Survivin genų lygiai periferiniame kraujyje pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, nepriklausomai prognozuoja survival

Survivin genų kiekį periferiniame kraujyje pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, nepriklausomai prognozuoja išlikimą
tezės
Background Viesbutis The cirkuliuojančių vėžinių ląstelių aptikimą (BTK) manoma perspektyvi priemonė gerinti rizikos stratifikacija pacientams diagnozuota solidinių auglių. Mes ištirti, ar CTC susijusių genų ekspresijos prideda bet kokį prognostinę galią TNM pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma.
Metodai
Septyniasdešimt pacientai, sergantys TNM I etapo IV skrandžio karcinoma buvo retrospektyviai duomenimis. Periferinio kraujo mėginiai buvo tiriami naudojant kiekybinio realaus laiko PGR (qrtPCR) dėl keturių BTK susijusių genų išraiškos: karcinoembrioninį antigeno (CEA), citokeratino-19 (CK19), kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF) ir Survivin (BIRC5).
rezultatai
Genų ekspresija Survivin, CK19, CEA ir VEGF buvo didesnis nei įprastų kontrolę, 98,6%, 97.1%, 42,9% ir 38,6% atvejų, atitinkamai, tai rodo galimą diagnostinę vertę tiek Survivin ir CK19 , Tuo kintamųjų išgyvenamumo analizė, TNM sustojimo ir Survivin iRNR kiekis buvo saugomi kaip nepriklausomų prognostinių faktorių, o tai rodo, kad Survivin išraiška periferiniame kraujyje prideda prognostinę informaciją TNM sistemą. Priešingai anksčiau paskelbtais duomenimis, stenograma gausa CEA, CK19 ir VEGF nebuvo susijęs su pacientų klinikinio rezultato.
Išvados
Genų ekspresijos lygio Survivin pridėti reikšmingą prognostinę vertę dabartinės TNM. Šių išvadų patvirtinimas didesniu perspektyviniu ir daugiacentre serijos gali sukelti šios biologinis į kasdieninį klinikinėje aplinkoje įgyvendinimo, siekiant optimizuoti rizikos stratifikacija ir galiausiai individualizuoti terapinę valdymą šiems pacientams.
Background
Skrandžio vėžys yra ketvirtoji dažniausia vėžio ir antroji pagrindinė priežastis, dėl vėžio susijusių mirčių visame pasaulyje. Numatoma dabartinė dažnis skrandžio vėžys yra maždaug 16,2 /100 000 asmenys /metus (pasaulis standartizuotas rodiklis, WSR), su labiausiai paplitęs Rytų Azijoje, Rytų Europoje ir Pietų Amerikoje [1]. Šiuo metu tik prognostinė sistema paprastai dirba už skrandžio vėžiu sergančių pacientų valdymo remiasi Tarptautinės Sąjunga nuo vėžio augliu limfmazgius metastazių (TNM) sustojimo sistemos [2], kuriame naviko įsiskverbimo (PT) ir limfmazgių būklės laipsnis (pN) [3] yra du pagrindiniai prognostiniai rodikliai ligoniams, neturintiems tolimoje metastazavusio. Pacientai ankstyvosiose stadijose yra laikomi kandidatai išgydyti iki operacijos. Tačiau, 50% skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kenčia nuo naviko atkryčių net po to, kai radikaliai operacijos [4, 5]. Taigi, dabartinė sustojimo sistema neatrodo tiksliai prognozuoti individualaus paciento riziką vėžio pasikartojimo. Iš tiesų ši klasifikacija nurodoma plačias kategorijas labai skiriasi, prognostinės pogrupis kiekvieno etapo, dėl kurių ši sistema suboptimalūs už asmeninį terapinį metodą. Tai iliustruoja faktas, kad kai kuriems pacientams, kurie dabar klasifikuojami kaip "mažos rizikos" nėra pateikta pagalbinį gydymą, nors jie patirtis ligos atkryčio. Atvirkščiai, kai kurie pacientai metu vyksta adjuvantinis gydymas dėl "didelės rizikos" TNM klasifikaciją, nereikės šį gydymą [6]. Siekiant išspręsti šią problemą ir pagerinti nuo pacientų prognozei, skubiai reikia naujų parametrai patikimai prognozuoti pacientų rezultatus. Pacientai, kuriems buvo atlikta potencialiai gydomosios operacijos išlaikyti pasikartojimo riziką, kuri kyla iš mikroskopinių naviko likučių žinomas kaip minimaliomis likutinės ligos (MAS). MAS gali paveikti įvairių kūno skyrių, įskaitant kaulų čiulpų, limfmazgių ir periferiniame kraujyje [7]. Pastaraisiais metais keletas tyrimų buvo siekiama cirkuliuojančių vėžinių ląstelių (CTC), atsižvelgiant į jų klinikinė reikšmė pacientams su skrandžio vėžio aptikimą. Kaip rezultatas, kiekybinis realaus laiko polimerazės grandinine reakcija (qrtPCR) ir variantai šią techniką, kuri yra laikoma, kad labiausiai jautrus įvertinimo metodas genų ekspresiją, buvo naudojamas naviko žymenų, kurie rodo, kad CTC buvimą Detektavimo kraujo [8].
Esant dabartinei analizei, siekėme profiliavimo periferinį kraują 70 patentų nukentėjo su skrandžio adenokarcinoma naudojant qrtPCR. Mes išbandėme keturis biologinius žymenis, du iš buvimas skelbimą Du iš naviko agresyvumą, ir vienas iš jų, Survivin, pridėti nepriklausomą prognostinę galią TMN sustojimo sistema. Tai gali leisti geriau stratifikacijos paciento riziką ir tokiu būdu geriau terapinio gydymo, ypač adjuvantinį
metodai
Pacientai
Šiame tyrime mes studijuojantys 70 pacientų (39 vyrų, 31 moterys;. Amžiaus grupė 28 - 90 metų, amžiaus mediana 68 metai), kurie buvo atlikta operacija (visišką ar dalinį pašalintas skrandis) už histologiškai patvirtintas skrandžio karcinoma nuo 1998 spalio iki 2007 metų lapkritį ir kam periferinė kraujo mėginys buvo prieinama. Tyrimas, kuris atitinka Helsinkio deklaraciją, buvo patvirtintas Vietos etikos komiteto Padujos universiteto (patvirtinimo numeris: 70/2006). Parašė informuotas sutikimas dėl biologinių bandinių tiriamų tikslais buvo gauta iš visų pacientų. Tuo analizės metu, 33 (47,1%) buvo gyvas o 37 (52,9%) mirė. Stebėjimo trukmės mediana buvo 15 mėnesiai (diapazonas: 6-119 mėnesių). Išgyvenamumo mediana buvo 25 mėnesiai. Naviko charakteristikos yra apibendrinti 1 lentelėje naviko invazijos (T kategorijos) gylis, kiek limfmazgių metastazių (N kategorija) ir makroskopinis metastazių (M kategorijos) buvo suskirstyti į kategorijas pagal UICC TNM sustojimo system.Table 1 pacientų ir naviko savybes .
parametrai
N.
(%)
Pacientai
visi
70
(100,0)
vyrai
39
(55,7)
Moteris
31
(44,3)
Amžius (metai)
≤ 65
21
(30,0)
> 65
49
(70,0)
VIETA
daugiacentre
5
(7.1)
viršutinis trečdalis
11
(15,7)
viduriniame trečdalyje
19
(27,1)
apatinis trečdalis
35
(50,0)
TNM etapą
aš (IA + IB)
10
(14,3)
II
14

19
(27,1)
IV
27
(38,6)
ląstelių linijų (20,0)
III (IIIa + IIIb)
žmogaus skrandžio karcinoma ląstelių linijos NVI-N87, gautą iš Amerikos tipas kultūros kolekcija (Manassas, JAV), buvo inkubuojami RPMI-1640 Medium (Invitrogen - Gibco, Carlsbad, CA, JAV), turinčio 10% vaisiaus serumas iš veršiuko . (Euroclone - Celbio, Pero, MI), 10 mM Hepes, 1 mM natrio Piruvato (Sigma-Aldrich, St Louis, MO), esant 37 ° C 5% CO 2
NVI-N87 yra skrandžio karcinoma ląstelių linija, gautas iš kepenų metastazės gerai diferencijuoto karcinoma, skrandžio, paimtu prieš citotoksinį gydymą. Pasak gamintojo specifikacija, ląstelės išreiškia paviršiaus glikoproteinų karcinoembrioninius antigenas (CEA).
Mobilaus pakilo eksperimentai
Mobilųjį dygiu Tyrimas buvo atliktas siekiant nustatyti šios qrtPCR technika jautrumą aptikti vėžines ląsteles periferinio kraujo mononuklearų ląstelių (PKVL). PBMC buvo gauti iš sveikų savanorių, ir buvo skaičiuojamas ir skiesti santykiu 1: 1 į RPMI terpėje. Skrandžio vėžio ląstelės N87 buvo skaičiuojami ir serijiniu sumažintas nuo 1 × 10 6 ląstelių /ml iki 1 ląstelių /ml į PBMC. Iš viso RNR išskirta ir atvirkštinio transkripcija iš 2 mililitrų kiekvieną frakciją. qrtPCR dviejų genų interesų tada buvo atlikti, kaip aprašyta toliau.
pavyzdžių rinkinys, RNR išskyrimo ir kDNR sintezės
A 6 ml alikvotinė dalis veninio kraujo buvo gautas iš kiekvieno paciento tuo operacijos metu. Pavyzdys apdorojimas buvo atliktas per dvi valandas po kraujo panaikinimą. Pavyzdžio buvo centrifuguojamas 2000 × g 10 minučių, ir PBMC frakcija buvo kaupiami ir saugomi skystame azote. Buvo atšildyti
užšaldytų mėginių ir bendras RNR buvo išskirta naudojant guanidinio tiocianato-fenolio-chloroformo metodą (Trizol reagentas, Invitrogen, Karlovi Varai, CA, JAV). Iš izoliuotos RNR vientisumas buvo įkurta qrtPCR analizės endogeninė nuoroda genų beta aktino (b-aktino), kaip aprašyta toliau [9].
Viso RNR (7 mikrogramai 100 iL galutinio reakcijos tūrį) buvo atvirkštinio transkripcija naudojant Atsitiktinės gruntai ir MultiScribe atvirkštinės transkriptazės (Didelės talpos kDNR atvirkštinės transkripcijos rinkinys, Applied Biosystems Foster Miestas, CA, JAV). Reakcijos mišinys buvo inkubuojamos 10 minučių 25 ° C temperatūroje, tada 37 ° C temperatūroje 120 minučių. kDNR buvo laikomi -80 ° C iki naudojimo.
realaus laiko kiekybine polimerazės grandininę reakciją
transkripcijos lygio keturių genų (ty karcinoembrioninį antigeno [CEA], citokeratino-19 [CK19], Survivin ir kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus [VEGF]) buvo matuojamas periferiniame kraujyje pacientams, pasitelkiant kiekybinę realaus laiko PGR (qrtPCR), naudojant santykinį kiekybinio nustatymo metodo (2 -ΔΔCt metodas) [10, 11]. Naudojant 2 -ΔΔCt metodą Duomenys pateikiami kaip kartų kaita genų raiškos normalizuotas pagal atskaitos genų ir santykinis į kalibratoriaus mėginyje. Iš normalizavimo procesu siekiama patikslinti vertę atstovaujanti transkripcijos lygius kiekvieno geno pagal mRNR kiekviename mėginyje yra: tai paprastai gaunami padalinant ekspresijos lygi kiekvienos interesų geną tuos, kurie yra atskaitos geno (taip pat vadinamas "namų ruošos" genas). Namų ruošos genai išreiškė constitutively ir - idealiu atveju - neturi įtakos eksperimentinių manipuliacijos: Todėl, jie turi maždaug atspindi bendrą sumą mRNR išbandyti kiekviename mėginyje [12]. Kaip atskaitos geno Šiame tyrime mes naudojamas beta-aktino, vienas iš dažniausiai naudojamų namų apyvokos genuose.
Santykinis kiekybinio PGR tyrimą, vadinamasis "kalibratorius" atstovauja genų išraiška atrinktų, pagal kurį pasakymas aprašymą kiekvienos interesų mėginyje yra koreguojamas: šis metodas leidžia tyrėjui palyginti išraiška profilį dominančio tarpusavyje pavyzdžių, kalbant apie jų kartų kaita, atsižvelgiant į vieno pavyzdžio (kalibratorių)
. paprastai, kalibratorius yra neapdorotas mėginys (pvz funkcinio tyrimo), ėminys metu nulio (pvz tikru laiku kursų studijų) arba bet nesusiję duomenų imties charakteristikos (pvz sveiki kontrolė yra sergančių pacientų tyrimas, ar normalūs fibroblastai į vėžio ląstelių linija tyrimas) [10]. CDNR, gautais iš PBMC su 20 sveikų donorų skaičius buvo naudojamas kaip kalibratoriaus šaltinis mūsų tyrimo. Vertinimas 2 -ΔΔCt rodo kartų kaita genų ekspresiją, palyginti su kalibratorių. Dėl kalibratorių ΔΔCt lygus nuliui, ir 2 0 yra lygi vieną, kad kartų kaita genų ekspresijos, lyginant su kalibratorių lygus, pagal apibrėžimą.
Metodas buvo įteisintas mūsų eksperimentinės sistemą patikrinti, ar efektyvumas yra amplifikacija tikslus ir b-aktino genų yra panašūs. specifiniai CEA, CK19, Survivin ir VEGF TaqMan genų ekspresijos Bandymai buvo įsigytas iš "Applied Biosystems. Norėdami išvengti stiprintuvo užterštus genomo DNR, pradmenų pora buvo padėtas tarp dviejų egzonų sankirtoje. QrtPCR tyrimas buvo atliktas naudojant ABI PRISM 7300 seka aptikimo sistema. PGR reakcijos tęsti mišinyje (30 pl), kurioje yra 15 įxL 2 × TaqMan Universalus PGR Master Mix 1,5 įxL 20 × TaqMan genų ekspresijos tyrimas (visų reagentų iš Applied Biosystems) 12,5 įxL vandens ir 1 įxL kDNR šabloną , Penkiasdešimt ciklai amplifikacija buvo atliekami 95 ° C temperatūroje (15 sekundžių) ir 60 ° C (1 minutė) ir iRNR raiška koncentracija normalizavosi prieš kiekybiškai B-aktino iRNR išraiškos kiekvieno mėginio.
Statistinė analizė
Statistinė analizė buvo atlikta naudojant Stat Rodyti V. 4,57 programinę įrangą (Abacus Concepts, Londonas, Jungtinė Karalystė) ir StatXact 7.0.0 versijos programinę įrangą (Cytel Software Corporation, JAV). Tarp genų lygių (aukštų palyginti mažo genų ekspresiją, kaip apibrėžta vidurine vertę) ir ligos TNM sustojimo kategorijas koreliacija buvo įvertintas naudojant Cochrane-Armitage tendencijų tyrimas. Išgyvenimo kreivės buvo apskaičiuotas naudojant Kaplan-Meyer metodą ir Vienmatės išgyvenimo palyginimai buvo apskaičiuojamas pagal log-rank testą. Transkripcijos lygio keturių genų, kartu su antropometrinių veiksnių ir TNM etapais (pagal 5-asis leidimas iš AJCC TNM išleistas 1997 metais), buvo naudojamas kaip nepriklausomų kintamųjų daugiamatis išgyvenamumo analizė, kuri buvo atlikta naudojant Cox proporcinės pavojai regresijos modelis [13]. Rodiklių kad reikšmingas prisideda prie prognozavimo modelio parinkimas buvo atliktas laipsnišką metodą. . Tikimybė vertybių < 5% buvo laikomi statistiškai reikšmingas
rezultatai
Mobilusis pakilo: jautrumas qrtPCR technika
į N87 ląstelių linijos, iRNR lygių CEA, CK19, Survivin ir VEGF genai buvo labai išreikšta (1 paveikslas), todėl tai skrandžio karcinoma ląstelių linija atstovavo galiojantį teigiamą kontrolę, mūsų eksperimentus. 1 pav genų ekspresijos lygis keturių genų interesų N87 žmogaus skrandžio vėžio ląstelių (vertinant pagal kiekybinius realaus laiko PGR metodu: Žr tekstas duomenis). Natūralusis logaritmas išraiškos lygių pranešė apie y ašį: ašis kilmė (0) atstovauja etaloninis mėginys (vadinamas kalibratorius), su kuria visi eksperimentiniai pavyzdžiai palyginti santykinės kiekybinio metodo (žr tekstą informaciją)
. Norėdami nustatyti aptikimo ribą (jautris) yra iš qrtPCR technika, serijos 10 kartų skiedžiant (in PBMC) iš N87 skrandžio karcinoma ląstelių buvo tiriami trimis egzemplioriais iki qrtPCR naudojant CEA ir Survivin kaip genų žymekliais. CEA ir Survivin iRNR buvo aptikta iki 1 ląstelių /10 8 PBMC praskiedimo:. Tai atitinka ieškant 1 iki 10 vėžinių ląstelių per 10 ml periferiniame kraujyje (duomenys nerodomas)
Expression žymekliai kraujo mėginius
Periferinio kraujo mėginiai iš visų 70 pacientų buvo įvertintas keturių genų žymekliais. Sąvoka buvo teigiamas (didesnis nei kalibratorius) į 98,6%, 97,1%, 42,9%, 38,6% mėginių Survivin, CK19, CEA, VEGF, atitinkamai (2 lentelė). Nuo Survivin ir CK19 genų lygiai rasta beveik visi pacientai yra didesnė nei sveikų, šios išvados rodo, kad diagnostinio potencialo abiejų genes.Table 2 transkripcijos lygio keturių prognostinių žymenų periferiniame kraujyje pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu.
žymeklis
Virš kalibratorius (%) *
Žemiau kalibratorių (%) *
nenustatoma (%)

Survivin
69 (98,6)
1 (1,4)
0 (0.0)
CK19
68 (97,1)
2 (2,9)
0 (0,0 )
CEA
30 (42,9)
21 (30,0)
19 (27,1)
VEGF
27 (38,6)
(61,4)
43 0 (0.0 )
* genų ekspresijos lygis buvo matuojamas kiekybinio realaus laiko PGR metodu: naudojant santykinį kiekybinio nustatymo metodo, mėginiai buvo klasifikuojama kaip aukščiau ar žemiau nustatytą lygį kalibratorius (sukaupiami periferinio kraujo mėginiuose sveikiems donorams)
Be to,. jei mes laikomas 75-procentinė dalis Survivin ekspresijos lygį per etapą, mes turėjome daug didesnio tendencija (p = 0,04) etapuose iš I-III, bet ne IV stadijos (2 paveikslas). 2 pav Survivin genų išmatuoti lygiai periferiniame kraujyje 70 pacientams, sergantiems TNM etape I IV skrandžio vėžio. Ši tendencija testas analizė rodo reikšmingą padidėjimą Survivin transkripcijos lygio visoje pacientams, sergantiems I etapo III skrandžio vėžiu (tendencija testas p-reikšmė = 0,04). Dėl kiekvieno stulpelio pranešė vidurkis ± SD
išgyvenamumo analizė
Po vidurkio sekti 26 mėnesių, vidutinis bendras išgyvenamumas (BI) už TNM I etapo II nebuvo pasiektas.; vidutinis OS IV III etape ir buvo 25 ir 13 mėnesių, atitinkamai (log-rank testas p-reikšmė "< 0,0001, 3 pav.) 3 pav Bendras išgyvenamumas už TNM I etapo II, III ir IV visų pacientų (log-rank testas p-reikšmė "< 0,0001).
Upon vieną požymį išgyvenamumo analizė, tarp keturių genų mes išbandyti, tik Survivin išraiška galėtų nustatyti dvi pacientų grupes labai skiriasi, prognozė. Iš tiesų, atsižvelgiant į 75 procentilis rąstinių transformuotos genų transkripcijos lygio (1.508), kaip lizdu, mediana OS aukštas (> 1,508) ir žemo (≤1.508) Survivin iRNR gausa buvo 14 ir 41 mėnesių, atitinkamai (logoritminis rank p-reikšmė = 0,036, 4 pav.) 4 Kaplan-Meier išgyvenamumo kreivės pacientus, sergančius didelio (> 75 procentilis) arba mažas (< 75. procentilis) transkripcijos lygiai Survivin išmatuoti periferiniame kraujyje. Log-rank testą. P-reikšmė = 0,036
daugiamatis išgyvenamumo analizė, įskaitant TNM etape, amžių, lytį ir mRNR lygių keturių žymenų parodė, kad tik TNM stadija ir Survivin iRNR kiekį, nustatytą periferiniame kraujyje savarankiškai prognozuoti pacientų OS , Rizikos santykis (RS), susijęs su Survivin lygių rodo į mirties rizika padidėja 100 kartų padidinti Survivin išraiškos (3 lentelė) .table 3 daugiamatė išgyvenamumo analizė 70 pacientų, sergančių skrandžio vėžiu.
kintamųjų

HR

95% PI
P vertė


Žemutinė riba
viršutinė riba

TNM I etapo
(nuoroda)
1 - CR.LT -
- CR.LT II pakopos
1.20
1.01
1.45
0,048 pervežimas III etapas
1.34
1,05
1.70
0,017
IV etapo
3.17
1.38
6.77
0,004
Survivin *
1.34
1.14
1.53
< 0.001
HR: rizikos santykis; PI: pasikliautinasis intervalas; * HR susijęs su Survivin lygius rodo Mirties rizika padidėja dėl 100 kartus padidėjo Survivin išraiška.
Nes tik šie keturi nepriklausomi kintamieji buvo pasilieka Cox modelis, ši analizė rodo, kad Survivin genų ekspresijos galite pridėti naudingos prognostinę informaciją nusistovėjusią veiksnių, tokių kaip TNM.
diskusijų
šiame tyrime mes nustatėme, kad transkripcijos lygiai Survivin matuojamas periferiniame kraujyje pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma nepriklausomai koreliuoja su bendru jų išlikimui.
Jei įteisintų didesniuose perspektyvinius tyrimus, šie rezultatai leistų padidinti prognostinę galią įprastinių prognozinių veiksnių, kurie šiuo metu įkūnija TNM sustojimo parametrus. Tai ypač aktualu pacientams, sergantiems TNM etape I-III liga, kuriems optimalus rizikos stratifikacija yra svarbu nustatyti dalykus su didžiausia tikimybe gauti naudos iš adjuvanto gydymo.
Mūsų išvados yra ypač svarbūs ir nuo naviko biologijos požiūriu nes Survivin genas koduoja pagrindines kovos su aprotoninį baltymą, priklausančių tam apoptozės baltymų (TPA) šeimos inhibitoriumi. Šalia yra viena iš labiausiai tinka apibūdinti anti-aprotoniniais veiksnių [14], Survivin yra intensyvių Tyrimo objektas dėl to, kad suaugusiems ji yra pasirinktinai, išreikštą iš esmės tik vėžio skirtingos kilmės; Be to, jos išraiška pirminio naviko buvo susijęs su blogesne prognoze ir atsparumą įprastinių chemoterapiniai vaistai [15]. Šios pastabos padaryti Survivin idealus tikslą naviko konkrečių terapijos, tokios kaip mažų molekulių inhibitorių ir antigeno-specifinės imunoterapijos [16].
Survivin baltymų raišką pirminius navikus, įskaitant skrandžio vėžio, buvo tiriama, kaip prognostinis faktorius, didesnis lygiai yra susijęs su blogesne vėžio rezultatus [17]. Apie RNR raiškos, Survivin iRNR lygiai buvo tiriama, kaip cirkuliuoja navikines ląsteles (BTK) į kitos rūšies vėžio persekiotoją, bet turimi duomenys yra riboti [18, 19]. Be 26 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams serijos, Survivin iRNR (kaip matuojamas ELISA įsikūrusio qrtPCR) periferiniame kraujyje buvo pranešta, kad jie koreliuoja su pacientų prognozei, The TNM sustojimo neįskaitant iš galutinio mutivariable modelis (verčia visus kintamuosius į Cox modelis) [20]. Mūsų didesnių serijos (n = 70), prognostinę vaidmuo Survivin kraujyje yra patvirtinta, nors TNM sustojimo išlieka reikšmingas prognostinis faktorius galutiniame kintamųjų modelį (naudojant laipsnišką režimą kintamojo pasirinkimas). Nepaisant ženklaus kartu su pacientų prognozei, Survivin iRNR lygiai nepadidino visose keturiose TNM etapais: didinti transkripcijos gausa tendencija buvo iš tiesų parodė tik pacientams su etape III liga (2 paveikslas) I priedą. Ši išvada galia priklauso nuo mažo imties dydžio bendrosios TNM etapais (ir dėl to mažo statistinės galios), bet taip pat gali matyti, kad Survivin vaidina svarbų vaidmenį locoregional, o ne tolimoje metastazavusio (kai kiti genai gali būti svarbesnis, kaip neseniai pranešė [21])
Skirtingai nuo kitų tyrimų [9, 22-26] paskelbė apie CK19 ir CEA lygių nebuvo sutampantys su pacientais išlikimo mūsų serijos, arba apie univariacinį (duomenys nerodomas) arba kintamųjų išgyvenamumo analizė. Ši gali priklausyti nuo kelių veiksnių. Visų pirma, į mūsų kintamųjų analizės įtrauktis (su laipsniško režimu kintamojo pasirinkimas) nuo žymeklio nelaikomas kitų autorių daro bet koks palyginimas neįmanoma.
Pažymėtina, keletas teigiamų ataskaitos naudoti tik univariacinį išgyvenamumo analizė, kuri kelia grėsmę buvo įgyvendinta patikimumo ir atkuriamumas jų rezultatus, kartą koregavimo nusistovėjusiais prognozinių veiksnių (ty TNM etapai) [9, 25, 27, 28]. Be to, atsižvelgiant į mūsų rezultatus kiti tyrėjai padaryti ataskaitą trūksta asociacijos tarp citokeratinams teigiamą ląstelių buvimą ir prognozės [29] (4 lentelė) .table 4 Pasirinktas serijos analizuojant prognostinę vaidmenį platinant navikines ląsteles (BTK) pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu.
Author

Year

Ref.

Patients

Method

Survival analizė
Žymekliai

išvados
Koga, T ET. al.,
2008
[9]
101
Kiekybinė PGR
vienmatės
CK18, CK19, CK20 CEA
CK19 yra geriau žymeklis, ir yra naudojama su įvertinti prognozę arba už papildomą gydymą pervežimas Yie SM et. al.,
2008
[20]
26 (skrandžio vėžį)
AT-PGR Elisa
daugiamatis
Survivin
statusas Survivin ekspresija CTC yra stipri ir nepriklausoma prognozuoti pasikartotų pervežimas Hiraiwa K et. . Al
2008
[22]
44 (skrandžio vėžys)
CellSearch sistemą
daugiamatis
CD45 (-) ląsteles vs CK (+) ląstelės
CTSs reikšmingai koreliavo su Išplėstinė naviko stadija
Illert B et. al.,
2005
[23]
70
kiekybinis RT-PGR
daugiamatė
CK20
CK20 yra nepriklausoma prognostinė žymeklis
Yeh KH et. al.,
1998
[24]
34
Lizdinė kiekybinė PGR
vienmatės
CK19
CK19 išreikšti CTC yra susiję su blogos prognozės pervežimas SEO JH et. al.,
2005
[25]
46
Kiekybinė PGR
Ne vykdomas
CEA
CEA iRNR yra gerokai koreliuoja su klinikiniais pasikartojimo pervežimas VU CH et. al.,
2006
[26]
42
Kiekybinė PGR
Ne vykdomas
hTERT, CK19, CK20 CEA
CEA iRNR koreliuoja su didesne rizika pooperacinio pasikartojimo /metastazės
UEN YH et. al.,
2006
[27]
52
kiekybinis RT-PGR
vienmatės pervežimas c-met, MUC1
c-met ir MUC1mRNA gerokai koreliuoja su prognozavimo
Mimori K ET. al.,
2008
[28]
810
Kiekybinė PGR
vienmatės
MT1-MMP pervežimas MT1-MMP yra nepriklausoma veiksnys nustatant pasikartojimui ir toli metastazių
Pituch-Noworolska ET. . Al
2007
[29]
57
tėkmės citometrijos
vienmatės
CD45 (-) ląsteles vs CK (+) ląstelės
CK buvimą (+) ląstelės neturi jokios prognostinės vertės pervežimas dėl nevienodų duomenų gali priklausyti nuo to, kad CK19 ir CEA yra markerius CTC buvimą, bet nebūtinai CTC gebėjimą metastazuoja: iš tikrųjų, tai yra gerai priimtas, kad tik CTC poaibis turi biologinis potencialas sukėlęs metastazavusiu indėlius, o dauguma BTK galiausiai mirti nežalodami priimančioji [7]. Taigi, markerius CTC "agresyvumas", pavyzdžiui, Survivin gali atskleisti labiau informatyvus, kalbant apie koreliaciją su pacientų prognozei.
Pastabos, šioje studijoje iRNR gausa Survivin ir CK19 visada buvo didesnis, nei buvo nustatyta sveikų išskyrus vieno ir dviejų atvejų, atitinkamai. Tai patvirtina, naudojant kiekybinį metodą (qrtPCR), kuri leido mums stratifikuoti pacientų riziką dėl nuolat masto svarbą, o standartinis PGR būtų klasifikuojami beveik visi pacientai teigiamai. Iš kitos pusės, ši išvada - kuri geriausia mūsų žinių dar niekada nebuvo pranešta anksčiau - rodo, kad šie genai gali būti išnaudojami, taip pat diagnostikos tikslais, nors speciali studija, specialiai sukurtas šis tikslas pateisina
Kaip. galutinis atlygis, mes norėtume pastebėti, kad PGR pagrįsti metodai neleidžia nustatyti ląstelių šaltinį išmatuotų žymeklių: iš tiesų, visi šie metodai reikalauti ląstelių surinktų iš periferinio kraujo pacientų lizę siekiant išgauti iRNR naudojamas įvertinti tikslinių genų ekspresiją. Be to CTC, kiti galimi šaltiniai PGR aptiktų genų PBMC, cirkuliuojančių endotelio ląstelių (CEC), kaulų čiulpų kilęs cirkuliuojančių kamieninių ląstelių, taip pat odos ląsteles (pvz keratinocitų, fibroblastai, melanocitai) Pavyzdys metu kraujo atsiėmimo užteršė. Nepaisant to, BTK greičiausiai bus pagrindinis ląstelių šaltinis Survivin kaip jos išraiška yra labai ribotas normaliomis suaugusių audinių ir vietoj daugiausia tik piktybinių ląstelių [30]. Atsižvelgiant į tai, citometrijos metodais yra mažiau linkę į klaidingų teigiamų rezultatų, nes jie reiškia antikūnų pagrindu ląstelių rūšiavimo po citologinis identifikuoti naviko ląstelių, kad ankstesnis jų fenotipo apibūdinimą [31].
išvadas
genų ekspresijos lygis Survivin pridėti reikšmingą prognostinę vertę dabartinės TNM pacientams, sergantiems skrandžio karcinoma. Šių išvadų didesnėse būsimasis serijos patvirtinimas gali
sukelti optimizuoti rizikos stratifikacija ir galiausiai individualizuoti terapinę priežiūrą šiems pacientams. Pirmines deklaracijas
autorių pateiktus failus vaizdų
Žemiau yra nuorodos į Autoriaus originalus pateiktų failų vaizdų. 12967_2009_422_MOESM1_ESM.eps Autorių originalus failas 1 pav 12967_2009_422_MOESM2_ESM.eps Autorių originalios ir 2 pav 12967_2009_422_MOESM3_ESM.eps Autorių originalios ir 3 pav 12967_2009_422_MOESM4_ESM.eps Autorių originalaus failo 4 pav konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai deklaruoja, kad jie neturi konkuruojančius interesus.

• Klinikos ypatumai ir prognostiniai vaidmenys, Kras BRAF, PIK3CA ir NRI mutacijų išplitusiu skrandžio vėžiu
• Stento palyginti gastrojejunostomy dėl skrandžio išleidimo obstrukcija lengvinančio: sisteminė apžvalga