Interleukino-23A yra susijęs su naviko augimo Helicobacter pylori--susijusių žmogaus skrandžio vėžio

Interleukino-23A yra susijęs su naviko augimo Helicobacter pylori-
"" susiję žmogaus skrandžio vėžio
tezės
fone
interleukino (IL) -23 yra vienas iš naujai identifikuotų uždegiminių citokinų, ir uždegimas yra taip pat žinoma, kad būti susijęs su skrandžio vėžio (GC) plėtros. IL-23 vaidmuo skrandžio vėžio, tačiau, yra plačiai žinomas. Šioje studijoje, mes ištirti išraiška ir galimo vaidmens IL-23A žmogaus GC.
Metodai
IL-23A ir IL-17A išraišką žmogaus GC audinių nulėmė imunohistocheminiu, ir tarp santykius tirta IL-23A išraiška ir klinikinių charakteristikų GC. Koncentracija serume IL-23A ir IL-17A taip pat buvo išbandytas ELISA metodu. Šaltinis ir vaidmuo IL-23A GC buvo tiriamas in vitro
pagal Flowcytometry, MTS (Owen reagentas) tyrimas ir Vakarų dėmė.
Rezultatai
IL-23A, IL-23 receptoriaus (IL-23R) ir IL-17A visi buvo aktyvuojami žmogaus GC audinių, ir IL-23A lygis buvo gerai koreliuoja su IL-17A GC audinių, taip pat paciento serumo. Makrofagų ir GC ląstelės buvo pagrindinis šaltinis, IL-23A sekrecijos po stimuliacijos H. pylori
lizate. Be to, mes nustatėme, kad IL-23A skatinamas proliferaciją GC ląstelių linijas per IL-17A /IL-17 receptoriaus antagonisto (IL-17RA) /Branduolinė faktoriaus κB (NF-κB) signalizacijos.
Išvados Viesbutis The aukštos išraiška IL-23A yra susijęs su GC. IL-23A gali skatinti GC ląstelių augimą stimuliuoja IL-17A sekreciją naviko mikroaplinka. Mūsų rezultatai rodo, kad koncentracija serume IL-23A yra geras biologinis prastos klinikinės prognoze GC pacientams.
Raktiniai žodžiai
Interleukinas-23A Interleukinas-17A atominės faktoriaus κB Skrandžio vėžys faktai
IL-23A yra priklausantis heterodimerinio citokino subvieneto, IL-23, kurį ryšio porą su kita subvieneto, p40 (IL-12). Ji yra žinoma, kad IL-23A yra išreikštas ir sekretuoja makrofagų ir dendritinės ląstelės. IL-23 gali įjungti signalo keitiklių ir aktyvatorius transkripcijos 4 (STAT4) per IL-23R platinamas kelių tipų imuninių ląstelių, įskaitant T ląstelių membranos, gamtos žudikas (NK) ląstelių, monocitų ir dendritinės ląstelės. Ir IL-23 dalyvauja imuninės sistemos nustatant pašalines medžiagas ir ginti organizmą nuo infekcijos ir ligos [1], [2].
IL-23A dalyvauja uždegiminio atsako skatinant matricos metalproteazės 9, didinant angiogenezę ir sumažinti CD8 + T ląstelių infiltracija [3], [4]. Dirbdami kartu su IL-6 ir transformuojantis augimo faktorius-β1, IL-23 gali skatinti CD4 + naivus T ląstelės Th17 ląstelių, kuris yra vienas iš gerai priimtas T pagalbininkas ląstelių pogrupiuose [5] diferenciaciją - [ ,,,0],7]. Th17 ląstelės išskiria priešuždegiminiais citokinų IL-17A, kad gali sukelti Th17 atsaką stimuliuodamas kitų priešuždegiminiais molekulių, tokių kaip IL-1β, IL-6, naviko nekrozės faktoriaus-alfa (TNF-alfa) ir chemokinus gamybą, todėl uždegimas. , Buvo pastebėta, kad IL-17 buvo glaudžiai susijusi su GC [8], [9]. Genomo masto asociacijos atliktas tyrimas parodė, kad -197G > Polimorfizmas -197 pozicijos IL-17 promotoriaus regione žymiai padidėjo GC riziką bendroje populiacijoje [10], [11], o dėl padidėjusio išraiška IL-17 buvo nustatyta, pacientams, sergantiems GC. IL-17 yra taip pat dalyvauja GC progresavimo skatinant angiogenezę naviko mikroaplinkoje [12]. Be to, nuolatinį uždegimą sukeltas iš dalies IL-17 gali prisidėti prie skrandžio gleivinės patologijos, taip padidinti GC riziką [9], [11], [13].
, Palyginti su IL-17A, tyrimai dėl IL-23A vaidmuo žmogaus GC yra labai trūksta. Šiame tyrime mes tyrė IL-23A išraišką GC, ir buvo įtraukti jo klinikinė reikšmė ir galimas mechanizmas.
Rezultatai
IL-23A, IL-23R ir IL-17A yra pernelyg daug žmonių GC
ištirti IL-23A ir susijusių molekulių žmogaus GC išraišką, 141 parafino įterptųjų audiniai buvo tiriami dėl saviraiškos ir paskirstymo IL-23A, IL-23R ir IL-17A naudojant imunohistocheminis. Pirma, mes nustatėme, kad IL-23A, IL-23R ir IL-17A visi buvo gerokai ekspresija žmogaus GC, palyginti su įprastais valdikliais. Nors tai buvo neaptinkamas esant normalioms skrandžio liaukų ir šiek tiek teigiamas infiltrating uždegiminių ląstelių, IL-23A buvo aptikta aukšto lygio infiltrating uždegiminių ląstelių ir vėžines ląsteles vėžio audiniuose (1A pav.) IL-23R buvo išreikštas tik patekę uždegiminių ląstelių tiek vėžio ir normaliuose audiniuose, bet pasakymas lygis ir santykis buvo daug didesnis vėžio audiniuose (1b pav.) IL-17A buvo įsikūrusi daugiausia infiltruotų uždegiminių ląstelių GC (1c pav). Mes kitą tyrė tarp išraiškos IL-23A ir įvairių klinikinių charakteristikų, santykius, ir nustatė, kad IL-23A lygis buvo susijęs su H. pylori
infekcijos ir naviko (1 lentelė). 1 pav išraiška ir pasiskirstymas IL-23A, IL-23R ir IL-17A žmogaus GC ir normalaus skrandžio audinio. (A) išraiška ir pasiskirstymas IL-23A buvo analizuojami imunohistocheminiu į tiek žmogaus GC ir normalaus skrandžio audinio. Vidutinis integruotas optinis tankis buvo gaunami analizuojant penkis matymo laukais kiekvienam vertino vaizdo Pro Plus 5.0 skaidrę. (B), išraiška, paskirstymo ir vidutinis integruotas optinis tankis IL-23R. (C), išraiška, paskirstymo ir vidutinis integruotas optinis tankis IL-17A. ** P
< 0.01 1
lentelė. Klinikiniai charakteristikos 141 GC pacientų
Pacientų demografiniai
IL-23 teigiamas
IL-23 neigiamas
Pvaluea
>
Amžius, Y (diapazonas)
59 (32-85)
ND
ND
Lytis
0.730
Vyras
89
45
44
Moteris
52
28
24
Pagrindinis vietą
0,613 pervežimas U
74
36
38
ML
67
29
38
Dydis, cm (nuo)
0.028b
> 5
97
74
23
< 5
44
25
19
Gylis invazijos
0,519
T1 /T2
88 24 14
T3 /T4 53
29
24
Lauren klasifikacija
0,372
Žarnų
94
45
49
Difuzinė
47
27
20
limfmazgių metastazės
0.401
teigiamą
69
37
32
Neigiama pervežimas 72
33
39
H.pylori
infekcijos
< 0.0001c
Teigiamas
84
74
10
Neigiama
57
28
29
etapas
0,215
aš
32
16
16
II
45
23
22
III
43
20
23
IV
21
10
11
ND = nenustatyta
aχ2 testą
BP
. <.; 0,05
cP
. ≪ 0,01.
IL-23A koreliuoja su IL-17A sekrecijos žmogaus GC
Naujausi tyrimai parodė, kad IL-23A sekreciją buvo vienas iš pagrindinių veiksnių, normalaus Th17 ląstelių diferenciacijos. Mes suabejojo, ar IL-23A pat buvo susijęs su Th17 ląstelių GC. Iš tiesų, padidėjusi IL-23A išraiška sutapo su padidėjusia išraiška IL-17A (2A pav.) Ištirti tolesnį ryšį tarp jų, mes kiekybiškai abiejų citokinų išraišką per IHC dažymo GC pacientų ir parodė, kad IL-23A išraiška reikšmingai koreliavo su IL-17A išraiška per linijinę koreliaciją testas (R 2 = 0,7148, P
< 0,001) (2B pav). 2 pav IL-23A koreliuoja su IL-17A sekrecijos žmogaus GC. (A) koreliacija tarp IL-23A ir IL-17A vėžiu audinių GC pacientams buvo tirtas imunohistocheminiu. (B) tarp IL-23A ir IL-17A koreliacija per IHC dažymo GC pacientų buvo atvertas tiesiškai koreliacijos testą.
Serumas IL-23A koncentracija yra prastos prognozės rodiklis GC pacientų
Abi IL-23A ir IL-17A gali būti išskiriamas į kraują, todėl, mes hipotezę, kad IL-23A ir IL-17A lygis prie GC pacientų arba sveikų žmonių serume gali būti nustatomas pagal IFA biomarkeriai. Mes pirmą kartą buvo aptikti abiejų citokinų lygio, kaip 213 ± 75 pg /ml IL-23A ir 286 ± 101 pg /ml IL-17A per 50 sveikų asmenų (3a ir B pav). Serumas lygis abiejų citokinų buvo gerokai padidėjo GC pacientams 517 ± 247 pg /ml IL-23A ir 422 ± 284 pg /ml IL-17A (3a ir B pav.) Ir tiesinė koreliacija serume koncentracija tarp IL-23A ir IL-17A pat buvo pastebėtas GC pacientų (R 2 = 0,5841, p
< 0,001) (3C pav.) Iš sveikų riba buvo gautas, atsižvelgiant į 95% pasikliautinasis intervalas (PI), kuris buvo 285 pg /ml IL-23A. Pasak slenksčio, GC pacientai buvo suskirstyti į IL-23A didelis ir IL-23A žemų pogrupiuose. Norėdami palyginti savo klinikinį prognozę tarp dviejų pogrupių GC pacientų serume IL-23A išraiška buvo tiriama naudojant Kaplan-Meier metodu. Mes nustatėme, kad IL-23A lygis (> 285 pg /ml) buvo reikšmingai susijęs su trumpesniu bendro išgyvenamumo (OS) [P
= 0,027, šanso santykis (ŠS) 2,246, 95% PI: 1,212-4,160] (pav 3D). 3 paveikslas Serumas IL-23A koncentraciją kaip blogos prognozės rodiklis GC pacientams. (A), koncentraciją serume IL-23A GC pacientų ir sveikų. (B), koncentraciją serume IL-17A GC pacientų ir sveikų. (C) koreliacija tarp IL-23A ir IL-17A serume GC pacientų buvo atvertas tiesiškai koreliacijos testą. (D), Kaplan-Meier kreivės OS GC pacientams su skirtingo išraiška IL-23A.
IL-23A gali būti išskiriami makrofagų ir GC ląstelių
imunohistocheminį dažymo įrodė, kad IL-23A buvo gausiai išreikštas kelių tipų ląstelių, įskaitant T ląsteles, makrofagus ir GC ląstelių (1a pav.) Išnagrinėti tikslią kilmę IL-23A, mes atvertas IL-23A išraišką į vitro
stimuliacijos sistema naudojant H. pylori
lizatas kaip citokinų skatinančius agentu, kuris, remiantis ankstesne pastaba, kad Helicobacter pylori
buvo tvirta induktorius už IL-23A sekrecijos. T ląstelių, IL-23A sekrecija buvo šiek tiek padidėjo, po stimuliacijos H. pylori pervežimas lizate (4a pav.) Makrofaguose, IL-23A-teigiamų ląstelių skaičius padidėjo nuo 1,15 ± 0,18% iki 13.21 ± 6.21% (4b pav.) Nors GC ląstelių linijų, IL-23A-teigiamas SGC-7901 ląstelių padidėjo nuo 2,64 ± 1,12% iki 13.11 ± 3.12%, ir IL-23A teigiami MKN45 ląstelės padidėjo nuo 1,16 ± 0,46% iki 17.55 ± 5.42% (4c pav). Apskritai, makrofagų ir GC ląstelės parodė H. pylori
lizate sukeltos stimuliacijos IL-23A sekrecijos (4d pav.) 4 pav IL-23A yra išskiriami makrofagų ir GC ląsteles. (A) IL-23A ir ląstelės paviršiaus žymeklių CD3 raiška buvo aptikta Flowcytometry T ląstelių su skirtingo požiūrio. (B) IL-23A ir ląstelės paviršiaus žymeklių CD14 ekspresija buvo aptikta Flowcytometry makrofaguose su skirtingo požiūrio. (C) IL-23A išraiška buvo aptikta FCS į SGC-7901 ir MKN45 ląstelių gydomiems H. pylori pervežimas lizate. (D) IL-23A teigiamų ląstelių T ląstelių, makrofagų ir GC ląstelių linijų santykis.
IL-23A skatina išlikimą GC ląstelių per IL-17A /IL-17RA /Branduolinė koeficiento (NF) -κB signalizacijos
ištirti IL-23A poveikį naviko augimą, bendraautoris kultūra tyrimas in vitro
buvo panaudoti. Pirma, mes nustatėme, kad IL-23A neturėjo reikšmingos įtakos ląstelių proliferaciją, kai GC linijos SGC-7901 ir MKN45 buvo gydomi žmogaus rekombinantinis IL-23A tiesiogiai. Mes šalia nustatė, kad nebuvo jokio reikšmingo poveikio naviko ląstelių SGC-7901 ar MKN45 augimo co-kultūringas su naivus T limfocitų IL-23A buvimą. Tačiau didelis ląstelių augimą skatinantį buvo matyti, kai Arba makrofagai ar H. pylori
lizatas buvo įtraukta į bendro kultūros sistemoje. Kai abu makrofagai ir H. pylori
buvo pridėta, poveikis buvo sinergetinis (5a ir B pav.) 5 paveikslas IL-23A skatina išlikimą GC ląstelių linijas per IL-17A /IL-17RA /NF-κB signalizacijos. (A), buvo tiriama Ląstelių gyvybingumas SGC-7901 su gydymu. (B) ląstelių gyvybingumas MKN45 su gydymu buvo nagrinėjama. (C) IL-17A koncentracija ląstelių kultūros terpėje SGC-7901 ir MKN45 buvo nustatomas pagal ELISA. ** P
< 0,01. (D) IL-17RA ir IL-23R išraiška tiek MKN45 ir SGC-7901. (E) p-IkBa, IkBa ir CyclinD1 išraiška tiek MKN45 ir SGC-7901.
Mes ištirti galimą mechanizmą, kuriuo grindžiama tarp IL-17A ir IL-23A asociacija. Koncentracija IL-17A į terpę buvo nustatomas, ir nebuvo reikšmingas skirtumas, kai GC ląstelės buvo gydomi vien IL-23A arba IL-23A plius T limfocitų. Tačiau IL-17A sekrecija padidėja, kai tiek H. pylori
lizatas arba makrofagai buvo įtraukta (5C pav.) Taip pat buvo ištirta aktyvinimas NF-κB signalizacijos, ir tiek IL-17RA ir IL-23R išraiška buvo aptikta tiek SGC-7901 ir buvo nustatyta MKN45 ląstelės, gana stiprus išraiška IL-17RA ir beveik nėra IL-23R išraiška (5D pav.) Fosforilinamos IκBα ir cyclinD1, NF-κB signalizacijos produktai, abu buvo padidintas SGC-7901 ir MKN45 ląstelių kartu su didėjančiu IL-17A (5E pav.) IL-23A išsiskiria iš abiejų makrofagų ir GC ląsteles ir skatina vėžio plitimą per IL-17A /IL-17RA /NF-κB signalizacijos.
Diskusijos
GC yra ketvirtoji dažniausia vėžio ir antroji pagrindinė priežastis, dėl vėžio AMŽIAUS mirtis visame pasaulyje. Tarp kelių histologinių tipų, žarnyno tipo GC paprastai būna susijęs su H. pylori
infekcijos, ir jos kursas yra būdingas ūmaus gastritas, lėtinis gastritas, skrandžio atrofijos, žarnyno metaplazijos, ir pagaliau, formavimas GC [10].
tikslios priežastys GC yra nežinoma, tačiau keletas veiksnių gali padidinti ligos riziką, įskaitant lyties, rasės, genetikos, geografijos, kraujo tipo, senyvo amžiaus, šeimos istoriją ir H.pylori
infekcija skrandis. H. pylori
užkrečia skrandžio gleivinę ir sukelia lėtinį uždegimą ir opas. Išsamios molekulinės keliai atsakingi už H. pylori pervežimas stimuliacija vis dar nėra visiškai žinoma [14] - [16].
Keletas tyrimų duomenimis, imunines molekules H. pylori
, pavyzdžiui, CagA , CagA skatinamas išraišką prouždegiminių chemokinus IL-8, CXC-chemokino ligandas 2 (taip pat žinomas kaip makrofagų uždegiminio baltymo) ir antimikrobinis peptidas žmogaus β-defensin-2 per aktyvavimo NF-κB signalizacijos [17]. Kiti tyrimai parodė, kad CagA pernešami į epitelio ląsteles, sukeldami aukšto lygio IL-8 užkrėsti tam tikrų H. pylori
padermių pridėdama indukcijos uždegimine reakcija [16], [18], [19]. Rasa priklausomi kinazės, Ekstraląstelinė signalo reguliuojamas kinazės (ERK) 1 ir ERK2, taip pat įjungiama CagA-sukėlė tirozino fosforilinimo, todėl suveikus transkripcijos veiksniai NF-κB, aktyvatorius baltymų-1 ir galiausiai, IL-8 gamyba pagal šeimininko ląsteles [9].
mechanizmas susijęs Hp infekcija ir Th17 atsakymas nebuvo visiškai atskleista. Kai kurie iš citokinų, tokių kaip IL-1β ir IL-21 buvo odurzeń. Lee ir kt. parodė, kad nuolatinis HP infekcija gali sukelti HP konkrečius Th17 ląsteles, o ne kitas imunines ląsteles, kurios taip pat buvo aprašytas išskirti IL-17A. Be to, IL-1β taip pat buvo nuolat padidėjusi ir neutralizavimas IL-1β sumažino HP-specifinis IL-17A atsakymą, rodo funkcinį ryšį tarp IL-1β ir nuolat Th17 atsakas [20]. Kita grupė taip pat atskleidė, kad IL-21 reguliuoja Th1 ir Th17 efektorines atsakymus metu lėtinio H. pylori infekciją STAT1- ir stat3 priklausomu būdu, todėl vaidina svarbų vaidmenį kontrolinį H. pylori infekcija ir gastritas [21].
Mes pranešama, kad IL-23A išsiskiria iš GC ląstelių ir makrofagų. Mes nustatėme, kad serumo lygis IL-23A buvo prastos prognozės GC pacientų rodiklis, o jo išraiška buvo susijęs su naviko apimtį ir H.pylori
infekcijos. Mūsų rezultatai taip pat rodo, kad IL-23A neturėjo tiesioginio poveikio vėžinių ląstelių proliferaciją. Tačiau, ji turi įtakos naviko mikroaplinkose didinant sekreciją IL-17A, kuri yra požymis citokinų iš Th17 ląstelių. Taigi, mes nustatėme, kad IL-23A gali būti potencialus indeksą ir tikslą diagnozuoti ir gydyti GC.
Išvadas
Taigi, šis tyrimas parodė, kad aukštos raiškos IL-23A yra susijęs su GC. IL-23A gali sukelti IL-17A sekreciją aktyvuoti IL-17A /IL-17RA /NF-κB signalizacijos naviko mikroaplinka. Serumas IL-23A koncentracija yra prastos prognozės GC pacientų ir IL-23A bus potencialus indeksas ir tikslas diagnozuoti ir gydyti GC rodiklis.
Medžiagos ir metodai
Pacientų
Šis tyrimas apėmė 141 pacientams, sergantiems GC, kuris buvo atlikta operacija nuo 2008 iki 2013 m KUNSHAN Liaudies ligoninė, Kunshan, Jiangsu ir Kunshan ligoninės kontroliuojamų Nanjing universiteto kinų medicinos. Dokumentais informuoti sutikimą genų ekspresijos analizuoja visų audinių buvo gautas iš visiems pacientams prieš operaciją. Šis tyrimas patvirtino vietos etikos komiteto KUNSHAN Liaudies ligoninė. Histologinis potipis pagal Lauren klasifikacija [22] buvo nustatyta po to naviko skyriuose peržiūros dviejų patologai. Tolesni duomenys buvo gauti iš visų GC pacientų, kurie buvo vertinami 3, 6,12 mėnesius ir po to kas 6 mėnesius 5 metus arba iki mirties.
Imunohistocheminis
Visi audiniai buvo pašalinta ir nustatyta 4% paraformaldehido per naktį 4 ° C, tada apdorojami ir suskirstyta į 5 pm storio. Sekciniu skaidres buvo tamsintas imunohistocheminiu IL-23A, IL-23R ir IL-17A (Santa Cruz Biotechnology), po to inkubacijos su antrinio antikūno 37 ° C temperatūroje 30 min ir reakcijos su DAB reagento 5-10 min. Skaidrės buvo sumontuoti neutraliu guma mikroskopiškai ištirti. buvo laikomi ląstelės su rudos ląstelėje granulės (citoplazmoje arba branduolio) turi būti teigiamos tamsintas.
Elisa
koncentracija IL-23A ir IL-17A serume GC pacientų ir sveikų kandidatų buvo matuojami naudojant įsigyti daugiasluoksnis ELISA rinkiniai ( eBioscience).
stimuliavimas IL-23A vitro
T ląstelių ir makrofagų ir buvo izoliuotas nuo periferinio kraujo mononuklearų ląsteles naudojant izoliacijos rinkinys T ląstelių bei monocitų atitinkamai (Miltenyi Biotec). T ląstelių ir makrofagų plius GC ląstelių linijas (MKN45 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 buvo įsigytas iš ATCC) išliko in vitro, parsisiųsti ir skatino Helicobacter pylori pervežimas lizate (NCTC 11637, CagA + ir Vaca +) ir analizuojami viduląstelinė citokinų dažymo , Viduląsteliniam citokinų dažymo, T ląstelės buvo stimuliuojama 37 ° C temperatūroje 5 valandas, kurių leukocitų aktyvacijos kokteilis (BD Pharmingen). Be to, T ląstelės, makrofagai ir GC ląstelių linijos buvo tamsintas su paviršinių žymenų, fiksuoto ir laidžiomis su IntraPre reagentas (Beckman Coulter), ir pagaliau dažyti ląstelėje žymekliais. Duomenys buvo įsigyta FACSVantage SE ir analizuojami su CellQuest programinės įrangos. Fluorochrominiai konjuguoto MA prieš IL-23A buvo įsigytas iš BD Pharmingen (562.468 kat.).
Flowcytometry
ląstelės viduje citokinų dažymo, ląstelės buvo stimuliuojama 37 ° C 5 valandas su Leukocitų aktyvacijos kokteilis (BD Pharmingen) , Ląstelės buvo tamsintas su paviršinių žymenų, fiksuoto ir laidžiomis su IntraPre reagentas (Beckman Coulter), ir pagaliau dažyti ląstelėje žymekliais. Duomenys buvo įsigyta FACSVantage SE ir analizuojami su CellQuest programinės įrangos. Fluorochrominiai konjuguoto monokloninius antikūnus (MAB) prieš IL-23A, CD3 tarnavo kaip persekiotoją T ląstelių ir CD14 tarnauti kaip žymekliai monocitų ir makrofagų buvo įsigytas iš BD Pharmingen.
MTS Analizės
išauginti ląstelės buvo padengtas tokiu tankumu 6 × 10 3 ląstelių /gerai 96 šulinėlių plokštelės ir prižiūrimų su DMEM plius 10% serumas iš veršiuko embriono (Invitrogen). Ląstelių gyvybingumas vertintas MTS tyrimu. CellTiter 96Aqueous Vienas Sprendimas reagentas (Promega) buvo įtraukta į kiekvieną šulinėlį pagal gamintojo instrukcijas, o plokštelės buvo grąžintas į inkubatoriuje. Po 4 valandų, ląstelių gyvybingumas buvo nustatomas matuojant esant 490 nm, naudojant kompiuterinę kontroliuojama plokštės skaitytoją absorbcija.
Vakarų dėmė
Baltymai buvo paimti iš ląstelių ir kiekybiškai naudojant baltymų tyrimą (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Baltymų pavyzdžiai (30 mikrogramų) buvo frakcionuotas SDS-PAGE ir perkelti į nitroceliuliozinio membrana. Imunoblotingas buvo atliekami naudojant antikūnus prieš p-IκBα, IκBα, CyclinD1 ir IL-17RA (Santa Cruz Biotechnology). Rezultatai buvo ryškinamos naudojant cheminės liuminescencijos aptikimo sistemą (Pierce "ECL substratas Vakarų dėmė aptikimo sistema; Thermo Scientific) ir veikiami autoradiografavimą filmo (" Kodak xar filmo)
Statistinė analizė Bendrovės rezultatai išreiškiami vidurkis ± SD ne. mažiausiai trimis egzemplioriais eksperimentus. Palyginimai tarp dviejų grupių buvo atliekama naudojant Mann-Whitney U
testą. IL-23A išraiškos tarp įvairių klinikinių charakteristikų palyginimas buvo analizuojami naudojant χ 2 testą. Koreliacinė analizė tarp išraiškos IL-23A ir IL-17A GC audiniuose buvo atliekama naudojant Spearman neparametriniai Santykių analizė. Išgyvenimo kreivės buvo apskaičiuota naudojant Kaplan-Meier produktas terminas metodą ir reikšmingų skirtumų tarp išgyvenimo kreivių buvo nustatoma naudojant log-rank testą. P
< 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas
Santrumpos
IL-23.
Interleukinas-23
GC: Rīga, skrandžio vėžio


IL-23R: Rīga, IL-23 receptoriaus
IL-17RA: Rīga, IL-17 receptoriaus subvienetų

NF-κB: Rīga, atominė faktoriaus κB
STAT4: Rīga, Signal keitiklio ir aktyvatorių transkripcijos 4
NK: Rīga, gamtos žudikas
deklaracijų
Padėka
šiame tyrime buvo remiami socialinės raidos technologijų projektų Kunshan, Kinija (KS1255)
Autoriai ". Originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 12935_2014_104_MOESM1_ESM.gif Autorių originalus failas 1 pav 12935_2014_104_MOESM2_ESM.gif Autorių originalaus failo 2 pav 12935_2014_104_MOESM3_ESM.gif Autorių originalios 3 pav 12935_2014_104_MOESM4_ESM.gif Autorių originalaus failo 4 pav 12935_2014_104_MOESM5_ESM.gif Autorių originalaus failo 5 paveiksle konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai deklaruoja, kad jie neturi jokių konkuruojančių interesų.
autorių indėlį
KI ir WZ pastojo ir suprojektuoti eksperimentus. KI, YZ, JZ, YZ, QW ir HP atliko eksperimentus. KI ir WZ atlikti statistinę analizę visų duomenų. KI rašė popierių. Visi autoriai sutaria su rankraščio šio pateikimo turinį. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Statinai ir skrandžio vėžio rizika diabetu sergantiems pacientams
• Dalyvavimas naviko nekrozės faktoriaus alfa į CXCR4 išraiška ląstelę skrandžio vėžio sukeltas Helicobacter pylori