Az interleukin-23A társul tumornövekedést Helicobacter pylori összefüggő emberi gyomor- cancer

interleukin-23A társul tumornövekedést Helicobacter pylori
val kapcsolatos emberi gyomorrák
Abstract
alapon
interleukin ( IL) -23 egyik újonnan azonosított gyulladásos citokinek és gyulladás is ismert, hogy kapcsolatban áll a fejlesztés a gyomorrák (GC). A szerepe az IL-23 a gyomorrák, azonban nagyrészt ismeretlen. A jelen vizsgálatban, vizsgáltuk az expressziós és lehetséges szerepét az IL-23A humán GC.
Módszerek
az IL-23A és az IL-17A humán GC szövetekben határoztuk meg immunhisztokémiai, és a kapcsolat a IL-23A kifejezés és klinikai jellemzői GC vizsgáltuk. A szérum koncentrációja az IL-23A és az IL-17A-t is teszteltük ELISA-val. A forrás és szerepe az IL-23A GC vizsgáltuk in vitro katalógusa áramlási citometriával, MTS (Owen-reagens) assay és Western blot. Katalógusa Eredmények katalógusa IL-23A, IL-23 receptor (IL-23R) és az IL-17A mind túlexpresszálódik emberi GC szövetekben, és az IL-23A volt jól korrelál az IL-17A GC szövetekben, valamint a beteg szérumában. A makrofágok és a GC-sejteket a fő forrása az IL-23A szekréció stimulálás a H. pylori katalógusa lizátumból. Továbbá azt találtuk, hogy az IL-23A mozdítani proliferációját GC sejtvonalak keresztül IL-17A /IL-17-receptor-antagonista (IL-17RA) /nukleáris faktor-kB (NF-kB) jelátviteli.
Következtetések
A nagy az IL-23A társított GC. Az IL-23A lehet mozdítani a GC-sejtek növekedését indukálva az IL-17A tumor mikrokörnyezetében. Eredményeink azt sugallják, hogy a szérum koncentrációja az IL-23A jó biomarker a rossz klinikai prognózisának GC betegeknél.
Kulcsszavak
interleukin-23A interleukin-17A nukleáris faktor-KB-Gyomorrák alapon
IL-23A alegysége az heterodimer citokin, az IL-23 által párosítás a többi alegység, p40 (IL-12). Ismeretes, hogy az IL-23A expresszálódik és szekretálódik a makrofágok és a dendritikus sejtek. Az IL-23 aktiválhatja jelátvivő és transzkripciós aktivátor 4 (STAT4) keresztül az IL-23R elosztott membránján többféle immunsejtek, beleértve a T-sejtek, a természetes ölősejtek (NK-sejtek), monociták és a dendritikus sejtek. És IL-23 részt vesz immunválaszokat azonosításában idegen anyagok és védi a szervezetet a fertőzés és a betegség [1], [2].
IL-23A részt vesz a gyulladásos válasz elősegítése révén mátrix metalloproteáz 9, növelve az angiogenezist és redukáló CD8 + T-sejtek infiltrációja [3], [4]. Dolgozva együtt az IL-6 és a transzformáló növekedési faktor-β1, az IL-23 elősegíti a differenciálódást a CD4 + naiv T-sejtek Th17 sejtek, amelyek egyike a jól fogadta T-helper-sejt-alcsoportok [5] - [ ,,,0],7]. Th17 sejtek szekretálnak proinflammatorikus citokin IL-17A, amely képes indukálni Th17 válasz serkentése révén a termelés más gyulladáskeltő molekulák, mint például az IL-1β, IL-6, a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α) és kemokinek, így a gyulladás. Leírták, hogy az IL-17-szorosan kapcsolódó GC [8], [9]. A genom-szintű asszociációs vizsgálat során kiderült, hogy -197G > A polimorfizmus pozíciójában -197 az IL-17 promoter régió jelentősen megnövekedett GC kockázat az általános populációban [10], [11], míg a megnövekedett expressziója az IL-17-ben talált betegeknél GC. IL-17 is részt vesz a progresszió GC előmozdításával angiogenezis a tumor mikrokörnyezetében [12]. Sőt, állandó gyulladás okozta részben az IL-17 hozzájárulhat a gyomornyálkahártya patológia, és ezáltal növeli a GC [9], [11], [13].
Képest, hogy a IL-17A, a vonatkozó vizsgálatok a szerepe az IL-23A humán GC nagyrészt hiányzik. A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy az IL-23A GC, és a klinikai jelentősége és lehetséges mechanizmus is részt vettek. Katalógusa Eredmények katalógusa IL-23A, IL-23R és IL-17A túlzó emberi GC
Annak vizsgálatára, az IL-23A és a rokon molekulák a humán GC, 141 paraffinba ágyazott szövetek vizsgáltuk expressziója és eloszlása ​​az IL-23A, IL-23R és IL-17A immunhisztokémiai. Először is, azt tapasztaltuk, hogy az IL-23A, IL-23R és IL-17A mind jelentősen expresszálódik a humán GC Összevetve a normális kontrollal. Bár nem volt kimutatható a normál gyomor mirigyek és enyhén pozitív infiltráló gyulladásos sejtek, IL-23A volt kimutatható magas szinten a beszűrődő gyulladásos sejtek és rákos sejtek rákos szövetekben (1A). Az IL-23R-t kizárólag kifejezett beszűrődő gyulladásos sejtek mind a rák és a normál szövetek, de a kifejezés szintje és aránya sokkal magasabb volt a rákos szövetekben (1B). Az IL-17A volt található főleg a beszivárgott gyulladásos sejtek GC (1C). Mi következő vizsgáltuk közötti kapcsolat kifejezés az IL-23A és a különböző klinikai jellemzőit, és megállapította, hogy az IL-23A társult a H. pylori
fertőzés és daganatterhelés (1. táblázat). Ábra 1 expressziója és eloszlása ​​az IL-23A, IL-23R és IL-17A humán GC és a normál gasztrikus szövetben. (A) expressziója és eloszlása ​​az IL-23A analizáltuk immunhisztokémiai mind humán GC és a normál gasztrikus szövetben. Átlagos integrált optikai sűrűséget kapunk elemzésével öt látómezők egyes diák értékelte Image-Pro Plus 5.0 verzió. (B) Expressziós, elosztás és az átlagos integrált optikai sűrűség az IL-23R-hez. (C) Expression, elosztás és az átlagos integrált optikai sűrűségét IL-17A. ** P katalógusa < 0.01.
1. táblázat Klinikai jellemzői 141 GC betegek katalógusa betegek demográfiai
IL-23 pozitív Matton IL-23 negatív Matton Pvaluea
katalógusa Életkor, y (tartomány) hotelben 59 (32-85) hotelben ND katalógusa ND katalógusa szex katalógusa 0.730 katalógusa Férfi katalógusa 89 katalógusa 45 katalógusa 44 fiatal női katalógusa 52 katalógusa 28 katalógusa 24 katalógusa Main helyen katalógusa 0,613 katalógusa U
74 katalógusa 36 katalógusa 38 katalógusa ML
67 katalógusa 29 katalógusa 38 katalógusa Size cm (tartomány) hotelben 0.028b katalógusa > 5 katalógusa 97 katalógusa 74 katalógusa 23 katalógusa < 5 katalógusa 44 katalógusa 25 katalógusa 19 katalógusa mélysége invázió
0.519 katalógusa T1 /T2
88 katalógusa 24 katalógusa 14 katalógusa T3 /T4
53 katalógusa 29 katalógusa 24
Lauren besorolás katalógusa 0.372 katalógusa Bél katalógusa 94 katalógusa 45 katalógusa 49 katalógusa Diffúz katalógusa 47 katalógusa 27 katalógusa 20 katalógusa nyirokcsomó metasztázis katalógusa 0.401 katalógusa Pozitív katalógusa 69 katalógusa 37 katalógusa 32 katalógusa Negatív katalógusa 72 katalógusa 33 katalógusa 39 katalógusa pylori fertőzés katalógusa katalógusa < 0.0001c
Pozitív katalógusa 84 katalógusa 74 katalógusa 10 katalógusa Negatív katalógusa 57 katalógusa 28 katalógusa 29 katalógusa Stage
0,215 katalógusa I
32 katalógusa 16 katalógusa 16 katalógusa II katalógusa 45 katalógusa 23 katalógusa 22 katalógusa III
43 katalógusa 20 katalógusa 23 katalógusa IV katalógusa 21 katalógusa 10
11 katalógusa ND = nincs meghatározva.
aχ2 teszt. katalógusa bP katalógusa < 0.05.
Pas katalógusa < 0.01.
IL-23A összefüggésben van az IL-17A szekrécióra humán GC katalógusa A legújabb vizsgálatok kimutatták, hogy az IL-23A volt az egyik fő tényező a normál Th17 sejt differenciálódás. Feltettük a kérdést, hogy az IL-23A is társult Th17 sejt a GC. Valóban, emelkedett az IL-23A expresszió egybeesett megnövekedett expressziója IL-17A (2A ábra). Hogy vizsgálja meg a további kapcsolat közöttük, azt mennyiségileg a kifejezés egyaránt citokinek belül IHC festést GC betegek, és kiderült, hogy az IL-23A expresszió szignifikáns korrelációt mutatott az IL-17A kifejezése egy lineáris korrelációs vizsgálat (r 2 = 0,7148, P katalógusa < 0,001) (2B). A 2. ábra az IL-23A összefüggésben van az IL-17A szekrécióra humán GC. (A) közötti korreláció az IL-23A és az IL-17A rákos szöveteiben GC betegek vizsgáltuk Immunhisztokémia. (B) a korrelációs között az IL-23A és az IL-17A belül IHC festést GC betegek által hozzáférhető lineáris korrelációs tesztet.
Szérum IL-23A koncentráció indikátoraként rossz prognózissal GC betegek
Mind az IL-23A és az IL-17A lehet a vérbe, ezért feltételeztük, hogy az IL-23A és az IL-17A és a szérumban a GC a betegek vagy az egészséges kontrollok lehet meghatározni ELISA-val biomarkerek. Mi első érzékelt szintjén egyaránt citokinek, mint 213 ± 75 pg /ml IL-23A és 286 ± 101 pg /ml IL-17A 50 egészséges egyének (3A és B). A szérum szintje mindkét citokinek jelentősen nőtt GC betegek 517 ± 247 pg /ml IL-23A és 422 ± 284 pg /ml IL-17A (3A és B). És a lineáris korreláció a szérum-koncentráció között az IL-23A és az IL-17A is látható volt GC betegeknél (r 2 = 0,5841, p
< 0,001) (3C, ábra). A küszöb az egészséges kontrollok szerint állítottuk elő, hogy a 95% -os konfidencia intervallum (Cl), amely 285 pg /ml IL-23A. Szerint a küszöböt, a GC soroltuk a IL-23A és magas IL-23A kis részhalmaza. Való összehasonlítása érdekében klinikai prognózisa között a két altípus a GC beteg esetében a szérum IL-23A expresszióját vizsgáltuk a Kaplan-Meier-módszerrel. Azt találtuk, hogy az IL-23A szint (> 285 pg /ml) szignifikánsan összefüggött a rövidebb teljes túlélés (OS) [P katalógusa = 0,027, relatív hazárd (HR) 2,246, 95% CI: 1,212-4,160] (ábra 3D). 3. ábra A szérum IL-23A koncentráció indikátora a rossz prognózissal GC betegeknél. (A) szérum koncentrációja az IL-23A GC betegek és az egészséges kontrollok. (B) Szérum koncentrációja az IL-17A GC betegek és az egészséges kontrollok. (C) a korrelációs között az IL-23A és az IL-17A szérumban GC betegek által hozzáférhető lineáris korrelációs teszt. (D) A Kaplan-Meier görbék az OS GC betegek különböző expresszióját IL-23A.
IL-23A lehet kiválasztódik a makrofágok és a GC-sejtek
immunhisztokémiai azt mutatták, hogy az IL-23A-t bőségesen fejezik ki többszörös sejt, köztük a T-sejtek, a makrofágok és a GC-sejtek (1a ábra). Ahhoz, hogy vizsgálja meg a pontos eredetét IL-23A, Hozzáfértünk IL-23A kifejezés egy vitro katalógusa stimuláció rendszer segítségével H. pylori katalógusa lizátumot a citokin-indukáló szer, amely alapján a korábbi megfigyelés, hogy a H. pylori
volt robusztus induktor számára az IL-23A. A T-sejtekben az IL-23A szekréciót enyhén emelkedett upon stimulálás a H. pylori
lizátum (4a ábra). A makrofágokban, a szám az IL-23A-pozitív sejtek emelkedett 1,15 ± 0,18% és 13,21 ± 6,21% (4b ábra). Míg GC sejtvonalakban, az IL-23A-pozitív SGC-7901 sejtek emelkedett 2,64 ± 1,12% és 13,11 ± 3,12%, és az IL-23A pozitív MKN45 sejtek emelkedett 1,16 ± 0,46% és 17,55 ± 5,42% (4C). Összességében, a makrofágok és a GC sejtek mutattak a H. pylori
lizátum-indukált stimuláció az IL-23A szekréció (ábra 4d). A 4. ábra az IL-23A kiválasztódik makrofágok és GC sejtekben. (A) az IL-23A és a sejtfelszíni markert CD3 detektáltunk áramlási citometriával a T-sejtekben a különböző kezelést. (B) az IL-23A és a sejtfelszíni markert CD14 detektáltunk áramlási citometriával makrofágokban különböző kezelést. (C) az IL-23A detektáltuk FCS SGC-7901 és MKN45 kezelt sejtek a H. pylori
lizátumból. (D) aránya az IL-23A pozitív sejtek T-sejtek, makrofágok és a GC-sejtvonalak.
IL-23A elősegíti túlélését GC-sejtek révén az IL-17A /IL-17RA /nukleáris faktor (NF) -κB jelátviteli
Annak vizsgálatára, az IL-23A tumornövekedésre, egy társ-tenyésztési vizsgálat in vitro
alkalmaztuk. Először azt találtuk, hogy az IL-23A nem volt szignifikáns hatása a sejtproliferációra, amikor a GC vonalak SGC-7901 és MKN45 kezeltük humán rekombináns IL-23A közvetlenül. Azt következő találtuk, hogy nem volt jelentős hatása a tumor sejt SGC-7901 vagy MKN45 növekedés együtt tenyésztett naiv T-limfociták jelenlétében IL-23A. Azonban a jelentős sejt-növekedést elősegítő hatását volt látható, ha vagy a makrofágok, vagy H. pylori
lizátumot adtunk a társ-tenyésztési rendszer. Amikor mindkét makrofágok és a H. pylori
adunk hozzá, a hatás szinergetikus (5A ábra és B). 5. ábra az IL-23A elősegíti túlélését GC sejtvonalak keresztül IL-17A /IL-17RA /NF-kB jelátvitel. (A) A sejt életképességét SGC-7901 a kezelést vizsgáltuk. (B) a sejt életképességét az MKN45 a kezelést vizsgáltuk. (C) a koncentráció az IL-17A a sejttenyészet közegét SGC-7901 és MKN45 határoztuk meg ELISA-val. ** P katalógusa < 0,01. (D) az IL-17RA és IL-23R mind MKN45, SGC-7901. (E) A kifejezés a p-IkBa, IkBa és CyclinD1 mindkét MKN45, SGC-7901. Katalógusa megvizsgáltuk a lehetséges mechanizmus alapjául a szövetség között az IL-17A és IL-23A. Koncentrációja az IL-17A a tenyésztőközegben határoztuk, és nem volt szignifikáns különbség, ha a GC-sejteket kezeltünk IL-23A önmagában, vagy az IL-23A, valamint a T-limfociták. Azonban az IL-17A növekedett, amikor vagy a H. pylori
lizátumot vagy makrofágok adunk (5C). NF-kB jelátvitel is megvizsgálták, és a kifejezés mind az IL-17RA és IL-23R-t detektáltunk mind SGC-7901 és MKN45 sejtek, viszonylag erős expresszióját az IL-17RA és szinte nincs az IL-23R-azonosítottunk (5D ábra). A foszforilált kBa és cyclinD1, a termékek az NF-kB jelátvitel mindketten növekedett SGC-7901 és MKN45 sejtek együtt emelkedett IL-17A (5E ábra). IL-23A kiválasztódott mind a makrofágok és a GC-sejtek és támogatni a rák terjedése révén IL-17A /IL-17RA /NF-kB jelátvitel.
Vita katalógusa GC a negyedik leggyakoribb daganat a második vezető oka a rák val kapcsolatos halál világszerte. A számos szövettani típusú, bél típusú GC gyakran társul H.pylori
fertőzés, és annak természetesen jellemzi akut gyomorhurut, krónikus gyomorhurut, gyomor atrófia, intesztinális metaplázia, és végül, képződése GC [10].
a pontos okai GC ismeretlen, de számos tényező növelheti a betegség kockázatát, beleértve a nem, faj, genetika, földrajz, vércsoport, előrehaladott életkor, a családi történelem, és a H. pylori fertőzés katalógusa a gyomor. H. pylori katalógusa fertőzi a gyomornyálkahártya okoz krónikus gyulladás és fekélyek. A részletes molekuláris útvonalak felelős a stimuláció H. pylori katalógusa még mindig nem teljesen ismert [14] - [16].
Több tanulmány arról számolt be, az immunrendszer effektor molekulákat a H. pylori katalógusa, például CagA . CagA elősegítette kifejezése a proinflammatorikus kemokinek az IL-8, a CXC-kemokin-ligandumot 2 (más néven makrofág gyulladásos fehérje), és az antimikrobiális peptid emberi β-defenzin-2 aktiválása révén az NF-kB jelző [17]. Más tanulmányok kimutatták, hogy CagA transzlokálódik a hámsejteket indukáló magas szintű IL-8 által fertőzött egyes H. pylori
törzsek kíséretében indukciója gyulladásos válasz [16], [18], [19]. Ras-függő kinázok extracelluláris szignál-szabályozott kináz (ERK) 1 és ERK2, szintén aktiválják CagA kiváltott tirozin foszforilezést, ami aktiválja a transzkripciós faktorok NF-kB, aktivátor protein-1, és végül, az IL-8 termelés fogadó sejtek [9].
A mechanizmus kapcsolódik Hp fertőzés és Th17 választ nem teljesen feltárt. Néhány a citokinek, például az IL-1β és IL-21 számoltak be, hogy kapcsolatban. Lee et al. feltárta, hogy perzisztens Hp fertőzés képes indukálni Hp-specifikus Th17 sejtek helyett más immunsejtek, amelyek szintén leírták, hogy titkos IL-17A. Ezenkívül az IL-1β-t is tartósan emelkedett, és semlegesítés az IL-1β csökkentette a Hp-specifikus IL-17A válasz, ami arra utal, egy funkcionális közötti összefüggést az IL-1β és a tartós Th17 válasz [20]. Másik csoport is kimutatta, hogy az IL-21 szabályozza a Th1 és Th17 effektor válaszokat a krónikus H. pylori fertőzés STAT1- és STAT3-függő módon, így alapvető szerepet játszik ellenőrző H. pylori fertőzés és gyomorhurut [21]. Mi katalógusa számolt be, hogy az IL-23A-t szekretált GC-sejtek és a makrofágok. Azt találtuk, hogy a szérum szint az IL-23A volt indikátoraként rossz prognózissal GC betegeknél, és expresszióját volt kapcsolatos tumor térfogatának és H. pylori
fertőzés. Eredményeink azt mutatták, hogy az IL-23A nem volt közvetlen hatása a proliferációs rákos sejtek szaporodását. Azonban ez nem befolyásolja a tumor mikrokörnyezetében növelésével szekréciót IL-17A, ami fémjelzi citokin Th17 sejtek. Összefoglalva, azt találtuk, hogy az IL-23A lehet egy potenciális index és a cél a diagnózis és a kezelés a GC.
Következtetések
Összefoglalva, ez a vizsgálat azt mutatta, hogy a magas expresszióját IL-23A társított GC. IL-23A indukálhatják az IL-17A aktiválja az IL-17A /IL-17RA /NF-kB jelátviteli tumor mikrokörnyezetében. Szérum IL-23A koncentráció indikátoraként rossz prognózissal GC betegek és az IL-23A lesz egy potenciális index és a cél a diagnózis és a kezelés a GC.
Anyagok és módszerek
Betegek
A jelen vizsgálatban 141 betegek GC műtéten átesett 2008-2013 a Kunshan Népi Kórház, Kunshan, Jiangsu és Kunshan kórház csatlakozott a Nanjing kínai Orvostudományi Egyetem. Dokumentált tájékozott beleegyezését génexpressziós analízise minden szövetben kapunk minden beteg a műtét előtt. Ez a tanulmány által jóváhagyott helyi etikai bizottság Kunshan Népi Kórházban. A szövettani altípus szerint Lauren osztályozás [22] után határoztuk meg véleményét a tumor szakaszok két patológusok. A nyomon követés adatok álltak rendelkezésre az összes GC beteg, aki értékelték 3, 6,12 hónap, majd 6 havonta 5 évig, vagy addig, amíg a halál. Katalógusa immunhisztokémiai Tanuld az összes környező szöveteket eltávolítjuk, és a fix 4% paraformaldehidben egy éjszakán át 4 ° C-on, majd a feldolgozott és metszeteket 5 jim vastagságú. Szekcionált tárgylemezeket festettük, majd immunhisztokémiával IL-23A, IL-23R és IL-17A (Santa Cruz Biotechnology), majd inkubáltuk szekunder antitesttel 37 ° C-on 30 percig és a reakció DAB reagens 5-10 percig. A lemezeket szerelt semleges rágógumi mikroszkópos vizsgálatra. A sejteket barna intracelluláris granulátumok (citoplazmában vagy mag) tekintették pozitívan festett.
ELISA
koncentrációja az IL-23A és az IL-17A szérumban GC betegek és egészséges jelöltek mértük a kereskedelemben kapható szendvics ELISA készletekkel ( eBioscience).
stimulálása IL-23A in vitro
T-sejtek és a makrofág-t izoláltunk perifériás vér mononukleáris sejtek használatával izolációs készlet a T-sejtek és a monocita illetőleg (Miltenyi Biotec). T-sejtek és makrofágok plusz GC sejtvonalak (MKN45, SGC-7901 vásároltunk az ATCC-től) in vitro tartottuk
és stimulált Helicobacter pylori által
lizátum (NCTC 11637, CagA + és VacA +) és analizáljuk az intracelluláris citokin-festéssel . Az intracelluláris citokin-festéssel, T-sejteket stimuláltunk 37 ° C-on 5 órán keresztül Leukocyte Aktiválás koktéllal (BD Pharmingen). Továbbá, a T-sejtek, makrofágok és a GC sejtvonalakat festettük felszíni markerek, fix, és permeabilizáltuk IntraPre reagens (Beckman Coulter), és végül festettük intracelluláris markerek. Az adatok megvásárolnák FACSVantage SE és elemzik CellQuest szoftvert. Fluorokrómmal konjugált mAb elleni IL-23A vásároltunk a BD Pharmingen (Kat. 562.468).
Áramlási citometriával
For intracelluláris citokin festés sejteket 37 ° C-on 5 órán keresztül Leukocyte Aktiválás koktéllal (BD Pharmingen) . A sejteket ezután megfestettük felszíni markerek, fix, és permeabilizáltuk IntraPre reagens (Beckman Coulter), és végül festettük intracelluláris markerek. Az adatok megvásárolnák FACSVantage SE és elemzik CellQuest szoftvert. Fluorokrómmal konjugált monoklonális antitestek (mAb-k) az IL-23A, CD3 szolgált markereként T-sejtek és a CD14 szolgálnak markerként monocita és makrofág szereztük BD Pharmingen.
MTS-vizsgálat
tenyésztett sejteket sűrűséggel 6 × 10 3 sejt /mérőhely egy 96 mérőhelyes lemezre, és fenn DMEM plusz 10% magzati borjú szérumot (Invitrogen). A sejtek életképességét értékeltük MTS vizsgálattal. CellTiter 96Aqueous egyik megoldás reagens (Promega) adtunk mindegyik lyukhoz, a gyártó utasításai és a lemezeket visszatettük az inkubátorba. 4 óra elteltével a sejtek életképességét úgy határoztuk meg, hogy megmérjük az abszorbanciát 490 nm-en egy számítógéppel vezérelt lemez-olvasó.
Western blot
fehérjéket sejtekből kivont és mennyiségileg egy fehérje vizsgálattal (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). A fehérje mintákat (30 ng) frakcionáltuk SDS-PAGE és átvittük egy nitro-cellulóz-membránra. Immunoblot végeztük elleni antitestek p-kBa, kBa, CyclinD1 és az IL-17RA (Santa Cruz Biotechnology). Az eredményeket vizualizáltuk kemilumineszcens detektáló rendszer (Pierce ECL szubsztrát Western-blot-érzékelő rendszer; Thermo Scientific), és ki vannak téve a autoradiográfiás filmre (Kodak XAR film).
Statisztikai analízis
Az eredményeket átlag ± SD AT legalább három párhuzamos kísérletek. Az összehasonlítást két csoport között végeztük a Mann-Whitney U
teszt. Az összehasonlítás az IL-23A kifejezés a különböző klinikai jellemzőit elemeztük a χ 2 teszt. Korreláció elemzés között az IL-23A és az IL-17A GC szövetekben végeztünk Spearman nem-paraméteres kapcsolat elemzést. A túlélési görbéket kiszámításához a Kaplan-Meier-módszerrel, és jelentős különbségek túlélési görbéket a log-rank teszt. P katalógusa < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Katalógusa rövidítések katalógusa IL-23: katalógusa interleukin-23
GC: katalógusa Gyomorrák katalógusa
katalógusa IL-23R: katalógusa IL-23 receptor
IL-17RA: katalógusa IL-17 receptor alegység Matton
NF-kB: katalógusa nukleáris faktor-kB
STAT4: katalógusa jelátviteli és transzkripciós aktivátor 4
NK: katalógusa Natural killer
nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa Ez a tanulmány által támogatott szociális fejlesztési technológiai projektek Kunsan, Kína (KS1255). katalógusa Authors ' eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 12935_2014_104_MOESM1_ESM.gif A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 12935_2014_104_MOESM2_ESM.gif A szerzők eredeti fájl 2. ábrán 12935_2014_104_MOESM3_ESM.gif A szerzők eredeti fájl 3. ábra 12935_2014_104_MOESM4_ESM.gif A szerzők eredeti fájl 4. ábra 12935_2014_104_MOESM5_ESM.gif A szerzők eredeti fájl 5. ábra versengő érdekek
a szerzők kijelentik, hogy nem ellentétes érdekek. katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa CL és WZ terveztek és a kísérletek. CL, YZ, JZ, YZ, QW és Hp végzett kísérletekben. CL és WZ végzett statisztikai elemzést az összes adatot. CL írta a papírt. Minden szerző egyetért a tartalmával a kéziratot, és ezt az észrevételt. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• A statinok és a kockázat a gyomorrák cukorbetegek
• Bevonása tumor nekrózis faktor-α az fokozza a CXCR4 expresszió gyomorrák által kiváltott Helicobacter pylori