Interleukiini-23A liittyy kasvaimen kasvua Helicobacter-pylorin liittyvät ihmisen mahalaukun cancer

interleukiini-23A liittyy kasvaimen kasvua Helicobacter-pylorin
liittyviä ihmisen mahasyövän
Abstract
tausta
interleukiini ( IL) -23 on yksi äskettäin tunnistettu tulehduksellisten sytokiinien ja tulehdusta tiedetään myös liittyvän mahasyövän (GC). Rooli IL-23 mahasyövän, on kuitenkin suurelta osin tuntemattomia. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme tutkineet ja ilmentävät mahdollista roolia IL-23A ihmisen GC.
Menetelmät
IL-23A: n ja IL-17A ihmisen GC kudoksissa määritettiin immunohistokemiallisesti, ja suhde IL-23A ilmaisun ja kliinisiä tekijöitä GC tutkittiin. Seerumin IL-23A: n ja IL-17A testattiin myös ELISA: lla. Lähde ja roolia IL-23A GC tutkittiin in vitro
virtaussytometrialla, MTS (Owenin reagenssi) määritys ja Western blot.
Tulokset
IL-23A, IL-23-reseptorin (IL-23R) ja IL-17A olivat kaikki yli-ilmentyy ihmisen GC kudoksissa, ja taso IL-23A oli hyvin korreloi IL-17A GC kudoksissa sekä potilaan seerumi. Makrofagien ja GC solut olivat päälähde IL-23A eritys stimuloitaessa helikobakteeri
lysaattia. Lisäksi olemme havainneet, että IL-23A edisti proliferaatiota GC solulinjojen kautta IL-17A /IL-17-reseptorin antagonisti (IL-17RA) /ydin tekijä-KB: n (NF-KB: n) signalointia.
Päätelmät
korkea IL-23A liittyy GC. IL-23A voi edistää GC solujen kasvua aiheuttamalla eritystä IL-17A kasvaimen mikroympäristössä. Tuloksemme viittaavat siihen, että seerumin IL-23A on hyvä biomarkkereiden huonon kliinisen ennusteen GC potilailla.
Avainsanat
interleukiini-23A interleukiini-17A Nuclear factor-KB Mahasyöpää Background
IL-23A on alayksikkö heterodimeerisen sytokiinin, IL-23 pariksi muiden alayksikön p40 (IL-12). On tunnettua, että IL-23A ilmaistaan ​​ja erittävät makrofagit ja dendriittisolut. IL-23 voi aktivoida signaalin anturi- ja aktivaattori transkription 4 (STAT4) kautta IL-23R jaetaan kalvon useita erilaisia ​​immuunijärjestelmän soluja, mukaan lukien T-solut, luonnolliset tappajasolut (NK-solut), monosyyteissä ja dendriittisolut. Ja IL-23 osallistuu immuunivasteita tunnistaa vieraita aineita ja puolustaa kehoa infektioita ja sairauksia [1], [2].
IL-23A on osallisena tulehdusreaktio edistämällä matriisi-9, lisäämällä angiogeneesiä ja vähentää CD8 + T-solujen infiltraatiota [3], [4]. Tekemällä yhdessä IL-6 ja transformoiva kasvutekijä-β1, IL-23 voi edistää erilaistumista CD4 + naiivit T-solut Th17 soluihin, joka on yksi hyvin hyväksytty auttaja-T-solualaryhmien [5] - [ ,,,0],7]. Th17 solut erittävät tulehdusta edistävä sytokiini IL-17A, joka voi aiheuttaa Th17 stimuloimalla tuotannon muiden proinflammatoristen molekyylien, kuten IL-1β, IL-6, tuumorinekroositekijä-α (TNF-α) ja kemokiinien, mikä johtaa tulehdukseen. On raportoitu, että IL-17 on tiiviisti GC [8], [9]. Genomi-laajuinen yhdistys tutkimuksessa kävi ilmi, että -197G > Polymorfismi asemassa -197 IL-17 promoottorialueen huomattavasti GC riski väestössä [10], [11], kun taas lisääntynyt IL-17 todettiin potilailla, joilla GC. IL-17 on mukana myös etenemistä GC edistämällä angiogeneesiä kasvaimen mikroympäristössä [12]. Lisäksi jatkuva tulehdus aiheutettiin osittain IL-17 voi myötävaikuttaa mahalaukun limakalvon patologian, siten lisäävät riskiä GC [9], [11], [13].
Verrattuna että IL-17A, tutkimukset koskevat roolia IL-23A ihmisen GC ole juurikaan. Esillä olevassa tutkimuksessa tutkimme IL-23A GC, ja sen kliininen merkitys ja mahdollinen mekanismi olivat mukana.
Tulokset
IL-23A, IL-23R ja IL-17A ovat liiallisia ihmisen GC
tutkimiseksi IL-23A ja liittyvien molekyylien ihmisen GC, 141 parafinoidut kudokset tutkittiin ekspressiota ja jakelu IL-23A, IL-23R: n ja IL-17A käyttäen immunohistokemia. Ensin havaitsimme, että IL-23A, IL-23R: n ja IL-17A olivat kaikki merkittävästi yli-ilmentyy ihmisen GC verrattuna normaaleihin kontrolleihin. Vaikka se oli havaita normaalissa maharauhanen ja lievästi positiivinen infiltroituvissa tulehdussolujen, IL-23A havaittiin korkealla tasolla infiltroituvissa tulehdussolujen ja syöpäsoluja syövän kudoksissa (kuvio 1A). IL-23R oli yksinomaan ilmaistu soluttautua tulehdussolujen sekä syövän ja normaaleissa kudoksissa, mutta ekspressiotaso ja suhde oli paljon suurempi syövän kudoksissa (kuvio 1 B). IL-17A sijaitsi pääasiassa soluttautuneet tulehdussolujen GC (kuvio 1 C). Me tutkimme seuraavaksi suhdetta IL-23A ja erilaisia ​​kliinisiä piirteitä, ja totesi, että taso IL-23A liittyi helikobakteeri
infektion ja kasvaintaakkaa (taulukko 1). Kuvio 1 Expression ja jakelu IL-23A, IL-23R: n ja IL-17A ihmisen GC ja normaali mahalaukun kudosta. (A) Expression ja jakelu IL-23A analysoitiin immunohistokemiallisesti sekä ihmisen GC ja normaalin mahalaukun kudosta. Keskimäärin integroitu optinen tiheys saatiin analysoimalla viisi näkökentät jokaisen dian arvioitiin Image-Pro Plus 5.0. (B) Expression, jakelu- ja keskimääräinen integroitu optinen tiheys IL-23R. (C) Expression, jakelu- ja keskimääräinen integroitu optinen tiheys IL-17A. ** P
< 0.01.
Taulukko 1 kliiniset ominaisuudet 141 GC potilaiden
Potilaiden demografiset
IL-23 positiivista
IL-23 negatiivisen
Pvaluea

ikä, y (alue)
59 (32-85) B ND
ND
Sex
0,730
Mies
89
45
44
Nainen
52
28
24
Main sijainti
0,613
U
74
36
38
ML
67
29
38
Size, cm (alue) B 0.028b
> 5
97
74
23
< 5
44
25
19
syvyys invaasion
0,519
T1 /T2
88
24
14
T3 /T4
53
29
24
Lauren luokitus
0,372
Suoliston
94
45
49
Diffuusi
47
27
20
Imusolmuke etäpesäke
0,401
Positiivinen
69
37
32
Negative
72
33
39
H.pylori
infektio
< 0.0001c
Positiivinen
84
74
10
Negative
57
28
29
Stage
0,215
I
32
16
16
II
45
23
22
III
43
20
23
IV
21
10
11
ND = ei määritetty.
aχ2 testi.
bP
< 0.05.
CP
< 0.01.
IL-23A korreloi IL-17A eritystä ihmisen GC
Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että eritystä IL-23A oli yksi tärkeimmistä tekijöistä normaalissa Th17 solujen erilaistumista. Me epäilivät IL-23A liittyi myös Th17 soluun GC. Todellakin, kohonnut IL-23A ekspressio samaan aikaan lisääntynyt IL-17A (kuvio 2A). Tutkia tarkemmin niiden välinen suhde, me kvantitatiivisesti ilmaus molempien sytokiinien sisällä IHC värjäytyminen GC potilaiden ja paljasti, että IL-23A ilmentyminen korreloi merkitsevästi IL-17A ilmaisun kautta lineaarinen korrelaatio koe (r 2 = 0,7148, P
< 0,001) (kuvio 2B). Kuvio 2 IL-23A korreloi IL-17A eritystä ihmisen GC. (A) välinen korrelaatio IL-23A ja IL-17A syöpäkudoksiin GC potilaista tutkittiin immunohistokemiallisesti. (B) välinen korrelaatio IL-23A ja IL-17A sisällä IHC värjäytyminen GC potilaista oli käsiksi korreloivat testi.
Seerumin IL-23A pitoisuus on merkki huonon ennusteen GC potilailla
Sekä IL-23A ja IL-17A voidaan erittää vereen, sen vuoksi, olemme arveltu, että taso IL-23A: n ja IL-17A seerumissa GC potilaiden tai terveiden verrokkien voidaan määrittää ELISA: lla, kuten biomarkkereita. Ensin havaittu taso sekä sytokiinien, kuten 213 ± 75 pg /ml IL-23A ja 286 ± 101 pg /ml IL-17A 50 terveiden yksilöiden (kuvio 3A ja B). Seerumin taso molempien sytokiinien oli lisääntynyt merkittävästi GC potilailla 517 ± 247 pg /ml IL-23A ja 422 ± 284 pg /ml IL-17A (kuvio 3A ja B). Ja lineaarinen korrelaatio seerumin pitoisuuden välillä IL-23A ja IL-17A nähtiin myös GC potilailla (r 2 = 0,5841, P
< 0,001) (kuvio 3C). Kynnys terveiden kontrollien saatiin mukaan 95%: n luottamusväli (CI), joka oli 285 pg /ml IL-23A. Mukaan kynnys, GC potilaat jaettiin IL-23A korkean ja IL-23A alhainen subsets. Verrata kliinisen ennusteen välillä osajoukot GC potilaiden seerumin IL-23A ilmentyminen tutkittiin käyttäen Kaplan-Meier-menetelmällä. Huomasimme, että IL-23A tason (> 285 pg /ml) merkitsevästi yhteydessä lyhyempi yleinen (OS) [P
= 0,027, riskisuhde (HR) 2,246, 95% CI: 1,212-4,160] (kuva 3D). Kuva 3 Seerumin IL-23A pitoisuuden indikaattorina huonon ennusteen GC potilailla. (A) pitoisuus seerumissa IL-23A GC potilaiden ja terveiden verrokkien. (B) pitoisuus seerumissa IL-17A GC potilaiden ja terveiden verrokkien. (C) välinen korrelaatio IL-23A ja IL-17A seerumissa GC potilaista oli käsiksi korreloivat testi. (D) Kaplan-Meier -käyrät OS GC potilaiden eri IL-23A.
IL-23A voidaan erittää makrofagien ja GC solujen
immunohistokemiallinen värjäys osoitti, että IL-23A oli runsaasti ilmaistu useita solutyyppejä, mukaan lukien T-solut, makrofagit ja GC-solujen (kuvio 1A). Tutkia tarkkaa alkuperää IL-23A, me käyttää IL-23A ilmentymisen käytettäessä vitro
stimulaatio järjestelmän avulla helikobakteeri
lysaatti kuten sytokiini-indusoiva aine, joka perustuu aikaisemmin havaintoon, että H. pylori
oli vankka indusoijan eritystä IL-23A. T-soluissa, IL-23A eritys lisääntyi hieman stimuloitaessa H. pylori
lysaattia (kuvio 4A). Makrofageissa, määrä IL-23A-positiivisia soluja nousi 1,15 ± 0,18%: sta 13,21 ± 6,21% (kuvio 4B). Kun taas GC-solulinjoissa, IL-23A-positiivisia SGC-7901-solujen määrä nousi 2,64 ± 1,12%: sta 13,11 ± 3,12%, ja IL-23A positiivisia MKN45 soluja nousi 1,16 ± 0,46%: sta 17,55 ± 5,42% (kuvio 4C). Kaiken makrofagien ja GC-solut osoittivat helikobakteeri
lysaatin aiheuttama stimulaatio IL-23A erittymistä (kuvio 4D). Kuvio 4 IL-23A jota makrofagit ja GC-soluja. (EN) IL-23A ja solunpintamarkkeria CD3 havaittiin virtaussytometrialla T-solujen erilaisen kohtelun. (B) toinen IL-23A ja solupinnan CD14 havaittiin virtaussytometrialla makrofageihin eri hoitoa. (C): n ilmentyminen IL-23A havaittiin FCS SGC-7901 ja MKN45 soluja käsiteltiin helikobakteeri
lysaattia. (D) suhde IL-23A positiivisten solujen T-soluissa, makrofageissa ja GC solulinjoissa.
IL-23A edistää eloonjäämistä GC soluihin IL-17A /IL-17RA /ydin- tekijä (NF) -κB signalointi
tutkimiseksi IL-23A kasvaimen kasvua, co-dosviljelmämäärityksessä in vitro
käytettiin. Ensinnäkin, olemme huomanneet, että IL-23A ei ollut merkittävää vaikutusta soluproliferaatioon kun GC linjat SGC-7901 ja MKN45 käsiteltiin ihmisen rekombinantti IL-23A suoraan. Seuraavaksi me havainneet, että ei ollut merkittävää vaikutusta kasvainsolun SGC-7901 tai MKN45 kasvua viljeltiin yhdessä naiivi T-lymfosyyttien läsnäolo IL-23A. Kuitenkin merkittävää solujen kasvua edistävää vaikutus havaittiin, kun joko makrofageissa tai helikobakteeri
lysaattia lisättiin yhdessä viljelemisen järjestelmä. Kun sekä makrofagien ja H. pylori
lisättiin, vaikutus oli synergistinen (kuvio 5A ja B). Kuva 5 IL-23A edistää selviytymistä GC solulinjojen kautta IL-17A /IL-17RA /NF-KB signalointi. (A) Solujen elinkelpoisuus SGC-7901 kanssa hoidon tutkittiin. (B) Solujen elinkelpoisuus MKN45 kanssa hoitoon tutkittiin. (C) pitoisuus IL-17A soluviljelyväliaineen SGC-7901 ja MKN45 määritettiin ELISA: lla. ** P
< 0,01. (D) IL-17RA ja IL-23R sekä MKN45 ja SGC-7901. (E) Ilmaus p-IkBa, IkBa ja CyclinD1 sekä MKN45 ja SGC-7901.
Tutkimme mahdollinen mekanismi tukevat yhdistyksen välillä IL-17A ja IL-23A. Konsentraatio IL-17A elatusaineessa määritettiin, ja ei ollut merkittävää eroa, kun GC-soluja käsiteltiin IL-23A yksin tai IL-23A ja T-lymfosyyttejä. Kuitenkin eritystä IL-17A lisääntyi, kun joko helikobakteeri
lysaattia tai makrofageissa lisättiin (kuvio 5C). NF-KB: n signaloinnin tutkittiin myös, ja ekspressio sekä IL-17RA ja IL-23R havaittiin sekä SGC-7901 ja MKN45 soluja, suhteellisen vahva IL-17RA ja lähes IL-23R tunnistettiin (Kuva 5D). Fosforyloituu IκBα ja cyclinD1, tuotteet NF-KB: n signalointia, molemmat lisääntynyt SGC-7901 ja MKN45 solujen kasvun myötä IL-17A (kuvio 5E). IL-23A erittyi sekä makrofagien ja GC solujen ja edistää syövän leviämisen kautta IL-17A /IL-17RA /NF-KB: n signalointi.
Keskustelu
GC on neljänneksi yleisin syöpä ja toiseksi yleisin syy syövän -aiheiset kuoleman maailmanlaajuisesti. Joukossa useita histologisia tyyppejä, suoliston-tyyppinen GC liittyy yleisesti H.pylori
infektio, ja sen kurssi on ominaista akuutti gastriitti, krooninen gastriitti, mahalaukun surkastuminen, suoliston metaplasiaa, ja lopuksi muodostumista GC [10].
tarkat syyt GC ovat tuntemattomia, mutta useat tekijät voivat lisätä riskiä taudin, kuten sukupuoli, rotu, genetiikka, maantiede, veriryhmä, korkea ikä, suvussa, ja helikobakteeri
infektio vatsa. Helikobakteeri
infektoi limakalvon vatsaan ja aiheuttaa kroonisen tulehduksen ja haavaumia. Yksityiskohtaiset molekyylitason reitit vastuussa stimulaatio helikobakteeri
vielä ole täysin tiedossa [14] - [16].
Useat tutkimukset ovat osoittaneet immuuniefektorisolujen molekyylejä helikobakteeri
, kuten CagA . CagA edistää ilmentymistä proinflammatoristen kemokiinien IL-8, CXC-kemokiini-ligandi 2 (tunnetaan myös nimellä makrofagin tulehduksellinen proteiini) ja antimikrobinen peptidi ihmisen β-defensiini-2: sta NF-KB: n signaloinnin [17]. Muut tutkimukset ovat osoittaneet, että CagA siirtämisellä osaksi epiteelisoluihin indusoimalla korkeat IL-8-tartunnan tiettyjen H. pylori
kantoja, mukana induktio tulehdusvasteen [16], [18], [19]. Ras-riippuvaisten kinaasien, ekstrasellulaarisen signaalin säädelty kinaasi (ERK) 1 ja ERK2: n, ovat myös aktivoidaan CagA laukaisema tyrosiinifosforylaation, aktivoitumiseen johtavat transkriptiofaktoreiden NF-KB-aktivaattori-proteiini-1, ja lopulta, IL-8 tuotantoa isäntäsolujen [9].
mekanismi liittyy Hp infektio ja Th17 vastetta ei täysin paljastettu. Osa sytokiinien, kuten IL-1β: n ja IL-21 oli raportoitu liittyvän. Lee et ai. paljasti, että jatkuva Hp-infektio voi aiheuttaa Hp-spesifisten Th17 solut, sen sijaan, että muut immuunijärjestelmän solut, jotka on myös kuvattu erittämään IL-17A. Lisäksi, IL-1β myös jatkuvasti koholla, ja neutralointi IL-1β vähensi Hp-spesifinen IL-17A vaste, mikä viittaa toiminnallisen assosiaatio IL-1β ja jatkuvasti Th17 vaste [20]. Muut ryhmän paljasti myös, että IL-21 säätelee Th1 ja Th17 efektori vasteita pitkäaikaisessa helikobakteeri-infektion STAT1- ja STAT3 riippuvaisella tavalla, siis merkittävä rooli valvoa helikobakteeri-infektiota ja gastriitti [21].
Me raportoitu, että IL-23A erittyi GC solut ja makrofagit. Huomasimme, että seerumin IL-23A oli osoitus huonon ennusteen GC potilaille, ja sen ilmentyminen liittyvät kasvaimen tilavuus ja helikobakteeri
infektio. Tuloksemme osoittivat myös, että IL-23A ei ollut suoraa vaikutusta syöpäsolujen lisääntymistä. Se ei kuitenkaan vaikuta kasvaimen mikroympäris- lisäämällä eritystä IL-17A, joka on tunnusomaista sytokiini Th17 soluja. Lopuksi löysimme että IL-23A voi olla potentiaalinen indeksin ja tavoite diagnosointiin ja hoitoon GC.
Johtopäätökset
Johtopäätöksenä tämä tutkimus osoitti, että korkeat IL-23A liittyy GC. IL-23A voivat aiheuttaa eritystä IL-17A aktivoida IL-17A /IL-17RA /NF-KB signalointia kasvaimen mikroympäristössä. Seerumin IL-23A pitoisuus on merkki huonon ennusteen GC potilaiden ja IL-23A on potentiaalinen indeksin ja tavoite diagnosointiin ja hoitoon GC.
Materiaalit ja menetelmät
Potilaat
Tässä tutkimuksessa mukana 141 potilaalla on GC, joille tehtiin leikkaus 2008-2013 Kunshanin kansan sairaalassa, Kunshan, Jiangsu ja Kunshan Hospital Affiliated Nanjing University of Chinese Medicine. Dokumentoitu tietoinen suostumus geenin ilmentymisen analyysit kaikissa kudoksissa saatiin kaikille potilaille ennen leikkausta. Tutkimus hyväksyi paikallinen eettinen komitea Kunshan Kansan sairaalassa. Histologinen alatyypin mukaan Lauren luokittelun [22] määritettiin jälkeen tarkistaa tuumorisektioiden kahdella patologia. Seuranta tietoja oli saatavissa kaikki GC potilaat, jotka arvioitiin 3, 6,12 kk ja sitten 6 kuukauden välein 5 vuoden ajan tai kunnes kuolema.
Immunohistokemia
Kaikki kudokset poistettiin ja kiinnitettiin 4% paraformaldehydi yön yli 4 ° C: ssa, sitten käsitellään ja leikattiin 5 pm: n paksuudelta. Leikattiin levyt värjättiin immunohistokemiallisesti IL-23A, IL-23R: n ja IL-17A (Santa Cruz Biotechnology), jota seurasi inkubaatio sekundaarisen vasta-aineen 37 ° C: ssa 30 minuuttia ja reaktio DAB-reagenssia 5-10 min. Objektilasit asennettu neutraali purukumi mikroskooppista tutkimusta. Solut ruskealla solunsisäisten rakeita (solulimassa tai tumassa) katsottiin positiivisesti värjättyä.
ELISA
Pitoisuus IL-23A ja IL-17A seerumissa GC potilailla ja terveillä ehdokkaiden mitattiin käyttämällä kaupallisesti saatavilla sandwich ELISA ( eBioscience).
stimulaatio IL-23A in vitro
T-solujen ja makrofagien eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisissa soluissa käyttämällä eristyspakkausta T-soluihin ja monosyyttien vastaavasti (Miltenyi Biotec). T-solujen ja makrofagien sekä GC-solulinjoja (MKN45 ja SGC-7901 ostettiin ATCC) pidettiin in vitro
ja stimuloi Helicobacter pylori
lysaattia (NCTC 11637, CagA + ja VacA +) ja analysoitiin solunsisäisen sytokiinin värjäystä . Solunsisäisen sytokiinin värjäystä, T-soluja stimuloitiin 37 ° C: ssa 5 tunnin ajan Leukosyyttien aktivointi Cocktail (BD Pharmingen). Lisäksi T-solujen, makrofagien ja GC-solulinjat värjättiin pinnan markkereita, kiinnitettiin ja tehtiin läpäiseviksi IntraPre Reagent (Beckman Coulter), ja lopuksi värjätään solunsisäisen markkereita. Tiedot hankittiin FACSVantage SE ja analysoitiin CellQuest ohjelmisto. Fluorikromi-konjugoidulla mAb: t IL-23A hankittiin BD Pharmingen (Cat. 562468).
Virtaussytometrialla
solunsisäistä sytokiinin värjäystä, soluja stimuloitiin 37 ° C: ssa 5 tunnin ajan Leukosyyttien aktivointi Cocktail (BD Pharmingen) . Sitten solut värjättiin pinnan markkereita, kiinnitettiin ja tehtiin läpäiseviksi IntraPre Reagent (Beckman Coulter), ja lopuksi värjätään solunsisäisen markkereita. Tiedot hankittiin FACSVantage SE ja analysoitiin CellQuest ohjelmisto. Fluorokromiin konjugoituja monoklonaalisia vasta-aineita (mAb: t) vastaan ​​IL-23A, CD3 toimi markkerina T-solujen ja CD14 toimivat markkereina monosyyttien ja makrofagien hankittiin BD Pharmingen.
MTS-määritys
Viljellyt solut maljattiin tiheydellä 6 x 10 3 solua /kuoppa 96-kuoppalevylle ja ylläpidetään DMEM plus 10% vasikan sikiön seerumia (Invitrogen). Solujen elinkelpoisuus arvioitiin MTS-määrityksellä. CellTiter 96Aqueous Yksi ratkaisu reagenssia (Promega) lisättiin kuhunkin kuoppaan mukaisesti valmistajan ohjeiden ja levyt palautettiin inkubaattoriin. 4 tunnin jälkeen solujen elinkykyisyys määritettiin mittaamalla absorbanssi 490 nm: ssä käyttäen tietokoneohjattua levyn lukijaa.
Western blot
Proteiinit uutettiin soluista ja kvantitoitiin käyttäen proteiinia määritystä (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Proteiininäytteet (30 ug) fraktioitiin SDS-PAGE: lla ja siirrettiin nitroselluloosakalvolle. Immunoblottaus suoritettiin käyttäen vasta-aineita p-IκBα, IκBα, CyclinD1 ja IL-17RA (Santa Cruz Biotechnology). Tulokset visualisoitiin käyttäen kemiluminesenssi tunnistusjärjestelmä (Pierce ECL substraatti western blot havaitsemisjärjestelmä, Thermo Scientific) ja valotettiin autoradiografialla kalvon (Kodak XAR-kalvo).
Tilastollinen analyysi
tulokset ilmaistaan ​​keskiarvona ± SD, joka on vähintään kolmena kappaleena kokeiluja. Vertailut kahden ryhmän välillä suoritettiin käyttäen Mann-Whitneyn U-
testi. Vertailu IL-23A ilmentymisen eri kliinisiä piirteitä analysoitiin käyttämällä χ 2 testi. Korrelaatio analyysi välillä IL-23A ja IL-17A GC kudoksissa suoritettiin käyttäen Spearman epäparametrinen suhde analyysi. Survival käyrät arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier tuote-raja menetelmällä, ja merkittäviä eroja eloonjäämiskäyrien määritettiin käyttäen log-rank-testi. P
< 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Lyhenteet
IL-23:
Interleukiini-23
GC:
Mahasyöpää


IL-23R:
IL-23-reseptorin
IL-17RA:
IL-17-reseptorin alayksikköä

NF-KB:
Nuclear tekijä-KB
STAT4:
Signal anturin ja aktivaattori transkription 4
NK:
Natural killer
julistukset
Kiitokset
tutkimus tukee sosiaalisen kehityksen teknologiaprojektit Kunshan City, Kiina (KS1255).
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12935_2014_104_MOESM1_ESM.gif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12935_2014_104_MOESM2_ESM.gif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12935_2014_104_MOESM3_ESM.gif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 12935_2014_104_MOESM4_ESM.gif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 4 12935_2014_104_MOESM5_ESM.gif Kirjoittajien alkuperäisen tiedoston luku 5 kilpailevat edut
kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.
Tekijät osuudet
CL ja WZ suunniteltu ja kokeet. CL, YZ, JZ, YZ, QW ja Hp suoritti kokeita. CL ja WZ suoritettu tilastollinen analyysi kaikki tiedot. CL kirjoitti paperille. Kaikki kirjoittajat ovat yhtä mieltä sisällöstä käsikirjoituksen ja tämä väite. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Statiinit ja mahalaukun syövän riski diabetespotilaiden
• Osallistuminen tuumorinekroositekijä-α ylössäätelyyn CXCR4 ilmentymisen mahasyövän aiheuttama Helicobacter pylori