Aptikta kontrolinių ir ne kontrolinius limfmazgių mikrometastazių visiškas serijinių pjūvių ir imunohistocheminio analizės skrandžio vėžio

Aptikta kontrolinių ir ne kontrolinius limfmazgių mikrometastazių visiškas serijinių pjūvių ir imunohistocheminio analizės skrandžio vėžio pervežimas tezės
Background
Mes ištirti buvimą ir pasiskirstymą Sentinel ir ne kontrolines mazgas mikrometastazių naudojant pilną serijos ruožais ir imunohistocheminį dažymo (IHC), patikrinti, ar limfmazgiuose mikrometastazių išplito į Sentinel limfmazgiuose pirmas.
metodai
kaip 35 pacientų, kuriems buvo atlikta pašalintas skrandis su sarginių limfmazgių biopsija skrandžio vėžio viso buvo įtraukti šiame tyrime. buvo pasirinktas; viso 1028 limfmazgiai 35 pacientų, turinčių skrandžio vėžį be metastazės limfmazgiuose pagal nuolatinę skyriuje hematoksilinu ir eozino dažymo (E H &). Nebuvo 252 kontroliniai mazgai ir kita 776 buvo ne kontroliniai mazgai. Visi mazgai buvo suskirstyta serijiniu ir tamsintas pakaitomis su H & E ir IHC. Limfmazgių mikrometastazių buvo apibrėžtas kaip įrodė esąs teigiamas pirmasis Arba IHC arba visiškas serijinių pjūvių.
Rezultatai
mikrometastazių buvo aptikta 4 (11%) iš 35 pacientų, 6 (0.58%) Iš 1028 mazgų. Iš šių 4 pacientams, 3 turėjo mikrometastazių tik kontrolinių mazgų, o kitas turėjo micrometastasis abiejų kontrolinių ir ne kontrolinių mazgų. Nebuvo pacientas turėjo micrometasitases tik ne kontrolinių mazgų.
Išvada
Šie rezultatai patvirtina koncepciją, kad limfmazgis micrometastasis skrandžio vėžio plinta pirmasis sargybiniams mazgai.
Faktai
prognozavimo pacientai su skrandžio vėžio turi įtakos visų pirma metastazių limfmazgiuose buvimą. Limfmazgių metastazių skrandžio vėžiu sergantiems pacientams su gleivine invazijos atsirasti nuo 15 iki 20% pacientų; Todėl, limfmazgių skrodimo gali būti nereikalingas likusios 80 iki 85% pacientų [1]. Tikslus ir patikimas rodiklis, prognozuoti metastazių limfmazgiuose nebuvimas būtų pašalinti daug nereikalingų lymphadenectomies [1]. Todėl Ikioperacinė ir tiksli diagnozė limfinių metastazių limfmazgiuose išlieka svarbus [2-4]. Sargybinis mazgas biopsija skrandžio vėžiu yra intraoperacinis diagnostikos metodas aptikti limfmazgių metastazių [5-7]. 1992 m, Morton ir kt. [8] pristatė intraoperacinių dažų injekcijos techniką tuo melanomos identifikuoti "sarginio" mazgą, kuris yra pirmasis mazgas, kad įcentriniai limfagyslėms įvesti nuo auglio vietą svetainėje. Miwa ir kt. [7, 9] dirbo šį dažų kartografavimo technika tipą nustatyti sarginį mazgai skrandžio vėžio, ir apie aukštą teigiamą prognostinė vertė ir tikslumą Sentinel mazgo biopsiją pradžioje skrandžio vėžio. Kita vertus, atsižvelgiant į tai, į limfmazgius micrometastasis buvimas yra rimta problema klinikinės taikymo Sentinel mazgo biopsija ankstyvo skrandžio vėžio. Limfmazgiuose mikrometastazių buvo rasta pacientų nustatoma, kad mazgas-neigiamas, vykdant įprastinę histologinio tyrimo. Ankstesnės tyrėjai pranešė, kad limfmazgiuose mikrometastazių gali būti nustatyta naudojant žingsnis ruožais, imunohistocheminis dažymas ir atvirkštinės transkriptazės polimerazės grandininę reakciją [10-12]. Tačiau, ten buvo keletas pranešimų apie mikrometastazių pasiskirstymą tiek kontrolinių ir ne kontrolinių mazgų mazgas neigiamas skrandžio vėžiu sergantiems pacientams einamieji histologinis tyrimo [13-15].
Šiame tyrime mes retrospektyviai ištirtas buvimas ir pasiskirstymas kontrolinių ir ne kontrolinių mazgų mikrometastazių naudojant pilną serijinių pjūvių ir imunohistocheminis dažymas. buvo atliktas Tai metodas yra pats tiksliausias metodai aptikti mikrometastazių mazguose, kad galėtume nustatyti, ar limfmazgiuose mikrometastazių išplito į kontrolinius limfmazgių pirmųjų.
metodai
kontrolinio limfmazgių (SLNs) biopsija skrandžio vėžio 243 pacientų tuo departamento Gastroenterologic chirurgijos Kanazawa universitetinės ligoninės nuo 1993 iki 2002 Prieš Sentinel mazgo biopsija, parašyta informuotas sutikimas buvo gautas, laikantis etikos komiteto standartus dėl žmogaus išbandymas Kanazawa universitetinė ligoninė. Iš šių pacientų mes mokosi 35, kuris turėjo vėžys, įsiveržė į submucosa arba muscularis Propria ir neturėjo limfmazgių metastazių, vykdant įprastinę histologinis egzamino šiame tyrime. Nė vienas iš pacientų gavo priešoperacinė chemoterapija arba radioterapija. Remiantis Japonijos klasifikatoriaus Skrandžio karcinoma, visi 35 pacientai patyrė Sentinel mazgas biopsiją po įprastinių limfadenektomija atsargines skrodimo [16]. Iš 1028 limfmazgių viso buvo pašalintas iš 35 pacientų. Iš jų, 252 limfiniai mazgai buvo SLNs, o kitas 776 buvo ne SLNs. Visi 252 SLNs buvo neigiami metastazių tiek operacijos metu sušaldyti pjūvis tyrimo ir nuolatinio skyriuje hematoksilinu ir eozino dažymo (H & E). Kiti 776 mazgai buvo neigiami metastazių apie histologinio tyrimo pagal H & E kelių žingsnio ruožais 0,2 cm intervalais. Į clinicopathologic duomenys buvo vertinami pagal Japonijos klasifikatoriaus skrandžio vėžio [16]. Pacientų charakteristikos yra išvardytos 1 lentelėje aptikti SLNs, mes panaudojome intraoperacinį endoskopinės limfos žemėlapių (IELM), kurį sudarė kaip operacijos metu injekcijos 0,2 ml 2% patent mėlynasis į pogleivio sluoksnio keturiose vietose aplink skrandžio karcinoma per gastroscope [9]. Dažų karto pasirodė serosal paviršiaus ir tamsintas limfagyslių ir mazgų [5, 9]. Šiuo tyrime SLN buvo apibrėžta kaip limfmazgiuose, kad tamsintas mėlynus 20 minučių po injekcijos. Limfinės baseinai buvo apibrėžiama kaip zona, kurioje tamsintas limfagyslių ir kuris galėjo būti suskirstyti į penkias kategorijas pagal arterijų puses apsuptas skrandį, taip: kairįjį skrandžio arterijos srityje, teisė skrandžio arterijos sritis, teisė gastroepiploic arterijos sritis, teisė gastroepiploic arterijų plotas ir užpakalinės skrandžio arterijos srityje. Į akcizais apmokestinamos SLNs buvo išsiųsti nagrinėti sušaldyti pjūvis. Limfmazgiai tamsintas su H & E reprezentatyvių skyriuose buvo supjaustyti išilgai plokštumos su didžiausio diametro, kad įtraukti mazgas Hilus, ir išnagrinėjo intraoperatively už metastases.Table 1 pacientų charakteristikas
amžiaus mediana (ribos)
62 (37-85)
seksas
Vyras
23
Moteris
12
Gylis invazijos
S.
24
MP
11
histologinis tipas
Diferencijuota *
18
Nediferencijuota *
17
limfagyslėms invazija
Neigiama
16
teigiamas
19
Kraujagyslių invazija
Neigiama
30
teigiamas
5
SM submucosa; MP, muscularis propuria
* diferencijuota tipas; spenelių, gerai ir vidutiniškai diferencijuoti vamzdiniai adenokarcinomos
** Nediferencijuotas tipas;. Prastai diferencijuota adenokarcinoma, mucinous adenokarcinoma ir antspaudo žiedas ląstelių karcinoma Viesbutis The likusius užšaldytus audinius buvo atšildyti, o audiniai ir ne SLNs buvo reguliariai pjauti 0,2 cm intervalais. Vėliau, kelis suskirstyta limfmazgiai ir rezekcijos egzemplioriai buvo nustatytas 10% formalino, tvarkomi per rūšiavo etanolio ir įdėta į parafino už nuolatinių skyriuose. Limfmazgiai buvo tamsintas su H &. E ir buvo nagrinėjami du patologai
Šiame tyrime, visi rezekcijos limfmazgiai buvo suskirstyta serijiniu ne 25-mikrometrai kas 4-mikronų storio to ir arba pakaitomis tamsintas su H & E ir imunohistocheminį dažymo (IHC), naudojant anti-citokeratino antikūnų. ENVISION technika buvo naudojama (DaKo, Carpinteria, ca) IHC ir mes panaudojome monokloninis anti-human citokeratino 8/18 antikūnas (Santa Krusas Biotechonology, Kalifornija, JAV) [17-19]. Visi pagrindiniai naviko jų pavyzdžiai 35 pacientų, buvo atliktas citokeratino dažymo ir buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė. Limfmazgis micrometastasis buvo apibrėžta kaip mazgas, neigiamo metastazių mūsų kasdieninį histologinis egzaminą, tačiau teigiami nei IHC arba visiškai serijinių pjūvių metodus.
Rezultatai
išnagrinėjo Bendras sekcijų skaičius buvo 24.094. Iš jų 5986 buvo SLNs ir 18.108 buvo ne SLNs. Iš 35 pacientų, 4 (11%) turėjo mikrometastazių. Micrometastasis buvo rasta 6 iš 1028 mazgų (0,6%) ir 60 skyriuose (0,3%), iš 24.094 (pav. 1, 2). Iš šių 6 mazgų dalyvavo micrometastasis, 4 buvo SLNs, o kitas 2 buvo ne SLNs limfinėje baseino. Nėra mikrometastazių buvo aptikta ne baseine (2 lentelė). Skirstymo modelį, vietą ir dydį, mikrometastazių detalės parodyta 3, 4 ir 5. 4 pacientams, kurie turėjo limfmazgių micrometastasis lentelėse, 3 pacientai turėjo mikrometastazių išskirtinai SLNs. Kitas pacientas turėjo micrometastasis į tiek SLN ir ne SLNs į limfinę baseine. Nėra pacientas turėjo micrometastasis tik ne SLNs. Nėra pacientas dar patyrė pasikartojimo arba mirė nuo gruodžio 2007.Table 2 skaičius ir vieta limfmazgių su micrometastasis
Vieta mazgų
skaičius mazgų

su micrometastasis

be micrometastasis
SLNs
4
248
ne SLNs į limfinę baseino pervežimas 2
653
ne SLNs iš baseino
0 pervežimas 121 pervežimas visų mazgų
6
1022
SLNs, Sentinel limfmazgiai
3 lentelė paskirstymo modelis limfmazgis micrometastasis

atvejų
platinimo modelio micrometastasis
Planinė histologiniai egzaminą
visą serijinių pjūvių ir IHC

SLNs (-), ne SLNs (-)
35
31
SLNs (+), ne SLNs (-)
0
3
SLNs (+), ne SLNs (+)
0
1
SLNs (-), ne SLNs (+)
0
0
SLNs, Sentinel limfmazgiai; IHC, immunohistochemic dažymo
4 lentelė Vieta limfmazgių micrometastasis
Case
Miestas naviko

vitražas limfinės baseinai
skaičius SLNs
skaičius micrometastsis pervežimas pervežimas stoties micrometastasis iš SLNs

stotis micrometastasis nebuvimo SLNs

1
M Mažiau
Kairysis GA
8 1
Nr.3 LN -
2
M, pašto
. Kairysis GA Teisė GEA
5
1
Nr.3 LN UAB -.
3
, M, skruzdė
Kairysis GA
2
1
Nr.3 LN -
4
M Mažiau
Kairysis GA Teisė GEA
10
Nr.3 LN
Nr.3 LN
3 SLNs Sentinel limfmazgiai; M, viduriniame trečdalyje skrandžio; Mažiau, mažiau iškrypimas; Pranešimo .; užpakalinės sienos; Ant. priekinė siena; G., skrandžio arterija; GEA gastroepiploic arterija; Nr.3 LN, LN palei mažesniu kreivės
5 lentelė Svetainės ir dydžio limfmazgių micrometastasis
Case
limfmazgių
Svetainės ir limfmazgiuose
iš micrometastasis (mm)
1
SLN
periferinė sinusinis dydis
1.2 pervežimas 2 pervežimas SLN
periferinė sinusų
0,3
3
SLN
periferinė sinusų
0.2
4
SLN
periferinė sinusų
0,6
ne SLN
periferinė sinusų
1,0
ne-SLN
periferinių sinuso pervežimas 1,0
SLN, kontrolinius limfmazgiuose
1 pav limfmazgių mircrometastasis kaip aptiktą imunohistocheminį dažymo su citokeratino antikūnų. (× 400).
2 pav nėra vėžinės ląstelės buvo nustatyta šiame skyriuje, atliekant įprastinį histologinis tyrimas. (Hematoksilinu & eozinas dažymo, × 40). (B) Limfmazgių micrometastasis atitinkamu sekcijoje visą serijinių pjūvių metodą. (Imunohistocheminį dažymo, × 40). (C) Micrometastasis limfmazgis atitinkamu sekcijoje visą serijinių pjūvių metodą. (Imunohistocheminį dažymo, × 400)
Diskusijos
Miwa et al., pristatė Sentinel mazgo biopsija koncepciją skrandžio vėžio [7]. Klinikinis panaudojimas Sentinel mazgo biopsija nustatyti chirurginio požiūrį skrandžio vėžio reikalauja šios sąvokos patikrinimo metu limfmazgių mikrometastazių lygiu. Šiame tyrime mes ištirti buvimą ir pasiskirstymą limfmazgių mikrometastazių pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, kuris turėjo Sentinel mazgas biopsiją. Pastaruoju metu limfmazgių mikrometastazių neaptinkamas įprastas histologinio tyrimo buvimas buvo pranešta krūties, plaučių, stemplės, skrandžio, storosios žarnos ir tulžies pūslės vėžiu. Buvo pranešta, kad limfmazgis micrometastasis buvo prastas prognostinė rodiklis krūties, plaučių, storosios žarnos vėžio ir [20-22]. Keli autoriai pranešė, kad limfmazgis micrometastasis buvo prastas prognostinis faktorius skrandžio vėžiu sergančių pacientų [23, 24]. Taigi, iš aptikti limfmazgių micrometastasis svarba buvo pabrėžta įvairių navikinių ligų.
Įvairius metodus aptikti limfmazgiuose mikrometastazių egzistuoja, įskaitant IHC ir polimerazės grandininės reakcijos tyrimai. Matsumoto ir kt. parodė, kad atvirkštinės transkriptazės-polimerazės grandininė reakcija (AT-PGR) yra jautresnis nei IHC už mikrometastazių [2] aptikti. Tačiau, Yamamoto et al. [25] pasiūlė, kad teigiamus rezultatus, kurių molekulinė tyrimo pavyzdžiui, RT-PCR gali neparodyti gyvybingų naviko ląstelių buvimą, o navikų DNR ir buvimas tokiu būdu, gali būti susijęs su žymiai padidintas klaidingai teigiami norma Nepaisant to, didesnis jautrumas molekulinio tyrimo. Kita vertus, ji buvo pastebėta, kad serijiniu pjūvių padidėjo auglio ląstelių identifikavimo periferiniuose ančių limfmazgių [26]. Manoma, kad serijinių pjūvių su IHC yra tiksliausias metodas limfmazgių mikrometastazių aptikti. Todėl mes patiria visą mėginį serijinių pjūvių ir IHC. Naudojamas IHC antikūnų buvo monokloninis anti-žmogaus citokeratino 8/18 antikūnas, kuris yra jautresnis, konkreti, paprasta, tiksli, ir ekonominis, nei kitų antikūnų IHC.
Naviko indėliai pagal limfmazgių buvo klasifikuojamas ir pakopinės pagal peržiūrėtas gaires Tarptautinės Sąjungos kovos su vėžiu (UICC) 6 -asis leidimas rinkinys. Pagal šią klasifikavimo sistemą, metastazės mažiau nei 0,2 cm, buvo laikomi mikrometastazių (MMS) ir izoliuotos naviko ląstelės (ITCS) buvo vienišos naviko ląstelės arba mažų grupių ląstelių, kad išmatuotas ne didesniu nei 0,2 mm ir paprastai buvo aptiktos IHC ar molekulinių metodų , bet galima patikrinti su H & E. ITCS paprastai nėra įrodymų išplitusiam veiklos platinimu, indukciją stromos reakcija arba skverbtis kraujagyslių arba limfinės sinusų sienos invazijos [27, 28]. Nakajo ir kt. [23] ir Siewert ir kt. [29] pranešė, kad limfmazgis dalyvavimas yra skirstomi į klasterio formavimosi ar pavienių ląstelių formų, pagal IHC rezultatus citokeratino. Jų rezultatai parodė, kad vieniši ląstelės negali daugintis limfmazgius, nes jie jau buvo nužudytas vietos ir bendrųjų imunocituose. Iš ląstelių grupė su stromos reakcija gali lengvai daugintis, todėl sergate metastazavusiu potencialą. Mūsų departamentas, rezekcijos limfmazgiai yra reguliariai pjauti 0,2 cm intervalais ir limfmazgiai yra tiriama metastazių. Taigi, šiame tyrime limfmazgių micrometastasis apibrėžimas skiriasi nuo UICC klasifikacija. Dėl šio tyrimo buvo apibrėžiamas kaip mazgas, neigiamas metastazių mūsų kasdieninį histologinio tyrimo supjaustyti 0,2 cm intervalais skyriuose, tačiau teigiamas visiškas serijinių pjūvių H & E ir IHC. Be to, visi vieniši tipų ląstelių ir mažų klasterių tipai be stromos reakcijos citokeratino teigiamą dažymo nebuvo pripažinta kaip vėžinių ląstelių kitame H & E tamsintas skaidrę. Taigi, mes be Visi pavieniai ląsteles ir mažas grupes be stromos reakcijos, kurios klasifikuojamos kaip TPB į UICC klasifikavimo sistemą, iš teigiamos limfmazgių micrometastasis grupės [27, 28].
Mes atmesti skrandžio vėžiu pacientams, kurių navikai įsiveržė į gleivinę šiame tyrime, nes daro pilną serijinių pjūvių ir imunohistocheminį dažymo buvo daug darbo; Be to, iš limfmazgių micrometastasis lygis buvo žemas. Todėl mes mokosi 35, kuris turėjo skrandžio vėžys, įsiveržė į submucosa arba muscularis Propria ir neturėjo tam limfmazgių metastazių pagal histologinis egzamino Šio tyrimo įrodymus.
Šiame tyrime mes nustatėme limfmazgių micrometastasis 4 pacientams (11%) su skrandžio vėžiu, kuris įsiveržė į submucosa arba muscularis Propria. Skrandžio vėžio, Isozaki ir kt. [30] ir Natsugoe ir kt. [31] pranešė, kad limfmazgiuose mikrometastazių buvo nustatyta nuo 10 iki 30% egzempliorių po žingsnio-pjūviu ar IHC. Mūsų rezultatai buvo tiksliausias iš visų per pastaruosius tyrimus ir įrodė faktines aplinkybes limfmazgių micrometastasis skrandžio vėžio, kad įsiveržė į submucosa arba muscularis Propria.
Šiame tyrime mes išnagrinėjo limfmazgių mikrometastazių iš SLNs ir ne -SLNs. Mes nustatėme, limfmazgių mikrometastazių į 4 pacientams SLNs. Vienas pacientas, taip pat turėjo micrometastasis nediskriminuojant SLN limfinės baseine, nors buvo nustatyta ne baseine jokių ne SLNs mikrometastazių. Be to, nė vienas pacientas turėjo limfmazgių micrometastasis tik ne-SLN. Mūsų rezultatai parodė, kad pacientai, kurie neturėjo su limfmazgių micrometastasis į SLNs taip pat neturėjo micrometastasis negyvenamųjų SLNs. Šie rezultatai gali remti koncepciją, limfmazgių mikrometastazių pirmasis išplito į SLNs, tada į ne SLNs į limfinę baseino ir pagaliau ne SLNs ne baseine. Todėl, remiantis šia koncepcija, pakanka nagrinėti tik SLNs nustatyti, ar nėra ten yra limfmazgių mikrometastazių pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu.
Vis dar neaišku, ar limfmazgis micrometastasis yra prognozinis veiksnys skrandžio vėžiui , Tačiau limfmazgis micrometastasis buvo nustatyta skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie buvo ne apie limfmazgių metastazių, atliekant įprastinį dažymo įrodymus. Šis rezultatas rodo, kad turėtume atsargiai sumažinti limfmazgių dissections mastą. Intraoperacinis nebuvimas SLN micrometastasis rodo, kad limfmazgių skrodimo mastas gali būti saugiai sumažinta, nes ji yra mažai tikėtina, skirta ne SLNs turėti mikrometastazių be SLN micrometastasis. Krūties vėžio atveju, už operacijos metu diagnozuoti limfmazgių mikrometastazių poreikis nėra būtina, nes papildomas išpjausčius pažasties limfinių mazgų gali būti atliekamas lengvai. Tačiau vėlesnis skrodimo limfmazgių sunku skrandžio vėžio; todėl intraoperacinis diagnozė limfmazgių mikrometastazių yra labai svarbus. Mes tikėjo, kad kai limfmazgis micrometastasis dalyvavo, turėtume atlikti limfmazgių skrodimo metu dabartimi. Mūsų tyrimas naudojamas kuo tikslesnius metodus, bet mes negalėjome gauti rezultatai pakankamai greitai už itraoperative diagnozę. Taigi, mes turime sukurti tikslią metodas sparčiai operacijos metu identifikuoti. Matsumoto ir kt. teigė, kad intraoperacinis greitas imunodažymu buvo paprastas ir naudingas būdas aptikti limfmazgių mikrometastazių [32]. Ultra-greitas RT-PGR sistema, kuri gali baigti vėžinių ląstelių aptikimą per maždaug 70 minučių, buvo sukurtas. Netolimoje ateityje, bus taikomi šie metodai aptikti limfmazgių mikrometastazių į SLNs operacijos [33] metu.
Išvada
mes parodėme gebėjimą aptikti limfmazgių mikrometastazių pajungiant visą mėginį atlikti serijinių pjūvių ir IHC už limfmazgius neigiamas skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie turėjo Sentinel mazgas biopsiją. Šie rezultatai patvirtina koncepcija, kad limfmazgis mikrometastazių pirmasis plinta į SLNs. Be to, intraoperacinis ir greitas diagnozė limfmazgių mikrometastazių į SLNs gali padėti nukreipti atitinkamą limfmazgių skrodimo skrandžio vėžiu sergantiems pacientams. Todėl greitai ir tiksliai intraoperacinis diagnozė limfmazgių mikrometastazių į SLNs bus būtinas ir turėtų būti būsimų tyrimų centre.
Deklaracijos
Padėka
Autoriai dėkingi profesoriui tetsuo Ohta į Kanazawa universiteto už tai tyrimas. Ir mes taip pat dėka anksto profesorius Koichi Miwa.
Autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 13046_2008_7_MOESM1_ESM.tiff Autorių originalus failas 1 pav 13046_2008_7_MOESM2_ESM.tiff Autorių originalaus failo 2 paveiksle

• Vėžio susijęs fibroblastai yra teigiamai koreliuoja su metastazavusiu potencialo žmogaus skrandžio cancers
• Rimta ne kodavimo RNR išraiška aprašymą žmogaus skrandžio vėžio ir jos klinikinė significances