Effet vun electroacupuncture Stimulatioun um Zusanli acupoint (ST36) op gastric motility: méiglech duerch PKC an MAPK Signal transduction Weeër

Effet vun electroacupuncture Stimulatioun um Zusanli acupoint (ST36) op gastric motility: méiglech duerch PKC an MAPK Signal transduction Weeër VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Electroacupuncture (W) Stimulatioun gouf fir bestéet gastrointestinal engem super therapeutesch Potential ze hunn dës motility Onuerdnung. Allerdéngs huet keng Beweiser déi Mechanismen Contributioun fir d'Auswierkunge vun MOL Stimulatioun am Zusanli acupoint (ST.36) stoungen. Dës Etude gouf entworf regulative Effet vun MOL Stimulatioun am ST.36 op gastric motility ze ermëttelen an hir méiglech Mechanismen beschen VerfÜgung Method VerfÜgung Drëssegjärege Sprague-Dawley deër zoufälleg an dräi Gruppen agedeelt goufen:. De ST.36 Grupp, d'Net-acupoint Grupp, an der Kontroll Grupp. MOL Stimulatioun war um 2 Hz, bestänneg Modus, an 1 V fir 30 min setzen. D'Frequenz an der Moyenne Héichpunkt Amplituden vun gastric motility sech duerch electrogastrography gemooss. D'FAQ kinase C (PKC) an mitogen-ageschalt FAQ kinase (MAPK) sécher Weeër sech mat real-Zäit Reaktioune polymerase Kette évaluéieren. Caldesmon (CAD) an calponin (GAP) FAQ Ausdrock vun der gastric antrum sech op Western blots fonnt. A berechnen Video Processing System benotzt gouf morphological Ännerungen am Fonctionnéieren Muskel Zellen (SMCs) aus der gastric antrum ze diskutéieren. VerfÜgung Resultater VerfÜgung MOL Stimulatioun um ST.36 haten eng duebel Wierkung op d'Frequenz an der Moyenne Héichpunkt Amplituden. Ausserdeem, um ST.36 MOL Stimulatioun den Ausdrock vun e puer Genen vun der PKC an MAPK sécher Weeër reegelen, an et den Ausdrock vun der CAD a Kap Proteinen reegelen. MOL serum SMC contractility entschlof. Promotioun vun gastric motility kann vergläichen mat up-Regulatioun vun MAPK6 (ERK3), MAPK13, an Prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (PTGS2) Gentherapie Ausdrock, an d'verwandelt-Regulatioun vun der collagen, Typ ech, alpha 1 (COL1A1) Gentherapie an CAD a Kap FAQ Ausdrock. Inhibition vun gastric motility vläicht mat verwandelt-Regulatioun vun der Interleukin-1 receptor Typ 2 (IL1R2) an MATRIX metalloproteinase-9 (MMP9) Genen, an weider-Regulatioun vum CAD a Kap FAQ Ausdrock vergläichen. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung MOL Stimulatioun am ST.36 gastric motility reegelen, an d'Auswierkungen huet souwuel Promotioun an inhibiting an deër. Déi méiglech Mechanismen vläicht mat der PKC an MAPK Signal transduction Weeër vergläichen. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Electroacupuncture Zusanli Gastric motility PKC MAPK Background VerfÜgung Gastric motility ee vun de stäerkste kritescher gestallt Funktiounen vun der mënschlecher gutt ass. Ouni koordinéiert motility, der Verdauung an Tellur vun Nahrungszousaz nährstoffaarme huelen kann net Plaz. D'Regulatioun vun gastrointestinal motility ass komplizéiert an implizéiert de Kontraktioun vun glat Muskel Zellen (SMCs). Der Kontraktioun vun SMCs ass vun flüchteg Ännerungen am intracellular Ca allem reegelen 2+ Konzentratioun [1]. Et ginn zwou grouss Weeër an dësem Mechanismus Équipe, an zwar, d'RhoA-Rho kinase Passerelle an d'FAQ kinase C (PKC) Passerelle [2]. Calponin (GAP), e gutt etabléiert kënschtlech VerfÜgung Realitéiten fir Proteinen vun PKC sécher [3], openee direkt mat PKC [4]. Caldesmon (CAD) ass eng actin an myosin bindend FAQ datt an zwee isoforms existéiert, déi alternativ splicing generéiert ginn [5]. Et ass aktueller Beweiser fir e Lycée Passerelle an der Regulatioun vun glat Muskel Kontraktioun datt PKC ofhängeg ass, an dës Passerelle kann duerch Cap an CAD Aktivéierung [6-9] mediated ginn. Mitogen-ageschalt FAQ kinase (MAPK) sécher Weeër hunn och zu SMC Kontraktioun [10] agebonne ginn. Et ginn dräi grouss Kategorien vun gemaach reegelen MAPKs datt zu verännert Gentherapie Ausdrock bréngen. D'extracellular Signal Zesummenhang kinases 1 an 2 (ERK1 /2), d'C-jr Uschloss kinase (JNK), an der p38 MAPK si bekannt fir wichteg Roll an der intracellular sécher Äntwert op extracellular stimuli [11] spillen. Ausserdeem, kann Cap Erk-ofhängeg sécher erliichtert, also eng wichteg Roll an der Regulatioun vun SMC Kontraktioun gespillt [12]. VerfÜgung Akupunktur, wat fir Dausende vu Joer zu China benotzt gouf, ëmmer weltwäit fir d'Gestioun benotzt gëtt vun verschidde Krankheete [13]. Et gëtt ugeholl, datt Stimulatioun eng acupoint direkt relevant Uergel an erreechen den Effet vun Akupunktur Therapie Afloss kann. W ass eng kombinéiert Prozedur datt en acupoint mat elektresche Stimulatioun amplaz mat manuell manipulations vun Nolen koum. Villen Etuden hunn d'Effekter an Mechanisme vun MOL op gastric motility [14-20] bewäert. Baséierend op de Reproche vun dësen Studien, gouf MOL Stimulatioun engem super therapeutesch Potential fir bestéet gastrointestinal motility Onuerdnung ze hunn gewisen. D'Zusanli (ST.36) ass eent vun de meescht allgemeng benotzt acupoints fir gastrointestinal Krankheeten. Laut der Theorie vun der traditioneller chinesescher Medezin (TCM), et ass eng Relatioun tëscht ST.36 an d'Funktioun vun der gastrointestinal TRACT. Fir Datum vum Ee, huet keng Beweiser déi genee Mechanismen Contributioun zu de Folge vun MOL Stimulatioun Souzesoen. VerfÜgung Dofir, vun morphologic Ännerungen an myoelectrical Aktivitéit iweerpréifen, déi heiteg Etude fir d'regulative Effet vun MOL Stimulatioun am ST.36 diskutéieren acupoint op gastric motility an deër an hir méiglech Mechanismen ze entdecken. VerfÜgung Method VerfÜgung Déieren an reagents VerfÜgung Drëssegjärege volljäreg männlech Sprague-Dawley (Fils) deër Persoun 180-220 g op engem 12-h Liichtjoer haten sech donkel Zyklus um 25 ± 2 ° C an 60% Loftfiichtegkeet mat gratis Zougang zu Liewensmëttel a Waasser. Fils deër goufen aus der hun Déieren Center vun der véierter Military Medical University kaaft. All Déier Experiment am Aklang mat der institutioneller Richtlinnen vun der véierter Military Medical Universitéit fir d'Betreiung a Gebrauch vun Labo Déieren duerchgefouert. Akraafttriede vun der Etude Protokoll war vun der Ethik Komitee fir Déieren Fuerschung, soll Military Medical University, China kritt. Déieren sech zoufälleg an dräi Gruppen entgéintgeholl:. De ST.36 Grupp, d'Net-acupoint Grupp, an der Kontroll Grupp VerfÜgung Collagenase II, trypsin inhibitor, dithiothreitol Alkohol Zocker, Bovine serum albumin, Kalzium-gratis phosphate gefiermt Salins (PBS ), glutaraldehyde, an Trypan blo sech aus Fläch chemesche Co. Den Total RNS Extraktioun Kit, SuperScript III Réckproduktioun Transcriptase, an SuperArray Hinnen alleguer Master Mix sech aus Invitrogen Co. Anti-Geess, anti-Maus, an anti-Kanéngchen antibodies sech kaaft kaaft vu Shanghai Kangcheng Bio-Engineering Co. VerfÜgung MOL Stimulatioun Prozedur kaaft VerfÜgung d'ST.36 ongeféier 5 mm lateral zu der fibula vun der hënnescht fofzeng etabléiert war, iwwerdeems d'net-acupoint op den hënneschte Fouss nieft wellkomm war ST.36 oppen 5 mm [21]. D'Nolen huet 5 mm déif an d'Fleesch Layer vun der gewielter acupoint gesaat an goufen vun MOL op 2 Hz an 2 V mat elektresch stimulator stimuléiert (G6805-2A; Shanghai Huayi Medical Instrument Factory, Shanghai, China). All Stimulatioun suguer 20 min an kontinuéierlech Modus, an Stimulatioun war 5 Deeg fir 1 Zäit /Dag duerchgefouert. D'deër zu Kontroll Grupp sech eleng fir 30 min gläichzäiteg all Dag ouni Stimulatioun zu Seecherheetsvierkéierungen deposéiert. VerfÜgung Electrogastrography VerfÜgung Electrogastrography war d'Multichannel Physiologic Signal Acquisition an Processing System (Modus RM-6280) no der leschter applizéiert benotzt Stimulatioun op der fënnefter Dag. No enger 12-h séier (mat gratis Zougang zu Waasser) a 6 h ouni Gedrénks, goufen d'deër Nodeel intraperitoneally (i.p.) mat 10% urethane op enger Portioun 1 g /kg Kierper an dann Sommet. Déi éischt Elektroden war fir de Schwanz fest, a proposéiert gedränkt waren op der serosal Uewerfläch vun de Mo. 0.3 implanted - 0,5 cm iwwer dem pylorus. D'gedränkt sech mat 37 ° C normal Salins gauze, verbonne mat Drot iwwerzunn. D'Experimenter benotzt Parameteren sech wéi follegt zesummen:. Frequenz 400 Hz, filteren 10 Hz, Scannen Vitesse 2 s /Divisioun, Empfindlechkeet 25 mV, Zäit konstant direkt aktuell, an oscilloscope Opnahmen Zäit 1 h [18] zu Real-Zäit polymerase Kette Reaktioun (Hinnen alleguer) Analyse VerfÜgung No de leschte Stimulatioun mat MOL, goufen d'deër geaffert. Fir Kontroll Grupp an Net-acupoint Grupp, war ee Grenzwäerter bzw. ausgewielt. Fir MOL Grupp, mir ënnerdeelt et brutal MOL Grupp Promotioun an MOL Grupp inhibiting no de Resultater vun der electrogastrography. An dann, et deër sech zoufälleg aus zwou Gruppen erausgesicht. Gastric antrum Stoffer (aus der pyloric 0,8 - 1 cm) waren an Stécker geschnidde datt × 0,5 cm an eng Gréisst vu ronn 0.3 cm huet an direkt zu -70 ° C flëssegem Stéckstoff gesat. Total RNS Echantillon waren benotzt TRIZOL vu verschiddene Gruppen ofgebaut laut den Hiersteller d'Uweisungen. RNS Qualitéit war spectrophotometrically op der Basis vun der A260 /A280 Verhältnis ze évaluéieren. RNS Echantillon waren fir Integritéit vun der 18S an 28s RNS vun gelies electrophoresis iwwerpréift. Total RNS (1,5 μg) war benotzt éischte-staarkt cDNA mat SuperScript III Réckproduktioun Transcriptase (1 μl) aus der isoléiert RNS ze generéieren. D'real-Zäit Hinnen alleguer Reaktioune waren mat engem SuperArray Hinnen alleguer Master Mix virbereet (Cat. Nr PA-112) d'PKC an MAPK Signal Passerelle Genen mat. D'verdënntem cDNA (102 μl) war fir all Lach dobäi dem Hinnen alleguer Chip entspriechend. Dunn huet sech de Hinnen alleguer Fritten an der real-Zäit Hinnen alleguer Instrument fir d'Hinnen alleguer Reaktioun gesat. De Vëlo ware wéi follegt: 95 ° C fir 10 min, 60 ° C fir 15 ass, an 60 ° C fir 1 min (40) zouféieren. Differenzen an der Gentherapie Ausdrock, ausgedréckt, wéi fantastesch-Ännerungen, waren der 2 berechent benotzt -ΔΔCt Method. VerfÜgung Western blots vum CAD a Kap VerfÜgung D'CAD a Kap FAQ Niveau vun Western blotting fonnt goufen. No Behandlung mat MOL, goufen d'deër geaffert. D'deër goufen dann fest, gefollegt vun Trauer vun der postwendend misse Haut an peritoneum. D'viscera goufen ausgestallt, an der Mëtt 1/3 vun der gastric Kierper gouf an kleng Stécker geschnidde datt × 0,5 cm an eng Gréisst vu ronn 0.3 cm goufen. D'Stécker goufen direkt bei -70 ° C an flëssegem Stéckstoff gespäichert. Kuerz, Zell dovu (30 μg) aus der ieweschter 1/3 vun der Mëtt vun der gastric Kierper vun Natrium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) an dann transferéiert ze nitrocellulose Schläimhait getrennt goufen. (: 3000 dilution 1), GAP (1: 3000 dilution), an β-actin (1: 10000) de Filter sech mat Tris-gefiermt Salins (TBS) /5% Mëllech, gefollegt vun incubation mat polyclonal antibodies géint CAD gespaart. Nodeems d'Schläimhait gewäsch waren, waren se mat Première peroxidase-conjugated antibodies incubated verdënntem 1: 5000 an TBS mat 0,01% Tween 20. D'antibody erkennen System benotzt gouf, an de Schläimhait sech zu X-Ray Film ausgesat laut den Hiersteller d'Uweisungen. VerfÜgung Serum Virbereedung VerfÜgung Serum bereet war wéi virdrun mat Ännerunge beschriwwen [22]. No de leschte Stimulatioun mat MOL, waren all deër geaffert. Next, war 6 ml vu Blutt aus der Wat vun all Grenzwäerter geholl. D'Blutt war nach gehaalen fir 1 h, an da fir 15 min bei 3000 Ziichter centrifuged. D'serum war gesammelt, Filter Bakterien ze läschen, an 1.5 ml war an eng EP eraus vide, déi bei -70 ° C an flëssegem Stéckstoff gespäichert gouf. VerfÜgung Effects vun MOL serum op SMC contractility VerfÜgung Five normal Fils deër goufen Nodeel IP mat 10% urethane op enger Portioun 1 g /kg Kierpergewiicht. No Nodeel ass, waren d'postwendend misse Haut an peritoneum incised, a sech der viscera ausgesat. De ganze Mo huet probéiert eraus, an d'gastric antrum Stoffer goufen isoléiert an direkt an Sauerstoff Boverie PBS mat penicillin (100 U /ml) an streptomycin (100 μg /ml) bei 4 ° C gesat. No rinsed Wiesen, goufen Stoffer zu Sauerstoff Boverie HEPES transferéiert, mat enger Geldstrof-Effekt op engem Silikatsubstrat gelies zappen verbreet an fix. D'mucosal futti war Géigewier virsiichteg ugefaangen, Circulaire mucosa Kleeschen suz, wat an 9 ëmmerhi war - 10 Muskel Strips (1 mm × 4 mm), gesat an Tyrode d'Léisung, an huet fir ongeféier 15 min am Frigo bei 4 ° C. D'Fleesch Strips waren an 1% collagenase Typ II, verdaut 0,05% trypsin inhibitor, 0,05% dithiothreitol Alkohol Zocker, an 0,2% Bovine serum albumin Aktivitéit zu engem Waasser Bad fir 25 min bei 36 ° C. No unzereegen, war d'Mëschung mat Aktivitéit-gratis HEPES rinsed, fir 30 min incubated, an mat engem 200 Écran ech Filter fir de Fräistouss Single gastric SMCs sammelen. Zell Nuetsvolen war mat der Trypan blo Test gemooss. De liewege Zellen sech méi wéi 95% bei enger Dicht vun 10 6 Zellen /ml. VerfÜgung der isoléiert SMCs zoufälleg nees normal serum Grupp ënnerdeelt goufen, ST.36 serum Grupp, an Net-acupoint serum Grupp. SMCs suspensions (50 μl) op eng Dicht vun 1.0 × 10 6 Zellen /ml am 96-gutt Placke plazéiert goufen. All serum Prouf war no 30 min an engem 56 ° C Waasser Bad inactivated, an verdënntem dann 1: 2 mat HEPES. Serum (50 μl) aus de verschiddene Gruppe war dobäi ze SMCs, gemëscht mat enger Pipette fir 30 ass, an fix mat 30 μl 2,5% glutaraldehyde. Zell Längt war mat engem berechnen Video Processing System (DP2-BSW) évaluéieren, wat benotzt gouf de ageet Prozentsaz ze berechnen. D'Zell ageet Prozentsaz = (Zell Längt virun Behandlung - Zell Längt der Behandlung). /Zell Längt virun Behandlung × 100% VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung Data ausgedréckt huet als mengen ± S.D. One-Manéier Analyse vun Varianz vun Bonferroni d'Pluralitéit Verglach Test duerno war mat SPSS 10.0 Software applizéiert. D'ΔCt Wäerter vun der real-Zäit Hinnen alleguer kritt, déi gebraucht goufen d'Weeër-Ännerung Differenzen ze berechnen (hei als Prozent Kontroll ausgedréckt), sech och fir statistesch Analyse benotzt. A p VerfÜgung -value &Si besteet; 0,05 oder eng fantastesch-Ännerung > 2 als statistesch relevant fir all Analysë definéiert war. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Effects vun MOL op gastric motility VerfÜgung MOL op ST.36 produzéiert groussen Ännerungen an der absolute Wäert vun der Moyenne Héichpunkt Amplituden an Frequenz am Verglach mat der Kontroll oder Net-acupoint Gruppen (P VerfÜgung &Si besteet; 0.01). Am Géigesaz, um MOL d'Net-acupoint hutt induce net wichteg Ännerungen an gastric motility Verglach mat der Kontroll Grupp (Zousätzleche Fichier 1: Dorënner S1). Zwou Zorte vun gastric Motor Musteren sech fir d'ST.36 Grupp an der laut der Moyenne Héichpunkt getest 10 deër observéiert: deër mat positive Duerchschnëtt Héichpunkt huet scho Muster doran, iwwerdeems deër mat negativen Duerchschnëtt Héichpunkt ze förderen Muster scho waren. D'Resultater zougedréckt 5 (50.0%) deër der ST.36 zougedréckt Spur Muster an 5 (50.0%) deër zougedréckt a dem ST.36 inhibiting Muster. An deër mat der ST.36 Spur Muster, déi duerchschnëttlech Héichpunkt Amplituden an Frequenz Wäerter waren 47,13 ± 0,44 an 0.19 ± 0,06, respektiv. An deër mat der ST.36 inhibiting Muster, goufen d'Moyenne Héichpunkt Amplituden an Frequenz Wäerter -43,41 ± 0,62 an 0,17 ± 0,03, respektiv. (Zousätzleche Fichier 2: Table S1) VerfÜgung Effects vun MOL op der PKC an MAPK sécher Weeër VerfÜgung MOL op ST.36 bedeitend dem Wëllen vun e puer Genen vun der PKC an MAPK sécher Weeër reegelen. Table 1 Lëschte d'Resultater vun der microarray Analyse vun der ST.36 Spur Grupp (wéi fir d'Kontroll Grupp Verglach). Den Ausdrock vun villen Genen war no MOL Stimulatioun erhéicht, dorënner ERK3, MAPK13, IL1R1, PRKCA, an PTGS2. Aner Genen huet ofgeholl Ausdrock der MOL Stimulatioun, dorënner IL1R2. Table 2 Lëschte d'Resultater vun der microarray Analyse vun der ST.36 inhibiting Grupp (wéi fir d'Kontroll Grupp Verglach). Der Gentherapie Ausdrock vun IL1R2 an MMP9 sech no MOL stimulation.Table 1 Gene ofgeholl änneren MOL vergläichen mat Kontroll Grupp VerfÜgung Signal Passerelle Spur Grupp
Gene
z'erwaarde
MOL /Kontroll (falen änneren)
W /Kontroll (falen Bastelen oder erof-Regulatioun)
MAPK VerfÜgung MAPK6 (ERK3)
D02
2.39
2.39
MAPK
MAPK13
D10
2.86
2.86
PKC
IL1R1
F08
2.18
2.18
PKC
PRKCA
G01
2.40
2.40
PKC
PTGS2
G02
2.72
2.72
PKC
IL1R2
F09
0.26
-3.85
Fantastesch-änneren (2-ΔΔCt) ass den normalized Gentherapie Ausdrock (2-ΔCt) am Test Prouf vun der normalized Gentherapie Ausdrock ënnerdeelt (2-ΔCt) an d'Kontroll Prouf. Fantastesch-Regulatioun duerstellt der fantastesch-Ännerung Resultater an engem biologically sënnvoll Manéier. Fantastesch-Ännerung Wäerter méi wéi een eng positive- oder up-Regulatioun uginn, an d'Weeër-Regulatioun ass fir d'fantastesch-Ännerung gläich. Fantastesch-Ännerung Wäerter manner wéi een eng negativ oder erof-Regulatioun uginn, an d'Weeër-Reglement ass den negativen ëmgedréit, et gesäit vun der fantastesch-änneren. VerfÜgung Table 2 Gene änneren vergläichen MOL inhibitory Grupp mat Kontroll Grupp VerfÜgung Signal Passerelle
Gene
z'erwaarde
W /Kontroll (falen änneren)
W /Kontroll (falen Bastelen oder down-regulation)

PKC
IL1R2
F09
0.24
-4.26
PKC
MMP9
F11
0.21
-4.68
Fantastesch-änneren (2-ΔΔCt) ass den normalized Gentherapie Ausdrock (2-ΔCt) am Test Prouf vun der normalized Gentherapie Ausdrock ënnerdeelt (2-ΔCt) an d'Kontroll Prouf. Fantastesch-Regulatioun duerstellt der fantastesch-Ännerung Resultater an engem biologically sënnvoll Manéier. falen-Ännerung Wäerter méi wéi een eng positive- oder up-Regulatioun uginn, an d'Weeër-Regulatioun ass fir d'fantastesch-Ännerung gläich. falen-Ännerung Wäerter manner wéi een eng negativ oder erof-Regulatioun uginn, an d'Weeër -regulation ass den negativen ëmgedréit, et gesäit vun der fantastesch-änneren. VerfÜgung Table 3 Lëschten d'Resultater vun der microarray Analyse vun der ST.36 Spur Grupp (als Verglach zu den net-acupoint Grupp). den Ausdrock vun der COL1A1 Gentherapie fräi war no MOL Stimulatioun. den Ausdrock vun der IL1R2 an SERPINE1 Genen huet no MOL Stimulatioun. Table 4 Lëschten Resultater aus der microarray Analyse vun der ST.36 inhibiting Grupp ofgeholl (wéi fir d'net-acupoint Grupp Verglach). Vill vun de Genen ofgeholl huet Ausdrock der MOL Stimulatioun, dorënner de ERK3, JNK3, p38bMAPK, MAPK13, p38MAPK, ERK1, FGF2, IL1R1, IL1R2, MYC, PRKCA, an PTGS2 Genen. Den Ausdrock vun der COL1A1 Gentherapie war no MOL stimulation.Table 3 Gene änneren fräi vergläichen MOL Spur Grupp mat Net-acupoint Grupp VerfÜgung Signal Passerelle
Gene
z'erwaarde
W /non-acupoint (falen änneren)
W /non-acupoint (falen Bastelen oder down-regulation)

PKC
COL1A1
F05
3.60
3.60
PKC
IL1R2
F09
0.39
-2.54
PKC
SERPINE1
G04
0.48
-2.07
Fantastesch-änneren (2-ΔΔCt) ass den normalized Gentherapie Ausdrock (2-ΔCt) am Test Prouf vun der normalized Gentherapie Ausdrock ënnerdeelt (2-ΔCt) an d'Kontroll Prouf. Fantastesch-Regulatioun duerstellt der fantastesch-Ännerung Resultater an engem biologically sënnvoll Manéier. falen-Ännerung Wäerter méi wéi een eng positive- oder up-Regulatioun uginn, an d'Weeër-Regulatioun ass fir d'fantastesch-Ännerung gläich. falen-Ännerung Wäerter manner wéi een eng negativ oder erof-Regulatioun uginn, an d'Weeër -regulation ass den negativen ëmgedréit, et gesäit vun der fantastesch-änneren. VerfÜgung Table 4 Gene änneren vergläichen MOL inhibitory Grupp mat net-acupoint Grupp VerfÜgung Signal Passerelle
Gene
z'erwaarde VerfÜgung VerfÜgung W /non-acupoint (falen änneren)
W /non-acupoint (falen Bastelen oder erof-Regulatioun)
MAPK VerfÜgung MAPK6 (ERK3) VerfÜgung D02 VerfÜgung 0,18 VerfÜgung -5,67 VerfÜgung MAPK VerfÜgung MAPK10 (JNK3) VerfÜgung D07 VerfÜgung 0,42 VerfÜgung -2,40 VerfÜgung MAPK VerfÜgung MAPK11 (p38bMAPK) VerfÜgung D08
0,39 VerfÜgung -2,58 VerfÜgung MAPK VerfÜgung MAPK13 VerfÜgung D10 VerfÜgung 0,28 VerfÜgung -3,58 VerfÜgung MAPK VerfÜgung MAPK3 (ERK1) VerfÜgung G11 VerfÜgung 0,26 VerfÜgung -3,83 VerfÜgung MAPK VerfÜgung MAPK14 (p38MAPK)
D11
0.47
-2.13
PKC
FGF2
F07
0.37
-2.67
PKC
IL1R1
F08
0.30
-3.31
PKC
IL1R2
F09
0.36
-2.81
PKC
MMP9
F11
0.22
-4.48
PKC
MYC
F12
0.39
-2.59
PKC
PRKCA
G01
0.23
-4.27
PKC
PTGS2
G02
0.19
-5.36
PKC
COL1A1
F05
4.81
4.81
Fantastesch-änneren (2-ΔΔCt) ass den normalized Gentherapie Ausdrock (2-ΔCt) am Test Prouf vun der normalized Gentherapie Ausdrock ënnerdeelt (2-ΔCt) an d'Kontroll Prouf. Fantastesch-Regulatioun duerstellt der fantastesch-Ännerung Resultater an engem biologically sënnvoll Manéier. falen-Ännerung Wäerter méi wéi een eng positive- oder up-Regulatioun uginn, an d'Weeër-Regulatioun ass fir d'fantastesch-Ännerung gläich. falen-Ännerung Wäerter manner wéi een eng negativ oder erof-Regulatioun uginn, an d'Weeër -regulation ass den negativen ëmgedréit, et gesäit vun der fantastesch-änneren. VerfÜgung Effects vun MOL op CAD a Kap FAQ Ausdrock VerfÜgung Stimulatioun mat MOL vill fräi CAD a Kap FAQ Ausdrock vun der ST.36 inhibiting Grupp am Verglach mat den net-acupoint Grupp logéiert Stimulatioun mat MOL ofgeholl vill CAD a Kap FAQ Ausdrock vun ST.36 Grupp Spur am Verglach mat den Net-acupoint Grupp (Dorënner 1A, B, C, d). 1 Effects vun MOL Stimulatioun op Caldesmon Dorënner (CAD) an Calponin (GAP) FAQ Niveauen. A. Expression vun Caldesmon FAQ Niveau vun Western blotting. B. Densitometric Analyse Caldesmon FAQ Niveau vun β-actin normalized; C. Expression vun Calponin FAQ Niveau vun Western blotting; D Densitometric Analyse Calponin FAQ Niveau vun β-actin normalized. CAD: Caldesmon; Cap: calponin; 1: Net-acupoint Grupp; 2-4: MOL inhibiting Grupp; 5-7: MOL Grupp Spur. * P &Si besteet; 0,05 compard fir Net-acupoint Grupp VerfÜgung Effects vun MOL serum op VerfÜgung SMC contractility Als zu Weider Fichier dës 3:. Dorënner S2 an Weider Fichier 4: Table S2, Zell Wirklechkeet war mat verschiddene ënnert d'Liicht microscope der Behandlung observéiert Zorte vun serum. Do ware keng Ennerscheeder zu Zell Längt virun der Zousätzlech vun serum (p > 0,05). ST.36 serum fräi SMC contractility (60.22 ± 3,84 μm) am Verglach mat der Kontroll serum (96.02 ± 6,24 μm) oder d'Net-acupoint serum (97.33 ± 6,97 μm). D'Kontraktioun Prozentsaz war 41% an der Stimulatioun mat ST.36 serum hierkommen der Kontraktioun Prozentzuelen huet 7% an 10% an der Stimulatioun mat entweder d'Net-acupoint serum oder Kontroll serum, bzw.. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung de Moment Etude bewisen datt MOL Stimulatioun um ST.36 no engem regulative Effekt op gastric motility an deër datt entweder stimulatory oder inhibitory war. De Geroch Effet vun MOL kann de PKC an MAPK sécher Weeër Akt duerch. VerfÜgung d'Auswierkunge vun MOL op gastric motility hunn zu zwee Déieren a Mënschen wéinst der Disponibilitéit vun electrogastrography extensiv studéiert ginn. Et ass bekannt, datt gastric myoelectrical Aktivitéit besteet aus luesen Wellen an Spikes. Spikes sinn direkt mat den Optrëtt vun contractions assoziéiert. Luesen Wellen do kéinte bréngen net gastrointestinal contractility, mä si bestëmmt de Maximum Frequenz vun gastric contractions. VerfÜgung De stäerkste oft benotzt acupoint zu gastrointestinal Entwécklungsstéierungen bestéet d'ST.36 ass. Et ass allgemeng ugeholl, datt Akupunktur huele kann Promotioun an op der stimuléiert acupoint je Auswierkungen op gastrointestinal motility inhibiting. An Mënschen, gouf et dës datt bei ST.36 MOL Stimulatioun duebel Auswierkungen op gastric peristalsis datt entweder facilitative oder inhibitory si haten [15, 23]. Obwuel Patienten aus gastrointestinal Krankheete leiden hunn aus der Applikatioun vun Akupunktur um ST.36 profitéiert, mä genau molekulare Mechanismen sinn nach onkloer. An Muppen, fräi MOL op ST.36 der Regularitéit vun gastric luesen Wellen [24, 25]. An bewosst deër, um ST.36 MOL Stimulatioun duebel Effekter entschlof, déi entweder facilitative oder inhibitory waren, op gastric motility [26, 27]. Weider Etude bekannt, datt de stimulatory Effekt ass via cholinergic Weeër mediated, iwwerdeems de inhibitory Effekt onofhängeg vun de Nereïden Passerelle ass [28]. Déi allgemeng Theorie vun Akupunktur Medezin ass op dem Konzept vun Yin a Yang premised, an Akupunktur ass gegleeft den Desequiliber tëscht Yin a Yang ze beaarbechten. D'Auswierkunge vun Akupunktur op Equiliber Yin a Yang kënnt via d'Interaktioun tëscht der neurotransmission vun GABA an glutamate am Stammgehir mediated ginn. VerfÜgung Am aktuellen Pabeier, MOL Stimulatioun um ST.36 war effektiv an gastric motility Regulatioun, wéi hien vun de groussen Zouhuele Héichpunkt Amplituden an Frequenz. Ausserdeem, d'Feele vun esou enger Äntwert wann d'selwecht Stimulatioun am Net-acupoint Leeschtung war war vun der Spezifizitéit vun dësem Effet däitlech. Laut den Héichpunkt Amplituden an Frequenz, war d'ST.36 Grupp ënnerdeelt weider an der Promotioun an inhibitory zeréckzeféieren, well MOL eng duebel Wierkung gewisen. Fir weider d'Mechanismen Entdeckung vun deenen MOL gastric motility reguléieren, isoléiert mir SMCs vun de Mo a observéiert den Effet vun ST.36 serum op SMC contractility Methoden serologic pharmacological Testen benotzt. D'Resultater weisen, datt ST.36 serum SMC contractility vill fräi; . Hierkommen d'vun normal oder Net-acupoint serum produzéiert Effekter net kloer waren VerfÜgung rezenten Ënnersich ugeholl, datt d'Auswierkunge vun MOL Stimulatioun sinn duerch d'opioid System mediated [29] oder duerch seng Spannend Effekt op vagal Aktivitéit [30]; Ee, déi genee Mechanismen déi MOL gastric motility schellt waren net ganz verstan. Virdrun Conclusiounen annoncéiert och dass PKC Niveauen an der Stimulatioun mat MOL eropzesetzen [31]. Dofir, ausgewielt mir de PKC an MAPK Weeër als Ziler fir d'stimulatory Auswierkunge vun MOL op gastric Mobilitéit mediating. Desweideren, Cap an CAD vläicht eng Roll an der Regulatioun vun gastrointestinal motility während gestallt an agebousst Adaptatioun Leeschtung. Up-Regulatioun vun Kap an CAD Ausdrock inhibited gastrointestinal motility, a verwandelt-Regulatioun vun Kap an CAD Ausdrock gefördert gastrointestinal motility [32, 33]. ERK1 /2, e Member vun der MAPK Famill, gouf eng wichteg Roll an der Regulatioun vun glat Muskel Kontraktioun [34] zu Leeschtung gewisen. Laut eiser microarray Resultater, Promotioun vun gastric motility mat up-Regulatioun vun MAPK6 (ERK3) vergläichen kann, MAPK13, an PTGS2 Gentherapie Ausdrock, an Ugrëff-Regulatioun vun COL1A1 Gentherapie Ausdrock. Inhibition vun gastric motility vläicht mat verwandelt-Regulatioun vun IL1R2 an MMP9 Gentherapie Ausdrock vergläichen. Western blots opgedaucht-Regulatioun vum CAD a Kap FAQ Ausdrock gastric motility inhibited hierkommen verwandelt-Regulatioun vum CAD a Kap FAQ Ausdrock gastric motility gefördert. Dës Resultater weisen, datt CAD a Kap vläicht eng Roll an der Regulatioun vun gastrointestinal motility während gestallt an agebousst Adaptatioun Leeschtung. VerfÜgung Et waren e puer Aschränkungen an de Grëff ze studéieren, datt ernimmt ginn soll. Éischt, mir hunn dat net ob der inhibitors vun PKC an MAPK konnt de reglementaresche Effet vun MOL Stimulatioun um ST.36 op gastric Mobilitéit Afloss oder blockéieren. Weider Studien gëtt opgefuerdert d'Aflëss vun PKC an MAPK inhibitors ze ermëttelen. Zweet, gëtt Zukunft Ënnersich voll konzentréieren de Rollen vun all Ännerung vun der Gentherapie Ausdrock Versteesdemech op d'Regelung vun gastric Mobilitéit. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Am Resumé, eis Conclusiounen bewisen, datt MOL Stimulatioun um ST.36 gastric motility reegelen. MOL Stimulatioun um ST.36 Nofolleg duebel Auswierkungen op gastric motility datt entweder stimulatory oder inhibitory goufen. Zousätzlech, Regulatioun vun gastric motility vläicht mat der PKC an MAPK Signal transduction Weeër vergläichen. VerfÜgung Notes VerfÜgung Qi Yang, Yan-Dong Xie matgehollef gläich un dëser Aarbecht. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Dëst . Dorënner S1:: Effects vun MOL Stimulatioun op gastric motility Etude war vun Stipendien aus der National Natural Science Foundation of China (Nr 30801487) VerfÜgung Electronic zousätzlecht Material VerfÜgung 12906_2013_1722_MOESM1_ESM.doc Weider Fichier 1 ënnerstëtzt. Gastric motility war vun electrogastrography gemooss. A. Control, B. ST.36, C. Non-acupoint. Stimulatioun mat MOL op ST.36 fräi Duerchschnëtt Héichpunkt Amplituden an Frequenz. Gastric Wellen zougedréckt duebel Ännerungen am ST.36 Grupp am Verglach mat der Kontroll oder Net-acupoint Grupp. Wäerter sinn wéi déi heeschen ± S.D. ausgedréckt (N VerfÜgung = 10). * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs VerfÜgung. Kontroll Grupp. #p VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ## p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Net-acupoint Grupp. (Intrigue 1 MB) 12906_2013_1722_MOESM2_ESM.doc Weider Fichier 2: Table S1: Effects vun MOL op gastric myoelectrical Aktivitéit. D'ST.36 Grupp war weider ënnerdeelt MOL Promotioun an MOL Gruppen no der gastric Wellen inhibiting. Wäerter sinn ausdrécke well heeschen ± S.D (n VerfÜgung = 5). (Intrigue 26 KB) 12906_2013_1722_MOESM3_ESM.doc Weider Fichier 3: Dorënner S2: Effects vun MOL Stimulatioun op gastric SMC contractility. Zell Wirklechkeet huet mat enger liichter microscope (× 200 Vergréisserung) observéiert. D'Längt vun der Zell an der Kontraktioun Prozentsaz war mat engem Computer Image Analys System gemooss. O. SMCs; A. SMCs + Kontroll serum; B. SMCs + ST.36 serum; C. SMCs + Net-acupoint serum. (Intrigue 1 MB) 12906_2013_1722_MOESM4_ESM.doc Weider Fichier 4: Table S2: Effects vun serum op SMC contractility. Wéi déi vun de Video Processing System berechnen évaluéieren, schéinen Zusanli serum am wesentleche contractility zu SMCs. Resultater sinn wéi d'mengen ± S.D ausgedréckt (n VerfÜgung = 10). * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 ** p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Kontroll serum Grupp. #p VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ## p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Net-acupoint serum. (Intrigue 28 KB) Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller. 12906_2013_1722_MOESM5_ESM.tiff Auteuren 'original Datei fir Figur 1 Wettsträit Interessen VerfÜgung D'Auteuren erklären, datt se keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung Auteuren' Contributiounen VerfÜgung QY de molekulare genetesch Studien duerchgefouert deelgeholl, an der Haaptrei Formatioun an COSL der mëttelalterlech Handschrëft. YDX, MXZ, duerchgefouert BH der immunoassays eraus. CZ, HYLi, deelgeholl Décauville an der Haaptrei Formatioun. MQ, deelgeholl YXH an den Design vun der Etude an d'statistesch Analyse gesuergt. JJW vun der Etude komm, an un hiren Design an Koordinatioun an gehollef d'mëttelalterlech Handschrëft zu Projet. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Single-Etapp chirurgesch Reparatur airway gastric fistula der esophagectomy
• Eng Etude vun antimicrobial Aktivitéit, Fouss toxicity an cytoprotective Effet vun engem polyherbal Extrait vun engem Grenzwäerter Ethanol-HCl gastric oppent model