CHD5 Minus-reegelen duerch Promoteur hypermethylation zu gastric Kriibs

CHD5 Minus-reegelen duerch Promoteur hypermethylation zu gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Nonhistone chromosomal Proteinen am Concert mat histones wichteg Roll an der Gedächtnis a Reparatur vun DNA an zu der Regelung vun der Gentherapie Ausdrock Leeschtung. Der Dereguléierung vun dësen Proteinen kann un der Entwécklung vun enger Rei vu Krankheeten wéi Kriips bäidroen. Als nonhistone chromosomal FAQ, huet chromodomain helicase DNA bindend FAQ 5 (CHD5) wéi de Produit vun engem Roman entholl suppressor Gentherapie (wënnt), ënnerstëtzt vun der Reunioun vun p19 ink4a VerfÜgung an p16 kierzlech identifizéiert Arf VerfÜgung. D'inactivation vun CHD5 war deelweis duerch genetesch Läschen erreecht well et am 1p36 wellkomm ass, enger Regioun dacks zu Mënsch erhéijen geläscht. An dëser Etude, Zil mir d'Bedeelegung vun CHD5 zu gastric Kriibs ze studéieren, déi zweet Équipe gemeinsam Kriibs weltwäit. VerfÜgung Method VerfÜgung CHD5 Ausdrock vun engem Rot vu gastric Kriibs Zellen déi grouss RT-Hinnen alleguer alles goufen. D'methylation vun CHD5 war vun methylation spezifesch Hinnen alleguer an bisulfite Nepgen sequencing bewäert. Den Effet vun CHD5 op Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen vun Amphipolis Opstellung assay getest gouf. VerfÜgung Resultater VerfÜgung CHD5 Ausdrock war an all vun gastric Kriibs Zell Linnen benotzt-verwandelt reegelen (100%, 7/7) an däitlech restauréiert no pharmacological demethylation. Methylation vun CHD5 Promoteur war an all siwe gastric Kriibs Zell Linnen a vun der Majoritéit vun der Primärschoul gastric carcinoma Stoffer iwwerpréift (73%, 11/15) fonnt. Endlech, zu engem groussen Wuesstem inhibition gefouert ectopic Ausdrock vun CHD5 zu gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung CHD5 war eng wënnt epigenetically verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs. VerfÜgung Background VerfÜgung All eukaryotic Organismen hunn representativ Weeër entwéckelt DNA an chromatin duerch déi dynamesch Interaktioune vun verschiddenen DNA-verbonne Proteinen vun Verpakung. Esou Verpackungen ass an eng rigoréis Manéier net nëmme wichteg fir de Stockage vun genetesch Informatiounen mat héije Vertrauen an Integritéit, mä och den Transfert vun genetesch Informatiounen aus DNA zu RNS. Proteinen datt zu DNA kruet chromatin zu Form Traditionell an zwou allgemeng Klassen opgedeelt: histones an nonhistone chromosomal Proteinen. Histones sinn e Grupp vun héichgradeg conserved DNA bindend Proteinen an hire verschiddenen Post-respektiv Modifikatioune wor den "histone Code" datt d'Verpakung vun DNA oder chromatin Remodeling kenneléieren. D'histone Code ass ageleet, haten an interpretéiert haaptsächlech duerch nonhistone chromosomal Proteinen [1-4]. Zum Beispill, neutralizes der acetylation vun lysine Pestiziden op histone Schwänz vun histone acetyltransferases (trendy) hir Vitesse a Verloschter d'Affinitéit vun histones mat DNA, DNA zougänglech fir transcriptional Faktoren nees Gentherapie Transkriptiouns ze lancéieren. Ëmgedréit, dat Affinitéit Restauratioun der deacetylation vun deene Reschter vun histone deacetylases (HDACs) an DNA aus transcriptional Mechanisme vum Parquet kann [5]. Nieft acetylation, phosphorylation an methylation vun histone Schwänz sinn wichteg fir d'dynamesch Associatioun vun DNA mat transcriptional Maschinnen an aner chromosomal Proteinen [6-8]. Nonhistone chromosomal Proteinen Leeschtung wichteg Roll an der Interpretatioun vun histone Code vun chromatin Remodeling investéiert grënnen. Béid histones an nonhistone chromosomal Proteinen sinn wichteg fir d'Regelung vun der Gentherapie Ausdrock, DNA Gedächtnis a DNA gefléckt. D'deregulations am Ausdrock an Aktivitéit vun dësen Proteinen an der Entwécklung vun enger Rei vu Krankheeten wéi Kriips [9-13] Resultat kéint. VerfÜgung war An enger rezenter Etude, chromodomain helicase DNA bindend FAQ 5 (CHD5) als identifizéiert Roman entholl suppressor Gentherapie (wënnt) zu neuroblastoma [14]. CHD5 gehéiert zu enger superfamily vun SWI2 /SNF2-Zesummenhang ATPases, ee grousse Grupp vun nonhistone chromosomal Proteinen. CHD5 encodes eenzegaartege Mix vun funktionell Beräicher aus zwee N-Uschloss chromodomains, gefollegt vun engem SWI2 /SNF2-wëll ATPase /helicase Domain an engem DNA-verbindlech public [14]. Vun chromatin Struktur Regulatioun, kann CHD5 den Ausdrock vun p19 Promotioun Arf datt Funktiounen p53 ze stabiliséieren, d'suppressor entholl zu méi ewéi d'Halschent vun der Mënschheet Cancers inactivated [15]. CHD5 ass dobäi op engem Gene nët (1p36.31) an iwwer 35% vun neuroblastoma geläscht [16]. CHD5 war geduecht virdrun speziell an der nervös System ausgedréckt gin, mä seng Roll an Kriibs an aner Stoffer gëtt ab Aspekt [17]. CHD5 Gentherapie war vill geläscht an glioma [18] fonnt. Ofgesi vun der Gentherapie Läschen, kann CHD5 vun anere Mechanismen opgeléist ginn. An e puer Fäll vun neuroblastoma, do sinn Beweiser dass CHD5 Ausdrock epigenetically vum Promoteur hypermethylation opgeléist ass [19], obschons dës Observatioun net duerch aner Etude [20] bestätegt gouf. Viru Kuerzem, huet d'CHD5 Promoteur fonnt an kleng subsets vun Broscht methylated gin (4,4%), Colon (10%), spillt (15%) an glioma (17%) erhéijen [17, 20], proposéiert epigenetic silencing vun CHD5 vun methylation vläicht eng partiell Roll an tumorigenesis an dëse Stoffer Leeschtung. Hei fannt mir dass, am Géigesaz zu aneren Zorte vu Kriibs gemellt sou wäit, CHD5 zu gastric Kriibs dacks hypermethylated war (73% vun erhéijen an 100% Zell Linnen). D'ectopic Ausdrock vun CHD5 zu gefouert gastric Kriibs Zellen zu engem groussen Wuesstem inhibition. Dat markant Korrelatioun vun der epigenetic Ennerdréckung vun CHD5 an gastric Kriibs proposéiert e virdrun onbekannt Relatioun tëschent dëser wënnt an gastric tumorigenesis. VerfÜgung Method VerfÜgung gastric Kriibs Zell Linnen (AGS, Kato Ray Kultur an RNS /DNA Extraktioun VerfÜgung All III, MKN28, MKN45, SNU1, SNU16 an NCI-N87) huet aus Riken Gene Bank (Tsukuba, Ibaraki, Japan) an amerikanesch Type Kultur Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) kritt. All Kriibs Zell Strecken aus carcinomas vun gastric epithelial Zellen etabléiert. Ausser speziell uginn, cultured Zellen sech am RPMI 1640 mëttelfristeg (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) mat 10% An et Bovine serum nà bei 37 ° C mat 5% CO 2, an 95% Loftfiichtegkeet. Fir pharmacological demethylation, goufen Zellen mat 5 μM 5-AZA-2'-deoxycytidine (December) (Fläch, St Louis, MO, USA) fir dräi hannereneen Deeg behandelt [21]. December war all 24 Stonnen replenished. Eng gläichwäerteg Konzentratioun vun der Gefier (DMSO) war wéi d'Kontroll benotzt. Fir d'alleréischt Stoffer, goufen d'normal gastric Stoffer als Net-inflammation an Net-entholl Stoffer definéiert. All gastric carcinoma Stoffer sinn adenocarcinoma Stoffer. Total RNS a Frankräich DNA huet mat Trizol reagent (Invitrogen) ofgebaut no der Uweisunge d'Hiersteller. Chemeschen real Zäit RT-Hinnen alleguer
Transkriptiouns Reaktioun Réckproduktioun war mat standing 1 μg vun insgesamt RNS mat Réckproduktioun Transkriptioun System (Promega, Madison , allem, USA). D'mRNA Ausdrock Niveau vun der CHD5 sech duerch grouss real-Zäit RT-Hinnen alleguer SYBR Green Master Mix Kit (Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA) sech. Glyceraldehyde-3-phosohate dehydrogenase (GAPDH) huet als eng intern Kontroll vun RNS Integritéit benotzt. Primers benotzt fir CHD5 RT-Hinnen alleguer waren CHD5-F: 5'-AGTTCCGTGTGAGGATGAAC an CHD5-R:. 5'-TCAAGGCTGACGTGTTCAAG VerfÜgung Methylation spezifesch Hinnen alleguer (MSP) VerfÜgung Methylation Status vun CHD5 vun MSP benotzt bisulphate geännert Frankräich festleet war DNA wéi de Schablounen. Frankräich DNA war bisulfite-behandelt mat Zymo DNA Verännerung Kit (Zymo Fuerschung, Orange, CA, USA) no de Protokoll gëtt. MSP war bei 62 ° C, fir 40 Zykle mat annealing Temperatur duerchgefouert wéi virdru beschriwwen [22]. Methylation-spezifesch primers goufen: CHD5M-F: 5'-GTTCGGGGTTTAGCGTTTTC (vun -525 bis -506 relativ zu der Transkriptiouns Start Site) an CHD5M-R: 5'-GAAACTTAACGAACCCGAACG (vun -438 bis -418), an unmethylation-spezifesch primers goufen: CHD5U-F: 5'-GGGTTTGGGGTTTAGTGTTTTT an CHD5U-R: 5'-TCAAAACTTAACAAACCCAAACA. All primers sech virdrun bestätegt, fir net all unbisulfited DNA hire VerfÜgung Bisulfite Nepgen sequencing (BGS) VerfÜgung Bisulfite-behandelt DNA huet mat BGS primers Implikatioune verstärkt, CHD5-BF:. 5'-GTTGTAAATTAGATTTATAGTTTT (vun -724 bis -701) an CHD5-BR: 5'-GCAAATTAAAAAACTAATCCTAAA (vun -324 bis -301). Hinnen alleguer Produiten sech mat Illustra GFX ™ Hinnen alleguer an gelies Band Offäll Kit sidd (GE Gesondheetswiesen Liewen Wëssenschaft, Uppsala, Schweden) an gekloonten an pCR4-anerer Sprooch Vecteure fir sequencing (Invitrogen). Op d'mannst 6 Kolonien huet fir plasmid erauszéien a sequencing Analyse zoufälleg gewielt. VerfÜgung Bau vun CHD5 Ausdrock plasmids VerfÜgung D'CHD5 Ausdrock plasmid vum Klone vun der voller-Längt CHD5 oppen liesen Rumm an mammalian Ausdrock Vecteure pcDNA3.1 gebaut gouf. D'CHD5 oppen liesen Rumm war aus normal Mo. cDNA benotzt héich Vertrauen PFU DNA polymerase (Invitrogen) an gekloonten an pcDNA-TOPO4 (Invitrogen) Kick. No sequencing publizéieren, huet de opginn an pcDNA3.1 mat der Restriktioun Enzymen Hind III an Xba I. VerfÜgung Kolonie Opstellung assay fir monolayer VerfÜgung Transiently transfected AGS Zellen mat eidelen pcDNA3.1 oder pcDNA3.1-CHD5 sech benotzt subcloned Kolonie Opstellung assay. Zellen sech Iwwernuechtung zu engem 12-Meter zappen cultured (1.0 × 10 5 /gutt) an transfected mat pcDNA3.1 oder der CHD5-ausdrécken Vecteure benotzt lipofectamine ™ 2000 (invitrogen). 48 Stonnen méi spéit, huet de transfectants du-plated zu triplicate an cultured fir 10-15 Deeg am komplett RPMI1640 mëttelfristeg wouvun G418 (400 μg /ml). Eos Kolonien huet Kierchefënster mat Gentian Violet der methanol zéien an Kolonien erausgeet gewësse Gréisst (≥ 50 Zellen) goufen gezielt. D'Experiment dräi Mol widderholl. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Down-Regulatioun vun CHD5 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen VerfÜgung den Ausdrock vun CHD5 zu Linnen gastric Kriibs Zell déi grouss RT-Hinnen alleguer alles war. Iwwerdeems CHD5 héich zu normal gastric Stoffer ausgedréckt huet, huet hiren Ausdrock an all 7 gastric Kriibs Zell Linnen (AGS, Kato III, MKN28, MKN45 an NCI-N87 SNU1 an SNU16) verwandelt-reegelen (Figebam. 1). Figur 1 CHD5 Minus-reglementéiert gastric Kriibs Zell Linnen. Den Ausdrock vun CHD5 zu gastric Kriibs Zell Linnen war vun RT-Hinnen alleguer alles. GAPDH war benotzt der CHD5 Ausdrock ze normaliséieren. Déi normal Mo. Otemschwieregkeeten (Moo) war als Referenz gebraucht. Resultater vun grouss RT-Hinnen alleguer real-Zäit war am ieweschte Rot an d'Resultat vun konventionelle RT-Hinnen alleguer war am ënneschten erschéngt. VerfÜgung Promoter hypermethylation vun CHD5 zu gastric Kriibs Zell Linnen an alleréischter gastric carcinoma Stoffer VerfÜgung Eng typesch dës dës 55%, ObsCpG /ExpCpG >; GC Inhalt > 0,65, an Längt > 500 BP (Lalumi 2A.): CpG Island (CGI) war ronderëm CHD5 Exon 1 benotzt dëse Kritèren fonnt. D'methylation Status vun dëser CGI zu gastric Kriibs Zellen war vun methylation spezifesch Hinnen alleguer (MSP) alles. Als zu Lalumi gewisen. 2B, ganz oder deelweis methylation war an all vun 7 gastric Kriibs Zell Linnen fonnt mir iwwerpréift. An konsequent mat den Donnéeën op gastric Zell Linnen, war d'CHD5 Promoteur, och an der Majoritéit vun de Primärschoule gastric carcinoma Stoffer getest (73%, 11/15) (Figebam. 2C) methylated. Wichteg war, methylation vun der CHD5 Promoteur entweder geflücht oder schwaach Magnéitfeld an normal Stoffer nieft dem erhéijen vun der selwechter Patienten a vun gastric Stoffer vun normal Sujeten. Desweideren, methylation vun CHD5 Promoteur am gastric Kriibs Zell Linnen an gastric carcinoma Stoffer war vun bisulfite Nepgen sequencing (BGS) bestätegt (Figebam. 2D). Geholl zesummen, war CHD5 Kannerbetreiung zu gastric Kriibs entsat an Promoteur hypermethylation wossten déi grouss Mechanismus vun CHD5 silencing zu tumorigenesis vun dëser Otemschwieregkeeten gin. Figur 2 CHD5 Promoteur ass an gastric Kriibs hypermethylated. A, huet CHD5 eng typesch CpG Insel (CGI) ëm hir Exon 1. CGI war vun GeneTool Programm opgezeechent. D'Positioune vun BGS an MSP primers sech den Feiler uginn. B, de methylation Status vun CHD5 Promoteur am gastric Kriibs Zellen war vun methylation spezifesch Hinnen alleguer alles. M: methylation; U: unmethylation. C, D methylation Status vun CHD5 Promoteur am primäre Stoffer gastric Kriibs war vun methylation spezifesch Hinnen alleguer wéi zu B. Normal gastric Stoffer an bascht Net-entholl Stoffer goufen als Kontrollen benotzt alles. N1 a N2 sinn normal gastric Stoffer. T1 an T2 weg gastric carcinoma Stoffer iwwerdeems A1 an A2 bascht Net-entholl Stoffer vertrieden. Vertruede Resultater huet dës Distanz. D, Methylation vun CHD5 Promoteur am gastric Kriibs Zell Linnen an alleréischter gastric carcinoma Stoffer war vun BGS confirméiert. All Krees bedeit ee CpG Site a schwaarz gefëllt Kreeser vertrieden CpG Siten methylated. Ee Stéck vun Kreeser entsprécht engem eenzegen Kolonie. VerfÜgung Up-Regulatioun vun CHD5 Ausdrock der December Behandlung VerfÜgung weider Fir de Promoteur CGI hypermethylation-mediated CHD5 silencing zu gastric Kriibs Zell Linnen, CHD5 Ausstralung an AGS a Kato III confirméieren, ier an no demethylation reagent sech December Traitement analyséiert. Béid Zell Linnen komplett methylation vun der CHD5 Promoteur. CHD5 Ausdrock vun dësen zwou Zell Strecken no December-entschlof demethylation vun CHD5 Promoteur (Figebam. 3A an 3B) wesentlech méi Musiktherapie- datt CHD5 Exemplar epigenetically zu gastric Kriibs entsat ass. Figur 3 Pharmacological demethylation reaktivéiert CHD5 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen. A, rel CHD5 däitlech virun an no December behandelt goufen vun RT-Hinnen alleguer wéi zu Lalumi alles. 1. GAPDH war benotzt de Skelett Zomm ze normaliséieren. B, Demethylation vun CHD5 Promoteur am AGS Zellen der December Traitement war wéi an Lalumi vun BGS confirméiert. 2D. VerfÜgung Wuesstem inhibitory Funktioun vun CHD5 VerfÜgung D'entholl Ennerdréckung Besëtz vun CHD5 zu gastric Kriibs Zellen war duerch e falschen-vun-Funktioun Strategie ze propagéieren. Full oppen liesen Rumm (ORF) vun CHD5 war an mammalian Ausdrock Vecteure pcDNA3.1 gekloonten. Den Effet vun ectopic CHD5 Expressioun op de Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen AGS war mat monolayer Kolonie Opstellung assay alles. D'gezwongen Ausdrock vun CHD5 zu AGS Zellen war vun RT-Hinnen alleguer (Figebam. 4A) confirméiert. D'Zuel vun de Kolonie op der Plack geformt vun Zellen iwwer-ausdrécken CHD5 war bedeitend reduzéiert (p VerfÜgung &Si besteet; 0.01) (Lalumi 4B an 4C.), Wat beweist, datt CHD5 de Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen oofgesinn kann. Figur 4 CHD5 bremst Wuesstem vun gastric Kriibs Zell Linn AGS. Den Effet vun ectopic CHD5 Ausdrock op entholl Zell Wuesstem war vun der monolayer Kolonie Opstellung assay propagéieren. A, CHD5 Ausdrock vun AGS Zellen der transfection war vun RT-Hinnen alleguer alles. D'Foto vun Kolonien vun AGS Zellen transfected mat pcDNA3.1 (Vecteure) oder pcDNA3.1-CHD5 (CHD5) war an B. C, Chemeschen Analysë vun Amphipolis Zuelen sinn dës als Wäerter vu menge ± normale deviation geformt gewisen. P VerfÜgung Wäerter sech mat Schüler d'T-Test berechent. De Stär beweist statistesch groussen Ënnerscheed (p VerfÜgung &Si besteet; 0.01). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung dene leschte Joren, hu vill TSGs fonnt epigenetically inactivated zu gastric Kriibs ze ginn, wat beweist, datt epigenetic silencing vun TSGs ass ee vu groussen molekulare hire Restaurant am Prozess vun gastric carcinogenesis [22-25]. An dëser Etude, war CHD5 wéi aner potentiell wënnt hir epigenetic inactivation identifizéiert zu gastric carcinogenesis bäidroen kënnen. Et war dacks am gastric Kriibs Zell Linnen duerch Promoteur hypermethylation verwandelt-reegelen. D'ectopic Ausdrock vun CHD5 Nerve de Wuesstem inhibition vun gastric Kriibs Zellen, wat beweist, datt CHD5 Funktiounen als wënnt epigenetically zu gastric Kriibs entsat. VerfÜgung Promoter hypermethylation vun CHD5 zu Kriibs huet an aner Cancers observéiert ginn [17, 20]. Allerdéngs war d'Heefegkeet vun CHD5 Promoteur methylation zu gastric Kriibs Zell Linnen an erhéijen an dëser Etude fonnt relativ héich sinn, am Verglach zu der Frequenz vun CHD5 methylation an aner Cancers (meeschtens ënner 20%) [17, 20]. Natierlech, soll méi Echantillon benotzt ginn dëst Resultat mat der selwechter MSP primers an de folgende Studien ze confirméieren. Trotzdem, seet eis fannen dass CHD5 inactivation kéint duerch verschidde Mechanismen verschidden Stoffer mediated ginn. Well CHD5 duerch Kopie Zuel Anomalie vun verschiddenen Cancers inactivated ass [15, 16], uginn Komparativ Frankräich hybridization (CGH) dass 1p36, déi CHD5-haltege nët Gentherapie, ass net vill vun gastric Cancers imbalanced [26]. Amplaz, wéi an dëser Etude gewisen, schéngt CHD5 Kannerbetreiung zu gastric Kriibs vum Promoteur hypermethylation entsat gin. VerfÜgung Et ass ëmmer evident dass hypermethylation vun wënnt Promoteur eent vun de groussen molekulare hire Restaurant zu Kriibs Entwécklung duerstellt. Déi héich Heefegkeet vun CHD5 Promoteur hypermethylation zu gastric Kriibs kann net nëmmen als eng gastric Kriibs Diagnos lant ginn awer och Cepheid hätt. Fir dat Enn, ass et wichteg de CHD5 Promoteur methylation am Veräin mat Medeziner Charakteristiken, wéi Alter, Geschlecht, H. pylori Wonn, entholl Schouljoer, Lauren Klassifikatioun an dat zu Markenzeeche. Tatsaach, datt d'héich heterogeneity vun der Primärschoul gastric carcinoma Stoffer, methylation mat héich Opléisung analyséiert wéi grouss methylation spezifesch Analyse mat sequenom oder Taqman real-Zäit Hinnen alleguer wäerten hëllefräich sinn ze evaluéieren, ob CHD5 Promoteur methylation fir fréi gastric Kriibs Detectioun an hätt Cepheid nëtzlech ass. VerfÜgung Obwuel dacks Promoteur methylation CHD5 zu gastric Kriibs Zell Linnen inactivates, kënne mir net d'Präsenz vun anere Mechanismen fir de Verloscht Funktioun vun CHD5 zu gastric Kriibs auszeschléissen. CHD5 Ausdrock ass extrem héich an MKN28 an SNU16 (Figebam. 1), de Promoteur vun CHD5 awer nëmmen an deenen zwou Zell Linnen deelweis methylated war (Figebam. 2B), wat beweist, datt aner Mechanismen fir d'silencing vun CHD5 zu puer responsabel gin vläicht zu gastric Kriibs Zellen vun gastric Kriibs Zell Linnen. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung CHD5 war dacks duerch Promoteur hypermethylation verwandelt-reegelen. D'ectopic Ausdrock vun CHD5 Nerve Wuesstem inhibition vun gastric Kriibs Zellen, wat beweist, datt CHD5 Funktiounen als entholl suppressor Gentherapie epigenetically zu gastric Kriibs entsat. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Mir Merci Dr Hongchuan Jin (Biomedical Research Center, Sir Runrun Shaw Spidol, Zhejiang University) fir seng grouss Rotschléi an technesch Ënnerstëtzung. Der Aarbecht an dësem Pabeier beschriwwe gouf duerch Subventiounen aus der Fuerschung Stipendie Conseil vun der Hong Kong Special Administrativ Regioun, China (Project Nr CityU 160508). VerfÜgung Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller deelweis ënnerstëtzt VerfÜgung sinn drënner der Linken op der original deposéiert Fichieren fir Biller "Auteuren. 12929_2009_95_MOESM1_ESM.jpeg Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12929_2009_95_MOESM2_ESM.jpeg Auteuren' original Datei fir Figur 2 12929_2009_95_MOESM3_ESM.jpeg Auteuren 'original Datei fir Figur 3 12929_2009_95_MOESM4_ESM.jpeg Auteuren' original Datei fir Figur 4 Wettsträit Interessen VerfÜgung D'Auteuren erklären, datt si keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung

• D'prognostic Impakt vun epidermal Wuesstem Faktor receptor zu Patiente mat metastatic gastric cancer
• Laparoscopic metallen hu Roux-en-y gastric Contournement als primären Prozedur fir de Super-Super-mockeleg (Kierper Mass Index > 60 kg /m2)