Gene Ausdrock Analyse vun engem Helicobacter pylori-Krankheet an héich-Salz Ernährung-behandelt Maus gastric entholl Model: Identifikatioun vun CD177 als Roman prognostic Faktor Patienten mat gastric Kriibs

Gene Ausdrock Analyse vun engem Helicobacter pylori VerfÜgung -infected an héich-Salz Ernährung-behandelt Maus gastric entholl Model: Identifikatioun vun CD177 als Roman prognostic Faktor Patienten mat gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Helicobacter pylori VerfÜgung (H. pylori VerfÜgung) Wonn an exzessiv Salz ofgeroden sinn wéi wichteg Risiko Facteure fir Mo. Kriibs am Mënschen bekannt. Allerdéngs, Interaktioune vun dësen zwee Punkte mat Gentherapie Ausdrock Profiler während gastric carcinogenesis bleiwen onkloer. Am Moment studéieren, mer d'global Gentherapie Ausdrock verbonne mat Mo. carcinogenesis an hätt vun mënschlech gastric Kriibs mat enger Maus Modell propagéieren. VerfÜgung Method VerfÜgung am Mo. carcinogenesis Équipe Kandidat Genen ze fannen, gebaut mer éischtens eng carcinogen-entschlof Maus gastric entholl Modell mat H. kombinéiert pylori VerfÜgung Wonn an héich-Salz iessen. C57BL /6J Mais sech N entscheet VerfÜgung -methyl-N VerfÜgung -nitrosourea an hirem Drénkwaasser a geaffert no 40 Wochen. Déiere vun enger Kombinatioun Grupp sech mat H. pylori VerfÜgung inoculated an z'iesse eng héich-Salz iessen. Gene Ausdrock Profiler an glandular Mo vun de Mais sech duerch oligonucleotide microarray propagéieren. Zweet, iwwerpréift mir eng Disponibilitéit vun de Kandidat Gentherapie als prognostic Faktor fir Mënscherechter Patienten. Immunohistochemical Analyse vun CD177, eent vun de up-reegelen Genen, war am mënschleche fortgeschratt gastric Kriibs uplanzen standing d'Associatioun mat Iwwregens hätt ze diskutéieren. VerfÜgung Resultater VerfÜgung D'Zuel vun gastric entholl zu carcinogen-behandelt Mais war vun geschéckt vill fräi vum H. pylori VerfÜgung Wonn an héich-Salz iessen. An der microarray Analyse, 35 a 31 méi wéi zwee-Weeër an-reglementéiert an Ugrëff-reegelen Genen, respektiv, sech an d'H. pylori VerfÜgung -infection an héich-Salz iessen kombinéiert Grupp am Verglach mat den anere Gruppen fonnt. Chemeschen RT-Hinnen alleguer bestätegt bedeitend méi-Ausdrock vun zwee Kandidaten Genen och Cd177 VerfÜgung an Reg3g VerfÜgung. Op immunohistochemical Analyse vun CD177 zu Mënsch fortgeschratt gastric Kriibs uplanzen, iwwer-Ausdrock war zu 33 (60.0%) vun 55 Fäll evident, mat engem ordentleche hätt vill correlating (P VerfÜgung = 0.0294). Multivariate Analyse dorënner clinicopathological Facteure wéi covariates héich Ausdrock vun CD177 Teamchef eng onofhängeg prognostic Faktor fir globale Iwwerliewe gin. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Dës Resultater hindeit, datt eis Maus Modell mat H. pylori VerfÜgung Wonn an héich-Salz iessen kombinéiert ass den Ausdrock Gentherapie zu gastric carcinogenesis nëtzlech profiling, Beweiser suergt datt CD177 engem Roman prognostic Faktor fir Mo. Kriibs ass. Dëst ass den éischte Rapport engem prognostic Korrelatioun tëscht CD177 Ausdrock a staark entholl gelooss weist. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Cd177 Gastric Kriibs Helicobacter pylori VerfÜgung Microarray Salt Background VerfÜgung Mo. Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an zweete Spëtzekandidat Doudesursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit [1]. Helicobacter pylori VerfÜgung (H. pylori VerfÜgung) elo als Risk Faktor fir chronesch gastritis an Mo. Kriibs Entwécklung unerkannt ass [2]. Ausserdeem hunn Ëmwelt- an Provider Faktoren och gastric carcinogenesis ze beaflossen, a Salz (Natrium Mord, NaCl) a Salzwaasser Liewensmëttel gi besonnesch Bedeitung, baséiert op de Beweis vun enger Zuel vun epidemiological an experimentell Studien [3-6] gewise gouf. Sou, kombinéiert aussetzt H. pylori VerfÜgung Wonn an exzessiv Salz ofgeroden ganz wichteg fir d'Entwécklung an de Werdegang vun gastric erhéijen ze ginn ebenfalls, obwuel den detailléierte Mechanismen, virun allem am Beräich vun der Gentherapie Ausdrock Profiler, Souzesoen gin bleiwen.
Héich duerch dat microarray Technologie e mächtege Outil fir déifgräifend Gentherapie Analyse gëtt, applizéiert schonn Gentherapie Ausdrock Musteren an souwuel mënschlech Echantillonen an Déier Modeller vun gastric Entwécklungsstéierungen [7-16] ze bewäerten. Obwuel vill Chercheuren op der Gentherapie Ausdrock vun H. pylori VerfÜgung -treated gastric Zell Zeilen do hunn [17-19], Resultater zu Zell Kultur net onbedéngt mat Ausdrock vu spezifesche Genen an d'zu VIVO VerfÜgung microenvironment vergläichen Provider mat immun Äntwerte an stromal-epithelial Interaktioune zu Cancers. Carcinogen-behandelt Persounen gerbils hunn als nëtzlech Déier Modell vun H. pylori VerfÜgung -associated gastric carcinogenesis [20-24] benotzt gouf, a mir ginn virdrun dass eng synergistic Interaktioun tëscht H. pylori VerfÜgung Wonn an héich-Salz ofgeroden gut iwwerstan chronescher inflammation an entholl Entwécklung vun der Mamm vun dësen Déieren [25, 26]. Leider gëtt et wéineg Informatiounen sinn fir d'gerbil Nepgen, hampering genetesch a molekulare Analyse. Dofir, huet Opmierksamkeet op Maus Modeller do [12, 13], an Opstelle vun enger Maus Modell fir Mo. Kriibs mat Salz a H. pylori VerfÜgung stéiert ass fir Ënnersich waren Genen Équipe an gastric carcinogenesis gezielt. VerfÜgung virdrun microarray Studien Hëllef Knabberdéieren Modeller hutt Ausdrock Profiler net z'ënnerscheeden an baséiert op der Interaktioun vun H. pylori VerfÜgung Wonn a Salz ofgeroden Markenzeeche. Am Moment studéieren, iwwerpréift mir Gentherapie Ausdrock vun der gastric mucosa zu engem -infected an héich-Salz Ernährung-behandelt Maus gastric entholl Modell VerfÜgung H. pylori vun oligonucleotide microarray an fonnt zwee Kandidaten an-reegelen Genen och Cd177 VerfÜgung an Reg3g VerfÜgung. Mir propagéieren och den Ausdrock vun CD177 zu Mënsch fortgeschratt gastric Cancers vun immunohistochemistry, a kritt Beweiser als potentiell prognostic Faktor fir Mo. carcinogenesis. VerfÜgung Method VerfÜgung Inoculation mat H. pylori
H. pylori
huet déi selwecht Method virbereet wéi virdru beschriwwen [27, 28]. Kuerz, H. pylori VerfÜgung (Sydney Deformatioun 1) war um 37 op Brucella Agar Placke (Becton Dickinson, Cockeysville, MD, USA) mat 7% (v /v) Hëtzt-inactivated An et Bovine serum (FBS) an incubated inoculated ° C ënner microaerophilic Konditiounen um héich Fiichtegkeet fir 2 Deeg. Dunn, op de Placke ugebaut Bakterien sech an Brucella läschen agefouert (Becton Dickinson) ergänzt mat 7% (v /v) FBS an den 24-er ënnert de selwechte Bedingungen incubated. No 24-h fasting, sech Déieren Zollformalitéiten-gastrically inoculated H. pylori VerfÜgung (1.0 × 10 8 Kolonie-administrativ Ënnerdeelunge). Ier inoculation, waren der Fleeschbritt läschen Kulturen vum H. pylori VerfÜgung ënner enger Phas-Kontrast microscope vergewësseren fir bakteriell Form a Mobilitéit. VerfÜgung Déieren an experimentell Protokoll VerfÜgung fofzeg-sechs spezifesch pathogen-gratis männlech, 5- oder 6 -week-al C57BL /6J Mais (Clea Japan, Tokyo, Japan) waren an dëser Etude benotzt. All Déieren goufen am Plastik Käfeg op hardwood-Chip Bettgezei an eng Loft-bedingt biohazard Sall mat enger 12-h Liicht /12-h donkel Zyklus, an erlaabt e fräien Zougang fir Iessen a Waasser uechter waren. D'experimentell Design war déi Déieren Care Comité vun der Aichi Cancer Center Research Institut guttgeheescht, an d'Déieren sech fir fir adäquate Verhalensregele vun Déieren Experimenter (Science Conseil vu Japan, den 1. Juni 2006 mat institutionell Richtlinnen souwéi d'ageschafft an Aklang gär, ). VerfÜgung D'experimentell Design zu Dorënner 1A illustréiert ass. De Mais sech an 4 Gruppen (Groups A-D) erwaart; 21, 5, 15, an 15 Mais sech ze A, B, C, an D Gruppe gehéiert, respektiv, bei der commencement vun der Experimenter. Déiere vun Groups B an D sech mat H. pylori VerfÜgung Zollformalitéiten-gastrically op alternativ Wochen (insgesamt 7 mol) inoculated, iwwerdeems Mais vun den anere Gruppen mat Brucella läschen eleng inoculated goufen. All Mais -Supporter N VerfÜgung -methyl-N VerfÜgung -nitrosourea (MNU, Fläch chemesche, St Louis, MO, USA) zu hirem Drénkwaasser an der Konzentratioun vun 120 ppm op alternativ Wochen (total aussetzt war 5 Wochen) . Fir dëst Zil war MNU frësch an destilléiert Waasser dräi Mol pro Woch opgeléist. Mais vun Groups C an D scho CE-2 Bierger (basal Natrium Inhalt vun 0,36%; Clea Japan) mat 10% NaCl. Während der aussetzt Period, een Déier vum Grupp B, eent vun Group C a sechs vun Group D gestuerwen oder gouf Kreativitéit a si goufen aus der Experimenter ausgeschloss. Um 40 Wochen, goufen d'blouf Déieren ze déif Anästhesie an laparotomy mat excision vun de Mo. ënnerworf. Figur 1 hun Design an histopathological Conclusiounen. A: Mir hun Design. Five- zu sechs-Woch-alen Mann C57BL /6J Mais sech mat H. pylori VerfÜgung SS1 Deformatioun (Groups B an D) oder Brucella läschen (Groups A an C) inoculated. All Déiere waren 120 ppm MNU an hirem Drénkwaasser op alternativ Wochen (total aussetzt, 5 Wochen) verwalt. Mais vun Groups C an D sech entscheet basal Ernährung (CE-2) mat 10% NaCl. B: Histopathological Conclusiounen fir MNU-entschlof Mais gastric erhéijen. (Enger an b) Gastric adenoma an der pyloric Regioun vun engem MNU-behandelt a H. pylori VerfÜgung -infected Maus (Grupp B). (C an d) Gastric observéiert adenocarcinoma am Grupp B. Note déi héich Zell Dicht a bewosst an strukturell atypia. Bar = 200 (enger an c) oder 100 μm (b an d). VerfÜgung Histological Evaluatioun VerfÜgung Fir histological Bedenken, déi Mamm huet zu 10% neutral-gefiermt formalin fix fir 24-h, laanscht d'monumental Achs longitudinal geschnidden an Strips vun selwecht Breet, an zu paraffin Ënnerbewosstsinn. Véier-μm décke Rubriken sech bereet an Kierchefënster mat hematoxylin an eosin (H & E) fir histological Observatioun. Erhéijen waren an adenoma an adenocarcinoma séiert baséiert op bewosst an morphological atypia an invasiv Wuesstem zu submucosa wéi mir virdrun gemellt [21]. VerfÜgung RNS Virbereedung an oligonucleotide microarray Analyse VerfÜgung Total RNS war aus der ganzer gastric mucosa dorënner zwou entholl ofgebaut an Randerscheinung Otemschwieregkeeten mat engem RNeasy Plus Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Däitschland) a seng Qualitéit mat engem microchip electrophoresis System iwwerpréift (i-Chip SV1210; Hitachi chemesche, Tokyo, Japan). Héich-Qualitéit Echantillon sech ausgewielt, a fir all Grupp hinzeginn eenzel Ënnerscheed fir oligonucleotide microarray Foussgänger vermeiden (Grupp E, n = 3; B, n = 4; C, n = 6; D, n = 7). D'CodeLink Mouse Lait Genom Bioarray (Obwuel Microarrays, Tempe, AZ, USA) mat 35.587 Studiebäihëllefe baut pro Chip benotzt gouf Gentherapie Ausdrock Profiler ze analyséieren. Hybridization, Veraarbechtung, an Scannen vun Filgen Galaxy (Nagoya, Japan) gesuergt huet, dass Scanner Donnéeën Biller mat enger Software Package (Microarray analyteschen Tool, Filgen) analyséieren. Komplett-linkage Hierarchie Käre och op de véier Gruppen iwwerpréift war eng qualifizéiert Studiebäihëllefe Ziel (Filgen) benotzt. VerfÜgung Chemeschen real-Zäit RT-Hinnen alleguer vun Ausdrock Profiler am Mais Mo. VerfÜgung rel grouss real-Zäit RT-Hinnen alleguer war gesuergt mat engem StepOne Real-Time Hinnen alleguer System (Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA) mat der Maus-spezifesch glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (Gapdh VerfÜgung) Gentherapie wéi eng intern Kontroll. mat engem SuperScript VILO cDNA Synthes Kit (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) No DNase Behandlung, goufen éischt staarkt cDNAs aus total RNS Wierderbuch. D'Hinnen alleguer war beäntweren dichteg Uweisungen folgenden Fabrikant d'enger QuantiTect SYBR Green Hinnen alleguer Kit (QIAGEN) benotzt. D'primer Message fir all Gene sinn an Table opgezielt 1. Spezifizitéit vun der Hinnen alleguer Reaktioune war mat der StepOne Software an electrophoresis vun der Hinnen alleguer en Echantillon vun 3% agarose gels gëtt eng schocken rop Programm bestätegt benotzt. Den Ausdrock Niveau vun mRNAs sech normalized dem mRNA Niveau vun Gapdh VerfÜgung an am Verglach mat der Kontroll Mais (Grupp E) vun der ΔΔCT method.Table 1 Primer Message fir relativ grouss ass real-Zäit RT-Hinnen alleguer Gene VerfÜgung
zu Message
Product Längt
Zougank keen.
Gapdh
5'-AACGGATTTGGCCGTATTG-3 "VerfÜgung 140 VerfÜgung NM_008084 VerfÜgung 5'-TTGCCGTGAGTGGAGTCATA-3 "VerfÜgung Cd177
5'-AGGGGTGCCACTCACTGTTA-3" VerfÜgung 128 VerfÜgung NM_026862 VerfÜgung 5'-CCGATTGTTTTGGAGTCACC-3 VerfÜgung Reg3g
zu 5'-GTATGGATTGGGCTCCATGA-3 "VerfÜgung 106 VerfÜgung NM_011260 VerfÜgung 5'-GATTCGTCTCCCAGTTGATG-3" VerfÜgung Muc13
5'-CCTAATCCCTACGCAAACCA-3 "VerfÜgung 124 VerfÜgung NM_010739 VerfÜgung 5'-TCTGCCCATTTCTCCTTGTC-3 "VerfÜgung Gapdh VerfÜgung glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, Reg3g VerfÜgung islet-ofgeleet FAQ 3 ESO regeneréiert, Muc13 VerfÜgung mucin 13. VerfÜgung Patienten an entholl uplanzen VerfÜgung a Ganzen 55 Fäll vun der Primärschoul fortgeschratt gastric Kriibs, surgically resected um Aichi Cancer Center Hospital (Nagoya, Japan) tëscht 1995 an 2002, goufen an der Maîtrise Awëllegung propagéieren. D'Etude gouf vun der Ethik Comité vun Aichi Cancer Center guttgeheescht. D'Patienten goufen all männlech a mengen Alter an Steiren Suivi Period goufen 58,6 ± 10,2 Joer an 83 Wochen, respektiv. Keen hat preoperative Chimiotherapie oder radiotherapy dobäi. Carcinomas mat Otemschwieregkeeten bascht mucosa sech fest an paraffin agebaut, a fir staining mat H §ioned; E. Klassifikatioun vun entholl Stadium an Diagnos vun fortgeschratt Fäll goufen no der japanescher Klassifikatioun vun Gastric Carcinomas [29] huet. D'Cancers haten d'muscularis propria (T2 fir TNM Klassifikatioun) agefall, déi subserosa (T3), oder d'serosa an der peritoneal Discours (T4a), heiansdo bascht Organer (T4b) sensibiliséieren. VerfÜgung Immunohistochemistry Mënsch gastric Kriibs Otemschwieregkeeten benotzt
Mir iwwerpréift Ausdrock vun CD177, fir déi eng kommerziell Primärschoul antibody, an mënschlechen gastric Kriibs Stoffer vun immunohistochemistry disponibel war. No inhibition vun endogenous peroxidase Aktivitéit vun immersion zu 3% Waasserstoff Hem /methanol Léisung, antigen retrieval war bei 98 ° C fir 10 min mat 10 mm citrate Prellbock (pH 6.0) an engem Schleck erëm Uewen duerchgefouert. Dunn, Rubriken huet mat enger Maus incubated monoclonal anti-CD177 antibody (Copie 4C4, verdënntem 1: 100, Abnova, Taipei, Taiwan). Staining fir CD177 war standing engem Vectastain Elite ABC Kit benotzt (Vecteure Laboratoiren, Burlingame, CA, USA) a mat 0,05% 3,3'-diaminobenzidine visualized obligatoresch. D'Resultater vun CD177 immunostaining zu neoplastic Zellen sech an véier Grad séiert; Schouljoer 0 (keent, 0-10% vun positiven Zellen), mannerwäerteg 1 (schwaach, 10-30%), mannerwäerteg 2 (moderéiert, 30-60%), an mannerwäerteg 3 (staark, iwwer 60%) baséiert op Undeel vun Kierchefënster Zellen, a Fäll méisseg bis staark staining weist sech als positiv geduecht. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung Den Chi-Feld Test mat Bonferroni Korrektur benotzt gouf incidences vun gastric entholl ze bewäerten. Chemeschen Wäerter dorënner Zuel vun entholl a relativ Ausdrock vun mRNA sech als Mëttel ± Fils oder SE vertrueden, an Ënnerscheeder tëscht heescht sech statistesch vun ANOVA oder der Kruskal-Wallis Test vun der Tukey Test fir verschidde Vergläicher duerno analyséiert. Allgemeng Survival war fir Vergläicher mat der Kaplan-Meier Method an d'Logbuch-Platz Test geschat. Kennenzeléieren tëscht CD177 Ausdrock an clinicopathological Facteure sech duerch ANOVA oder Chi-Feld Test analyséiert. Multivariate Analyse war standing ze iwwerpréifen, ob CD177 iwwer-Ausdrock war eng onofhängeg prognostic Faktor der proportionaler-Risikoe Réckgang Modell Cox benotzt. P VerfÜgung Wäerter vu &Si besteet; 0,05 considéréiert goufen statistesch relevant ze ginn. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Incidences an multiplicities vun gastric erhéijen VerfÜgung De effektiv Zuel vu Mais an der observéiert incidences an multiplicities vun gastric erhéijen sinn an Table 2. Saachen an der gastric mucosa entwéckelt zesummegefaasst vun all MNU-behandelt Gruppen (Groups AD) (Dorënner 1B). An héich-Salz Ernährung-behandelt Gruppen (Groups C an D), d'Heefegkeet vun gastric entholl am Grupp D (H. pylori VerfÜgung -infected; 100%) war méi héich wéi déi vun Group C (Net-Personal; 50,0 %) (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). An basal Ernährung Gruppen (Groups A a B), war d'Heefegkeet fräi och vun H. pylori VerfÜgung -infection (Grupp E, 61,9% an Group B, 100%), dato ouni statistesch Bedeitung. D'multiplicities vun insgesamt erhéijen an zwee H. pylori VerfÜgung -infected Gruppen (Grupp B, 3,3 ± 1.0 erhéijen /Maus an Grupp D, 2,6 ± 1,1) waren mat Ofstand méi héich wéi déi vun den Net-Krankheet Gruppen (Grupp E, 0,9 ± 0,8 an Group C, 1.0 ± 1.2) (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). D'Zuel vun gastric adenocarcinoma am Grupp D (2.1 ± 1,4) war méi héich wéi déi am Grupp B (1,8 ± 1.0) a vill iwwer der Group C Wäert fräi (0,8 ± 1.0) (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05). Am Géigesaz, déi multiplicities vun adenomas a Gruppen A an D (0,1 ± 0,4 an 0,4 ± 0,5, respektiv) huet däitlech méi niddreg wéi am Grupp B (1,5 ± 0.6) (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 an 0.01) .Table 2 Heefegkeet an Zuel vun gastric erhéijen an MNU-behandelt Mais VerfÜgung Group
Effektiv Zuel
Prefabrizéierten
Heefegkeet (%)
Zuel (keen. vun entholl /Maus)
Adenoma
Carcinoma
Total entholl
Adenoma
Carcinoma
Total entholl
zu enger VerfÜgung 21 VerfÜgung MNU VerfÜgung 3 (14.3) zu 13 (61.9) zu 13 (61.9) VerfÜgung 0,1 ± 0.4a VerfÜgung 0,8 ± 0,7 VerfÜgung 0,9 ± 0,8 VerfÜgung B VerfÜgung 4 VerfÜgung MNU + H. pylori
4 (100) b VerfÜgung 4 (100) bis 4 (100) VerfÜgung 1,5 ± 0.6 VerfÜgung 1,8 ± 1.0 VerfÜgung 3,3 ± 1.0c VerfÜgung C VerfÜgung 14 VerfÜgung MNU + 10% NaCl VerfÜgung 2 (14.3) zu 6 (42.9) zu 7 (50.0) VerfÜgung 0,2 ± 0.6 VerfÜgung 0,8 ± 1.0 VerfÜgung 1.0 ± 1,2 VerfÜgung D VerfÜgung 9 VerfÜgung MNU + H. pylori zu + 10% NaCl VerfÜgung 4 (44.4)
(88.8) VerfÜgung 9 (100) d VerfÜgung 0,4 ± 0.5e VerfÜgung 2.1 ± 1.4d VerfÜgung 2,6 ± 1.1d VerfÜgung fir Zuel Werter ausgedréckt sinn als Mëttel ± Fils. Incidences goufen normalerweis vun Chi-Feld Test, gefollegt vun pairwise Analyse mat Bonferroni Korrektur évaluéieren. Multiplicities goufen normalerweis vun ANOVA, gefollegt vun der Tukey Test fir Multiple Verglach analyséiert. AP VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Grupp B, BP VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Group A, CP VerfÜgung &Si besteet; 0,05 vs. VerfÜgung Group A, DP VerfÜgung &Si besteet; 0,05 vs. VerfÜgung Group C, EP VerfÜgung &Si besteet; 0,05 vs. VerfÜgung Group B. VerfÜgung Gene Ausdrock vun der glandular Mamm vun oligonucleotide microarray VerfÜgung No oligonucleotide microarrays profiling, am Verglach mat den Net-Krankheet an basal Ernährung-behandelt Grupp (Grupp E), 34 Genen sech weider-reglementéiert an 169 goufen verwandelt-reegelen méi wéi zwee-Weeër an H. pylori VerfÜgung -infected Mais (Grupp B), 56 weider-reglementéiert an 129 erof -regulated an héich-Salz Ernährung-behandelt Mais (Group C), an 69 weider-reglementéiert an 214 verwandelt-reglementéiert an d'kombinéiert Grupp (Grupp d) (Dorënner 2A). Geholl zesummen, wéi zu Table 3 gewisen, hunn mir déi 35 Genen waren-up reglementéiert an 31 Genen huet verwandelt-reegelen méi wéi zwee-Weeër nëmmen duerch d'Kombinatioun vum H. pylori VerfÜgung Wonn an héich-Salz iessen. mat der kompletter-linkage Käre sind (Dorënner 3) Ausserdeem, war Hierarchie Käre Analyse iwwert de véier Gruppe mat engem Total vun 303 qualifizéiert Ämter gesuergt. Drësseg-eent Ämter dorënner Cd177 VerfÜgung, Reg3g VerfÜgung an Muc13 VerfÜgung bannent engem Koup vun Ämter ze ginn bestätegt goufen nëmmen war bis-reglementéiert Group D. Aueren Analyse vun der momentaner Etude op dës Genen do, well et war als dass d'Genen vun deem Ausdrock nëmmen an der kombinéiert Grupp verännert huet vläicht mat gastric carcinogenesis an Werdegang vun de Mënschen verbonne ginn. Figur 2 Global Gentherapie Analyse vun der glandular Mo vun MNU-behandelt Mais benotzt oligonucleotide microarray. A: Zuel vun Genen Bastelen oder erof-reegelen méi wéi zwee-Weeër am Mo vun MNU-behandelt Mais. An Venn d'Diagramm, weg de Kreeser Bastelen (lénks) oder erof-reegelen (riets) Genen am Mo vun MNU-behandelt Mais mat H. pylori VerfÜgung Wonn, héich-Salz iessen oder hir geschéckt. D'Festung Géigend stellt d'Bastelen oder erof-reegelen Genen méi wéi zwee-Weeër nëmmen déi geschéckt. B: Chemeschen real-Zäit RT-Hinnen alleguer Analyse vun dräi gewielte up-reegelen Genen (Cd177 VerfÜgung, Reg3g VerfÜgung, an Muc13 VerfÜgung) an der Mamm vun MNU-behandelt Mais. Ausdrock Niveau vun de Genen an all Prouf huet déi VerfÜgung Gapdh normalized wéi intern Kontroll benotzt ΔΔCT Method. Relativer Ausdrock Niveauen sech den X-fantastesch Verännerung am Verglach zu Group A (fix den 1.0) vertrueden. Statistesch Analyse gouf vun der Kruskal-Wallis Test fir generell Analys an Tukey Test fir Multiple Verglach gesuergt. Erausgoen, SE; *, P VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Grupp A an &Si besteet; 0,05 vs. VerfÜgung Group C; †, P VerfÜgung &Si besteet; 0,01 vs. VerfÜgung Group C. VerfÜgung Table 3 reegelen Genen vun Kombinatioun vun H. pylori Wonn an héich-Salz iessen an Maus gastric mucosa VerfÜgung Zougank keen.
Symbol VerfÜgung
Genen /Proteinen VerfÜgung Ännerungen falen VerfÜgung Up-reegelen Genen

XM_357640 VerfÜgung Igk-V8 VerfÜgung Immunoglobulin Kappa Kette Variabel 8 (V8) VerfÜgung 14,4 VerfÜgung XM_001472541 VerfÜgung Ighg VerfÜgung Immunoglobulin schwéier Ketten (ESO polypeptide) VerfÜgung 9,2 VerfÜgung NM_026862 VerfÜgung Cd177 VerfÜgung CD177 antigen VerfÜgung 7.3 VerfÜgung NM_011260 VerfÜgung Reg3g VerfÜgung regeneréiert islet-ofgeleet 3 ESO VerfÜgung 6.1 VerfÜgung NM_023137 VerfÜgung Ubd VerfÜgung Ubiquitin D VerfÜgung 4,3 VerfÜgung XM_144817 VerfÜgung Igk-V34 VerfÜgung Immunoglobulin Kappa Kette ofwiesselnd 34 (V34)
4,1 VerfÜgung NM_007675 VerfÜgung Ceacam10 VerfÜgung Carcinoembryonic antigen-Zesummenhang Zell Haftung Protein 10 VerfÜgung 3,7 VerfÜgung NM_183322 VerfÜgung Khdc1a VerfÜgung KH Domän mat 1A VerfÜgung 3,3 VerfÜgung NM_011475
Sprr2i VerfÜgung klenger proline-räiche FAQ 2I VerfÜgung 3,2 VerfÜgung NM_175165 VerfÜgung Tprg VerfÜgung sozialt Zesummenhang FAQ VerfÜgung 3,2 VerfÜgung NM_175406 reegelen 63 VerfÜgung Atp6v0d2 VerfÜgung ATPase, H + transparent , Dëst V0 subunit D2 VerfÜgung 3.0 VerfÜgung NM_009703 VerfÜgung Araf VerfÜgung v-RAF murine homolog oncogene Haren sarcoma 3611 VerfÜgung 2,6 VerfÜgung NM_026822 VerfÜgung Lce1b VerfÜgung Late cornified Enveloppe 1B
2,5 VerfÜgung NM_016958 VerfÜgung Krt14 VerfÜgung Keratin 14 VerfÜgung 2,5 VerfÜgung NM_212487 VerfÜgung Krt78 VerfÜgung Keratin 78 VerfÜgung 2,4 VerfÜgung NM_009807 VerfÜgung Casp1 VerfÜgung Caspase 1
2,4 VerfÜgung NM_146037 VerfÜgung Kcnk13 VerfÜgung Kalium Kanal, subfamily K, Member 13 VerfÜgung 2,4 VerfÜgung NM_019450 VerfÜgung Il1f6 VerfÜgung Interleukin 1 Famill, Member 6 VerfÜgung 2,3 VerfÜgung NM_008827 VerfÜgung Pgf VerfÜgung Placental Wuesstem Faktor VerfÜgung 2,3 VerfÜgung XM_893506 VerfÜgung Klk12 VerfÜgung Kallikrein Zesummenhang-peptidase 12 VerfÜgung 2,3 VerfÜgung NM_016887 VerfÜgung Cldn7 VerfÜgung Claudin 7
2,3 VerfÜgung NM_029360 VerfÜgung Tm4sf5 VerfÜgung Transmembrane 4 superfamily Member 5 zur VerfÜgung 2,2 VerfÜgung NM_172301 VerfÜgung Ccnb1 VerfÜgung Cyclin B1 VerfÜgung 2,2 VerfÜgung NM_010739 VerfÜgung Muc13 VerfÜgung Mucin 13, epithelial transmembrane VerfÜgung 2,2 VerfÜgung NM_011165 VerfÜgung Prl4a1 VerfÜgung Prolactin Famill 4, subfamily engem, Member 1 VerfÜgung 2,2 VerfÜgung NM_010162 VerfÜgung Ext1 VerfÜgung Exostoses (méi) 1
2,2 VerfÜgung NM_011704 VerfÜgung Vnn1 VerfÜgung Vanin 1 VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_011082 VerfÜgung Pigr VerfÜgung Polymeric immunoglobulin receptor VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_007769 VerfÜgung Dmbt1 VerfÜgung Geläschte zu malignant Gehir erhéijen 1 VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_022984 VerfÜgung Retn VerfÜgung Resistin VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_173037 VerfÜgung Tmco 7 VerfÜgung Transmembrane an coiled-coil Domain 7 VerfÜgung 2.1
NM_009100 VerfÜgung Rptn VerfÜgung Repetin VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_007630 VerfÜgung Ccnb2 VerfÜgung Cyclin B2 VerfÜgung 2.1 VerfÜgung NM_001081060 VerfÜgung Slc9a3 VerfÜgung Musée gouf Famill 9 (Natrium /Waasserstoff exchanger), Member 3 VerfÜgung 2.0 VerfÜgung NM_146588 VerfÜgung Olfr1030 VerfÜgung Ech och receptor 1030 VerfÜgung 2.0 VerfÜgung Down-reegelen Genen
NM_008753 VerfÜgung Oaz1 VerfÜgung Ornithine decarboxylase antizyme 1 VerfÜgung 0,31 VerfÜgung NM_027126 VerfÜgung Hfe2 VerfÜgung Hemochromatosis Typ 2 (jonk) (mënschlech homolog) VerfÜgung 0,33 VerfÜgung NM_053206 VerfÜgung Magee2 VerfÜgung Melanoma antigen, Famill E, 2
0,33 VerfÜgung NM_010924 VerfÜgung Nnmt VerfÜgung Nicotinamide N-methyltransferase VerfÜgung 0,41 VerfÜgung NM_026260 VerfÜgung Tctn3 VerfÜgung Tektonik Familljemember 3 VerfÜgung 0,41 VerfÜgung NM_181039 VerfÜgung Lphn1
Latrophilin 1 VerfÜgung 0,43 VerfÜgung NM_008312 VerfÜgung Htr2c VerfÜgung 5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 2C VerfÜgung 0,43 VerfÜgung NM_146667 VerfÜgung Olfr740 VerfÜgung Ech och receptor 740 VerfÜgung 0,44
NM_007550 VerfÜgung Blm VerfÜgung Bloom Syndrom homolog (mënschlech) VerfÜgung 0,44 VerfÜgung NM_011243 VerfÜgung Rarb VerfÜgung Retinoic Seier receptor, Beta VerfÜgung 0,44 VerfÜgung NM_184052 VerfÜgung Igf1
Insulin-wëll Wuesstem Faktor 1 VerfÜgung 0,45 VerfÜgung NM_013893 VerfÜgung Reg3d VerfÜgung regeneréiert islet-ofgeleet 3 0,46 VerfÜgung NM_008645 VerfÜgung Mug1 VerfÜgung Murinoglobulin 1 VerfÜgung 0,46 VerfÜgung Delta
NM_029550 VerfÜgung Keg1 VerfÜgung Nier ausgedréckt Gentherapie 1 VerfÜgung 0,46 VerfÜgung NM_019388 VerfÜgung Cd86 VerfÜgung CD86 antigen VerfÜgung 0,46 VerfÜgung NM_011316 VerfÜgung Saa4 VerfÜgung Serum amyloid A 4 VerfÜgung 0,47 VerfÜgung NM_007811 VerfÜgung Cyp26a1 VerfÜgung Cytochrome P450, Famill 26, eng subfamily, polypeptide 1 VerfÜgung 0,47 VerfÜgung NM_011538 VerfÜgung Tbx6 VerfÜgung T-Këscht 6 VerfÜgung 0,48
NM_011086 VerfÜgung Pip5k3 VerfÜgung Phosphatidylinositol-3-phospate /phosphatidylinositol 5-kinase, Typ III
0.48
NM_133723
Asph
Aspartate-beta-hydroxylase
0.48
NM_001081390
Palld
Palladin, cytoskeletal verbonne FAQ VerfÜgung 0,48 VerfÜgung NM_007858 VerfÜgung Diap1 VerfÜgung Diaphanous homolog 1 (Villäicht sollte) VerfÜgung 0,48 VerfÜgung NM_053271 VerfÜgung Rims2 VerfÜgung regelen synaptic Membran exocytosis 2 VerfÜgung 0,48
NM_153163 VerfÜgung Cadps2 VerfÜgung Ca2 + -dependent activator FAQ fir secretion 2 VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_007541 VerfÜgung Bglap1 VerfÜgung Bone ESO carboxyglutamate FAQ 1 VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_031871 VerfÜgung Ghdc
GH3 Domain wouvun VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_025545 VerfÜgung Aptx VerfÜgung Aprataxin VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_177322 VerfÜgung Agtr1a VerfÜgung Angiotensin II receptor, Typ 1a VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_026872 VerfÜgung Ubap2 VerfÜgung Ubiquitin-verbonne FAQ 2 VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_028045 VerfÜgung Erv3 VerfÜgung Endogenous Realitéit leien 3 VerfÜgung 0,49 VerfÜgung NM_011641 VerfÜgung Trp63 VerfÜgung sozialt Zesummenhang FAQ 63 VerfÜgung 0,49 VerfÜgung Dorënner 3 Hierarchie Käre Analyse vun véier experimentell Gruppe vun MNU-behandelt Mais. Ausdrock Daten aus 303 qualifizéiert Ämter (lénks). Déi véier experimentell Gruppe waren an zwou Kéip (Groups A /C) séiert an (Groups B /D) baséiert op souvill Ausdrock zeréckzeféieren. All hannertenee stellt eng Studiebäihëllefe an all Kolonn stellt eng experimentell Grupp (Groups A-D). Wéi an der Faarw Bar gewisen, beweist gréng an-Regulatioun; rout beweist verwandelt-Regulatioun; a schwaarz Kuuscht keng Verännerung. Drësseg-eent Ämter opgebaut engem Koup vun Ämter up-reegelen nëmmen am Grupp D (riets). VerfÜgung De ganze Resultater vun dëser microarray Analyse hu proposéiert ginn a sinn erhale retrievable aus der Ëffentlechkeet Datebank NCBI Gene Expression Omnibus (Geo) mat der Bäitrëtt Zuel GSE29444 (Prouf Nummer: GSM728857-60). VerfÜgung Chemeschen real-Zäit RT-Hinnen alleguer Analyse vun der Gentherapie Ausdrock Profiler an MNU-behandelt Maus Mamm VerfÜgung rel grouss real-Zäit RT-Hinnen alleguer Analyse vun dräi gewielte Bastelen regulariséiert Genen (Cd177 VerfÜgung, Reg3g VerfÜgung, an Muc13 VerfÜgung) zu H. pylori VerfÜgung -infected an héich-Salz Ernährung-behandelt Mais bestätegt fräi Meenungsäusserung vun Cd177 VerfÜgung an Reg3g VerfÜgung, wéi an Dorënner 2B, mat Differenze gewisen. Obwuel Ausdrock Niveau vun Muc13 VerfÜgung am Grupp D héich war wéi all anere Gruppen, gouf et keng statistesch Bedeitung dorënner (P VerfÜgung = 0,0712 vs. VerfÜgung Group C). VerfÜgung Immunohistochemical Ausdrock vun CD177 zu Mënsch fortgeschratt gastric Cancers a Korrelatioun mat clinicopathological Faktoren VerfÜgung op immunohistochemical Analyse vum Mënsch gastric Kriibs Stoffer, CD177 war an de Schläimhait an cytoplasms vun communal neutrophils net nëmmen observéiert, mä och zu gastric Kriibs Zellen vun zwee drun, an kaum-ënnerscheet adenocarcinomas ( Figur 4A). Cancer Zellen vun signet-Ring Zell Typ (2 Fäll) sech negativ fir CD177. Dorënner 55 gastric Kriibs Fäll, moderéiert ze staark Ausdrock vun CD177 war zu 33 (60.0%) (Table 4) observéiert. Figur 4 Immunohistochemistry fir CD177 zu Mënsch fortgeschratt gastric Kriibs a Korrelatioun mat globale Iwwerliewe Tarif. A: Immunohistochemical Analyse vun CD177 Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs Otemschwieregkeeten. (Enger an b) Negativ staining (keng ze schwaach) fir CD177 zu engem gastric adenocarcinoma. CD177 Ausdrock ass dobäi nëmmen neutrophils iwwerdeems neoplastic Zellen vum Gutt-ënnerscheet (e) oder schlecht-ënnerscheet (b) carcinoma sinn negativ zu infiltrating. Original Vergréisserung, × 100 (inset, × 400). (C an d) Note positiv (moderéiert ze staark) Ausdrock fir CD177 zu gutt-ënnerscheet (c) oder schlecht-ënnerscheet (d) gastric Kriibs Zellen. Original Vergréisserung, × 100 (inset, × 400). B:. Se Kaplan-Meier entwéckele Iwwerliewe Kéiren fir CD177 negativ a positiv gastric Kriibs Fäll VerfÜgung Table 4 CD177 Ausdrock vun gastric carcinomas a seng Korrelatioun mat clinicopathological Faktoren
Case kee
. CD177 Over-expression

Pvalue‡

Positive

Negative

Strong

Moderate

Weak

None

Gastric adenocarcinomas VerfÜgung 55 zu 18 zu 15 zu 17 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung Alter VerfÜgung Joer (heescht ± Fils) VerfÜgung 55,3 ± 10,4 VerfÜgung 60.2 ± 8,13 VerfÜgung 59,8 ± 11,0 VerfÜgung 60,4 ± 13,0 VerfÜgung 0,5039 VerfÜgung Histological Klassifikatioun VerfÜgung Ma /mëttelméisseg-ënnerscheet Typ * VerfÜgung 21 VerfÜgung 6 VerfÜgung 9 VerfÜgung 4 VerfÜgung 2 VerfÜgung 0,1904 VerfÜgung LINN-ënnerscheet /Signet-Ring Zell Typ ** VerfÜgung 34 zu 12 VerfÜgung 6 VerfÜgung 13 VerfÜgung 3 VerfÜgung Déift vun Invasioun † VerfÜgung T1-3
27 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 10 zu 10 VerfÜgung 2 VerfÜgung 0,2011 VerfÜgung 26 VerfÜgung T4 VerfÜgung 11 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 7 VerfÜgung 3 VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung N0 VerfÜgung 6 VerfÜgung 1 VerfÜgung 2 VerfÜgung 2 VerfÜgung 1 VerfÜgung 0,7869 VerfÜgung N1-3 VerfÜgung 49 zu 17 zu 13
15 VerfÜgung 4 VerfÜgung * Lauren d'intestinal Typ, war ** Lauren d'diffusen Typ, † Case Zuel bis fofzeg-dräi reduzéiert, well d'Déift vun Invasioun net zu zwee Fäll séiert war, ‡ ANOVA an Chi-Feld Test huet gesuergt vum Alter an anere Facteuren, bzw.. VerfÜgung de Suivi Period vun de Patienten aus 9 bis 606 Wochen (Steiren = 83 Wochen) gounge. Fënnef-Joer Iwwerliewe Tariffer fir CD177-positiv an negativ waren 39,4% an 18,2%, respektiv. Vun der Kaplan-Meier Iwwerliewe rop Analyse, war CD177-positiven Ausdrock mat besser allgemeng Iwwerliewe (P VerfÜgung = 0,0294, Log-Platz Test) assoziéiert (Dorënner 4B). Et war keng statistesch relevant Korrelatioun vun CD177 Ausdrock mam Alter, histological Klassifikatioun, Déift vun Invasioun, an lymph Node Metastasen (Table 4). VerfÜgung Multivariate Analyse fir globale Iwwerliewe vum Mënsch Fäll gastric Kriibs VerfÜgung der proportionaler Risikoe Cox Ausschöpfung Modell , multivariate Analyse vun clinicopathological Verännerlechen, dorënner de Patient Alter, entholl histological Klassifikatioun, Invasioun Déift, lymph Node Metastasen, an CD177 Ausdrock (Table 5), réischt d'lescht eng onofhängeg Faktor fir globale Iwwerliewe (P VerfÜgung = 0.0323) gin . All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Curcumin verbessert Ausdrock vun SCF /c-Kit duerch oxidative Stress attenuating an NF-κB Aktivatioun vun gastric Stoffer vun Diabetiker gastroparesis rats
• Ernährung hunn erhéigt de Risiko vun Mo. Kriibs mortality