Studio clinico di nodi linfatici raccolta con nanoparticelle di carbonio nel cancro gastrico avanzato: uno studio randomizzato prospettico

Studio clinico di nodi linfatici raccolta con nanoparticelle di carbonio nel cancro gastrico avanzato: uno studio prospettico randomizzato
Abstract
sfondo
L'obiettivo di questo studio è quello di valutare l'efficacia e la sicurezza di nanoparticelle di carbonio (CNPS) per la raccolta della linfa nodi (LNS) nei casi di cancro gastrico avanzato (AGC).
Metodi
pazienti non precedentemente trattati con resecabile AGC erano eleggibili per l'inclusione in questo studio. Tutti i pazienti sono stati assegnati in modo casuale a due sottogruppi. Nel gruppo sperimentale, 1,0 mL di CNP è stato iniettato nel sottosierosa dello stomaco attorno al tumore prima gastrectomia con D2 dissezione. La stessa procedura è stata effettuata direttamente senza alcun materiale colorante nel braccio di controllo. Dopo l'intervento chirurgico, LNs sono state raccolte, LNs colorati sono stati contati, ei diametri sono stati misurati dallo sperimentatore e patologo.
Risultati
Trenta pazienti sono stati arruolati nello studio. Abbiamo osservato effetti avversi gravi correlati a iniezione CNP. Il tasso di LNs macchiate era 46,6%. Il numero medio di linfonodi raccolte sia stata maggiore nel sperimentale rispetto al gruppo di controllo (38.33 vs 28.27, p = 0,041
). Un diametro più piccolo di LN è stato registrato nel braccio sperimentale (3,32 vs 4,30 millimetri, p = 0,023
). Inoltre, abbiamo sviluppato un modello per prevedere il numero totale di LNs sulla base dei dati provenienti da LNs CNP-colorato e LNs metastatiche (mln)
. Conclusioni
CNP è un materiale sicuro. I chirurghi possono raccogliere più LNs nei pazienti con AGC. La raccolta di un maggior numero di piccoli diametri di LNs può essere utile. Ulteriore studio è garantito per dimostrare la praticità del modello.
Parole
nanoparticelle di carbonio avanzata gastrica cancro D2 gastrectomia LN raccolta L'abstract di questo articolo è stato accettato per la presentazione del manifesto ai 2015 Gastrointestinal Cancers Symposium.
Sfondo
Anche se il cancro gastrico è diminuito da essere il più comune di cancro nel 1975 ad essere la quinta neoplasia più comune nel 2012, rimane la terza causa di morte per cancro in tutto il mondo, contribuendo a 723.000 decessi all'anno [1, 2]. Lo screening e la consapevolezza ampia base della malattia ha migliorato i tassi di identificazione di tumori in fase iniziale e di sopravvivenza superiore. Tuttavia, rispetto ad alcuni paesi sviluppati, come il Giappone, la maggior parte dei pazienti con diagnosi di cancro gastrico avanzato (AGC) in Cina, che rappresenta una sfida trattamento.
Gastrectomia con D2 linfonodi (LN) dissezione è il trattamento standard per AGC in Asia a causa del beneficio di sopravvivenza e basso tasso di complicanze [3, 4]. Un simile risultato studio è stato pubblicato di recente con dati provenienti da paesi occidentali [5]. Non c'era nessuna polemica sulla necessità di dissezione dei linfonodi. Alla luce di orientamenti, esame istopatologico di almeno 15 linfonodi regionali è necessario assegnare precisione la categoria N per carcinoma gastrico. Curiosamente, senza dubbio riflette il contributo delle migrazioni palco e sezionare LNs più metastatici, che rappresenta la qualità del funzionamento, la sopravvivenza globale (OS) ha migliorato in modo incrementale con conta LN superiori [6-8]. Sulla base di questi risultati, abbiamo cercato di sviluppare un metodo per ottenere più LNs. In altri studi, traccianti linfatici, compresi i materiali coloranti, sono stati utilizzati per soddisfare questa esigenza [9]. nanoparticelle di carbonio (CNPS) sono un materiale praticabili per i nodi linfatici raccolta nel nostro reparto.
CNPS con una dimensione media di 150 nm può essere assunto fino selettivamente dai vasi linfatici dopo l'iniezione nel tessuto. I drenanti linfonodi regionali sono in tal modo di colore nero, che può fornire una guida per il chirurgo durante dissezione linfonodale e aiutare linfonodi raccolto dopo l'intervento chirurgico, LNs soprattutto più piccoli. Tuttavia, non vi sono prove sufficienti per giustificare la sua efficacia a questi fini. Pertanto, abbiamo effettuato uno studio prospettico randomizzato controllato sul linfonodo colorazione vitale per LN dissezione e la raccolta in AGC.
Metodi
Pazienti
pazienti AGC resecabile Trentadue 20- a 80-year-old da dicembre 2013 al giugno 2014 diagnosticata mediante biopsia patologica, messo in scena dalla tomografia computerizzata (CT) e l'ecografia endoscopica (EUS), che non ha avuto un precedente trattamento, sono stati scelti per questa prova. Tutti i pazienti sono stati diagnosticati da un team multidisciplinare e hanno fornito il consenso informato scritto prima dell'intervento chirurgico. I criteri di esclusione sono stati i seguenti: R0 resezione non è stato raggiunto da gastrectomia con linfoadenectomia D2 secondo le linee guida giapponese di trattamento del cancro gastrico 2010 (ver.3) [10], che hanno una reazione allergica, essere incinta, o di essere rivelate stadio T1 o M1 dopo l'intervento chirurgico. sono stati esclusi due pazienti; uno è stato diagnosticato come patologicamente nella fase di T1 e l'altro era citologia positiva da un approccio laparoscopico. Così, 30 pazienti sono stati analizzati. La Figura 1 mostra lo schema di prova. Figura. 1 schema di prova
CNP colorazione, gastrectomia D2 aperto con dissezione, e linfonodi raccolta
I pazienti sono stati arruolati prima dell'operazione in base a una tabella randomizzato generato dallo statistico (Yan Zhang). Tutti sono stati assegnati in modo casuale a due sottogruppi. Nel gruppo sperimentale, 1.0 mL di CNP (nanoparticelle di carbonio iniezione sospensione, 1 mL /50 mg, Chongqing, Cina) è stato iniettato nel sottosierosa dello stomaco in cinque punti attorno al tumore in media (0,2 mL in ogni punto cardinale adiacente la lesione, Fig. 2a) 10 minuti prima gastrectomia D2 aperto con dissezione. In gastrectomia distale (DG, Fig. 2c), un margine prossimale libero di almeno 4 cm è stato necessario secondo le linee guida di trattamento del cancro gastrico del cancro gastrico Associazione giapponese (ver. 3). En bloc escissione è stato fatto nei linfonodi di stazione nn. 1, 3, 4SB, 4d, 5, 6, 7, 8, 9, 11p, 12a, e 14v se metastasi era altamente sospetto in nessun. 6. Inoltre, nn. 2, 11d, e 10 sono stati asportato a gastrectomia totale (TG, Fig. 2b). Lo stesso gastrectomia è stata effettuata direttamente senza alcun materiale colorante nel braccio di controllo. Immagini o video della chirurgia sono stati valutati da tutta la squadra nel nostro reparto dopo l'operazione per garantire che una gastrectomia standard D2 è stata eseguita. Figura. 2 a nanoparticelle di carbonio sono stati iniettati nel sottosierosa dello stomaco intorno al tumore; le frecce
mostrare i siti di iniezione. b D2 dissezione eseguita in gastrectomia totale; Stazione della milza-conservazione no. 10 è stato asportato. SV
vasi splenici, PGA
posteriore arteria gastrica. c D2 dissezione eseguita in gastrectomia distale; sono mostrati porzioni di LNs sezionato. CHA
dell'arteria epatica comune, LGA
arteria gastrica sinistra, LGV
lasciato vena gastrica, RGV
giusti vasi gastrici, DS
moncone duodenale.
Dopo l'intervento chirurgico, l'investigatore (Sheng Ao ) raccolti i linfonodi con i patologi (10 min per i campioni di ciascun paziente) e allo stesso tempo contato il LNS colorati. I tessuti sono stati fissati in formalina e inclusi in paraffina per l'esame istologico con H & E colorazione. Poi, i diametri di ogni LN sono stati misurati.
Questo studio è stato progettato come un unico centro prospettico sperimentazione clinica. La procedura è stata approvata dal Comitato Etico di Pechino Cancer Hospital. Il protocollo dello studio è stato pubblicato su ClinicalTrials.gov (ID: NCT02123407).
Studio di design
L'outcome primario è stato quello di calcolare il numero di linfonodi raccolto. La seconda misura di esito era il diametro dei LNS raccolte, che aveva lo scopo di ottenere la massima dimensione in modo da riflettere il grado di difficoltà di raccogliere LN. Inoltre, il tempo di funzionamento, sanguinamento, e le complicanze sono stati confrontati tra i due gruppi per confermare la sicurezza di CNP.
Rispettivamente, il numero medio di linfonodi abbiamo raccolto in avanzati casi di cancro gastrico senza CNP era 28.76 ± 1.14. La dimensione del campione è stata fissata a 30 (15 per gruppo) basato sul presupposto che il numero atteso di LNs dovrebbe aumentare almeno uno, con un alpha due lati del 5% e almeno il 90% di potenza. La durata prevista per competenza è stato di 7 mesi. Tutte le analisi statistiche sono state condotte con il software SPSS 17.0.
Risultati
I fattori di fondo, esiti perioperatorie, reperti patologici, e risultati operativi relativi sono stati mostrati in tabella 1. L'età, indice di massa corporea, la posizione, la chirurgia, e lo stadio patologico di tumore non erano significativamente differenti nei due gruppi, né sono state il tempo di funzionamento, sanguinamento, e complicazioni. Nessun allergie e reazioni tossiche o effetti collaterali della iniezione di CNP sono stati registrati in qualsiasi case.Table 1 Le caratteristiche cliniche dei pazienti
variabile
gruppo Modelli
gruppo sperimentale

p controllo
valore
*
Sesso
Maschio
10 (9.5)
9 (9,5)
0,705
femminile
5 (5,5)
6 (5.5)
Età (anni)
> 70 Pagina 2 (1.5)
1 (1,5)
50-70
11 ( 9.5) Pagina 8 (9.5)
0.380
< 50 Pagina 2 (4.0) Pagina 6 (4,0)
BMI
25.45 ± 3.60
23.80 ± 2.44
0,155
Lauren tipo
intestinale
3 (3.0) Pagina 3 (3.0)
Nonintestinal
12 (12.0)
12 (12.0)
1.000
Location
Alto
5 (4.5) Pagina 4 (4.5)
Medio
2 (3.0) Pagina 4 (3.0)
0,788
inferiore Pagina 8 (7.5) Pagina 7 (7.5)
Chirurgia
DSG
7 (7.0) Pagina 7 (7.0)
TG
8 (8,0) Pagina 8 (8,0)
1.000
fase
IB
0 (1.0) Pagina 2 (1.0)
II
5 (6.0) Pagina 7 (6.0)
0.242
III
10 (8.0) Pagina 6 (8,0)
tempo di funzionamento (min)
214,7 ± 42,9
212,9 ± 55,7
0,922
Bleeding (ml)
110.0 ± 63.2
98,7 ± 66,2
0.635
Complication
Sì
5 (4.0) Pagina 3 (4.0)
No
10 (11.0)
12 (11.0)
0,682
* Analizzato con il test t di Student
o il test χ 2
LNS raccolte di ogni paziente e ogni stazione sono stati descritti in Fig. 3 bis, c, dove le differenze significative è stato trovato tra i nn stazione. 1 e 3 nei due gruppi. Il tasso di LNs macchiate era 46,6% nel braccio sperimentale (Fig. 3b). Il numero medio di linfonodi raccolte sia stata maggiore nel sperimentale rispetto al gruppo di controllo (38.33 vs 28.27, p = 0.041
, tabella 2). Nessuna differenza significativa è stata trovata sulla presenza di metastasi salto tra i due gruppi (0/15 vs 0/15). Il rapporto dei pazienti LN metastasi-positivi era superiore a quello del gruppo di controllo (14/15 vs 7/15, p
= 0,014), mentre il numero di linfonodi metastatici (mln) non era diversa (p
= 0,126, Fig. 3b). Per determinare il motivo per cui il numero di LN era più grande con il trattamento CNP, sono state eseguite ulteriori analisi esplorative di diametri LN (Fig. 4a). Nel gruppo sperimentale, diametri LN patologiche compreso tra 0,5 e 15,0 millimetri, con una media di 3,32 mm. Non inaspettatamente, un diametro medio di 4,30 mm con una da 0,5 a 20,0 mm è stato registrato nel gruppo di controllo (Tabella 3). Un diametro più piccolo nella stazione nn. 1 e 3 si è osservato nel braccio sperimentale, anche se questo non era statisticamente significativa (Fig. 4b, c). Figura. 3 a Harvested LNs da ogni paziente. b Numero totale di LNs raccolte e LNs metastatici nei gruppi sperimentale e di controllo. c LNs raccolto da ogni stazione
Tabella 2 numero medio di linfonodi raccolte sia
Numero
Mezzi di linfonodi
p valore
gruppo sperimentale
15
38.33
gruppo di controllo
15
28.27
0,041
Fig. 4 un mezzo diametro di LNs in ciascun paziente. b medio diametro di LNs nella stazione n. 3. C diametro medio di linfonodi nella stazione n. 1
Tabella 3 diametro di LNs raccolte sia Significa
Numero
Mezzi di diametro (mm)
p valore
gruppo sperimentale
15
3.32
gruppo di controllo
15
4.30
0.023
Abbiamo cercato di progettare un modello per prevedere il numero totale di LNs sulla base dei dati di LNs CNP-colorazione e mln utilizzando metodo statistico modello di regressione lineare (tabella 4). Questo modello ha dimostrato di essere la seguente equazione lineare: $$ Y = 11,628 + 1.062X1 + 1.126X2 $$ Tabella 4 modello per prevedere il numero totale di LNs
Modello
β

SE
t
p
Constanta
11,628
7,839
1.483
0,164
CNP LNs -staining
1.062
0,329
3.223
0.007
LNs metastatici
2.373
1.126
0,475 0,035

R
piazza
0,537 dimensione del campione

15
variabile dipendente: numero di linfonodi (Y
); predittori: LNs costante, CNP-colorazione (X
1), LNs metastatici (X Pagina 2)
Agender, età, indice di massa corporea, la posizione, la chirurgia, tempo di funzionamento, sanguinamento, diametro, e stadio patologico sono stati inclusi traccianti
Discussione
linfatico, come il blu di metilene, verde indocianina, e una tecnica di radiazione intraoperatoria con una sonda gamma, sono stati ampiamente utilizzati come guida per la ricerca dei linfonodi e la dissezione per alcuni anni [11, 12]. Inizialmente è stato confermato che traccianti linfatici sono stati utili per migliorare OS raccogliendo più LNs. In realtà, entrambi chirurghi e patologi hanno difficoltà LN raccolta a causa del loro carico di lavoro occupato, in particolare in Cina, che ha il maggior numero di persone nel mondo. Inoltre, nessun materiali ideali sono stati trovati a causa della limitazione della loro efficienza colorazione, relativamente complicato flusso linfatico del sistema gastrico, ferita di radiazione, e la spesa. particelle di carbonio, che sono convenienti, poco costoso e ampiamente disponibile in ospedali generali, sono stati utilizzati da altri per LN colorazione e hanno dimostrato di essere sicuri [13, 14]. Allo stesso modo, nel nostro studio, non CNP-correlati sono verificati effetti collaterali, non vi era nessun sanguinamento in più, la lunghezza di intervento chirurgico non è stato esteso, e non sono state osservate complicazioni extra.
Questo studio prospettico randomizzato e controllato è stato principalmente progettato per testare l'efficienza di CNP. Nel processo di ricerca progettuale, metodo di iniezione è stato considerato. Poiché vasi linfatici sono collegati tra loro da un ramo comunicante nella parete gastrica che si espande in verticale, molti ricercatori sostenevano che metodi di iniezione erano ugualmente efficaci nel linfonodo colorazione in AGC [15, 16]. Abbiamo ottenuto risultati simili in un esperimento preliminare; pertanto, abbiamo scelto di effettuare l'iniezione colorante sottosierosa, che è un metodo più semplice e più efficace durante la chirurgia aperta. Il nostro tasso di colorazione è stata del 46,6%, leggermente inferiore rispetto al tasso riportato in studi giapponesi circa cancro gastrico precoce [17]. Ci potrebbero essere due ragioni di questa differenza. In primo luogo, i vasi linfatici maggiori sono stati bloccati dal tumore in AGC. D'altro canto, più LNs dalla stazione N2 stati sezionati in AGC per lo sviluppo della chirurgia gastrica, che erano più difficili da macchiare causa della distanza e linfatica struttura complessa nave.
Ovviamente, più LNs sono state raccolte in pazienti con CNP colorazione (38.33 vs 28.27). La differenza d'accordo con la conclusione di Catarci utilizzando CH40 (un tipo di materiale colorante) [18]. Tuttavia, abbiamo ottenuto un maggior numero di linfonodi e meglio gastrectomia D2 di serie con dissezione. Tuttavia, l'analisi dei sottogruppi ha mostrato alcuna altre mln sono state raccolte nel gruppo sperimentale, che potrebbe essere dovuto alle dimensioni del campione. D'altra parte, il rapporto più elevato di pazienti LN metastasi positivi da quella del gruppo di controllo ha indicato che CNP potrebbe contribuire a migliorare il tasso di scoperta di LN metastatico, ma più studi sono necessari per dimostrare il risultato.
Per esplorare perché siamo riusciti a raccogliere più LNs con CNP, abbiamo misurato il diametro massimo di ogni LN per un risultato soddisfacente. Solo noi offriamo i dati in dettaglio. Dal punto di vista del funzionamento, in blocco escissione di linfonodi potrebbe essere completa perché erano distinte più facilmente dai tessuti adiposi se colore nero. Inoltre, alcuni piccoli linfonodi (< 2.0 mm) non sarebbero stati lasciati (Fig. 5) nel caso di micrometastasi, che potrebbe avere un'influenza molto importante sulla N di sosta e di trattamento delle strategie. Abbiamo anche capito che la più grande differenza è accaduto nella stazione nn. 1 e 3. Anche se non statisticamente significativo, il valore clinico non dovrebbe essere ignorato perché più piccoli LNs sono state raccolte. Nel frattempo, pregiudizi nella nostra analisi dei sottogruppi era inevitabile in modo che più gli studi dovrebbero essere progettati per fornire tali dati su ogni stazione LN. Figura. 5 piccoli LNs sono state colorate da nanoparticelle di carbonio in modo che essi non sarebbero stati lasciati in caso di micrometastasi (frecce
mostrano i piccoli LNS)
Infine, abbiamo istituito un modello di previsione per valutare la qualità delle operazioni, se fosse CNP usato. Dal momento che l'importanza di statistiche è stato notato, sempre più scienziati, come Gretschel [19], hanno combinato con la medicina per risolvere i problemi clinici. In una certa misura, il nostro modello può aiutare i chirurghi rivedere la loro opera di rimozione LN per migliorare le loro competenze chirurgiche. Per esempio, i chirurghi possono confrontare i loro LNs resecati al numero predizione calcolato in questo modello per valutare la qualità del funzionamento. Tuttavia, questo lavoro dovrebbe essere testato in più casi.
Conclusioni
I nostri risultati hanno indicato che CNP è un materiale sicuro e che i chirurghi potessero raccogliere più LNs con esso in caso di AGC, che potrebbero trarre beneficio dalla raccolta di un aumento numero di linfonodi più piccoli. Il modello che abbiamo costruito in questo studio potrebbe svolgere un ruolo nella valutazione della capacità del chirurgo e la loro formazione. Tuttavia, sono necessari ulteriori studi per dimostrare la sua praticità.
Note
L'abstract di questo articolo è stato accettato per la presentazione del manifesto per i tumori gastrointestinali 2015 Symposium.
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Questa ricerca è stata sostenuto da Comune di Pechino Scienza e della Tecnologia Foundation Commissione (D141100000414002) e il Programma di alta tecnologia nazionale di ricerca e sviluppo della Cina (863 Program) (2012AA02A203-B01)
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concorrenti. interessi
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.
autori contributi
JJ concepito dello studio. ZL e SA hanno partecipato alla progettazione dello studio, i dati raccolti, ha eseguito l'analisi statistica, e redatto il manoscritto. ZB, AW, XW, FS, XJ, YZ, e ZX partecipato alla sua coordinazione e ha contribuito alla redazione del manoscritto. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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