Estudio clínico de la recolección de los ganglios linfáticos con nanopartículas de carbono en el cáncer gástrico avanzado: un estudio aleatorizado de trial

clínico prospectivo de recolección de los ganglios linfáticos con nanopartículas de carbono en el cáncer gástrico avanzado: un estudio prospectivo aleatorizado
Resumen Antecedentes
Francia El objetivo de este estudio es evaluar la eficacia y seguridad de las nanopartículas de carbono (CNPS) para la recolección de los ganglios linfáticos (LNS) en los casos de cáncer gástrico avanzado (AGC).
Métodos
los pacientes no tratados previamente con AGC resecable fueron elegibles para su inclusión en este estudio. Todos los pacientes fueron asignados aleatoriamente a dos subgrupos. En el grupo experimental, 1,0 ml de CNP se inyectaron en la subserosa del estómago alrededor del tumor antes de la gastrectomía con disección D2. El mismo procedimiento se realiza directamente sin cualquier material colorante en el brazo de control. Después de la cirugía, se recogieron los LN, LN colores se contaron, y los diámetros se midieron por el investigador y el patólogo.
Resultados
Treinta pacientes fueron incluidos en el estudio. No se observaron efectos adversos graves relacionados con la inyección CNP. La velocidad de los LN manchadas fue del 46,6%. El número medio de los LN cosechada fue mayor en el experimental que en el grupo control (38,33 vs 28,27, p = 0,041
). Un diámetro más pequeño de los LN se registró en el grupo experimental (3,32 vs 4,30 mm, p = 0,023
). Además, hemos desarrollado un modelo para predecir el número total de los LN en base a los datos de los LN-manchado CNP y los LN metastásicos (MLN).
Conclusiones
CNP es un material seguro. Los cirujanos podrían cosechar más LN en pacientes con AGC. La cosecha de un mayor número de diámetros más pequeños de los LN puede ser beneficioso. Nuevos estudios se requieren para demostrar la practicidad del modelo.
Palabras clave
Las nanopartículas de carbono avanzada gástrica D2 gastrectomía cáncer LN cosechar El resumen de este trabajo ha sido aceptado para su presentación del cartel de los cánceres gastrointestinales Simposio 2015.
Antecedentes
a pesar de que el cáncer gástrico disminuyó de ser el cáncer más común en 1975 para ser la quinta neoplasia más común en 2012, sigue siendo la tercera causa principal de muerte por cáncer en todo el mundo, lo que contribuye a 723.000 muertes al año [1, 2]. La detección y toma de conciencia amplia de la enfermedad ha mejorado las tasas de identificación de los cánceres en etapa temprana y una supervivencia superior. Sin embargo, en comparación con algunos países desarrollados, como Japón, la mayoría de los pacientes son diagnosticados con cáncer gástrico avanzado (AGC) en China, lo que representa un desafío tratamiento.
Gastrectomía con disección de ganglios linfáticos D2 (LN) es el tratamiento estándar para el AGC en Asia debido al beneficio en la supervivencia y la baja tasa de complicaciones [3, 4]. Un resultado similar fue publicado estudio recientemente con los datos de los países occidentales [5]. No hubo controversia sobre la necesidad de disección de ganglios linfáticos. A la luz de las directrices, el examen histopatológico de al menos 15 ganglios linfáticos regionales es necesario asignar con precisión la categoría N para el carcinoma gástrico. Curiosamente, sin duda, lo que refleja la contribución de la migración escenario y la disección de los LN más metastásicos, lo que representa la calidad de la operación, la supervivencia global (SG) mejoró gradualmente con un mayor número de LN [6-8]. Sobre la base de estos resultados, hemos intentado desarrollar un método para obtener más LN. En otros estudios, trazadores linfáticos, incluyendo materiales de colorante, se han utilizado para satisfacer esta necesidad [9]. Las nanopartículas de carbono (CNPS) son un material viable para la recolección de los ganglios linfáticos en nuestro departamento.
CNP con un tamaño medio de 150 nm se puede recoger de forma selectiva por los vasos linfáticos después de la inyección en el tejido. Los ganglios linfáticos de drenaje regionales están, por ello color negro, que pueden servir de guía al cirujano durante la disección de los ganglios linfáticos y ayudar a los ganglios linfáticos de la cosecha después de la cirugía, los LN especialmente los más pequeños. Sin embargo, no hay pruebas suficientes para justificar su eficacia para esos fines. Por lo tanto, se realizó un ensayo controlado aleatorizado prospectivo sobre los ganglios linfáticos tinción vital para LN disección y la cosecha de AGC.
Métodos Pacientes

Treinta y dos de 20 a 80 años de edad, pacientes de AGC resecables a partir de diciembre 2013 junio de 2014 diagnosticado por biopsia patológica, puesta en escena por tomografía computarizada (TC) y la ecografía endoscópica (EUS), que no tenía tratamiento previo, fueron escogidos para este ensayo. Todos los pacientes fueron diagnosticados por un equipo multidisciplinar y dieron su consentimiento informado por escrito antes de la cirugía. Los criterios de exclusión fueron los siguientes: resección R0 no se logró la gastrectomía con linfadenectomía D2 según las directrices de tratamiento de cáncer gástrico japonés 2010 (ver.3) [10], que tienen una reacción alérgica, estar embarazada, o ser demostrado ser en estadio T1 o M1 después de la cirugía. Se excluyeron dos pacientes; uno fue diagnosticado patológicamente como en la etapa T1 y el otro era citología positiva por un abordaje laparoscópico. Por lo tanto, se analizaron 30 pacientes. La Figura 1 muestra el esquema de ensayo. Higo. 1 esquema de prueba gratis tinción CNP, gastrectomía abierta con la disección D2, y la cosecha de los ganglios linfáticos
Los pacientes se inscribieron antes de la operación de acuerdo con una tabla aleatoria generada por el estadístico (Yan Zhang). Todos fueron asignados aleatoriamente a dos subgrupos. En el grupo experimental, 1,0 ml de CNP (nanopartículas de carbono de inyección de suspensión, 1 ml /50 mg, Chongqing, China) se inyectó en la subserosa del estómago en cinco puntos alrededor del tumor en promedio (0,2 ml en cada punto cardinal adyacente a la lesión, la Fig. 2a) 10 minutos antes de la gastrectomía abierta con la disección D2. En la gastrectomía distal (DG, Fig. 2c), un margen proximal libre de al menos 4 cm era necesario de acuerdo a las guías de tratamiento del cáncer gástrico de la Asociación Japonesa del Cáncer Gástrico (ver. 3). En bloque escisión se hizo en los ganglios linfáticos de la estación nn. 1, 3, 4SB, 4D, 5, 6, 7, 8, 9, 11P, 12a, y 14v si la metástasis era altamente sospechoso de no. 6. Además, nos. 2, 11d, y 10 fueron resecados en gastrectomía total (TG, Fig. 2b). Lo mismo gastrectomía se realiza directamente sin ningún material colorante en el brazo de control. Fotos o videos de la cirugía fueron evaluados por el equipo completo en nuestro departamento después de la operación para asegurarse de que se realizó una gastrectomía norma D2. Higo. 2 a nanopartículas de carbono se inyectaron en la subserosa del estómago alrededor del tumor; las flechas
muestran los sitios de inyección. b disección D2 lleva a cabo en una gastrectomía total; estación de bazo de preservación no. 10 fue resecado. SV
vasos esplénicos, PGA
arteria gástrica posterior. c disección D2 realiza en gastrectomía distal; se muestran partes de los LN disecados. CHA
arteria hepática común, LGA
arteria gástrica izquierda, LGV
dejó vena gástrica, RGV
vasos gástricos derechos, DS
muñón duodenal.
Después de la cirugía, el investigador (Sheng Ao ) cosechado los ganglios linfáticos con los patólogos (10 min para las muestras de cada paciente) y al mismo tiempo contado los LN de colores. Los tejidos se fijaron en solución de formalina y embebidos en parafina para el examen histológico con H & E tinción. A continuación, se midieron los diámetros de cada LN.
Este estudio se diseñó como un ensayo clínico prospectivo, de un solo centro. El procedimiento fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital de Cáncer de Beijing. El protocolo de estudio fue lanzado en ClinicalTrials.gov (ID: NCT02123407).
Estudio de diseño Francia El objetivo principal fue el de calcular el número de los LN cosechado. La segunda medida de resultado fue el diámetro de la LNS cosechados, cuyo objetivo era obtener la dimensión máxima para reflejar el grado de dificultad de recoger los LN. Además, el tiempo de operación, el sangrado y las complicaciones se compararon entre los dos grupos para confirmar la seguridad del CNP.
Respectivamente, el número medio de ganglios linfáticos que se cosecha en los casos de cáncer gástrico avanzado sin CNP fue 28.76 ± 1.14. El tamaño de la muestra se fijó en 30 (15 de cada grupo), basado en el supuesto de que el número esperado de los LN debería aumentar en al menos uno, con un alfa de dos caras de 5% y al menos 90% de potencia. La duración prevista de devengo fue de 7 meses. Todos los análisis estadísticos se realizaron con el software SPSS 17.0
. Resultados
Los factores de fondo, los resultados perioperatorios, hallazgos patológicos, y los resultados relacionados con la operación, se muestra en la Tabla 1. La edad, el IMC, la ubicación, la cirugía y el estadio patológico de tumor no fueron significativamente diferentes en los dos grupos, ni eran el tiempo de funcionamiento, hemorragias y complicaciones. No hay alergias y reacciones tóxicas o efectos secundarios de la inyección de CNP se registraron en cualquier case.Table 1 Características clínicas de los pacientes
grupo Patrón
variable
Grupo experimental

control
p
valor *
Sexo Masculino

10 (9,5) página 9 (9,5): perfil del 0,705
Mujer
5 (5.5) página 6 (5.5)
Edad (años) Hotel > 70 página 2 (1.5)
1 (1,5): perfil del 50-70 página 11 ( 9.5): perfil 8 (9,5) 0,380
Hotel < 50 página 2 (4.0) página 6 (4,0)
IMC
25.45 ± 3.60 23.80 ± 2.44

0.155
Lauren tipo
intestinal Estrellas: 3 (3.0) página 3 (3,0)
no intestinal página 12 (12,0) página 12 (12,0) 1.000

Ubicación y superior página 5 (4,5) página 4 (4,5)
Oriente página 2 (3.0) página 4 (3,0) 0,788

Baja página 8 (7.5) página 7 (7.5)
Cirugía
DSG página 7 (7.0) página 7 (7.0)
TG página 8 (8,0) página 8 (8,0)
1.000
Etapa IB

0 (1,0) página 2 (1.0)
II página 5 (6.0) página 7 (6.0)
0,242
III
10 (8,0) página 6 (8,0)
tiempo de funcionamiento (min)
214,7 ± 42,9 212,9 ± 55,7

0,922
Sangrado (ml)
110,0 ± 63,2 98,7 ± 66,2

0,635
complicación
Sí página 5 (4.0) página 3 (4,0)
Sin
10 (11,0) 12
(11.0)
0.682
* Analizado por t
prueba de Student o la prueba de χ
2 el SIN cosechadas de cada paciente y cada estación fueron descritos en la figura. 3a, c, donde las diferencias significativas se podían encontrar entre los números de estación. 1 y 3 en los dos grupos. La velocidad de los LN manchadas fue del 46,6% en el grupo experimental (Fig. 3b). El número medio de los LN cosechada fue mayor en el experimental que en el grupo control (38,33 vs 28,27, p = 0,041
, Tabla 2). No se encontraron diferencias significativas en la presencia de metástasis no continuas entre los dos grupos (0/15 vs 0/15). La relación de los pacientes LN metástasis-positivas fue mayor que la del grupo control (14/15 vs 7/15, p
= 0,014), mientras que el número de los LN metastásico (MLN) no fue diferente (p
= 0,126, Fig. 3b). Para determinar por qué el número de los LN fue mayor con el tratamiento CNP, se realizaron análisis exploratorios adicionales de diámetros LN (Fig. 4a). En el grupo experimental, los diámetros LN patológicos variaron desde 0,5 hasta 15,0 mm, con una media de 3,32 mm. Como era de esperar, un diámetro medio de 4,30 mm con un rango de 0,5 a 20,0 mm se registró en el grupo de control (Tabla 3). Un diámetro más pequeño en la estación de nos. 1 y 3 se puede observar en el grupo experimental, aunque esto no fue estadísticamente significativa (Fig. 4b, c). Higo. 3 a los LN cosechadas de cada paciente. b Número total de los LN LN cosechadas y metastásicos en los grupos experimentales y de control. c LN cosechadas de cada estación de
Tabla 2 Número medio de los LN cosechados
Número
Medios de ganglios linfáticos
p
valor
grupo experimental grupo control
15
38.33
15
28,27
0,041
Fig. 4 a diámetros medios de los LN en cada paciente. b Diámetro medio de las redes locales en la estación no. 3. ç diámetro medio de las redes locales en la estación no. 1 | Tabla 3 Diámetro medio de las redes locales cosechados
Número
Medios de diámetro (mm) guía empresas p
valor
Grupo experimental
15
3,32
grupo de control
15
4,30
0,023
Hemos tratado de diseñar un modelo para predecir el número total de los LN en base a los datos de los LN CNP-tinción y MLN mediante la utilización de método de modelo de regresión lineal estadística (Tabla 4). Este modelo resultó ser la siguiente ecuación lineal: Y = $$ 11.628 + + 1.062X1 1.126X2 $$ Tabla 4 Modelo para predecir el número total de los LN
Modelo
β

SE
t
p
Constanza
11.628
7.839 1.483

0,164
CNP LN -staining
1,062 0,329

3.223 0.007

LN metastásicos
2.373 1.126

0,475 0,035

R
cuadrado
0,537
tamaño de la muestra
15
Variable dependiente: número de ganglios linfáticos (Y
); predictores: LN constante, CNP-tinción (X
1), (X página 2)
Agender, edad, índice de masa corporal, la ubicación, la cirugía, el tiempo de operación, sangrado, diámetro y se incluyeron estadio patológico LN metastásicos trazadores
Discusión
linfático, como el azul de metileno, verde de indocianina, y una técnica de radiación intraoperatoria con una sonda gamma, habían sido ampliamente utilizados como guía para la búsqueda de la disección de los ganglios linfáticos y desde hace algunos años [11, 12]. Se confirmó que inicialmente trazadores linfáticos fueron útiles para mejorar la SG cosechando más LN. De hecho, ambos cirujanos y patólogos tienen LN recolección problemas debido a su carga de trabajo ocupados, especialmente en China, que tiene el mayor número de personas en el mundo. Además, no hay materiales ideales fueron encontrados debido a la limitación de su eficiencia de tinción, el flujo linfático relativamente complicada del sistema gástrico, lesión por radiación, y los gastos. Las partículas de carbono, que son convenientes, barata y ampliamente disponible en los hospitales generales, han sido utilizados por otros para la tinción de LN y fueron demostrado ser segura [13, 14]. Del mismo modo, en nuestro estudio, relacionados CNP-no se produjeron efectos secundarios, no hubo sangrado adicional, la duración de la cirugía no se extendió, y no se observaron complicaciones adicionales.
Este ensayo controlado aleatorizado prospectivo fue diseñado principalmente para probar la eficacia del CNP. En el proceso de investigación de diseño, se consideró método de inyección. Debido a que los vasos linfáticos están conectados entre sí por una rama de la comunicación en la pared gástrica que se expande verticalmente, muchos investigadores llevaron a cabo la idea de que los métodos de inyección fueron igualmente eficientes en la tinción de los ganglios linfáticos en AGC [15, 16]. Se obtuvieron resultados similares en un experimento preliminar; por lo tanto, se seleccionaron para llevar a cabo la inyección de colorante subserosos, que es un método más fácil y más eficaz durante la cirugía abierta. Nuestra tasa de tinción fue del 46,6%, algo inferior a la tasa reportada en estudios japoneses sobre el cáncer gástrico precoz [17]. Puede haber dos razones para esta diferencia. En primer lugar, los vasos linfáticos más fueron bloqueados por el tumor en AGC. Por otro lado, más los LN de la estación de N2 se diseccionaron en AGC para el desarrollo de la cirugía gástrica, que eran más difíciles de manchar debido a la distancia y la estructura compleja de vasos linfáticos.
Obviamente, más los LN se cosecharon en pacientes con CNP tinción (38,33 vs 28,27). La diferencia estuvo de acuerdo con la constatación del Catarci usando CH40 (un tipo de material colorante) [18]. Sin embargo, hemos obtenido un mayor número de los LN y mejor estándar con gastrectomía D2 disección. Sin embargo, el análisis de subgrupos no mostró más MLNs se cosecharon en el grupo experimental, lo que podría ser debido al tamaño de muestra. Por otro lado, la proporción más alta de los pacientes LN metástasis positivos a la del grupo de control indica que el CNP podría ayudar a mejorar la tasa de descubrimiento de LN metastásico, pero más estudios son necesarios para probar el resultado.
A explorar por qué podríamos cosechar más LN con CNP, se midió el diámetro máximo de cada LN para un resultado satisfactorio. Sólo ofrecemos los datos en detalle. Desde el punto de vista de la operación, en bloque escisión de los LN podría ser completa ya que se distinguen más fácilmente de los tejidos adiposos si de color negro. Además, algunas redes locales pequeñas (< 2,0 mm) no se dejarían (Fig. 5) en el caso de micrometástasis, que podría tener una influencia muy importante en las estrategias de estadificación y tratamiento N. También nos dimos cuenta de que la mayor diferencia ocurrió en la estación nn. 1 y 3. Aunque no es estadísticamente significativa, el valor clínico no debe ser ignorado porque se cosecharon más pequeños LN. Mientras tanto, el sesgo en nuestro análisis de subgrupos era inevitable para que más estudios deben ser diseñados para proporcionar dichos datos de cada estación LN. Higo. 5 LN pequeños se tiñeron por nanopartículas de carbono para que no se dejarán en caso de micrometástasis (flechas
muestran los pequeños LN) guía Finalmente, hemos creado un modelo de predicción para evaluar la calidad de la operación si era CNP usado. Desde que se dio cuenta de la importancia de las estadísticas, cada vez más científicos, como Gretschel [19], se han combinado con la medicina para resolver problemas clínicos. Hasta cierto punto, nuestro modelo puede ayudar a los cirujanos revisan su trabajo de eliminar los LN para mejorar sus habilidades quirúrgicas. Por ejemplo, los cirujanos pueden comparar sus LNs resecados al número predicción calculado con este modelo para evaluar la calidad de funcionamiento. Sin embargo, este trabajo debe ser probado en más casos.
Conclusiones
Nuestros resultados indican que el CNP era un material seguro y que los cirujanos podrían cosechar más LN con ella en los casos de AGC, que podrían beneficiarse de la cosecha de un aumento número de los LN más pequeñas. El modelo que hemos construido en este estudio podría desempeñar un papel en la evaluación de la capacidad del cirujano y su formación. Sin embargo, se necesitan más estudios para demostrar su sentido práctico.
Notas comentario El resumen de este documento ha sido aceptado para su presentación en póster para los cánceres gastrointestinales Simposio 2015.
Declaraciones
Agradecimientos Esta investigación fue
con el apoyo de Beijing Municipal de Ciencia y Tecnología Fundación Comisión (D141100000414002) y el Programa Nacional de alta Tecnología de Investigación y Desarrollo de China (Programa 863) (2012AA02A203-B01).
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de la competencia. intereses
los autores declaran que no tienen intereses en competencia.
contribuciones de los autores JJ concebido del estudio. ZL y SA participó en el diseño del estudio, los datos recogidos, realizó el análisis estadístico, y redactó el manuscrito. ZB, AW, XW, FS, XJ, YZ, ZX y participó en su coordinación y ayudó a redactar el manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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