PLoS One: kannabinoid HU210 védi izolált patkány gyomor által okozott károkkal szemben szérum patkányok kísérleti akut hasnyálmirigy

absztrakt katalógusa

Az akut pancreatitis (AP), különösen a súlyos heveny hasnyálmirigy gyakran okoz extra hasnyálmirigy szövődmények, például az akut gyomor-bél nyálkahártya elváltozás (AGML), amely kíséri meglehetősen magas halálozási arány, de a patogenezise AP indukált AGML még nem teljesen tisztázott. Ebben a jelentésben azt vizsgáltuk, hogy a megváltozott szérum alkatrészek és gyomor endokrin és exokrin funkciókat patkányokban kísérleti heveny hasnyálmirigy, és tanulmányozták a lehető hozzájárulását ezek a változtatások az patogenezisében AGML. Ezen túlmenően, feltártuk a beavatkozás hatásait cannabinoid receptor agonista HU210 és antagonista AM251 izolált és a szérum-perfundált patkány gyomor. Eredményeink azt mutatták, hogy a AGML után történt 5 órán AP replikáció, és a test homeosztázisát megzavarta AP patkány, megnövekedett szintje a hasnyálmirigy enzimek, lipopoliszacharid (LPS), proinflammtory citokinek és kemokinek a vérben, és egyenlőtlenség a gyomor szekréciót funkciót. Átáramló az izolált patkány gyomor az AP patkány szérum okozott morfológiai változások a gyomorban, kiegészítve egy jelentős növekménye pepszin és a [H ^{+] kibocsátás, és a megnövekedett gasztrin és a csökkent a szomatosztatin szekréció. HU210 megfordította a AP-szérum-indukált patkány patológiás elváltozások, beleértve a fordított átalakulás a gyomor morfológiája bizonyos mértékben. A vizsgálat eredményeit a vizsgálat bizonyítja, hogy a gyulladásos válaszokat, és az egyensúly a gyomor szekréció fejlődése során AP felelősek a patogenezisében AGML, és azt sugallják, terápiás potenciáljának HU210 számára AGML akut hasnyálmirigy-gyulladás.}

Hivatkozás: Cao MH, Li YY, Xu J, Feng Yj, Lin Xh, Li K, et al. (2012) A kannabinoid HU210 védi izolált patkány gyomor által okozott károkkal szemben szérum patkányok Kísérleti akut hasnyálmirigy. PLoS ONE 7 (12): e52921. doi: 10,1371 /journal.pone.0052921 katalógusa

Szerkesztő: Vinod K. Yaragudri, Nathan Kline Institute for Psychiatric Research és a New York-i School of Medicine, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: Május 9, 2012-ben; Elfogadva: november 21, 2012; Megjelent: December 28, 2012 katalógusa

Copyright: © 2012 Cao et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (Grant No. 81270477 és 81141050 Dr. Yong-yu Li). http://www.nsfc.gov.cn/. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

az akut pancreatitis (AP), különösen súlyos AP, egy potenciálisan halálos gyulladásos betegség hasnyálmirigy, amely gyakran okoz extra hasnyálmirigy szövődmények, akár több szisztémás szerv működési zavarok. Leírták, hogy a betegek 52% -a az akut hasnyálmirigy-gyulladás heveny gyomor-bél nyálkahártya-károsodás (AGML) vagy stressz fekély [1], [2]. Bár az endoszkópos megfigyelés azt mutatja, hogy az alanyok többsége csupán több sekély erózió a tápcsatornában, az optimális gyógyszeres beavatkozás továbbra is vita tárgyát képezi, és patogenezise AGML tisztázatlan marad. Katalógusa

Egyes kutatók azt jelentették, hogy a stresszes állapot akut pancreatitis okozza a csökkent vérellátás vagy hipoperfúzió a gyomor nyálkahártya, és a számláló-diffúziós a gyomor-hidrogén-ion (H ^{+) fontos tényező a AGML is [3], [4]. Egyéb vizsgálatok felfedezték, hogy a szérum és ascites folyadékot AP betegek és kísérleti állatok tartalmazott nagy mennyiségű toxikus anyagok, mint például a hasnyálmirigy-enzimek, endotoxinok, a gyulladásos mediátorok [5], [6], amely hozzájárulhat a többszörös szervi diszfunkciók akut hasnyálmirigy-gyulladás [7], [8]. katalógusa}

évszázadokon Cannabis növény és annak kivonatai volna használni a tünetek enyhítésére gastrointestinalis gyulladásos betegségek. Megállapítást nyert, hogy a D ^{9-tetrahidrokannabinol, a fő pszichoaktív összetevője a kannabisz, fejti ki elsődleges celluláris intézkedések ellenére, két G-fehérjéhez kapcsolt receptorok, kannabinoid 1 (CB1) és a kannabinoid 2 (CB2) receptorokhoz [9] - [ ,,,0],11]. Azóta ez a két receptor elismert, mint a fő szabályozói fiziológiás és patológiás folyamatok [12]. A kannabinoidok csökkentik a gyomor-szekréciót [13], és az A CB1 receptor mutat védő szerepe ellen stressz által kiváltott AGML [14], [15], de a mechanizmus az akció továbbra is megfoghatatlan. Katalógusa}

A cél a jelen munka volt, hogy vizsgálja meg, mind in vivo és in vitro kísérletekben, a változások a szérum komponensek, a változások a gyomor endokrin és exokrin funkciókat patkány AP modell, valamint a lehetséges hozzájárulását ezek a változtatások az patogenezisében AGML. Szintén feszegették voltak az intervenciós hatásait CB1 felhasználásával annak agonista HU210 és antagonista AM251, annak érdekében, hogy jobb megvilágítását kórélettani mechanizmusainak AP-asszociált AGML és a fekélyellenes potenciálok ezek kannabinoid szerek.

Anyagok és Módszerek

Állatok katalógusa

Férfi Sprague-(220-250 g) szereztünk be a kísérleti állat Center Fudan Egyetem, Shanghai, Kína. A kísérleteket megelőző, mind az állatokat elhelyezték 1 hétig standard körülmények között szabad hozzáféréssel a vízhez és a laboratóriumi Chow. Minden vizsgálati eljárást az alábbiakban összhangban voltak a nemzetközi irányelvek az ellátás és a laboratóriumi állatok felhasználását és hagyta jóvá Állat Etikai Bizottsága Tongji Egyetem, Shanghai, Kína. Katalógusa

Indukciós akut hasnyálmirigy patkányokban katalógusa

A patkányokat elkülönített véletlenszerűen két csoportra oszthatók: az AP és ál-működés csoport 24 állatot minden csoportban. A patkányokat éjszakán át éheztettük és csak vizet hagyjuk a műtét előtt. AP modell indukáltunk által kifejlesztett eljárással Aho és munkatársai [16]. Röviden, a patkányokat kapott laparotomia (~ 3 cm hasi-középvonali bemetszést) Miután a standard aszeptikus eljárást, és az általános anesztézia intraperitoneális injekcióval 20% -os etil-karbamát 10 ml /kg volt. Az epe-hasnyálmirigy vezetékrendszerben ideiglenesen elzárjuk a máj köldökseb egy finom, puha mikrovaszkuláris bilincs, hogy megakadályozzák reflux az infundált anyag a májban. Retrográd injekció 3% nátrium-dezoxikolát a epe-hasnyálmirigy vezetékrendszerben ezután végezzük (0,1 ml /100 g testtömeg). A bilincs eltávolítjuk az injektálás után. Sham-műtétet végeztek megfelelően anélkül, hogy a nátrium-dezoxikolát injekciót, és a műtét kötötték hasi rétegzett zárás. Az ötödik óra a műtét után, a vért gyűjtöttünk a hasi aorta szúrás alatt érzéstelenítésben. Valamennyi mintát a vér centrifugáltuk, és a felülúszó folyadékot (szérum) összegyűjtjük, aliquot részekre osztjuk, és -20 ° C-on későbbi alkalmazásokhoz. A hasnyálmirigy eltávolítjuk, két részre osztott, és az egyik rész ben helyezték TRIzol azonnal és tároljuk -20 ° C-on GeneChip elemzés, mint a többi részét rögzítettük 10% -os paraformaldehiddel. A gyomrot is eltávolították, kinyitotta mentén nagy görbe, és a rögzített 10% -os paraformaldehiddel követő patológiai vizsgálatát.

hisztológiai értékelés

A szövettani értékelést végeztünk patkány hasnyálmirigy és a gyomor, hogy fixáltuk 10% paraformaldehidet és paraffinba ágyaztuk. Ezt követően 5 um vastagságú metszeteket szeletelt Leica RM2126 mikrotom (Leica, Shanghai, Kína) és festettünk hematoxilinnel (0,5%) és az eozin (0,5%), ezt követi a megfigyelés alatt Motic BA300 mikroszkóp (Motic China Group Co. Ltd ., Xiamen, Kína). Szövettani Pontozás volt értékelni a hasnyálmirigy szakaszok egy módosított kritérium Nathan JD, et al. [17] Az értékelés készült tíz véletlenszerűen kiválasztott mikroszkópos mezőt minden egyes állat csúszdák, és ismételt három patkány /csoport egy vak módon. És a teljes szövettani pontszámot (0-9) fejeztük összegeként ödéma (0-3), gyulladásos sejtes infiltráció (0-3), és a szöveti elhalás (0-3). Katalógusa

Microarray hibridizációs vizsgálat

Microarray analízis azonosítására használt transzkripciós profilok néhány gyulladásos indexek a hasnyálmirigy patkány akut hasnyálmirigy-gyulladás. Array hibridizációkat végeztünk három biológiai ismétlésben RNS-minták kivont hasnyálmirigy AP és kontroll patkányok. Probe készítmény, chip hibridizáció és adatok elsődleges elemzését végeztük Capital Bio Corporation (a cég engedéllyel és engedélyezte Affymetrix működik Peking, Kína). Rácsok beolvasott GeneChip Scanner 3000 7G (Affymetrix, Santa Clara, CA, USA). A kvantitatív analízis segítségével végeztük Affymetric microarray Suite 5.0-specifikus feltételek (statisztikai algoritmusok) GCOS (Affymetrix GeneChip működtető szoftver) 1.4 verzió. A differenciáltan expresszálódó gént azonosítottunk a SAM használatával (Szignifikáns elemzése Microarray) szoftver, és a kiválasztott alapján azok szeres változások (> 2-szeres), mint a kontroll mintákat.

Immunhisztokémia Elemzés katalógusa

az immunhisztokémiai festés paraffinos metszeteket patkány gyomor és a hasnyálmirigy végeztük nyúl poliklonális anti-CB1 és anti-CB2 antitestek (Kat. szám: ALX-210-314 anti-CB1 és Cat. No: ALX-210-315 az anti-CB2, Enzo, Plymouth Meeting, PA, USA) a korábban leírtak szerint [18]. A tárgylemezeket szakasza patkány gyomor és a hasnyálmirigy-on inkubáltuk egy éjszakán át 4 ° C-on az anti-CB1 vagy anti-CB2 antitestek, valamint a biotin-jelzett kecske anti-nyúl IgG-munkaközeg (Kat. Szám: SP0023; bioszintézise Biotechnology Co. Ltd ., Peking, Kína) alkalmazták aztán minden tárgylemezre, és inkubáljuk 37 ° C-on 15 percig, majd inkubáltuk egy HRP-vel jelzett streptavidin munkaoldatot, 37 ° C-on 15 percen át, és tárgylemezeket öblítjük alaposan. Végül, a lemezeket DAB-festett és nukleáris újra festettük hematoxilin. A lemezeket a negatív kontroll feldolgozása révén azonos lépéseket, de az elsődleges antitest helyett PBS-sel. A képelemzés segítségével végezhetjük digitális Motic Med 6.0 képelemző rendszer (Motic; China Group Co. Ltd., Xiamen, Kína). Katalógusa

Western blot Mérési CB1 és CB2 Expression katalógusa

CB1 és CB2 fehérje expresszióját a hasnyálmirigyben és a gyomor értékeltük Western-blottal. Amint azt korábban leírtuk [19], az inkubálás után a primer antitestekkel egy 1:250 hígítás egyedileg (nyúl poliklonális anti-CB1 és anti-CB2 antitestek, Cat. No: ALX-210-314 anti-CB1 és Cat. No: ALX-210-315 anti-CB2, Enzo, Plymouth Meeting, PA, USA), a blotoljuk nitrocellulóz membránra (Whatman, Dassel, Németország) öblítettük alaposan, és a megfelelő másodlagos ellenanyag konjugált tormaperoxidázzal inkubáltuk 1 órán át szobahőmérséklet. Belső referencia, poliklonális nyúl anti-egér β-aktin antitest (1:2,000 hígítás) (Abmart, Shanghai, Kína) alkalmaztunk. Végül, ellenanyag-kötődést való kitettség által ECL Western-blot detekciós reagens (Kat. Szám: SC-2048, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) és rögzített film.

előállítása Isolated- vascularly perfundált patkány gyomor

Rat érzéstelenítettük, és az izolált, vascularly perfundált patkány gyomor állítottuk elő a korábban leírtak szerint [20]. Röviden, a has nyitották középvonali metszést steril körülmények között. Ligálás után a hasi aorta fölött elágazás a coeliakia artéria, egy kanült helyezünk a coeliakia artéria keresztül bemetszést helyezni az aortába. Két ml sóoldatot tartalmazó 600 egység heparint ezután injektáljuk a gyomor artéria keresztül az artériás kanül. Ezt követően, a meleg (37 ° C) módosított Krebs-Ringer-oldatot áramoltatunk egy keveréket, amely 95% O _{2 és 5% CO 2 vezették be. A vénás elfolyó oldatot összegyűjtöttük keresztül portális véna kanül segítségével. Egy polietilén csövet gyomor lumenbe perfúziós beiktatjuk a nyelőcső és a Tip elhelyezni a luminális része a gyomorban. Ezután a pylorusszűkületben csomópont volt kitéve, és a másik polietilén csövet vezettünk be a gyomorba keresztül a metszést a duodenum, majd rögzíteni egy ligatúra körül a pylorus. A perfundált patkány gyomor izoláltuk és helyezzük egy meleg (37 ° C) kis kamra Krebs-Ringer-oldattal.}

kezelése izolált patkány gyomor

Az izolált gyomrot vascularly perfundáltuk módosított Krebs-Ringer-oldattal 30 percig egyensúlyba mielőtt a hivatalos kísérletekben. A perfúziós ezután végezzük egymást követően három folyadékokkal és minden egyes közeg 20 percig, összesen 60 perc. A kontroll csoport kapott: 1) Krebs-Ringer-oldattal, 2) származó szérum normális kontroll patkányok, 3) Krebs-Ringer-oldattal. Az AP-csoport kapott: 1) Krebs-Ringer-oldattal, 2) a szérum AP patkányok, 3) Krebs-Ringer-oldattal. A csoport a AP + HU kapott: 1) Krebs-Ringer-oldatot + HU210 (10 ^{-7M), 2) az AP szérum + HU210 (10 -7M), 3) Krebs-Ringer-oldattal. És a csoport a AP + AM kapott: 1) Krebs-Ringer-oldatot + AM251 (10 -7M), 2) az AP szérum + AM251 (10 -7M), 3) Krebs-Ringer-oldattal. A gyomor lumen Az izolált gyomor perfundáltuk normál sóoldatot (pH = 7,0). Minden perfúziós folyadék futott állandó sebessége 1 ml /perc alkalmazásával mikro-infúziós pumpák. Eközben a megoldások és az izolált szervek tartottuk 37 ° C-termosztáttal szabályozott egységeknek az egész kísérlet során. A mintákat vénás elfolyó vagy gyomor lumen elfolyó gyűjtöttünk, a végén 20 percenként, a hűtött kémcsöveket hogy azonnal -80 ° C-on későbbi mérés kísérletekben.}

amiláz és lipopoliszacharidot szintje

a vizsgálatok amiláz és lipopoliszacharid (LPS) szintje a szérumban AP vagy kontroll patkányok végeztünk alapján a gyártó ajánlott eljárások (Kat. szám: C016 amiláz assay kit, Jiancheng Technology, Nanjing, Kína; és Cat. No: CE32545 LPS assay kit, kínai Horseshoe Crab reagens Co. Ltd., Xiamen, Kína). katalógusa

Vizsgálatok lladásátvivő katalógusa

A szintek interleukin-6 (IL-6 ), és a citokin által indukált neutrofil kemoattraktáns 1 (CINC1 /Kc) a szérumban a patkány és a vénás elfolyó az izolált patkány gyomor mennyiségi meghatározását a patkány IL-6 és a KC ELISA kitek alapján a gyártó által javasolt protokoll (Kat. szám : F01731D patkány interleukin 6 ELISA kitek, Cat. No: F01723D patkány KC ELISA kitek. H-Y Biological Co. Ltd., Shanghai, Kína). Az optikai sűrűséget meghatároztuk 490 nm-nél az abszorbancia egy enzimmel kapcsolt immunszorbens assay eszköz (Microplate Reader, Model Elx800; BioTek, Winooski, VT, USA). Mindegyik mintának mértük három alkalommal, és a méréseket megismételtük 6 patkány mintákban az egyes csoportok. Az adatok a vénás elfolyó az izolált patkány gyomor bemutatva a különbség az IL-6 vagy KC szint között a perfúziós és az elfolyó, tekintett az IL-6 és a KC-re a patkány gyomor.

a gasztrin és a szomatosztatin Levels Animal példányaira katalógusa

a gasztrin és a szomatosztatin szintet az állat szérumban és az izolált gyomor vénás szennyvíz mértük kereskedelmi forgalomban kapható gasztrin és szomatosztatin radioimmunoassay készletekkel (gasztrin Kit: Cat. No. G01PJB Észak Intézet Biológiai Technology, Peking, Kína. a szomatosztatin Kit: Cat. No. S111013, második Katonai Orvostudományi Egyetem, Shanghai, Kína). Mérési eljárások alapján a gyártó ajánlásai az előzőekben leírtak szerint [21]. Ugyanaz, mint a fentiekben, az egyes mintának megmértük három alkalommal, és a méréseket megismételtük 6 patkány mintákban az egyes csoportok. Az adatok a vénás szennyvíz az izolált patkány gyomor bemutatva különbségek gasztrin vagy a szomatosztatin szint a vérellátás és a szennyvíz tekintett megjelenése gasztrin és szomatosztatin a patkány gyomor. Katalógusa

A pepszin és H ^{+ szintek Állati példányaira}

a vizsgálatokat a pepszin szintjét a patkány gyomorsav és a gyomor lumenbe elfolyó az izolált patkány gyomor végeztük a gyártó által javasolt protokoll (Cat. No. A081- 1, Jiancheng Technology, Nanjing, Kína), mint a [H ^{+] ezekben a mintákban mértük delta 320 pH-mérővel (Mettler-Toledo Inc. Zürich, Svájc), és a leolvasott ezután alakítjuk [H +].}

Solutions and Chemicals

HU210 [(6aR) -transz-3- (1,1-dimetil-heptil) -6a, 7,10,10a-tetrahidro-1-hidroxi -6,6-dimetil -6H-dibenzo [b, d] pirán-9-metanol], AM251 [(N- (Piperidin-1-il) -5- (4-jód-fenil) -1- (2,4- diklór-fenil) - 4-metil-1H-pirazol-3-karboxamid)], vásároltunk a Tocris (Tocris-Bioscience, Ellisville, MO, USA). Mindkét vegyszerek oldunk egy oldószerben állt etanol, Tween80 és normál sóoldat (NS), térfogatarány 1:01:18, hogy koncentrációja 10 ^{-2M, 37 ° C értékre állítjuk be ultrasonicator, majd tovább hígítottuk a NS 10 -5 M, és ismét 10 -7M a perfúziós közvetlenül a felhasználás előtt az olyan feltételekkel határoztuk meg kísérleti tanulmány [22]. A módosított Krebs-Ringer oldatot tagjai 117,5 mM nátrium-klorid, 4,7 mM kálium-klorid, 2,4 mM CaCI _{2, 1,1 mM MgCI 2, 1,1 mM NaH 2PO 4, 25 mM NaHCO 3, 11,1 mM glükóz, 0,05% szarvasmarha szérum albumin, és 4% dextrán. Más szerek, ha forrásokat nem a fent említett, a Sigma (Sanghaj, Kína). Katalógusa}}

Az adatok elemzése katalógusa

Az összes adatot átlag ± SEM. T-próba vagy az egyetlen tényező varianciaanalízissel (ANOVA) az SPSS 13.0 szoftver (SPSS Co. Ltd., Shanghai, Kína). P-értékek < 0,05 statisztikailag szignifikánsnak tekintettük. Katalógusa

Eredmények katalógusa

Eredmények a kísérlet In Vivo Matton

kóros elváltozásokat a hasnyálmirigyben az AP patkányok .

fénymikroszkóp alatt, nyilvánvaló volt, hogy a kezelés után a nátrium-taurokolát, patkányok kifejlesztett súlyos akut pancreatitis nyilvánvaló ödéma, vacuolisatio és súlyos nekrózis a acinus sejtek a hasnyálmirigy-szövetben. Míg a szövettani pontszámot AP patkányokban sokkal magasabb, mint a kontroll patkányok (ábra. 1). Kombinálva a fokozott amiláz aktivitás a szérumban AP patkányok, az eredmények igazolták, hogy az AP modell replikációs patkányokban volt sikeres.

kóros elváltozásokat a gyomor AP patkányokban.

a gyomor, a patkányok akut pancreatitis, súlyos kóros elváltozásokat alakult ki, kiállító nyálkahártya ödéma, az erózió és vérzések, amint azt mindkét macrography (2A. és 2B) és mikroszkópos vizsgálatok (ábra. 2d); és ezek a sérülések gyűltek elsősorban a gyomor antrum.

GeneChip elemzést.

ábrán látható. 3A, a pontdiagramokat képviselt gén két-szeres, és erősebb expressziót voltak a felső (piros) határ, míg a gén két-szeres, és alacsonyabb expressziót az alsó (zöld) határ; és a megváltozott gének szorosan kapcsolódik az akut hasnyálmirigy-gyulladás voltak láthatók a csoportosítás minták (ábra. 3B). Nyilvánvaló volt, hogy az expressziós profil, a gének jelentősen differenciál kifejezések (≥2-szeres, a P < 0,05) elsősorban azok, amelyek kapcsolódnak a hasnyálmirigy emésztő enzimek, gyulladásos mediátorok és a jelátviteli utak, amelyek különválasztják, és szerepelnek a Gene neve és génbank ID 1. táblázatban

Változások az IL-6, KC és az LPS szinteket AP szérumban.

mind az IL-6 és a KC szintje a szérumban az AP patkányok jelenik jelentős növekedésével összehasonlítva a kontroll patkányok, azzal upsurges 145% és 186% volt (P < 0,05; ábra. 4). Egy hasonló, de több kiemelkedő növekedés volt megfigyelhető az LPS szintet a szérumban AP patkányok, egy fellángolása, mint 231-szorosa az A kontroll csoportban (P 0,01; 4A.).

módosításai a gasztrin és szomatosztatin szint a szérumban AP patkányokban.

a szérumban az AP patkányok, gasztrin és a szomatosztatin szintje jelentősen nőtt összehasonlítva a kontroll patkányok, azzal upsurges 169% és 147% volt ( mindkét esetben, a P < 0,05; ábra. 4B).

változása pepszin szintek és a [H +] a gyomornedvben AP patkányokban.

értékeli a változások a gyomor exokrin funkció tesztekben pepszin szint és [H ^{+] végeztük a gyomorsav AP és kontroll patkányok. Mind a pepszin szint és a [H +] a gyomornedvben mutatott határozott növekedést AP patkányokban, összehasonlítva a kontroll patkányok, azzal upsurges 177% és 347% volt (ábra. 4C).}

Expression CB1 és CB2 receptorok patkány hasnyálmirigy és a gyomor. katalógusa

A kifejezés jellemzőit a CB1 és CB2 receptorok patkány hasnyálmirigy és a gyomor vizsgáltuk. Az eredmények azt igazolták, hogy a példányok állatokból kontroll csoport bemutatott csak gyenge immunhisztológiai festést CB1 és CB2 receptorok a hasnyálmirigyben, míg példányok AP patkányokat mutatott fokozott kifejezésére való CB1 és CB2 receptorokat. Főként, erős pozitív jelei barna festés csoportosulnak a acinusok (ábra. 5. A nyílhegyek). A fel-szabályzata CB1 és CB2 receptorok a hasnyálmirigy szöveteiben AP patkányokat tovább bizonyítja Western blot analízissel és bemutatni, 5. ábra a B. hasonló expressziós jellemzőinek CB1 és CB2 receptorokat is találtak a gyomorban az AP patkányok , amint azt mind immunhisztológiai festéssel és Western-blot-vizsgálat (ábra. 5 ° C és 5 D). Az erős pozitív jelei barna festés főleg a gyomornyálkahártya (ábra. 5 ° C, nyílhegyek). Katalógusa

Eredmények a kísérlet In Vitro Matton

Effect kannabinoidok a gyomor kóros megváltozásával és a gasztrin és szomatosztatin Release.

hatásának vizsgálata a CB1 receptor agonista HU210 az endokrin funkciója az izolált patkány gyomor stimulált AP patkány szérummal, megvizsgáltuk a változások a gasztrin és szomatosztatin szint a vénás elfolyó a gyomor, vagy anélkül beavatkozása CB1 receptor agonista HU210 és antagonista AM251. Az eredmények azt mutatták, hogy míg a kontroll csoport, a patkány gyomor kezelt AP szérum provokált megnövekedett gasztrin Release (P < 0,05), de csökkent a szomatosztatin Release (P < 0,05), HU210 megfordította a gasztrin és a szomatosztatin változások által indukált szérumban AP patkányok (P < 0,05), míg a AM251 nem volt kimutatható hatása a kibocsátás a két hormon (6.). katalógusa

hatásai kannabinoidok pepszinaktivitás és [H ^{+] a gyomor lumenbe elfolyó.}

a hatások a szerek HU210 és AM251 a pepszin aktivitás és a [H ^{+], a gyomor lumene elfolyó az izolált patkány gyomor kerültek ábrán bemutatott. 7. Összehasonlítva a társaik a kontrollcsoport, AP szérum ösztönözte a pepszin szekréció és a savtermelés az izolált patkány gyomor (P < 0,05). A beavatkozás a CB1 /2 receptor agonista, HU210 legyengített az AP szérum által indukált változások a pepszin szekréció és a savtermelés (P < 0,05), míg a receptor antagonista AM251 nem mutatnak nyilvánvaló hatása a következő két paraméter.}

Hatások a kannabinoidok a szinteket IL-6 és a KC a gyomor vénás elfolyó patkányok.

Miután a patkányok a kezelés a AP szérum, IL-6 és a KC szint szignifikánsan emelkedett a vénás származó effluens a izolált patkány gyomorban; HU210 fordított az IL-6 és a KC változások által indukált szérum AP patkányok (P < 0,05), míg a AM251 nem volt kimutatható hatása a szinten a citokin és kemokin, a vénás effluens (ábra. 8).

Vita katalógusa

a klinikán a betegek akut hasnyálmirigy-gyulladás, különösen a súlyos heveny hasnyálmirigy, gyakran szenvednek AGML vagy stressz fekély, gyakori szövődménye AP. Az oki tényezők gyomor sérülés közé tartoznak, de nem kizárólagosan, a stressz a gyulladásos ingerlés amely képes indukálni az aktiválás a locus coeruleus-norepinefrin /szimpatikus-mellékvese velő rendszer és a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese kéreg rendszer. A titkos növeli a katekolaminok és glükokortikoid hormonok a legfontosabb tényező a test stressz, ezek az alkatrészek provokál gyomorsav-hiper-szekréciót, és a vér áramlási átkerülését okozó gasztrointesztinális nyálkahártya ischaemia. Fontos, hogy a ischaemia szekvenciálisan merül a képességét, a gyomor nyálkahártya, hogy dobja a back-diffundáló sav, így csökken az intramurális pH és aktiválását proteáz, és az azt követő fekélyesedés [3], [4], [23]. Más mechanizmusok, beleértve oxigénből származó szabad gyökök és néhány bizonytalan tényezők is szerepet játszanak a gyomor-bél sérülést kapcsolatos akut hasnyálmirigy-gyulladás.

Korábbi vizsgálatok azt találták, hogy az AP a plazma és az AP-kapcsolódó aszcitesz folyadék tartalmaznak nagy mennyiségű mérgező anyagokat, amelyek károsak a test [5], [6], [8], ami a kár a máj, a vese, a tüdő és a keringési rendszer, valamint a gyomor-bél zavarok, stb [24] - [28]. Mi előzetes tanulmány felfedezte, hogy a hasnyálmirigy acinus sejtekben szenvedett kalcium túlterhelés és csökkent vitalitás, mint amely inkubáltuk AP szérum vagy aszcitesz folyadékból [8]. Ebben a vizsgálatban először kísérletileg kiváltott AP patkányokban és bizonyult az indukciós AP állati modell sikeres volt, bizonyítva a kóros változás hasnyálmirigy morfológiája és a növekedés a hasnyálmirigy enzim patkány szérum indukálása után. Amikor azt mondja a modell, amit továbbra is létre génexpressziós profilt, hogy bemutassa a megváltozott génexpresszió a hasnyálmirigy enzimek és a gyulladásos mediátorok, hogy megpróbálja követni az aláhúzás gének játszott a legtöbb kritikus szerepet játszik a az AGML kapcsolódó AP. És az eredmények az AP és a kontroll patkányok profilozott Gene chip analízis összhangban voltak a biokémiai vizsgálatokban. Ezen kívül, teszteltük ha volt jótékony hatása a kannabinoid antagonisták és /vagy agonisták az állatokat a kísérleti akut hasnyálmirigy-gyulladás.

A fentiek alapján eredményeket, azt a kérdést vizsgálta a gyomor szekréció, mind az endokrin vagy exokrin funkciókat, akkor módosítható AP patkányokban. Ismeretes, hogy a gasztrin stimulálja a savtermelés és pepszin szekréció, mint a szomatosztatin ellensúlyozza a gasztrin. Amikor gasztrinantagonistákról vagy szomatosztatin szekréció nem képes fenntartani egy alapvető egyensúly, a többlet pepszin és sav felszabadulása aránytalanul, ami a károk és zavarok a gyomor alatt akut hasnyálmirigy-gyulladás. Ahogy ebben a jelentésben, találtunk egy jelentősen emelte gasztrin szint a szérumban és emelkedett pepszin és a sav szintje a gyomornedv AP patkányok, amelyek megerősítették, hogy az endokrin és exokrin funkcióit a gyomor zavarta az AP modell szerint.

továbbá, a keringő aktivált proteolitikus enzimek, a vazoaktív fehérjék és endotoxin specifikus patogenezisében az akut pancreatitis felelős lehet AGML is. Ezért vizsgálni a hatásait a szérum AP patkányok izolált és perfundált patkány gyomor, hogy a szerve lehet figyelmen kívül hagyni a rendszerszintű stressz és hatásokat. Az izolált patkány gyomor által stimulált szérum AP patkány nem csak azt mutatta, a szem-látható nyálkahártya sérülések, hanem bemutatott egy sor biokémiai rendellenességek, beleértve a magasabb szintű gasztrin, citokin IL-6, kemokin KC, és alacsonyabb szintű szomatosztatin a gyomor vénás szennyvíz, valamint emelt pepszin és savtermelés a gyomor lumenbe szennyvízben. Ésszerű a következtetés, hogy nincs egyensúly között az agresszív tényező, és a védő tényező a gyomornyálkahártya az akut hasnyálmirigy-gyulladás. Különösen, a megnövekedett gasztrin, gyomorsav kimenet és a pepszin közösen fontos szerepet játszanak patogenezisében AGML, súlyosbítva a kár a gyomor és a kiváltó ördögi ciklusok során az akut hasnyálmirigy-gyulladás.

Az elmúlt évtizedben, számos publikációk kimutatták a gyulladásgátló hatások a kannabinoidok [29] - [32]. Számos tanulmány kimutatta, hogy a kannabinoidok gátolják a gyomorsav-kiválasztást és csökkentik a gyulladásos citokinek és más közvetítő a plazmában az állatok AP [33], [34]. Eredményeink nem csak megerősíteni ezek a korábbi felfedezések, hanem azt is bizonyítják, hogy a vegyi HU210, feltehetően egy cannabinoid receptor agonista, szolgálják funkciókat ugyanúgy mint kannabinoidok csökkenti a gyulladásos citokinek és egyéb mediátorok, így enyhíti a tüneteket, AP-asszociált AGML. Érdekes, hogy a vizsgálat eredményei azt mutatják, hogy HU210 képes gyengíteni a gyomor endokrin és exokrin változások a patkány izolált gyomor irritálja AP szérum, fordított az abnormálisan felfújt szintje a gasztrin, gyomorsav és a pepszin és tokos a hatást ezek a károsító tényezők. A másik oldalon, HU210 megnöveli a szomatosztatin, amely gátolja szekrécióját a gasztrin és a gyomorsav, és így fejt ki védőhatást a gyomor nyálkahártyáját.

Az eredmények a tanulmány nyújt harmonikus koherenciáját gén-chip elemzés és biokémiai vizsgálati adatok felhasználásával mintát a állatmodellben, ami arra utal, egy új mechanizmus, amely a kialakuló AGML van, legalábbis részben, mivel a gasztrin, és a gyomorsav-/somatostain egyensúlyhiány által kiváltott toxinok a AP szérum; és a kannabinoid agonista HU210 helyreállítja az egyensúlyt, így a védelem. Az eredmények alátámasztják, hogy a HU210 előnyös kezelésére akut pancreatitis miatt gyulladáscsökkentő szerepe és gátló hatást a AGML kapcsolatos akut hasnyálmirigy-gyulladás. Az eredmény, hogy a CB1 receptor antagonista AM251 nem játszik szerepet az AP indukált gyomor sérülés támogatás a feltételezése, megerősítve a pozitív szerepét CB1 /2 receptor. Katalógusa

Egy prospektív kísérlet, hogy vizsgálja meg, ha a protonpumpa-gátlók (PPI-k) is védi az állatokat a kísérleti akut pancreatitis, mi adjuk omeprazol (OME, IP, 40 mg /kg testsúly), egy reprezentatív PPI szert, hogy egy csoport patkányok ugyanabban az időben, amikor AP indukció végeztünk. Az előzetes eredmények azt mutatták, hogy OME növelte a túlélési arány AP patkányok (az adatokat nem mutatjuk be). Előfordulhat azonban, hogy szükség multicentrikus vizsgálat kideríteni, ha PPI-k jótékony terápiás lehetőség az akut hasnyálmirigy-gyulladás az emberek. Katalógusa

Mindent felett, az eredmények a mi kísérleti vizsgálat során kiderül, hogy a gyulladásos válaszokat és a zavarok a gyomor- szekréció, mind az endokrin és exokrin funkciókat, a csúcsteljesítmény akut hasnyálmirigy-gyulladás, és ők viszont hozzájárulnak patogenezisének AGML. Továbbá, az eredmények azt sugallják, hogy a kannabinoid HU210, a CB1 /2 receptor agonista, az a terápiás potenciálja AGML akut hasnyálmirigy-gyulladás által enyhítő gyulladás és helyreállítása gasztrin /szomatosztatin egyensúly, majd csökkentve a gyomorsav és a pepszin.

• PLoS One: Műtét kemoradioterápiában kombinált epirubicin-alapú kemoterápia triplett lokálisan előrehaladott Adenocarcinoma a gyomor vagy gastrooesophagealis Junction
• PLoS One: Elemzés a gyomrot és a beleket Microbiomes a keleti Oyster (Crassostrea virginica) a part menti Louisiana, USA