Genetska variabilnost CYP3A4 in CYP3A5in primarni jeter, želodca in debelega črevesa patients

genetska variabilnost
CYP3A4 in CYP3A5
v primarni jeter, želodca in bolnikov z rakom debelega črevesa
Abstract
Ozadje
-encimov za presnovo zdravil igrajo vlogo pri kemični kancerogenosti z encimsko aktivacijo procarcinogens na biološko reaktivnih metabolitov. Vloga genskih polimorfizmov številnih encimov citokroma P450 v prebavnem tveganje za nastanek raka je bil temeljito raziskan. Vendar pa so encimi za presnovo drog s širšega substrata specifičnosti, CYP3A4 in CYP3A5, ki niso bili doslej analizirali. Namen te študije je preučiti povezave med skupnim CYP3A4 in CYP3A5 polimorfizmov in prebavni tveganje za nastanek raka.
Metode
so CYP3A4 in CYP3A5 genotipov določene v 574 posameznikov, vključno z 178 bolniki s primarnim rakom jeter, 82 bolnikov z rakom želodca, 151 bolnikov z . kolorektalnega raka in 163 zdravih posameznikov
Rezultati
alelov varianta frekvenc za bolnike z rakom na jetrih, rak želodca, debelega črevesa in danke in zdravih kontrol, v tem zaporedju, so: CYP3A4 * 1B
, 4,8% (95% CI 2,6-7,0), 3,7% (0,8-6,6) 4,3% (2,0-6,6) in 4,3% (2,1-6,5); CYP3A5 * 3
, 91,8% (93,0-97,4), 95,7% (92,6-98,8), 91,7% (88,6-94,8) in 90,8% (87,7-93,9). Povezava med CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
variantne alelov ni bistveno razlikovala med bolniki in nadzora. Ni razlike v genotipov, alelov frekvenc ali povezovanja med variante alelov je bilo zaznati tudi glede na spol, starost ob diagnozi, lokacija tumorja ali fazo.
Zaključek
skupne polimorfizmov na
CYP3A4 in CYP3A5
geni storiti ne spreminja tveganje za razvoj prebavne raka v zahodni Evropi.
Ozadje
identifikacijo nizkih penetrantnih genov, ki lahko povečajo tveganje za nastanek raka v razvoju lahko predstavljajo pomembno sredstvo za identifikacijo posameznikov pri dednih spremenjeni občutljivosti. V zvezi s tem se je vloga encimov, ki presnavljajo zdravilo v tveganje za nastanek raka je bilo predmet več sto študij, opravljenih v zadnjem desetletju [1]. Glavni hipoteza temelji povezavo med encimi presnavljajo droge in kemično karcinogenezo temelji na encimsko aktiviranju procarcinogens na biološko reaktivnih metabolitov. Te reaktivne metaboliti bi interakcijo z DNK, kar povzroča spremenjeno izražanje genov ali funkciji, in na koncu karcinogenezo. Primarni presnovo različnih ksenobiotske karcinogenov predvsem prek citokroma P450 (CYP) encimov, ki pripadajo CYP 1, 2 ali 3 družine, ki skupaj vsebujejo 25 različnih izoencimov. Med njimi je najpomembnejši sta CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP2E1, CYP3A4 in CYP3A5 [2-4]. Večina slednjih encimi so polimorfne, mutiranih alelov povzročajo odpraviti, zmanjšano ali spremenjen encimsko aktivnost. Do danes so številne študije osredotočila na vlogo genskih polimorfizmov ali encimske aktivnosti CYP1A1 [5-11], CYP1A2 [7, 12-14], CYP1B1 [7, 15] in CYP2E1 [6, 16-19] v prebavilih tveganje raka. Kljub temu pa je vpliv na tveganje za nastanek raka polimorfizmov teh encimov CYP s širšim specifičnosti podlage, in sicer CYP3A4 in CYP3A5, ni bila podrobno analizirana doslej.
CYP3A4 in CYP3A5 encimi so glavni encimi za presnovo zdravil pri odraslih [ ,,,0],20], obe encimi, ki sestavljajo skoraj 30% vseh encimov CYP, izražene v človeških jetrih [21]. Ker ni individualizirani kvantifikacijo CYP3A4 in CYP3A5 in vivo
je trenutno mogoče zaradi širokega substrat specifičnosti prekrivajo, so se pridružile encimske aktivnosti označi kot CYP3A [22]. Tako CYP3A4 in CYP3A5 so izraženi v jetrih, želodca, debelega epitelija in kolorektalnega raka tkivu [23-26], čeprav obstajajo velike interindividualne razlike v izražanju obeh encimov [27-29]. Poleg lokalnega učinka encimske aktivnosti v presnovi rakotvornih snovi, CYP3A4 presnova /5-odvisno v proksimalnem črevesju je verjetno, da vplivajo na luminalnega ali žilno dostavo rakotvornih molekul na jetrih in debelem črevesu.
Ta dejstva zagotavljajo verjetna hipoteza za organe specifično prehransko aktivacijo procarcinogen in zato prebavnega tveganje za nastanek raka. Hipoteza, da upraviči to študijo, ki temelji na dejstvu, da sta CYP3A4 in CYP3A5 encimske aktivnosti, ki sodeluje pri aktiviranju več procarcinogens, vključno aflatoksina B1 stergmatocystin, ki se pridobiva hrane heterocikličnih aminov, alfa-hydroxytamoxifen in N'-nitrosonornicotine, in da tako encimi so izraženi na visoki ravni v prebavnem traktu [27, 30-36]. Tako je mogoče hipotezo, da bi genetske razlike, ki povzročajo sipanje v uredbe, izražanjem aktivnosti CYP3A encimov pomembni dejavniki, ki spreminjajo dovzetnost za raka ali rezultatov kliničnih raziskav. Ta združenja alel z boleznijo, ki so že pokazale za CYP3A genskih polimorfizmov in prostate, raka dojke in raka pljuč [37-43], čeprav z spornih rezultatov. Čeprav CYP3A4 in CYP3A5 igrajo pomembno biološko vlogo v jetrih in črevesnega epitela študij niso obravnavane, ali polimorfizem teh encimov, povezane z prebavni tveganje za nastanek raka, verjetno zato, ker variant alelov za ustreznimi geni so pravkar opisali. V zvezi s tem nove ugotovitve kažejo, da je CYP3A5
genotipi, ki vodijo k visoki encimske aktivnosti, povezane z rakom požiralnika [44]. Vendar interakcija
CYP3A4 in CYP3A5
genskih polimorfizmov in tveganje za razvoj glavnih prebavne raka, kot so jetra, želodec ali debelega raka ostala neraziskana. Namen te študije je analizirati takšnega sodelovanja.
Metode
Študijska skupina sestavljena iz 411 nepovezanih bolnikih s prebavnimi raka, vključno z 178 bolniki s primarnim rakom jeter, 82 bolnikov z rakom želodca in 151 bolnikov z rakom debelega črevesa in 163 zdravih subjekti. Tabela I prikazuje povzetek študijskih skupin, vključenih v raziskavo. Vsi udeleženci so bili beli španski posamezniki, ki živijo na istih področjih kot bolniki (Madrid in okolici), in so bili vključeni v raziskavo, po daje pisno soglasje. Vsi bolniki z diagnozo jeter, želodca in debelega črevesa in danke, ki so se udeležili tudi sodelujoče Storitve izbranih bolnišnicah so bili vključeni v raziskavo. je temeljil na histologijo diagnoza analize endoskopske biopsije in /ali kirurški odstranitvi osebkov. Podatki o znanih predhodnih prebavnih bolezni, alkohola in uživanja tobaka, testi seruma za hepatitisa B in virus C in drugih bolezni, so bili zbrani. Težki pivci so bili opredeljeni kot posamezniki pitje več kot 50 g alkohola na day.Table 1 Povzetek študijskih skupin.

NO

samci
ŽENSKE
povprečna starost (SD; RANGE)
rak jeter
178
145
33
66.1 (9,8; 20-88)
rak želodca
82
54
28
67,7 (13,9; 31-99)
kolorektalnega raka
151
82
69
66,3 (11,2; 33-89)
zdrave osebe
163
111
52
46,3 (12,7; 21-95)
št: število oseb
Vsi bolniki so bili pozvani, da sodelujejo v raziskavi, in vsi so se dogovorili, da to storijo. Kontrolni vzorci so bili pridobljeni iz študentov medicine Univerze in osebje bolnišnice. Zdravniški pregled je bila za identifikacijo predmetov v dobrem zdravstvenem stanju. Več kot 95% zdravih osebah zahtevanih dogovorili za sodelovanje v raziskavi. Protokol je odobril Odbor za etiko v Univerzitetni bolnišnici v San Carlos v Madridu. Možen moteč dejavnik v tej študiji je, da v študijski skupini, se lahko pogostost posameznikov, ki nosijo odločno alel varianto spreminja s starostjo v primeru, da bi prisotnost takšnih alel povezano z resnimi boleznimi. Če ima odločen genotip z "zaščitno učinek" proti nobeni bolezni, se lahko pričakuje, da v populacijah, sestavljene iz starejših osebah povečana pogostost takšnih zaščitna genotip. Zato smo vključili v kontrolni skupini izbrano podskupino 41 zdravih preiskovancih s starosti od 90 do 95 let [45]. Analiza
CYP3A4 in CYP3A5
genotip kaže frekvenc za genotipov, ki so enaki tistim pri mlajših zdravih osebah. Frekvence za CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
alelov so bile podobne pri mlajših in starejših kontrole (glej poglavje Rezultati). 4,33% in 90,7% za mlajše nadzora in 4.18 in 91,2% za starejše kontrole. Druga možna confounder je povezan z dejstvom, da so nadzorne predmeti visoko izobraženih ljudi, in razlike v življenjskem slogu, v primerjavi s katero se pričakuje, bolniki z rakom. Ker so prebavne raka delno povezanih s prehrano, lahko te spremembe v načinu življenja so pomembni. Vendar pa je treba poudariti, da so bili bolniki in kontrole na razgovor, da se zagotovi, da prehrana in način življenja narediti med bolniki in kontrolnimi osebami ne razlikujejo.
Vzorce krvi od vseh udeležencev smo hranili pri -80 ° C do analize. Genomsko DNA smo pripravili iz perifernih levkocitov, in raztopimo v sterilno 10 mM Tris-HCl, pH 8,0, 1 mM etilendiamintetraocetna kisline, pri končni koncentraciji od 400 do 600 mg na ml. Vzorce DNK smo očistili po standardnih postopkih [46] in shranjeni pri 4 ° C v sterilni viali plastičnih.
analize za CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
genske variante so bile, ki jih izvajajo ojačanja-omejitev postopki, kakor je opisano drugje [47, 48]. Te alelne variante so bili analizirani namesto drugih, ker so to skupne variante, ki povzročajo funkcionalne spremembe. [47, 48].
Statistična analiza
Študija je bila zasnovana ob upoštevanju pričakovane pogostosti posameznikov izražanje CYP3A5, in sicer z najmanj enim CYP3A5 * 1
alel, kar predstavlja 13% belcev prebivalstva [20]. Zasnova omogoča identifikacijo kot statistično značilna povečana za 1,7-krat ali 2-kratno zmanjšanje pogostosti CYP3A5 expressers med bolniki z rakom. Statistični moč je bila ocenjena z genetskim modelom analizirati pogostost nosilci gena bolezni z RR vrednost = 2,5 (α = 0,05). Moč izračunana združenjem s tveganjem za nastanek raka na prisotnost CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
alelov je 90,2% in 99,3% za raka na jetrih, 74,5% in 93,9% za raka želodca in 87,7% in 98,8 % kolorektalnega raka oz. Vrednosti primerjava medskupinski smo izračunali s pomočjo statističnega paketa SPSS 11.0.1. (SPSS Inc. Chicago, Illinois, ZDA). Hi-kvadrat (X 2) Test je bil uporabljen za primerjavo genotipov frekvenc in združenja
CYP3A4 in CYP3A5
variante alelov, če se pogoji za uporabo tega testa niso bili ustrezni. V takih primerih je Fisherjev natančni preizkus se uporablja za izračun p
vrednost.
Rezultati
sedem različnih kombinacij
CYP3A4 in CYP3A5
genotipi so bile ugotovljene v študijskih skupinah. Povzetek genotipov je prikazana v tabeli 2. Iz primerjave genotipov frekvenc med prebavne rakavih bolnikov in zdravih kontrolah kaže podobno genotip frekvenco preko študijskih skupin. Ni bilo statistično pomembnih razlik. alelov varianta frekvence so, kot je izračunana iz genotipov prikazan v preglednici 2, so bili skoraj enaki pri vseh študijskih skupin: CYP3A4 * 1B
je bila prisotna pri alelov frekvencah 4,8 (95% CI 2.6-6.9), 3,7 (95% CI 0,8 -6,5) in 4,3% (95% interval zaupanja 2,0-6,6) za jetra, želodec in bolnikov z rakom debelega črevesa in danke, v tem zaporedju, in 4,3% (2.1-6.5) za zdrave posameznike. Alel frekvence za CYP3A5 * 3
bilo 91,9 (95% IZ 89,0-94,7), 95,7 (95% IZ 92,6-98,8) in 91,7% (95% IZ 88,6-94,8) za jetra, želodec in bolnikov z rakom debelega črevesa zaporedju, in 90,8% (95% interval zaupanja 87,7-93,9) pri zdravih posameznikih. Opazili so statistično pomembne razlike v alelov frekvencah, čeprav je pogostost za funkcionalno alel CYP3A5 * 1
med bolniki z rakom želodca nižja (približno 50%), kot so jih opazili pri ostalih študijskih skupin (p = 0,051, kot v primerjavi z zdravimi osebami) .table 2 CYP3A4
in CYP3A5
genotipov pri prebavnih rakavih bolnikov in zdravih kontrolah.
CYP3A4

CYP3A5
rak jeter
N (Frequency; 95% CI)
rak želodca
N (Frequency; 95% CI)
kolorektalnega raka
N (frekvenca; 95% CI)
Control predmeti
N (Frequency; 95% CI)
* 1A /* 1A
* 3 /* 3
144 (80,9; 75,1-86,7)
74 (90,2; 83.8-96.7)
121 (80,1; 73,8-86,5)
134 (82,2; 76.4-88.1)
* 1A /* 1A
* 1 /* 3
17 (9,6; 5,2-13,9)
2 (2,4; 0-5,8)
18 (11,9; 6,8-17,1)
14 (8,6; 4,3-12,9)
* 1A /* 1A
* 1 /* 1
0
0
0
1 (0,6; 0-1,8)
* 1A /* 1B
* 3 /* 3

5 (2,8; 0,4-5,2)
1 (1,2; 0-3,6)
5 (3,3; 0,5-6,2)
1 (0,6; 0-1.8)
* 1A /* 1B
* 1 /* 3
12 (6,7; 3,1-10,4)
5 (6.1; 0.9-11.3)
6 (4,0; 0,9-7,1)
12 (7,4; 3,3-11,4)
* 1A /* 1B
* 1 /* 1
0
0
0
1 (0,6; 0-1,8)
* 1B /* 1B
* 1 /* 3
0
0
1 (0,7; 0-2,0)
0
tako
CYP3A4 in CYP3A5
genotipi so bili v ravnotežju Hardy-Weinberg je med primerov in kontrol ter alelov varianta frekvence so enake kot poročajo tako, evropski in ameriški belci [20, 49]. Kar zadeva povezavo med CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 1
alelov je delež posameznikov, ki imajo obe variante je precej višja pri vseh študijskih skupin (6,7%, 6,1% in 4,6% za jeter, želodca in debelega črevesa bolniki z rakom in 7,4% za kontrolne skupine), kot pričakujejo od naključno združenja teh alelov (0,3 do 0,8% posameznikov, kot je izračunana na podlagi dejanskih alelov frekvenc v študijskih skupinah). Te ugotovitve so v dogovoru s prejšnjo raziskavo, ki poroča tako SNP združenje v drugi kavkaški populaciji s frekvenco 7,1%. [22, 43]. Med bolniki, je bila starost ob diagnozi podobna v vseh podskupinah bolnikov, in ta parameter ni bil povezan s genotipov. V zvezi s kontrolnimi osebami, frekvence za CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
alelov je bilo 4,33% in 90,7% za mlajše kontrol in 4.18 in 91,2% za starejše kontrol. Spol, prejšnji kirurška terapija ali kemoterapija, zloraba alkohola ali uporaba tobaka ni vplival na porazdelitev polimorfizmov proučevanih med bolniki. Med bolniki z rakom jeter niso opazili nobenih razlik v porazdelitvi polimorfizmov v zvezi s kronično okužbo z virusom hepatitisa B ali C. Med bolniki z rakom želodca niso opazili statistično pomembne razlike glede na anatomske mestu tumorja. V nasprotju s tem velike razlike, ki kažejo povečanje pogostosti prevoznikov CYP3A4 * 1A
plus CYP3A5 * 3
haplotip, so pri bolnikih z rakom črevesnih tipa želodca opazili v primerjavi z zdravimi kontrolami (95,3% v primerjavi s 82,8 %, p. < 0,05)
bolnikov z rakom debelega črevesa so bile razdeljene v tri podskupine glede na anatomske mestu tumor (non sigmasto debelega črevesa, sigmoid debelega črevesa in danke), zaradi razlik v regiji drugih polimorfizmov z drogami presnovnih encimov, povezanih s spletno mesto tumorja so poročali [50, 51]. Rezultati so povzeti v tabeli 3. Presežek bolnikih z ne-sigmasto raka debelega črevesa, ki izvajajo združene genotip CYP3A4 * 1A /* 1B
plus CYP3A5 * 3 /* 3
so opazili pri zdravih osebah (Chi kvadratne in pravokotne = 10,3, p = 0,0015, ki niso pomembni za multiplo primerjavi analiz) Kar zadeva alel frekvenc, CYP3A4 * 1B
alel frekvenca je bila 6,6%, 5,9% in 1% in CYP3A5 * 3 frekvenca je bila 91,1%, 90,1% in 93,6% pri bolnikih z ne-sigmoidne debelega črevesa, sigmoid debelega črevesa in danke oz. Delež posameznikov, ki opravljajo CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 1
alelov je bilo 13,3%, 9,8% in 1,8% za bolnike z ne-sigmoidne debelega črevesa, sigmoid debelega črevesa in danke oz. Nobena od teh razlik so bile statistično značilne. Ni razlike glede stopnje Dukes tumorja so observed.Table 3 CYP3A4
in CYP3A5
genotipov pri bolnikih z rakom debelega črevesa in danke po tumorja mesto.
CYP3A4
CYP3A5
NON-sigmasto
N (FREQUENCY; 95% CI)
sigmasto
N (FREQUENCY; 95% CI)

danke
N (pogostost; 95% CI)
* 1A /* 1A
* 3 /* 3
33 (73,3; 60,4-86,3)
40 (78,4; 67,1-89,7)
48 (87,3; 78,5-96,1)
* 1A /* 1A
* 1 /* 3
6 (13,3; 3,4-23,3)
6 (11,8; 2,9-20,6)
6 (10,9; 2,7-19,1)
* 1A /* 1B
* 3 /* 3

4 (8,8; 0,6-17,2) *
1 (2,0; 0-5,8)
0
* 1A /* 1B
* 1 /* 3
2 (4,4; 0 -10,5)
3 (5,9; 0-12.3)
1 (1,8; 0-5.3)
* 1B /* 1B
* 1 /* 3
0
1 (2,0; 0-5,8)
0
* p < 0,0015 v primerjavi z zdravimi osebami
Pogovor
metabolizma v zvezi z encimi CYP razlikujejo organov in tkiv, in zato se pričakuje, da se tkivo specifičnost proti snovi raku indukcijo povezane z site-specific izraz ksenobiotske-presnovnih encimov. Prebavne raka so močno povezane s prehranskimi dejavniki, in so bili predlagani mehanizmi, ki vključujejo interakcijo takih prehranskih dejavnikov z določenimi polimorfizmov ksenobiotske-presnovnih encimov [10]. Večina CYP
genov, ki so jih izrazili v človeškem črevesju in jetrih, in sicer CYP1A1
, CYP1A2
, CYP1B1
,
CYP3A4 in CYP3A5
[25], so zelo pomembni za rakotvorno aktiviranje. Z izjemo
CYP3A4 in CYP3A5
, so bile vse gene, ki kodirajo teh encimov pretehtati glede prebavnega tveganje za nastanek raka [1]. Ta študija je bila namenjena za zapolnitev vrzeli na trenutno znanje domnevni vlogi polimorfizmov od preostalih dveh pomembnih encimov CYP v prebavnem traktu.
CYP3A encimsko aktivnost kaže variabilnost zaradi kombiniranega učinka genetike in interakcije z zdravili ali okoljske kemikalije [22]. Oba
CYP3A4 in CYP3A5
genov so polimorfna in več variant alelov so opisani za bodisi
CYP3A4 ali CYP3A5
gena (za posodobljen seznam alelov, glej [52]). Le dve variante alelov, ki so na genetsko neravnostežje, in sicer CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
so skupne vsej različnih etničnih populacij in funkcionalno ustreznost. Druge variante alelov so bodisi zelo redki ali nepomembni za encimske aktivnosti [20], in zato niso bili analizirani v tej študiji.
Sedanji dokazi kažejo, da je CYP3A4 * 1B
in CYP3A5 * 3
funkcionalni polimorfizmi v vivo
. Glede CYP3A4 * 1B
, se zdi, da se spremeni sposobnost, da prebavi nekaj CYP3A substratov, kot so kinina [53], čeprav ne vpliva na metabolizem drugih podlagah, kot so midazolam ali dekstrometorfanom [49, 54]. CYP3A5 * 3
je najpogostejša CYP3A5
alel in je povezan z zelo zmanjšano encimsko aktivnost [20].
Ta študija prinaša nove ugotovitve o domnevni vlogi
CYP3A4 in CYP3A5
polimorfizmov v prebavnem tveganje za nastanek raka. Kljub prisotnosti CYP3A encimske aktivnosti v črevesju in jetrih in ustrezne vloge teh encimskih aktivnosti v rakotvorne aktivacije, naši rezultati ne podpirajo pomembno povezavo med skupnim
CYP3A4 in CYP3A5
polimorfizmov in rak prebavil tveganje. Kljub temu pa je možnost za nizke do zmerne učinek teh polimorfizmov zlasti v najmanjše skupine, raka na želodcu, ni mogoče izključiti. Manjše razlike v frekvencah, za posameznike, ki nosijo CYP3A4 * 1A
plus CYP3A5 * v nekaterih podskupinah raka želodca ali črevesa, opazili 3
haplotipov, kot pri zdravih osebah, pri p vrednostmi pod 0,05. Te razlike ni mogoče šteti za statistično značilne pri večkratnem primerjavi analiz, in ne zdi, da imajo ustrezno klinično učinek. Vendar pa je to tema, ki zasluži za preiskave in nadaljnje študije, bi se morala osredotočiti na vlogo teh polimorfizmov v jetrih, v želodcu ali kolorektalnega raka v populacijah z ekstremnimi pojavnosti te vrste raka.
Zaključek
Jemanje skupaj ugotovitve o katerih so poročali v ta študija, je mogoče sklepati, da je skupna polimorfizem CYP3A encimov s funkcionalno pomembni niso pomembni dejavniki pri prebavnih karcinogenosti v zahodni Evropi. To je v nasprotju z drugimi človeških rakih, ki so povezane s takšnimi polimorfizmov. Ker so človekove drobovje primarni tkiva, ki imajo stik s prehranskimi rakotvornih snovi, je zanimivo, da je tveganje za nastanek raka prebavnega ne spreminja genetski dejavniki, ki so povezani z drugimi človeškimi vrstami raka, kot prostate, raka dojke in pljuč, s čimer se krepi hipotezo, da se združenje CYP3A
polimorfizmov z prostate ali raka na dojki so povezane z endogene snovi namesto ksenobiotikov rakotvornim [37-43].
Izjave
Zahvala
Zahvaljujemo se gospe Diani Herrero za tehnično pomoč in prof James McCue za pomoč pri lektoriranje. Finančna podpora: Dotacije FIS 051056 od Fondo de Investigación Sanitaria, Instituto de Salud Carlos III (Madrid, Španija), SV-2003-00967 iz Ministerio de Ciencia y Tecnologia, Madrid, Španija in podelitev SCSS0414 od Junta de Extremadura, Consejería de Sanidad y consumo, Merida (Španija).
Konkurenca interesov
avtorja (ev), navedejo, da nimajo konkurenčnih interesov.

• Protivnetno, gastroprotektivna in anti-ulkusnih učinke rdečih alg Gracilaria changii (Gracilariales, Rhodophyta) izvleček
• Neo-adjuvantno kemoterapija in nato z operacijo in kemoterapijo ali z operacijo in kemoradioterapija za bolnike z resektabilne rakom želodca (kritikov)