Ploche ONE: Žalúdok Teplotný Records Reveal ošetrovateľská Správanie a prechod na solídnej úrovni spotreby potravín v neodstaveným cicavec, Harbour tuleních mláďat (Phoca vitulina)

abstraktné

Znalosť prenosu mlieka z matky na potomka a na začiatku pevných požití potravín v cicavcoch umožňuje väčšie pochopenie faktorov, ktoré ovplyvňujú prechod na nutričné ​​nezávislosti a pre-odstavenie rast a prežitie. Napriek tomu štúdie monitorovacie dojčí často spoliehali na vizuálne pozorovanie, ktoré nemusia presne predstavovať príjem mlieka. Hodnotili sme použitie žalúdka teploty telemetrie sledovať dojčatá a zháňanie potravy správanie vo voľnom-siahať tuleň ( Phoca vitulina
) mláďat počas laktácie. teplota žalúdka poklesy boli analyzované za použitia hlavnú zložku a zhlukovej analýzy, ako aj skúšky pomocou simulovanej žalúdok, čo má za presné klasifikáciu žalúdka teplota neklesne do mlieka, morskej vody a pevných požití potravín. Morská voda a tuhú stravu požití zastúpené v priemere 15,3 ± 1,6% [0 až 40,0%] a 0,7 ± 0,2% [0 až 13,0%], respektíve jednotlivých požití. Celkovo možno povedať, 63,7% mliečnych požití došlo pri šteňatá boli vo vode, z toho 13,9% bolo predchádzala morskou vodou požití. Priemerná doba medzi následnými požití bola výrazne nižšia ako pre morskú vodu pre mlieko požití. Tieto výsledky naznačujú, že morská voda požití môže predstavovať vedľajší požitie počas vodné pokusov o dojčení. Alternatívne, ako pevnú stravu požití ( n
= 19) boli pozorované u 7 mláďat, morská voda požití môže dôjsť z zmeškaných koristi pokusy o zachytenie. Táto štúdia ukazuje, že niektoré tuleň obyčajný začať s požitím korisť, zatiaľ čo stále kojila, čo naznačuje, že odstavenie vyskytuje viac pozvoľna než sa predtým myslelo u tohto druhu. Teplota žalúdok telemetria predstavuje sľubnú metódu na štúdium sania správania u voľne žijúcich cicavcov a prechod na nutričné ​​nezávislosti u rôznych druhov endotermu

Citácia :. Sauvé CC, Van de Walle J, Hammill MO, Arnould JPY, Beauplet G (2.014 žalúdok) Teplotný Records Reveal ošetrovateľská Správanie a prechod do Solid spotreba potravín v neodstaveným cicavec, Harbour Seal Pup ( Phoca vitulina
). PLoS ONE 9 (2): e90329. doi: 10,1371 /journal.pone.0090329

Editor: Yan Ropert-Coudert, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Francúzsko

prijatá: 17. septembra 2013; Prijaté: 29. január 2014; Publikované: 26. februára 2014

Copyright: © 2014 Sauvé et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Toto dielo bola podporená prírodných vied a Rady Engineering Research of Canada (URL: http://www.nserc-crsng.gc.ca/index_fra.asp~~HEAD=pobj; poskytuje rad 355536-2008, 358856-2008, 390930-2010 k GB a 431802- 2012 CCS); a Fonds de recherche Nature et Technologies du Québec (URL: http://www.fqrnt.gouv.qc.ca/; grant číslo 2010-NC-132906 až GB). Québec-Ocean (URL: http://www.quebec-ocean.ulaval.ca/) a kanadskej Ministerstvo rybolovu a oceány (URL: http://www.dfo-mpo.gc.ca/index-eng. htm) za predpokladu, vedeckú a logistickú podporu v celom tomto projekte. Rybolov a oceány Kanada prispeli k zberu údajov a rukopis prostredníctvom odborných znalostí MO Hammill, P Carter, J-F Gosselin a S Turgeon. Okrem toho sa investori mali žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

Počas doby rodičovskej závislosti, rastu mláďat a prežitie spoliehať na rodičovskej nutričné ​​opravných položiek, väčšinou určené prevodom materského mlieka u cicavcov [1], [2]. Po nutričné ​​nezávislosti, potomkovia prežitie závisí od podmienok prostredia, hustotou obyvateľstva, telesných rezerv a schopnosť efektívne pasú v danom prostredí [3], [4], [5], [6], [7]. Takýto výrazný posun z faktorov, ktoré ovplyvňujú prežitie potomstvo robí prechod k nutričné ​​nezávislosti kritický proces v histórii života voľne žijúcich zvierat [1], [8], [9].

Štúdium ošetrovateľstva a pásť správania u cicavcov poskytuje dôležité informácie týkajúce sa prenosu energie z matky na potomka, rovnako ako prechod na nutričné ​​nezávislosti. Plutvonožcov (phocids, otariids a mrože) sú vynikajúce model pre porovnávacie štúdie správania dojčenia a prechodu na nutričné ​​nezávislosti, pretože samica rodí slobodný mladý, fylogenetický je prijateľne vytvorené medzi rodinami [10] a diferenčné párenie a materských stratégií, sú dobre zdokumentované medzi dvoma hlavnými rodín [11]. Medzi phocids (true záver), samice zvyčajne rýchlo na zemi po celej krátky (4-50 d
) dojčenia obdobie [11], [12]. Odstavenie je považovaný za náhle v phocids a nasleduje pôstu, počas ktorej pokračuje fyziologického vývoja a pasúce sa budú zlepšovať zručnosti [12], [13], [14], [15]. V otariids (tuleňov a tuleňov), samice striedajú medzi epizódami na zemi predovšetkým pre opatrovateľské a pásť výlety na mori [11], [16]. Otariid mláďatá začínajú konzumovať pevnú stravu blízko konca obdobia laktácie [12], [16], takže prechod na nutričné ​​nezávislosti pozvoľnejší v otariids než v phocids. Napriek týmto fylogeneticky rozdiely, samice niektorých druhov phocid nenasledujú typické phocid matiek stratégiu, ako sa pasú v priebehu obdobia laktácie [17], [18], [19], [20,]. V súlade s tým, tuleň ženy zaväzujú lietavky výlety na mori aj po prvom týždni dojčení [19], [21]. Tento materský stratégia "otariid typu" je myšlienka byť kvôli neschopnosti žien pre ukladanie dostatok energie a k podpore produkcie mlieka po celé obdobie laktácie [11]. Prístav tuleních mláďat sú tiež výnimočné medzi phocids, pretože oni berú k vode skoro po narodení [22], [23], [24], vykonávať skoky zvyčajne spojené s pásť sa pred odstavením [24] a niekedy sprevádzať svoju matku na mori počas zbierajúci cestách [23]. Avšak, to je všeobecne za to, že odstavenie u tohto druhu je náhla rovnako ako vo väčšine phocids [25].

štúdií skúmajúcich dojčenia správanie majú väčšinou spoliehal na priame pozorovanie [26]. Avšak, vizuálne pozorovanie voľne sa pasúcich zvierat sú často obmedzené na denných hodinách a sú ovplyvnené klimatickými podmienkami, polohe pozorovateľa a prístup k ošetrovateľských miest. Nočné a podvodné dojčiacich príhody boli hlásené u mnohých druhov cicavcov ( napr
. [27], [28], [29], [30]). Navyše skenovanie frekvencia nemusí byť reprezentatívny pre dojčené úspechu [31], [32], ktoré bránia presné charakterizácii s opatrovateľskou službou vzorov. Hoci energetika laktácie bola hodnotená pomocou nepriamej metódy, ako je riedenie izotopu a dvojnásobne označenú vodu v niekoľkých druhov ( napr
. [33], [34], [35], [36], [37 ], [38]), tieto metódy poskytujú iba informácie o priemernom prenos energie medzi dvoma časovými bodmi.

teplota žalúdka telemetrie bol vyvinutý a široko používajú na monitorovanie potravné správanie morských endotermní predátorov ( napr
, [39], [40], [41], [42], [43]). Vzhľadom k tomu, ich telesná teplota je vyššia než ich koristi, spotrebe potravín endotherms kŕmenie na chladnejších predmety výsledkov v žalúdku kolísanie teploty vyznačuje strmý pokles a následné exponenciálneho rastu (PDER udalosti; [39]). Rovnako tak, mliečne žľazy sa nachádzajú v dermis tkanive, ktorá je chladnejšie ako teplota jadra zvierat ( napr
., [44]). Dojča má preto za následok udalosti PDER v žalúdku potomkovia teploty [28]. Žalúdok teploty telemetrie sa ukázala byť cenným technikou pre detekciu sajúci udalostí ako v zajatí [28] a voľne pohybuje [29] prístav tuleních mláďat, čo predstavuje sľubnú metódu pre štúdium ošetrovateľstva správanie v rôznych voľne žijúcich cicavcov. Interpretácia dát žalúdok teplote v rozmedzí od dojčiacich cicavcov vyžaduje overenie techniku ​​s cieľom rozlíšiť PDER udalosti spojené s dojčatá od prípadov spôsobených morskou vodou alebo pevným príjmom potravy. Materského mlieka, morská voda a ectothermic organizmy majú rôzne teploty a /alebo termodynamické vlastnosti také, že ich požitie by prinášajú odlišný PDER vzory krivky (obr. 1). Požitie materského mlieka od mláďat tesnenie bolo preukázané, že za následok PDER udalostí podstatne nižšia amplitúdu v porovnaní s morskou vodou alebo dravých požití [28], [29]. Podobne, morská voda má vyššiu tepelnú vodivosť a nižšiu viskozitu ako položky koristi ( napr.
Rýb), čo má za následok PDER akcií s rýchlejšiu regeneráciu žalúdka teplota [45], [46]. V súlade s tým, mlieko požití bol už skôr odlíšiť od požitia chladnejších materiálov v prístavných tuleních mláďat na základe rýchlosti poklesu teploty žalúdka [28], [29]. Podobne index rýchlosti zotavenia teploty už predtým bol vyvinutý, aby efektívne rozlíšiť spotreby rýb od slanej vody pitia u dospelých plutvonožcov a morských vtákov [41], [47]. Kombináciou týchto dvoch metód, mohlo by preto malo byť možné diskriminácia medzi tromi možnými typmi požití (mlieko, morskej vody a tuhú stravu) u dojčiacich mláďat. Takáto diskriminácia je nanajvýš dôležité presne vyšetriť ošetrovateľský správanie a prechod k nutričné ​​nezávislosti u cicavcov.

Hlavným cieľom tejto štúdie bolo poskytnúť metódu efektívne rozlíšiť tri možné typy pohltiť (mlieko, morskej vody a pevnú stravu), v domoch s opatrovateľskou cicavcov, ktorí sa živia chladnejších predmetov. Predpokladali sme, typy požití môžu byť rozlíšené na základe charakteristík jednotlivých PDERs ktoré generujú použitím kombinácie techník viacrozmerné analýzy dát a laboratórne žalúdočných simulácií [28], [46]. Ako morská voda požití bol často pozorovaný v záznamoch žalúdku teplotných z malej vzorky voľne sa pasúcich prístav tuleních mláďat [29], sme tiež testovali rôzne hypotézy vysvetľujúce spotrebu s morskou vodou od pre-odstavené mláďatá. Očakávali sme, že keď mláďatá piť morskú vodu keď dehydrované, výskyt morskej vode požití by sa pozitívne koreluje s dobou, ktorá uplynula od posledného mlieka požití. Alternatívne, v prípade, morská voda požití predstavuje dôsledok podmorských pokusov o dojčatá, že by sa pravdepodobne bude nasledovať následné požitia krátko potom. V neposlednom rade sme skúmali výskyt predbežného odstavenie pevného príjmu potravy u šteniat tuleň.

Materiály a metódy

tvrdenie etika

manipulačné postupy na zvieratách boli schválené starostlivosť o zvieratá výbory Université Laval (povolenka čísla: 200844 a 2011020) a pre rybolov a oceány Kanada (povolenka čísla: IML 2010-030, IML 2011-004 a 2012-003) IML

zaobchádzania so zvieratami a prístrojová <. br>

Táto štúdia bola vykonaná na Bic Island tuleň kolóniu (48 ° 24 'N, 68 ° 51' W), ktorá sa nachádza okolo súkromnom ostrove v ústí rieky St. Lawrence, počas 2010-12 obdobia rozmnožovania , Prístav tuleních mláďat boli zachytené s dlhým dip siete [48] v priebehu celého obdobia dojčenia (od polovice mája do júla). Na prvý zachytenie, šteňa pohlavie, pupka stavu a hmotnosti (± 0,5 kg, Salter jar stupnice, West Bromwich, Anglicko) boli zaznamenané. Aby sa uľahčilo zachytí, jednotlivci boli označené farebným a číslované hlavy tag (Seal Hat, Dalton, Anglicko) lepené (LoctiteƦkyanoakrylátové lepidlo a˩2 Accelerator, Loctite Corp., Mississauga, ON, Kanada) na hlave a označený jedinečný číslovaná tag v zadnej plutvy (Jumbotag, Dalton, Anglicko). Zachytí mláďat boli vykonávané tak často, ako je to možné až do odstavenia, s minimálnym odstupom 48 hodín medzi po sebe idúcimi snímky.

Pretože väčšina mláďat neboli zachytené bezprostredne po pôrode dva nepriame metódy boli použité pre odhad mláďat veku (D) , V prípade veľmi malých mláďat, vek bol stanovený v súlade s pupok degenerácia fázach [48], [49], [50]. V starších mláďat, jednotlivci boli vážil viac ako raz počas sezóny a veku bola stanovená spätný výpočet, aby pôrodnou hmotnosťou za použitia tempo rastu znamená pre kohorty (podrobne [51]).

Na monitorovanie teploty žalúdka zmeny, voľne pohybuje mláďat boli vybavené žalúdok teplotách piluliek (STP; nemodifikovaná StP3: 32 g, 6,3 cm x 2,2 cm; Wildlife Computers Inc., Redmond, WA, USA), ktorý zaviedla intubáciou s použitím namazaný (KY Jelly , Johnson &Johnson, New Brunswick, NJ, USA) s priemerom 2,54 cm rúrka vložená do žalúdka [29]. Každých 10 s, dáta STP boli podrobené časovo hĺbky rekordéra (TDR; MK10-L, Wildlife Computers Inc.) prilepená (5-Cure morské epoxidové, priemyslové Výrobcovia prípravkov, Auburn, WA, USA), aby šteňa chrbtovej kožušiny [ ,,,0],29]. Vykonali sme testy kalibračné laboratóriu STP (pozri [28] pre protokol podrobnosti), ktorá je uvedená priemerná doba odozvy 18 ± 2 s (interval: 10 - 27 s) kvôli oneskoreniu medzi emisiami STP a TDR príjem dát teploty. Okrem toho, aby uľahčila premiestnenie pre vychytávať, VKV vysielačom (3Pn, Sirtrack ltd., Havelock North, Nový Zéland) bol tiež nalepené na krku šteňa je. Údaje z prístrojov pripojenými ku zvieraťu boli stiahnuté v oblasti na seba zachytiť pomocou prenosného počítača. Manipulácia čas zriedka prekročila 15 min od zachytenia k uvoľneniu.

Spracovanie dát, analýza a simulácia teplotných žalúdočné

Všetky spracovanie dát a štatistické analýzy boli vykonané v rámci výskumu životného prostredia [52], pokiaľ nie je uvedené inak , údaje o teplote žalúdok (± 0,1 ° C) boli získané od TDRS pomocou v1.25.2006 software Mk10host (Wildlife Computers Inc.). Vzhľadom k tomu, dôležité intra- a inter-individuálne rozdiely v záznamoch teploty žalúdočných zabrániť v použití automatizovaných metód na identifikáciu požití sa PDER udalosti boli identifikované vizuálne. Sken žalúdka teploty v závislosti na čase (s použitím prístroja Helper v3.0, divoká Computers Inc.) bola vykonaná na každý súbor lokalizovať PDER udalosti, ktoré sú definované ako prudký pokles žalúdka teplote najmenej 2 štandardné odchýlky od strednej teploty vypočítaná z posledných 10 min, s následným zvýšením exponenciálny tvaru teploty. PDER charakteristiky udalostí boli už skôr popísané pre morskú vodu, korisť (u dospelých) a mliečnych požití ( napr
. [28], [29], [40], [47], [53]). Každá udalosť PDER bol preto predbežne priradené k typu požití ( tj
mlieko, morská voda alebo pevných potravín) na základe amplitúdy a pokles tvaru krivky pre obnovenie (konvexné, konkávne alebo pseudo-lineárne, spojené s mliekom , tuhú stravu a morské požití, v uvedenom poradí) prezrieť v teplotných záznamoch (obr. 1b). Hoci subjektívne, táto kategorizácia slúžila ako spoľahlivý kritérium pre porovnávanie výsledkov z nasledujúcich objektívne metódy triedenia.

Ak chcete štatisticky klasifikovať teplota klesne do rôznych typov požití, tri body boli definované pre každú PDER udalosti (Obr. 1A [47], [53]): ( a
) bod predchádzajúceho nástup poklesu teploty ( tj
predtým, ako teplota klesne na alebo pod predchádzajúce priemernou teplotou (vypočítané u konca. 10 min) mínus 2 štandardné odchýlky (SD); [42]); ( B
) miesto, kde je dosiahnutá najnižšia teplota; a ( C
) bod, po ktorom teplota dosiahne stabilitu (± 1 štandardná odchýlka) po dobu najmenej 10 minút. Šesť premenné boli následne vypočítané pre každú udalosť PDER: (1) amplitúdy poklesu teploty, T _{A-T B
; (2) Trvanie poklesu teploty, t B-t A
; (3) teplota na polceste vyrovnanie teploty, T 0,5
kde (1) (4) Doba od bodu A
na polceste vyrovnanie teploty, t 0,5
; (5) index miery návratnosti teploty, I
[41], [47], kde (2) a (6) rýchlosť poklesu teploty, D, kde
(3)}

PDER udalostí, ktoré boli ťažké odlíšiť od prirodzených kolísaní teploty tela boli zaznamenané ako PDER udalostí nízka dôvera. Patrí medzi ne teplota klesne amplitúd menší ako 0,7 ° C, alebo teplota klesne prezentovať podobné znižovať aj zvyšovať sadzby alebo iné vlastnosti nie sú plne v súlade s definíciou PDER udalostí [39], [46]. Vzhľadom na ich nezvyčajného tvaru charakteristiky, skôr detailné premenné odvodené z nízke sebavedomie PDER udalostí nemuselo byť reprezentatívne typických PDER udalostí. Podobne, keď došlo k viac ako jedna kvapka žalúdka teplota pred bolo dosiahnuté stability, prekrývajúce PDER udalosti boli ošetrené dohromady a sú definované ako viac PDER udalosti [46]. Pre tieto konkrétne udalosti, body A
B stroje a C
iba vyznačuje väčší pokles zápasu. Avšak, Wilson et al
. [46] zistili, že reakcia STP bol menej variabilné, v priebehu prvého požití v porovnaní s následnými požití tohto záchvatu. Preto premenné vypočítané pre viac PDER udalosti nie sú reprezentatívne typických PDER udalostí buď a treba posudzovať oddelene. metódy zhlukovaniu sú silne ovplyvnené odľahlých hodnôt. Aby sa zabezpečilo vytvorenie PDER skupín, udalostí, ktoré presne odrážajú prirodzené rozdiely v správaní pri požití, nízka dôvera a viac PDER udalosti boli vylúčené z analýzy klastra.

Použitie iba nerozdeleného PDER udalosti, analýzy hlavných komponentov (PCA ) bola vykonaná na základe stredom a meradlo hodnôt premenných 6 pre generovanie nekorelované faktory, na ktorých otáčanie Varimax (balík Psych
), bola použitá [54]. Faktory s vlastným číslam > 1 (Kaiser kritérium) boli zachované a ich výsledky boli použité na vykonanie hierarchickej, kompletné-väzbovú analýzu klastra. Tento prístup umožnil stanovenie príslušného počtu zhlukov prítomných v dátovom súbore pomocou úrovne fúzny hodnoty kritéria [55], ako aj identifikácia klastrov centier. Tieto centrá bola zavedená ako počiatočná semien pri zhlukovaniu non-hierarchické K-means, ktorá bola opakovaná až do hodnoty stali centrum konštantný [56]. Kategorizácia PDER udalostí zo strany zhlukovaniu metódou najbližších stredov postupu boli v porovnaní s ich subjektívne vizuálnou klasifikácii zistiť, či rôzne skupiny získané zhodoval so špecifickým typom požitia ( tj
mlieko, morská voda, alebo pevnej stravy).

pre ďalšie zvýšenie efektivity rozlišovať medzi spotrebou vody a pevnej stravy, požití boli umelo simulované. STP bol vložený do balóna a ponorí do cirkulujúcej vodnom kúpeli pri strednej teplote simuluje žalúdočné PUP je (37,8 ° C; [28]). Voda alebo ryby (strih, nevypitvanej sleď) boli udržiavané pri 12,0 ° C, čo je najvyššia teplota vody zaznamenané vo študovanej oblasti v období dojčenia (St. Lawrence Global Observatory, Rimouski Station, 2010-2012). Položky boli potom vstrekuje do balóna s použitím 530 ml sacia pištoľ a zostala na mieste, keď sa zahreje na teplotu vodného kúpeľa. Ak chcete napodobniť pokles teploty vzory sa očakáva v žalúdku voľne sa pasúcich šteňaťa je, simulácia boli vyrobené s použitím rôznych množstvo vody (25-125 g) a rýb (30 až 300 g). Vzhľadom na to, že cieľom týchto simulácií bolo upozorňovať na rozdiely v charakteristikách teplota klesne vytváraných vody a rýb požití, absolútna úroveň hmotnej otepľovanie nebolo dôležité. bol urobený žiadny pokus napodobniť tepelnú vodivosť a miešanie vzory žalúdka šteňa je. V dôsledku toho, PDER udalosti z laboratórnych simulácií boli charakterizované väčším poklesom teploty nasleduje pomalší oteplenie ako tie, ktoré by boli zaznamenané v živých zvierat. Keďže rozdiely v PDER udalosti boli v simulácii využívajúce morskú vodu a rybie požití zistené, relatívne porovnanie medzi týmito rôznymi typmi požití by však mohli byť aplikované na PDER udalosti extrahované z nahrávok voľne sa pasúcich mláďat.

Pre každú experimentálne generované PDER akcie sa 6 premenné popísané vyššie boli vypočítané, stred a zmenšený, a zavedie sa do lineárnej diskriminačnej analýzy (LDA; balíček MASS
; [57]), v ktorom je množstvo (g) vstrekovaného materiálu bol pridaný ako 7 ^{th premennej. Premenná s najvyšším lineárnou diskriminačný koeficient bol považovaný za najlepší prediktor materiálu (vody alebo ryby), ktorý spôsobil pokles teploty [58]. Distribúcia Dej tejto konkrétnej premennej bol potom produkoval pre PDER udalostí zaznamenaných na voľne sa pasúcich mláďat (s výnimkou nízke sebavedomie a viac PDER udalostí). To umožnilo identifikáciu nespojitosti v distribúcii, ktoré odrážajú rôzne typy podania. PDER akcie boli následne klasifikovaná na základe ich relatívnej pozície v rámci distribúcie najlepším ukazovateľom premenné z dvoch nemliečnych typy požití (s morskou vodou alebo pevnú stravu).}

Výsledné klasifikácie z oboch metód, v kombinácii s predbežným vizuálne klasifikácie, sa porovnali a zlúčili tvoriť tri finálovej skupiny, pomenované podľa vypočítaného typu požití predstavovali ( tj.
mlieko, morskej vody a tuhú stravu). Tieto kategórie konečných boli použité ako zoskupenie faktorov vykonať LDA na klasifikovaný ( tj
jediné a vysoká spoľahlivosť) PDER udalosti za použitia rovnakých 6 vysvetľujúcich premenných, ktoré sa predtým používali v analýze klastra. Prediktívne funkcie generuje LDA bol následne použije na klasifikáciu dôveru a viac PDER udalostí nízke skôr vylúčené z oboch metód klasifikácie. Tento postup viedol všetky PDER udalosti, ktoré majú byť klasifikované ako mlieko, morskej vode, alebo pevné požitie potravín.

boli skúmané niekoľkými faktormi vysvetliť morskú vodu a solídny príjmu potravy v pre-odstavené mláďatá. Individuálne rýchlosť rastu bola vypočítaná ako koeficient všeobecný lineárny model na hmotnosti a veku, než odhadované odstavu veku (vek ≤33 d; [48]). Ďalej len "ťahal-out" alebo "vo vode" stav mláďat bola stanovená pre každú vyznačuje PDER udalosti pomocou mokrej /suchej prah svojho TDR. Doba, ktorá uplynula od posledného mlieka požitia, čas, ktorý uplynul od posledného požitia bez ohľadu na typ požití, uplynulý čas až do budúceho mlieka požití a dobe, ktorá uplynula až budúci požití boli počítané pre každú udalosť PDER a prostriedky porovnanie pre každý typ požití.

Ak je to vhodné, normalita bola testovaná pomocou testu Shapiro-Wilk a homogenity rozptylu s testom Levente na prostriedky (balík autá
, [59]). Keď bol kritériom normalita nebola rešpektovaná, Randomizácia testy (Rand-test; zmenená z [60]) s 5000 permutácie boli použité skôr než t-testy
porovnať štatistiky medzi skupinami. Výsledky boli považované za významné pri P < 0,05 a sú prezentované ako priemery ± štandardné chyby (SE), pokiaľ nie je uvedené inak

Výsledky

PDER udalosti vo voľne sa pasúcich mláďat a ich predbežná klasifikácia

boli prístroji celkom 40 voľne sa pasúcich mláďat. Z nich 35 za predpokladu, použiteľné údaje (tabuľka 1), čo vedie k celkovej dĺžke 565 d záznamu žalúdka teploty, s individuálnym priemerná doba 16,1 ± 0,9 d a celkom 1776 PDER udalostí. Celkový priemerný počet PDER udalostí na deň a šteňa bolo 3,1 ± 0. 3, s podstatným inter-individuálne rozdiely (rozmedzie: 0.6-4.7 PDER udalostí denne). Medzi identifikovanými PDER udalostí, 354 vystavovaných amplitúd < 0,7 ° C (ale ≥0.3 ° C), zatiaľ čo 142 mal nezvyčajné tvary krivky, ktoré tým boli klasifikované ako PDER udalostí nízka dôvera. Okrem toho, 13 boli považované za viac PDER udalostí, čo má za následok 1267 jedno a vysokých PDER udalostí spoľahlivosti.

Charakteristika komponentov faktorov získaných z PCA sú uvedené v tabuľke 2. V súlade s kritériom Kaiser, 2 faktory z PCA je vysvetlené 80.3% z celkovej variance a následne boli zachované. Boli zavedené tieto faktory do rotácie varimax, ktorá nemá vplyv na podiel celkovej variance vysvetliť, ale vyrovnal svoj oddiel medzi oboma faktormi. Zatiaľ čo jeden faktor Vystavené významné zaťaženie pre premenné týkajúce sa trvania PDER udalostí, premenné spojené s teplotou klesať silne namáhaná na iný faktor (tabuľka 3). To znamená, že tieto dva faktory získané gól na rôznych premenných v súlade s charakteristikami os PDER udalostí ". Okrem toho maximum-pravdepodobnosť Faktorová analýza odhalila, že dva faktory vyplývajúce z otočenom matrice boli dostatočné v modeli (fit = 0,98, χ ^{2
= 662,55, P Hotel < 0,001), podporuje ich uchovávanie pre ďalšiu analýzu. Absolútne hodnoty smerodajných zaťaženia boli > 0,30 aspoň jeden faktor pre šesť premenných, čo znamená, že všetky z nich sú dôležité v PCA (tabuľka 3; [61])}

výsledky pre dvoch. faktory pre každý z PDER udalostí 1267 boli vypočítané z otočené matricu a zavedená ako premenné v hierarchickej zhlukovej analýzy kompletnú-väzby. Podľa kritéria hodnotu úrovne fúzie, optimálny počet klastrov prítomné v údajoch bola k
= 5, pretože to bol prvý hodnota k
pred ktorým malý skok vo výkrese výšky uzla proti bol pozorovaný počet zhlukov (obr. 2, [55]). Hierarchická zhluková analýza dendrogram tak bola nakrájaná na k
= 5, a boli použité prostriedky čiastkových faktorov pre každý klaster ako počiatočný semien v zhlukovaniu nehierarchické K-means (obr. 3).

Keď boli PDER udalosti z výsledných skupín v porovnaní s ich predbežnej vizuálnou klasifikácie, tri skupiny obsahovali vysoký podiel PDER zistenými ako mlieko vstupy (skupina 1: 87,7%, skupina 3: 99,6% a skupina 5: 100%; obrázok 3), pričom dve skupiny boli prevažne zložené z zistenými buď ako voda alebo pevné príjmu potravín (skupina 2 :. 99,2% a skupina 4: 100%). Zhluková analýza neumožňovala diskrimináciu medzi morskou vodou a pevnými požitie potravín, ale oba typy požití mohli efektívne odlíšené od mlieka príjmu, s celkovým rozdielom vo výške 3,9% medzi viacrozmerné analýzy a vizuálne klasifikačné metódy.

Požitie simulácie a opravil klasifikácia PDER udalostí

Všetky injekcie vody a rýb v simulovaných žalúdkov viedli k náhlym poklesom nasledovaný exponenciálnym nárastom teploty zaznamenanej STP. Výsledný koeficientov lineárnych diskriminant zo LDA na 7 premenných (tabuľka 4) identifikovanej I Index
ako najúčinnejší prediktor skupiny. Aj
index vypočítaný pre vodné injekcie bola významne (rand-test, P
= 0,002) nižšie ako u rýb injekciu. Preto je I
index distribúcie bola vynesená pre PDER akcií zaradených do skupín 2 a 4 ( n
= 195; vody a tuhých požití potravín). Ako je znázornené na Obr. 4, zrejmý prerušenia bol prítomný v distribúcii, s hustotou rovnou nule pre Aj
hodnôt v rozmedzí od 77,3 do 108,3 ° C, s ^{-1. Predbežný vizuálne klasifikácia PDER udalostí zo skupín 2 a 4 s I
hodnoty > 92,8 y ° C -1 (stredný bod nulového rozsahu I
distribúciu , viď obr. 4, n
= 13) uviedla, že pravdepodobný sa vynoril z pevných potravín požitia, zatiaľ čo PDER udalosti majúce I
hodnoty < 92,8 y ° C -1 boli väčšinou vizuálne klasifikované ako morské požití.}

Vzhľadom k tomu, mliečne požití sa očakáva, že produkujú väčšie I
hodnoty v porovnaní s sypkých požití (viď obr. 1B), PDER udalosti zo všetkých skupín, ktoré majú Aj
hodnoty nižšie ako 92,8 ° C s ^{-1 ( n
= 251) boli klasifikované ako morskej vody požití. Na rozdiel od toho PDER akcie s I
hodnoty väčšie ako 92,8 ° C, s -1 boli kategorizované ako sypkých požití ( n
= 13), pri priradení do skupín 2 alebo 4, a ako mlieko požití ( n
= 1003), pri priradenie do skupín 1, 3 alebo 5 pomocou zhlukovej analýzy.}

výslednej lineárne diskriminant zo LDA vykonaná na 1267 PDER udalostí klasifikovaných ako s vysokou mierou istoty a jediný sú uvedené v tabuľke 5. Výsledná prediktívne funkcia povolená klasifikácii zvyšných 517 viac či nízke sebavedomie PDER akcií s 98,3% z súlade s predbežnou vizuálnou klasifikácie. V dôsledku toho sú všetky 1776 PDER udalosti boli klasifikované buď ako mlieka ( n
= 1478), morskej vode ( n
= 279) alebo sypkých požití ( n =
19). Celková rozpor v skupine rozdelenie medzi kombinovanej štatistické analýzy a predbežnej vizuálne klasifikácia bola 2,4%, a to hlavne z dôvodu PDER udalostiach od skupiny 1 (viď obr. 3), ktoré boli vizuálne považované za sypkých požití, aj keď je označovaná ako mlieko požití podľa štatistická metóda.

požití kategórií a spotreba správanie

Kým morskou vodou a tuhú stravu požití zastúpené 15,7% a 1,1% všetkých PDER udalostí z, respektíve relatívny význam každého typu požití značne líšili medzi jednotlivcami (tabuľka 6). Nie je prekvapením, že mlieko reprezentoval najbežnejším typom požití u všetkých mláďat, s relatívnou podiel celkových jednotlivých požitie v rozmedzí od 60.0-100% (priemer = 84,1 ± 1,7%). Morská voda požití cez jedincov pohybovali v rozmedzí od 0-40.0% (priemer = 15,3 ± 1,6%) z PDER udalostí, zatiaľ čo pevných potravín zastúpená 0-13.0% (priemer = 0,7 ± 0,2%) z celkového počtu požitia medzi jednotlivcami. Všetci ale jeden jedinec požil morskú vodu aspoň raz počas doby záznamu. Medzi 7 mláďat boli zistené celkovo 19 pevných potravín požití. Medzi týmito mláďat, 9 tuhú stravu požití boli zaznamenané v jednej osoby, zatiaľ čo medzi ostatnými 6 zvierat pevnú stravu sa požitého na ≤3 príležitostiach.

Celkovo možno povedať, šteňatá boli vo vode pri 63,7% mliečnych požití, z ktorých 13,9% bolo predchádzala akcia morskej vody požití. Takmer všetky (98,5%), z morskej vody požití došlo pri mláďatá vo vode. Okrem toho, mláďatá sa obvykle ešte vo vode pri vykonávaní následnej nasatí po požití morskej vody (98,6% a 72,2%, kedy tieto boli požití morská voda alebo mlieko, v tomto poradí). Zaujímavé je, že šteňatá, že požití pevnú stravu vykazovali väčší výskyt vodného ošetrovateľstvo (mlieko požití zatiaľ čo šteňa bol vo vode), ako mláďatá, ktorá nemala požívať pevnú stravu (P < 0,001 znamená = 80 ± 4% a 54 ± 6%, v tomto poradí).

Milk požití došlo po celú dobu sledovania teploty v žalúdku, zatiaľ čo prvý identifikovaný spotreba morskej vody a pevné potraviny došlo v 4 a 12 dní veku, resp. Ako je znázornené na Obr. 5, podiel požití spojených s dojčenia sa znížil z 94,4% v deň 1 až 77,4% v deň 20, a ďalej zvýšila až na 90,0% až odhadovanej odstavu veku (deň 33, [48]).

• Ploche ONE: Živiny diferenčné Regulovať Nucleobindin-2 /Nesfatin-1 in vitro kultivované žalúdka Ghrelinoma (MGN3-1 bunky) a in vivo u samcov Mice
• Ploche ONE: Kvantifikácia chitinasy mRNA hladiny u človeka a myši tkanív real-time PCR: Druhovo špecifická expresia kyslé cicavcov chitinázy v žalúdku Tissues