PLOS ONE: Los registros de temperatura de estómago revelan Comportamiento de enfermería y transición a que el consumo de alimentos sólidos en un sin destetar Mamífero, el puerto de cría de foca (Phoca vitulina)

Extracto

El conocimiento de la transferencia de la leche de madre a hijo y sólidos principios ingestas de alimentos en los mamíferos permite una mayor comprensión de los factores que afectan la transición a la independencia nutricional y el crecimiento de pre-destete y la supervivencia. Sin embargo, los estudios de seguimiento comportamiento de succión a menudo se han basado en observaciones visuales, lo que podría no representar con precisión el consumo de leche. Se evaluó el uso de estómago telemetría de temperatura para controlar la succión y el comportamiento de forrajeo de foca de puerto que viven en libertad ( Phoca vitulina
) las crías durante la lactancia. descensos de temperatura de estómago se analizaron utilizando componentes principales y análisis de clúster, así como los ensayos mediante los estómagos simuladas resultantes en una clasificación precisa de la temperatura del estómago gotas a la leche, agua de mar y las ingestiones de alimento sólido. El agua de mar y la ingestión de alimentos sólidos representaron en promedio 15,3 ± 1,6% [0 a 40,0%] y 0,7 ± 0,2% [0 a 13,0%], respectivamente, de las ingestiones individuales. En general, 63,7% de la ingestión de leche produjo mientras los cachorros estaban en el agua, de los cuales 13,9% era precedida por la ingestión de agua de mar. El tiempo medio transcurrido entre la ingestión posteriores fue significativamente menor para el agua de mar que para la ingestión de leche. Estos resultados sugieren que la ingestión de agua de mar podría representar la ingestión colateral durante los intentos de lactantes acuáticos. Por otra parte, la ingestión de alimentos sólidos ( n
= 19) se observaron entre 7 cachorros, la ingestión de agua de mar podría ser el resultado de los intentos de captura de presas perdidas. Este estudio muestra que algunas focas empiezan a ingerir presas sin dejar de ser amamantado, lo que indica que el destete se produce de forma más gradual que se había pensado en esta especie. telemetría la temperatura del estómago representa un método prometedor para estudiar el comportamiento de la lactancia en los mamíferos salvajes y de transición a la independencia nutricional en diversas especies endotherm

Visto:. Sauvé CC, Van de Walle J, MO Hammill, Arnould JPY, Beauplet G (2014 los registros de temperatura de estómago) revelan Comportamiento de enfermería y transición a que el consumo de alimentos sólidos en un sin destetar Mamífero, el puerto de cría de foca ( Phoca vitulina
). PLoS ONE 9 (2): e90329. doi: 10.1371 /journal.pone.0090329

Editor: Yan Ropert-Coudert, Instituto pluridisciplinario Hubert Curien, Francia |

Recibido: 17 Septiembre, 2013; Aceptado 29 de enero de 2014; Publicado: 26 Febrero 2014

Derechos de Autor © 2014 Sauvé et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan

Financiación:. Este trabajo recibió el apoyo de Ciencias Naturales e Ingeniería de Investigación de Canadá (URL: http://www.nserc-crsng.gc.ca/index_fra.asp; concede número 355536-2008, 358.856 hasta 2008, desde 390.930 hasta 2.010 GB y 431802- 2012 al CCS); y Fonds de recherche et Naturaleza Tecnologías du Québec (URL: http://www.fqrnt.gouv.qc.ca/; subvención número 2010-NC-132 906 GB). Quebec-Océan (URL: http://www.quebec-ocean.ulaval.ca/) y el Departamento canadiense de Pesca y Océanos (URL: http://www.dfo-mpo.gc.ca/index-eng. htm) proporciona apoyo científico y logístico a lo largo de este proyecto. Fisheries and Oceans Canada contribuido a la recopilación de datos y preparación de manuscritos a través de la experiencia de MO Hammill, P Carter, J-F Gosselin y S Turgeon. Más allá de eso, los proveedores de fondos no tiene función alguna en el diseño del estudio, la recogida y el análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito

Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia

Introducción

Durante el periodo de dependencia de los padres, el crecimiento de la descendencia y la supervivencia depende de la provisión de nutrición parental, determinada principalmente por la leche materna en la transferencia de los mamíferos [1], [2]. Tras la independencia de nutrición, supervivencia de las crías depende de las condiciones ambientales, la densidad de población, las reservas del cuerpo y la capacidad de ramoneo de manera eficiente en un entorno determinado [3], [4], [5], [6], [7]. Dicho marcado cambio de los factores que afectan la supervivencia de los hijos hace que la transición a la independencia nutricional de un proceso crítico en la historia de la vida de los animales silvestres [1], [8], [9].

El estudio de la enfermería y la búsqueda de alimento comportamiento en los mamíferos proporciona información importante relacionada con la transferencia de energía de la madre a la descendencia, así como la transición a la independencia nutricional. Pinnípedos (fócidos, otáridos y morsas) son un excelente modelo para el estudio comparativo del comportamiento de succión y la transición a la independencia nutricional ya que las hembras dan a luz a un solo joven, filogenia se establece aceptablemente entre las familias [10], y de acoplamiento diferencial y estrategias maternas están bien documentados entre las dos grandes familias [11]. Entre fócidos (focas verdaderas), las hembras suelen ser rápidos en tierra a lo largo de un corto (4-50 d
) período de lactancia [11], [12]. El destete se considera que es abrupto en fócidos y es seguido por un periodo de ayuno durante el cual continúa el desarrollo fisiológico y habilidades de forrajeo se mejoran [12], [13], [14], [15]. En otáridos (lobos finos y lobos marinos), las hembras entre los episodios alternos en tierra principalmente para la enfermería y los viajes de alimentación en el mar [11], [16]. cachorros Otariid comienzan a consumir alimentos sólidos cerca del final del período de lactancia [12], [16], haciendo que la transición a la independencia nutricional más gradual en otáridos que en fócidos. A pesar de estas diferencias filogenéticas, las hembras de algunas especies phocid no siguen la estrategia materna phocid típica, ya que se alimentan en el curso del período de lactancia [17], [18], [19], [20,]. En consecuencia, las hembras de foca de puerto se comprometen viajes de alimentación en el mar más allá de la primera semana de la lactancia [19], [21]. Esta estrategia materna 'de tipo otariid' se piensa que es debido a la incapacidad de las mujeres para almacenar suficiente energía y la producción de leche apoyo durante todo el período de lactancia [11]. Harbour crías de foca también son excepcionales entre los fócidos porque toman al agua poco después del nacimiento [22], [23], [24], lleve a cabo inmersiones por lo general asociados con la búsqueda de alimento antes del destete [24] y, a veces acompañan a su madre en el mar durante los viajes de alimentación [23]. Sin embargo, en general se considera que el destete en esta especie es abrupta como en la mayoría fócidos [25].

Los estudios que investigan el comportamiento de succión se han basado principalmente en observaciones directas [26]. Sin embargo, las observaciones visuales de los animales criados en libertad a menudo se limitan a las horas del día y se ven afectados por las condiciones climáticas, la posición del observador, y el acceso a los sitios de enfermería. lactantes eventos nocturnos y submarinas se han reportado en muchas especies de mamíferos ( por ejemplo
., [27], [28], [29], [30]). Por otra parte, las frecuencias de exploración pueden no ser representativos de la succión éxito [31], [32], lo que dificulta la caracterización precisa de los patrones de enfermería. A pesar de la energética de la lactancia se ha evaluado el uso de métodos indirectos, tales como la dilución de isótopos y agua doblemente marcada en varias especies ( por ejemplo
., [33], [34], [35], [36], [37 ], [38]), estos métodos sólo proporcionan información sobre la transferencia de energía promedio entre dos puntos de tiempo.

telemetría temperatura de estómago ha sido desarrollado y ampliamente utilizado para monitorear el comportamiento de alimentación de los depredadores marinos endotherm ( por ejemplo,
, [39], [40], [41], [42], [43]). Debido a que su temperatura corporal es mayor que la de su presa, el consumo de alimentos por endotermas se alimentan de más frías artículos resulta en una variación de la temperatura estómago caracterizada por una caída en picado y el aumento exponencial posterior (evento PDER; [39]). Del mismo modo, las glándulas mamarias están situados en el tejido de la dermis, que es más fría que la temperatura del núcleo de los animales ( por ejemplo
., [44]). por lo tanto, Suckling resulta en un evento PDER de la temperatura descendencia estómago [28]. telemetría la temperatura del estómago ha demostrado ser una técnica valiosa para la detección de eventos, tanto en lactantes cautiva [28] y el pastoreo libre [29] crías de foca de puerto, lo que representa un método prometedor para estudiar el comportamiento de enfermería en diversos mamíferos salvajes. La interpretación de los datos de temperatura del estómago de los mamíferos lactantes requiere una técnica de validación con el fin de discriminar los eventos PDER asociados con la succión de los causados ​​por el agua de mar o la ingestión de alimentos sólidos. la leche materna, agua de mar y los organismos ectothermic tienen diferentes temperaturas y /o propiedades termodinámicas de tal forma que su ingestión debe producir patrones de la curva distinta PDER (Fig. 1). La ingestión de leche materna en las crías de foca se ha demostrado resultar en eventos PDER de amplitud considerablemente menor en comparación con el agua de mar o ingestión presa [28], [29]. Del mismo modo, el agua de mar tiene una mayor conductividad térmica y la viscosidad más baja que las presas ( por ejemplo.
Pescado), dando como resultado eventos PDER con una recuperación más rápida la temperatura del estómago [45], [46]. En consecuencia, la ingestión de leche ha sido distinguido con anterioridad por la ingestión de materiales más frías en las crías de foca de puerto en base a la tasa de disminución de la temperatura del estómago [28], [29]. Del mismo modo, un índice de la tasa de recuperación de la temperatura previamente ha sido desarrollado para discriminar de manera eficiente el consumo de pescado de beber agua de mar en los pinnípedos y aves marinas adultas [41], [47]. Mediante la combinación de estos dos métodos, la discriminación entre los tres posibles tipos de ingestión (leche, agua de mar y de los alimentos sólidos), por tanto, podría ser posible en lactantes cachorros. Esta discriminación es de primordial importancia para investigar con precisión el comportamiento de enfermería y la transición a la independencia nutricional en los mamíferos.

El objetivo principal de este estudio es proporcionar un método para discriminar de manera eficiente los tres tipos posibles de ingestión (leche, agua de mar y alimentos sólidos) en los mamíferos lactantes que se alimentan de los artículos más frescos. La hipótesis de los tipos de ingestión podían distinguirse en base a las características de los PDERs que generan utilizando una combinación de técnicas de análisis multivariante de datos y simulaciones de laboratorio de estómago [28], [46]. Como se observa con frecuencia la ingestión de agua de mar en los registros de temperatura del estómago de una pequeña muestra de las crías de foca de puerto en libertad [29], también a prueba diferentes hipótesis para explicar el consumo de agua de mar por los cachorros no destetados. Esperábamos que si las crías beben agua de mar cuando se deshidrata, la aparición de la ingestión de agua de mar se correlacionó positivamente con el tiempo transcurrido desde la última ingesta de leche. Alternativamente, si la ingestión de agua de mar es una consecuencia de los intentos lactantes bajo el agua, es probable que ser seguido por una ingestión posterior poco después. Por último, se determinó la prevalencia de pre-destete consumo de alimentos sólidos en las crías de foca de puerto.

Materiales y Métodos

Declaración de Ética

procedimientos de manipulación de los animales fueron aprobados por el Cuidado de Animales comités de la Universidad Laval (permisos números: 200844 y 2011020) y de Pesca y Océanos de Canadá (números de permisos: IML 2010-030, 2011-004 IML, y IML 2012-003) guía

manejo de animales y la instrumentación <. br>

Este estudio se llevó a cabo en la isla de Bic sello de puerto de colonias (48 ° 24 'N; 68 ° 51' W), que se encuentra alrededor de una isla privada en el estuario del río San Lorenzo, durante las épocas de reproducción 2010-12 . crías de foca del puerto fueron capturadas con una red de larga inmersión [48] durante el período de lactancia (desde mediados de mayo a julio). En la primera captura, sexo cachorro, estado ombligo y la masa (± 0,5 kg; Salter escala primavera, West Bromwich, Inglaterra) fueron registrados. Para facilitar recapturas, los individuos fueron marcados con una etiqueta de la cabeza de color y numerada (sello Sombrero, Dalton, Inglaterra) pegada (LoctiteƦde pegamento de cianoacrilato y˩2 Acelerador, Loctite Corp., Mississauga, ON, Canadá) en la cabeza y etiquetado con una etiqueta numerada en una única aleta posterior (Jumbotag, Dalton, Inglaterra). Recapturas de las crías se realizaron la mayor frecuencia posible hasta el destete, con un intervalo mínimo de 48 horas entre capturas sucesivas.

Como la mayoría de las crías no fueron capturados inmediatamente después del parto, se utilizaron dos métodos indirectos para estimar la edad cachorro (d) . En el caso de crías de muy corta edad, la edad se determina de acuerdo con las etapas ombligo degeneración [48], [49], [50]. En las crías de mayor edad, los individuos se pesaron más de una vez durante la temporada y la edad se determinó por extrapolación retrospectiva a la masa del nacimiento mediante una tasa de crecimiento media de la cohorte (detallado en [51]).

Para controlar la temperatura del estómago cambios, sin que van cachorros estaban equipados con pastillas de estómago-temperatura (STP; no modificado STP3: 32 g, 6,3 cm x 2,2 cm; Wildlife Computers Inc., Redmond, WA, EE.UU.) introducido por la intubación usando un lubricado (KY Jelly , Johnson & Johnson, New Brunswick, Nueva Jersey, EE.UU.) tubo flexible de diámetro 2,54 cm insertados en el estómago [29]. Cada 10 s, los datos de STP se transmiten a un registrador de tiempo-profundidad (TDR; MK10-L, Wildlife Computers Inc.) pegada (5-Cure Marina epoxi, formuladores industriales, Auburn, WA, EE.UU.) a la piel dorsal del cachorro [ ,,,0],29]. Se realizaron pruebas de laboratorio de calibración de los STP (ver [28] para el protocolo de datos) que indicaban un tiempo de respuesta promedio de 18 ± 2 s (rango: 10-27 s) debido al retraso entre la emisión y la recepción STP TDR de los datos de temperatura. Además, para facilitar la reubicación de recaptura, un transmisor de VHF (3PN, Sirtrack ltd., Havelock North, Nueva Zelanda) también estaba pegada en el cuello del cachorro. Los datos de los dispositivos todavía atar al animal se descargaron en el campo a cada uno recaptura usando un ordenador portátil. Tiempo de manipulación rara vez excede de 15 minutos desde la captura de su liberación.

Procesamiento de datos, análisis y simulaciones de temperatura del estómago

Todo el procesamiento de datos y los análisis estadísticos se realizan dentro del entorno R [52], a menos que se indique lo contrario . datos de la temperatura del estómago (± 0,1 ° C) se extrajeron de los TDR utilizando el software de v1.25.2006 Mk10host (Wildlife Computers Inc.). Desde importantes variaciones intra e interindividuales en los registros de temperatura del estómago impidieron el uso de métodos automatizados para identificar las ingestiones, los eventos PDER se identificaron visualmente. Una exploración de la temperatura del estómago en función del tiempo (usando Instrumento v3.0 ayudante, Wildlife Computers Inc.) se llevó a cabo en cada archivo para localizar eventos PDER, definida como fuertes caídas de la temperatura del estómago de por lo menos 2 desviaciones estándar de la temperatura media calculada sobre el anterior 10 min, seguido de un aumento de la temperatura en forma exponencial. características de los eventos PDER anteriormente se han descrito para el agua de mar, la presa (en adultos) y la ingestión de leche ( por ejemplo
., [28], [29], [40], [47], [53]). Cada evento PDER fue por lo tanto de forma preliminar asignado a un tipo de ingestión ( es decir
leche, agua de mar o alimentos sólidos) sobre la base de la amplitud de disminución y la forma de la curva de recuperación (convexa, cóncava o pseudo-lineal; asociados con la leche , la ingestión de alimentos y de agua de mar sólidos, respectivamente) vistos en los registros de temperatura (fig. 1B). Aunque subjetiva, esta categorización sirve como criterio fiable de comparación para los resultados de los siguientes métodos de clasificación objetivas.

Para clasificar estadísticamente la temperatura cae en los diferentes tipos de ingestión, se definieron tres puntos para cada evento PDER (fig. 1A; [47], [53]): ( Un
) el punto anterior al inicio de la disminución de la temperatura ( es decir, antes de
temperatura disminuye hasta o por debajo de la temperatura media anterior (calculado sobre. 10 min) menos 2 desviaciones estándar (SD); [42]); ( B
) el punto en que se alcanza la temperatura más baja; y ( C
) el punto después de lo cual la temperatura alcanza la estabilidad (± 1 s.d.) durante al menos 10 minutos. Seis variables se calcularon posteriormente para cada evento PDER: (1) la amplitud de la caída de la temperatura, T _{A-T B
; (2) la duración de la caída de la temperatura, t B-t Un
; (3) temperatura a la recuperación de la temperatura a medio camino, T 0,5
donde (1) (4) la duración desde el punto Un
de recuperación de la temperatura a medio camino, t 0,5
; (5) un índice de la tasa de recuperación de la temperatura, I
[41], [47] donde (2) y (6) la tasa de disminución de la temperatura, en donde D gratis (3)}

El PDER eventos que eran difíciles de distinguir de las variaciones de temperatura naturales del cuerpo se observaron eventos como pDER baja confianza. Estos incluyen caídas de temperatura amplitudes menores que 0,7 ° C o temperatura baja presentando tasas de disminución y aumento similares u otras características que no cumplan plenamente con la definición de suceso PDER [39], [46]. Debido a sus características de forma inusual, las variables anteriormente detallados derivados de eventos de baja confianza PDER podrían no ser representativos de los eventos típicos PDER. Del mismo modo, cuando se produjo más de una caída de la temperatura del estómago antes de llegar a la estabilidad, los eventos PDER superpuestas fueron tratados juntos y se definen como eventos múltiples PDER [46]. Para estos eventos en particular, los puntos Un
, B Opiniones y C sólo
ha caracterizado la mayor caída de la pelea. Sin embargo, Wilson et al
. [46] encontró que la respuesta STP fue menos variable durante la primera ingestión en comparación con las ingestiones posteriores de la pelea. Por lo tanto, las variables calculadas para múltiples eventos PDER no son representativos de los eventos típicos PDER bien y deben considerarse por separado. La agrupación de métodos se ven muy afectados por los valores atípicos. Para asegurar la formación de grupos de eventos PDER que reflejan con precisión las variaciones naturales en el comportamiento de la ingestión, la baja confianza y múltiples eventos PDER fueron excluidos del análisis de conglomerados.

Usando sólo los eventos PDER retenidas, un análisis de componentes principales (PCA ) se realizó en los valores centrados y escalados de las 6 variables para generar factores no correlacionados en el que una rotación varimax (paquete de psych
; se aplicó [54]). Factores con valores propios > 1 (criterio de Kaiser) fueron retenidos y sus puntuaciones se utilizaron para ejecutar un análisis completo del clúster-vinculación jerárquica. Este enfoque permitió la determinación del número apropiado de grupos presentes en el conjunto de datos utilizando el nivel de fusión valores criterio [55], así como la identificación de los centros de los conglomerados. Estos centros fueron introducidos como semilla inicial en un análisis cluster no jerárquico K-significa que se repitan ciertos hasta que los valores se convirtieron en centros de constante [56]. La categorización de los eventos PDER por los K-means clustering procedimiento se compararon con su clasificación visual subjetiva para determinar si los diferentes grupos obtenidos coincidieron con un tipo específico de la ingestión ( es decir
leche, agua de mar, o alimentos sólidos).

para aumentar aún más la eficiencia de discriminar entre el consumo de agua y alimentos sólidos, las ingestiones se simularon artificialmente. Un STP se insertó en un globo y se sumergió en un baño de agua en circulación se mantiene a una temperatura media simulando el estómago del cachorro (37,8 ° C; [28]). Agua o peces (corte, el arenque sin eviscerar) se mantuvieron a 12,0 ° C, la temperatura del agua más alta registrada en el área de estudio durante el período de lactancia (Observatorio Mundial de St. Lawrence, la estación de Rimouski, 2010-2012). Los productos se inyectaron en el globo con una pistola de aspiración 530 ml y se mantuvieron en su lugar mientras se calentaban a la temperatura del baño de agua. Para imitar los patrones de caída de temperatura esperados en el estómago de un cachorro que viven en libertad, las simulaciones se realizaron utilizando diferentes cantidades de agua (25-125 g) y peces (30-300 g). Dado que el objetivo de estas simulaciones es poner de relieve las diferencias en las características de las caídas de temperatura generados por la ingestión de agua y peces, la tasa absoluta de calentamiento material no era importante. No se hizo ningún intento de imitar la conductividad térmica y los patrones de mezcla del estómago de un cachorro. En consecuencia, los eventos PDER de simulaciones de laboratorio se caracterizan por mayores caídas de temperatura, seguido de calentamiento más lento que los que se hubieran registrado en animales vivos. Dado que no se detectaron diferencias en los eventos PDER en la simulación de agua de mar y peces ingestiones, las comparaciones relativas entre estos diferentes tipos de ingestión, no obstante, se podrían aplicar a eventos PDER extraídos de grabaciones cachorros criados en libertad '.

Para cada evento PDER generados experimentalmente , se calcularon las 6 variables descritas anteriormente, centradas y escalados, y se introducen en un análisis discriminante lineal (LDA; paquete MASS
; [57]) en la que la cantidad (g) de material inyectado se añadió como una 7 ^{º variable. La variable con el coeficiente más alto discriminante lineal se consideró como el mejor predictor del material (agua o pescado) que causó la caída de la temperatura [58]. Una gráfica de distribución de esa variable en particular se produjo luego de los eventos grabados en PDER cachorros criados en libertad (con excepción de la baja confianza y múltiples eventos PDER). Esto permitió la identificación de discontinuidades en la distribución que reflejaban diferentes tipos de ingestión. PDER eventos fueron posteriormente clasificados de acuerdo con su posición relativa en la distribución de la mejor variable predictora de los dos tipos de ingestión no lácteos (agua de mar o alimentos sólidos).}

Las clasificaciones resultantes de ambos métodos, combinados con el preliminar clasificación visual, se compararon y se agruparon para formar los tres últimos grupos nombrados de acuerdo con el tipo calculado que representaban la ingestión ( es decir
. leche, agua de mar y alimentos sólidos). Estas categorías finales fueron utilizados como la agrupación de factores para realizar una LDA en la clasificación ( es decir
confianza individual y alta) PDER eventos utilizando los mismos 6 variables explicativas utilizadas anteriormente en el análisis de conglomerados. La función de predicción generada por el LDA se utilizó posteriormente para clasificar los eventos PDER baja confianza y múltiples anteriormente excluidos de ambos métodos de clasificación. Este procedimiento llevó a todos los eventos PDER para ser clasificado como leche, agua de mar, o la ingestión de alimentos sólidos.

Hay varios factores que se investigaron para explicar el agua de mar y la ingestión de alimentos sólidos en las crías predestetados. tasa de crecimiento individual se calculó como el coeficiente de un modelo lineal general para el peso y la edad antes de la edad de destete estimado (edad ≤33 d; [48]). Se determinó la 'acarreado-out' o el estado 'en el agua' de los cachorros para cada evento PDER caracterizado utilizando el umbral húmedo /seco de su TDR. El tiempo transcurrido desde la ingestión de leche último, el tiempo transcurrido desde la última ingesta independientemente del tipo de la ingestión, el tiempo transcurrido hasta la próxima ingesta de leche y el tiempo transcurrido hasta el próximo ingestión se calcularon para cada evento PDER y los medios de comparación para cada tipo de ingesta.

Cuando sea apropiado, la normalidad se probó con la prueba de Shapiro-Wilk y la homogeneidad de la varianza con un test de Levene sobre los medios (paquete de coche
, [59]). Cuando el criterio de normalidad no se respetó, pruebas al azar (RAND-prueba; modificados a partir de [60]) con 5000 permutaciones se utilizaron en lugar de pruebas t
para comparar estadísticas entre los grupos. Los resultados se consideraron significativas a P < 0,05 y se presentan como medias ± error estándar (SE), a menos que se indique lo contrario

Resultados

eventos PDER en cachorros criados en libertad y su clasificación preliminar

se instrumentó un total de 40 crías en libertad. De éstos, 35 proporcionaron datos utilizables (Tabla 1), resultando en una duración total de 565 días de registro de la temperatura del estómago, con una duración media individual de 16,1 ± 0,9 D y un total de 1776 eventos PDER. La media del número total de eventos PDER por día y por las crías fue de 3,1 ± 0. 3, con importantes variaciones interindividuales (rango: 0.6-4.7 eventos PDER por día). Entre los eventos identificados PDER, 354 amplitudes exhibidos < 0,7 ° C (pero ≥0.3 ° C), mientras que 142 tenían formas de las curvas inusuales y, por lo tanto, fueron clasificados como eventos PDER baja confianza. Además, 13 fueron considerados como eventos múltiples PDER, resultando en 1267 PDER eventos individuales de confianza y altas.

Características de los factores componentes obtenidos de la PCA se presentan en la Tabla 2. De acuerdo con el criterio de Kaiser, 2 factores de la PCA explica el 80,3% de la varianza total y se mantuvieron posteriormente. Estos factores se introdujeron en la rotación varimax, que no afecta a la proporción de la varianza total explicada, pero igualan su partición entre ambos factores. Mientras que uno de los factores expuestos cargas importantes para las variables relacionadas con la duración de los eventos PDER, las variables asociadas con la temperatura disminuyen muy cargado en el otro factor (Tabla 3). Esto indica que los dos factores obtenidos anotó para diferentes variables de acuerdo con las características de los ejes de los eventos PDER '. Por otra parte, el análisis factorial de máxima verosimilitud reveló que los dos factores derivados de la matriz rotada eran suficientes en el modelo (ajuste = 0,98, χ ^{2
= 662,55, P Hotel < 0,001), apoyando su retención para su posterior análisis. Los valores absolutos de las cargas estandarizadas eran > 0,30 en al menos un factor para las seis variables, indicando que todas ellas eran relevantes en el ACC (Tabla 3; [61])}

Las puntuaciones de los dos. factores para cada uno de los eventos pDER 1267 se calcularon a partir de la matriz rotada y se introducen como variables en el análisis de agrupamiento completa-vinculación jerárquica. De acuerdo con el criterio de valor del nivel de la fusión, el número óptimo de las agrupaciones presentes en los datos fue k = 5
, porque era el primer valor de k
ante la cual un pequeño salto en la trama de la altura del nodo en contra se observó número de grupos (figura 2;. [55]). El dendrograma análisis de agrupamiento jerárquico fue cortado en tanto k
= 5, y se utilizaron los medios de factores componentes de cada grupo como semilla inicial en un análisis de conglomerados de K-medias no jerárquico (Fig. 3).

Cuando los eventos pDER de los grupos resultantes se compararon con su clasificación visual preliminar, tres grupos contenían un alto porcentaje de eventos pDER identificados como la ingesta de leche (grupo 1: 87,7%, grupo 3: 99,6% y el grupo de 5: 100%; Fig 3), mientras que dos grupos fueron predominantemente compuestos de eventos identificados como agua o la ingesta de alimentos sólidos (grupo 2:. 99,2% y el grupo 4: 100%). El análisis de conglomerados no permite la discriminación entre el agua de mar y la ingestión de alimentos sólidos, pero ambos tipos de ingestión de manera eficiente podría ser diferenciada de la ingesta de leche, con una diferencia global de 3,9% entre el análisis multivariado y el método de clasificación visual
.

simulaciones de ingestión y la clasificación corregida de eventos pDER

Todas las inyecciones de agua y los peces en los estómagos simulados dieron lugar a caídas repentinas, seguido de un aumento exponencial de la temperatura registrada por la STP. Como resultado coeficientes de discriminantes lineales de la LDA en 7 variables (Tabla 4) identificó los I
índice como el predictor grupo más eficiente. El I
índice calculado para las inyecciones de agua fue significativamente (rand-test, P
= 0,002) menor que el de las inyecciones de pescado. Por lo tanto, el I
distribución del índice se trazan para los eventos PDER clasificados en los grupos 2 y 4 ( n = 195
, el agua y la ingestión de alimentos sólidos). Como se muestra en la Fig. 4, una discontinuidad obvia estuvo presente en la distribución, con una densidad igual a cero para I
valores que van desde 77,3 a 108.3 s ° C ^{-1. La clasificación visual preliminar de los eventos PDER de los grupos 2 y 4 que tienen I
valores > 92,8 s ° C -1 (punto medio del rango nulo de la I
distribución , ver figura 4;. n
= 13) indicaron que probablemente surgió de la ingestión de alimentos sólidos, mientras que los eventos pDER tener I
valores < 92,8 s ° C -1 eran sobre todo dividido visualmente como la ingestión de agua de mar.}

Dado que se espera que la ingestión de leche para producir una mayor I
valores en comparación con la ingestión de alimentos sólidos (ver Fig. 1B), eventos pDER de todos los grupos que tienen I
valores inferiores a 92,8 ° C s ^{-1 ( n
= 251) fueron clasificados como ingestiones de agua de mar. Por el contrario, los eventos PDER con I
valores superiores a 92,8 ° C s -1 fueron categorizados de ingestas de alimentos sólidos ( n
= 13) cuando se asignen a grupos de 2 o 4, y, como la ingestión de leche ( n
= 1,003) cuando se asignan a los grupos 1, 3 o 5 por el análisis de conglomerados.}

los discriminantes lineales resultantes de la LDA realizaron en los 1267 eventos clasificados como pDER alta confianza y solo se presentan en la Tabla 5. la función de predicción resultante permitió la clasificación de los 517 eventos confianza pDER múltiples o bajas restantes con un 98,3% de acuerdo con la clasificación visual preliminar. Como resultado, todos los eventos PDER 1776 fueron clasificados como la leche ( n
= 1,478), el agua de mar ( n
= 279) o la ingestión de alimentos sólidos ( n =
19). La diferencia global en la atribución de grupo entre el análisis estadístico combinado y la clasificación visual preliminar fue de 2,4%, y se debió principalmente a eventos PDER del grupo 1 (Fig. 3) que se considera visualmente como la ingestión de alimentos sólidos, aunque se clasifica como la ingestión de leche por el método estadístico.

categoría de ingestión y consumo de comportamiento

Mientras que el agua de mar y de los alimentos sólidos ingestiones representaron el 15,7% y el 1,1% de todos los eventos pDER, respectivamente, la importancia relativa de cada tipo de ingesta varió considerablemente entre los individuos (Tabla 6). No es sorprendente que la leche representa el tipo más frecuente de la ingestión de todos los cachorros, con la proporción relativa de las ingestas individuales total de entre 60.0-100% (media = 84,1 ± 1,7%). la ingestión de agua de mar a través de los individuos varió de 0-40.0% (media = 15,3 ± 1,6%) de los eventos PDER, mientras que los alimentos sólidos representado 0-13,0% (media = 0,7 ± 0,2%) de ingestas totales entre los individuos. Todas menos una persona ingiere el agua de mar al menos una vez durante el período de registro. Se detectaron un total de 19 ingestas de alimentos sólidos entre los 7 cachorros. Entre estos cachorros, 9 ingestión de alimentos sólidos se registraron en un solo individuo, mientras que entre los otros 6 animales alimento sólido se ingirió en ≤ 3 ocasiones.

En general, los cachorros estaban en el agua durante el 63,7% de la ingestión de leche, de los cuales el 13,9% fueron precedidos por un evento de la ingestión de agua de mar. Casi todos ocurrieron (98,5%) de las ingestiones de agua de mar, mientras que los cachorros estaban en el agua. Por otra parte, los cachorros eran por lo general todavía en el agua cuando se realiza la ingestión posterior después de una ingestión de agua de mar (98,6% y 72,2% cuando estas ingestiones eran agua de mar o de leche, respectivamente). Curiosamente, las crías que ingirieron alimento sólido mostraron una mayor ocurrencia de enfermería acuático (ingestiones de leche, mientras que el cachorro estaba en el agua) que cachorros que no ingirieron alimento sólido (P < 0,001; medio = 80 ± 4% y 54 ± 6%, respectivamente).

ingestión de leche producido en todo el período de control de la temperatura del estómago, mientras que la primera consumo identificado de agua de mar y los alimentos sólidos se produjo a las 4 y 12 días de edad, respectivamente. Como se ilustra en la Fig. 5, la proporción de las ingestiones asociados con la succión disminuyó de 94,4% a los días 1 a 77,4% en el día 20, y aumentó aún más hasta 90,0% hasta la edad de destete estimada (día 33; [48]).

• PLOS ONE: Los nutrientes regulan diferencialmente Nucleobindin-2 /nesfatin-1 in vitro en células del estómago Ghrelinoma cultivadas (MGN3-1) e in vivo en ratones machos
• PLOS ONE: cuantificación de los niveles de ARNm de quitinasa en los tejidos humanos y de ratón por PCR en tiempo real: Expresión específica de la especie de mamífero ácida en el estómago quitin…