PLoS ONE: Vatsa Lämpötila Records Paljasta Nursing Käyttäytyminen ja kiinteään ruokaan siirtymisen kulutus käytettäessä Vieroittamattomien nisäkäs, Kirjohylje Pup (Phoca vitulina)

tiivistelmä

Tieto maitoon äidiltä jälkeläisille ja varhaisen kiinteää ruokaa annosten ottamista nisäkkäillä mahdollistaa ymmärtää paremmin vaikuttavista tekijöistä siirtyminen ravitsemuksellisia riippumattomuus ja ennalta vieroituksen kasvua ja selviytymistä. Silti tutkimukset seuranta imetykseen käyttäytyminen ovat usein turvautuneet visuaaliset havainnot, jotka eivät ehkä tarkasti edustaa maidon saanti. Arvioimme käyttö vatsaan lämpötilan telemetria seurata imeväiset ja juurikasvit käyttäytymistä vapaa-alainen kirjohylje ( Phoca vitulina
) pentujen imetyksen aikana. Vatsa lämpötila laskee analysoitiin pääkomponenttina ja klusterin analyysit sekä kokeita simuloitu vatsat johtaa täsmällisesti luokitella mahan lämpötila laskee maitoon, merivettä ja kiinteää ruokaa annosten ottamista. Merivesi ja kiinteää ruokaa annosten ottamista edusti keskimäärin 15,3 ± 1,6% [0-40,0%] ja 0,7 ± 0,2% [0-13,0%], tässä järjestyksessä, yksittäisten annosten ottamista. Kaiken kaikkiaan 63,7% maidon nauttimisesta tapahtui pennut olivat vedessä, joista 13,9% edelsi meriveden nieltynä. Keskimääräinen aika välillä myöhemmin nauttimisesta oli huomattavasti vähemmän meriveden kuin maidon nauttimisesta. Nämä tulokset viittaavat siihen, että meriveden nieleminen voisi edustaa vakuuden nauttimisen aikana vesiympäristön imemisen yrityksiä. Vaihtoehtoisesti, kuten kiinteää ruokaa nauttimisesta ( n
= 19) havaittiin keskuudessa 7 pentua, merivettä nieleminen voi johtua jäi saalis talteenotto yrityksiä. Tämä tutkimus osoittaa, että jotkut Kirjohylkeet alkaa nauttiminen saalis ollessaan edelleen imetti, mikä osoittaa, että vieroituksen tapahtuu hitaammin kuin aiemmin on ajateltu tällä lajilla. Vatsa lämpötila telemetrian edustaa lupaava menetelmä tutkia imemisen käyttäytymistä luonnonvaraisten nisäkkäiden ja siirtyminen ravitsemukselliset riippumattomuus eri endotermian lajeja.

Citation: Sauvé CC, Van de Walle J, Hammill MO, Arnould JPY, Beauplet G (2014 ) Vatsa Lämpötila Records Paljasta Nursing Käyttäytyminen ja kiinteään ruokaan siirtymisen kulutus käytettäessä Vieroittamattomien nisäkäs, Kirjohylje Pup ( Phoca vitulina
). PLoS ONE 9 (2): e90329. doi: 10,1371 /journal.pone.0090329

Editor: Yan ROPERT-Coudert, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Ranska

vastaanotettu: 17 syyskuu 2013; Hyväksytty: 29 tammikuu 2014; Julkaistu: 26 helmikuu 2014

Copyright: © 2014 Sauvé et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat luonnontieteiden ja tekniikan tutkimuksen toimikunta Kanadan (URL: http://www.nserc-crsng.gc.ca/index_fra.asp; myöntää määrä 355536-2008, 358856-2008, 390930-2010 GB ja 431802- 2012 CCS); ja Fonds de Recherche Nature et Technologies du Québec (URL: http://www.fqrnt.gouv.qc.ca/; lupanumeroon 2010-NC-132906 ja GB). Québec-Océan (URL: http://www.quebec-ocean.ulaval.ca/) ja Kanadan kala- ja Oceans (URL: http://www.dfo-mpo.gc.ca/index-eng. htm) edellyttäen tieteellistä ja logistista tukea koko tämän projektin. Kalastus- ja Oceans Kanada osaltaan tiedonkeruuseen ja käsikirjoitus valmisteilla kautta asiantuntemusta MO Hammill, P Carter, J-F Gosselin ja S Turgeon. Sen lisäksi on rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

aikana vanhempien riippuvuus, jälkeläisten kasvuun ja eloonjääminen luottaa vanhempien ravitsemuksellisia provisioinnin, useimmiten määräytyy äidin maitoon nisäkkäillä [1], [2]. Kun ravitsemukselliset riippumattomuus, jälkeläisten selviytyminen riippuu ympäristöolosuhteista, väestöntiheys, kehon varaukset ja kyky heinään tehokkaasti tietyssä ympäristössä [3], [4], [5], [6], [7]. Tällainen merkittävä muutos vaikuttavista tekijöistä jälkeläisten eloonjäämisen tekee siirtymisen ravitsemuksellisen itsenäisyyden kriittinen prosessi elämässä historiassa villieläinten [1], [8], [9].

Tutkimus hoitotyön ja keräilijäryhmien käyttäytyminen nisäkkäillä tarjoaa tärkeitä tietoja, jotka liittyvät energian siirto äidiltä jälkeläisille sekä siirtymistä ravitsemukselliset itsenäisyyttä. Eväjalkaisiin (phocids, otariids ja mursut) ovat erinomainen malli vertailevia tutkimuksia imetyksen käyttäytymistä ja siirtyminen ravitsemukselliset itsenäisyyden jälkeen naaraat synnyttävät yhden nuoren, phylogeny on hyväksytysti välille perheiden [10], ja ero pariutumisen ja äidin strategiat ovat hyvin tiedossa kahden suuren perheiden [11]. Joukossa phocids (tosi tiivisteet), naaraat yleensä nopeasti maalla koko lyhyt (4-50 d
) imetyksen aikana [11], [12]. Vieroitus pidetään äkillisesti phocids ja seuraa paaston aikana, jona fysiologista kehitys jatkuu ja keräilijäkansoja osaamisen parantamista [12], [13], [14], [15]. In otariids (Hylkeillä ja merileijonat), naisilla vuorotellen jaksoja maalla ensisijaisesti hoitotyön ja saalistavat matkoja merellä [11], [16]. Otariid pennut alkavat kuluttaa kiinteää ruokaa loppupuolella imetysaikaa [12], [16], jotka siirtyvät ravitsemukselliset riippumattomuus lisää vähitellen otariids kuin phocids. Huolimatta näistä fylogeneettiseen erotteluja, naaraat joidenkin phocid lajit eivät noudata tyypillistä phocid äidin strategiaa ne heinään aikana imetysaikaa [17], [18], [19], [20,]. Niinpä kirjohylje naaraat sitoutuvat foraging matkoja merellä kuin ensimmäisellä viikolla imetys [19], [21]. Tämä "otariid-tyyppi" äidin strategia ajatellaan johtuvan siitä, ettei naisilla varastoida riittävästi energiaa ja tuki maidontuotanto koko imetyksen ajan [11]. Harbour kuuttien ovat myös poikkeuksellista phocids koska ne vievät veteen pian syntymän jälkeen [22], [23], [24], suorittaa sukelluksia yleensä liittyy keräilijäkansoja ennen vieroitusta [24] ja joskus mukana äitinsä merellä aikana foraging matkat [23]. On kuitenkin yleisesti katsotaan, että vieroitukseen tällä lajilla äkillisesti kuten useimmissa phocids [25].

selvittelevät tutkimukset imetystä käyttäytymistä ovat enimmäkseen luottaneet suorien havaintojen [26]. Kuitenkin silmämääräiset havainnot vapaa-alaisia ​​eläimiä rajoittuvat usein päiväsaikaan ja vaikuttavat sääolosuhteet, asema tarkkailija, ja pääsy hoitotyön sivustoja. Nocturnal ja vedenalainen imeväiset tapahtumia on raportoitu monissa nisäkäslajeista ( esim
., [27], [28], [29], [30]). Lisäksi skannaus taajuudet eivät ehkä ole edustava imetykseen menestys [31], [32], jotka haittaavat tarkka luonnehdinta hoitotyön malleja. Vaikka energiaoppia imetys on arvioitu käyttäen epäsuoria menetelmiä, kuten isotooppi laimennus ja kaksinkertaisesti leimattu vettä useilla lajeilla ( esim
., [33], [34], [35], [36], [37 ], [38]), tällaiset menetelmät antavat tietoja vain keskimäärin energiansiirto kahden ajankohtina.

Vatsa lämpötila telemetrian on kehitetty ja laajalti käytetty seurata keräilijäkansoja käyttäytymistä meren endotermian saalistajien ( esim
, [39], [40], [41], [42], [43]). Koska niiden ruumiinlämpö on suurempi kuin saalista, ruoan kulutus endotermien ravintonaan jäähdytin kohteita johtaa vatsassa lämpötilavaihtelu ominaista äkillisestä ja myöhemmät räjähdysmäisesti (PDER tapahtuma; [39]). Samoin maitorauhaset sijaitsevat dermis kudos, joka on viileämpi kuin eläin sisälämpötilaan ( esim
., [44]). Suckling vuoksi johtaa PDER tapauksessa jälkeläisten vatsassa lämpötila [28]. Vatsa lämpötila telemetria on osoittautunut arvokkaaksi tekniikka havaitsemiseksi imemisen tapahtumia sekä vankeudessa [28] ja vapaa-alainen [29] satama kuuttien, joka edustaa lupaava menetelmä tutkia hoitotyön käyttäytymistä eri luonnonvaraisten nisäkkäiden. Tulkinta mahan lämpötilatietoja hoitotyön nisäkkäistä vaatii validoivien jotta erottelemaan PDER liittyvät tapahtumat imeväiset näiden aiheuttamasta meriveden tai kiinteää ruokaa nielemisen. Äidin maito, merivettä ja ectothermic organismit ovat eri lämpötiloissa ja /tai termodynaamiset ominaisuudet, että niiden nieleminen pitäisi tuottaa selvästi PDER käyrä kuvioita (Fig. 1). Nieleminen äidin maidon poikasta on osoitettu johtavan PDER tapahtumiin huomattavasti pienempi amplitudi kuin merivettä tai saalista nielemisen [28], [29]. Samoin merivesi on suurempi lämmönjohtavuus ja alhaisempi viskositeetti kuin saalista kohdetta ( esim.
Kala), jolloin PDER tapahtumiin nopeamman mahan lämpötila elpyminen [45], [46]. Niinpä äidinmaidonmäärä on aikaisemmin erottaa nauttimisesta kylmempi materiaalien satamassa Hylkeenpoikasten perustuu Mahan lämpötilan lasku [28], [29]. Samoin indeksi lämpötilan hyötykäyttöaste on aiemmin kehitetty tehokkaasti erottamaan kalan kulutuksen merivedestä juominen aikuisten pinnipeds ja merilintuja [41], [47]. Yhdistämällä nämä kaksi tapaa, syrjiä kolmesta mahdollisesta nieleminen tyyppiä (maito, merivesi ja kiinteää ruokaa) voivat siten olla mahdollista imettäville pentuja. Tällainen syrjintä on ensiarvoisen tärkeää tarkasti tutkia hoitotyön käyttäytymistä ja siirtyminen ravitsemukselliset itsenäisyyden nisäkkäillä.

päätavoitteena Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli tarjota menetelmä tehokkaasti erottamaan kolmesta mahdollisesta nieleminen tyyppiä (maito, merivesi ja kiinteää ruokaa) hoitotyössä nisäkkäitä, jotka syövät jäähdytin kohteita. Oletimme nieleminen tyypit voitiin erottaa perustuu ominaisuuksiin PDERs ne tuottavat yhdistämällä Monimuuttuja-analyysin tekniikoita ja laboratorion vatsa simulaatiot [28], [46]. Merivedestä nieleminen on usein havaittu vatsassa lämpötila tietueet pieni näyte vapaa-alainen satama kuuttien [29], testasimme myös erilaisia ​​hypoteeseja selittämään meriveden kulutus pre-vieroitettu pentuja. Odotimme, että jos pennut juo merivettä kun kuivattu, esiintyminen meriveden nieleminen olisi korreloi positiivisesti aika kulunut edellisestä äidinmaidonmäärä. Vaihtoehtoisesti, jos merivesi nielemisen edustaa seurauksena vedenalainen imetykseen yrityksistä, se todennäköisesti seuraa myöhemmin nieltynä pian sen jälkeen. Lopuksi tutkimme esiintyvyys ennalta vieroituksen kiinteää ruokaa kulutus satamassa poikasta.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys

Eläinten käsittely menettelyjä hyväksynyt Animal Care komiteat Université Laval (luvat numerot: 200844 ja 2011020) sekä kalastus- ja Oceans Kanada (luvat numerot: IML 2010-030, IML 2011-004, ja IML 2012-003).

eläinten käsittely ja instrumentointi

Tämä tutkimus suoritettiin sen Bic Island kirjohylje siirtomaa (48 ° 24 'N, 68 ° 51' W), joka sijaitsee noin yksityinen saari St. Lawrence-joen suisto aikana 2010-12 kasvatus vuodenaikaa . Harbour poikasta vangittiin pitkä dip net [48] koko imetyksen aikana (toukokuun puolivälistä heinäkuu). Aluksi kaapata, pentu sukupuoli, umbilicus tila ja massa (± 0,5 kg; Salter keväällä mittakaavassa, West Bromwich, Englanti) kirjattiin. Helpottaakseen takaisin saaduista merkeistä, tutkittaville merkitty värillisellä ja numeroitu pään tag (Seal Hat, Dalton, Englanti) liimattu (LoctiteƦsyanoakrylaattiliima ja˩2 Accelerator, Loctite Corp., Mississauga, ON, Kanada) päähän ja koodattu ainutlaatuinen numeroituja tunniste on hind räpylä (Jumbotag, Dalton, Englanti). Recaptures poikasten tehtiin mahdollisimman usein vieroitukseen saakka, jossa on 48 h minimi aikaväli peräkkäisten kaappaa.

Kuten useimmat pennut eikä jää heti synnytyksen, kaksi välillistä menetelmiä käytettiin arvioitaessa poikasten iän (d) . Kun kyseessä on hyvin nuorten poikasten, ikä määritettiin mukaisesti syvennys rappeuma vaiheissa [48], [49], [50]. Vanhemmissa pentua, yksilöt punnittiin useamman kerran kauden aikana ja ikä määritettiin takaisin-laskennan syntymän massaa käyttäen keskimääräistä kasvuvauhtia kohortin (yksityiskohtaisesti [51]).

seuraamiseksi vatsaan lämpötilaa muutoksia, vapaa-alainen pennut varustettu vatsaan lämpötilan pillereitä (STP, ei-modifioitu STP3: 32 g, 6,3 cm x 2,2 cm; Wildlife Computers Inc., Redmond, WA, USA) käyttöön intubaatio käyttämällä voideltu (KY Jelly , Johnson &Johnson, New Brunswick, NJ, USA) 2,54 cm halkaisijaltaan joustava putki työnnetään niiden vatsa [29]. 10 s välein, STP tiedot on siirretty aikaan syvällistä tallennin (TDR, MK10-L, Wildlife Computers Inc.) liimattu (5-Cure Marine Epoxy, Industrial Formuloijat, Auburn, WA, USA) on pennun selkä turkista [ ,,,0],29]. Suoritimme laboratoriossa kalibrointitestien of STP (katso [28] protokollan yksityiskohdat) ilmoitettu keskimääräinen vasteaika 18 ± 2 s (vaihteluväli: 10-27 s) johtuen viive STP päästöjen ja TDR vastaanoton lämpötilatietoja. Lisäksi helpottamiseksi siirtäminen takaisinottojärjestelmän, VHF-radiolähettimellä (3PN, Sirtrack ltd., Havelock North, Uusi-Seelanti) myös liimattu pennun kaulaan. Tiedot laitteista vielä kiinni eläimen ladattu alalla nähden jokaista recapture käyttämällä kannettavaa tietokonetta. Käsittelyaika harvoin yli 15 min talteenotto vapauttamiseksi.

Tietojenkäsittely, analysointi ja vatsa lämpötila simulaatiot

Kaikki tietojenkäsittely ja tilastolliset analyysit tehtiin sisällä R ympäristöön [52], ellei toisin mainita . Vatsa lämpötilatietoja (± 0,1 ° C) on poimittu TDR avulla Mk10host v1.25.2006 ohjelmisto (Wildlife Computers Inc.). Koska tärkeä sisäinen ja yksilöiden välisiä vaihteluita vatsassa lämpötilatallenteet esti käyttämällä automaattisia menetelmiä, joilla selvitetään nauttimisesta, The PDER tapahtumaa löydettiin visuaalisesti. Skannattu vatsaan lämpötilan ajan funktiona (käyttäen Instrument Helper v3.0, Wildlife Computers Inc.) suoritettiin jokaisen tiedoston paikantaa PDER tapahtumia, määritellään jyrkkä tippaa vatsassa lämpötilassa vähintään 2 keskihajonnat keskilämpötilan laskettuna edeltävien 10 min, jonka jälkeen eksponentiaalinen muotoinen lämpötilan nousu. PDER tapahtuma ominaisuudet on aikaisemmin kuvattu merivettä, saalista (aikuisilla) ja maidon nauttimisesta ( esim
., [28], [29], [40], [47], [53]). Kukin PDER tapahtuma näin ollen alustavasti määritetty nauttimista tyyppiä ( eli
maitoa, merivettä tai kiinteää ruokaa), joka perustuu amplitudi lasku ja muodon elpymisen käyrän (kupera, kovera tai pseudo-lineaarinen, liittyy maito , kiinteää ruokaa ja meriveden nauttimisesta, vastaavasti) katsottuna lämpötilatallennuksia (Fig. 1 B). Vaikka subjektiivinen, tätä luokittelua toimi luotettavasti kriteerinä vertailun tuloksista seuraamasta tavoite luokittelun menetelmiä.

tilastollisesti luokitella lämpötila putoaa eri nieleminen tyyppejä, kolme pistettä määriteltiin kullekin PDER tapahtumaa (Fig. 1A; [47], [53]): (
) pisteen syntymistä edeltävän lämpötilan lasku ( eli
. ennen lämpötila laskee tai alle edellisen keskilämpötilan (laskettuna 10 min) miinus 2 keskihajonnat (sd); [42]); ( B
) kohdassa, jossa alin lämpötila on saavutettu; ja ( C
) piste, jonka jälkeen lämpötila saavuttaa vakaus (± 1 S.D.) vähintään 10 minuutin ajan. Kuusi muuttujat myöhemmin lasketaan kullekin PDER tapahtumaa: (1) amplitudi lämpötilan lasku, t _{A-T B
; (2) kesto lämpötilan lasku, t B-t
; (3) lämpötila puolivälissä lämpötila elpyminen, t 0,5
missä (1) (4) kesto pisteestä
on puolivälissä lämpötila elpyminen, t 0,5
; (5) luettelo lämpötilan hyötykäyttöaste, I
[41], [47] jossa (2) ja (6) nopeus lämpötilan lasku, D jossa
(3)}

PDER tapahtumia, jotka oli vaikea erottaa elimistön lämpötilan vaihtelut havaittiin niinkin alhainen luottamus PDER tapahtumia. Näitä ovat lämpötila laskee amplitudien pienempi kuin 0,7 ° C, tai lämpötila laskee esitellä samanlainen lasku ja nousu hinnat tai muut ominaisuudet eivät täysin noudata PDER tapahtuman määritelmä [39], [46]. Koska niiden epätavallinen muoto ominaisuuksien aiemmin yksityiskohtainen muuttujista johdettu alhaisen luottamuksen PDER tapahtumia ei välttämättä tyypillisille PDER tapahtumia. Vastaavasti kun useampi kuin yksi vatsaan lämpötilan lasku tapahtui ennen vakaus saavutettiin, päällekkäiset PDER tapahtumia käsitellään yhdessä ja määritellään useita PDER tapahtumat [46]. Näistä erityisesti tapahtumia, kohdat
, B
ja C
vain ominaista suurempi pisara ottelun. Kuitenkin Wilson et al
. [46] totesi, että STP vaste oli vähemmän vaihteleva ensimmäisellä nauttimisen verrattuna myöhemmin annosten ottamista koko kierroksen. Siksi muuttujat lasketaan useiden PDER tapahtumat eivät tyypillisille PDER tapahtumia joko ja tulisi tarkastella erikseen. Klusterointi menetelmät ovat erittäin vaikuttavat poikkeavia havaintoja. Varmistaakseen muodostumista PDER tapahtumaryhmät jotka kuvaavat tarkasti luonnollinen vaihtelu nielemisen käyttäytyminen, alhainen luottamus ja useita PDER tapahtumia jätettiin klusterianalyysillä.

Käyttämällä vain säilyttänyt PDER tapahtumia, pääkomponenttianalyysiin (PCA ) suoritettiin ja skaalattiin arvot 6 muuttujien tuottaa korreloimattomia tekijät, joiden varimax kierto (paketti psych
; [54]) levitettiin. Tekijöitä ominaisarvot > 1 (Kaiserin kriteeri) on säilytetty ja niiden tulokset käytettiin toteuttaa hierarkkinen, täydellinen-sidos klusterianalyysillä. Tämän lähestymistavan ansiosta määritettäessä sopiva määrä klustereita läsnä aineisto avulla fuusio tason arvot kriteeri [55] sekä tunnistamista klusterin keskusten. Nämä keskukset otettiin käyttöön alkuperäisen siemeniä ei-hierarkkinen K-means klusterianalyysillä joka iteroidaan kunnes keskellä arvot tuli jatkuvasti [56]. Luokittelussa PDER tapahtumia K-means klusterointi menettely verrattiin niiden subjektiivista visuaalista luokittelu onko eri ryhmien saatu samaan aikaan tietyn nauttimisesta tyyppiä ( eli
maito, merivettä tai kiinteää ruokaa).

edelleen kasvattaa tehokkuutta erottamaan veden ja kiinteää ruokaa annosten ottamista keinotekoisesti simuloitiin. STP sijoitettiin ilmapallo ja upotetaan kiertoveden lämpötila oli keskilämpötilassa jäljittelee pennun vatsa (37,8 ° C; [28]). Vettä tai kalaa (cut, ei-suolistetut silli) pidettiin 12.0 ° C, korkein lämpötila kirjataan tutkimusalueella imetysaikana (St. Lawrence Global Observatory, Rimouski Station, 2010-2012). Erät ruiskutettiin sitten ilmapallon avulla 530 ml imu ase ja pysyi paikallaan, kun ne lämmitetään lämpötilaan vesihauteessa. Matkia lämpötilan lasku malleja arvioidaan vapaa-alainen pennun vatsa, simulaatioita tehtiin käyttämällä erilaisia ​​määriä vettä (25-125 g) ja kalojen (30-300 g). Koska tavoitteena simulaatio oli korostaa eroja ominaisuuksissa lämpötilan laskiessa syntyy veden ja kalojen annosten ottamista, absoluuttinen nopeus materiaalin lämpeneminen ei ollut merkittävä. Ei yritetty jäljitellä lämmönjohtavuus ja sekoittamalla kuviot pennun vatsa. Niinpä PDER tapahtumia laboratorio simulaatioita leimasi suurempi lämpötilan laskiessa seurasi hitaampi lämpenemistä kuin ne, jotka olisi kirjattu elävissä eläimissä. Koska erot PDER tapahtumiin havaittiin simuloida merivedessä ja kalan nauttimisesta, suhteellinen vertailuja näiden eri nieleminen tyyppejä voitaisiin kuitenkin soveltaa PDER tapahtumiin uutettu vapaa-alainen pentujen "tallenteita.

Jokaista kokeellisesti syntyvän PDER tapahtuma , 6 muuttujien edellä kuvatut laskettiin, ja skaalattiin ja syötetään lineaarisen erotteluanalyysin (LDA; paketti MASS
; [57]), jossa määrä (g) injektoidun materiaalin lisättiin 7 ^{th muuttuja. Muuttuja, jolla on korkein lineaarinen erotteluanalyysi kerroin pidettiin parhaana ennustaja materiaalin (vesi tai kala), joka aiheutti lämpötilan lasku [58]. Jakelupalkkiota käyrä kyseisen muuttujan Sitten tuotettiin PDER tapahtumia kirjattu vapaasti alainen pennut (paitsi alhainen luottamus ja useita PDER tapahtumat). Tämän ansiosta tunnistamisen katkoksia jakelussa että heijastunut eri nieleminen tyyppejä. PDER tapahtumia sen jälkeen luokiteltu perustuen niiden suhteellinen asema jakelussa paras ennustaja muuttuja kahden ei-äidinmaidonmäärä tyypit (merivettä tai kiinteää ruokaa).}

Tuloksena luokitusten molemmista menetelmistä yhdistettynä alustavan visuaalinen luokittelu, verrattiin ja yhdistettiin muodostamaan kolmen viimeisen ryhmään nimetty lasketun nielemisen tyypin ne edustivat ( eli
. maito, merivettä ja kiinteää ruokaa). Nämä lopulliset luokkia käytettiin ryhmittymä tekijät suorittamiseksi LDA on luokiteltu ( so
yhden ja suuri luottamus) PDER tapahtumia käyttäen samaa 6 selittävät muuttujat aiemmin käytetty klusterianalyysillä. Ennustavan toiminto tuottama LDA käytettiin sen jälkeen luokitella alhaisen luottamuksen ja useita PDER tapahtumia aiemmin jätetty luokitustehtävät menetelmiä. Tämä menettely johti kaikki PDER tapahtumia luokitellaan maitoa, merivettä tai kiinteää ruokaa annosten ottamista.

Useat tekijät tutkittiin selittämään merivettä ja kiinteää ruokailuajankohdista valmiiksi vieroitettu pentuja. Yksittäiset kasvunopeus laskettiin kerroin yleinen lineaarinen malli massan ja iän ennen arvioitua vieroituksen ikä (ikä ≤33 d; [48]). The 'raahattiin-out "tai" veteen "tilan pentujen määritettiin kullekin ominaista PDER tapahtuma käyttämällä märkä /kuiva kynnys niiden TDR. Aikaa kulunut edellisestä äidinmaidonmäärä, aika kulunut edellisestä nauttimisesta riippumatta nielemisen tyypin, kulunut aika vasta ensi äidinmaidonmäärä ja kuluneen ajan ensi nauttimisesta laskettiin jokaiselle PDER tapahtumaa sekä keinot verrataan kunkin nielemisen tyypin.

tarvittaessa normaaliuden testattiin Shapiro-Wilk testi ja varianssin homogeenisuudesta kanssa Levene testin avulla (paketti auto
, [59]). Kun normaalius kriteeri ei noudatettu, satunnaistaminen testit (rand-testi; muokattu [60]) 5000 permutaatiot sijasta käytettiin t-testit
tilastojen vertailu ryhmien välillä. Tulokset katsottiin merkitsevä P < 0,05 ja esitetään keskiarvoina ± keskivirheet (SE), ellei toisin mainita.

Tulokset

PDER tapahtumia vapaasti vaihtelevat pennut ja niiden alustava luokitus

yhteensä 40 vapaa-alainen pennut mittauslaitteilla. Näistä 35 edellyttäen käyttökelpoista tietoa (taulukko 1), joten kokonaiskesto 565 d vatsaan lämpötilan tallennus, joiden kunkin keskimääräinen kesto oli 16,1 ± 0,9 d ja yhteensä 1776 PDER tapahtumia. Yleinen keskimääräinen lukumäärä PDER tapahtumia per päivä per pentu oli 3,1 ± 0. 3, merkittäviä yksilöiden välisiä vaihteluita (alue: 0,6-4,7 PDER tapahtumaa päivässä). Niistä tunnistettu PDER tapahtumia, 354 esillä amplitudit < 0,7 ° C (mutta ≥0.3 ° C), kun taas 142 oli epätavallinen käyrä muotoja ja siten, luokiteltiin alhaisen luottamuksen PDER tapahtumia. Lisäksi 13 pidettiin useita PDER tapahtumia, jolloin 1267 yhden ja suuri luottamus PDER tapahtumia.

ainesosan ominaisuudet, jotka saadaan PCA on esitetty taulukossa 2. Mukaan Kaiser kriteerin, 2 tekijöitä päässä PCA selitti 80,3% koko varianssi ja sittemmin säilytetty. Nämä tekijät vietiin VariMAX kierto, joka ei vaikuta osuus koko varianssi selittää, mutta tasoittuvat sen osion molempien tekijöiden. Vaikka yksi tekijä esillä tärkeitä kuormituksia varten liittyviä muuttujia kesto PDER tapahtumia, muuttujat, jotka liittyvät lämpötilan laskea raskaasti kuormitettu toisella kertoimella (taulukko 3). Tämä osoittaa, että kertoimilla pisteytettiin eri muuttujien mukaisesti PDER tapahtumia akselilla ominaisuudet. Lisäksi suurin-todennäköisyys tekijä analyysi paljasti, että kaksi tekijää, jotka johtuvat pyöritetty matriisi riittivät mallissa (fit = 0,98, χ ^{2
= 662,55, P
< 0,001), joka tukee niiden säilyttäminen tarkempaa analysointia varten. Absoluuttiset arvot standardoidun kuormitukset olivat > 0,30 vähintään yksi tekijä kuuden muuttujia, mikä osoittaa, että ne kaikki olivat relevantteja PCA (taulukko 3, [61]).}

Partituurit kaksi tekijät kullekin 1267 PDER tapahtumia laskettiin käännetyssä matriisi ja käyttöön muuttujia hierarkkinen täydellinen-sidoksen klusterianalyysillä. Mukaan fuusio tasolle arvon kriteeri, optimaalinen määrä klustereita läsnä tietoja oli k
= 5, koska se oli ensimmäinen arvo k
jota ennen pientä hypätä juoni solmun korkeus vastaan ​​useita klustereita havaittiin (Fig. 2; [55]). Hierarkkinen klusterianalyysin dendrogrammissa oli siis leikattiin k
= 5, ja keinot komponentin tekijät kullakin klusterin käytettiin aluksi siemeniä ei-hierarkkinen K-means klusterianalyysillä (Fig. 3).

Kun PDER tapahtumia tuloksena ryhmiä verrattiin alustavat visuaalisia luokitus, kolme ryhmää sisälsi suuren prosenttiosuuden PDER tapahtumista tunnistettu maidon saannin (ryhmä 1: 87,7%, ryhmä 3: 99,6% ja ryhmä 5: 100%; Fig. 3), kun taas kaksi ryhmää olivat pääasiassa koostuu tapahtumien tunnistettava joko vettä tai kiinteää ruokaa saannin (ryhmä 2: 99,2% ja ryhmä 4: 100%). Klusterianalyysiä ei salli syrjiä meriveden ja kiinteää ruokaa annosten ottamista, mutta molemmat nielemisen tyyppejä voitaisiin tehokkaasti voidaan erottaa maidosta saannista, joiden kokonaispituus ristiriita 3,9% välillä Monimuuttuja-analyysissä ja visuaalisen luokituksen menetelmällä.

nieleminen simulaatioita ja korjattu luokittelu PDER tapahtumien

Kaikki injektiot veden ja kalojen simuloidun vatsat johtanut äkillisiin seurasi räjähdysmäisesti lämpötilan kirjannut STP. Tuloksena kertoimet lineaarisen diskriminantti päässä LDA 7. muuttujat (taulukko 4) tunnistettiin I
indeksin tehokkain ryhmä ennustaja. I
indeksi lasketaan varten vedenruiskutus oli merkitsevästi (rand-testi, P
= 0,002) alempi kuin kaloille injektioita. Siksi I
indeksin jakelu piirrettiin varten PDER tapahtumien luokiteltu ryhmiin 2 ja 4 ( n
= 195, vettä ja kiinteää ruokaa annosten ottamista). Kuten on esitetty kuviossa. 4, ilmeinen epäjatkuvuus oli läsnä jakelussa, jonka tiheys on yhtä kuin nolla I
arvot vaihtelevat 77,3-108,3 s ° C ^{-1. Alustava visuaalinen luokittelu PDER tapahtumien ryhmistä 2 ja 4, joiden I
arvot > 92,8 s ° C -1 (keskimmäinen piste nolla alue I
jakelu , ks. 4; n
= 13) osoitti, että ne todennäköisesti syntyivät kiinteää ruokaa annosten ottamista, kun taas PDER tapahtumien I
arvojen < 92,8 s ° C -1 olivat useimmiten visuaalisesti luokiteltu meriveden annosten ottamista.}

koska maito annosten ottamista odotetaan tuottavan suurempia I
arvot verrattuna kiinteään ruokaan annosten ottamista (ks. 1 B), PDER tapahtumia kaikista ryhmistä, joilla on Olen
pienemmiksi 92,8 s ° C ^{-1 ( n
= 251) luokiteltiin merivettä annosten ottamista. Sen sijaan PDER tapahtumia I
arvoja yli 92,8 s ° C -1 luokiteltiin kiinteää ruokaa nauttimisesta ( n
= 13), kun ryhmiin 2 tai 4, ja maidon nauttimisesta ( n
= 1003), kun ryhmiin 1, 3 tai 5 klusterianalyysiä.}

tuloksena lineaarinen diskriminantti päässä LDA suoritetaan 1267 PDER tapahtumia luokitellaan korkea luottamus ja yksi on esitetty taulukossa 5. tuloksena ennakoiva toiminta sallitaan luokittelu jäljellä 517 useita tai alhaisen luottamuksen PDER tapahtumia on 98,3% mukaisesti alustavien visuaalisen luokituksen. Tämän seurauksena kaikki 1776 PDER tapahtuma luokiteltiin joko maitoa ( n
= 1478), merivettä ( n
= 279) tai kiinteän ruoan nauttimisesta ( n
= 19). Yleinen ristiriita ryhmän nimeäminen väliin yhdistetyn tilastollista analyysiä ja alustava visuaalinen luokitus oli 2,4%, ja oli lähinnä PDER tapahtumia ryhmän 1 (Fig. 3), jotka olivat visuaalisesti pidetään kiinteää ruokaa annosten ottamista, vaikka se onkin luokiteltu maidon nauttimisesta by tilastollista menetelmää.

nieleminen luokkia ja kulutuskäyttäytymisen

Vaikka merivettä ja kiinteää ruokaa annosten ottamista edusti 15,7% ja 1,1% kaikista PDER tapahtumia vastaavasti suhteellinen merkitys kunkin nielemisen tyypin vaihtelivat huomattavasti yksilöiden välillä (taulukko 6). Ei ole yllättävää, maito edustaa yleisin nauttimisesta tyyppi kaikille pentujen, jossa suhteellinen osuus koko yksittäisten annosten ottamista vaihtelevat 60,0-100% (keskiarvo = 84,1 ± 1,7%). Meriveden nieleminen vastapäätä yksilöitä vaihteli 0-40,0% (keskiarvo = 15,3 ± 1,6%) PDER tapahtumia, kun taas kiinteää ruokaa edusti 0-13,0% (keskiarvo = 0,7 ± 0,2%) koko annosten ottamista yksilöiden välillä. Kaikki paitsi yksi yksittäinen nautitaan merivettä vähintään kerran tallennuksen aikana aikana. Kaikkiaan 19 kiinteää ruokaa nauttimisesta havaittiin keskuudessa 7 pentua. Näistä pennut, 9 kiinteää ruokaa annosten ottamista kirjattiin yhden henkilön taas joukossa muun 6 eläimet kiinteää ruokaa oli nautittu ≤3 otteeseen.

Kaiken pennut olivat vedessä aikana 63,7% maidon nauttimisesta, ja on 13,9% edelsi meriveden nieltynä tapahtuma. Lähes kaikki (98,5%) meriveden annosten ottamista tapahtui pentua olivat vedessä. Lisäksi pennut olivat yleensä vielä vedessä suoritettaessa myöhemmin nauttimisen jälkeen merivettä nauttimisen (98,6% ja 72,2%, kun nämä nauttimisesta oli merivettä tai maitoa, vastaavasti). Mielenkiintoista, pennut että nautittuina kiinteää ruokaa osoitti suuremman esiintymisen vesiympäristön hoitotyön (maito annosten ottamista, kun pentu jäi veteen) kuin poikasten jotka eivät nielemään kiinteää ruokaa (P < 0,001; keinot = 80 ± 4% ja 54 ± 6%, vastaavasti).

äidinmaidonmäärä tapahtunut koko ajan vatsaan lämpötilan valvonta, kun taas ensimmäinen tunnistettu kulutus meriveden ja kiinteää ruokaa tapahtui 4 ja 12 päivän iässä, vastaavasti. Kuten kuviossa. 5, osuus annosten ottamista liittyy imetykseen laski 94,4% päivänä 1-77,4% päivänä 20, ja edelleen nostaa 90,0% asti arvioitu vieroittamiseen ikä (päivä 33; [48]).

• PLoS ONE: Ravinteet Differentially Regulate Nucleobindin-2 /Nesfatin-1 in vitro viljellyissä Maha Ghrelinoma (MGN3-1) Solut ja In vivo uroshiirillä
• PLoS ONE: kvantifiointi kitinaasiaktiivisuuden mRNA tasot ihmisen ja hiiren kudokset Real-Time PCR: lajikohtaiset ilmentäminen Happamia Nisäkkäiden kitinaasiaktiivisuuden vatsassa Tissues