PLoS ONE: Magen Temperaturaufzeichnungen Reveal Pflegeverhalten und Übergang auf feste Nahrung Verbrauch in einem unweaned Säugetier, das Harbour Seal Pup (Phoca vitulina)

Abstrakt

Die Kenntnis der Milchtransfer von der Mutter an die Nachkommen und früh feste Nahrung Inges bei Säugetieren ermöglicht ein besseres Verständnis der Faktoren, die zu Ernährungs Unabhängigkeit und Pre-Entwöhnung Wachstum und das Überleben beeinflussen Übergang. Doch Studien Saugverhalten Überwachung haben oft auf visuelle Beobachtungen gestützt, die nicht genau Milchaufnahme darstellen könnte. Wir untersuchten die Verwendung von Magen Temperatur Telemetrie Säugen und Fraßverhalten bei frei lebenden Seehund ( Phoca vitulina
) Welpen während der Laktation zu überwachen. Magen-Temperatur sinkt wurden unter Verwendung von Hauptkomponente und Cluster analysiert Analysen sowie Studien mit simulierten Mägen in einer präzisen Klassifizierung von Magentemperatur resultierende fällt in Milch, Meerwasser und feste Nahrung Inges. Meerwasser und feste Nahrung Inges auf durchschnittlich 15,3 ± 1,6% vertreten [0-40,0%] und 0,7 ± 0,2% [0-13,0%] bzw. einzelner Inges. Insgesamt traten 63,7% der Milch Inges während die Welpen im Wasser waren, davon 13,9% durch Meerwasser Einnahme vorausgingen. Die durchschnittliche Zeit zwischen aufeinanderfolgenden Inges war deutlich weniger für Meerwasser als für Milch Inges. Diese Ergebnisse legen nahe, dass Meerwasser Einnahme Sicherheiten Einnahme während Wasser Säugen Versuche darstellen könnten. Alternativ kann, wie feste Nahrung Inges ( n
= 19) unter 7 Welpen beobachtet wurden, könnten Meerwasser Einnahme von verpassten Beutefang Versuche zur Folge haben. Diese Studie zeigt, dass einige Seehunde beginnen Beute Einnahme während noch gesäugt werden, was darauf hinweist, dass die Entwöhnung allmählich mehr auftritt als bisher in dieser Art gedacht. Magen-Temperatur Telemetrie stellt eine viel versprechende Methode Saugverhalten in wild lebenden Säugetieren und den Übergang zur Ernährungs Unabhängigkeit in verschiedenen Endotherme Arten zu studieren

Citation. Sauvé CC, Van de Walle J, Hammill MO, Arnould JPY, Beauplet G (2014 Reveal Pflegeverhalten und Übergang auf feste Nahrung Verbrauch) Magen Temperaturaufzeichnungen in einem unweaned Säugetier, das Harbour Seal Pup ( Phoca vitulina
). PLoS ONE 9 (2): e90329. doi: 10.1371 /journal.pone.0090329

Editor: Yan Ropert-Coudert, multidisziplinären Instituts Hubert Curien, Frankreich

Empfangen: 17. September 2013; Akzeptiert: 29. Januar 2014; Veröffentlicht: 26. Februar 2014

Copyright: © 2014 Sauvé et al. Dies ist eine Open-Access-Artikel unter den Bedingungen der Lizenz Creative Commons, die uneingeschränkte Nutzung erlaubt, die Verteilung und Vervielfältigung in jedem Medium, vorausgesetzt, der ursprüngliche Autor und Quelle genannt werden

Finanzierung:. Diese Arbeit wurde von Naturwissenschaften und Engineering Research Council of Canada (URL unterstützt: http://www.nserc-crsng.gc.ca/index_fra.asp; gewährt Nummer 355536-2008, 358.856-2008, 390.930-2010 GB und 431802- 2012 CCS); und Fonds de recherche Nature et Technologies du Québec (URL: http://www.fqrnt.gouv.qc.ca/; Gewährungsnummer 2010-NC-132906 GB). Québec-Océan (URL: http://www.quebec-ocean.ulaval.ca/) und dem Canadian Department of Fisheries and Oceans (URL: http://www.dfo-mpo.gc.ca/index-eng. htm), die wissenschaftlichen und logistischen Unterstützung während des gesamten Projekts. Fischerei und Ozeane Kanada trugen zur Datensammlung und Manuskripterstellung über das Know-how von MO Hammill, P Carter, J-F Gosselin und S Turgeon. Darüber hinaus hatten die Geldgeber keine Rolle in Studiendesign, Datenerfassung und Analyse, Entscheidung zu veröffentlichen oder um die Herstellung des Manuskripts

Interessen im Wettbewerb:.. Die Autoren haben erklärt, dass keine Interessenkonflikte bestehen

Einführung

Während der Zeit der Elternabhängigkeit, Nachwuchs Wachstum und das Überleben verlassen sich auf die elterliche Ernährungsvorsorge, vor allem durch die Muttermilch Transfer bei Säugetieren bestimmt [1], [2]. Nach Ernährungs Unabhängigkeit, Nachkommen Überleben hängt von den Umgebungsbedingungen, Bevölkerungsdichte, Körperreserven und die Fähigkeit, effizient in einer bestimmten Umgebung nach Futter zu suchen [3], [4], [5], [6], [7]. Eine solche deutliche Verschiebung der Faktoren Nachwuchs das Überleben beeinflussen macht den Übergang zur Ernährungs Unabhängigkeit einen kritischen Prozess in der Lebensgeschichte von Wildtieren [1], [8], [9].

Das Studium der Krankenpflege und Nahrungssuche Verhalten bei Säugetieren liefert wichtige Informationen für die Übertragung von Energie von der Mutter auf die Nachkommen sowie den Übergang zur Ernährungs Unabhängigkeit zusammen. Pinnipeds (phocids, otariids und Walrosse) ein hervorragendes Modell für vergleichende Studien Saugverhalten und den Übergang zur Ernährungs Unabhängigkeit sind seit Weibchen geboren einzelne junge geben wird Phylogenie akzeptierbar zwischen Familien etabliert [10], und Differential Paarung und mütterlichen Strategien sind gut dokumentiert zwischen den beiden Hauptfamilien [11]. Unter phocids (Hundsrobben), Frauen in der Regel schnell auf dem Land in ganz kurzer (4-50 d
) Stillzeit [11], [12]. Die Entwöhnung wird als in phocids sein abrupt und wird von einer Fastenperiode gefolgt, während der physiologischen Entwicklung geht weiter und Nahrungssuche Fähigkeiten verbessert werden [12], [13], [14], [15]. In otariids (Seebären und Seelöwen), Weibchen wechseln sich zwischen den Episoden auf dem Land in erster Linie für die Pflege und Nahrungssuche Reisen auf See [11], [16]. Otariid Welpen beginnen, feste Nahrung in der Nähe des Ende der Stillzeit zu konsumieren [12], [16], um den Übergang zu Ernährungs Unabhängigkeit allmählicher in otariids machen als in phocids. Trotz dieser phylogenetischen Unterschiede, Weibchen einiger Arten phocid folgen nicht dem typischen phocid mütterlichen Strategie, wie sie im Verlauf der Stillzeit Futter [17], [18], [19], [20]. Dementsprechend Seehund Frauen Nahrungssuche Fahrten auf See jenseits der ersten Woche der Laktation [19], [21] verpflichten. Diese "otariid-type 'mütterlichen Strategie wird angenommen, aufgrund der Unfähigkeit der Frauen zu sein, zu speichern genügend Energie und Unterstützung der Milchproduktion in der gesamten Stillzeit [11]. Seehund Welpen sind auch außergewöhnliche unter phocids, weil sie auf dem Wasser nehmen kurz nach der Geburt [22], [23], [24], führen Tauchgänge in der Regel mit Nahrungssuche assoziiert vor dem Absetzen [24] und manchmal ihre Mutter auf See begleiten während Nahrungssuche Reisen [23]. Es wird jedoch allgemein angenommen, dass bei dieser Art der Entwöhnung als in den meisten phocids abrupt ist [25].

Studien Saugverhalten Untersuchung haben vor allem auf direkten Beobachtungen verlassen [26]. Allerdings visuelle Beobachtungen von freilebenden Tiere werden oft auf Tagesstunden begrenzt und werden von Wetterbedingungen, die Position des Beobachters beeinflusst, und der Zugang zu Pflege-Sites. Nocturnal und Unterwasser Säugen Ereignisse haben sich in vielen Säugetierarten berichtet ( z
., [27], [28], [29], [30]). Darüber hinaus kann Abtastfrequenzen nicht repräsentativ für Säugen Erfolg [31], [32], genaue Charakterisierung der Pflegemuster zu behindern. Obwohl die Energetik der Laktation wurde 37 indirekte Methoden bewertet unter Verwendung von wie Isotopenverdünnung und doppelt markiertem Wasser in mehreren Spezies ( zB
., [33], [34], [35], [36], [ ], [38]), solche Verfahren nur Informationen über durchschnittliche Energieübertragung zwischen zwei Zeitpunkten bereitzustellen.

Stomach Temperatur Telemetrie entwickelt worden ist und das Sammelverhalten der marinen Endotherme Räuber ( zB allgemein zur Überwachung
, [39], [40], [41], [42], [43]). Weil ihre Körpertemperatur größer ist als die ihrer Beute, die Nahrungsaufnahme von Warmblütern an kühleren Elemente führt zu einer Magen Temperaturschwankung durch einen steilen Abfall und anschließenden exponentiellen Anstieg gekennzeichnet Fütterung (PDER Ereignis; [39]). In ähnlicher Weise sind Milchdrüsen in der Dermis Gewebe entfernt, die kühler als die Tierkerntemperatur ist ( z
. [44]). Suckling ergibt sich damit eine PDER Ereignis bei den Nachkommen Magen Temperatur [28]. Magen-Temperatur Telemetrie hat eine wertvolle Technik zur Detektion Säugen Ereignisse in beiden gefangen [28] und freilebenden [29] Hafen Roobbenbabies, die eine vielversprechende Methode zu studieren Pflegeverhalten in verschiedenen wild lebenden Säugetieren erwiesen. Die Interpretation der Magen Temperaturdaten von Pflege Säugetieren erfordert eine Validierungsverfahren, um die PDER Ereignisse mit Säugling von den von Meerwasser oder feste Nahrungsaufnahme verursacht werden kann, zu unterscheiden. Muttermilch, Meerwasser und ectothermic Organismen haben unterschiedliche Temperaturen und /oder thermodynamischen Eigenschaften, so daß ihre Einnahme deutliche PDER Kurvenmuster ergeben sollte (Fig. 1). Die Aufnahme von Muttermilch durch Roobbenbabies wurde in PDER Ereignisse erheblich niedriger Amplitude im Vergleich zu Meerwasser oder Beute Einnahme [28], [29] zu führen, gezeigt. In ähnlicher Weise hat Meerwasser eine höhere thermische Leitfähigkeit und eine geringere Viskosität als Beutetieren ( z.
Fisch), mit schneller Magen Temperaturerholzeit in PDER Ereignissen resultieren [45], [46]. Dementsprechend wurde Milchaufnahme vorher aus der Aufnahme von kälteren Materialien im Hafen Roobbenbabies unterscheiden basiert auf der Rate der Magen Temperaturabfall [28], [29]. Ebenso hat ein Index für die Temperaturwiederherstellungsrate zuvor entwickelt worden, um effizient Fischkonsum aus dem Meerwasser zu trinken in der Erwachsenen pinnipeds und Seevögel [41], [47] unterscheiden. Durch die Kombination dieser beiden Methoden, die Unterscheidung zwischen den drei möglichen Einnahme Typen (Milch, Meerwasser und feste Nahrung) kann daher sein, Welpen in laktierenden. Eine solche Diskriminierung von primärer Bedeutung ist, um genau das Pflegeverhalten und den Übergang zur Ernährungs Unabhängigkeit bei Säugetieren zu untersuchen.

Das Hauptziel dieser Studie ein Verfahren bereitzustellen, war effizient die drei möglichen Einnahme Typen (Milch, Meerwasser zu unterscheiden und in Pflege Säugetieren feste Nahrung), die an kühleren Artikel füttern. Wir stellten die Hypothese Einnahme Typen basierend auf den Eigenschaften der PDERs unterschieden werden konnten sie eine Kombination von multivariate Datenanalysetechniken und Labor Magen Simulationen [28] unter Verwendung gene, [46]. Als Meerwasser Einnahme aus einer kleinen Probe von freilebenden Hafen Roobbenbabies [29] häufig in den Magen Temperaturaufzeichnungen beobachtet wurde, auch wir verschiedene Hypothesen getestet Meerwasser Verbrauch zu erklären durch Pre-entwöhnte Welpen. Wir erwarten, dass, wenn Welpen Meerwasser, wenn dehydriert trinken, kann das Auftreten von Meerwasser Einnahme würde positiv mit der Zeit seit dem letzten Milchaufnahme vergangen korreliert werden. Alternativ kann, wenn Meerwasser Einnahme eine Folge von Unterwasser Säugen Versuche darstellt, wäre es wahrscheinlich durch eine spätere Einnahme kurz nach verfolgt werden. Schließlich untersuchten wir die Prävalenz von Pre-Entwöhnung feste Nahrungsaufnahme im Hafen Roobbenbabies.

Materialien und Methoden

Ethik-Anweisung

Tierhandhabungsverfahren wurden von der Animal Care genehmigt Ausschüsse der Université Laval (Genehmigungen Zahlen: 200.844 und 2.011.020) und für Fischerei und Ozeane Kanada (Genehmigungen Zahlen: IML 2010-030, IML 2011-004 und 2012-003 IML)

Animal Handling und Instrumentierung <. br>

Diese Studie wurde auf der Bic Insel Seehund-Kolonie durchgeführt (48 ° 24 'N; 68 ° 51' W), um einer privaten Insel in der Mündung Lawrence Fluss St., während der Brutzeit 2010-12 . Harbour Roobbenbabies wurden mit einem langen Kescher [48] in der gesamten Stillzeit (von Mitte Mai bis Juli) erfasst. Auf den ersten Erfassung, pup Sex, Nabels Zustand und Masse (± 0,5 kg; Salter Federwaage, West Bromwich, England) wurden aufgezeichnet. Zur Erleichterung der Wiederfängen wurden Personen die mit einem farbigen und nummerierten Kopf-Tag (Siegel Hut, Dalton, England) geklebt (LoctiteƦCyanacrylatkleber und˩2 Accelerator, Loctite Corp., Mississauga, ON, Kanada) auf dem Kopf und mit dem Tag ein einzigartiges nummerierten Tag in einem Hinter Flosse (Jumbotag, Dalton, England). Recaptures der Jungen wurden so oft wie möglich durchgeführt, bis der Entwöhnung mit einem 48 h Mindestintervall zwischen aufeinanderfolgenden Aufnahmen.

Wie die meisten Jungen nicht sofort gefangen genommen wurden nach der Geburt, zwei indirekte Methoden verwendet wurden pup Alter zu schätzen (d) . Im Falle von sehr kleinen Welpen, Alter, wurde gemäß der umbilicus Degeneration Stufen bestimmt [48], [49], [50]. Bei älteren Welpen wurden Personen mehr als einmal während der Saison gewogen und Alter wurde durch Rückrechnung bis zur Geburt Masse mit einer mittleren Wachstumsrate für die Kohorte (die in [51]) bestimmt.

Magen Temperaturüberwachung Änderungen, Welpen frei reich wurden mit Magen-Temperatur Pillen ausgestattet (STP; nicht modifizierten STP3: 32 g, 6,3 cm x 2,2 cm, Wildlife Computers Inc., Redmond, WA, USA) durch Intubation führte eine geschmiert (KY Jelly mit Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA) 2,54 cm Durchmesser flexible Schlauch in den Magen eingeführt [29]. Alle 10 s wurden die STP-Daten zu einer Zeit-Tiefe-Recorder (TDR; MK10-L, Wildlife Computer Inc.) übertragen geklebt (5-Cure Marine-Epoxy, Industrie Formulierer, Auburn, WA, USA) auf die dorsale Fell des Welpen [ ,,,0],29]. Wir führten Laborkalibrierungstests von STPs (siehe [28] für Protokolldetails), die eine durchschnittliche Antwortzeit von 18 s ± 2 s angegeben (Bereich: 10-27 s) aufgrund der Verzögerung zwischen STP-Emission und TDR Empfang von Temperaturdaten. Darüber hinaus Umzug für die Rück zu erleichtern, ist ein UKW-Sender (3PN, Sirtrack ltd., Havelock North, Neuseeland) wurde ebenfalls auf den Welpen um den Hals geklebt. Die Daten von den Geräten noch am Tier befestigt wurden in dem Gebiet auf jede heruntergeladene zurückzuerobern einen tragbaren Computer. Bearbeitungszeit überschritten selten 15 Minuten von der Aufnahme zu lösen.

Datenverarbeitung, Analyse und Magen Temperatursimulationen

Die gesamte Datenverarbeitung und statistische Analysen innerhalb der R-Umgebung durchgeführt wurden [52], sofern nicht anders angegeben . Stomach Temperaturdaten (± 0,1 ° C) wurden aus TDRs extrahiert unter Verwendung der Mk10host v1.25.2006 Software (Wild Computer Inc.). Da wichtige intra- und interindividuellen Schwankungen Aufzeichnungen Magen Temperatur den Einsatz von automatisierten Methoden verhindert Inges zu identifizieren, wurden die PDER Ereignisse visuell identifiziert. Ein Scan von Magen Temperatur gegen die Zeit aufgetragen (unter Verwendung von Instrumenten Helper v3.0, Wildlife Computer Inc.) für jede Datei ausgeführt wurde PDER Ereignisse zu lokalisieren, definiert als scharfe Tropfen in Magen Temperatur von mindestens 2 Standardabweichungen von Mitteltemperatur über die berechnete vorangegangenen 10 Minuten, durch eine exponentielle förmige Temperaturanstieg gefolgt. PDER Ereigniseigenschaften zuvor für Meerwasser, Beute (bei Erwachsenen) beschrieben worden und Milch Inges ( z
., [28], [29], [40], [47], [53]). Jedes Ereignis PDER wurde daher vorbereitend auf eine Einnahme zugeordnet ( dh
Milch, Seewasser oder feste Nahrung) basierend auf der Amplitude der Abnahme und der Form der Erholungskurve (konvex, konkav oder pseudo-linear; assoziiert mit Milch , feste Nahrung und Meerwasser Inges, jeweils) in den Temperaturaufzeichnungen (Abb. 1B) angesehen. Obwohl subjektiv, diente diese Kategorisierungen als verlässlicher Vergleichskriterium für die Ergebnisse aus folgenden objektiven Klassifikationsmethoden.

statistisch Um die Temperatur zu klassifizieren fällt in die verschiedenen Einnahme-Typen wurden drei Punkte für jeden PDER Ereignis definiert (Abb. 1A; [47], [53]): ( A
) der Punkt, um den Beginn der Temperaturabnahme vorhergehenden ( dh
vor Temperatur auf oder unter den vorherigen mittleren Temperatur abnimmt (berechnet über. 10 min) minus 2 Standardabweichungen (SD); [42]); ( B
) der Punkt, wo die niedrigste Temperatur erreicht ist; und ( C
) der Punkt, nach dem Temperatur erreicht Stabilität (± 1 S. D.) für mindestens 10 Minuten. Sechs Variablen wurden anschließend für jedes PDER Ereignis berechnet: (1) Amplitude der Temperaturabfall, T _{A-T B
; (2) die Dauer der Temperaturabfall, t B-t A
; (3) Temperatur auf halbem Weg Temperaturerholzeit, T 0.5
wo (1) (4) Dauer von Punkt A
auf halbem Weg Temperaturerholzeit, t 0.5
; (5) ein Index der Temperatur Recovery Rate, I
[41], [47], wobei (2) und (6) Rate der Temperaturabnahme, D, wo
(3)}

Die PDER Ereignisse, die von natürlichen Körpertemperaturschwankungen festgestellt wurden als geringes Vertrauen PDER Ereignisse schwer zu unterscheiden waren. Dazu gehören Temperatur Tropfen Amplituden kleiner als 0,7 ° C, oder Temperatur sinkt präsentiert ähnliche Abnahme und Steigerungsraten oder anderer Merkmale nicht vollständig mit dem PDER Event-Definition entsprechen, [39], [46]. Aufgrund ihrer ungewöhnlichen Form Merkmale, die zuvor detailliert Variablen aus niedrigen Vertrauens PDER Ereignisse abgeleitet möglicherweise nicht repräsentativ für typische PDER Ereignisse sein. Ebenso, wenn mehr als ein Magen Temperaturabfall aufgetreten, bevor Stabilität erreicht wurde, wurden die überlappende PDER Ereignisse zusammen behandelt und als mehrere PDER Ereignisse definiert [46]. Für diese besonderen Ereignisse, Punkte A
, B
und C
gekennzeichnet nur die größeren Tropfen des Kampfes. Allerdings Wilson et al
. [46] festgestellt, dass die STP Reaktion war weniger variabel während der ersten Einnahme im Vergleich zu den nachfolgenden Inges des Kampfes. Daher sind die Variablen für mehrere PDER Ereignisse berechnet nicht repräsentativ für typische PDER Ereignisse entweder und sollten getrennt betrachtet werden. Clustering Methoden sind stark von Ausreißern beeinflusst. Um die Bildung von PDER Ereignisgruppen sicherzustellen, dass genau die natürlichen Schwankungen der Nahrungsaufnahme Verhalten reflektieren, geringes Vertrauen und mehrere PDER Ereignisse wurden von der Cluster-Analyse ausgeschlossen.

nur die einbehaltenen PDER Ereignisse mithilfe einer Hauptkomponentenanalyse (PCA ) wurde auf die zentriert und skalierten Werten der 6-Variablen durchgeführt unkorreliert Faktoren zu erzeugen, auf dem ein Varimax Rotation (package Psych
; [54]) angewendet wurde. Faktoren mit Eigenwerten > 1 (Kaiser-Kriterium) wurden beibehalten und ihre Ergebnisse wurden verwendet, um eine hierarchische, komplett-Verknüpfung Clusteranalyse auszuführen. Dieser Ansatz erlaubt die Bestimmung der entsprechenden Anzahl von Clustern in dem Datensatz des Fusionspegelwerte Kriterium [55] sowie die Identifizierung der Clusterzentren verwenden. Diese Zentren wurden als anfängliche Samen in einer nicht-hierarchischen K-means Clusteranalyse eingeführt, iteriert wurde, bis die Mittelwerte konstant [56] wurde. Die Kategorisierung der PDER Ereignisse durch die K-Means Verfahren Clustering wurden im Vergleich zu ihren subjektiven visuellen Klassifikation zu bestimmen, ob die verschiedenen erhaltenen Gruppen mit einem bestimmten Typ der Einnahme fiel ( dh
Milch, Meerwasser oder feste Nahrung).

zur weiteren Erhöhung unserer Effizienz zwischen dem Verbrauch von Wasser und feste Nahrung zu unterscheiden, wurden Inges künstlich simuliert. Ein STP wurde in einen Ballon eingeführt und in einem zirkulierenden Wasserbad gehalten bei einer mittleren Temperatur simuliert den Welpen Magen getaucht (37,8 ° C; [28]). Wasser oder Fisch (Schnitt, nicht ausgenommenen Hering) wurden während der Stillzeit (St. Lawrence Globale Observatory, Rimouski Station, 2010-2012) bei 12,0 ° C, die höchste Wassertemperatur im Untersuchungsgebiet aufgezeichnet gehalten. Artikel wurden dann in den Ballon injiziert, um eine 530 ml Saugpistole verwenden und blieben an Ort und Stelle, während sie auf die Temperatur des Wasserbades erwärmt. Um die Temperaturabfall Muster erwartet in einem freilebenden Welpen Magen nachahmen, wurden Simulationen unter Verwendung unterschiedlicher Mengen von Wasser (25-125 g) und Fisch (30-300 g). Da das Ziel dieser Simulationen in den Eigenschaften von Temperaturstürzen durch Wasser und Fisch Inges, die absolute Geschwindigkeit des Materialerwärmung erzeugt hervorzuheben Unterschiede war, war nicht wichtig. Es wurde kein Versuch gemacht, die Wärmeleitfähigkeit und Mischmuster eines Welpen Magen zu imitieren. Folglich als die PDER Ereignisse aus Laborsimulationen wurden durch langsamer Erwärmung durch größere Temperatur Tropfen gefolgt gekennzeichnet, dass in lebenden Tieren aufgenommen werden würde. Da Unterschiede in PDER Ereignisse in der Simulation Meerwasser und Fisch Inges, relative Vergleiche zwischen diesen verschiedenen Arten der Einnahme nachgewiesen wurden dennoch zu PDER Ereignisse von freilebenden Welpen 'Aufnahmen extrahiert angewendet werden könnte.

Für jede experimentell erzeugten PDER Ereignis die 6 oben beschrieben wurden Variablen berechnet, zentriert und skaliert und in eine lineare Diskriminanzanalyse eingeführt (LDA; package MASS
; [57]), in dem die Menge (g) des eingespritzten Materials als zugegeben 7 ^{th Variable. Die Variable mit der höchsten linearen Diskriminanzanalyse Koeffizient wurde als der beste Prädiktor des Materials (Wasser oder Fisch) in Betracht gezogen, die die Temperaturabfall verursacht [58]. Ein Verteilungskurve dieser bestimmten Variable wurde dann für die PDER Ereignisse auf frei lebende Welpen aufgenommen produziert (außer ein geringes Vertrauen und mehrere PDER Ereignisse). Dies ermöglichte die Identifizierung von Inhomogenitäten in der Verteilung, die verschiedene Arten der Einnahme reflektiert. PDER Ereignisse wurden danach klassifiziert auf der Grundlage ihrer relativen Position in der Verteilung der beste Prädiktor Variable der beiden nicht-Milchaufnahme Typen (Meerwasser oder feste Nahrung).}

Die resultierenden Klassifikationen von beiden Methoden, mit dem vorläufigen kombiniert visuelle Klassifizierung, wurden verglichen und vereinigt die drei abschließenden Gruppen entsprechend der berechneten Einnahme Typ mit dem Namen zu bilden, die sie repräsentierten ( dh
. Milch, Meerwasser und feste Nahrung). Diese abschließenden Kategorien wurden als Gruppierungsfaktoren verwendet, um eine LDA auf dem Anzeige ( d.h
Einzel- und hohes Vertrauen) PDER Ereignisse führen die gleichen 6 erklärenden Variablen bisher verwendeten in Cluster-Analyse. Die Vorhersagefunktion durch die LDA erzeugt wurde anschließend verwendet, um die ein geringes Vertrauen und mehrere PDER Ereignisse zuvor von beiden Klassifikationsverfahren ausgeschlossen zu klassifizieren. Dieses Verfahren führte alle PDER Ereignisse wie Milch, Meerwasser oder feste Nahrung Inges klassifiziert werden.

Mehrere Faktoren wurden Meerwasser und feste Nahrungsaufnahme in pre-entwöhnte Welpen zu erklären, untersucht. (; [48] Alter ≤33 d) Einzelne Wachstumsrate als der Koeffizient eines allgemeinen linearen Modells auf Masse und Alter vor dem geschätzten Absetzalter berechnet. Die "geschleppt-out" oder "in Wasser" Status der Welpen wurde für jeden gekennzeichnet PDER Ereignis bestimmt die Wet /Dry Schwelle ihrer TDR verwenden. Die Zeit seit dem letzten Milchaufnahme vergangen ist, seit der letzten Einnahme verstrichen ist, unabhängig von der Einnahme Typ, Zeit bis nächsten Milchaufnahme und die verstrichene Zeit bis zum nächsten Einnahme für jede PDER Ereignis berechnet wurden und die Mittel für jede Einnahme Typ verglichen.

Wenn es angebracht ist, Normalität mit dem Shapiro-Wilk-Test und Varianzhomogenität mit einem Levene-Test getestet wurde auf Mittel (Paket Auto
, [59]). Wenn die Normalität Kriterium nicht eingehalten wurde, Randomisierungstests (rand-Test, modifiziert nach [60]) mit 5000 Permutationen wurden verwendet, anstatt t-Tests
Statistiken zwischen den Gruppen zu vergleichen. Die Ergebnisse wurden bei P <signifikant angesehen; 0,05 und sind als Mittelwerte ± Standardfehler (SE), sofern nicht anders angegeben

Ergebnisse

• PLoS ONE: Nährstoffe Regulate Differen Nucleobindin-2 /Nesfatin-1 in vitro in Cultured Magen Ghrelinoma (MGN3-1) Zellen und in vivo in Male Mice
• PLoS ONE: Quantifizierung von Chitinase-mRNA-Spiegel in Mensch und Maus Gewebe durch Real-Time PCR: Spezies-spezifischen Expression von Saure Mammalian Chitinase in Magen Tissues