PLoS ONE: Mave Temperatur Records Reveal Sygepleje Adfærd og overgang til fast føde Forbrug i en fravænnede Pattedyr, Harbour Seal Pup (Phoca vitulina)

Abstrakt

Kendskab til overførsel mælk fra mor til afkom og tidlig fast mad indtagelser hos pattedyr giver mulighed for en større forståelse af de faktorer, der påvirker overgangen til ernæringsmæssige uafhængighed og pre-fravænning vækst og overlevelse. Alligevel undersøgelser overvågning diende adfærd har ofte påberåbt visuelle observationer, som måske ikke giver et retvisende mælk indtag. Vi vurderede brugen af ​​maven temperatur telemetri til at overvåge diende og fourageringsadfærd i fritgående spættet sæl ( Phoca vitulina
) hvalpe under amning. Mave temperatur falder blev analyseret under anvendelse hovedkomponent og klyngeanalyser, samt forsøg med simulerede maver resulterer i en præcis klassificering af maven temperaturen falder i mælk, havvand og fast føde indtagelser. Havvand og solid mad indtagelser repræsenterede i gennemsnit 15,3 ± 1,6% [0-40,0%] og 0,7 ± 0,2% [0-13,0%] henholdsvis individuelle indtagelser. Samlet set 63,7% af mælk indtagelser opstod mens hvalpene var i vandet, hvoraf 13,9% blev forudgået af havvand indtagelse. Den gennemsnitlige tid mellem efterfølgende indtagelser var signifikant mindre for havvand end for mælk indtagelser. Disse resultater antyder, at havvand indtagelse kan udgøre sikkerhed indtagelse under akvatiske diende forsøg. Alternativt som faste fødevarer indtagelser ( n
= 19) blev observeret blandt 7 hvalpe, kan havvand indtagelse medføre mistede byttedyr capture forsøg. Denne undersøgelse viser, at nogle spættede sæler begynde at indtage bytte mens stadig plejet, hvilket indikerer, at fravænning sker mere gradvist end tidligere antaget i denne art. Mave temperatur telemetri repræsenterer en lovende metode til at studere diende adfærd i vilde pattedyr og overgang til ernæringsmæssige uafhængighed i forskellige endoterm arter

Henvisning:. Sauve CC, Van de Walle J, Hammill MO, Arnould JPY, Beauplet G (2014 ) mave Temperatur Records Reveal Sygepleje Adfærd og overgang til fast føde Forbrug i en fravænnede Pattedyr, Harbour Seal Pup ( Phoca vitulina
). PLoS ONE 9 (2): e90329. doi: 10,1371 /journal.pone.0090329

Redaktør: Yan Ropert-Coudert, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Frankrig

Modtaget: September 17, 2013; Accepteret: 29 Januar 2014; Publiceret: 26 feb 2014

Copyright: © 2014 Sauve et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af naturvidenskab og teknik Forskningsråd of Canada (URL: http://www.nserc-crsng.gc.ca/index_fra.asp; giver nummer 355.536-2008, 358.856-2008, 390.930-2010 til GB og 431802- 2012 til CCS); og Fonds de recherche Nature et Technologies du Québec (URL: http://www.fqrnt.gouv.qc.ca/; tilskud nummer 2010-NC-132.906 til GB). Québec-Océan (URL: http://www.quebec-ocean.ulaval.ca/) og den canadiske Institut for Fiskeri og Oceans (URL: http://www.dfo-mpo.gc.ca/index-eng. htm) forudsat videnskabelig og logistisk støtte i hele dette projekt. Fiskeri og Oceans Canada bidrog til dataindsamling og manuskript forberedelse via ekspertise MO Hammill, P Carter, J-F Gosselin og S Turgeon. Ud over dette, der finansierer havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

i perioden med forældrenes afhængighed, afkom vækst og overlevelse er afhængige af forældrenes ernæringsmæssige provisioning, for det meste bestemt af modermælk overførsel i pattedyr [1], [2]. Ved ernæringsmæssige uafhængighed, afkom overlevelse afhænger af miljømæssige forhold, befolkningstæthed, body reserver og evnen til at fouragere effektivt i et givet miljø [3], [4], [5], [6], [7]. en sådan markant skift af de faktorer, der påvirker afkom overlevelse gør overgangen til ernæringsmæssige uafhængighed en kritisk proces i livshistorie af vilde dyr [1], [8], [9].

Undersøgelsen af ​​sygepleje og fouragering adfærd hos pattedyr giver vigtige oplysninger relateret til overførsel af energi fra moder til afkom, samt overgangen til ernæringsmæssige uafhængighed. Sæler (phocids, otariids og hvalrosser) er en fremragende model for sammenlignende studier af diende adfærd og overgang til ernæringsmæssige uafhængighed, da hunnerne føder enkelt ung, er fylogeni acceptabelt etableret mellem familier [10], og forskellen parring og moderen strategier er veldokumenterede mellem de to store familier [11]. Blandt phocids (sande sæler), hunner som regel hurtigt på land gennem en kort (4-50 d
) ammeperioden [11], [12]. Fravænning anses for at være brat i phocids og efterfølges af en fastende periode, hvor fysiologisk udvikling fortsætter, og fouragering færdigheder forbedres [12], [13], [14], [15]. I otariids (pels sæler og søløver), hunner alternative mellem episoder på land primært til sygepleje og fouragerer ture på havet [11], [16]. Otariid unger begynder at forbruge fast føde nær slutningen af ​​laktationsperioden [12], [16], hvilket gør overgangen til ernæringsmæssige uafhængighed mere gradvis i otariids end i phocids. På trods af disse fylogenetiske distinktioner, behøver hunner af nogle phocid arter, der ikke følger den typiske phocid moderens strategi som de foder i løbet af laktationsperioden [17], [18], [19], [20,]. Derfor spættet sæl hunner foretage fouragerer ture på havet ud over den første uge af amning [19], [21]. Denne "otariid-type" maternal strategi menes at skyldes den manglende evne af hunner til at lagre tilstrækkelig energi og produktionsstøtte mælk i hele ammeperioden [11]. Harbour sælunger er også exceptionel blandt phocids fordi de tager til vandet hurtigt efter fødslen [22], [23], [24], udføre dyk normalt er forbundet med fouragering før fravænning [24] og undertiden ledsage deres mor på havet i løbet fouragerer ture [23]. Det er dog generelt, at fravænning i denne art er brat som i de fleste phocids [25].

Undersøgelser undersøger diende adfærd har for det meste påberåbt sig direkte observationer [26]. Dog er visuelle observationer af fritgående dyr ofte begrænset til dagtimerne og påvirkes af vejrforhold, position på den observatør, og adgang til sygepleje sites. Natlige og undersøiske diende hændelser er blevet rapporteret i mange pattedyrarter ( f.eks
., [27], [28], [29], [30]). Desuden kan scanne frekvenser ikke repræsentative for diende succes [31], [32], hindrer nøjagtig karakterisering af sygepleje mønstre. Selvom energetik af amning er blevet vurderet ved hjælp indirekte metoder såsom isotopfortynding og dobbelt mærket vand i flere arter ( f.eks
., [33], [34], [35], [36], [37 ], [38]), sådanne metoder kun giver oplysninger om gennemsnitligt energioverførsel mellem to tidspunkter.

mave temperatur telemetri er blevet udviklet og bredt anvendt til at overvåge fourageringsadfærd af marine endoterm rovdyr ( f.eks
, [39], [40], [41], [42], [43]). Fordi deres kropstemperatur er højere end deres bytte, mad forbrug endothermer fodring på køligere varer resulterer i en variation mave temperatur kendetegnet ved en brat fald og efterfølgende eksponentiel stigning (PDER begivenhed; [39]). Tilsvarende er mælkekirtler beliggende i dermis væv, som er køligere end dyret kernetemperatur ( f.eks
., [44]). Suckling resulterer derfor i en PDER begivenhed i afkom mave temperatur [28]. Mave temperatur telemetri har vist sig at være en værdifuld teknik til påvisning af diende begivenheder i både den bundne [28] og fritgående [29] havnen sælunger, der repræsenterer en lovende metode til at studere sygepleje adfærd i forskellige vilde pattedyr. Fortolkningen af ​​maven temperaturdata fra ammende pattedyr kræver en validering teknik for at diskriminere de PDER begivenheder forbundet med suckling fra dem, der skyldes havvand eller fast fødeindtagelse. Modermælk, havvand og ectothermic organismer har forskellige temperaturer og /eller termodynamiske egenskaber således, at deres indtagelse skulle give distinkt PDER kurve mønstre (Fig. 1). Indtagelse af modermælk ved sælunger har vist sig at resultere i PDER begivenheder betydeligt lavere amplitude i forhold til havvand eller bytte indtagelse [28], [29]. Ligeledes havvand har større termisk ledningsevne og lavere viskositet end byttedyr ( f.eks.
Fisk), hvilket resulterer i PDER arrangementer med hurtigere mave temperatur opsving [45], [46]. Derfor har mælk indtagelse tidligere skelnes fra indtagelse af koldere materialer i havnen sælunger baseret på hastigheden af ​​maven temperaturfald [28], [29]. Ligeledes har et indeks over temperaturen genfindingsprocenten tidligere blevet udviklet til effektivt at skelne fisk forbruget fra havvand drikke hos voksne sæler og havfugle [41], [47]. Ved at kombinere disse to metoder, kan forskelsbehandling mellem de tre mulige indtagelse typer (mælk, havvand og solid fødevarer) derfor være muligt ammende hvalpe. En sådan forskelsbehandling er af største betydning for nøjagtigt undersøge sygepleje adfærd og overgang til ernæringsmæssige uafhængighed i pattedyr.

Hovedformålet med denne undersøgelse var at tilvejebringe en metode til effektivt at skelne de tre mulige indtagelse typer (mælk, havvand og fast føde) i sygepleje pattedyr, der lever af køligere elementer. Vi hypotese indtagelse typer kunne skelnes baseret på egenskaberne af PDERs de generere ved hjælp af en kombination af multivariate dataanalyse teknikker og mave laboratorium simuleringer [28], [46]. Som havvand indtagelse ofte blev observeret i maven temperatur optegnelser fra et lille udsnit af fritgående havn sælunger [29], vi også testet forskellige hypoteser forklarer forbruget havvand ved pre-vænnet unger. Vi forventede, at hvis unger drikker havvand når dehydreret, forekomst af havvand indtagelse vil være positivt korreleret med den forløbne tid siden sidste mælk indtagelse. Alternativt, hvis havvand indtagelse betegner en konsekvens af undersøiske diende forsøg, ville det sandsynligvis blive fulgt af en efterfølgende indtagelse kort efter. Endelig har vi undersøgt forekomsten af ​​præ-fravænning solid fødevareforbruget i havn sælunger.

Materialer og metoder

Etik erklæring

procedurer Animal håndtering blev godkendt af Animal Care komitéer Université Laval (tilladelser numre: 200844 og 2011020) og af fiskeri og Oceans Canada (tilladelser numre: IML 2010-030, IML 2011-004, og IML 2012-003)

Animal håndtering og instrumentering <. br>

Denne undersøgelse blev foretaget på Bic Island spættet sæl koloni (48 ° 24 'N; 68 ° 51' V), der ligger omkring en privat ø i St. Lawrence floden udmunding, i løbet af de 2010-12 ynglende sæsoner . Harbour sælunger blev fanget med en lang dukkert net [48] i hele diegivningsperioden (fra midt i maj til juli). Ved første fange, hvalp sex, navlen stat og masse (± 0,5 kg, Salter foråret skala, West Bromwich, England) blev registreret. For at lette genfangede individer blev individer markeret med en farvet og nummereret hoved tag (Seal Hat, Dalton, England) limet (LoctiteƦcyanoacrylat lim og˩2 Accelerator, Loctite Corp., Mississauga, ON, Canada) på hovedet og mærkede med et unikt nummereret tag i en hind flipper (Jumbotag, Dalton, England). Genfangede individer af unger blev udført så ofte som muligt, indtil fravænning, med en 48 h minimum interval mellem successive fanger.

Da de fleste unger ikke blev taget til fange umiddelbart efter fødslen blev to indirekte metoder anvendt til at estimere hvalp alder (d) . I tilfælde af meget små hvalpe kunne alder bestemt ifølge navlen degeneration stadier [48], [49], [50]. I ældre unger blev individer vejet mere end én gang i løbet af sæsonen og alder blev bestemt ved back-beregning til fødslen masse ved hjælp af en gennemsnitlig vækstrate for kohorten (nærmere beskrevet i [51]).

For at overvåge mave temperatur ændringer, fritgående unger var udstyret med mave-temperatur piller (STP, ikke-modificerede STP3: 32 g, 6,3 cm x 2,2 cm, Wildlife Computers Inc., Redmond, WA, USA) indført ved intubation ved hjælp af en smurt (KY Jelly , Johnson &Johnson, New Brunswick, NJ, USA) 2,54 cm diameter fleksible rør indsat i deres mave [29]. Hver 10 s blev STP data overføres til en tid-dybde optager (TDR; MK10-L, Wildlife Computers Inc.) limet (5-Cure Marine Epoxy, Industrial Formuleringsvirksomheder, Auburn, WA, USA) til hvalp dorsale fur [ ,,,0],29]. Vi udførte laboratorieforsøg kalibrering test af renseanlæg (se [28] til protokol detaljer), der er angivet en gennemsnitlig svartid på 18 ± 2 s (interval: 10-27 s) på grund af forsinkelsen mellem STP emission og TDR modtagelse af temperaturdata. Hertil kommer, at lette flytning til genbeskatning, blev en VHF transmitter (3PN, Sirtrack ltd., Havelock North, New Zealand) også limet på hvalpen hals. Data fra enheder stadig er fastgjort til dyret blev hentet i feltet på hver generobre bruger en bærbar computer. Håndtering tid oversteg sjældent 15 min fra fangst til at frigive.

Data behandling, analyse og mave temperatur simuleringer

Alt databehandling og statistiske analyser blev udført inden for det R miljø [52], medmindre andet er angivet . Mave temperaturdata (± 0,1 ° C) blev ekstraheret fra TDR vha Mk10host v1.25.2006 software (vilde dyr Computers Inc.). Da vigtige intra- og inter-individuelle variationer i mave temperatur optegnelser forhindrede anvendelse af automatiserede metoder til at identificere indtagelser blev PDER begivenheder identificeret visuelt. En scanning af maven temperatur plottet mod tid (ved hjælp Instrument Helper v3.0, Wildlife Computers Inc.) blev udført på hver fil for at finde PDER begivenheder, der defineres som skarpe fald i maven temperatur på mindst 2 standardafvigelser fra middeltemperatur beregnet over foregående 10 minutter, efterfulgt af en eksponentiel-formet temperaturstigning. PDER event egenskaber er tidligere blevet beskrevet for havvand, bytte (voksne) og mejeriprodukter indtagelser ( f.eks
., [28], [29], [40], [47], [53]). Hver PDER begivenhed blev derfor foreløbigt tildelt til en indtagelse type ( dvs.
mælk, havvand eller fast føde) baseret på amplituden af ​​faldet og kurvens form recovery (konveks, konkav eller pseudo-lineær, associeret med mælk , solid mad og havvand indtagelser henholdsvis) set i temperatur optegnelser (fig. 1B). Selvom subjektive, denne kategorisering fungerede som en pålidelig kriterium sammenligningsgrundlag for resultaterne fra følgende objektive klassificering metoder.

For at statistisk klassificere temperaturen falder ind i de forskellige indtagelse typer blev tre point defineret for hver PDER begivenhed (fig. 1A; [47], [53]): ( A
) punktet forud for indtræden af ​​temperaturfald ( dvs.
før temperaturen falder til eller under den foregående gennemsnitlige temperatur (beregnet over. 10 min) minus 2 standardafvigelser (SD); [42]); ( B
) det punkt, hvor den laveste temperatur er nået; og ( C
) det punkt, hvorefter temperaturen når stabilitet (± 1 standardafvigelse) i mindst 10 minutter. Seks variabler blev efterfølgende beregnet for hver PDER begivenhed: (1) amplituden af ​​temperaturfald, T _{A-T B
; (2) varigheden af ​​temperaturfald, t B-t A
; (3) temperatur på halvvejen temperatur opsving, T 0,5
hvor (1) (4) varighed fra punkt A
til halvvejs temperatur opsving, t 0,5
; (5) et indeks over temperatur recovery rate, jeg
[41], [47], hvor (2) og (6) på temperaturfald, D, hvor Hotel (3)}

PDER begivenheder, der var vanskelige at skelne fra naturlige krop temperaturvariationer blev noteret som lav tillid PDER begivenheder. Disse omfatter temperatur dråber amplituder mindre end 0,7 ° C, eller temperaturen falder præsentere lignende nedgang og stigningstakter eller andre karakteristika ikke fuldt ud opfylder de PDER begivenhed definition [39], [46]. På grund af deres usædvanlige form egenskaber, kan de tidligere detaljerede variabler afledt lave tillid PDER begivenheder ikke repræsentative for typiske PDER begivenheder. Tilsvarende, når mere end én mave temperaturfald indtruffet før stabilitet blev nået, blev de overlappende PDER begivenheder behandles sammen og defineret som flere PDER arrangementer [46]. For disse særlige begivenheder, peger En
, B
og C
kun præget større dråbe af kampen. Men Wilson et al
. [46] fandt, at STP svar var mindre variabel under den første indtagelse i forhold til de efterfølgende indtagelser af kampen. Derfor er de variable beregnet for flere PDER begivenheder er ikke repræsentative for typiske PDER begivenheder enten og bør behandles særskilt. Clustering metoder er stærkt påvirket af outliers. For at sikre dannelsen af ​​PDER hændelsesgrupper der nøjagtigt afspejler de naturlige variationer i indtagelse adfærd, blev lav tillid og flere PDER begivenheder udelukket fra klyngeanalyse.

Brug kun de tilbageholdte PDER begivenheder, en principal komponent analyse (PCA ) blev udført på den centrerede og skalerede værdier af de 6 variabler til at generere ukorrelerede faktorer, som en varimax rotation (pakke Psych
; [54]) blev påført. Faktorer med egenværdier > 1 (Kaisers kriterium) blev lagret, og deres scoringer blev brugt til at udføre en hierarkisk, komplet-kobling cluster analyse. Denne fremgangsmåde tillod bestemmelsen af ​​det passende antal klynger stede i datasæt ved hjælp af fusion niveau værdier kriterium [55] samt identifikation af de klynge centre. Disse centre blev indført som indledende frø i en ikke-hierarkisk K-means cluster analyse, der blev itererede indtil center værdier blev konstant [56]. Kategoriseringen af ​​de PDER begivenheder ved K-midler clustering procedure blev sammenlignet med deres subjektive visuelle klassifikation at afgøre, om de forskellige grupper opnåede faldt sammen med en bestemt indtagelse type ( dvs
mælk, havvand, eller fast føde).

for yderligere at øge vores effektivitet til at skelne mellem indtagelse af vand og fast føde, blev indtagelser kunstigt simuleret. En STP blev indsat i en ballon og nedsænket i et cirkulerende vandbad holdt ved en middeltemperatur simulerer hunds mave (37,8 ° C; [28]). Vand eller fisk (cut, ikke-renset sild) blev holdt ved 12,0 ° C, den højeste vandtemperatur registreret i undersøgelsesområdet i diegivningsperioden (St. Lawrence Global Observatory, Rimouski Station, 2010-2012). Elementer blev derefter injiceret ind i ballonen ved hjælp af en 530 ml sugning pistol og forblev på plads, mens de opvarmes til temperaturen af ​​vandbadet. For at efterligne temperaturfald mønstre der forventes af et fritgående hvalp mave, blev simuleringer foretaget ved hjælp af forskellige mængder vand (25-125 g) og fisk (30-300 g). Da formålet med disse simuleringer var at fremhæve forskelle i karakteristika temperaturfald genereret af vand og fisk indtagelser, den absolutte hastighed af materiale, opvarmning var ikke vigtigt. Der blev ikke gjort forsøg på at efterligne varmeledningsevne og blande mønstre af en hvalp mave. Derfor blev PDER begivenheder fra laboratorie simuleringer præget af større temperaturfald efterfulgt af langsommere opvarmning end dem, der ville blive registreret i levende dyr. Da blev påvist forskelle i PDER arrangementer i simulerer havvand og fisk indtagelser, kunne relative sammenligninger mellem disse forskellige indtagelse typer alligevel anvendes på PDER begivenheder udvundet af fritgående hvalpenes optagelser.

For hver eksperimentelt genereret PDER begivenhed , de 6 variabler er beskrevet ovenfor blev beregnet, centreret og skaleret, og indføres i en lineær diskriminant analyse (LDA; pakke MASS
; [57]), hvori mængde (g) af injiceret materiale blev tilsat som et 7 ^{th variabel. Variablen med den højeste lineære diskriminant koefficient blev betragtet som den bedste forudsigelse af materialet (vand eller fisk), der forårsagede temperaturfald [58]. En fordeling plot af denne variabel blev derefter produceret for PDER begivenheder optaget på fritgående unger (undtagen lav selvtillid og flere PDER hændelser). Dette tillod identifikation af afbrydelser i distributionen, der afspejles forskellige indtagelse typer. PDER arrangementer blev derefter klassificeret baseret på deres relative position i fordelingen af ​​bedste forudsigelse variable af de to ikke-mælk indtagelse typer (havvand eller fast food).}

De resulterende klassifikationer fra begge metoder, kombineret med det foreløbige visuel klassificering, blev sammenlignet og samles for at danne de tre endelige grupper opkaldt efter den beregnede indtagelse type de repræsenterede ( dvs
. mælk, havvand og fast føde). Disse endelige kategorier blev anvendt som gruppering faktorer til at udføre en LDA på klassificeret ( dvs.
enkelt og høj tillid) PDER begivenheder ved hjælp af de samme 6 forklarende variable tidligere anvendte i klyngeanalyse. Den intelligente funktion genereret af LDA blev efterfølgende brugt til at klassificere de lave tillid og flere PDER begivenheder tidligere udelukket fra begge metoder klassificering. Denne procedure førte alle PDER begivenheder, der skal klassificeres som mælk, havvand, eller faste fødevarer indtagelser.

Flere faktorer blev undersøgt for at forklare havvand og fast føde indtagelse i pre-vænnet unger. Individuel vækstrate blev beregnet som koefficienten af ​​en generel lineær model på masse og alder før forventet fravænning alder (alder ≤33 d; [48]). Den "halede-out" eller "i vand 'status hvalpene blev bestemt for hver karakteriseret PDER hændelse ved hjælp af våd /tør tærsklen til deres TDR. Den forløbne tid siden sidste mælk indtagelse, forløbet tid siden sidste indtagelse uanset indtagelse type, forløbet tid indtil næste mælk indtagelse og forløbet tid indtil næste indtagelse blev beregnet for hver PDER begivenhed og midlerne sammenlignet for hver indtagelse type.

Når det er hensigtsmæssigt, normalitet blev testet med Shapiro-Wilk test og varianshomogenitet med en Levene test på midler (pakke bil
, [59]). Når kriteriet normalitet ikke blev respekteret, randomisering test (rand-test; modificeret fra [60]) med 5000 permutationer blev brugt i stedet for t-tests
at sammenligne statistikker mellem grupperne. Resultaterne blev betragtet signifikant ved P < 0,05 og præsenteres som betyder ± standardfejl (se), medmindre andet er angivet

Resultater

PDER begivenheder i fritgående hvalpe og deres foreløbige klassifikation

i alt 40 fritgående unger blev instrumenteret. Af disse 35 forudsat brugbare data (tabel 1), hvilket resulterer i en samlet varighed på 565 d af maven temperatur optagelse, med et individuelt gennemsnitlig varighed på 16,1 ± 0,9 d og i alt 1776 PDER begivenheder. Det samlede gennemsnitlige antal PDER hændelser per dag per hvalp var 3,1 ± 0. 3, med betydelige inter-individuelle variationer (interval: 0.6-4.7 PDER hændelser pr dag). Blandt de identificerede PDER begivenheder, 354 udstillede amplituder < 0,7 ° C (men ≥0.3 ° C), mens 142 havde usædvanlige kurve former og, dermed, blev klassificeret som lav tillid PDER begivenheder. Derudover 13 blev betragtet som flere PDER begivenheder, hvilket resulterer i 1267 single og høje tillid PDER begivenheder.

Karakteristik af de indgående faktorer opnået fra PCA er præsenteret i tabel 2. Ifølge Kaisers kriterium, 2 faktorer fra PCA forklarede 80,3% af den samlede varians og blev efterfølgende tilbageholdt. Disse faktorer blev indført i varimax rotation, som ikke påvirker den andel af den samlede varians forklaret, men udlignede sin partition mellem de to faktorer. Mens den ene faktor udstillet vigtige loadings for de variabler i relation til varigheden af ​​PDER begivenheder, de variabler, der er forbundet med temperaturen falde tungt lastet på den anden faktor (tabel 3). Dette indikerer, at de to faktorer opnåede scorede for forskellige variabler i overensstemmelse med de PDER begivenheder aksen egenskaber. Desuden maksimum-sandsynlighed faktor analyse viste, at de to faktorer, der stammer fra den roterede matrix var tilstrækkelige i modellen (fit = 0,98, χ ^{2
= 662,55, P
< 0,001), støtte deres tilbageholdelse til yderligere analyse. De absolutte værdier af de standardiserede belastninger var > 0,30 på mindst én faktor for de seks variabler, hvilket indikerer, at alle af dem var relevante i PCA (tabel 3 [61])}

Scores for de to. faktorer for hver af de 1267 PDER hændelser blev beregnet ud fra den roterede matrix og indført som variable i den hierarkiske komplet-binding klyngeanalyse. Ifølge kriterium værdi fusion niveau, det optimale antal klynger til stede i data var k
= 5, fordi det var den første værdi af k
for hvilken en lille spring i plottet node højde mod blev observeret antal klynger (figur 2;. [55]). Den hierarkiske klyngeanalyse dendrogram blev således skåret på k
= 5, og midlerne til komponent faktorer for hver klynge blev brugt som indledende frø i en ikke-hierarkisk K-betyder klyngeanalyse (fig. 3).

Når PDER begivenheder fra de resulterende grupper blev sammenlignet med deres indledende visuel klassificering, tre grupper indeholdt en høj procentdel af PDER begivenheder identificeret som mælk indtag (gruppe 1: 87,7%, gruppe 3: 99,6% og gruppe 5: 100%, fig 3), mens to grupper blev overvejende sammensat af hændelser, der identificeres som enten vand eller faste fødevareindtag (gruppe 2:. 99,2% og gruppe 4: 100%). Klyngeanalysen tillod ikke forskelsbehandling mellem havvand og fast føde indtagelser, men begge indtagelse typer kunne effektivt skelnes fra mælk indtag, med en samlet afvigelse på 3,9% mellem den multivariate analyse og den visuelle klassificering metode.

Indtagelse simuleringer og korrigeret klassificering af PDER begivenheder

Alle injektioner af vand og fisk i de simulerede maver resulterede i pludselige fald efterfulgt af en eksponentiel stigning i temperaturen registreret af STP. Resulterende koefficienter af lineære diskriminanter fra LDA på 7 variable (tabel 4) identificerede den jeg
indeks som den mest effektive gruppe prædiktor. jeg
indeks beregnet for vand injektioner var signifikant (rand-test, P
= 0,002) lavere end for fisk injektioner. Derfor jeg
indeks distribution blev plottet for de PDER arrangementer klassificeret i gruppe 2 og 4 ( n
= 195, vand og fast food indtagelser). Som vist i fig. 4, en indlysende diskontinuitet var til stede i fordelingen, med en densitet lig med nul for jeg
værdier fra 77,3 til 108,3 s ° C ^{-1. Den foreløbige visuelle klassificering af PDER begivenheder fra gruppe 2 og 4, der har jeg
værdier > 92,8 s ° C -1 (midtpunktet af null vifte af jeg
fordeling , se figur 4;. n
= 13) viste, at de sandsynligvis opstod fra faste fødevarer indtagelser, mens PDER begivenheder, der har jeg
værdier < 92,8 s ° C -1 var meste visuelt klassificeret som havvand indtagelser.}

da mælk indtagelser forventes at producere større jeg
værdier i forhold til fast føde indtagelser (se fig. 1 B), PDER begivenheder fra alle grupper, der har jeg
værdier lavere end 92,8 s ° C ^{-1 ( n
= 251) blev klassificeret som havvand indtagelser. I modsætning hertil PDER begivenheder med jeg
værdier større end 92,8 s ° C -1 blev kategoriseret som faste fødevarer indtagelser ( n
= 13), når henføres under gruppe 2 eller 4, og som mælk indtagelser ( n
= 1003), når henføres under gruppe 1, 3 eller 5 ved klyngeanalyse.}

de resulterende lineære diskriminanter fra LDA udført på 1267 PDER begivenheder er klassificeret som høj tillid og single er vist i tabel 5. det resulterende forudsigende funktion tillod klassificeringen af ​​de resterende 517 multiple eller lav selvtillid PDER arrangementer med 98,3% af overensstemmelse med foreløbig visuel klassificering. Som følge heraf blev alle 1776 PDER begivenheder klassificeret som enten mælk ( n
= 1478), havvand ( n
= 279) eller faste fødevarer indtagelser ( n
= 19). Den generelle afvigelse i gruppe tilskrivning mellem den kombinerede statistisk analyse og den foreløbige visuelle klassifikation var 2,4%, og var mest på grund af PDER begivenheder fra gruppe 1 (fig. 3), der blev visuelt betragtet som faste fødevarer indtagelser, selvom klassificeret som mælk indtagelser ved den statistiske metode.

indtagelse kategorier og forbrugsadfærd

Mens havvand og solid mad indtagelser repræsenterede 15,7% og 1,1% af alle de PDER begivenheder, henholdsvis den relative betydning af hver indtagelse typen varierede betydeligt mellem individer (tabel 6). Ikke overraskende, mælk repræsenterede den hyppigste indtagelse type for alle hvalpe, med den relative andel af de samlede individuelle indtagelser spænder fra 60,0 til 100% (middelværdi = 84,1 ± 1,7%). Havvand indtagelse på tværs af individer varierede 0-40,0% (middelværdi = 15,3 ± 1,6%) af PDER begivenheder, mens fast føde repræsenterede 0-13,0% (middelværdi = 0,7 ± 0,2%) af de samlede indtagelser mellem individer. Alle undtagen én enkelt indtaget havvand mindst én gang under optagelsen periode. blev påvist i alt 19 faste fødevarer indtagelser blandt 7 unger. Blandt disse unger, blev 9 fast føde indtagelser optaget i et enkelt individ, mens blandt de andre 6 dyr fast føde blev indtaget på ≤3 lejligheder.

Samlet set hvalpe var i vandet i løbet af 63,7% af mælk indtagelser, af der 13,9% blev forudgået af en havvand indtagelse begivenhed. Næsten alle (98,5%) af havvand indtagelser opstod mens hvalpe var i vandet. Desuden hvalpe var normalt stadig i vandet, når der udføres den efterfølgende indtagelse efter en havvand indtagelse (98,6% og 72,2%, når disse indtagelser var havvand eller mælk, henholdsvis). Interessant hvalpe der indtages fast føde udviste en større forekomst af akvatiske sygepleje (mælk indtagelser mens hvalpen var i vandet) end hvalpe, der ikke indtager fast føde (P < 0,001 betegner = 80 ± 4% og 54 ± 6%, henholdsvis).

Milk indtagelse opstod under hele overvågning mave temperatur, mens den første identificerede forbrug af havvand og fast føde fandt sted ved 4 og 12 dage gamle, hhv. Som illustreret i fig. 5, er andelen af ​​indtagelser forbundet med diende faldt fra 94,4% ved dag 1 til 77.4% på dag 20, og yderligere øges op til 90,0%, indtil den anslåede fravænningsalderen (dag 33; [48]).

• PLoS ONE: Næringsstoffer Differentielt Regulere Nucleobindin-2 /Nesfatin-1 in vitro i kulturperler mave Ghrelinoma (MGN3-1) Celler og in vivo i hanmus
• PLoS ONE: Kvantificering af chitinase- mRNA Niveauer i mennesker og mus væv ved Real-Time PCR: artsspecifik ekspression af sure pattedyr chitinase i mave væv