Ассоциация IL-1бета полиморфизма гена с кахексии из местно-распространенного рака желудка

Ассоциация IL-1бета полиморфизма гена с кахексии из местно-распространенного рака желудка
Аннотация
Справочная информация
IL-1бета вовлечен в воспалительный эпизод. Ввиду воспалительного характера раковая кахексия, мы определили прогностическую ценность IL-1B-31 T /C, -511 C /T, +3954 C /T и IL-1Rn полиморфизмов гена VNTR на возникновение кахексии, связанной с местно-распространенного рака желудка.
Методы
В исследование были включены 214 пациентов и 230 здоровых добровольцев. Геномную ДНК получали из лейкоцитов периферической крови. Генотипов и частот аллелей определяли у больных и здоровых лиц с использованием полиморфизма длин рестрикционных фрагментов анализ продуктов полимеразной цепной реакции.

Результаты в целом частот IL-1B-31 Т, -511 T, +3954 T и IL -1RN алеллей у больных с местно-распространенным раком желудка были сопоставимы с таковыми в контрольной группе. Никаких существенных различий не было обнаружено в распределении IL-1B-31 T, T -511 и IL-1RN VNTR между пациентами с кахексии и без него. У пациентов с кахексией показали значительно более высокую распространенность IL-1B + 3954 аллеля Т, чем без (P = 0,018
). В логистической регрессии с поправкой на фактический вес, расположение рака и стадии, IL-1B + 3954 CT генотип был связан с отношением шансов 2,512 (95% ДИ, 1.180 - 5.347). Для кахексии
Заключение
IL-1B + 3954 T аллель является основным риском для кахексии от рака желудка на местном уровне. Генетические факторы, изучаемые вряд ли будут играть важную роль в определении восприимчивости к местно-распространенным раком желудка.
Справочная информация
раковая кахексия является синдром характеризуется потерей веса, заметное анорексии, астении и анемии, что составляет в не менее 20% смертельных случаев в опухолевых больных [1]. В отличие от голода, который истощает запасы жира образуют жировой ткани при сохранении белка из атрофии скелетных мышц, в кахексии ни жира, ни белка избавлен. Прогрессивная потеря веса является общим признаком рака и несет ответственность не только за низкого качества жизни и плохой ответ на химиотерапии, но и короткое время выживания независимо от массы опухоли или при наличии метастазов, и это также препятствует терапии рака [2 ]. Хотя механизм кахексии рака остается в значительной степени нерешенным, были выявлены несколько ключевых медиаторов. Один комплект провоспалительные цитокины [3], в том числе TNF-alpha, IL-1, IL-6 и IFN-gamma [4, 5]. У людей, появляется все больше доказательств того, что цитокиновый ответ хозяина определяется генетически. Полиморфные последовательности генов некоторых цитокинов могут быть потенциальными маркерами восприимчивости и клинических исходов в различных инфекционных заболеваний человека. Однако, насколько нам известно, ни одно исследование не обратился к корреляции цитокин полиморфизмов гена IL-1 с вероятностью кахексии от местно-распространенного рака желудка.
IL-1β является мощным провоспалительных цитокинов освобожден макрофагами в системный воспалительные реакции. Она не только имеет важное биологическое действие, но также регулирует воспалительную реакцию и иммунный ответ путем поощрения других цитокинов выражения, такие как IL-6 и IL-12. Исследования документально конститутивный IL-1β продуцирования белка в линиях раковых клеток человека и животных, в том числе сарком и рака яичников и переходных карцином. Солидные опухоли, в которых IL-1β было показано, чтобы быть до регулируется, включают груди, толстой кишки, легких, головы и шеи, рака и меланом, а также пациентов с IL-1β продуцирующие опухоли как правило, имеют плохие прогнозы. Кроме того, было сообщено, что этот цитокин был фактором, ответственным за повышенной деградации белков у крыс, и повторное введение IL-1 крысам индуцированных анорексия и потеря веса [6]. В естественных условиях, потенциально вредные провоспалительные эффекты IL-1 β уравновешиваются действием антагониста рецептора интерлейкина-1 (ИЛ-1Rn) [7]. Обширные данные свидетельствуют о том, что биологическая функция секретируемого ИЛ-1RN является конкурентно ингибировать связывание циркулирующего IL-1 с рецепторами клеточной поверхности [8, 9], и уровни ИЛ-1Rn увеличить поздно в течение воспалительного процесса, чтобы прекратить острое воспаление [7].
продукции ИЛ-1 и IL-1RN являются зависит от нескольких факторов, существует все больше доказательств того, что генетические факторы играют важную роль. IL-1B и гены IL-1Rn расположены на хромосоме 2q14, в пределах области 360 кб. В гене IL1B есть два diallelic полиморфизмы в положениях -511, -31 в области промотора и в положении + 3954 в пятом экзоне. Ген IL-1RN имеет пента-аллельная полиморфный сайт в интрона 2, содержащий переменное количество 86 п.н. последовательности тандемного повтора. В последние годы в пробирке и в естественных условиях исследования показали, что IL-1B -511 T и T +3954 аллели усиления IL-1 и IL-1RN производств и циркулирующие уровни двух цитокинов в организме человека [10, 11]. Сообщалось, что провоспалительные генотипы интерлейкин-1 локусов были связаны со значительно повышенным риском хронического hypochlorhydric ответ на инфекцию H. Pylori и рак желудка в кавказской популяции, предположительно за счет изменения IL-1 уровни в желудке [12 , 13], но влияние полиморфизма гена IL-1 β на восприимчивость к кахексии от рака желудка не была оценена. С учетом роли IL-1 играл в кахексии, мы предположили, что его полиморфизмы могут иметь некоторую связь с развитием рака кахексии.
Причины кахексии, как полагают, многофакторный, но в первую очередь связано с гиперкатаболизм и потеря аппетита из-за циркулирующих опухолевых связанных веществ и цитокинов [14, 15]. Исходя из предположения о существенной воспалительного вклада в кахексии рака, мы предположили, что IL-1B-31 T /C, -511 C /T, +3954 C /T и IL-1RN полиморфизмы генов имеют некоторое отношение с развитием кахексии, связанной с местно-распространенного рака желудка. Мы также определили ли ген полиморфизмы изученные были связаны с восприимчивостью к местно-распространенным раком желудка.
Методов
исследуемой популяции
Протокол был одобрен местным Комитетом по этике и информированное согласие было получено от каждого из пациент или близкий родственник. Все подряд пациентов с местно-распространенным раком желудка с 1 июня 2004 года по 1 июня 2006 года были рассмотрены перспективно. Для того, чтобы иметь право на зачисление, все субъекты должны были быть китайский Хан Население. Критерии исключения были следующие: (1) анорексия; (2) пилорического обструкции; (3) основных желудочно-кишечные заболевания, хроническая почечная недостаточность, сахарный диабет и ВИЧ; (4) печени, перитонеальный, тазовой и отдаленных метастазов; (5) родственный спаривание. Сразу после приема и перед любой хирургической или медицинская процедура была начата, пациенты были исследованы на наличие анорексия, потеря веса, курение и употребление алкоголя состояния воды. Органы управления были набраны из больницы участников в двух центрах, без семейной истории рака желудка. Они были подобраны с пациентами по возрасту и полу, без каких-либо злокачественных заболеваний и инфекционных заболеваний.
Информация о курении и состояние питьевой воды было получено интервью. Мы не получили диетические истории, такие как детали мяса или потребления рыбы. Мы определили "ток", как лиц, которые были курильщиками, "экс-" как те, кто-то курил в прошлом, и "никогда", как те, кто никогда не курил в любое время в их жизни.
Потеря веса во время производства было выражено 6 месяцев в процентах от обычного веса и пациенты были разделены на 2 группы в зависимости от тяжести потери веса: Non-кахексия группы, потеря веса ≤ 10%; Кахексия группа, > 10%.
Оценка Н статуса пилори
14С-МДТ тест повторяли два раза для включенных в исследование пациентов контрольной группы единой командой специализированного персонала. Ни один из испытуемых, никогда не обращались за искоренение H пилори.
Выделение ДНК
геномной ДНК выделяли из 5 мл образцов периферической крови с использованием мастера геномную ДНК набора для очистки (Promega) в соответствии с инструкцией завода-изготовителя.
IL-1B + 3954 C /T
Этот полиморфизм был исследован с использованием полиморфизма длин рестрикционных фрагментов анализ продуктов полимеразной цепной реакции, как изученными ранее [16].
IL-1B-31 T /C
Вперед , TCTTTTCCCCTTTCCTTTAACT; реверс, GAGAGACTCCCTTAGCACCTAGT [17] (Nanjing Bio Eng Co.). Условия ПЦР: 10 мин при 95 ° С; 40 циклов 30 с при 72 ° С, 15 сек при 95 ° С, 20 с при 52 ° C (Bio-Rad, Япония). Продукты ПЦР расщепляли с помощью рестриктазы Alul (Promega) и визуализировали с помощью электрофореза на агарозном геле, окрашенном 2,5% с 0,1% бромистым этидием. Аллели были закодированы следующим образом: C аллель: 234 пар оснований; T аллель:. 150 пар оснований и 84 пар оснований
IL-1B-511C /T
Вперед, 5-TGGCATTGATCTGGTTCATC-3, реверс, 5-GTTTAGGAATCTTCCCACTT-3 [18] (Nanjing Bio Eng Co.). Условия ПЦР: 95 ° C 1 минута; 30 циклов 95 ° С 30 сек, 55 ° С 30 сек, 72 ° С 30 сек; 70 ° С 7 мин (Bio-Rad, Япония). Продукты ПЦР расщепляли с помощью рестриктазы Аваль (Promega) и визуализировали с помощью электрофореза на агарозном геле, окрашенном 2,5% с 0,1% бромистым этидием. Аллели были закодированы следующим образом: Т: 304 пар оснований, C:. 190 и 114 пар оснований
IL-1RN VNTR
Вперед, 5-CTCAGCAACACTCCTAT-3, обратный, 5-TCCTGGTCTGCAGGTAA-3 [19] (Nanjing Bio Eng Co.). Условия ПЦР: 94 ° С в течение 4 мин, 32 циклов при 94 ° С в течение 1 мин, 50 ° С в течение 1 мин, 72 ° С в течение 1 мин; 72 ° C в течение 10 мин (Bio-Rad, Япония). ПЦР-продукты анализировали с помощью электрофореза на агарозном геле 2% окрашивали бромистым этидием. Аллели 1-5 (IL1RN * 1-IL1RN * 5) были обнаружены в соответствии с их размерами относительно лестницы ДНК длиной 100 пар оснований: аллель 1 (четыре) повторы 410 пар оснований; аллель 2 (два повтора) 240 пар оснований; аллель 3 (пять повторов) 500 пар оснований; аллель 4 (три повтора) 325 пар оснований. Аллель 5 (шесть повторов; 595 пар оснований) не наблюдалось в исследуемой популяции было зарегистрировано
Статистический анализ
описательные данные непрерывных переменных, как среднее ± стандартное отклонение и проходят проверку Стьюдента
-test по SPSS 11.0.. Различия в частоте аллелей между группами были обследованы на предмет статистической значимости с хи-квадрат тест или точный критерий Фишера когда это необходимо. Анализ был завершен SAS 6.12 и 2 хвостами P
&л;. 0,05, взятые для обозначения значения
Результаты
Харди-Вайнберга
В каждой исследуемой группе, распределение генотипов соответствовали предсказываемых Харди-Вайнберга (таблица 1 и таблица 2.). Таблица 1 Харди-Вайнберга анализа у пациентов с раком и контрольной группы.
<й>
<й>
рака (п = 214)

Contr. (П = 230)

<й>
<й>
Observed

Expected

Observed

Expected

IL-1β-31
CC
48
45.3
53
49.8
CT 101

95,1
108
114,4
TT
75
73,6
69
65,8
P

0,980 <бр> 0,835
IL-1β-511
CC
55
50,1
56
49,3
КТ
97
106,8
101
114,4
TT
62
57,1
73
66,3
P

0,638
0,454
IL-1β + 3594
CC
178
179,5
201
201,9
КТ
36
33
29
27,2
TT
0
1,5
0
0,9
P

0,442
0,619
Ил-1RN VNTR
1/1
157
156,5
168
167
1/2
45
54
50
58,8
2/2 страница 5 из 6 3.5

4.2
1/3
5
0 4
0
1/4 страница 2 0 страница 2 0
P

0,089
0,135
генотипы не отклоняться от Харди -. равновесия Вайнберга
Таблица 2 Харди-Вайнберга анализ в Non-кахексия группы и группы кахексии
<СОР.> <й>
<й>
Non-кахексии (п = 123)

кахексия (п = 91)

<й>
<й>
Observed

Expected

Observed

Expected

IL-1β-31
CC
26
24.1
12
12.7
КТ
57
60,7
44
42,6
TT
40
38,1
35
35,7
P

0. 889
0,976
IL-1β-511
CC
31
27,8
24
22,3
CT
55
61,4
42 <бр> 45,4
TT
37
33,8
25
23,3
P

0,716
0,881
IL-1β + 3594
CC
109
109,4
69
70,3
КТ
14
13,2
22
19,4
TT
0
0,4 ​​
0
1.3
P

0,809
0,480
Ил-1RN VNTR
1/1
91
90,5
66
66,0
1/2
25
30,5
20
23,4
2/2 страница 3 2.0 страница 2 1.6
1/3
3
0.0 страница 2 0.0
1/4
1
0.0
1
0.0
P

0,316 <бр> 0.510
генотипы не отклоняться от Харди -. равновесия Вайнберга
характеристики исследуемой популяции
на основе критериев отбора, были изучены 214 пациентов с местно-распространенным раком желудка. Из них 91 пациентов имели потерю веса больше, чем 10% в течение шести месяцев (кахексия группа). Характеристики исследуемой популяции были представлены в таблице 3. Никаких существенных различий не было отмечено в полу, возрасту, стадии опухоли и местах между пациентами с кахексии и теми without.Table 3 Характеристики пациентов с местно-распространенным раком желудка.
<й>
<й>
кахексия (п = 91)

Non-кахексии (п = 123)

P


Пол (М /Ж)
55/36
72/51
0,7793
Возраст (год)
55,5 ± 15,0
57,0 ± 13,5
0,4443
сывороточный альбумин (г /л)
30,5 ± 4,7
36,3 ± 6,1
&л; 0,001
Фактический вес (кг)
55,1 ± 9,0
57,2 ± 6,3
0,0584
Анорексия (п)
39
46
0,4198
карцинома расположение
Средняя треть
56
90
0,071
низкий третий
35
33
этап карцинома
III
65
101
0,064
IV
26
22
Нет существенное различие было отмечено, в полу и возрасту.
клинические характеристики органов управления и пациентов приведены в таблице 4.Table 4 характеристики пациентов и контрольной группы.
<й>
<й>
рака (п = 214)

Contr. (П = 230)

P


Пол (М /Ж)
127/87 140/90

0,743
Возраст (год)
56,4 ± 14,3 ± 55,0
13,5
0,280 статус
Курение
никогда не
85 (39,7%)
95 (41,3%)
0,714
Экс-
32 (15,0%)
39 (17,0%)
тока
97 (45,3%)
96 (41,7%)
хеликобактерной инфекции
125 (58,4%)
* 124 (59,9%)
0,756
Плохо питьевой воды (колодезная вода)
31 (14,5%)
22 (9,6%)
0,110
* Двадцать три управления пропустили. Ни одна значимая связь не была обнаружена между частотой статуса курения, плохое состояние питьевой воды и хеликобактерной инфекции. Обе группы были сопоставимы по возрасту и полу.
Полиморфизма генов у пациентов с местно-распространенным раком желудка и контроль
Никаких существенных различий не было найдено по частоте аллеля между пациентами и контрольной группой (таблица 5) .table 5 Сравнение между аллелями пациентов с раком и управления.
<й>
<й>
рака (п = 214)

Contr. (П = 230)

P


IL-1β-31
CC
48
53
CT 101

108
TT
75
69
T аллель
251 (58,6%)
246 (53,5%)
0,121
IL-1-511
CC
55
56
CT 97

101
TT
62
73
T аллель
221 (51,6%)
237 (53,7 %)
0,973
IL-1 + 3594
CC
178
201
КТ
36
29
TT
0 0

аллеля Т
36 (8,4%)
28 (6,3%)
0,228
IL-1RN VNTR
1/1
157
168
1 /2
45
50
2/2 страница 5 из 6
1/3
5 4
1/4
2 <бр> 2
0,992
Никаких существенных различий не было найдено по частоте аллеля между пациентами с раком и контроль
Распределение аллелей исследованных у пациентов с местно-распространенным раком желудка
Подробная информация о сравнении аллелей у пациентов с язвенной рак приведены в таблице 6. Никаких существенных различий не было обнаружено в распределении IL-1-31 T, T -511 и IL-1RN VNTR аллеля между кахексии группой и не-кахексия group.Table 6 Распределение аллелей у пациентов с рак.
<й>
<й>
Non-кахексии (п = 123)

кахексия (п = 91)

P


IL-1β-31
CC
26
12
КТ
57
44
TT
40
35
аллель Т
137 (55,7%)
114 (62,6%)
0,194
IL-1β-511 CC

31
24
CT
55
42
TT
37
25
T аллель
109 (44,3%)
92 (50,5%)
0,376
IL-1β + 3594
CC
109
69
КТ
14
22
TT
0 0

аллеля Т
14 (5,7%)
22 (12,1%)
0,018
IL-1RN VNTR
1/1
91
66
1/2
25
20
2/2
3 страница 2 1/3
3 страница 2 1/4
1
1
0,997
* χ2 = 5,556, P = 0,018
. Значительная разница была обнаружена в частоте аллеля Т между кахексии группой и не-кахексия группы.
Как IL-1B + 3594 полиморфизма, IL-1B + 3594 T аллель был замечен значительно чаще у пациентов с кахексией, чем без него (х 2 = 5,556, P = 0,018
).
логистической регрессии
логистической регрессии с поправкой на фактический вес, расположение рака и стадии, IL-1β + 3954 CT генотип был связан с отношением шансов 2,512 (95% ДИ, 1,180 - 5,347) для кахексии (таблица 7) .table 7 Логистический регрессионный анализ у больных с желудочной Джанер
<й> <. BR> β

95% ДИ

SE

P

IL-1β +3954
0,921
2,512 (1,180, 5,347)
0,386
0,017
бинарной логистической регрессии. Метод = Поэтапное (при условии). Логистической регрессии с поправкой на фактический вес, расположение рака и стадии, IL-1β +3954 CT генотип был связан с отношением шансов 2,512 (95% ДИ, 1.180 - 5.347) для кахексии
Обсуждение
В свете воспалительная природа кахексии рака, мы исследовали роль полиморфизмов в генах, связанных с воспалением при раке желудка. Частота IL-1B-31 Т, -511 T, +3954 T и IL-1RN алеллей нашли в этом исследовании сопоставимы с предыдущими отчетами в Китае [20-22]. Мы обнаружили, что полиморфизмы изучены не связаны со значительным увеличением риска местно-распространенного рака желудка. Тем не менее, значительно увеличилась частота IL-1B + 3954 Т аллель был отмечен у больных с кахексией из местно-распространенного рака желудка, который не сообщалось ранее.
Прежде чем оценивать роль цитокиновой полиморфизма играл в болезни, три необходимо ответить на [23, 24] вопросы. Во-первых, являются субъектами однородна? Чтобы избежать артефактов в смеси населения, мы выбрали только китайские ханьцы в Китае. Кроме того, единокровные предметы соединяемые были исключены из нашего исследования. Во-вторых, это произведение изучаемого гена играют важную роль в патогенезе болезни? Центральные роли для IL-1 в возникновении кахексии было продемонстрировано многими исследованиями [3, 5, 25]. В-третьих, имеет ли полиморфизм гена производят соответствующее изменение в уровне или функции генного продукта? В пробирке и в естественных условиях исследования показали, что эти аллели усиления IL-1 и IL-1RN производств и циркулирующие уровни двух цитокинов в организме человека [10, 11].
Так как Эль-Омар и др [26] сообщили, что IL-1B-31CC и IL-1RN * 2 /* 2 генотипы были связаны со значительным увеличением риска GC в кавказцев, сообщили некоторые противоречивые результаты исследований в разных странах. Поэтому, прежде чем оценивать роль цитокина полиморфизма играл в кахексии, связанной с раком желудка, один важный вопрос необходимо ответить. Являются ли генные полиморфизмы изученные коррелируют с раком желудка? В настоящей работе мы исследовали роль IL-1B-31 T /C, -511 C /T, +3954 C /T и IL-1RN VNTR в качестве факторов риска хозяина для рака желудка, но не удалось продемонстрировать связь между полиморфизмов изучали и желудка, предрасположенность к раку. Восприимчивость к раку желудка у больных с провоспалительных генетическим профилем является увлекательным гипотеза, которая была в основном подтверждены в исследованиях из Польши [26], Португалия [27, 28], и Америке [29]. В противоположность этому, другие исследования, проведенные в Азии не удалось подтвердить этот вывод [20, 30, 31]. Несмотря на то, что нет четкого объяснения этих противоречивых результатов, различные генетические фоне западных и азиатских народов может стать важным фактором. Кроме того, рак желудка является многофакторным заболеванием. Отмеченный географическая изменчивость, тенденции времени, а также миграционный эффект на желудочную заболеваемости раком предполагают, что экологические или факторы образа жизни являются основными факторами, способствующими этиологии этого заболевания. Таким образом, необходимо проводить исследования случай-контроль крупномасштабные учитывающие факторы образа жизни, такие как диета и привычки пить перед окончательным утверждением о роли IL-1B полиморфизма генов при раке желудка может быть сделано. Тем не менее, наше настоящее исследование от этого китайского населения свидетельствует о том, что никакой связи не было замечено между изученных полиморфизмов и рака желудка, и, следовательно, нет доказательств того, что эти локусы способствуют расширенному желудка восприимчивости рака.
Хотя точный механизм кахексии неясна это самоочевидно, что воспалительный процесс является чрезвычайно сильным в весе потери больных раком [32]. В данном исследовании мы исследовали частоты цитокин полиморфизм у пациентов с местно-распространенным желудка. Тем не менее, распределение цитокин полиморфизмом внутри пациентов варьировал с IL-1B + 3954 аллеля Т были обнаружены значительно чаще у больных кахексии, чем у не-кахексии пациентов (P &
л; 0,05). Логистической регрессии с поправкой на фактический вес, расположение рака и стадии, IL-1β + 3954 CT генотип был связан с отношением шансов 2,512 (95% ДИ, 1.180 - 5.347) для кахексии. В пробирке исследования показали, что IL-1β + 3594 T на 5-м экзоне существенно влияет на выработку IL-1 [10]. Поэтому мы индуцируют, что ген под контролем высокую выработку IL-1, вероятно, играют определенную роль в возникновении кахексии у пациентов с распространенным раком желудка. Тем не менее, в исследованиях с относительно небольшим размером выборки, таких как настоящего исследования, внимание должно быть уделено оценке существенных факторов, предложенного статистического анализа, особенно когда они имеют относительно большие значения P (0.01 ≪ P
&лт; 0,05). Существует возможность того, что такие факторы показывают, ложно-положительный результат.
Есть несколько сильных сторон нашего исследования гена ассоциации. Во-первых, пациенты были набраны из двух центров; число пациентов, относительно большой по сравнению с исследованиями с меньшим размером выборки. Во-вторых, чтобы избежать артефактов в смеси населения, мы выбрали только китайский ханьцев в Китае, ограничивая тем самым возможность расслоения населения из-за этнической. В-третьих, мы исследовали четыре отдельных, но взаимосвязанных генов, что позволяет прямое сравнение результатов каждого гена полиморфизма ассоциации с исходом. Тем не менее, интерпретация результатов исследования ограничена, поскольку она может быть более ценным для измерения фактического уровня или для оценки выражения IL-1 в слизистой оболочке желудка в соответствии с полиморфизмом. Кроме того, мы не оценивали потери белка из предметов, так как такой фактор, было трудно выразить численно и оценивать объективно. Несомненным, дальнейшие исследования будут определить, является ли играть важную роль в патогенезе кахексии от поздних стадий рака желудка продукт изученных генов.
Заключение
В целом, настоящее исследование от этого китайского населения свидетельствует о том, что IL-1β аллель может способствовать возникновению кахексии, связанной с местно-распространенным раком желудка. Исследования с большими размерами выборки и множественными ОНП других важных цитокинов необходимы для дальнейшего выяснения генетических факторов, участвующих в этиологии кахексии от рака желудка.
Declarations
Благодарности
Этот вопрос был поддержан, в частности, путем гранты от Шаньдун природного фонда Y2006C20) и Циндао City Foundation (No.kzd05).
конкурирующие интересы
автор (ы) заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

• Фаза I исследования иматиниба, цисплатин и 5-фторурацил или капецитабин в продвинутом пищевода и аденокарцино…
• Привратника сохранение петли дуодено-энтеростомия с втулкой гастрэктомии - предварительное results