Szövetség az IL-1 béta-gén polimorfizmus cachexia származó lokálisan előrehaladott gyomorrák

Szövetség az IL-1 béta-gén polimorfizmus cachexia származó lokálisan előrehaladott gyomorrák katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa IL-1 béta óta játszik a gyulladásos epizód. Tekintettel a gyulladásos jellegű rák cachexia, meghatároztuk a prediktív értéket az IL-1B-31 T /C, -511 C /T, 3954 C /T és az IL-1RN VNTR gén polimorfizmusok előfordulása cachexia társított lokálisan előrehaladott gyomorrákban. katalógusa módszerek katalógusa A vizsgálatban 214 beteg és 230 egészséges önkéntes. Genomi DNS-t preparáltunk a perifériás vér leukociták. Genotípusok és allél frekvenciák meghatároztuk a betegekben és egészséges kontrollokban felhasználásával restrikciós fragmens hossz polimorfizmus elemzés polimeráz láncreakció termékeket.
Eredmények
általános frekvenciákat az IL-1B-31 T, -511 T, 3954 T és IL -1RN VNTR allélek kezelt, lokálisan előrehaladott gyomorrák voltak összehasonlíthatók az a kontrollokban. Nem volt szignifikáns különbség a forgalmazási IL-1B-31 T, -511 T és az IL-1RN VNTR betegek között cachexia nélkül. Betegek cachexia szignifikánsan nagyobb prevalenciája IL-1B + 3954 T allél, mint azok nélkül (p
= 0,018). A logisztikus regressziós analízis korrigált tényleges súlya, carcinoma helyen és helyzetben, az IL-1B + 3954 CT genotípusú járt az esélyhányados 2,512 (95% CI, 1,180-5,347) a cachexia. Katalógusa Következtetés katalógusa az IL-1B + 3954 T allél nagyobb veszélyt cachexia helyben gyomorrák. Genetikai tényezők vizsgálták nem valószínű, hogy fontos szerepet játszik a meghatározása fogékonyság lokálisan előrehaladott gyomorrákban. Katalógusa Háttér katalógusa rák cachexia egy olyan szindróma jellemzte fogyás, étvágytalanság, gyengeség és vérszegénység, számviteli at legalább 20% -a halálesetek daganatos betegeknél [1]. Ellentétben az éhezés, amely kimeríti a zsírraktárak alkotnak zsírszövet megőrizve fehérjét a pazarlás vázizom, a cachexia sem kövér, sem fehérje kíméli. Progresszív fogyás közös jellemzője a rák, és felelős nem csak a rossz életminőséget és gyenge választ kemoterápia, hanem rövid túlélési idő, függetlenül a daganat tömege vagy jelenléte áttétek, és ez is akadályozza a rák terápia [2 ]. Bár a mechanizmus a rák cachexia nagyrészt megoldatlan, több kulcsfontosságú mediátor azonosítottak. Az egyik sorozat gyulladásos citokinek [3], beleértve a TNF-α, IL-1β, IL-6 és IFN-γ [4, 5]. Az emberben, egyre több bizonyíték van, hogy a gazdaszervezet citokin válasz genetikailag meghatározott. Polimorf gén szekvenciák bizonyos citokinek lehetnek potenciális markerek érzékenység és a klinikai kimenetel különböző humán fertőző betegségek. Ahhoz azonban, hogy a legjobb tudásunk, nem tanulmány foglalkozott a korreláció a citokin polimorfizmusok az IL-1β gén a valószínűsége a cachexia a helyileg előrehaladott gyomorrák.
IL-1β egy erős gyulladáskeltő citokin makrofágok által kibocsájtott szisztémás gyulladásos válaszokat. Ez nem csak fontos biológiai hatással, hanem szabályozza a gyulladásos reakciót és az immunválasz elősegítése révén egyéb citokinek kifejezések, mint az IL-6 és az IL-12. Tanulmányok dokumentált konstitutív IL-1β protein termelés emberi és állati rákos sejtvonalak, beleértve a szarkómák és a petefészek és átmeneti sejtes karcinóma. Szolid tumorok, amelyek az IL-1β kimutatták, hogy akár szabályozott közé tartoznak az emlő, vastagbél, tüdő, fej és nyak rák, és melanómák, és a betegek IL-1β termelő tumorok általában rossz prognózis. Azt is leírták, hogy ez a citokin volt az a tényező felelős a fokozott protein lebomlás patkányokban, és ismételt adagolása az IL-1 patkányoknak indukált anorexia és a fogyás [6]. In vivo, a potenciálisan káros gyulladáskeltő hatásai az IL-1β ellensúlyozza az intézkedés a interleukin-1 receptor antagonista (IL-1RN) [7]. Számos bizonyíték azt jelzi, hogy a biológiai funkció a szekretált IL-1RN az, hogy kompetitív módon gátolják a kötődést a keringő IL-1β a sejtfelszíni receptorok [8, 9], és az IL-1RN szintek növelése későn során a gyulladásos esemény megszüntetésére akut gyulladás [7].
a termelt IL-1β és IL-1RN vannak függött több tényező, egyre több bizonyíték van, hogy a genetikai tényezők fontos szerepet játszik. Az IL-1B és az IL-1RN gén kromoszómán található 2q14, belül egy 360 kb-régióban. A IL1B gén két diallélikus polimorfizmust pozíciókban -511, -31 promoter régiót és pozíciójában + 3954 az ötödik exonjában. Az IL-1RN gén rendelkezik egy penta-allél polimorf helyén intron-2 tartalmú változó számban egy 86 bp méretű tandem ismétlődő szekvencia. Az elmúlt években, az in vitro és in vivo vizsgálatok azt mutatták, hogy az IL-1B -511 T és 3954 T allélek fokozza az IL-1β és IL-1RN produkciók és a keringő szintjei a két citokin emberekben [10, 11]. Leírták, hogy a gyulladáskeltő genotípusok az interleukin-1-lókuszokat társított jelentősen megnövekedett kockázatát krónikus hypochlorhydric válasz a H. pylori fertőzés és a gyomorrák egy kaukázusi populációban, feltehetően azáltal, hogy megváltoztatja az IL-1β szintek a gyomorban [12 13], de befolyásolja az IL-1β gén polimorfizmusok érzékenységi cachexia származó gyomorrák még nem értékelték. Tekintettel a szerepek az IL-1β játszott cachexia, azt feltételezték, hogy a polimorfizmus lehet néhány egyesület a rák kialakulásában cachexia.
Az okok cachexia úgy gondolják, hogy multifaktoriális, de elsősorban az amerikai hypercatabolism és étvágytalanság miatt keringő daganatos betegségekkel kapcsolatos anyagok és citokinek [14, 15]. Munka feltételezés jelentős gyulladásos hozzájárulás rák cachexia, feltételeztük, hogy az IL-1B-31 T /C, -511 C /T, 3954 C /T és az IL-1RN gén polimorfizmusok van némi kapcsolata a fejlesztési cachexia társított lokálisan előrehaladott gyomorrák. Azt is megállapítottuk, hogy a vizsgált gén polimorfizmus csatlakoztak a fogékonyság lokálisan előrehaladott gyomorrák. Katalógusa Módszerek katalógusa Study lakosság katalógusa A protokollt jóváhagyta a helyi etikai bizottság, és beleegyezését adta mind a beteg vagy közeli hozzátartozója. Minden egymást követő beteg lokálisan előrehaladott gyomorrák június 1-től 2004. június 1, 2006 prospektív tekinthető. Ahhoz, hogy jogosult a nyilvántartásba vétel, mind az alanyok kellett lennie a kínai Han Population. A kizárási kritériumok a következők voltak: (1) anorexia nervosa; (2) pylorus elzáródást (3) A súlyos gyomor-bélrendszeri betegségek, a krónikus veseelégtelenség, a cukorbetegség és a HIV; (4) a máj, hashártya, medencei és távoli áttét; (5) vérségi párzás. Közvetlenül azután, hogy a befogadási és mielőtt bármilyen sebészeti vagy orvosi eljárás indult, beteget vizsgáltunk jelenlétére anorexia, súlyvesztés, a dohányzás és az ivóvíz állapotát. Az ellenőrzések verbuválódtak kórház résztvevőket a két középpont nincs családja történetét gyomorrák. Úgy egyezett betegek kora, neme, anélkül, hogy a rosszindulatú betegségek és fertőző betegségek. Katalógusa információk a dohányzás és az ivóvíz státuszt kapott interjúban. Mi nem jutottak étrendi történetek, mint például a részleteket hús vagy hal fogyasztás. Mi határozza meg az "aktuális" olyan személyek, akik a jelenleg dohányzók, "ex", mint azok, akik szívtak a múltban, és "soha", mint azok, akik sosem dohányoztak bármikor az életük. Katalógusa Fogyás az eljárás során 6 hónapos százalékában kifejezve a szokásos súly és a betegek 2 csoportra osztottuk súlyossága szerint a fogyás: Nem-cachexia csoport, fogyás ≤ 10%; Kachexia csoport, > 10%. Katalógusa értékelése H. pylori katalógusa 14C-UBT vizsgálatot megismételtük kétszer beiratkozott betegek és a kontrollcsoport egyetlen csapat speciális személyzet. Egyik bevont alany valaha kezelték H. pylori felszámolására.
DNS-extrakció
A genomi DNS-t tisztítottunk 5 ml perifériás vérmintákból segítségével Wizard genomiális DNS tisztító készletet (Promega) alkalmazásával a gyártó instrukciói.
IL-1B + 3954 C /T
Ez a polimorfizmus alkalmazásával vizsgáltuk restrikciós fragmens hossz polimorfizmus elemzés polimeráz láncreakció termékeket a korábban vizsgált [16].
IL-1B-31 T /C
Forward , TCTTTTCCCCTTTCCTTTAACT; fordított, GAGAGACTCCCTTAGCACCTAGT [17] (Nanjing Bio Eng Co.). PCR körülmények: 10 perc 95 ° C-on; 40 ciklus 30 másodperc 72 ° C, 15 másodperc 95 ° C, 20 sec, 52 ° C (Bio-Rad, Japán). PCR-termékeket emésztjük restrikciós endonukleázos Alul (Promega), és láthatóvá tettük elektroforézissel egy 2,5% -os agaróz gélen megfestettük 0,1% etídium-bromid. Allélek kódolva a következő: C allél: 234 bp; T allél: 150 bp és 84 bp. Katalógusa IL-1B-511C /T
Forward, 5-TGGCATTGATCTGGTTCATC-3, fordított, 5-GTTTAGGAATCTTCCCACTT-3 [18] (Nanjing Bio Eng Co.). PCR körülmények: 95 ° C 1 perc; 30 ciklusban 95 ° C 30 másodperc, 55 ° C 30 másodperc, 72 ° C-on 30 mp; 70 ° C-on 7 perc (Bio-Rad, Japán). PCR-termékeket emésztjük restrikciós endonukleázos Aval (Promega), és láthatóvá tettük elektroforézissel egy 2,5% -os agaróz gélen megfestettük 0,1% etídium-bromid. Allélek kódolva a következők: T: 304 bp, C: 190 és 114 bp. Katalógusa IL-1RN VNTR
Forward, 5-CTCAGCAACACTCCTAT-3, fordított, 5-TCCTGGTCTGCAGGTAA-3 [19] (Nanjing Bio Eng Co.). PCR körülmények: 94 ° C 4 percig, 32 ciklus 94 ° C 1 perc, 50 ° C 1 perc, 72 ° C-on 1 perc; 72 ° C-on 10 perc (Bio-Rad, Japán). PCR-termékeket elektroforézissel analizáltuk egy 2% -os agaróz gélen etídium-bromiddal festett. Allél 1-5 (IL1RN * 1-IL1RN * 5) volt kimutatható szerint méretük képest 100 bp DNS létra: allél 1 (négy ismétlés) 410 bp; allél 2 (kettő ismétlés) 240 bp; allél 3 (öt ismétlés) 500 bp; allél 4 (három ismétléssel) 325 bp. Allél 5 (hat ismétlődés; 595 bp) nem volt megfigyelhető a vizsgált populáció. Katalógusa Statisztikai analízis katalógusa leíró adatainak folyamatos változók számoltak átlag ± SD és tesztelik a Student-féle t-próba katalógusa SPSS 11.0. A különbségek allél gyakorisága között csoportot vizsgáltunk statisztikai jelentőséggel chi-négyzet próbával vagy Fisher egzakt teszt, ha szükséges. Vizsgálatot végeztünk SAS 6.12, és a 2 farkú P katalógusa < 0,05 vitték jelölésére jelentősége. Katalógusa Eredmények katalógusa Hardy-Weinberg katalógusa Az egyes vizsgálati csoport a genotípus eloszlás összhangban voltak azokat előre a Hardy-Weinberg (1. táblázat és 2. táblázat).. 1. táblázat a Hardy-Weinberg elemzés daganatos betegeknél és ellenőrzések. katalógusa katalógusa katalógusa Rák (n = 214) Matton Szab. (N = 230) Matton katalógusa
Observed

Expected

Observed

Expected

IL-1β-31
CC
48
45.3
53
49.8
CT
101 katalógusa 95,1 katalógusa 108 katalógusa 114,4 katalógusa TT katalógusa 75 katalógusa 73,6 katalógusa 69 katalógusa 65,8 katalógusa P
0,980
0,835 katalógusa IL-1β-511 katalógusa CC katalógusa 55 katalógusa 50,1 katalógusa 56 katalógusa 49,3 katalógusa CT
97 katalógusa 106,8 katalógusa 101 katalógusa 114,4
TT
62 katalógusa 57,1 katalógusa 73 katalógusa 66,3 katalógusa P Matton 0,638 katalógusa 0,454 katalógusa IL-1β + 3594 katalógusa CC katalógusa 178 katalógusa 179,5 katalógusa 201 katalógusa 201,9 katalógusa CT
36 katalógusa 33 katalógusa 29 katalógusa 27,2 katalógusa TT katalógusa 0 katalógusa 1.5 katalógusa 0
0,9 katalógusa P
0,442 katalógusa 0,619 katalógusa IL-1RN VNTR
1/1 katalógusa 157 katalógusa 156,5 katalógusa 168 katalógusa 167 katalógusa 02/01 katalógusa 45 katalógusa 54 katalógusa 50 katalógusa 58,8 katalógusa 2/2 katalógusa 5 katalógusa 3.5 katalógusa 6 katalógusa 4.2 katalógusa 1/3 katalógusa 5 katalógusa 0 katalógusa 4 katalógusa 0 katalógusa 1/4 katalógusa 2

• I. fázisú imatinib, ciszplatin és 5-fluoruracil vagy kapecitabin előrehaladott nyelőcsőrák és gyomor adenokarcinóma
• Pylorus megőrzése loop duodeno-enterostomy hüvely gastrectomián - előzetes results