Oplosbaar Fas zou kunnen dienen als een diagnostisch hulpmiddel voor maagdarmkanker

Oplosbaar Fas zou kunnen dienen als een diagnostisch hulpmiddel voor adenocarcinoom
Abstracte achtergrond
Fas (Apo-1 /CD95) en de specifieke ligand (FasL) zijn belangrijke elementen in apoptose. Ze werden onderzocht bij verschillende maligniteiten, maar er zijn weinig gepubliceerde studies over de oplosbare vormen van deze merkers (i.e. SFAS /sFasL) bij maagkanker. We hebben het serum niveaus van SFAS /sFasL in adenocarcinoom van de maag patiënten en gevallen met een pre-neoplastische laesies als potentiële markers voor vroege diagnostiek vergeleken en onderzocht de relatie met klinisch-pathologische kenmerken.
Methods
Negenenvijftig nieuw gediagnosticeerde gevallen van maagdarmkanker die gastrectomie hadden ondergaan, samen met 62 endoscopically- en histologisch bevestigde non-kanker personen werden geïncludeerd in deze studie. SFAS /sFasL serumniveaus werden gedetecteerd door Enzyme Linked Assay Immunosurbent.
Resultaten
gemiddelde serum SFAS niveau was bij maagkanker patiënten significant hoger dan in de controlegroep (305,97 ± 63,71 (pg /ml) vs. 92,98 ± 4,95 ( pg /ml), P < 0,001); terwijl het gemiddelde serum niveau van sFasL was lager bij patiënten met adenocarcinoom van de maag (0,138 ± 0,04 (pg /ml) versus 0,150 ± 0,02 (pg /ml), P < 0,001). Gemiddelde serumspiegels van SFAS /sFasL significant verschillend in beide intestinale /diffuse en cardiale /niet-cardiale subtypes in vergelijking met de controlegroep (P < 0,001). Er was een toename van de serumspiegel van SFAS van de eerste stappen van pre-neoplastische laesies gastrisch adenocarcinoom (P < 0,001). Patiënten die geen betrokkenheid van de lymfeklieren hadden (N
0
) toonde significant hogere serum niveaus van SFAS in vergelijking met anderen (P = 0,044).
Conclusies
Productie van SFAS kan een kritische spelen rol in de carcinogenese van intestinale-type maagkanker. SFAS serum niveau kan dienen als een niet-invasieve instrument voor de vroege diagnose van maagkanker. achtergrond
Maagkanker is de tweede belangrijke oorzaak van kanker-gerelateerde sterfte wereldwijd met een grote geografische variatie [1]. In Iran, is de tweede meest voorkomende kanker bij mannen en de vierde bij vrouwen. Er wordt geschat dat maagkanker is de meest voorkomende oorzaak van kanker-gerelateerde mortaliteit in de Iraanse bevolking [2].
Hoewel maagkanker heeft een slechte prognose met een vijf-jaars overlevingskans van 25% in de Verenigde Staten [3 ], is er geen standaard biomarker voor vroege diagnose en geen consensus over screening programma's. Tot op heden zijn enkele richtlijnen zijn voor vroegtijdige diagnose [1] en nieuwe moleculaire merkers en therapeutische strategieën voorgesteld moeten effectieve diagnostische en therapeutische protocollen te ontwerpen.
Ontsporing van apoptose speelt een belangrijke rol in de ontwikkeling, groei en weerstand van kwaadaardige tumoren, en beïnvloedt ook de prognose [4]. Als lid van de TNF-familie receptoren Fas (Apo-1 /CD95) is een celoppervlak eiwit dat apoptose kan induceren door de cytosolische staart na binding aan de specifieke ligand, Fas Ligand [5]. Fas en Fas Ligand (FasL) zijn cruciaal in het immuunsysteem van homeostase [6, 7]. FasL is ook een belangrijk wapen voor cytolytische T-cellen om apoptose in tumorcellen te induceren [4]. Bijgevolg kan een afname van Fas expressie in de membraan van tumorcellen beschermen tegen de dodelijke invloed van FasL. FasL detectie op het celoppervlak van een aantal tumorcellen voorgesteld de hypothese dat deze cellen immune aanval kan ontsnappen door inductie van apoptose in tumor-infiltrerende lymfocyten [8, 9]. Het Fas
gen produceert twee eiwit isovormen via alternatieve mRNA splicing: de volledige lengte Fas die een transmembraan domein bevat, en de oplosbare vorm van Fas (SFAS), die dit domein mist. Oplosbaar Fas fungeert als decoy in de extracellulaire omgeving en bindt FasL [10, 11]. Daarom is er een immune privilege tumorcellen door afscheiding van SFAS als inhibitor van apoptose.
Fas /FasL systeem is onderzocht in een grote verscheidenheid aan neoplasmata [12-15]. Er zijn echter weinig studies gerapporteerd over maagkanker tot nu toe. Er werd vastgesteld dat maagcarcinomen expressie FasL op een hoger niveau, terwijl lagere Fas expressie leidt tot het doden effecten van gastheerimmuunsysteem [16-18] omzeilen. Er zijn een aantal tegenstrijdige berichten over de correlaties van Fas /FasL meningsuiting - bestudeerd door immunohistochemie (IHC) methode - en de grootte van de tumor, diepte van invasie, metastase, differentiatie en classificatie van maag tumoren [18, 19] Lauren's. Er zijn maar weinig studies gepubliceerd over het serum niveau van SFAS /sFasL bij maagkanker, met afwijkingen in hun resultaten [20-23].
Deze studie werd uitgevoerd om het serum niveau van SFAS /sFasL in adenocarcinoom van de maag en niet beoordelen tumorale laesies, om hun mogelijke rol in de vroege diagnose en hun correlaties met klinisch-pathologische kenmerken van deze maligniteit te vinden.
Methods
Sample collectie
studie omvatte negenenvijftig patiënten met nieuw gediagnosticeerde, histologisch-bevestigd adenocarcinoom van de maag, die werden opgenomen op de afdeling chirurgie in Omid Oncologie Ziekenhuis, Mashhad, Iran; tussen februari 2006 en juni 2008. Patiënten met inoperabele tumoren, geschiedenis van eerdere chemotherapie, radiotherapie, of maag-operatie werden uitgesloten. Tweeënzestig individuen werden ingeschreven in de controlegroep. Ze hadden alle ondergaan esophagogastrodeodenoscopy als gevolg van gastro-intestinale klachten in de endoscopie unit, Imam Reza University Hospital, Mashhad, Iran; en bleken geen endoscopische en histologische tekenen van maag tumor te hebben. Ondernemingen De studie protocol werd goedgekeurd door de ethische commissie onderzoek in Mashhad University of Medical Sciences. Een schriftelijke geïnformeerde toestemming werd verkregen van elk individu. Demografische kenmerken (bijvoorbeeld etniciteit, leeftijd en geslacht) en klinische gegevens, waaronder symptomen, medicatie, en potentiële risicofactoren werden verkregen via een vragenlijst ingevuld door getraind personeel. Deze risicofactoren onder geschiedenis van tabaksgebruik en familiegeschiedenis van maagkanker
Volgens bijgewerkt Sydney System [24], vijf biopsieën werden verkregen van elk individu in de controlegroep voor histologisch onderzoek. Twee van de antrum, twee van de corpus, en één van de incisura angularis. Andere antrale biopsie verkregen voor de detectie van H. pylori
via handel verkrijgbare snelle ureasetest (Chemenzyme Co., Iran). Biopsie monsters werden gefixeerd in 10% gebufferde formaline. Na routine weefselverwerking, werden ze onderzocht op de aanwezigheid van pathologische vijf variabelen, zoals dichtheid van H. pylori
, intensiteit van neutrofiele en mononucleaire ontsteking, atrofie, intestinale metaplasie en dysplasie. We verdeelden de controle groep in drie subgroepen aan de pathologische patroon: milde gastritis zonder H. pylori
infectie (genoemd als vrijwel normale slijmvlies), chronische gastritis met een H. pylori
infectie (chronische actieve gastritis), en precancereuze letsels (met inbegrip van chronische atrofische gastritis, atrofie, intestinale metaplasie en dysplasie). Giemsa kleuring is in verdachte gevallen betere evaluatie van H. pylori
toegepast.
In de kanker-groep, werd de histologische diagnose op basis van morfologisch onderzoek van de monsters die routinematig verwerkt en gekleurd met hematoxyline en eosine methode. Volgens de criteria van Laurens, werden tumoren geclassificeerd intestinale als diffuse type. Tumor rang en chirurgische stadium werden ook bepaald.
Enzyme Linked Immunosurbent Assay (ELISA)
Een 3-ml monster van veneuze bloed werd verzameld van elke deelnemer voor endoscopie of een dag voor de operatie, in de controle en kanker groepen, respectievelijk. Onmiddellijk na bloedafname, werd serum verkregen door centrifugeren bij 2000 omw /min gedurende 15 min bij 4 ° C en bewaard bij -20 ° C tot verdere analyse. De titers van H. pylori
IgG-antilichaam werden gemeten via commerciële ELISA (Padtan Elm Co, Ltd Iran), volgens de instructies van de fabrikant. Serum niveaus van SFAS en sFasL werden beoordeeld met behulp van menselijke ELISA-kits (Bender MedSystems, GmbH, Wenen, Oostenrijk) volgens de instructies van de fabrikant.
Statistische analyse
Chi-kwadraat test met 95% betrouwbaarheidsinterval werd uitgevoerd voor het vergelijken van de variabelen. Als serum niveaus van SFAS en sFasL een normale verdeling niet over, we gebruikten Kruskal-Wallis en Mann-Whitney U test om de gemiddelde serumspiegels van SFAS en sFasL te vergelijken in verschillende groepen. Gegevens zijn getoond als gemiddelde ± SEM (standaardfout van het gemiddelde) in figuren en tabellen. . De statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van SPSS 16.0 statistisch pakket (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA)
Resultaten
Veertig-vier van de 59 patiënten met adenocarcinoom van de maag waren man (M /F ratio: 2.93) . De mediane leeftijd was 62 jaar (variërend 39-79, gemiddelde: 60,25 ± 10). Van 62 personen in de niet-tumorale groep, 32 waren mannen en 30 waren vrouwen met een mediane leeftijd van 47 jaar (van 20 tot 77 betekenen: 47,32 ± 16). Slechte economische status, lagere niveau van het onderwijs en de consumptie van tabak waren significant vaker voor bij kanker groep (p < 0,05). De meeste van onze patiënten werden gediagnosticeerd als intestinale soort maagkanker (45/59), waarvan 10, 15 en 5 waren goed, matig en slecht gedifferentieerde carcinomen, respectievelijk, en in 5 gevallen, de rang van differentiatie onbekend was. Onder 62 niet-kanker 11 individuen werden gecategoriseerd als vrijwel normale mucosa, 35 chronische actieve gastritis en 16 gevallen werden precancereuze lesies gezien in de maag. Gebaseerd op laboratoriumtests, 73,6% van de kankerpatiënten een positieve voorgeschiedenis van H. pylori
infectie, terwijl in de controlegroep de positieve voorgeschiedenis werd gevonden in 82,3%.
Gemiddelde serumniveaus van SFAS /sFasL gebaseerd op beschrijvende kenmerken van de niet-tumorale en tumorale groepen worden samengevat in tabel 1 en tabel 2. Er was een positieve correlatie tussen het roken van tabak en de gemiddelde serumconcentratie van SFAS maar niet sFasL, onder niet-tumorale groep (P = 0,041). Echter, in de tumorale groep, werd geen verband waargenomen tussen roken en de gemiddelde serum niveau van SFAS /sFasL (P = 0,06 voor SFAS). Er was geen significant verschil in serum niveaus van SFAS /sFasL tussen gevallen met en zonder geschiedenis van H. pylori infectie
in beide tumorale of niet-tumorale groups.Table 1 serumspiegels van SFAS /sFasL basis van beschrijvende kenmerken van niet- tumorale groep

Non-tumor Group

SFAS ( pg /ml)
sFasL (pg /ml)

N *
Mean ± SE.M †

P Waarde
N *
Mean ± SE.M †
P Waarde
Geslacht
Man

30
103,21 ± 7,54
0,023
32
0.13 ± 0.02
0.09
Female
29
82,40 ± 5,88
30
0.17 ± 0.03
economische status \\
Poor
15
85.21 ± 11.66
0.82
16
0.10 ± 0.03
0,17
matig tot goed
43
95,07 ± 5,45
45
0.16 ± 0.02
Educatieve Status
Onder middelbare school diploma
41
97,94 ± 6,44
0.25
43
0.16 ± 0.03
0,91
middelbare school diploma & boven
16
81.42 ± 6.91
17
0.13 ± 0.02
Tobacco verbruik
Negatief
51
88,83 ± 5,03
0,041
53
0.16 ± 0.02
0,11
Positieve
8
119,46 ± 15.27
9
0.11 ± 0.01
Opium verslaving
Negative
46
86,81 ± 5,20
0,015
47
0.16 ± 0.02
0.52
Positieve
13
114,82 ± 11.31
15
0.12 ± 0.02
Geschiedenis van H. pylori-infectie ‡
Negatief
49
76,17 ± 9,76
0.12
51
0,14 ± 0,04
0.27
Positieve
10

• Gefosforyleerd Smad2 in vergevorderd stadium Gastric Carcinoma
• Hyperfibrinogenemia wordt geassocieerd met lymfatische alsmede hematogene metastase en slechtere klinische uitkomst in T2 maag cancer