Präsenz vun S100A9-positiv demagogesch Zellen zu Kriibs Stoffer deemolegt Weltbild mat engem fréie Etapp Kriibs an eng besser hätt an Patienten mat gastric Kriibs

Präsenz vun S100A9-positiv demagogesch Zellen zu Kriibs Stoffer deemolegt Weltbild mat engem fréie Etapp Kriibs an eng besser hätt an Patienten mat gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung S100A9 war ursprénglech als e Faktor vun demagogesch Zellen secreted entdeckt. Viru Kuerzem, huet S100A9 fonnt mat verschidden Mënsch malignancies verbonne ginn. Den Zweck vun dëser Etude ass S100A9 Ausdrock vun gastric Kriibs a seng Roll an Kriibs Werdegang. VerfÜgung Method VerfÜgung S100A9 Ausdrock vun gastric Otemschwieregkeeten Echantillon vun 177 gastric Kriibs Patienten vun immunohistochemistry évaluéieren war ze ermëttelen. Den Ausdrock vun hirem dimerization Partner S100A8 an der S100A8 /A9 heterodimer waren och déi selwecht Method évaluéieren. Den Effet vun exogenous S100A9 op motility vun gastric Kriibs Zellen AGS an BGC-823 war dann propagéieren. VerfÜgung Resultater VerfÜgung S100A9 speziell vun demagogesch Zellen wéi macrophages an neutrophils zu Mënsch gastric Kriibs an gastritis Stoffer ausgedréckt huet. Statistesch Analyse gewisen, datt eng héich S100A9 Zell zielen (> = 200) pro 200x Vergréisserung microscopic Terrain zu Kriibs Stoffer war predictive vun fréi Etapp gastric Kriibs. Héich S100A9-positiv Zell Grof war negatif mat lymph Node Metastasen (P VerfÜgung = 0.009) an entholl Invasioun (P VerfÜgung = 0.011) soll. S100A9 war den onofhängege prognostic Estimatioun vun globale Iwwerliewe vu Patienten mat gastric Kriibs (P VerfÜgung = 0.04) identifizéiert. Patienten mat héije S100A9 Zell zielen sech mat ordentleche hätt (P VerfÜgung = 0.021). Weider Enquête fonnt dass S100A8 Verdeelung vun de Mënscherechter gastric Kriibs Stoffer war ähnlech ze S100A9. Allerdéngs huet d'Zuel vun S100A8-positiv Zellen net positiv mat Patient Iwwerliewe vergläichen. D'demagogesch Zellen Kriibs infiltrating sech S100A8 /A9 negativ, iwwerdeems déi an gastritis positiv waren. Ausserdeem, exogenous S100A9 FAQ inhibited Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Eis Resultater ugeholl S100A9-positiv demagogesch Zellen zu gastric Kriibs Stoffer mat fréi Etapp vun gastric Kriibs a gutt hätt verbonne sinn. VerfÜgung Schlësselwieder
Gastric Kriibs S100A9 entholl entgoe Zellen traureg Background VerfÜgung Gastric Kriibs haut ass ee vun deene bedeitendste Ursaachen vun Kriibs veruerteelt weltwäit. A Ganzen 989.600 nei Mo. Kriibs Fäll an 738.000 Doudesfäll goufen ugeholl an 2008 geschitt ze hunn, an iwwer 70% vun neie Fäll an Doudesfäll geschéien an Entwécklungslänner wéi China [1]. Gastric Kriibs ass um Bal Etappen allgemeng festgestallt, wann prognostic Resultater aarm sinn. Bal 70-80% vun de Patienten hunn Abannung vun de regionale lymph Wirbelen wat e staarken Afloss op Iwwerliewe huet [2, 3]. Dofir, Entdeckung vun neie biomarkers zu fréi ze erkennen an korrekt Cepheid vun entholl gelooss ermontert hätt Patient Iwwerliewe verbesseren [4-6]. VerfÜgung Memberen vun der S100 Famill vu Proteinen als biomarkers zu Multiple Zorte vun erhéijen zouginn [7]. D'S100 Familljemember S100A9 ass eng 13kd FAQ datt conserved strukturell motifs enthält aus zwee EF-Hand Ca 2 + -binding Beräicher. No Kalzium bindend, openee S100A9 mat aneren S100 Familljemember S100A8 der funktionell heterodimer genannt calprotectin zu Form [8, 9]. S100A9 war ursprénglech als e Faktor secreted vun demagogesch Zellen wéi neutrophils an macrophages zu rheumatoid Giicht, demagogesch bowel Krankheet identifizéiert, an anere demagogesch Krankheeten [10-14]. S100A9, S100A8, souwéi d'S100A8 /A9 heterodimer calprotectin, si während inflammation-entschlof carcinogenesis overexpressed [15]. S100A9 Ausdrock ass weider-reglementéiert entholl Zellen zu haett [16], Aarbecht [17], an Broscht Kriibs [18, 19], iwwerdeems et e Minus-reglementéiert Mënsch esophageal Kriibs Zellen [20]. An colorectal Kriibs Otemschwieregkeeten uplanzen, awer, war d'S100A9 FAQ net zu Kriibs Zellen fonnt, mä éischter an demagogesch Zellen uechter d'entholl stroma Fragmenter [21]. Ausserdeem war S100A9 bedeitend méi héich Hocker Echantillon vun colorectal Kriibs Patiente wéi an Kontrollen [22]. An gastric Kriibs, Gentherapie Ausdrock an proteomic Analyse bewisen héich Ausdrock vun S100A9 am Otemschwieregkeeten. [23, 24]. hir Verdeelung bannent de Otemschwieregkeeten an Associatioun mat clinicopathological Fonctiounen huet awer net voll bewisen. An dëser Etude VerfÜgung, déi mir Gentherapie Ausdrock Analyse S100A9 Ausdrock vun gastric Kriibs Stoffer an an der bascht, drëms normal Stoffer ze vergläichen. Immunohistochemical staining S100A9 zu entholl-verbonne demagogesch Zellen verroden. Ausserdeem, sot mir déi Korrelatioun tëschent der Zuel vun S100A9-positiv Zellen zu entholl Stoffer an der clinicopathological Fonctiounen. Mir sot och d'Co-Lokalisatioun vun S100A9 an S100A8 wéi och d'Lokalisatioun vun der dimer calprotectin vun immunofluorescence. Endlech, Asiicht an d'Funktioun vun S100A9 zu Kriibs Zellen ze gewannen, mir den Effet vun der recombinant S100A9 FAQ op Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen AGS an BGC-823 propagéieren. VerfÜgung Method VerfÜgung kennen an Otemschwieregkeeten uplanzen
war no Akraafttriede vun Ethik Comité vun Korea University Cancer Hospital gesuergt. Awëllegung war vun all Patient kritt. Honnert siwwenzeg-sechs Patienten mat gastric Kriibs studéiert. 124 Männercher an 53 Weibercher (mengen Alter, 57 Joer; Rei, 26-80 Joer) huet festgestallte an surgically zu Korea University Cancer Hospital tëscht 1998 an 2004 D'Déift vun entholl Invasioun, histological Schouljoer, lymph Node Metastasen, Liewer Metastasen behandelt, a wiere Invasioun sech aus de Medeziner an histopathological Rapporte kritt. Etapp vun gastric Kriibs war no der vun der American Gemeinsam Comité op Cancer recommandéiert 7. Editioun entholl-Node Metastasen (TNM) Klassifikatioun klassifizéiert. Keen vun de Patienten scho Chimiotherapie oder Bestrahlung preoperatively. All Patienten sech bis Januar 2010. No gastrectomy, een Deel vun resected specimen war zu 10% formalin fix a Filteren Zäitche fir agebousst Bilan, an anere war virgezunnen-gefruer an flëssege Stéckstoff gespäichert bei -80 ° C den RNS Extraktioun duerno weider. Zousätzlech, 30 reagéiert metastatic lymph Wirbelen sech och aus deene Patienten gesammelt. Zéng Fäll vun chronescher passéiert Stoffer mat exacerbation vun de Pompjeeën vun General befënnt gëtt décidéiert, d'laizistesch Spidol vun Qingdao University Medical College. VerfÜgung Immunohistochemistry (IHC) VerfÜgung Véier-gebraucht Sektiounen aus formalin-fix paraffin-Ënnerbewosstsinn Stoffer sech schéi op puer dovun-L-lysine-Beschichtete drënner an dann am xylene an rehydrated duerch Alkohol ze destilléiert Waasser deparaffinized. Endogenous peroxidase Aktivitéit war mat 3% Waasserstoff Hem fir 15 Minutte bei Raumtemperatur gespaart. No Drock Kachen der drënner an 10 mmol /L héich (pH 8.0) fir 3 Minutten huet den Sektiounen mat 5% Geess serum incubated, dann Anti-S100A9 antibody Nuecht op 4 ° C mat Maus incubated (1: 200, T1028, BMA Biomedicals, Schwäiz), oder Maus anti-S100A8 antibody (1: 200, T1031, BMA Biomedicals), oder Maus anti-S100A8 /A9 antibody (1: 200, T1023, BMA Biomedicals). Primärschoul antibodies huet mat enger zwee-Schrëtt Stellt System (Dako, Glostrup, Dänemark) fonnt. Horseradish peroxidase an diaminobenzedene hydrochloride (botzt) waren Aktivitéit an chromogen agestallt. Ausdrock vun S100A9, S100A8 an S100A8 /A9 huet och zu Cybrdi Otemschwieregkeeten microarray drënner (IC00-01-001, Cybrdi, Xian, China) mat chronescher gastritis mat metaplasia (57 Fäll) an gastric carcinoma Stoffer (23 Fäll) fonnt. Zéng Fäll vun chronescher passéiert uplanzen mat exacerbation sech als positiv Kontroll fir S100A8 /A9 zerwéiert. VerfÜgung Foussgänger IHC an präventive Definitioun VerfÜgung S100A9 an S100A8 waren an der demagogesch Zellen wéi macrophages an neutrophils infiltrating entholl Stoffer Kierchefënster. Positiv Zellen duerch eng Variabel Ofschloss vun cytoplasmic staining. Biller waren Qualifikatiounen benotzt Ariol Bild Analyse System (Obwuel Imaging, San Jose, CA, USA). De Scanner baséiert op eng Olympus BX61 microscope mat engem motoriséiert Etapp an autofocus Kënnen mat enger Kamera equipéiert. Drënner waren um 200 × Vergréisserung gescannt. Den Ofschloss vun monoclonal S100A9 oder S100A8 antibody ofbaubar zu all Otemschwieregkeeten Sektioun war vun Zielen d'Zuel vun Kierchefënster demagogesch Zellen zu dräi 200 × Vergréisserung Scopes évaluéieren. Dëse vun zwee onofhängegen pathologists mat der Hëllef vun engem automateschen microscope System an der Bildveraarbechtung Software gehaal huet (kuckt Weider Fichier 1: Dorënner S1). Präventive Wäert vun S100A9 Kierchefënster demagogesch Zellen fir d'Cepheid vum Patient agebousst Etapp gouf vun Receiver Fonctionnementskäschten charakteristesche (ROC) rop alles. VerfÜgung Laser confocal Scannen VerfÜgung de Co-Lokalisatioun vun S100A9 a seng dimerization Partner S100A8 ze ermëttelen, oder der heterodimer S100A8 /A9, déi Cybrdi Otemschwieregkeeten microarray drënner (IC00-01-001) 1,5 Stonnen anti-S100A9 antibody bei Raumtemperatur mat Maus (1: 200) incubated sech mat der Zenon Alexa Fluor 647 Mouse IgG Etikette Kit Pre-Label (Z-25008, rout fluorescence), an entweder d'Anti-S100A8 antibody (1: 200) oder anti-S100A8 /A9 antibody (1: 200) mat den Zenon Alexa Pre-Label Fluor 488 Mouse IgG Etikette Kit (Z-25002 , gréngen fluorescence). Confocal Biller waren mat der Leica TCS SP5 confocal microscope (Leica, Mannheim, Däitschland) chrétienne. . Ausserdeem, déi mat DAPI (Vecteure, Burlingame, CA, USA) counterstained Kären excitation bei 358 nm VerfÜgung uplanzen vun chronescher passéiert Stoffer mat exacerbation mat anti-S100A9 antibody incubated sech (1: 200, rout fluorescence Fortgeschratten), an Anti-S100A8 /A9 antibody. (1: 200, gréng fluorescence Fortgeschratten) als eng positiv Kontroll fir de spezifesche S100A8 /A9 heterodimer Ausdrock VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung Béid Zell Linnen an dëser Etude sech virdrun duerch microarray Analyse profiléiert a regelméisseg benotzt ierjend Analyse (kuerz zwee widderhuelen DNA fingerprinting) [25] ubelaangt. Gastric Kriibs Zell Linn AGS kritt aus ATCC (American Type Kultur Collection, Manassas, VA), an Zell Linn BGC-823 huet an China gegrënnt a vum Stammzellenfuerschung Institut, Shanghai, China kritt. Cancer Zellen sech als monolayer zu RPMI-1640 mëttelfristeg (GIBCO BRL, Karlsbad CA), deen mat 10% (v /v) An et Kallef serum (FCS, GIBCO) an Antibiotiken bei 37 ° C an enger humidified 5% Zäitche ugebaut CO 2 Atmosphär. VerfÜgung Zell Invasioun assay VerfÜgung CytoSelect 24-Majo Zell Missiounen Assay Kit war vun Zell Biolabs, USA kaf. S100A9 recombinant FAQ war vun BMA Biomedicals, Schwäiz kaf. Zell Invasioun assays sech mat Transwell Text gesuergt, déi Zellen duerch eng 8 μm pore Gréisst polycarbonate Membran un opgeholl erlaabt. Déi iewescht Fläch vum Neiegkeet Membran war mat enger eenheetlecher futti gedréchent Keller Membran Matrixentgasung Léisung bedeckt. Zellen am serum-gratis mëttelfristeg resuspended sech an der ieweschter ëmkomm vun all Transwell op eng Dicht vu 10 6 Zellen /ML (200μL /Chamber) plated. S100A9 war recombinant FAQ op 0 zu der ieweschter Chambre mëttelfristeg agefouert, 10, 20, 50, oder 100 Dummeldéng /ml. Ënnen ëmkomm war mat 500μL mëttelfristeg wouvun 10% FCS gefëllt. Zellen sech fir 48 h op 37 ° C bis opgeholl erlaabt. Zellen, datt an der ieweschter Chambre blouf sech mat engem Koteng Swab geläscht, an Zellen datt fir 15 Minutten zu Zell Stain Solution op der leschter Säit vun der Membran sech Kierchefënster wäit haten, a vun néng ausgewielt microscopic Felder (200 ×) pro gutt gezielt . All Neiegkeet war dann zu eidelen gutt transferéiert an 200μL vun Extraktioun Solution incubated. No 10 Minutten huet sech zu enger microtiter Plack 96-gutt transferéiert 100μL vun Léisung vun all Prouf an eng Schossel Lieser um OD560nm gemooss. VerfÜgung Zell Migratioun assay VerfÜgung Zell Mobilitéit war mat engem gudde Meter verkënnegt assay évaluéieren. Zellen sech duerch sechs-gutt Otemschwieregkeeten Kultur Platen rakommen an cultured bis Spuenien wär eng Zell monolayer ze kréien, déi dann steril 200 μl Pipette Tipps mat blesséiert gouf. All bewosst Protokoll war vun wäschen mat PBS geläscht. D'blesséiert monolayer Zell war dann zu mëttelfristeg mat 100 Dummeldéng /ml S100A9 recombinant FAQ incubated. Kontroll Zellen sech mat serum-gratis RPMI-1640 mëttelfristeg behandelt. Time-unzeginn Biller waren mat enger Faarf Phas-Kontrast microscope fir 0, 24, an 48 h op 200 × Vergréisserung ageholl. D'Zell Migratioun ëmmer war vun Berechnung vum duerchschnëttleche Zell Migratioun Distanz bewäert. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung Clinicopathologic Verännerlechen vum Medeziner a histopathological Rapporten ofgebaut goufen. ROC Kéieren waren an der Bestëmmung vum präventive Wäert vun der S100A9-positiv demagogesch Zell zielen an Evaluéieren agebousst TNM Etapp benotzt. D'Associatioun vun S100A9-positiv demagogesch Zell Grof mat verschiddene TNM Etappen war mat der Wilcoxon Geleeënheet-Zomm Test gemaach. Ze kréien Associatiounen tëscht S100A9 oder S100A8 Zell zielen an clinicopathologic Verännerlechen, war d'Daten Kräiz-tabulated an enger χ VerfÜgung 2 Test gemaach huet. Entwéckele Iwwerliewe war mat der Kaplan-Meier Method geschat, a Vergläicher tëschent Gruppe waren mat e Log-Platz Test gemaach. Allgemeng Survival war vum Datum vun initial Chirurgie ze Datum vum Doud gemooss, wa kee Fall dokumentéiert gouf Doud vun all Cause Enn Punkt, oder de leschten Datum vun Informatiounen, wéi d'Enn Punkt Zielen. A multivariate Analyse vun de Cox proportional Risikoe Réckgang Modell (hannen, stepwise) gouf ugeluecht den Afloss vun all Variabel op Iwwerliewe ze bewäerten. Bedeitung war um P VerfÜgung &dra setzen; 0,05. VerfÜgung Resultater VerfÜgung vun S100A9 Expression demagogesch Zellen zu gastric Kriibs a chronescher gastritis Stoffer zu infiltrating VerfÜgung An enger viregter Gentherapie vill Analyse, fonnt mir dass gastric Kriibs Stoffer aus bascht noncancerous mucosa déi charakteristesch Differenzen ënnerscheet sech vun hirem Gene Ausdrock Musteren [26]. D'Diversitéit vun der Gentherapie Ausdrock Musteren kënnen Variant am Ausriichtung Eegeschafte vun entholl an normalen Zellen souwéi Variant am bewosst Zesummesetzung vun dëse komplexe Stoffer spigelen. Bannend dësen Genen, war den Ausdrock vun S100A9 zu gastric Kriibs Stoffer méi héich wéi déi vun reagéiert bascht noncancerous mucosa (P VerfÜgung = 0,00241, Dorënner 1A). Figur 1 Expression vun S100A9 zu gastric Kriibs an bascht Net-kriibserreegend Stoffer. (A) Verschidde Ausdrock Wäert vun S100A9 zu 72 gastric Kriibs Stoffer a vläit keen-kriibserreegend Stoffer vun Donnéeën aus illumina Sentrix BeadChip cDNA microarray analyséiert. (B-E) Immunohistochemical staining vun S100A9 zu gastric Kriibs Stoffer (B) metastatic lymph Wirbelen (C), chronescher gastritis (D), a bascht Net-kriibserreegend gastric mucosa (E). S100A9 Lokalisatioun war den brong oder rout korséierte loci an der Zytoplasma vun infiltrating demagogesch Zellen, virun allem zu mononuclear phagocytes an neutrophil granulocytes verroden. (Vergréisserung 200 ×). VerfÜgung Immunohistochemistry vun uplanzen vu 177 Patienten gastric Kriibs zougedréckt datt S100A9 positiv war an all Primärschoul Kriibs Stoffer mat immunostaining zu demagogesch Zellen exklusiv wéi macrophages an neutrophils infiltrating Primärschoul entholl Stoffer (Déi aner Zell Zorte vun Otemschwieregkeeten Echantillon waren déi zwee onofhängeg pathologists identifizéiert) (Dorënner 1B). All iwwerpréift metastatic lymph Wirbelen (n = 30) huet sech och positiv fir S100A9 mat immunostaining exklusiv zu demagogesch Zellen wellkomm der metastatic Kriibs Stoffer (Dorënner 1c) Ëmfeld. An bascht Net-kriibserreegend mucosa, war S100A9 zu demagogesch Zellen ausgedréckt infiltrating gastritis. Gastric mucosa Équipe negativ oder ganz schwaach S100A9 Ausdrock (Dorënner 1D, E). VerfÜgung S100A9-positiv demagogesch Zell zielen zu Kriibs Stoffer ass mat Kriibs Etapp an Patient Iwwerliewe VerfÜgung verbonne Fir den Ëmfang vun S100A9 Ausdrock vun gastric cancer- diskutéieren assoziéiert Ëmwelt, war d'Zuel vun S100A9-positiv demagogesch Zellen an all entholl Otemschwieregkeeten vun averaging der Zell zielt vun dräi Felder (original Vergréisserung, 200 ×) an der Géigend, mat der gréisster Zuel vun positive Zellen um Site vun déifste entholl Invasioun gemooss. Korrelatioun tëschent Zell zielen an clinicopathological Parameteren an Patient Iwwerliewe war mat Wilcoxon Geleeënheet-Zomm Test an Kaplan-Meier Method analyséiert. Als zu Dorënner 2A, moderate Ofsenkung vun S100A9-positiv demagogesch Zell zielen zu Kriibs Stoffer mat der Erhéijung vun entholl agebousst Etapp vun I bis IV (Wilcoxon Geleeënheet Zomm Test fir 4 Etappen, P VerfÜgung = 0.0265) assoziéiert gouf gewisen. Figur 2 High S100A9 Zell zielen zu Kriibs Otemschwieregkeeten beweist bessert Resultat vun gastric Kriibs Patienten. (A) luucht Komplott vun S100A9-positiv demagogesch Zell zielen an all agebousst TNM Etapp. Déi blo Linn weist den Niveau vum 200. (B) ROC rop vun S100A9 Zell zielen fir d'Cepheid vun agebousst TNM Etapp. Pfeil uginn der cutoff Punkt iwwer 200. (C) Kaplan-Meier Analyse vun globale Iwwerliewe fir all agebousst TNM Etapp. (D) Kaplan-Meier Analyse vun globale Iwwerliewe fir héich S100A9 Zell zielen (≥ 200) Grupp an niddreg S100A9 Zell zielen (&Si besteet; 200) Grupp. (Nëmmen 176 Patienten goufen an der Analyse Coursë fir ee Patient ze Suivi verluer). VerfÜgung Da getest mir de Cepheid Muecht vun der S100A9 Zell zielen fir entholl Etapp vun gastric Kriibs. Baséierend op TNM Bühn, huet Patienten an zwou Gruppen ënnerdeelt, manner avancéiert Grupp (Etapp ech + II) an fortgeschratt Grupp (Etapp III + IV). Area ënner rop (AUC) aus der Receiver kritt Fonctionnementskäschten charakteristesche (ROC) Kéieren mat der S100A9-positiv demagogesch Zellen Grof war 0,623 fir agebousst TNM Etappen. D'cutoff Wäert war 198.5 (mir benotzt 200 vun den folgenden Analyse) pro 200 × Vergréisserung Terrain mat 64.3% Empfindlechkeet a 61,9% Spezifizitéit fir entholl Etapp Cepheid (Dorënner 2B). Cutoff Linn vu 200 kënnen benotzt gin der manner avancéiert Grupp vun de Bal Grupp ze trennen. Den Ënnerscheed war bedeitendst tëscht den zwou Gruppen (Wilcoxon Geleeënheet Zomm Test fir zwou Gruppen, P VerfÜgung = 0,017, Dorënner 2A). VerfÜgung Zanter Iwwerliewe Analyse zougedréckt a vill verschidde hätt fir gastric Kriibs Patienten zu verschiddene Kriibs Etappen (Dorënner 2C) mir der Relatioun tëscht S100A9-positiv demagogesch Zellen analyséiert zielen an Patient Iwwerliewe Tarif. Patienten goufen duerch cutoff Wäert an héich S100A9 Zell zielen (≥ 200) Grupp an niddreg S100A9 Zell Grof stratified (&Si besteet; 200) Grupp. 5-Joer Iwwerliewe Taux war 44,6% an héich Zell Grof Grupp mat 22,5% vun niddereg Zell Grof Grupp (P VerfÜgung = 0,021, Dorënner 2D). Paracetamol Iwwerliewe Zäit war 35,1 ± 10,8 Méint fir déi héich Zell Grof Grupp an 20.3 ± 3.0 Méint fir déi niddreg Zell Grof Grupp, bzw.. Geholl zesummen, kann S100A9-positiv demagogesch Zell zielen zu gastric Kriibs Otemschwieregkeeten wéi enger Estimatioun benotzt ginn ze fréi Etapp an fortgeschratt gastric Kriibs mat der cutoff vun 200 positive Zellen /HPF z'ënnerscheeden. Präsenz vun S100A9-positiv demagogesch Zellen zu Kriibs Stoffer deemolegt Weltbild mat e besser hätt an Patienten mat gastric Kriibs. VerfÜgung Low Zuel vun S100A9-positiv demagogesch Zellen zu Kriibs Stoffer deemolegt Weltbild positiv mat aarmséileg clinicopathological Fonctiounen VerfÜgung Low S100A9 Zell Grof fonnt huet soll mat entholl Invasioun Déift (T Etapp), lymph Node Metastasen (N Etapp), a Krankheete TNM Etapp (P VerfÜgung = 0,011, 0,009 an 0,002 bzw.) ze ginn. Korrelatioun tëschent S100A9 Zell zielen an aner Krankheete Funktiounen wéi Geschlecht, Alter, entholl Standuert, Liewer Metastasen (M Etapp), wiere Invasioun an dat waren net statistesch relevant (all P VerfÜgung > 0,05) (Table 1). Ausserdeem, bewisen multivariate Analyse N Etapp (P VerfÜgung = 0.006), Liewer Metastasen (P VerfÜgung = 0.000), an S100A9 Zell zielen (P VerfÜgung = 0.046) onofhängeg Faktore ze ginn a Punkto Iwwerliewe vun en (Table 2 ) .Table 1 Association vun S100A9-positiv demagogesch Zell Grof mat clinicopathological Parameteren zu Kriibs Stoffer zu gastric Kriibs Patienten VerfÜgung Variablen
Low S100A9 (positiv Zellen &Si besteet; 200)
High S100A9 ( positiv Zellen > = 200)
P VerfÜgung Wäert VerfÜgung Sex VerfÜgung 0,125 VerfÜgung Männlech VerfÜgung 74 zu 50 VerfÜgung Weiblech VerfÜgung 25 VerfÜgung
28 VerfÜgung Alter VerfÜgung 0,089 VerfÜgung &Si besteet; 50 zu 32 zu 18 VerfÜgung 50-59 VerfÜgung 24 zu 12 VerfÜgung 60-69 VerfÜgung 33
33 VerfÜgung > = 70 zu 10 zu 15 VerfÜgung entholl Standuert VerfÜgung 0,271 VerfÜgung Cardia 26
15 VerfÜgung Non-Cardia VerfÜgung 73 zu 63 VerfÜgung Déift vun entholl Invasioun ** VerfÜgung 0,011 VerfÜgung T1 VerfÜgung 3 VerfÜgung 2 VerfÜgung T2 VerfÜgung 7 VerfÜgung 19 VerfÜgung T3 VerfÜgung 69 zu 42 VerfÜgung T4
20 zu 15 VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung 0,009 VerfÜgung 13 VerfÜgung N0 VerfÜgung 23 VerfÜgung N1 VerfÜgung 32 zu 30 VerfÜgung N2 VerfÜgung 32
17 VerfÜgung N3 VerfÜgung 22 VerfÜgung 8 VerfÜgung Liewer Metastasen VerfÜgung 0,571 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 89 zu 68 VerfÜgung positiv VerfÜgung 10 zu 10 VerfÜgung TNM Etapp VerfÜgung 0,002 VerfÜgung І VerfÜgung 3 VerfÜgung 12 VerfÜgung II VerfÜgung 37 zu 35 VerfÜgung III VerfÜgung 50 zu 21 VerfÜgung IV VerfÜgung 9 VerfÜgung 10 VerfÜgung wiere Invasioun VerfÜgung 0,742 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 38 zu 31 VerfÜgung positiv VerfÜgung 58 zu 43 VerfÜgung net opgeholl * VerfÜgung 3 VerfÜgung 4 VerfÜgung dat ** VerfÜgung 0,472 VerfÜgung Ma VerfÜgung 2 VerfÜgung 4 VerfÜgung Mëttelméisseg + LINN VerfÜgung 82 zu 66 VerfÜgung Aner Zorte VerfÜgung 13 VerfÜgung 6 VerfÜgung net alles VerfÜgung 2 VerfÜgung 2 VerfÜgung * Daten onkomplett. VerfÜgung ** Fisher d'exakt Test. VerfÜgung Table 2 Multivariate Analyse vun prognostic Facteure fir globale Iwwerliewe vun gastric Kriibs Patienten VerfÜgung Variatiounen
P
RR
CI (95%)
Sex VerfÜgung 0,671 VerfÜgung 1,106 VerfÜgung 0.694-1.765
Männlech versus weiblech VerfÜgung Alter VerfÜgung 0,179 VerfÜgung 1,148 VerfÜgung 0.938-1.405 VerfÜgung &Si besteet; 50 VerfÜgung 50-59 VerfÜgung 60-69 VerfÜgung > = 70 VerfÜgung entholl Standuert VerfÜgung 0,545 VerfÜgung 0,864 VerfÜgung 0.538-1.387 VerfÜgung Cardia vs. VerfÜgung Non-Cardia VerfÜgung dat VerfÜgung 0,301 VerfÜgung 0,751 VerfÜgung 0.437- 1,292 VerfÜgung Ma mëttelméisseg versus + schlecht VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung 0,006 VerfÜgung 1,841 VerfÜgung 1.196-2.835 VerfÜgung N0 + N1 versus N2 + N3 VerfÜgung Déift vun entholl Invasioun VerfÜgung 0,1 VerfÜgung 1,756 VerfÜgung 0.897-3.435 VerfÜgung T1 + T2 versus T3 + T4 VerfÜgung Liewer Metastasen VerfÜgung 0 VerfÜgung 3,461 VerfÜgung 2.002-5.983 VerfÜgung Negativ versus positiv VerfÜgung wiere Invasioun VerfÜgung 0,107 VerfÜgung 1,452 VerfÜgung 0.922-2.285 VerfÜgung Negativ versus positiv VerfÜgung S100A9-positiv demagogesch Zell Grof VerfÜgung 0,046 VerfÜgung 0,643 VerfÜgung 0.417-0.991 VerfÜgung &Si besteet; 200 versus > = 200 VerfÜgung RR: famill Risiko; CI:. Vertrauen nolauschterer VerfÜgung Den Ausdrock Status vun S100A8 an der S100A8 /A9 heterodimer zu gastric Kriibs Stoffer an gastritis Stoffer VerfÜgung Kliniken gastritis enger chronescher gastric lesion ass, pathologically Zeeche vun Net-spezifesch chronescher inflammation vun der gastric mucosa. D'demagogesch Zellen zu chronescher gastritis sinn morphologically wéi déi alleréischt gastric Kriibs Stoffer infiltrating. An e puer Fäll, kann chronescher gastritis och zu Mo. Kriibs huet. Next, iwwerpréift mir weider den Ausdrock vun S100A8, engem noen vun S100A9 an der heterodimerization Form vun S100A8 /A9 souwuel gastric Kriibs Stoffer an bascht Net-entholl chronescher gastritis Stoffer an der gastric Kriibs uplanzen vun immunohistochemistry funktionéiert. Den Zerfall an d'Muster vun S100A9, war S100A8 ausgedréckt exklusiv zu demagogesch Zellen souwuel entholl Stoffer an bascht gastritis Stoffer infiltrating. . S100A8 war net zu all gastric Kriibs Zellen an normal gastric mucosa ausgedréckt VerfÜgung Next, laachen mer d'Zuel vun S100A8-positiv demagogesch Zellen an all Otemschwieregkeeten entholl ëmschriwwen virdrun fir S100A9 (Zousätzleche Fichier 1: Dorënner S1). oder Patient Iwwerliewe (Zousätzleche Fichier 3: Dorënner S2): verwonnerlech, huet S100A8 Zell Grof vun Stoffer gastric Kriibs net mat Meeschter clinicopathological Funktiounen (Table S1 Weider Fichier 2) vergläichen. Desweideren, Ausdrock vun der heterodimerization Form S100A8 /A9 net zu all demagogesch Zellen infiltrating gastric Kriibs Stoffer nogewise gouf, während e puer S100A8 /A9 positive Zellen an der chronescher gastritis Stoffer identifizéiert goufen (Donnéeën net gewisen). Dës Donnéeë uginn, datt d'Verdeelung vun S100A9, S100A8 an S100A8 /A9 kéint gastric Kriibs a chronescher gastritis Stoffer zu Mënsch ënnerschiddlech sinn. VerfÜgung dëser Hypothes Fir ze bestätegen, mir propagéieren weider der subcellular Lokalisatioun Muster vun S100A9, S100A8 an S100A8 /A9 heterodimer Ausdrock vun immunofluorecence staining zu engem Otemschwieregkeeten microarray dorënner 23 Fäll vun gastric Kriibs a 57 Fäll vun chronescher gastritis funktionéiert. An gastric Kriibs Stoffer, souwuel S100A9 an S100A8 Proteinen waren am entholl-infiltrating demagogesch Zellen (Dorënner 3A, B) fonnt, während kee S100A8 /A9 heterodimer war an all Fäll (Dorënner 3G) fonnt. Ausdrock vun S100A8 an S100A9 deelweis zu Zytoplasma vun Zellen (Dorënner 3D, E) overlapped. Zousätzlech, S100A9 an S100A8 Proteinen goufen demagogesch Zellen chronescher gastritis (Dorënner 3K, L) fonnt. Verdeelung vun dësen zwou Proteinen och deelweis overlapped (Dorënner 3N, O). Konsequent mat de Resultater vun immunohistochemistry, S100A8 /A9 war net zu all Zellen vun gastric Kriibs Stoffer (Dorënner 3G) ausgedréckt, iwwerdeems Ausdrock vun S100A8 /A9 deelweis mat der S100A9 zu demagogesch Zellen vun gastritis Stoffer (Dorënner 3Q, S, T) overlapped . Kardashian Ausdrock an Verdeelung vun S100A8 /A9 chronescher passéiert Stoffer mat exacerbation (déi positiv Kontroll) sech vill geféierlech déi chronescher gastritis Stoffer (Dorënner 3U, V, X, Y). Geholl zesummen, den Ënnerscheed Ausdrock an subcellular Lokalisatioun vun S100A9, S100A8 an S100A8 /A9 an verschidden Stoffer kënnen hir verschiddene Rollen an gastric Kriibs oder chronesch gastritis Ëmwelt implicate. Figur 3 Immunofluorescence Biller vun S100A9, S100A8 an S100A8 /A9 Proteinen an Otemschwieregkeeten microarray drënner gastric Kriibs Stoffer (A-J) a chronescher gastritis Stoffer (K-T), a chronescher passéiert Stoffer mat exacerbation (U-Y) mat. S100A9 an S100A8 sech duerch monoclonal antibody fonnt, prelabeled mat den Zenon Alexa Fluor Mouse IgG Etikette Kit (mat gréng a rout fluorescence bzw.). Ervirgaangen ass vun DAPI Kierchefënster. S100A8 /A9 heterodimers sech Magnéitfeld mat der dimer-spezifesch antibody 27E10 aus BMA Biomedicals mat grénge fluorescence prelabeled. De Co-Lokalisatioun vun S100A9 an S100A8 oder S100A8 /A9 war zu fusionéiert Biller (D, ech, N, S, X) an groussen fusionéiert Biller (E, J, O, T, Y) gewisen. White Pfeil an 3 T weist Co-Lokalisatioun vun S100A9 an S100A8 /A9 chronescher gastritis. Bar Längt, 50 μm. VerfÜgung D'inhibitory Effet vun der S100A9 recombinant FAQ op Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zell Linnen kënschtlech VerfÜgung D'S100A9 FAQ ass ausgedréckt an secreted vun demagogesch Zellen, am Déngscht als Vermëttler zu Fouss an chronescher inflammation. Zënter der S100A9-positiv demagogesch Zell Grof mat manner aggressiv clinicopathological Charakteristiken soll, getest mir weider den direkten inhibitory Funktioun vun recombinant S100A9 op der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen. Fir invasiv Fähegkeet vun gastric Kriibs Zellen diskutéieren, war transwell assays benotzt. Zwee gastric Kriibs Zell Linnen, AGS an BGC-823, goufen behandelt mat serum-gratis mëttel- oder mëttelfristeg mat verschiddene Konzentratioune vun S100A9 recombinant FAQ (10, 20, 50 an 100 Dummeldéng /ml, bzw.). Invasiv Zellen sech an néng ausgewielt microscopic Felder (200 ×) gezielt. Resultater weisen, datt S100A9 recombinant FAQ gehumpelt AGS Zell Invasioun (Dorënner 4A) inhibited, iwwerdeems S100A9 vill BGC-823 Invasioun zu enger Konzentratioun-ofhängeg Manéier inhibited (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, Dorënner 4C). Fir d'opgeholl Fähegkeet vun gastric Kriibs Zellen analyséieren, standing mir d'Wonn verkënnegt assay. Béid Zell Linnen goufen behandelt mat serum-gratis mëttel- oder mëttelfristeg wouvun 100 Dummeldéng /ml S100A9 recombinant FAQ. Resultater weisen, datt S100A9 gehumpelt inhibited AGS Zell Migratioun (Dorënner 4B), während Zell Migratioun Distanzen vu BGC-823 mat S100A9 no 24 h behandelt Zellen an 48 h vu incubation wéi déi vun Kontroll wesentlech méi niddreg waren (P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, Figur 4D). Figur 4 Effekt vun S100A9 recombinant FAQ op Invasioun an Migratioun vun gastric Kriibs Zell Linnen. An transwell assay, AGS (A) an BGC-823 (C) Zellen sech mat serum-gratis mëttel- oder mëttelfristeg mat 10, 20, 50 oder 100 NG behandelt /ml S100A9 recombinant FAQ. Invasiv Zellen sech am zoufälleg néng ausgewielt microscopic Felder (200 ×) gezielt. An Meter verkënnegt assay, AGS (B) an BGC-823 (D) Zellen sech mat serum-gratis RPMI-1640 mëttel- oder mëttelfristeg wouvun 100 Dummeldéng /ml S100A9 recombinant FAQ behandelt. Fotoe vun enger Faarf Phas-Kontrast microscope op 0 h, 24 h an 48 h der wounding ageholl. Dräi onofhängeg Experiment gesuergt. Resultater sech presentéiert als Mëttel ± S.D. vun dësen onofhängeg Experimenter. P VerfÜgung Wäert vs. VerfÜgung Kontroll Grupp. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Mënscherechter Kriibs ass eng chronesch Krankheet déi aus transforméiert Zellen originates genetesch ausser souwéi epigenetic hire Restaurant. Allerdéngs ass Kriibs net just vu Kriibs Zellen zesummegesat. Cancer Otemschwieregkeeten enthält aner Zorte Zell, dorënner Här iwert mech selwer an epithelial Zellen, immun Zellen, an deenen Zellen Blutt kritt an lymphatic vasculature [27]. An dës komplex entholl microenvironment, regléieren demagogesch mediators verschidden Etappe vun entholl Entwécklung, dorënner Initiatioun, Promotioun, Invasioun, an Metastasen [28]. VerfÜgung S100A9, e Member vun S100 Famill, ass räich an granulocytes, monocytes an ageschalt keratinocytes während verschidde demagogesch Konditiounen. An dëser Etude, fonnt mir dass S100A9 speziell zu demagogesch Zellen etabléiert war gastric Kriibs Stoffer a chronescher gastritis Stoffer infiltrating, iwwerdeems all gastric Kriibs Zellen oder bascht Zellen vun gastric mucosa S100A9 rauszesichen auszedrécken. Eis Resultater averstane mat virdrun Studien héich Ausdrock vun S100A9 Musiktherapie- zu immun Zellen zu verschiddenen Kriibs Zorte dorënner colorectal Kriibs infiltrating [21] an pancreatic Kriibs [29]. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Identifikatioun vun der mënschlecher gastric cancer
• Characterization vum Mënsch gastric carcinoma-Zesummenhang methylation vun 9 Mir CpG Inselen a Repressioun vun hiren Ausdrock an eng kënschtlech an vivo