endotelija lipaza protein je obetaven urinska biomarkerjev za diagnozo želodca cancer

endotelija lipaza protein je obetaven urinska biomarkerjev za diagnozo raka želodca
Abstract
Ozadje
raka želodca, je eden od najpogostejših malignih tumorjev na svetu . Iskanju učinkovitih diagnostičnih biomarkerjev v urinu in serumu bi predstavljal najbolj idealna rešitev za odkrivanje raka na želodcu med letnim fizični pregled. Ta študija je bil oceniti potencial endotelija lipaze (EL) kot urinske biomarker za diagnozo raka želodca.
Metode
Ravni izraz za EL smo merili z metodo Western blot in Imunohistokemijsko poskusov o (tkiva, serum, in urina) vzorce bolnikov želodca z rakom v primerjavi
zdravih ljudi. Prav tako smo preverili raven EL v vzorcih urina drugih vrst raka (pljuč, debelega črevesa in danke rak) in benignih lezij (gastritis in želodca leiomioma), da preveri, če je bil EL značilni za raka na želodcu.
Rezultat
smo opazili jasno ločitev med izražanjem EL v vzorcih urina za 90 bolnikov z rakom želodca ter 57 zdravih prostovoljcev. Bilo je približno 9,9-krat povprečno znižanje ravni izražanja EL v vzorcih urina raka želodca v primerjavi z zdravimi kontrolami (P
< 0,0001), dosegla 0.967 vrednost AUC za ROC (sprejemnik deluje značilno) krivulja, ki kaže to je zelo natančen kot diagnostični označevalec raka želodca. Zanimivo je, da stopnje izraženosti v EL v vzorcih tkiv in serumov ni bilo skoraj tako nediskriminatorno kot v urinu (P
= 0,90 in P
= 0,79). V Imunohistokemične poskusih, je bil pozitiven izraz EL beljakovin najdemo v 67% (8/12) od želodca mejijo noncancerous in 58% (7/12) vzorcev z rakom želodca. ni pomembno statistično v ravni izražanja tega proteina med rakom želodca in ujemajočih noncancerous tkiv (P
= 0,67) ni bilo.
Sklepi
sečnega EL kot zelo natančen želodca biomarker raka, ki je potencialno ., ki se uporabljajo za splošni pregledu z visoko občutljivostjo in specifičnostjo
Virtualni Tobogani
Virtualni slide (i) za tega člena, lahko najdete tukaj: http:... //www diagnosticpathol vili diagnomx eu /vs /4527331618757552
Ključne besede
endotelijska lipaza Biomarker rak želodca Diagnoza Ozadje
raka želodca je eden od najpogostejših malignih tumorjev na svetu, ki predstavlja tretji najpogostejši vzrok za smrt v zvezi z rakom pri moških in peti najpogostejši vzrok pri ženskah [1]. Približno dve tretjini primerov raka želodca se pojavljajo v manj razvitih državah, ki so skoraj trikrat več na prebivalca kot v razvitih državah, kot so evropske države in Severne Amerike [2]. Rak želodca je visoka stopnja smrtnosti, saj nima očitnih kliničnih simptomov v zgodnji fazi. Študije kažejo, da v povprečju 5-letno preživetje je, če je bil tumor odkrili in uspešno odstranili v zgodnji fazi relativno visoka [3, 4]. Zato je zgodnje odkrivanje in zdravljenje predstavljajo ključ k izboljšanju prognozo bolnikov z rakom želodca.
Čeprav je bila velika količina truda v razvoj tehnologij za lažje diagnosticiranje uporabljajo gastroskopija in imunohistokemičnim analizo invazivnega narave teh postopkov, zaradi česar je nepraktična za presejanje velikega obsega za rakom želodca. Učinkoviti diagnostični biomarkerjev v urinu in serumu bi predstavljal najbolj idealna rešitev za problem, ki omogoča testiranje za raka želodca skozi krvnih ali urinskih testov v letnih zdravniških pregledih. Več diagnostični serumski markerji so bili predlagani za raka želodca, kot MG7-Ag [5], karcinoembrionski antigen (CEA), BRCA1 in MUC5AC [6]. Stanje tehnike je, da skoraj vsi trpijo zaradi precej nizke občutljivosti in posebnosti diagnozo raka, in zato niso bile pogosto uporablja klinično [7]. V primerjavi s tkivom in seruma, zbiranje urina je relativno lažje in manj invaziven. Morda je bolj primerna za velike presejanje obsegu za odkrivanje raka [8]. Z uporabo primerjalne proteomskimi analize so predlagali številne potencialne urinarnih biomarkerjev in dobro testirana pri drugih vrstah raka, na primer cistatina B in klusterina za rak mehurja [9, 10], karboanhidraze IX in katepsina D za ledvičnim rakom [11 12], in ADAM12 za raka dojke [13]. Za rakom želodca, so poročali o več biomarkerjev, kot pepsinogen I, prostaglandina E2 in topnega c-erbB-2 [14-16]. Dejanska diagnostična možnost za raka želodca, je treba še temeljito oceniti, ker niso bile pogosto uporablja v klinični diagnostiko. Zato je očitno nujno potrebna za ugotavljanje in potrjevanje novih in zanesljivih diagnostičnih označevalcev za presejanje raka na želodcu.
Smo že izvedla študijo sistem biologije za ugotavljanje potencialnih biomarkerjev kandidatke za diagnozo raka želodca. V tej študiji smo analizirali podatke o gensko izražanje 80 parov želodca tkiv rakom in sosednjih non-rakastih tkiv, zbranih pri bolnikih z rakom želodca uporabo mikromrež čipov, in opredelila stotine različno izraženih genov pri raku primerjavi
nadzora tkiva [17 ]. Nato smo usposobljeni metoda podpornih vektorjev (SVM), ki temelji klasifikator na predvidevanja, kateri od teh različno izraženih genov imajo lahko njihovi beljakovine izloči skozi ledvice. Med napovedane izločanja beljakovin, smo ugotovili, EL kaže visoko diskriminatorne moč v smislu njegovega izražanja v vzorcih urina bolnikov želodca z rakom v primerjavi
zdravih ljudi [18].
Tukaj smo razširiti naše prejšnje študije, katerega namen je (a) nadalje potrjujejo, da je EL visoko diskriminatorno moč med vzorci urina bolnikov z rakom želodca in zdravih ljudi, starejših od večjega števila vzorcev, in (b) dokazati, da je EL zelo značilna za raka želodca s primerjavo svojih obilje v urinu raka želodca z drugimi rakom Vrste in benignih lezij.
metod
zbiranje vzorcev
Vsi vzorci so bili zbrani na treh bolnišnicah Jilin University Norman Bethune Medical College, Changchun, na Kitajskem in v bolnišnici raka povezan z Xinjiang Medical University, Urumqi, Kitajska. Želodčnega raka tkiva in ujemajoče se niso rakave tkiva so kirurško resekcija pri bolnikih z rakom želodca. random-ulova Vzorci urina v serumu in zjutraj so bili pridobljeni iz rakavih bolnikih pred operacijo. Ti vzorci vzorci so bili zbrani v obdobju od marca 2011 do septembra 2012. Skupno 90 želodca primerov raka (67males in 23 žensk; starostni razpon: 31-85 let) in 57 zdravih prostovoljcev (30 moških in 27 ženskih, starostna skupina : 29-76 let) so preučevali. V želodca primerov raka bili diagnosticirani s histološko analizo kot črevesne in razpršeni tip po klasifikaciji Lauren. Poleg tega so vzorci urina pridobljeni iz 9 bolnikov s pljučnim rakom, 10 od bolnikov z rakom debelega črevesa, bolnikih z rakom, 10 danke, 2 bolnikih gastritis in 2 bolnikih želodca leiomioma, ki se uporabljajo za preverjanje, če EL je značilna za raka želodca. Naslednja merila so bila uporabljena pri zbiranju vzorca: bolniki (i) rakom ne sme začeti z nobenim postopkom na njihovo raku; in (ii) prostovoljci v zdravem kontrolno skupino, ne bi smeli imeti resne sistemske bolezni v preteklosti. Pisno obveščen obrazec o soglasju je bil podpisan vsakega udeleženca, potem ko so bili obveščeni o namenu raziskave, ki je bila odobrena s odbori za etiko raziskovalnih pri Jilin University College of Medicine in Xinjiang Medical University, oz. Tabela 1 povzema informacije o zdravih prostovoljcih in bolnikih, vključenih v ta study.Table 1. Informacije zdravih prostovoljcih in bolnikih, ki sodelujejo v tej študiji
značilnosti
Tkivo
Serum

urina
Rak želodca
12
12
90
Povprečna starost (razpon)
60 (42-76)
63 (84-39)
60 (31-85)
Spol
Moški
6
7
67
ženski
6
5
23
tumorje lokacijo
Cardia
3
2
39
Body
5
6
26
Antrum
3
4
16
Diffuse
1
0
9
Operation
Celotnega želodca
4
5
29
Vmesni seštevek želodca
8
7
61
Lauren klasifikaciji
črevesne
5
4
39
razpršenih
7
8
51
Vrsta histologijo
Visoka ali zmerno
5
5
43
Slabo ali neraznovrstne
7
7
47
faze bula
Ι in ΙΙ
2
4
31
ΙΙΙ and ΙV
10
8
59
globina invazije
T1 in T2
5
9
30
T3 in T4
7
3
60
Node stanje
N0
3
3
29
N1 in N2
9
9
61
Metastasis stanje
M0
5
10
71
M1
7
2
19
Pljučni rak -
-
9
Povprečna starost (razpon)
46 (42- 57)
raka kolona
- -
10
povprečna starost (razpon)
53 (46-65)
raka danke -
-
9
Povprečna starost (razpon)
62 (47-78)
zdravih
12
12
57
Povprečna starost (razpon)
60 (42 -76)
54 (41-72)
47 (29-76)
gastritis /Kronično vnetje
- -
2
povprečna starost (razpon)
56 (43-69)
Gastritic leiomioma
2
Povprečna starost (razpon) -
-
56 (51-62)
Western blot analiza
tkiva smo zmelje v prašek v tekočem dušiku in nato liziramo pri ekstrakcijo protein pufru [0,5 mol /L Tris · Cl (pH 7,4), 150 mmol /L NaCI, 0,1 mmol /l etilen diamin tetra ocetna kislina (EDTA) (pH 7,0) , 1 mmol /l fenilmetilsulfonil fluorid (PMSF), 2,5 mg /ml aprotinina, 1 mmol /l ditiotreitol (DTT), 1% Triton X-100, 1% natrijev deoksiholat (SDS)]. Vsi reagenti so bili kupljeni od Beyotime (Beyotime, Šanghaj, Kitajska). Seruma in urina Vzorci so bili shranjeni v prisotnosti inhibitorja proteaze (Roche, Basel, Švica) sterilne posode in centrifugirali (1000 x g 10 minut pri 4 ° C), da odstranimo celične komponente. Supernatante zberemo in shranimo pri -80 ° C (najdaljši skladiščenju 6 mesecev). 2 ml vzorca urina smo dializiramo proti destilirani vodi skozi filtrirno membrano (Dinguo, Beijing, China) 8 kDa limitom pri 4 ° C in nato liofiliziramo pri -20 ° C. Liofilizirane vzorce urina smo ponovno suspendirali v 10 mM fosfat pufrom (PBS) (pH 7,5). Koncentracije proteina smo merijo v BCA Protein testom Kit (Beyotime, Šanghaj, Kitajska). Sečil ravni kreatinina so kvantizirana z alkalno metodo pikratni (reakcijski Jaffe je) s kreatinina rutinski preizkus semi-autoanalyser (Vital Micro 300, Nizozemska).
Western blot je bila uporabljena za merjenje ravni izražanja EL. 20 mikrogramov skupnih proteinov smo uporabili v eksperimentu. Vsi vzorci so bili ločeni s pomočjo 4-15% SDS-PAGE (Bio-Rad Laboratories Inc., ZDA) in prenese na PVDF membrano (Bio-Rad Laboratories Inc., ZDA). Membrana smo inkubirali v 5% raztopini mleko zapornega 2 uri pri sobni temperaturi. Membrana je bila inkubirana z poliklonalna kozji anti-humana EL primarnim protitelesom (1: 400, Santa Cruz Biotechnologies, ZDA) pri sobni temperaturi 1 uro, kar izperemo trikrat za 5 minut v s fosfatom puferirani slanici (PBS) in nato reagira s kunčjega anti-kozjega sekundarnih protiteles (1: 5000; Beyotime, Šanghaj, Kitajska). Za tkiv, beta-aktina protitelesa:; je (1 1000 Santa Cruz Biotehnologija, ZDA) recubated, da se zagotovi enako nakladanje. Na koncu se je membrana popolnoma prekrita z enako količino ojačevalec in raztopine peroksida od izvedeni ECL plus Kit (Beyotime, Šanghaj, Kitajska) 1 minuto, nato pa smo vse membrane izpostavljeni filma. Gostota pasu je količinsko, z uporabo gel sistem Image (Tanon, Šanghaj, Kitajska). Fiksni znesek 1 ng očistimo EL standarda (R &D Systems, Inc., ZDA) je bila uporabljena kot pozitivne kontrole za kalibracijo. Z upoštevanjem bilo razlik v nastanek in izločanje urina, denzitometrijo EL iz urina izražene glede na urinu koncentracije kreatinina.
Imunohistokemija
Za merjenje ravni izražanja EL raka v primerjavi
sosednjih noncancerous kontrolnih tkiv, tako vrste od tega so tkiva določena za 12-16 ur v 4% para-formaldehida (pH 7,0), vgrajeni v parafin in narežemo 4 mikrometrov debelih presekih. Plus drsi smo pekli pri 60 ° C 30 minut. Parafin odstranimo z uporabo ksilena 30 minut in odseki bile hidracijo skozi niz alkoholnih raztopin pred zdravljenjem z 1 mM citronske kisline, pH 6,0, pri 100 ° C za 5 minut in 1% H 2O 2 30 minut. Potem ko izperemo z destilirano vodo, so bili odseki inkubiramo pri sobni temperaturi s 5% prašičjim serumov v PBS 30 minut in EL protitelesa (1: 400; Santa Cruz Biotehnologija, ZDA), razredčene v PBS, preko noči pri 4 ° C, speremo trikrat 5 minut v PBS. Vezane protitelesa smo prikazali z barvo reagenta Diaminobenzidine (Bios, Peking, Kitajska). Oddelki so jih nasprotno s hematoksilinom Mayer. Dve patologi brez poznavanja kliničnega stanja bolnika oceniti vse obarvanih oddelkov neodvisno. Celice preštejemo pri visoki povečavi v vsakem primeru (x 400), in je bil izračunan odstotek pozitivno obarvanjem celic. Delež celic razstavnih EL izraz bil kategoriziran kot sledi: 0 = manj kot 10%; 1 = 11% -50%; 2 = 51% -75%; 3 = več kot 75%. Intenzivnost obarvanja je kategoriziran z relativno intenziteto, kot sledi: 0 = negativna; 1 = šibka; 2 = vmesno; 3 = močno obarvanje. Rezultat Delež in intenzivnosti so bile nato pomnoži, da ima skupni indeks rezultat. Na statistične analize, so rezultati nižji od 2 štejejo za negativne, in mnogo 2 ali več, so bile obravnavane pozitivno.
So Statistična analiza
hi-kvadrat testom in Wilcoxonovim podpiše rank testom uporabljajo za analizo ravni izražanja EL v seznanjenih rak in vzorci noncancerous tkiva. Za analizo razliko stopnjah izražanja EL v vzorcih seruma in urina med bolniki želodca z rakom in zdravih kontrol oz smo uporabili Mann-Whitney preizkus. Test hi-kvadrat je bila uporabljena za oceno razmerja med sečil stopnjah izražanja EL in clinicopathological spremenljivk. Zahtevne moč izražanjem EL v urinu med vzorcih raka in kontrolni skupini je bila preučena uporabljate sprejemnik deluje značilno (ROC) krivulja in površino pod ROC krivuljo (AUC). Vsi testi so bili dve tailed in P
-vrednost < 0.05 smo imeli za statistično značilne. Vse statistične analize smo opravili s statističnim opremo GraphPad Prism 5.
Rezultati
stopnjah izražanja EL v urinu
Za semi-kvantitativno analizo urina proteinov smo uporabili relativne stopnje izražanja EL glede na to od urina kreatinina v vsakem vzorcu normalizirati EL izražanje v različnih vzorcih urina. Opazili smo jasno ločitev med izražanjem EL v vzorcih urina za 90 bolnikov želodca z rakom (1,39 ± 0,68) in pri 57 zdravih prostovoljcih (0,14 ± 0,32). Opazili smo tudi približno 9,9 krat povprečno znižanje ravni EL beljakovin v urinu bolnikov z rakom želodca v primerjavi z zdravimi kontrolami (P
< 0,0001). Rezultate lahko vidimo na sliki 1A in sliki 2A. Imamo narisane ROC krivuljo za natančnost razvrščanja s pomočjo ravni izražanja EL vseh teh vzorcev urina, da bi zagotovili splošen pregled zahtevne moči beljakovin. Upoštevajte, da AUC zagotavlja široko sprejeta indeks za merjenje kakovosti osnovnega klasifikatorja z AUC = 1,0, ki predstavlja popolno razvrstitev in AUC = 0,5, ki predstavlja nobenih ločitev. EL je dosegla vrednost AUC pri 0.967 z 95% intervala zaupanja (CI), pri čemer [0.942-0.993], kar pomeni, da lahko v urinu EL služi kot zelo obetaven želodčne biomarker raka za diagnostične namene (slika 2B). Slika 1 Predstavnik Western blot analiza EL beljakovin izobilju. Pozitivna kontrola pasu (+) vsebuje komercialno standardno izdelek EL, ki je bila uporabljena za normalizacijo odgovor signala v vseh gelov. (A), Številčnost EL beljakovin v urinu; (B), EL številčnost na vzorcih raka tkiva in ujemanje noncancerous vzorce bolnikov želodca z rakom brez zdravljenja. Β-aktina služi kot notranji nadzor obremenitev za oceno relativne koncentracije proteina obilo; (C), EL protein številčnost v serumskih vzorcih.
Slika 2 urina EL beljakovine obilje pri bolnikih želodca z rakom v primerjavi z zdravimi kontrolami. Vsaka podatkovna točka je ena oseba. (A) EL številčnost v vzorcih bolnikov želodca z rakom bistveno nižje kot pri vzorcih iz zdravih kontrol; (B) ROC krivulje urinske EL proteina. Vrednost AUC je bil 0,967.
Opažamo, da je EL zasedba v zahodni blot ni v urinu od 71 bolnikov, ki so želodca z rakom 90 in vseh 57 zdravih prostovoljcev EL pas v svojih vzorcev urina. Uporaba odsotnost /prisotnost EL pasu kot cutoff pozivu osebo, ki ima raka na želodcu ali ne, zgoraj podatkov povzroča kliče občutljivost na 79% [95% CI, 0,690-0,867] in specifičnost 100% [95% CI, 0,937-1,000].
smo nato preučila raven izražanja EL v urinu bolnikov želodca z rakom in njenem odnosu do različnih clinicopathological dejavnikov, in sicer spol, diferenciacije histologijo, stopnjo tumorja, invazije, in status metastaz. je mogoče zaznati nobenih pomembnih statističnih razmerja med ravnmi izražanja EL in kateri koli od teh dejavnikov. Korelacija med sečil stopnjah izražanja EL in clinicopathological dejavniki so predstavljeni v tabeli 2.Table 2 Korelacija med sečil El izražanja in clinicopathological lastnosti
Clinicopathological (n)
EL, manjka (%)

EL prisotna (%)
P

n = 71
n = 19
Spol
moški (67)
51 (72)
16 (84)
0,27
Ženska (23)
20 (28)
3 (16)
histološki tip
Visoka ali zmerna (43)
31 (44)
12 (63)
0,13
Slabo ali nediferencirani, (47)
40 (56)
7 ( 37)
Pri klasifikaciji Lauren
Črevesne, (39)
29 (41)
10 (53)
0,36
difuzna, (51)
42 (59)
9 (47)
tumor fazah
Ι in ΙΙ, (31)
22 (31)
9 (47)
0,18
ΙΙΙ in ΙV, (59)
49 (69)
10 (53)
globina invazije
T1 in T2, (30)
21 (30)
9 (47)
0,14
T3 in T4 (60)
50 (70)
10 (53)
Node stanje
Jih ni, (29)
23 (32)
6 (32)
0,95
Present, (61)
48 (68)
13 (68)
metastaze stanje
M0 (71)
55 (77)
16 (84)
0,52
M1 (19)
16 (23)
3 (16)
smo tudi preverili, če EL je značilna za raka želodca. Kot začetni napor, smo preučili raven izražanja EL v vzorcih urina treh drugih vrstah raka (pljuč, debelega črevesa in danke rak) in benignih lezij (gastritis in želodca leiomioma). Test smo izvedli na vzorcih urina z dne 9. pljučnega raka, 10. rak debelega črevesa, 10 rakom danke, 2 gastritis in 2 bolnikih želodca leiomioma. Jasno lahko vidimo, da 9 od 9, 9 od 10, 10 od 10, 2 od 2, in 2 od 2 vzorci EL pas v vzorcih urina za pljučnega raka, debelega črevesa, raka na danki, gastritis in bolniki želodca leiomiom, v tem zaporedju (slika 3). Medtem ko se ta rezultat ne zagotavlja, da je pomanjkanje EL v urinu pokazatelj samo raka želodca, ne nakazujejo, da je EL zelo specifična. Večje testi se bo zgodilo v naši raziskavi nadaljnjem spremljanju, ki bo vključeval bistveno več bolnikov z drugimi boleznimi, so lahko povezani z rakom želodca, kot so rak trebušne slinavke in raka požiralnika. Slika 3 EL obilje v vzorcih urina drugih vrstah raka in benignih lezij. (A), devet vzorcev pljučni rak; (B), Deset vzorci rak kolona; (C), Deset danke vzorcev; (D), dva gastritis in dva gastritic vzorca leiomiom. (+) Pozitivna kontrola pas.
Raven izražanja EL v tkivih in serumov
Študija kaže, da je EL protein ni v vzorcih želodčne rak urina. Glede na to, da urin vsebuje tako beljakovine, izločenega iz urotelija kot tudi beljakovine iz lizo plazmo ali celice, smo preučili tudi raven izražanja EL v tkivu ali seruma bolnikov z rakom želodca, z namenom izpeljati razloge za to opaženo odsotnost. Western blot je bila izvedena za merjenje ravni izražanja EL v vzorcih raka tkiva in ujemanje noncancerous vzorcev iz 12 nezdravljenih bolnikih želodca z rakom (slika 1B). niso opazili pomembne razlike v stopnjah izražanja v EL med želodca vzorcev raka tkiva in ujemajočih noncancerous vzorcev (Wilcoxonov podpiše rang test, P
= 0,90).
V Imunohistokemijsko poskusih, smo ugotovili, da so rjave zrnca pretežno pojavil v citoplazmi (slika 4). Pozitiven izraz EL proteina smo našli v 58% (7/12), raka želodca in 67% (8/12) želodčnih sosednjih noncancerous vzorci (tabela 3). Ni bilo nobene razlike v stopnjah izražanja tega proteina med rakom želodca in ujemajočih noncancerous tkiv (hi-kvadrat test, P
= 0,67). Pregledali smo tudi morebitno povezavo med stopnjami EL izražanja in morda pomembno clinicopathological dejavnikov prej omenjenih. Odkrit ni bil noben odnos. Rezultati so predstavljeni v tabeli 4. Slika 4 Imunohistokemično analiza EL v tkivih raka želodca in ujemanje noncancerous vzorcev. Rjavi granule EL pretežno pojavil v citoplazmi. Sosednji noncancerous tkiva barvanega z (A) (× 400). Rak tkiva obarvali s (B) (× 400).
Tabela 3 EL izražanja v raka želodca in sosednjih noncance ROUS vzorcev
n
Izraz EL beljakovin

P
Negative
Pozitivna
sosednjih nadzor
12
4 (33%)
8 (67%)
0,67
rak želodca
12
5 (42%)
7 (58%)
Tabela 4 EL izraz in clinicopathological dejavniki v želodcu tkivih rakom
clinicopathological

n
El
P
Negative
pozitivno
Spol
Moški
6
2
4
0.56
Moški
6
3
3
Starost (leta)
≤50
3
1
2
0,74
> 50
9
4
5
Lauren uvrstitev
črevesne
5
3
2
0,28
razpršenih
7
2
5
histološki tip
zelo diferenciran
1
1
0
0,36
zmerno razlikuje
4
2
2
Slabo diferencirani
7
2
5
bula faze
I in II
2
1
1
0,79
III in IV
10
4
6
globina invazije
T1 in T2
5
2
3
0.92
T3 in T4
7
3
4
limfnega vozla metastaze
Positive
3
1
2
0,74
Negativno
9
4
5
nato smo merili raven izražanja EL v serumih 12 želodca bolnikov z rakom v primerjavi
tistih 12 zdravih ljudi (slika 1C). Razvidno je, da ni jasno razlikovanje med vzorci z rakom in zdrave nadzor (test Mann-Whitney, P
= 0,79). Opažamo, da so stopnje izraženosti EL razporeditev dosega široko v obeh vzorcev.
Razprava
V naši prejšnji raziskavi, smo razvili nov računski postopek in ga uporablja, da napovedujejo, da bi lahko EL lahko služi kot zelo obetaven diagnostični urina označevalec raka želodca. Tukaj smo dodatno potrdili to napoved na večjem nizu vzorca, poleg tega pa smo ugotovili, da je EL protein zelo specifična rak želodca.
EL je nov član trigliceridov lipaze družini genov, in ima visoko sekvenčno homologijo s lipoproteinske lipaze (LPL) (45%), jetrna lipaze (HL) (41%) in trebušne slinavke lipaze (PL) (21%) [19, 20]. EL ima v prvi vrsti za fosfolipaze in ima nekaj trigliceridov aktivnost lipaze, ki ima pomembno vlogo pri plazemskih lipoproteinov visoke gostote presnove in razvoj ateroskleroze [21-25]. Številne študije so pokazale, da ima LPL pomembno vlogo pri karcinogenezi, vključno debelega črevesa in pankreatičnih rakih in pljučnega raka [26, 27]. Vendar EL niso poročali, da je povezana s katero koli raka, razen testisov tumorjev zarodnih celic, medtem ko mehanizem je jasno, [28].
Odkritje, da je raven izraz za EL bistveno zmanjša v urinu bolnikov z rakom želodca , medtem ko kaže nobene razlike med ustreznimi serumskih vzorcih, kot tudi vzorce tkiva je zelo zanimiva. Ena od možnih razlogov bi bilo zaradi lastnosti glomerulne filtracije sistema. Znano je, da so bile plazemske beljakovine filtrirane čeprav glomerula na podlagi njihove velikosti, stroškov in strukture obliki [29]. Mala in pozitivno zaračunajo molekule bilo lažje filtrira v urinu kot velike in negativno nabitih beljakovin. Sekvenca EL ima številne pozitivno nabitih skupin [30], ki je lahko razlog, da se lahko filtriramo v urinu zdrave ljudi. Vendar pa mikrookolje rakavih celic so bolj kisla [31], ki se lahko spreminjajo potencialno pozitivno nabiti grozde EL do negativnih, zato preprečuje molekul iz filtrirati v urinu. Seveda, natančen vzrok še ni treba razumeti, in zagotavlja nadaljnje študije.
Urin je idealna neinvazivna vir za odkrivanje raka. Vendar pa je treba opozoriti, da je urin visoko stopnjo variabilnosti koncentracij beljakovin v celotnem dnevu, ki se lahko pod vplivom različnih dejavnikov (starost, prehrana in čas zbiranja). Iz tega razloga je ključnega pomena za normalizacijo koncentracijo proteina v urinu pri merjenju ravni ekspresije proteina. Zato smo uporabili relativne ravni izražanja EL glede da sečnega kreatinina v vsakem vzorcu normalizirati raven izražanja EL v različnih vzorcih urina. Rezultati te študije kažejo, da lahko izguba urinske EL izražanja zagotovi predhodno indikacijo raka želodca med presejanja obsežno in bolj neposrednih pregledih kot gastroskopija in patologijo testa na vzorcu biopsije bo potreben za končno diagnozo. Številne študije poročajo, da je lahko diagnostična biomarkerjev koristen prognostični in preživetje kazalnik za želodčne raka [32-34]. To ni bil samo napovedati podatke prognoze bolnikov z rakom, ampak tudi za strategije zdravljenja za zdravnika. Tako smo opisali povezavo med izražanjem EL in clinicopathological značilnosti pri bolnikih z rakom želodca. Čeprav EL naredi obetavno diagnostični marker za raka želodca, nismo našli nobenih trdnih odnosov med stopnjo EL izražanja in prognostičnih clinicopathological značilnosti tumorja, kot sta tip tumorja, invazije in TNM uprizoritve. Poleg tega je zaradi kratkega trajanja študija in pomanjkanje rednega sledenja bolnikov, ne moremo oceniti stopnjo preživetja v tej študiji. omejene količine podatkov, je pokazala, da EL izraz ni mogoče uporabiti kot uporabnih prognostičnih in preživetju kazalnikov za rakom želodca. Naslednja študija, smo želeli raziskati izraz za EL beljakovin v večjem številu bolnikov z različnimi tumorji in njenih nadaljeval študij in raziskovanje točno mehanizem vlogi El v karcinogenosti raka želodca.
Zaključek
In sklep, čeprav ni povezana s stopnjo tumorja ali razredu, lahko urina EL je zelo obetavna želodca biomarkerjev raka, ki se lahko uporablja za velike projekcije z visoko diagnostično zvestobe.
ugotavlja
Xueyan Dong, Guoqing Wang prispevala tudi za to delo
Kratice
EL.
endotelijska lipaza
ROC:
sprejemnik deluje karakteristike

AUC:
območje pod krivuljo ROC
deklaracij
Priznanja
Zahvaljujemo XiaoMing Xu za svoje prispevke, Oddelek za patobiologije laboratorija, Norman Bethune Medical College Jilin University. To delo je bilo podprto s strani National Institutes of Health (1R01GM075331), "spoštovani Učenjak" donacija iz Georgia raka koalicije, in sredstva seme iz University of Georgia. To je bila podprta tudi v delu Nacionalnega Temeljni raziskovalni program Kitajske (973 programov, 2011CB512003), National Natural Science Foundation Kitajske (81271897 in 81071424), Specialized Raziskovalnega sklada za doktorski program za visoko šolstvo Kitajske (20110061120093), Kitajska podoktorskih ga Science Foundation (20110491311 in 2012T50304), fundacija za Jilin ministrstva za zdravje deželnem (2011Z049) in Bethune poseben temelj Univerze Jilin
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev izvirnih predloženih spisov za slike . Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Clinicopathological značilnosti in napovedni analiza razvrstitve Lauren v adenokarcinomom želodca na Kitajskem
• MicroRNA-206 zatira rast želodčni rak celic in metastaz