Den endothelial lipase protein er lovende urin biomarkør for diagnostisering av magekreft

Den endothelial lipase protein er lovende urin biomarkør for diagnostisering av magekreft
Abstract
Bakgrunn
Magekreft er en av de vanligste ondartede svulster i verden. Finne effektive diagnostiske biomarkører i urin eller serum ville representere den mest ideelle løsningen for å påvise magekreft i løpet årlig fysisk undersøkelse. Denne studien var å evaluere potensialet til endotel-lipase (EL) som en urin biomarkør for diagnose av magekreft.
Methods
Den ekspresjonsnivåer av EL ble målt ved anvendelse av Western blotting og immunhistokjemisk farging eksperimenter på (vev, serum, og urin) prøver av magekreftpasienter versus
friske mennesker. Vi har også sjekket de EL nivåer i urinprøver av andre krefttyper (lunge, tykktarm og endetarm kreft) og godartede lesjoner (gastritt og mage Leiomyomer) for å sjekke om EL var spesifikke for magekreft.
Resultat
Vi observerte et klart skille mellom EL uttrykk nivåer i urinprøver av 90 mage kreftpasienter og av 57 friske frivillige. Det var omtrent 9,9 ganger gjennomsnittlig reduksjon av EL uttrykk nivåer i urinprøver av magekreft sammenlignet med friske kontroller (P
< 0,0001), å oppnå en 0,967 AUC-verdien for ROC (mottaker drift karakteristikk) kurve, viser det er svært nøyaktig som en diagnostisk markør for magekreft. Interessant, uttrykket nivåer av EL i vev og serumprøver var ikke på langt nær så diskriminativ som i urinprøver (P
= 0,90 og P
= 0,79). I immunhistokjemiske eksperimenter, ble positivt uttrykk for at EL-protein som finnes i 67% (8/12) av mage tilstøtende noncancerous og 58% (7/12) av magekreft prøver. Det var ingen signifikant statistisk i uttrykket nivåer av dette proteinet mellom magekreft og matchende noncancerous vev (P
= 0,67).
Konklusjoner
urin EL som en svært nøyaktig magekreft biomarkør som er potensielt . gjelder det generelle screening med høy sensitivitet og spesifisitet
Virtual Slides
virtuelle lysbilde (er) for denne artikkelen finner du her: http:... //www diagnosticpathol logi diagnomx eu /vs /4527331618757552
nøkkelord
endotel lipase Biomarker Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP Diagnose Bakgrunn
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP er en av de vanligste ondartede svulster i verden, som representerer den tredje største årsaken til kreft dødsfall hos menn og den femte ledende årsak hos kvinner [1]. Omtrent to tredjedeler av magekrefttilfeller forekommer i mindre utviklede land, som er nesten tre ganger høyere per innbygger enn i de utviklede landene, slik som europeiske land og Nord-Amerika [2]. Magekreft har høy dødelighet siden det har ingen åpenbare kliniske symptomer i tidlig stadium. Studier tyder på at dersom svulsten ble oppdaget og resected på et tidlig stadium, er den gjennomsnittlige 5-års overlevelse relativt høy [3, 4]. Derfor tidlig diagnose og behandling representerer en nøkkel til bedre prognose av mage kreftpasienter.
Selv stor mengde innsats har blitt satt inn i teknologiutvikling for å forenkle diagnose ved hjelp av gastroskopi og immunhistokjemisk analyse, invasiv natur av disse prosedyrene gjør det upraktisk for storskala screening for magekreft. Effektive diagnostiske biomarkører i urin eller serum ville representere den mest ideelle løsningen på problemet, som tillater testing for magekreft gjennom blod- eller urinprøver under årlige fysiske undersøkelser. Flere diagnostiske markører i serum er blitt foreslått for magekreft, slik som MG7-Ag [5], carcinoembryonic antigen (CEA), MUC1 og MUC5AC [6]. The state of the art er at nesten alle av dem lider heller lav sensitivitet og spesifisitet i kreftdiagnose, og dermed har ikke vært mye brukt klinisk [7]. Sammenlignet med vev og serum, er urinforholdsvis enklere og mindre invasiv. Det kan være mer egnet for storskala screening for diagnose av kreft [8]. Ved hjelp av sammenlignende proteomikk analyser, har en rekke potensielle urin biomarkører blitt foreslått og godt testet for andre typer kreft, for eksempel cystatin B og Clusterin for blærekreft [9, 10], karboanhydrase IX og cathepsin D for nyrekreft [11, 12], og ADAM12 for brystkreft [13]. For magekreft, har flere biomarkører blitt rapportert, for eksempel pepsinogen I, prostaglandin E2, og løselig c-erbB-2 [14-16]. Selve diagnostiske evne for magekreft er ennå ikke grundig vurdert, siden de ikke har vært mye brukt i klinisk diagnostikk. Derfor er det helt klart et stort behov for identifisering og validering av nye og pålitelige diagnostiske markører for screening magekreft.
Vi har tidligere gjennomført et system biologi studie for å identifisere potensielle kandidat biomarkører for diagnostisering av magekreft. I den studien vi analyserte gene expression-data for 80 par av magekreft vev og tilstøtende ikke-cancervev oppsamlet fra magecancerpasienter ved hjelp av microarray chips, og identifisert hundrevis av differensielt uttrykte gener i kreft versus
kontroll vev [17 ]. Vi trente en støtte vektor maskin (SVM) basert klassifiserings å forutsi hvilken av disse differensielt uttrykte gener kan ha sine proteiner utskilles i urinen. Blant de spådd excretory protein, fant vi EL viser høy diskriminerende effekt i form av dens uttrykk i urinprøver av magekreftpasienter versus
friske mennesker [18].
Her utvider vi vår tidligere studie med formål å (a) videre bekrefte at EL har høy diskriminerende effekt mellom urinprøver av magekreft pasienter og friske personer over et større sett av prøver, og (b) viser at EL er svært spesifikke for magekreft ved å sammenligne sine hopetall i urinprøver av magekreft med andre kreft typer og godartede lesjoner.
Metoder
Prøvetaking
Alle prøver ble samlet inn ved tre sykehus i Jilin-universitetet Norman Bethune Medical College, Changchun, Kina og i Cancer Hospital tilknyttet Xinjiang Medical University, Urumqi, Kina. Ventrikkelkreftstudien vev og samsvarende ikke-kreft vev ble kirurgisk reseksjon fra mage kreftpasienter. Serum og morgen random-fangsturinprøver ble hentet fra kreftpasienter før operasjonen. Disse prøvemateriale ble samlet inn i perioden fra mars 2011 til september 2012. Totalt 90 mage krefttilfeller (67males og 23 kvinner, aldersgruppe: 31-85 år) og 57 friske frivillige (30 menn og 27 kvinner, aldersgruppe : 29-76 år) ble studert. Mage krefttilfeller ble diagnostisert ved histologisk analyse som intestinal og diffus type i henhold til Lauren klassifisering. I tillegg ble urinprøver erholdt fra 9 lungekreftpasienter, 10 fra kolon kreftpasienter, 10 rektum kreftpasienter, 2 gastritt pasienter, og 2 gastrisk leiomyoma pasienter, som brukes for å undersøke om EL er spesifikk for magekreft. Følgende kriterier ble brukt i prøveinnsamling: (i) kreftpasienter bør ikke ha startet noen behandling på deres kreft; og (ii) frivillige i den friske kontrollgruppen bør ikke ha noen alvorlig systemisk sykdom i det siste. En skriftlig informert samtykkeskjema ble undertegnet av den enkelte deltaker etter at de ble informert om hensikten med studien, som ble godkjent av de forskningsetiske komiteer i Jilin universitet College of Medicine og Xinjiang Medical University, henholdsvis. Tabell 1 oppsummerer informasjonen om friske frivillige og pasienter som er involvert i denne study.Table en Informasjonen fra friske frivillige og pasienter som er involvert i denne studien
Kjennetegn
Tissue
Serum

Urin
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP
12
12
90
Gjennomsnittlig alder (range)
60 (42-76)
63 (84-39)
60 (31-85)
Kjønn
Mann fra 6
7
67
Kvinne
6
5
23
Tumor plassering
Cardia
3
2
39
Body
5
6
26
Antrum
3
4
16
Diffuse
1
0
9
Operation
Total gastrektomi
4
5
29
Subtotal gastrektomi
8
7
61
Lauren klassifisering
Tarm
5
4
39
Diffuse
7
8
51
Histologi typen
høy eller moderat
5
5
43
Dårlig eller udifferensiert
7
7
47
Tumor etapper
Ι og ΙΙ
2
4
31 ΙΙΙ og ΙV
10
8
59

Dybde invasjon
T1 og T2
5
9
30
T3 og T4
7
3
60
Node status
N0
3
3
29
N1 og N2
9
9
61
metastaser status
M0
5
10
71
M1
7
2
19
Lungekreft -
-
9
Middelalder (range)
46 (42- 57)
Tykktarmskreft kreft~~POS=HEADCOMP -
-
10
Middelalder (range)
53 (46-65)
endetarm kreft -
-
9
Middelalder (range)
62 (47-78)
Sunn
12
12
57
Gjennomsnittlig alder (range)
60 (42 -76)
54 (41-72)
47 (29-76)
Gastritt /kronisk betennelse -
-
2
Mean alder (range)
56 (43-69)
Gastritic leiomyoma
2
Mean alder (utvalg) -
-
56 (51-62)
Western blotting-analyse
vevene ble males til pulver i flytende nitrogen og deretter lysert i proteinekstraksjon buffer [0.5 mol /L Tris-HCl (pH 7,4), 150 mmol /l NaCl, 0,1 mmol /liter etylendiamin-tetra aceticacid (EDTA) (pH 7,0) , 1 mmol /l fenylmetylsulfonylfluorid (PMSF), 2,5 mg /ml aprotinin, 1 mmol /l ditiotreitol (DTT), 1% Triton X-100, 1% natriumdeoksykolat (SDS)]. Alle reagenser ble kjøpt fra Beyotime (Beyotime, Shanghai, Kina). Serum- og urinprøver ble oppbevart i nærvær av protease inhibitor (Roche, Basel, Switzerland) sterile beholdere og sentrifugert (1000 x g i 10 minutter ved 4 ° C) for å fjerne cellulære komponenter. Supernatantene ble samlet og lagret ved -80 ° C (den lengste lagring i 6 måneder). 2 ml urinprøver ble dialysert mot destillert vann gjennom en filtreringsmembran (Dinguo, Beijing, Kina) 8 kDa cutoff ved 4 ° C og deretter frysetørket ved -20 ° C. Fryse-tørkede urinprøver ble resuspendert i 10 mM fosfatbufret saltvann (PBS) (pH 7,5). Protein konsentrasjoner ble målt ved hjelp av BCA Protein Assay Kit (Beyotime, Shanghai, Kina). Urin kreatinin-nivåene ble kvantisert ved alkalisk pikrat metode (Jaffe reaksjon) med kreatinin en rutinetest semi-autoanalyser (Vital Micro 300, Nederland).
Western blot ble anvendt for å måle ekspresjonsnivåene av EL. 20 ug av totalproteiner ble anvendt i forsøket. Alle prøvene ble separert ved anvendelse av 4-15% SDS-PAGE (Bio-Rad Laboratories Inc., USA) og overført til en PVDF-membran (Bio-Rad Laboratories Inc., USA). Membranen ble inkubert i 5% melk blokkeringsløsning i 2 timer ved romtemperatur. Membranen ble inkubert med et polyklonalt geit anti-humant EL primære antistoff (1: 400; Santa Cruz Bioteknologi, USA) ved romtemperatur i 1 time, som ble vasket tre ganger i 5 minutter i fosfatbufret saltvann (PBS) og deretter reagert med en kanin anti-geit sekundært antistoff (1: 5000, Beyotime, Shanghai, Kina). For vev, β-aktin antistoff (1: 1000, Santa Cruz Bioteknologi, USA) ble recubated å sikre lik belastning. Til slutt ble membranen fullstendig dekket med en lik mengde enhancer og peroksyd-løsning fra en ECL pluss Kit (Beyotime, Shanghai) i 1 minutt, og deretter alle membraner ble eksponert for film. Tettheten av bandet ble kvantifisert ved hjelp av Gel Bilde System (Tanon, Shanghai, Kina). Den faste mengde på 1 ng renset EL standard (R &D Systems, Inc., USA) ble anvendt som en positiv kontroll for kalibrering. Med hensyn til variasjoner i urin dannelse og utskillelse, densitometry av EL fra urin ble uttrykt i forhold til urin kreatininkonsentrasjoner.
Immunohistochemistry
For å måle uttrykket nivåer av EL i kreft versus
tilstøtende noncancerous kontroll vev, begge typer av vevene ble fiksert i 12-16 timer i 4% para-formaldehyd (pH 7,0), innstøpt i parafin og kuttet i 4 um tykke seksjoner. Plus-objektglass ble oppvarmet ved 60 ° C i 30 minutter. Parafin ble fjernet ved anvendelse av xylen i 30 minutter, og ble seksjonene rehydrert gjennom en serie av alkoholoppløsninger før behandling med 1 mM sitronsyre, pH 6,0, ved 100 ° C i 5 minutter og med en% H 2o 2 i 30 minutter. Etter å ha blitt vasket med destillert vann ble snittene inkubert ved romtemperatur med 5% svine serum i PBS i 30 minutter og EL-antistoff (1: 400, Santa Cruz Bioteknologi, USA) fortynnet i PBS over natten ved 4 ° C, vasket tre ganger for 5 minutter i PBS. Bundet antistoff ble visualisert med fargen reagent Diaminobenzidin (Bios, Beijing, Kina). Seksjonene ble kontra med Mayers hematoksylin. To patologer uten kjennskap til pasientens kliniske status evaluert alle de fargede seksjoner uavhengig. Cellene ble tellet ved høy forstørrelse i hvert tilfelle (x 400), og prosentandelen av positive flekker celler ble beregnet. Andelen av celler som oppviser EL-ekspresjon ble kategorisert som følger: 0 = mindre enn 10%; 1 = 11% -50%; 2 = 51% -75%; 3 = mer enn 75%. Den fargeintensitet ble kategorisert ved relativ intensitet som følger: 0 = negativ; 1 = svak; 2 = middels; 3 = sterk farging. Andelen og intensitetspoeng ble deretter multiplisert å ha en total poengsum indeks. Per statistisk analyse, ble skårer lavere enn 2 vurderes negativt, og scorene til 2 eller høyere ble betraktet som positive.
Statistisk analyse
chi-kvadrat test og Wilcoxon er signert rank test ble brukt til å analysere uttrykket nivåer av EL i sammenkoblede kreft og prøver noncancerous vev. For å analysere forskjellen på EL uttrykk nivåer i serum og urinprøver mellom magekreftpasienter og friske kontroller henholdsvis ble Mann-Whitney test brukt. Chi-kvadrat test ble benyttet for å vurdere forholdet mellom urin EL uttrykk nivåer og clinicopathological variabler. Den kresne kraft av uttrykket nivåer av EL i urinen mellom prøver fra kreft og kontrollgruppen ble undersøkt ved hjelp av mottakeren opererer karakteristikk (ROC) kurve, og arealet under ROC-kurven (AUC). Alle testene var to tailed og en P
-verdi < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Alle statistiske analyser ble utført ved anvendelse av GraphPad Prism 5 statistisk programvare
. Resultater i El ekspresjonsnivåer i urinen
For semi-kvantitativ analyse av urinprotein, vi brukte relative EL-ekspresjonsnivåer i forhold til den av urin kreatinin i hver prøve å normalisere EL uttrykk på tvers av ulike urinprøver. Vi observerte et klart skille mellom EL uttrykk nivåer i urinprøver av 90 mage kreftpasienter (1,39 ± 0,68) og av 57 friske frivillige (0,14 ± 0,32). Vi observerte en ca 9,9 ganger gjennomsnittlig reduksjon på EL proteinnivået i urinprøver av magekreft pasienter sammenlignet med friske kontroller (P
< 0,0001). Resultatene kan sees i figur 1A og figur 2A. Vi har plottet ROC-kurven for klassifisering nøyaktighet ved hjelp av EL uttrykk nivåer på tvers av alle disse urinprøver, for å gi en samlet oversikt over den kresne kraft av proteinet. Legg merke til at AUC gir et allment akseptert indeks for å måle kvaliteten på den underliggende klassifikator med AUC = 1,0 representerer perfekt klassifisering og AUC = 0,5 representerer ingen separasjon. EL har oppnådd en AUC-verdi på 0,967 til 95% konfidensintervall (CI) er [0,942 til 0,993], noe som indikerer at urin EL kan tjene som et meget lovende magekreft biomarkør for diagnostiske formål (figur 2B). Figur 1 En representativ Western blot-analyse av EL-protein overflod. Positiv kontroll lane (+) inneholdt det kommersielle EL standard produkt, som ble anvendt for å normalisere signalrespons på tvers av alle geler. (A), overflod av EL-protein på urinprøver; (B), EL overflod på kreft vevsprøver og matchende noncancerous prøver fra magekreftpasienter med ingen behandling. Den β-actin tjener som en intern kontroll lasting for å anslå de relative overflod proteinnivåer; (C), EL protein overflod i serumprøver.
Figur 2 Urin EL protein Forekomsten i mage kreftpasienter versus friske kontroller. Hvert datapunkt er ett individ. (A), EL overflod i prøver av magekreftpasienter betydelig lavere enn det i prøver fra friske kontrollpersoner; (B), ROC-kurver av urin EL-protein. AUC-verdien var 0,967.
Vi merker oss at EL bandet i Western blot var fraværende i urinprøver av 71 av de 90 mage kreftpasienter og alle de 57 friske frivillige har EL bandet i deres urinprøver. Ved hjelp av fravær /nærvær av EL bandet som cutoff i å kalle en person som har magekreft eller ikke, gir de ovennevnte data opphav til et kall sensitivitet på 79% [95% KI, 0,690 til 0,867] og spesifisitet på 100% [95% CI, 0,937 til 1,000].
Vi undersøkte EL uttrykk nivåer i urinprøver av magekreftpasienter og dens forhold til de ulike clinicopathological faktorer, nemlig kjønn, histologi differensiering, tumor stadium, invasjon og metastasestatus. Ingen signifikante statistiske sammenhenger mellom EL uttrykk nivåer og noen av disse faktorene kan oppdages. Korrelasjonen mellom urin EL uttrykk nivåer og clinicopathological faktorene er vist i Tabell 2.Table 2 Sammenheng mellom urin EL uttrykk og clinicopathological funksjoner
Clinicopathological (n)
EL fraværende (%)

EL tilstede (%)
P
n = 71
n = 19
Kjønn
Mann (67)
51 (72)
16 (84)
0,27
Kvinne (23)
20 (28)
3 (16)
Histologisk typen
høy eller moderat, (43)
31 (44)
12 (63)
0,13
Dårlig eller udifferensiert, (47)
40 (56)
7 ( 37)
Lauren klassifisering
Intestinal, (39)
29 (41)
10 (53)
0,36
Diffuse, (51)
42 (59)
9 (47)
Tumor etapper
Ι og ΙΙ, (31)
22 (31)
9 (47)
0,18
ΙΙΙ og ΙV, (59)
49 (69)
10 (53)
Dybde invasjon
T1 og T2, (30)
21 (30)
9 (47)
0,14
T3 og T4, (60)
50 (70)
10 (53)
Node status
Fraværende, (29)
23 (32)
6 (32)
0,95
Present, (61)
48 (68)
13 (68)
Metastase status
M0 (71)
55 (77)
16 (84)
0,52
M1 (19)
16 (23)
3 (16)
Vi har også sjekket om EL er spesifikk for magekreft. Som et første forsøk, har vi undersøkt EL uttrykk nivåer i urinprøver av tre andre krefttyper (lunge, tykktarm og endetarm kreft) og godartede lesjoner (gastritt og mage Leiomyomer). Testen ble utført på urinprøver av 9 lungekreft, tykktarmskreft 10, 10 rektum-cancer, 2 gastritt, gastrisk og 2 leiomyoma pasienter. Åpenbart kan vi se at 9 av 9, 9 av 10, 10 av 10, to av to, og to ut 2 prøver har EL bandet i urinprøver av lungekreft, tykktarmskreft, endetarmskreft, gastritt og gastrisk leiomyoma pasienter, henholdsvis (figur 3). Selv om dette resultatet ikke garantere at mangel på EL i urin er en indikator på bare magekreft, betyr det sterkeste at EL er svært spesifikke. Større tester vil bli gjort i vår oppfølgingsstudie, som vil innebære betydelig flere pasienter med andre sykdommer muligens relatert til magekreft, som for eksempel kreft i bukspyttkjertelen og spiserøret kreft. Figur 3 EL hopetall i urinprøver av andre krefttyper og godartede lesjoner. (A), Ni lungekreft prøver; (B), ti tykktarmskreft prøver; (C), Ten endetarms kreft prøver; (D), to gastritt og to gastritic leiomyoma prøver. (+) Den positive kontrollen kjørefelt. I El uttrykk nivåer i vev og sera
Studien indikerer at EL protein er fraværende i magekreft urinprøver. Tatt i betraktning at urinen inneholder både protein utskilt fra urothelium samt proteiner fra plasma eller cellelyse, har vi også undersøkt EL uttrykk nivåer i vev eller serum av mage kreftpasienter, med formål å antyde grunnene til dette observert fravær. Western blot ble utført for å måle EL uttrykk nivåer i kreft vevsprøver og matchende noncancerous prøver fra 12 ubehandlede mage kreftpasienter (Figur 1b). Det ble ikke observert noen signifikant forskjell i uttrykket nivåer av EL mellom mage kreft vevsprøver og matchende noncancerous prøver (Wilcoxons signert rank test, P
= 0,90).
I immunhistokjemisk farging eksperimenter, fant vi ut at de brune granulater overveiende dukket opp i cytoplasma (figur 4). Positive ekspresjon av EL-protein ble funnet i 58% (7/12) av magekreft og i 67% (8/12) av mage tilstøtende noncancerous prøver (Tabell 3). Det var ingen forskjell i uttrykket nivåer av dette proteinet mellom magekreft og matchende noncancerous vev (chi-kvadrat test, P
= 0,67). Vi har også undersøkt noen mulig sammenheng mellom EL uttrykk nivåer og potensielt relevante clinicopathological forhold som er nevnt tidligere. Ingen forholdet ble oppdaget. Resultatene er presentert i tabell 4. Figur 4 Immunhistokjemisk analyse av EL i vev av magekreft og samsvarende noncancerous prøver. Den brune granulater av EL hovedsakelig dukket opp i cytoplasma. Tilstøtende noncancerous vev farget med (A) (× 400). Kreft vev farget med (B) (× 400).
Tabell 3 EL uttrykk i magekreft og tilstøtende noncance Rous prøver Book n
uttrykk for EL protein

P
Negativ
Positiv
tilknytning kontroll
12
fire (33%)
8 (67%)
0,67
mage~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP
12
fem (42%)
7 (58%)
Tabell 4 EL uttrykk og clinicopathological faktorer i mage kreft vev
clinicopathological

n
EL
P
Negativ
Positiv
Kjønn
Mann
6
2
4
0,56
Kvinne
6
3
3
Alder (år)
≤50
3
1
2
0,74
> 50
9
4
5
Lauren klassifisering
Tarm
5
3
2
0,28
Diffuse
7
2
5
Histologisk typen
svært differensiert
en
1 0
0,36
Moderat differensiert
4
2
2
Dårlig differensierte
7
2
5
Tumor etapper
I og II
2
1 1
0,79
III og IV
10
4
6
Dybde invasjon
T1 og T2
5
2
3
0,92
T3 og T4
7
3
4
lymfeknutemetastaser
Positive
3
1 2
0,74
Negative
9
4
5
Vi målte EL uttrykk nivåer i sera av de 12 mage kreftpasienter versus
de av 12 friske personer (figur 1C). Det kan sees at det ikke er klart skille mellom kreftprøver og den friske kontrollgruppen (Mann-Whitney test, P
= 0,79). Vi merker oss at EL uttrykk nivåer har et bredt spekter fordeling i begge sett av prøver.
Diskusjon
I vår forrige undersøkelse, har vi utviklet en ny beregningsmåte og brukt den til å forutse at EL potensielt kan tjene som en svært lovende diagnostisk urin markør for magekreft. Her har vi ytterligere bekreftet denne spådommen på større prøvesett, og i tillegg har vi oppdaget at EL protein er svært spesifikke for magekreft.
EL er et nytt medlem av triglyserid lipase genet familie, og har høy sekvens homologi med lipoprotein lipase (LPL) (45%), hepatisk lipase (HL) (41%) og pankreatisk lipase (PL) (21%) [19, 20]. EL har først og fremst en fosfolipase og har noen triglycerid lipase-aktivitet, som har en viktig rolle i plasma lipoproteiner med høy tetthet metabolisme og aterosklerose utvikling [21-25]. Flere studier har vist at LPL spiller en viktig rolle i karsinogenese og endetarms og bukspyttkjertel kreft og lungekreft [26, 27]. Imidlertid har EL ikke blitt rapportert å være assosiert med en hvilken som helst kreft med unntak av testikkelkreft bakterie celle svulster, mens mekanismen er uklar [28].
Oppdagelsen av at ekspresjonsnivåene av EL er betydelig redusert i urinen hos magekreftpasienter , samtidig viser ingen forskjell mellom de tilsvarende serumprøver samt vevsprøver er veldig spennende. En mulig årsak kan være på grunn av egenskapene til den glomerulære filtreringssystem. Det er kjent at plasmaproteiner ble filtrert gjennom glomeruli på grunnlag av deres størrelse, kostnader og struktur formen [29]. Små og positivt ladede molekyler ble lettere filtrert i urin enn store og negativt ladede proteiner. Sekvensen av EL har en rekke positivt ladede grupper [30], som kan være en grunn til at det kan filtreres ut i friske menneskers urin. Imidlertid er mikromiljøet av kreftcellene har en tendens til å være mer sure [31], som kan potensielt forandres positivt ladede grupper med els til negative, følgelig hindrer molekylene fra å bli filtrert ut i urinen. Riktignok er den nøyaktige grunnen ennå å bli forstått, og garanterer videre studier.
Urin er en ideell non-invasiv kilde for kreft gjenkjenning. Imidlertid bør det bemerkes at urin har en høy grad av variasjon i proteinkonsentrasjoner i løpet av en dag, som kan bli påvirket av ulike faktorer (alder, diett, og samling tid). Av denne grunn er det en nøkkel for å normalisere proteinkonsentrasjonen i urinen ved å måle ekspresjonsnivåene av protein. Derfor brukte vi de relative EL uttrykket nivåer med hensyn til den av urin-kreatinin i hver prøve for å normalisere EL uttrykk nivåer på tvers av forskjellige urinprøver. Resultatene av denne studien viser at tapet av urin EL-ekspresjonen kan gi en foreløpig indikasjon på magekreft i løpet av stor-skala screening og mer direkte undersøkelser som gastroskopi og patologi test på biopsiprøve vil være nødvendig for den endelige diagnose. Mange studier rapporterer at diagnostisk biomarkør kan være et nyttig prognostisk og overlevelse indikator for mage kreft [32-34]. Det var ikke bare å forutsi prognose informasjonen av kreftpasienter, men også for å tilveiebringe behandlingsstrategien for legen. Så vi undersøkt sammenhengen mellom EL uttrykk nivåer og clinicopathological egenskaper i magekreft. Selv om EL gjør en lovende diagnostisk markør for magekreft, fant vi ikke noen sterke relasjoner mellom EL uttrykk nivå og svulsten prognostiske clinicopathological egenskaper som for eksempel tumor type, invasjon og TNM staging. I tillegg, på grunn av den korte varigheten av studiet og mangel på regelmessig oppfølging av pasienter, kan vi ikke vurdere overlevelsesraten i denne studien. De begrensede eksisterende data viste at EL uttrykk ikke kan brukes som et nyttig prognostiske og overlevelsesindikatorer for magekreft. Den neste studien, etter Konklusjon rettet vi å undersøke EL protein uttrykk i større antall pasienter med forskjellige svulster og dens følger opp studier, og å utforske nøyaktig mekanismen av EL rolle i kreftutvikling av magekreft.
In konklusjon, selv om det ikke er knyttet til tumorstadium eller klasse, kan urin EL være en svært lovende magekreft biomarkør som kan være aktuelt for store screenings med høy diagnostisk nøyaktighet.
Merknader
Xueyan Dong, Guoqing Wang bidratt likt til dette arbeidet
Forkortelser
EL.
endotel lipase
ROC:
Receiver opererer karakteristikk

AUC:
Arealet under ROC-kurven
Erklæringer
Takk
Vi takker Xiaoming Xu for hans bidrag, Institutt for patobiologi laboratorium, Norman Bethune Medical College Jilin University. Dette arbeidet ble støttet av National Institutes of Health (1R01GM075331), "Distinguished Scholar" stipend fra Georgia Cancer Coalition, og frø finansiering fra University of Georgia. Det ble også støttet delvis av National Basic Research Program of China (973 program, 2011CB512003), Natural Science Foundation National of China (81271897 og 81071424), Specialized forskningsfond for doktorgradsutdanning av høyere utdanning i Kina (20110061120093), Kina Postdoktor Science Foundation (20110491311 og 2012T50304), Stiftelsen for Jilin Provincial Health Department (2011Z049) og Bethune spesiell fundament av Jilin universitet
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes originale innsendte filer for bilder . Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Clinicopathological egenskaper og prognostisk analyse av Lauren klassifisering i gastrisk adenokarsinom i Kina
• MikroRNA-206 undertrykker magekreft cellevekst og metastasis