Den endotel lipase protein er lovende urin biomarkør til diagnosticering af gastrisk cancer

Den endotel lipase protein er lovende urin biomarkør til diagnosticering af mavekræft
Abstract
Baggrund
mavekræft er en af ​​de mest almindelige maligne tumorer i verden . Finde effektive diagnostiske biomarkører i urin eller serum ville repræsentere den mest ideelle løsning til at opdage mavekræft under årlig fysisk undersøgelse. Denne undersøgelse var at vurdere potentialet af endothelial lipase (EL) som en urin biomarkør til diagnosticering af gastrisk cancer. Salg Fremgangsmåder
Ekspressionsniveauerne for EL blev målt ved anvendelse Western blotting og immunhistokemisk farvning eksperimenter på (væv, serum, og urin) prøver af mavecancerpatienter versus
raske mennesker. Vi kontrollerede også EL niveauer i urinprøver af andre typer kræft (lunge, tyktarm og endetarm kræft) og benigne læsioner (gastritis og gastrisk leiomyom) for at kontrollere, om EL var specifik for mavekræft.
Resultat
Vi observerede en klar adskillelse mellem EL ekspressionsniveauerne i urinprøverne på 90 mavecancerpatienter og 57 raske frivillige. Det var cirka 9,9 gange gennemsnitlige fald i EL ekspressionsniveauerne i urinprøverne af mavekræft i forhold til de raske kontroller (P
< 0,0001), at opnå en 0,967 AUC værdi for ROC (modtager opererer karakteristik) kurve, der viser det er meget nøjagtig som en diagnostisk markør for mavekræft. Interessant, ekspressionsniveauerne af EL i væv og serumprøver var ikke nær så diskriminerende som i urinprøver (P
= 0,90 og P
= 0,79). I immunhistokemiske eksperimenter blev positiv ekspression af EL protein, der findes i 67% (8/12) af gastrisk hosliggende noncancerous og i 58% (7/12) af gastrisk cancer prøver. Der var ingen signifikant statistisk i ekspressionsniveauerne af dette protein mellem mavekræft og matchende noncancerous væv (P
= 0,67).
Konklusioner
urin EL som en meget nøjagtig mavekræft biomarkør, der er potentielt ., der gælder for den generelle screening med høj følsomhed og specificitet
Virtuelle Slides
den virtuelle slide (er) for denne artikel kan findes her: http:... //www diagnosticpathol nologi diagnomx eu /vs /4527331618757552
Nøgleord
endotel lipase Biomarkør mavekræft Diagnose Baggrund
mavekræft er en af ​​de mest almindelige maligne tumorer i verden, der repræsenterer den tredje hyppigste årsag til kræft dødsfald hos mænd og den femte hyppigste årsag hos kvinder [1]. Ca. to tredjedele af gastrisk kræfttilfælde forekommer i mindre udviklede lande, som næsten tre gange højere per capita end i de udviklede lande, såsom de europæiske lande og Nordamerika [2]. Mavekræft har høj dødelighed, da det har ingen tydelige kliniske symptomer i den tidlige fase. Undersøgelser tyder på, at hvis tumor blev opdaget og resektion på det tidlige stadium, den gennemsnitlige 5-års overlevelse er relativt høj [3, 4]. Derfor er tidlig diagnose og behandling udgør en nøgle til at forbedre prognosen for mavecancerpatienter.
Selvom stor mængde indsats er blevet lagt i teknologiudvikling for at lette diagnose ved hjælp gastroskopi og immunhistokemisk analyse, den invasive karakter af disse procedurer gør det upraktisk for storstilet screening for mavekræft. Effektive diagnostiske biomarkører i urin eller serum ville repræsentere den mest ideelle løsning på problemet, som gør det muligt at teste for mavekræft gennem blod- eller urinprøver under årlige fysiske undersøgelser. er blevet foreslået adskillige diagnostiske serummarkører til gastrisk cancer, såsom MG7-Ag [5], carcinoembryonisk antigen (CEA), MUC1 og MUC5AC [6]. Den topmoderne er, at stort set alle af dem lider af temmelig lave følsomheder og særlige i kræftdiagnose, og derfor ikke har været udbredt klinisk [7]. Sammenlignet med væv og serum, urin samling er forholdsvis lettere og mindre invasiv. Det kan være mere egnet til store screening skala for kræft påvisning [8]. Brug komparative proteomikanalyser, har en række potentielle urin biomarkører blevet foreslået og godt testet for andre typer af kræft, såsom cystatin B og clusterin for blærekræft [9, 10], kulsyreanhydrase IX og cathepsin D for nyrekræft [11, 12], og ADAM12 for brystkræft [13]. For gastrisk cancer, er blevet rapporteret adskillige biomarkører, såsom pepsinogen I, prostaglandin E2, og opløseligt c-erbB-2 [14-16]. Den egentlige diagnostiske evne til mavekræft er endnu ikke grundigt vurderet, da de ikke er blevet meget udbredt i klinisk diagnostisk. Derfor er der klart et presserende behov for identifikation og validering af nye og pålidelige diagnostiske markører for screening mavekræft.
Vi har tidligere gennemført et system biologi undersøgelse for at identificere potentielle kandidatlande biomarkører til diagnosticering af mavekræft. I denne undersøgelse, analyserede vi de gen-udtryk data på 80 par af mavekræft væv og tilstødende ikke-kræft væv indsamlet fra mavecancerpatienter hjælp microarray chips, og identificeret hundredvis af differentielt udtrykte gener i cancer versus
kontrol væv [17 ]. Vi derefter trænet en støtte vektor maskine (SVM) baseret klassificeringen til at forudsige, hvilke af disse differentielt udtrykte gener kan have deres proteiner udskilles med urinen. Blandt det forudsagte ekskretionsorganerne protein, fandt vi EL viser høj diskriminerende effekt i form af sit udtryk i urinprøver fra mavecancerpatienter versus
raske mennesker [18].
Her vi udvide vores tidligere undersøgelse har til formål at (a) yderligere bekræfter, at EL har høj diskriminerende magten mellem urinprøver af gastrisk kræftpatienter og raske mennesker over en større sæt prøver, og (b) viser, at EL er meget specifik for mavekræft ved at sammenligne sine mængderne i urinprøver af mavekræft med andre kræft typer og godartede læsioner.
Metoder
prøvetagning
Alle prøver blev indsamlet på tre hospitaler i Jilin University Norman Bethune Medical College, Changchun, Kina og på Cancer Hospital tilknyttet Xinjiang Medical University, Urumqi, Kina. De gastrisk kræft væv og de matchende ikke-kræft væv blev kirurgisk resektion fra mavecancerpatienter. Serum og morgen random-fangst- urinprøver blev opnået fra cancerpatienter inden operation. Disse Prøverne blev indsamlet i løbet af perioden fra marts 2011 til september 2012. I alt 90 gastriske kræfttilfælde (67males og 23 kvinder, aldersgruppe: 31-85 år) og 57 raske frivillige (30 mænd og 27 kvinder; aldersgruppe : 29-76 år) blev undersøgt. De mavekræft sager blev diagnosticeret ved histologiske analyser tarm og diffus type i henhold til Lauren klassificering. Desuden blev urinprøver opnået fra 9 lungekræftpatienter, 10 fra kolon kræftpatienter, 10 rectum kræftpatienter, 2 gastritis patienter, og 2 gastriske leiomyom patienter, som anvendes til at kontrollere, om EL er specifik for mavekræft. Følgende kriterier blev anvendt i prøvetagningen: (i) kræftpatienter bør ikke have startet nogen behandling på deres kræft; og (ii) frivillige i raske kontrolgruppe bør ikke have nogen alvorlig systemisk sygdom i fortiden. Et skriftligt informeret samtykkeerklæring blev underskrevet af hver deltager, efter at de blev informeret om formålet med undersøgelsen, som blev godkendt af de videnskabsetiske komitéer på Jilin University College of Medicine og Xinjiang Medical University, hhv. Tabel 1 opsummerer informationen af ​​de raske frivillige og patienter, der er involveret i denne study.Table 1 Oplysningerne om raske frivillige og patienter, der er involveret i denne undersøgelse
Egenskaber
Tissue
Serum

Urin
mavekræft
12
12
90
Mean alder (interval)
60 (42-76)
63 (84-39)
60 (31-85)
Køn
Mand
6
7
67
Female
6
5
23
Tumor placering
Cardia
3
2
39
Body
5
6
26
Antrum
3
4
16
Diffuse
1
0
9
Operation
Total gastrektomi
4
5
29
Subtotal gastrektomi
8
7
61
Lauren klassifikation
Intestinal
5
4
39
Diffus
7
8
51
Histologi typen
høj eller moderat
5
5
43
Dårlig eller udifferentieret
7
7
47
Tumor stadier
Ι og ΙΙ
2
4
31
ΙΙΙ og ΙV
10
8
59
dybde invasion
T1 og T2
5
9
30
T3 og T4
7
3
60
Knude status
n0
3
3
29
N1 og N2
9
9
61
Metastase status
M0
5
10
71
M1
7
2
19
Lungekræft -
-
9
Mean alder (interval)
46 (42- 57)
Tyktarmskræft -
-
10
Mean alder (interval)
53 (46-65)
endetarm kræft -
-
9
Mean alder (interval)
62 (47-78)
Sund
12
12
57
Mean alder (interval)
60 (42 -76)
54 (41-72)
47 (29-76)
Gastritis /Kronisk betændelse -
-
2
Mean alder (interval)
56 (43-69)
Gastritic leiomyom
2
Mean alder (interval) -
-
56 (51-62)
Western blotting analyse
vævene blev formalet til pulver i flydende nitrogen og derefter lyseret i protein ekstraktionspuffer [0,5 mol /L Tris · Cl (pH 7,4), 150 mmol /l NaCl, 0,1 mmol /l ethylendiamin tetra aceticacid (EDTA) (pH 7,0) , 1 mmol /l phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF), 2,5 mg /ml aprotinin, 1 mmol /l dithiothreitol (DTT), 1% Triton X-100, 1% natriumdeoxycholat (SDS)]. Alle reagenser blev købt fra Beyotime (Beyotime, Shanghai, Kina). Serum- og urinprøver blev opbevaret i nærvær af proteaseinhibitor (Roche, Basel, Schweiz) sterile beholdere og centrifugeret (1.000 x g i 10 minutter ved 4 ° C) for at fjerne cellulære komponenter. Supernatanterne blev opsamlet og opbevaret ved -80 ° C (den længste opbevaring i 6 måneder). 2 ml urinprøver blev dialyseret mod destilleret vand gennem en filtreringsmembran (Dinguo, Beijing, Kina) af 8. kDa cutoff ved 4 ° C og derefter frysetørret ved -20 ° C. Frysetørrede urinprøver blev resuspenderet i 10 mM phosphatbufret saltvand (PBS) (pH 7,5). Proteinkoncentrationer blev målt under anvendelse af BCA Protein Assay Kit (Beyotime, Shanghai, Kina). Urinary kreatinin niveauer blev kvantiseret ved alkalisk picrat metode (Jaffe reaktion) med kreatinin en rutinemæssig test semi-Autoanalyser (Vital Micro 300, Holland).
Western blot blev anvendt til at måle ekspressionsniveauerne af EL. 20 ug af totale proteiner blev anvendt i forsøget. Alle prøver blev separeret ved anvendelse 4-15% SDS-PAGE (Bio-Rad Laboratories Inc., USA) og overført til en PVDF-membran (Bio-Rad Laboratories Inc., USA). Membranen blev inkuberet i 5% mælk blokeringsopløsning i 2 timer ved stuetemperatur. Membranen blev inkuberet med et polyklonalt gede-anti-humant EL primært antistof (1: 400; Santa Cruz Biotechnologies, USA) ved stuetemperatur i 1 time, hvilket blev vasket tre gange i 5 minutter i phosphatpufret saltvand (PBS) og derefter omsættes med en kanin-anti-gede-sekundært antistof (1: 5000; Beyotime, Shanghai, Kina). For væv, β-actin-antistof (1: 1000; Santa Cruz Biotechnologies, USA) blev recubated at sikre lige belastning. Ved afslutningen blev membranen dækket helt med et tilsvarende beløb af forstærker og peroxid løsning fra en ECL plus Kit (Beyotime, Shanghai, Kina) i 1 minut, og derefter alle membraner blev udsat for filmen. Densiteten af ​​bånd blev kvantificeret under anvendelse Gel Billede System (Tanon, Shanghai, Kina). Det faste beløb på 1 ng renset EL standard (R &D Systems, Inc., USA) blev anvendt som en positiv kontrol for kalibrering. Med hensyn til de variationer i urinen dannelse og udskillelse, densitometri af EL fra urin blev udtrykt i forhold til urin kreatininkoncentrationer.
Immunhistokemi
Til måling ekspressionsniveauerne af EL i kræft versus
tilstødende noncancerous kontrol væv, begge typer af væv blev fikseret i 12-16 timer i 4% paraformaldehyd (pH 7,0), indlejret i paraffin og skåret i 4 um tykke snit. Plus objektglas blev bagt ved 60 ° C i 30 minutter. Paraffin blev fjernet under anvendelse xylen i 30 minutter, og blev snittene rehydreret gennem en række alkoholopløsninger før behandling med 1 mM citronsyre, pH 6,0, ved 100 ° C i 5 minutter og med 1% H 2O 2 i 30 minutter. Efter at være blevet vasket med destilleret vand, blev snit inkuberet ved stuetemperatur med 5% porcin sera i PBS i 30 minutter, og EL-antistof (1: 400; Santa Cruz Biotechnologies, USA) fortyndet i PBS natten over ved 4 ° C, vasket tre gange i 5 minutter i PBS. Bundne antistoffer blev visualiseret med farven reagens Diaminobenzidin (Bios, Beijing, Kina). Snittene blev modfarvet med Mayers hæmatoxylin. To patologer uden viden om patienternes kliniske status vurderet alle de farvede sektioner uafhængigt. Cellerne blev talt ved stor forstørrelse i hvert tilfælde (× 400), og procentdelen af ​​positivt farvning af celler blev beregnet. Andelen af ​​celler, der udviser EL ekspression blev kategoriseret som følger: 0 = mindre end 10%; 1 = 11% -50%; 2 = 51% -75%; 3 = mere end 75%. Den farvningsintensitet blev kategoriseret efter relativ intensitet som følger: 0 = negativ; 1 = svag; 2 = mellemliggende; 3 = stærk farvning. Andelen og intensitet scoringer blev derefter ganget at have en samlet score indeks. Pr statistisk analyse blev scorer lavere end 2 betragtes som negative, og snesevis af 2 eller højere blev betragtet som positive.
Statistisk analyse
chi-square test og Wilcoxons signed rank testen blev anvendt til at analysere ekspressionsniveauerne af EL i den parrede kræft og noncancerous vævsprøver. For at analysere forskellen EL ekspressionsniveauer i serum og urinprøver mellem mavecancerpatienter og raske kontroller henholdsvis blev Mann-Whitney test anvendt. Den chi-square test blev anvendt til at vurdere forholdet mellem urin EL ekspressionsniveauerne og klinisk-patologiske variabler. Den kræsne magt ekspressionsniveauerne af EL i urin mellem prøver fra kræft og kontrolgruppen blev undersøgt ved hjælp af receiveren opererer karakteristik (ROC) kurve og arealet under ROC-kurven (AUC). Alle tests var tosidet og en P
-værdi < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af GraphPad Prism 5 statistisk software.
Resultater
EL ekspressionsniveauerne i urinen Hus Til den semi-kvantitativ analyse af urin proteiner, vi brugte relative EL ekspressionsniveauerne i forhold til den for urin kreatinin i hver prøve at normalisere EL udtryk på tværs af forskellige urinprøver. Vi observerede en klar adskillelse mellem de EL ekspressionsniveauerne i urinprøverne på 90 patienter mavekræft (1,39 ± 0,68) og af 57 raske frivillige (0,14 ± 0,32). Vi observerede en ca. 9,9 gange gennemsnitlige fald i EL protein niveauer i urinprøver fra mavecancerpatienter sammenlignet med raske kontroller (P
< 0,0001). Resultaterne kan ses i figur 1A og 2A. Vi har plottet ROC-kurven for klassificeringen nøjagtighed ved hjælp af EL ekspressionsniveauerne på tværs af alle disse urinprøver, for at give et samlet overblik over den kræsne magt af proteinet. Bemærk, at AUC tilbyder en bredt accepteret indeks for måling af kvaliteten af ​​den underliggende klassifikator med AUC = 1,0 repræsenterer perfekt klassificering og AUC = 0,5 repræsenterer ingen adskillelse. EL har opnået en AUC-værdi på 0,967 med 95% konfidensinterval (CI) er [0,942-0,993], hvilket indikerer, at urin EL kan tjene som en yderst lovende mavekræft biomarkør for den diagnostiske formål (figur 2B). Figur 1 Et repræsentativt Western blot-analyse af EL-protein overflod. Positiv kontrol lane (+) indeholdt det kommercielle EL standardprodukt, der blev anvendt til at normalisere signalet respons på tværs af alle geler. (A), Den overflod af EL protein på urinprøver; (B), EL overflod på kræft vævsprøver og matchende noncancerous prøver fra mavecancerpatienter uden behandling. Den β-actin tjener som en intern ladningskontrol til estimering af de relative protein overflod niveauer; (C), EL protein overflod i serumprøver.
Figur 2 Urinary EL protein mængderne i mavecancerpatienter versus raske kontrolpersoner. Hvert datapunkt er en person. (A), EL overflod i prøver af gastrisk kræftpatienter betydeligt lavere end i prøver fra raske kontroller; (B), ROC kurver af urin EL-protein. AUC-værdi var 0,967.
Vi bemærker, at EL-båndet i Western blot var fraværende i urinprøver fra 71 af 90 gastrisk patienter kræft og alle de 57 raske frivillige har EL-båndet i deres urinprøver. Brug af fravær /tilstedeværelse af EL båndet som cutoff i at kalde en person, der har mavekræft eller ej, ovennævnte data giver anledning til en kaldende sensitivitet ved 79% [95% CI, 0,690-0,867] og specificitet på 100% [95% CI, 0,937-1,000].
Vi undersøgte derefter EL ekspressionsniveauerne i urinprøver fra mavens kræftpatienter og dens forhold til de forskellige klinisk-patologiske faktorer, nemlig køn, histologi differentiering, tumor stadie, invasion, og metastase status. kan påvises nogen signifikante statistiske sammenhænge mellem EL ekspressionsniveauerne og nogen af ​​disse faktorer. Sammenhængen mellem urin EL ekspressionsniveauerne og klinisk-patologiske faktorer er præsenteret i tabel 2.Table 2 Sammenhæng mellem urin EL udtryk og klinisk-patologiske træk
klinisk-patologisk (n)
EL fraværende (%)

EL stede (%)
P Vejviser n = 71
n = 19
Køn
Mand, (67)
51 (72)
16 (84)
0,27
kvinde, (23)
20 (28)
3 (16)
Histologisk typen
høj eller moderat, (43)
31 (44)
12 (63)
0,13
Dårlig eller udifferentieret, (47)
40 (56)
7 ( 37)
Lauren klassificering
Intestinal, (39)
29 (41)
10 (53)
0,36
Diffuse, (51)
42 (59)
9 (47)
Tumor stadier
Ι og ΙΙ, (31)
22 (31)
9 (47)
0,18
ΙΙΙ og ΙV, (59)
49 (69)
10 (53)
dybde invasion
T1 og T2, (30)
21 (30)
9 (47)
0,14
T3 og T4, (60)
50 (70)
10 (53)
Knude status
Fraværende, (29)
23 (32)
6 (32)
0,95
Present, (61)
48 (68)
13 (68)
Metastase status
M0 (71)
55 (77)
16 (84)
0,52
M1 (19)
16 (23)
3 (16)
Vi har også kontrolleret, hvis EL er specifik for mavekræft. Som en indledende indsats, har vi undersøgt EL ekspressionsniveauerne i urinprøver fra tre andre typer kræft (lunge, tyktarm og endetarm kræft) og benigne læsioner (gastritis og gastrisk leiomyom). Testen blev udført på urinprøver fra 9 lungecancer, 10 coloncancer, 10 rectum cancer, 2 gastritis, og 2 gastriske leiomyoma patienter. Tydeligt kan vi se, at 9 ud af 9, 9 ud af 10, 10 ud af 10, 2 af 2, og 2 ud 2 prøver har EL-båndet i urinprøver fra lungekræft, coloncancer, rektumcancer, gastritis og gastriske leiomyom patienterne (figur 3). Selv om dette resultat ikke garanterer, at manglen på EL i urin er en indikator for kun mavekræft, betyder det kraftigt, at EL er meget specifik. Større prøver vil blive gjort i vores opfølgende studie, som vil involvere betydeligt flere patienter på andre sygdomme muligvis relaterede til mavekræft, såsom kræft i bugspytkirtlen og spiserøret kræft. Figur 3 EL mængderne i urinprøver af andre typer kræft og benigne læsioner. (A), Ni lungekræft prøver; (B), Ti tyktarmskræft prøver; (C), Ti rektale kræftformer prøver; (D), to gastritis og to gastritic leiomyoma prøver. (+) Den positive kontrol lane.
El ekspressionsniveauer i væv og sera
Undersøgelsen viser, at EL proteinet er fraværende i gastrisk cancer urinprøver. I betragtning af at urin indeholder både protein secerneres fra urothelium samt proteiner fra plasmaet eller cellelyse, har vi også undersøgt EL ekspressionsniveauer i væv eller serum fra mavecancerpatienter formål at udlede grundene til denne observerede fravær. Western blot blev udført for at måle EL ekspressionsniveauer i cancer vævsprøver og matchning noncancerous prøver fra 12 ubehandlede mavecancerpatienter (figur 1b). blev ikke observeret nogen signifikant forskel i ekspressionsniveauerne af EL mellem gastrisk kræft vævsprøver og matchende noncancerous prøver (Wilcoxons signed rank test, P
= 0,90). Salg In immunhistokemiske farvning eksperimenter, fandt vi, at de brune granulat overvejende optrådte i cytoplasmaet (figur 4). Positiv ekspression af EL-proteinet blev fundet i 58% (7/12) af gastrisk cancer og i 67% (8/12) af gastriske hosliggende noncancerous prøver (tabel 3). Der var ingen forskel i ekspressionsniveauerne af dette protein mellem mavekræft og matchende noncancerous væv (chi-square test, P
= 0,67). Vi undersøgte også eventuelle forhold mellem EL ekspressionsniveauerne og potentielt relevante klinisk-patologiske faktorer nævnt tidligere. Ingen forhold blev opdaget. Resultaterne er vist i tabel 4. Figur 4 Immunohistokemisk analyse af EL i væv af gastrisk cancer og matchende noncancerous prøver. De brune granulat af EL overvejende dukkede op i cytoplasma. Tilstødende noncancerous væv farvet med (A) (× 400). Kræft væv farvet med (B) (× 400).
Tabel 3 EL udtryk i mavekræft og tilstødende noncance Rous prøver
n
udtryk for EL protein

P
Negativ
Positiv
Tilstødende kontrol
12
4 (33%)
8 (67%)
0,67
mavekræft
12
5 (42%)
7 (58%)
tabel 4 EL udtryk og klinisk-patologiske faktorer i gastrisk kræft væv
klinisk-patologisk

n
EL
P
Negativ
Positiv
Køn
Mand
6
2
4
0,56
Female
6
3
3
Alder (år)
≤50
3
1
2
0,74
> 50
9
4
5
Lauren klassifikation
Intestinal
5
3
2
0,28
Diffus
7
2
5
Histologisk typen
Meget differentieret
1
1
0
0,36
Moderat differentieret
4 fotos 2
2
Dårligt differentierede
7
2
5
Tumor stadier
I og II
2
1
1
0,79
III og IV
10
4
6
dybde invasion
T1 og T2
5
2
3
0,92
T3 og T4
7
3
4
lymfeknudemetastase
Positiv
3
1
2
0,74
Negativ
9
4
5
Vi målte derefter EL ekspressionsniveauerne i sera fra 12 gastrisk patienter kræft versus
de 12 raske personer (Figur 1C). Det kan ses, at der ikke er nogen klar sondring mellem de kræft prøverne og den sunde kontrol (Mann-Whitney test, P
= 0,79). Vi bemærker, at EL ekspressionsniveauerne har en bred vifte fordeling i begge sæt prøver.
Diskussion
I vores tidligere undersøgelse har vi udviklet en ny beregningsmetode og anvendte det til at forudsige, at EL potentielt kunne tjene som en yderst lovende diagnostisk urin markør for mavekræft. Her har vi yderligere bekræftet denne forudsigelse om større prøvesæt, og derudover opdagede vi, at EL proteinet er meget specifik for mavekræft.
EL er et nyt medlem af triglycerid lipase gen familie, og har høj sekvenshomologi med lipoprotein lipase (LPL) (45%), hepatisk lipase (HL) (41%) og pankreas-lipase (PL) (21%) [19, 20]. EL har primært en phospholipase og har nogle triglycerid lipaseaktivitet, som har en vigtig rolle i plasma high-density lipoprotein metabolisme og atherosklerose udvikling [21-25]. Flere undersøgelser har vist, at LPL spiller en vigtig rolle i carcinogenese, herunder colorectal og pancreascancer, og lungekræft [26, 27]. Men EL ikke er blevet rapporteret, at være forbundet med nogen kræft undtagen testikulære kimcelletumorer, mens mekanismen er uklar [28].
Opdagelse, at ekspressionsniveauerne af EL reduceres betydeligt i urin fra mavecancerpatienter , mens den viser ingen forskel mellem de tilsvarende serumprøver samt vævsprøver er meget spændende. En mulig årsag kan skyldes egenskaberne af den glomerulære filtration system. Det er kendt, at plasmaproteiner blev filtreret gennem glomeruli på grundlag af deres størrelser, gebyrer og struktur form [29]. Små og positivt ladede molekyler blev lettere filtreret i urin end store og negativt ladede proteiner. Sekvensen af ​​EL har en række positivt ladede klynger [30], som kan være en grund til, at det kan filtreres ud i raske menneskers urin. Men mikromiljø kræftcellerne tendens til at være mere sure [31], som potentielt kan ændre sig positivt ladede klynger af EL-værdier til negative, dermed forhindre molekylerne bliver filtreret i urinen. Bestemt, den præcise årsag er endnu ikke forstået, og garanterer yderligere undersøgelser.
Urin er en ideel non-invasiv kilde til påvisning af kræft. Imidlertid bør det bemærkes, at urin har en høj grad af variabilitet i proteinkoncentrationer hele dagen, som kan påvirkes af forskellige faktorer (alder, kost, og indsamling tid). Af denne grund er det en nøgle til at normalisere proteinkoncentration i urin ved måling af ekspressionsniveauerne af protein. Derfor brugte vi de relative EL ekspressionsniveauerne i forhold til den for urin kreatinin i hver prøve at normalisere EL ekspressionsniveauerne tværs af forskellige urinprøver. Resultaterne af denne undersøgelse tyder på, at tabet af urin EL-ekspression kan tilvejebringe en foreløbig indikation af mavekræft under storstilet screening og mere direkte undersøgelser såsom gastroskopi og patologi test på biopsiprøve vil være behov for den endelige diagnose. Mange undersøgelser rapporterer, at diagnostisk biomarkør kan være en nyttig prognostisk og overlevelse indikator for gastrisk kræft [32-34]. Det var ikke kun at forudsige prognosen information af cancerpatienter, men også at give strategien behandling for lægen. Så vi undersøgte sammenhængen mellem EL ekspressionsniveauerne og klinisk-patologiske karakteristika i mavekræft. Selvom EL gør en lovende diagnostisk markør for mavekræft, har vi ikke finde nogen stærke relationer mellem EL ekspressionsniveauet og tumor er prognostiske klinisk-patologiske karakteristika såsom tumortype, invasion og TNM mellemstationer. På grund af den korte periode af undersøgelsen og manglende regelmæssig opfølgning af patienter, vi kan ikke vurdere overlevelsesraten i denne undersøgelse. De begrænsede eksisterende data viste, at EL udtryk ikke kan bruges som et nyttigt prognostiske og overlevelse indikatorer for mavekræft. Den næste undersøgelse, vi havde til formål at undersøge EL proteinekspression i større antal patienter med forskellige tumorer og dens opfølgning undersøgelser, og at udforske præcis mekanisme EL rolle i carcinogenese af mavekræft.
Konklusion Salg In konklusion, selv om det ikke er knyttet til tumor stadie eller klasse, kan urin EL være en yderst lovende mavekræft biomarkør, der kan gælde for store screeninger med høj diagnostisk troskab.
Noter
Xueyan Dong, Guoqing Wang bidrog ligeligt til dette arbejde
Forkortelser
EL:.
Endothelial lipase
ROC:
Receiver opererer kurve

AUC:
Arealet under ROC-kurven
erklæringer
Tak
vi takker Xiaoming Xu for hans bidrag, Institut for Patobiologi laboratorium, Norman Bethune Medical College Jilin Universitet. Dette arbejde blev støttet af National Institutes of Health (1R01GM075331), "Distinguished Scholar" bevilling fra Georgia Cancer Coalition, og startkapital fra University of Georgia. Det blev også delvist understøttet af National Basic Research Program Kina (973 program, 2011CB512003), National Natural Science Foundation of China (81.271.897 og 81.071.424), Specialized Forskningsfonden for ph.d.-programmet for videregående uddannelse i Kina (20110061120093), Kina Postdoc Science Foundation (20110491311 og 2012T50304), Foundation of Jilin provinsen Health Department (2011Z049) og Bethune særlige fundament af Jilin University
Forfattere 'oprindelige indsendt filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder . Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Klinisk-patologisk karakteristika og prognostisk analyse af Lauren klassifikationen i gastrisk adenocarcinom i Kina
• MicroRNA-206 undertrykker gastrisk vækst cancercellen og metastase