Izražanje in klinični pomen dolge nekodirajočega RNA HNF1A-AS1 v človeškega raka želodca

Izražanje in klinični pomen dolgoročnih nekodiran RNA HNF1A-AS1
in človeškega raka želodca
Abstract
Ozadje
Povečanje dokazov, je pokazala, da dolge RNA nekodiran (lncRNAs) igrajo bistveno vlogo pri nastanku in razvoj človeških raka, vključno z rakom želodca (GC). Vendar pa je funkcionalna in klinični pomen lncRNAs so še vedno slabo razumemo.
Metode
V tej študiji je bila izraz LncRNA HNF1A protismiselne RNA 1 (HNF1A-AS1
) z analizo lncRNAs mikromrež najprej preučiti 6 GC tkiva in potem smo nadalje preverili s realnem času kvantitativno reverzno prepisovanje PCR (QRT-PCR), oboje v 3. celičnih linijah GC in 161 primerov GC tkiv. Prav tako smo ocenili povezavo med HNF1A-AS1
izražanja in clinicopathological značilnosti bolnikov z GC.
Rezultati
LncRNAs mikromrež rezultatov analize razstavljene da HNF1A-AS1
je navzdol reguliranih v GCS tkiva (pomeni kratno spremembo 2,06 na strani
< 0,05), ki je nadalje potrdila QRT-PCR. Rezultati QRT-PCR je pokazala, da izraz HNF1A-AS1
ni bila navzdol reguliranih le v treh GC celičnih linijah (AGS, BGC-823 in podjetja MKN-45), glede na ki v normalnem želodčne sluznice epitelijskih celične linije ( GES-1), pa tudi zmanjšal GC tkiva v primerjavi z, ki v parnih sosednjih ne-neoplastične tkiva (nizko izražanja, 94 161, nizko stopnjo izražanja, 58,38%). Poleg tega je bila nizka HNF1A-AS1
izraz povezan s tumorsko velikost /premer (p
= 0,005, multivariatne analize), ravni serumskega karcinoembrionski antigena (CEA), in antigena ogljikovih hidratov 19-9 (CA19-9), and RRM1 izraz v vzorcih tkiv (p
= 0,028, P
= 0,009 in p
= 0,006, v tem zaporedju).
Sklepi PODJETJA
Če povzamemo, so naši podatki kažejo, da lncRNA HNF1A-AS1
lahko regulator GC, in s tem, da lahko ima potencial, da postane nova biomarker in cilje zdravljenja za to vrsto raka.
Ključne besede
rak želodca lncRNA HNF1A-AS1
biomarker Ozadje
rak želodca (GC) je eden izmed najpogostejših rakov in se lahko pojavijo v katerem koli delu človeškega želodca. Ti tumorji so pogosto maligne in imajo možnost, da napadejo perinevralni tkivo [1]. Podatki iz zadnje svetovne letne raziskave so pokazale, da je skoraj 1 milijon novih primerov in 740,000 smrti zaradi tega raka vsako leto po vsem svetu. Pojavnost GC na Kitajskem je višja kot v večini držav po svetu, z vsako leto več kot 400.000 novih primerov in približno 300.000 smrti. Študije so pokazale, da če se ta bolezen mogoče diagnosticirati v zgodnji fazi lahko dobro napoved doseči skozi celoten kirurški odstranitvi primarnega tumorja tkiva [2]. Na žalost, bolniki z GC kažejo nekaj simptomov v zgodnjih fazah bolezni in diagnoza je ponavadi težko. Stopnja preživetja 5-letno GC v poznejših fazah ostaja slaba in je trmast pri približno 30% [3]. Rak biomarkerji omogoči rak treba diagnosticirati in lahko služi kot terapevtske cilje, kakor tudi lahko uporabimo za raziskovanje patogenezo bolezni; Zato bi bilo ugotavljanje raka biomarkerjev biti zelo pomembna.
Dolgi nekodiranih RNA (lncRNAs) so nekodiranih RNA več kot 200 nukleotidov [4]. Te RNA ne kodira proteinov in so glavne sestavine človeškega transkriptoma [5]. Emerging dokazi kažejo, da so lncRNAs pomembne regulatorne molekule, katerih glavna naloge so povezane z modulacija genske ekspresije omrežij [6]. Mnoge od teh omrežij, ki so tesno povezana z razvojem raka in napredovanja [6-9]. Podatki iz različnih skupin so ugotovili, da so spremembe pri izražanju lncRNAs povezana z patogenezi raznih človeških rakavih obolenj. Nedavne ugotovitve Wang et al., Song et al., In Shao et al. so pokazali, da so spremembe v izražanju profilov lncRNAs povezana z želodčno kancerogenosti in napredovanja raka in da bi se lncRNAs uporabijo kot zgodnji biomarkerjev ali kot cilj zdravljenja za GC [10-12].
Da bi ugotovili nenormalno ekspresijo povezane s tumorjem lncRNAs in tiste lncRNAs s potencialnimi vrednostmi kot biomarkerjev, v tej študiji je bila lncRNAs izraz analiza profil mikromrež izvedena v šestih GC tkiva in njihove seznanjenih sosednjih non-neoplasticnih želodčnega tkiva. LncRNA HNF1A antisense RNA 1 (HNF1A-AS1
) je bil eden izmed LncRNAs, ki so bile ugotovljene za navzdol reguliranih v GC tkivih z analizo mikromrež. HNF1A-AS1
, eno- eksonu gena v pasu 12q24.31 kromosoma 12, je dvosmerni lncRNA od 2455 nukleotidov [13]. Transkripcijski Začetna stran tega lncRNA je zelo blizu tistemu iz jeter jedrske faktorja 1 alfa gena (HNF1A
; HNF1A-AS1
's startno mesto je približno 5 kb navzdol od HNF1A
) [13]. Kolikor nam je znano, izražanje HNF1A-AS1
v GC tkivih ostane neprijavljen. Zato je v tem delu, smo določili nivoje izražanja HNF1A-AS1
v 3. GC celičnih linijah in v 161 primerih GC tkiv in njihovih parnih sosednjih non-neoplastičnih želodčnega tkiva. Prav tako smo raziskali morebitno povezavo med izražanjem HNF1A-AS1
in clinicopathological značilnosti bolnikov z GC. Naši podatki kažejo na potencial tega lncRNA kot novega biomarkerja in cilj zdravljenja za GC.
Metode
vzorcev tkiv in klinični zbiranje podatkov
Sto šestdeset-one sveže paru vzorce tkiva (GC tkivo in ne -neoplastic tkiva zbrani 5 cm od roba raka v) so bili pridobljeni iz Splošne bolnišnice Fuzhou, Fujian, Kitajska, leta 2014 in 2015. Vse od vzorcev ni bil pridobljen takoj po kirurški poseg in se shranijo v RNAlater (Qiagen, Nemčija) pri -80 ° C C do uporabe. Vzorce seruma, ki se uporabljajo za odkrivanje serumu tumorskih biomarkerjev in vzorce tkiva, parafinski vgrajeni uporabljenih za detekcije Imunohistokemične markerjev zberemo tudi iz istih bolnikov. Vsak vzorec tkiva je histopathologically diagnosticirali in potrdili z vsaj dvema patologi. Standardi za tumorja-node-metastaz (TNM) fazi in histološko razreda so bili v skladu s smernicami Mednarodne zveze proti raku (UICC, 5. izdaja) in National Comprehensive Cancer omrežje je (NCCN) smernic klinične prakse pri onkologijo (V. 1,2011), oz. Nihče od bolnikov prejelo zdravljenje pred resekcijo.
Izjavo etiko
bil obveščen pridobili soglasje vseh posameznih udeležencev, vključenih v raziskavo, in ta študija je odobril Odbor za etiko Fuzhou General Hospital.
LncRNAs mikromrež test
lncRNAs mikromrež, ki se uporabljajo v tej študiji so človekove lncRNAs mikromrež V3.0 (Arraystar Inc., MD, ZDA), ki je bil sestavljen iz lncRNAs in mRNA iz človeškega genoma. lncRNAs mikromrež test in analizo podatkov smo izvedli s KANGCHEN Bio-tech (Šanghaj, Kitajska), ki temelji na navodilih proizvajalca.
celični kulturi
AGS, BGC-823, in MKN-45 GC celične linije in normalno človekovih želodca epitelnih celic linije (GES-1) so bili pridobljeni iz zbirke American Type Culture, Manassas, VA, Shanghai Institute of biokemijo in biologijo celice, kitajske akademije znanosti v Šanghaju, na Kitajskem, japonski Cancer Research banke in Beijing Cancer Institute ( Peking, Kitajska), v tem zaporedju. Celice gojimo v F12, RP1640 ali DMEM mediju (Invitrogen, Grand Island, NY, ZDA), od katerih so vsi vseboval 10% fetalni goveji serum, v inkubatorju pri 37 ° C s 5% CO 2.
Skupaj ekstrakcijo RNA in QRT-PCR
Skupaj RNA smo izolirali iz obeh tkiv in kultiviranih celic, s pomočjo TRIzola reagenta (Invitrogen). Reverzna transkripcija Nato smo izvedli s pomočjo reverzne Transcription komplet (Promega) v skladu z navodili proizvajalca. Realnem času kvantitativno reverzno transkripcijo PCR (QRT-PCR) je bila izvedena s kompletom za SYBR Green Mix (Promega, Madison, WI, ZDA) v koraku One Real-time PCR sistem (ABI, Grand Island, NY, ZDA) . Primerji za 18 let in HNF1A-AS1
qPCR so bili naslednji: (naprej) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'in (nazaj) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3 "za HNF1A-AS1
; (Naprej) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'in (nazaj) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3 "za 18 let. Pogoji za PCR so bili naslednji: stopnja 1, 95 ° C za 10 minut; faza 2, 40 ciklov pri 95 ° C za 15 sekund, 57 ° C 1 min; stopnja 3 (stopnja disociacije), 95 ° C za 15 sekund, 60 ° C za 15 sekund, 95 ° C za 15 sekund. Prag zabeležili cikel vrednosti (CT) je obsegal tako HNF1A-AS1
in 18 s; slednja služila kot kontrolo. Nivo izražanja HNF1A-AS1
je bila pridobljena po metodi ΔCt. Višje vrednosti ΔCt navedeno nižjega HNF1A-AS1
izraz. Rezultati so bili pridobljeni iz treh neodvisnih poskusov in izražena kot srednja vrednost ± standardni odklon (SD).
Merjenje AFP, CA-125, CEA in koncentracije CA19-9 v serumu bolnikov z GC
koncentracijah alfa-fetoproteina (AFP), karcinoembrionski antigena (CEA), antigena raka 125 (CA-125), in antigena ogljikovih hidratov so bile 19-9 (CA19-9) v serumu vseh 161 primerov teh bolnikov skupine zazna s pomočjo od količinske Kit za tumorski marker (Protein Chip-Kemiluminescenca) (HealthDigit, Huzhou, Kitajska) s HD-2001a ChipReader sistema (HealthDigit). V tej študiji so bile normalne referenčne vrednosti za zdravih posameznikih < 20,0 ng /ml, < 5,0 ng /ml, < 35,0 U /ml in < 35.0 U /ml za AFP, CEA, CA-125 in CA19 -9 oz.
IHK
uporabili smo imunohistokemično (IHC) v parafinski vgrajeni oddelke za določanje ekspresije vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja (VEGF), humani receptorji epidermalnega rastnega faktorja 2 (Ci-erbB-2 in HER2 ), timidilatne sintaze (TS), rak dojk 1 (BRCA1), izrezu popravilo navzkrižno dopolnjevanje skupina 1 (ERCC1), Ki67 antigen (Ki67) in ribonukleotid reduktaze podenote M1 (RRM1), synaptophysin (Syn), nevronske celične adhezijske molekule (CD56) in chromogranin A (CGA); 150 primerov vzorcev, parafin vgrajeni tkiva teh bolnikov v skupini so bili na voljo za test IHC. IHK smo izvedli s patologi v skladu z navodili izdelovalcev. Protitelesa in drugi reagenti za IHC, uporabljene v tem delu so bile kupljene od Maixin (Fujian, Kitajska) in ZSGB-BIO (Peking, Kitajska). Z izjemo Ki67, je intenzivnost obarvanja ocenjena od 0 do 4, pri čemer 0 ne pušča madežev; 1 manj kot 25% celic pozitivna; 2, 25 do 50% celic pozitivnih; 3, 51-75% celic pozitivnih; in 4, > 76% celic pozitiven. Za Ki67 so bile stopnje neposredno ocenjuje kot odstotno pozitivno za Ki67 izražanja. Diapozitivi so ocenjena z najmanj dvema patologi.
Statistična analiza
statističnega programa za družbene vede (SPSS) 16,0 programske opreme (SPSS, Chicago, IL, ZDA) in GraphPad Prism 5.0 (GraphPad programske opreme, LaJolla, CA, ZDA ) smo uporabili za vse statistične analize. Enosmerna analiza variance (ANOVA), so test rang vsoto, in preskus t
študent Glavne statistične metode, uporabljene v tem delu, p
< 0.05 je bilo obravnavano kot statistično značilne.
Rezultati
eksponati analiza LncRNAs mikromrež, ki je HNF1A-AS1
izraz navzdol reguliranih v GCS tkivih PODJETJA
Kot je prikazano na sliki. 1, rezultati analize lncRNAs izraz profil mikromrež gotten iz šestih GC tkiv in njihove seznanjenih sosednjih non-neoplastične želodčnega tkiva razstavljen, ki je bil HNF1A-AS1
izraz navzdol reguliranih v vseh šestih GC tkiv (pomeni kratno spremembo 2,06, p
< 0,05), ki je pokazala, da imajo lahko ta lncRNA možnost, da se eden od LncRNAs povezanih s tumorji. Tako smo se odločili za nadaljnjo analizo. Fig. 1 HNF1A-AS1
je downexpressed v šestih GC tkivih, ki jih analizo lncRNAs mikromrež. 84C, 83C, 87C, 78c, 97C in 90C navedeno šest GC tkiva (84, 83, 87, 78, 97 in 90 so bile šest primerov števila tkiva, C
raka); 83N, 87N, 90N, 78N, 97N in 84N navedla šest ustreznim seznanjenih sosednje non-neoplastične želodčne tkiva (N
ne-neoplastične želodca tkiva). Analiza grozda na podlagi rezultatov mikromrež razstavljen, ki je bil HNF1A-AS1
izraz v GC tkivih navzdol reguliranih primerjavi z seznanjenih ne-neoplastične želodčnega tkiva (pomeni kratno spremembo 2,06, p
< 0,05)
qRT- PCR preverjanje potrjuje, da je HNF1A-AS1
izraz navzdol reguliranih v celičnih linijah GC in tkiv
smo najprej preiskati izražanje lncRNA HNF1A-AS1
v treh celičnih linijah GC: AGS, BGC-823, in podjetja MKN -45. Z uporabo QRT-PCR smo potrdili, da je izraz HNF1A-AS1
je bila bistveno nižja v vseh celičnih linijah tri GC glede na, da v normalnih želodčnih epitelnih celic (ges-1 celic; AGS, str
< 0,0001; BGC-823, str
< 0,05; MKN-45, str
< 0,05;. slika 2). Pregledali smo tudi HNF1A-AS1
izraz v vzorcih GC tkiva in seznanjen sosednjih vzorcev ne neoplastične tkiva. Naši rezultati so pokazali, da je bila HNF1A-AS1
navzdol reguliranih na 58.38% (94/161) v GC tkiv glede na, da v ne-neoplastične tkiva (p
< 0,01, slika 3.). Če povzamemo, ti podatki kažejo, da se HNF1A-AS1
navzdol reguliranih v človeški GC. Fig. 2 Zmanjšano izražanje HNF1A-AS1
v GC celic, glede na, da v normalnih želodčnih epitelijskih celic. QRT-PCR smo uporabili za primerjavo izražanje HNF1A-AS1
v BGC-823, MKN-45, in AGS GC celic, ki ne-neoplastične ges-1 celic. Prikazani podatki so iz treh neodvisnih poskusov in izražena kot srednja vrednost ± SD. Zvezdice
navesti vrednosti s statistično pomembne razlike v primerjavi z vrednostjo v celicah GES-1. * P
< 0,05, **** p
< 0,0001. GC
raka želodca, QRT-PCR
kvantitativni PCR v realnem času, SD
standardni odklon
Sl. 3. Izražanje HNF1A-AS1
v neoplastične in non-neoplasticnih želodčnega tkiva. Ekspresijo HNF1A-AS1
v GC tkivih smo primerjali s tisto pri sosednjih non-neoplastičnih tkiv (n
= 161, ** p
< 0,01). T
GC tkiva, n
ne-neoplastične tkiva. Podatki so prikazane iz treh neodvisnih eksperimentov in izrazili kot srednji ± SD (ΔCt vrednosti). GC
raka želodca, SD
standardni odklon
Zveza HNF1A-AS1
izražanja z clinicopathological značilnosti bolnikov z GC
za oceno kliničnih pomen HNF1A-AS1
, smo analizirali razmerje med njegovo ekspresijo in clinicopathological značilnosti bolnikov z GC. Kot je prikazano v tabelah 1 in 2, univariatne analize razstavljena, da izraz HNF1A-AS1
je bilo povezano s tumorsko velikost /premer (p
= 0,002), globina invazije (T fazah, str
= 0,032 ), limfna metastaze (N faze, p
= 0,006), venske invasion (p
= 0,001), in perinevralni invasion (PNI, p
= 0,014). Vendar pa je po nadzorovanje vpliva dejavnikov, kot so starost, spol, lokacija tumorja, velikosti tumorja /premer, diferenciacija, invazije (T stopenj), limfna metastaze (N stopenj), vensko invazije, in PNI je multivariatna analiza potrjuje, da je velikost tumorja vztrajali do bistveno povezana z HNF1A-AS1 izražanja (p
= 0,005), kar pomeni, da več kot 5 cm imeli bolniki z velikostjo tumorja nižjo stopnjo HNF1A-AS1. Ti podatki kažejo, da HNF1A-AS1
lahko igrajo vlogo pri nastanku raka in napredovanje in je lahko nov biomarker želodca cancer.Table 1 Združenje HNF1A-AS1 izražanja (ΔCt) z clinicopathological značilnosti bolnikov
značilnosti

No. primera (%)
povprečje ± SD
p
vrednosti
Starost (leta)
0,119
≥60
82 (50,9 )
16.17 ± 2.90
< 60
79 (49,1)
15.47 ± 2.71
Spol
0.688
Moški
123 (76,4)
15.78 ± 2.88
ženski
38 (23,6)
15,99 ± 2,66
Tumor lokacija
0.560
sinusov ventriculi
57 (35,4)
16,06 ± 3,13
Cardia
33 (20,5)
15,87 ± 3,04
Korpusi ventriculi
45 (28,0)
15,92 ± 2,50
DRUGI
26 (16,1)
15,11 ± 2,36
premer (cm)
0.002
≥5
73 (45,3)
16,59 ± 2,8
< 5
88 (54,7)
15,2 ± 2,70
Razlikovanje
0.396
No
2 (1.2)
16.15 ± 0,71
Zmerna
34 (21,1)
15,24 ± 2,66
Poor
125 (77,7 )
15,98 ± 2,87
Invasion
0.032
T1
13 (8.1)
16,13 ± 1,95
T2
14 (8.7)
14.09 ± 2.24
T3
16 (9,9)
14,85 ± 3,71
T4
118 (73,3)
16,13 ± 2,76
Limfna metastaze
0,006

n0
38 (23,6)
14,74 ± 2,77
N1-3
123 (76,4)
16,16 ± 2,76
Venska invazija
0.001
Odsotno
86 (53,4)
15.14 ± 2,58
Predstavite
75 (46,6)
16.61 ± 2.90
perinevralni invazijo (PNI)
0.014
odsoten
89 (55,3)
15.34 ± 2.77
Predstavite
72 (44,7)
16,43 ± 2,79
CEA
0.028
Normal
130 (80,7 )
15.59 ± 2.74
visoko
31 (19,3)
16,83 ± 2,97
CA19-9
0,009
Normal
140 (87,0)
15.60 ± 2.70
visoko
21 (13,0)
17,32 ± 3,22
AFP
0,936
Normal
150 (93.2)
15,82 ± 2,80
visoka
11 (6,8)
15,89 ± 3,25
CA-125
0,494
normalnih
154 (95,7)
15,79 ± 2,84
Visoka
7 (4,3 )
16,55 ± 2,33
Poševno vrednote so pomembne pri p
< 0,05
Tabela 2 Primerjava vrednosti p
pridobljenih iz univariatne in multivariatne analize združenja HNF1A-AS1 izražanja (ΔCt) z clinicopathological značilnosti bolnikov
značilnosti
univariatne

multivariatnih
p
vrednost
p
vrednost
Starost (leta)
0,119
0,197
Spol
0,688
0,174
Premer (cm)
0.002
0.005
Diferenciacija
0,396
0,603
Invasion
0.032
0,580
Limfna metastaze
0,006
0,235
Venska invazija
0.001
0,057
perinevralni invazija (PNI)
0.014
0,192
tumorje lokacijo
0.560
0.342
Poševno vrednote so pomembne pri p
< 0,05
Združenje HNF1A-AS1
izražanja z serumu ali Imunohistokemične označevalcev GC
HNF1A-AS1
izražanja v GC tkivih je bila povezana z dvema serumskih markerjev tumorji prebavnega trakta, CEA (p
= 0,028) in CA19-9 (p
= 0,009), vendar ni bilo bistvene povezave z drugimi raka prebavnega trakta serum markerja AFP ali epitelijske tumor marker CA125 (tabela 1). Izraz HNF1A-AS1
v vzorcih tumorjev je bilo tudi značilno povezana z enim Imunohistokemične označevalce raka, RRM1 (p
= 0,006), vendar ne z VEGF, C-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn, ali CGA (tabela 3) .table 3 združenje HNF1A-AS1 izražanja (ΔCt) z immunohisochemical značilnosti GC tkiva
značilnosti
No. primera (%)
povprečje ± SD
p
vrednost
VEGF
0,809
0
15 (10,0)
15,27 ± 3,69
1
22 (14,7)
15,57 ± 2,92
2
33 (22,0)
15,83 ± 2,72
3
59 (39,3)
15,94 ± 2,54
4
21 (14,0)
16.39 ± 3.32
C-erbB-2
0.312
0
129 (86,0)
15,70 ± 2,84
1
5 (3.3)
16.37 ± 2.96
2
4 (2,7)
15.77 ± 1.01
3
12 (8,0)
17.30 ± 3.21
TS
0.543
0
22 (14,7)
16.41 ± 2.45
1
53 (35,3)
15,99 ± 2,97
2
52 (34,7)
15.33 ± 2.73
3
21 (14,0)
16,25 ± 3,34
4
2 (1.3)
15.92 ± 1.82
BRCA1
0,893
0
10 (6.7)
16,59 ± 1,83
1
31 (20,7)
16,07 ± 2,91
2
73 (48,6)
15,78 ± 2,57
3
34 (22,7)
15.61 ± 3.57
4
2 (1.3)
15,77 ± 5,01
ERCC1
0.585
0
19 (12,7)
15,81 ± 2,39
1
22 (14,7)
16.51 ± 3.61
2
44 (29,3)
15.96 ± 2,85
3
41 (27,3)
15.85 ± 3.05
4
24 (16,0)
15,11 ± 2,02
RRM1
0,006
0
81 ( 54,0)
15,79 ± 2,41
1
10 (6.7)
13,27 ± 4,11
2
17 (11,3)
15,51 ± 3,08
3
35 (23.3)
16,98 ± 2,93
4
7 (4,7)
15,48 ± 2,67
Ki67
0,328
1
14 (9.3)
16,54 ± 1.67
2
35 (23,3)
16,44 ± 2,79
3
57 (38,0)
15,48 ± 2,97
4
44 (29,4)
15.66 ± 3,02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15,99 ± 2,95
1
16 (10,7)
15.15 ± 2.17
2
3 (2.0)
13,98 ± 0,87
3
3 (2.0)
15,59 ± 3,06
CD56
0,364
0
137 (91,4)
15,94 ± 2,86
1
9 (6,0)
15,66 ± 3,09
2
2 (1.3)
12,72 ± 0,84
3
2 (1.3)
14,22 ± 0,97
CGA
0,980
0
141 (94,0)
15.87 ± 2.91
1
7 (4.7)
15.69 ± 1.83
2
2 (1.3)
15,63 ± 3,26
Poševno vrednote so pomembne pri p
< 0.05
Razprava
številni dokazi so pokazali, da spremembe v izražanju lncRNAs igrajo pomembno vlogo pri kancerogenosti in razvoj raka [14, 15], in je znano, da spremenjeno izražanje lncRNA se bistveno povezana z več clinicopathological značilnosti človeških tumorjev, kot bezgavkah metastaze, stopnji TNM, oddaljenih metastaz, in položaj diferenciacijo tkiva. Na primer, zmanjšano ekspresijo želodčnega raka povezana transkript 1 (GACAT1
) bistveno povezan z metastazami, invazija in diferenciacijo tkiva pri bolnikih z GC [16]. Poleg tega je povišana izraz homeobox (HOX) Prepis protismiselne RNA (HotAir
), dolgo medgenskega nekodirajočega RNA, povezana s stopnjo karcinoma endometrija (ES), metastaze, globine myometrial invazije, in slabša na splošno preživetja [17]. Nazadnje je nizko izražanje HMlincRNA717
v GC povezana z distalnim metastazami in invazije na venski in živčnega sistema [12]. Vse te ugotovitve so dokazi o pomembnih vlog lncRNAs v rakotvornosti ter potencialne vrednosti v svoji klinično uporabo.
V tej študiji smo ugotovili, da je raven izraz HNF1A-AS1
v treh želodčnih raka celičnih linijah signifikantno zmanjšala glede na to v normalnih želodčnih epitelijskih celic. Še pomembneje je, je navzdol reguliranih v 58.38% vzorcev želodčnega raka tkiva relativno tisti v sosednjih ne neoplastičnih tkiv. Ugotovitve Yang et al. kažejo, da je bil ta lncRNA povečana pri požiralnika adenokarcinom (EAC) [13]. Karcinogenezi in napredovanje raka je kompleksen patološki proces, ki poteka z izražanja genov omrežja. Rak pojav v različnih organov ali tkiv se lahko uredi z različno izraženih ravneh istih genov ali istih lncRNAs [18, 19]. To lahko pojasni, zakaj HNF1A-AS1
izkazuje različne profile izražanja v različnih vrstah rakavih celic. Nadaljnja preiskava morda potrebno razkriti natančen molekularni mehanizem za te razlike
Znano je, da je rak invazija in metastaze pogosto pojavi po treh skupnih poti. Bezgavko metastaze, potujejo skozi žilah in lokalno setev in rast. PNI je dodatno sredstvo invazije, ki je običajno povezana z lokalno ponovitvijo. Ker je lokalna ponovitev tesno povezano s slabo prognozo, identifikacijo bolnikov z velikim tveganjem za PNI ima velik klinični pomen.
Prognozo in preživetje bolnikov z GC lahko vpliva tudi na velikost tumorja, kar je povezano s svojim časom rasti. Manjše tumorji kažejo manj kršitev v želodcu, kot narediti večje tumorje. Poleg tega je povečana globina invazije z večjimi tumorji poveča verjetnost, da bo limfatičnega sistema kršena. Povečanje bezgavk metastaze omogoča rak lažje in rezultati v slabo prognozo rastejo.
Oba CEA in CA19-9 so dobro znani tumorski označevalci, ki so običajno molekul v vzorcih seruma ali tkiva pri bolnikih z zgodnjo ali primarnih malignih tumorjev prebavni trakt. RRM1 je eden od treh znano človeško ribonukleotid reduktaze s funkcijami za urejanje proliferacijo je rakavih celic preko posredovanja sintezo DNK in popravila, in odkrivanje izražanje RRM1 v GC tkivih po IHC je bilo ugotovljeno, da ima napovedni pomen pri bolnikih z GC [ ,,,0],20].
sklepe
Skratka, smo analizirali združenje ravni ekspresije HNF1A-AS1
z clinicopathological značilnosti bolnikov z GC. Naši rezultati so pokazali, da je bila ekspresija HNF1A-AS1
močno navzdol reguliranih tako GC tkiv in celičnih linij. Poleg tega se je zmanjšala izražanje povezan s tumorjem velikosti /premer in ravni serumskega CEA, CA19-9 in tkiva RRM1. Te ugotovitve kažejo, da HNF1A-AS1
lahko sodelujejo pri zatiranju želodca nastanku in razvoju raka in da ima potencial, da služijo kot nove tarče zdravljenja in biomarker za oceno resnosti bolezni pri bolnikih z GC. Ker je bil vzorec te raziskave relativno majhen, je lahko dodatno preverjanje potrebno potrditi pravo klinično vrednost HNF1A-AS1
's.
Deklaracij
Zahvala
To delo je podprla fundacija Innovation ekipe od Fuzhou Splošna bolnišnica za Lie Wang (2014CXTD04); podoktorski fundacija Splošna bolnišnica Fuzhou (43853) za Yuan Dang; National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81372788), Medical Znanstvenoraziskovalni Key Foundation Nanjing vojaškega poveljstva (št 11Z032) in naravoslovni fundacija province Fujian (št 2014J01427) za Qiaojia Huang; . In Medical Scientific Foundation inovacije Nanjing vojaškega poveljstva (No. 2013-MS122) za Yinghao Yu
Odpri AccessThis člena se razširja pod pogoji Creative Commons 4.0 Mednarodne License (http: //. Creativecommons org /licence /s /4. 0 /), ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, ki jih daje ustrezen kredit izvirnega avtorja (-ev) in vira, poskrbi za povezavo do Creative Commons licence in navesti, ali so bile narejene spremembe. Odprava Creative Commons Public Domain Posvetilo (http: //. creativecommons org /javna last /nič /1. 0 /) se uporablja za podatke, ki so na voljo v tem članku, razen če ni drugače navedeno
konkurirati. interesi
avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov. prispevki
avtorjev
YD izvedli preizkušanje in analizo podatkov. FL vodeni nekaj poskusov. XO, KW, in il sodeloval v vzorcih. YY voden s formalinom fiksni parafinsko vgrajeni tkivo zbrane in imunohistokemičnim testom. LW in YW vodene glavne sveže odvzetimi vzorci. LW je prispevala tudi k večji podpori financiranja. HP izdelal študijo. QH in YD napisal rokopis. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Želodčni karcinom supernatanta povzroči apoptozo in fibrozo v peritonealno tkivih in posledico ugodnega okolja za peritonealno metastaz, in vitro ter in vivo
• So zaviralci protonske črpalke prva izbira za akutno zdravljenje želodčnih razjed? Meta analiza randomiziranih kliničnih trials