Expressie en klinische betekenis van de lange niet-coderende RNA HNF1A-AS1 in de menselijke maag cancer

expressie en klinische betekenis van de lange niet-coderende RNA HNF1A-AS1
in menselijke maagkanker
Abstracte achtergrond
Toenemende bewijs heeft aangetoond dat de lange niet-coderende RNA's (lncRNAs) spelen een essentiële rol bij het ontstaan ​​en de ontwikkeling van de menselijke kankers, waaronder maagkanker (GC). Echter, de functionele en klinische betekenis van lncRNAs zijn nog steeds slecht begrepen.
Methods
In deze studie werd de expressie van LncRNA HNF1A antisense-RNA 1 (HNF1A-AS1
) eerst onderzocht door lncRNAs microarray-analyse in 6 GC weefsels, en werd vervolgens verder bevestigd door real-time kwantitatieve reverse transcriptie PCR (qRT-PCR) zowel 3 GC cellijnen en 161 gevallen van GC weefsels. We evalueerden ook de associatie tussen HNF1A-AS1
expressie en clinicopathologische kenmerken van patiënten met GC.
Resultaten
LncRNAs microarray analyseresultaten vertoonde dat HNF1A-AS1
werd neerwaarts gereguleerd in GC weefsels (gemiddelde fold change 2,06 , p
< 0,05), dat verder werd bevestigd door qRT-PCR. De resultaten van qRT-PCR toonde aan dat de expressie van HNF1A-AS1
niet alleen in drie GC cellijnen (AGS, BGC-823 en MKN-45) ten opzichte van die in een normale maagslijmvlies epitheliale cellijn (was downgereguleerd GES-1), maar ook afgenomen GC weefsels ten opzichte van die in gekoppelde naburige niet-neoplastische weefsels (lage expressie, 94 of 161; lage expressiesnelheid, 58,38%). Bovendien werd low HNF1A-AS1
expressie geassocieerd met tumorgrootte /diameter (p = 0,005
, multivariate analyse), serum carcino-antigeen (CEA), en koolhydraten antigeen 19-9 (CA19-9), en RRM1 expressie in weefselmonsters (p
= 0,028, p = 0,009
en p
= 0,006, respectievelijk).
Conclusies
Samengevat onze gegevens blijkt dat lncRNA HNF1A-AS1
kan een regulator van GC zijn, en dus kan het potentieel als een nieuwe biomarker en behandeling doel voor deze vorm van kanker te hebben.
Sleutelwoorden
Maagkanker lncRNA HNF1A-AS1
biomarker Achtergrond
Maagkanker (GC) is een van de meest voorkomende kankers en kan optreden in elk deel van de menselijke maag. Deze tumoren vaak kwaadaardige en hebben de mogelijkheid om perineurale weefsel [1] binnenvallen. Gegevens uit de nieuwste wereldwijde jaarlijkse enquête is gebleken dat er met bijna 1 miljoen nieuwe gevallen en 740.000 sterfgevallen als gevolg van deze vorm van kanker per jaar wereldwijd. De incidentie van GC in China is hoger dan die in de meeste landen ter wereld met meer dan 400.000 nieuwe gevallen per jaar en ongeveer 300.000 sterfgevallen. Studies hebben aangetoond dat als deze ziekte kan worden gediagnosticeerd in een vroeg stadium, kunnen goede prognose worden bereikt door volledige chirurgische resectie van de primaire tumor tissue [2]. Helaas, patiënten met GC vertonen weinig symptomen in de vroege stadia van de ziekte en de diagnose is meestal moeilijk. De 5-jaarsoverleving van GC in een vergevorderd stadium blijft slecht en is koppig op ongeveer 30% [3]. Kanker biomarkers mogelijk kanker worden gediagnosticeerd en kan als therapeutische doelwitten dienen, en kan worden gebruikt voor de pathogenese van de ziekte te onderzoeken; Daarom zou identificatie van kanker biomarkers van grote waarde zijn.
lange niet-coderende RNA's (lncRNAs) niet-coderende RNA's meer dan 200 nucleotiden [4]. Deze RNAs niet coderen voor eiwitten en zijn de belangrijkste onderdelen van het menselijk transcriptoom [5]. Opkomende bewijsmateriaal wijst erop dat lncRNAs zijn belangrijke regulerende moleculen waarvan de belangrijkste functies gerelateerd aan modulatie van genexpressie netwerken [6]. Veel van deze netwerken zijn nauw verbonden met de ontwikkeling van kanker en progressie [6-9]. Data van verschillende groepen hebben aangetoond dat veranderingen in expressie van lncRNAs zijn gerelateerd aan de pathogenese van verschillende menselijke kankers. Uit de resultaten van Wang et al., Song et al., En Shao et al. hebben aangetoond dat veranderingen in de expressieprofielen van lncRNAs zijn gekoppeld aan maagkanker carcinogenese en progressie die lncRNAs kan worden gebruikt als vroege biomarkers of behandelingsdoelen voor GC [10-12].
Om de abnormale expressie van identificatie tumorgerelateerde LncRNAs en die LncRNAs potentiële waarden biomarkers, in deze studie werd de lncRNAs expressieprofiel microarray analyse uitgevoerd in zes GC weefsel en de gepaarde naburige niet-neoplastische weefsels maag. LncRNA HNF1A antisense RNA 1 (HNF1A-AS1
) was een van de LncRNAs die zijn geïdentificeerd met GC weefsels wordt neerwaarts gereguleerd door de microarray analyse. HNF1A-AS1
, één-exongen op band 12q24.31 van chromosoom 12, is een bidirectionele lncRNA van 2455 nucleotiden [13]. De transcriptie startplaats van deze lncRNA is zeer dicht bij die van de lever nucleaire factor 1 alfa-gen (HNF1A
; HNF1A-AS1
's start site ligt op ongeveer 5 kb stroomafwaarts van HNF1A
) [13]. Voor zover wij weten, de expressie van HNF1A-AS1
in GC weefsels blijft aangegeven. Daarom is in dit werk hebben we de expressieniveaus van HNF1A-AS1
in 3 GC cellijnen en 161 gevallen van GC weefsels en hun gepaarde naburige niet-neoplastische weefsels maag. We onderzochten ook de mogelijke associatie tussen de expressie van HNF1A-AS1 Kopen en klinisch-pathologische kenmerken van patiënten met GC. Onze gegevens tonen het potentieel van deze lncRNA als een nieuwe biomarker en een behandeling doel voor GC.
Methods
weefselmonsters en klinische dataverzameling
Honderd en eenenzestig weefselmonsters verse gepaarde (GC weefsel en non -neoplastic weefsel dat 5 cm van de rand van de kanker) werden verkregen van Fuzhou General Hospital, Fujian, in 2014 en 2015. Alle monsters werden onmiddellijk verkregen na operatie en bewaard in RNAlater (Qiagen, Duitsland) bij -80 ° C tot gebruik. Serummonsters gebruikt voor detectie van de tumor biomarkers serum en weefselmonsters in paraffine ingebedde gebruikt voor detectie van de immunohistochemische merkers werden bij dezelfde patiënten. Elk weefselmonster werd histopathologisch gediagnosticeerd en bevestigd met ten minste twee pathologen. De normen voor tumor-node-metastase (TNM) podium en histologische graad waren in overeenstemming met de richtlijnen van de International Union Against Cancer (UICC; 5 Ed) en de National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Clinical Practice Guidelines in Oncology (V. 1,2011), respectievelijk. Geen van de patiënten kregen een behandeling voorafgaand aan resectie.
Ethiek statement
Informed consent werd verkregen van alle individuele deelnemers opgenomen in de studie, en deze studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van Fuzhou General Hospital.
LncRNAs microarray assay
lncRNAs microarrays gebruikt in deze studie waren de Human LncRNAs Microarray V3.0 (Arraystar Inc., MD, USA), die was samengesteld uit lncRNAs en mRNA's van het menselijk genoom. lncRNAs microarray test en de data-analyse werden uitgevoerd door Kang Chen Bio-tech (Shanghai, China) op basis van de instructies van de fabrikant.
Cell cultuur
AGS, BGC-823, en MKN-45 GC cellijnen en normale menselijke maag epitheel cellijn (GES-1) werden verkregen van de American Type Culture Collection, Manassas, VA, Shanghai Instituut voor Biochemie en Celbiologie, de Chinese Academie van Wetenschappen in Shanghai, China, de Japanse Cancer Research Bank en Beijing Cancer Institute ( Beijing, China), respectievelijk. De cellen werden gekweekt in F12, RP1640 of DMEM medium (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), die bevatte 10% foetaal runderserum, in een incubator bij 37 ° C met 5% CO 2.
Totaal RNA-extractie en qRT-PCR
Totaal RNA's werden van zowel weefsels en gekweekte cellen geïsoleerd met behulp van TRIzol reagens (Invitrogen). Reverse transcriptie werd vervolgens uitgevoerd onder toepassing van een reverse transcriptie kit (Promega) volgens de instructies van de fabrikant. Real-time kwantitatieve reverse transcriptie PCR (qRT-PCR) werd uitgevoerd met behulp van SYBR Green Mix kit uitgevoerd (Promega, Madison, WI, USA) in een stap een real-time PCR System (ABI, Grand Island, NY, USA) . De primers voor 18s en HNF1A-AS1
qPCR waren: (voorwaarts) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'en (achterwaarts) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3' voor HNF1A-AS1
; (Voorwaarts) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'en (omgekeerde) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3' voor 18s. De omstandigheden voor PCR waren als volgt: stap 1, 95 ° C gedurende 10 min; stap 2, 40 cycli bij 95 ° C gedurende 15 s, 57 ° C gedurende 1 min; fase 3 (dissociatie stap), 95 ° C gedurende 15 s, 60 ° C gedurende 15 s, 95 ° C gedurende 15 seconden. De opgenomen cyclus drempel (CT) waarden omvatte zowel HNF1A-AS1 Kopen en 18 s; deze laatste diende als controle. Het expressieniveau van HNF1A-AS1
werd verkregen met de ACt methode. Hogere ACt aangegeven waarden lager HNF1A-AS1
expressie. De resultaten werden verkregen uit drie onafhankelijke experimenten en uitgedrukt als het gemiddelde ± standaardafwijking (SD). Meet- van AFP, CA-125, CEA en CA19-9 concentraties in het serum van patiënten met GC
concentraties van alfa-foetoproteïne (AFP), carcino-antigeen (CEA), kanker antigen 125 (CA-125), en koolhydraten antigeen 19-9 (CA19-9) werden in het serum van alle 161 gevallen van deze groep patiënten opgespoord door middel de kwantitatieve Kit voor Tumor Marker (Protein Chip-Chemiluminescence) (HealthDigit, Huzhou, China) met de HD-2001a Chipreader System (HealthDigit). In deze studie, de normale referentiewaarden voor gezonde personen waren < 20,0 ng /ml, < 5,0 ng /ml, < 35,0 U /ml en < 35,0 U /ml voor AFP, CEA, CA-125, en CA19 -9 respectievelijk.
IHC
We gebruikten immunohistochemie (IHC) in paraffine ingebedde secties om de expressie van vasculaire endotheel groeifactor (VEGF), humane epidermale groeifactor receptor 2 (C-erbB-2 of HER2 bepalen ), thymidylaatsynthase (TS), borstkanker 1 (BRCA1), excisie reparatie cross-complementatie groep 1 (ERCC1), Ki67 antigeen (Ki67) en ribonucleotidereductase subunit M1 (RRM1), synaptophysine (Syn), neuronale celadhesiemoleculen (CD56), en chromogranine A (CgA); 150 gevallen van in paraffine ingebedde weefselmonsters van deze groep patiënten waren beschikbaar voor de IHC assay. IHC werd uitgevoerd door pathologen in overeenstemming met de instructies van de fabrikant. De antilichamen en andere reagentia voor IHC gebruikt in dit werk werden gekocht bij Maixin (Fujian, China) en ZSGB-BIO (Beijing, China). Met uitzondering van Ki67, werd de intensiteit van kleuring gerangschikt van 0 tot 4, waarbij 0 geen kleuring; 1, minder dan 25% van de cellen positief; 2, 25 tot 50% van de cellen positief; 3, 51-75% van de cellen positief; en 4, > 76% van de cellen positief. Voor Ki67, werden de rangen rechtstreeks beoordeeld als het percentage positief voor Ki67 expressie. De dia's werden beoordeeld door ten minste twee pathologen.
Statistische analyse
Statistical Program for Social Sciences (SPSS) 16.0 software (SPSS, Chicago, IL, USA) en GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA, USA ) werden gebruikt voor statistische analyse. One-way variantieanalyse (ANOVA), de rank-sum test, en de Student's t Electronics Test waren belangrijkste statistische methoden die worden gebruikt in dit werk, de p Restaurant < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.
Resultaten
LncRNAs microarray-analyse exposities die HNF1A-AS1
expressie wordt neerwaarts gereguleerd in GC weefsels Zoals in figuur
getoond. 1, de resultaten van lncRNAs expressieprofiel microarray analyse gekregen van zes GC weefsels en hun gepaarde naburige niet-neoplastische gastrische weefsels vertoonden dat HNF1A-AS1
expressie werd downgereguleerd in alle zes weefsels GC (gemiddelde veelvoudverandering 2,06, p
< 0,05), wat aangaf dat deze lncRNA de potentie om een ​​van de tumorgerelateerde LncRNAs kan hebben. Zo hebben we het kozen voor verdere analyse. Fig. 1 HNF1A-AS1
werd downexpressed in zes GC weefsels geïdentificeerd door lncRNAs microarray-analyse. 84C, 83C, 87C, 78C, 97C, en 90C aangegeven zes GC weefsels (84, 83, 87, 78, 97, en 90 waren de zes gevallen van weefsel nummer, C
kanker); 83N, 87N, 90N, 78N, 97N, 84N en gewezen op de zes corresponderende gepaarde naburige niet-neoplastische maag weefsels (N
non-neoplastische maag weefsels). Clusteranalyse gebaseerd op de microarray resultaten vertoonden dat HNF1A-AS1
expressie in weefsels GC werd downgereguleerd vergeleken met die van niet-gepaarde neoplastische gastrische weefsels (gemiddelde veelvoudverandering 2,06, p
< 0,05)
qRT- PCR verificatie bevestigt verder dat HNF1A-AS1
expressie wordt neerwaarts gereguleerd in GC cellijnen en weefsels
We hebben eerst de expressie van lncRNA HNF1A-AS1
onderzocht in drie GC cellijnen: AGS, BGC-823, en MKN -45. Via qRT-PCR bevestigden we dat de expressie van HNF1A-AS1
significant af in alle drie cellijnen GC opzichte van die in normale maagepitheelcellen (GES-1 cellen; AGS, blz
< 0,0001; BGC-823, blz Restaurant < 0,05; MKN-45, blz Restaurant < 0,05; fig. 2). We onderzochten ook HNF1A-AS1
expressie in GC weefselmonsters en gepaarde aangrenzende non-neoplastische weefselmonsters. Onze resultaten toonden dat HNF1A-AS1
was downgereguleerd in 58,38% (94/161) van GC weefsels ten opzichte van die in de niet-neoplastische weefsels (p
< 0,01, figuur 3.). Samengenomen geven deze gegevens aan dat HNF1A-AS1
wordt neerwaarts gereguleerd in menselijke GC. Fig. 2 Verminderde expressie van HNF1A-AS1
GC cellen ten opzichte van die in normale maagepitheelcellen. qRT-PCR werd toegepast om de expressie van HNF1A-AS1
van BGC-823, MKN-45 en AGS GC cellen te vergelijken met die van niet-neoplastische GES-1 cellen. De getoonde gegevens zijn afkomstig van drie onafhankelijke experimenten en uitgedrukt als het gemiddelde ± SD.
Sterretjes geven waarden met een statistisch significant verschil versus de waarde in GES-1 cellen. * P
< 0,05, **** p
< 0,0001. GC
maagkanker, qRT-PCR
kwantitatieve real-time PCR, SD
standaarddeviatie
Fig. 3 Expressie van HNF1A-AS1
in neoplastische en niet-neoplastische maag weefsels. De expressie van HNF1A-AS1
GC weefsels vergeleken met die in naburige niet-neoplastische weefsels (n = 161
, ** p
< 0,01). T Shirts GC weefsels, N
non-neoplastische weefsels. De getoonde gegevens zijn afkomstig van drie onafhankelijke experimenten en uitgedrukt als het gemiddelde ± SD (ACt-waarde). GC
maagkanker, SD
standaarddeviatie
Vereniging van HNF1A-AS1
expressie met klinisch-pathologische kenmerken van patiënten met GC Belgique Om de klinische betekenis van HNF1A-AS1
te beoordelen, analyseerden we de relatie tussen de expressie en clinicopathologische kenmerken van patiënten met GC. Zoals uit de tabellen 1 en 2, de univariate analyse vertoonde dat de expressie van HNF1A-AS1
geassocieerd met tumorgrootte /diameter (p
= 0,002), invasie diepte (T stadia, p = 0,032
), lymfatische metastase (N fasen, p
= 0,006), veneuze invasie (p
= 0,001), en perineurale invasie (PNI, p
= 0,014). Echter, na correctie beïnvloeden factoren zoals leeftijd, geslacht, tumorlokalisatie, tumorgrootte /diameter, differentiatie, invasie (T stadia), lymfatische metastase (N fasen), veneuze invasie en PNI, de multivariate analyse verder bevestigd dat tumorgrootte bleef om aanzienlijk worden gecorreleerd aan HNF1A-AS1 expressie (p = 0,005
), waardoor patiënten met tumorgrootte ≥5 cm hadden lagere niveaus van HNF1A-AS1. Deze gegevens suggereren dat HNF1A-AS1
rollen tijdens het optreden van kanker en progressie kunnen spelen en kan een nieuwe biomarker van maag cancer.Table 1 Vereniging van HNF1A-AS1 expressie (ACt) met klinisch-pathologische kenmerken van de patiënten
Kenmerken

No. van de zaak (%)
Gemiddelde ± SD
p
waarde
Leeftijd (jaar)
0,119
≥60
82 (50.9 )
16.17 ± 2.90 Restaurant < 60
79 (49,1)
15.47 ± 2.71
Geslacht
0,688
Man
123 (76,4)
15,78 ± 2.88
Vrouw
38 (23,6)
15.99 ± 2.66
Tumor locatie
0.560
sinussen ventriculi
57 (35,4)
16.06 ± 3.13
Cardia
33 (20,5)
15.87 ± 3.04
Corpora ventriculi
45 (28,0)
15.92 ± 2.50 overige
26 (16.1)
15.11 ± 2.36
diameter (cm)
0,002
≥5
73 (45,3)
16,59 ± 2,8 Restaurant < 5
88 (54,7)
15,2 ± 2.70
Differentiatie
0,396
Well Pagina 2 (1.2)
16.15 ± 0.71
Matige
34 (21,1)
15,24 ± 2,66
Poor
125 (77,7 )
15.98 ± 2.87
Invasion
0,032
T1
13 (8.1)
16.13 ± 1.95
T2
14 (8.7)
14,09 ± 2.24
T3
16 (9.9)
14.85 ± 3.71
T4
118 (73,3)
16.13 ± 2.76
Lymfatische metastase
0.006

N0
38 (23,6)
14.74 ± 2.77
N1-3
123 (76,4)
16.16 ± 2.76
veneuze invasie
0.001
Absent
86 (53,4)
15.14 ± 2.58
Presenteer
75 (46,6)
16.61 ± 2.90
perineurale invasie (PNI)
0,014
Absent
89 (55,3)
15.34 ± 2.77
Presenteer
72 (44,7)
16.43 ± 2.79
CEA
0,028
Normal
130 (80.7 )
15.59 ± 2.74
hoge
31 (19,3)
16.83 ± 2.97
CA19-9
0.009
Normal
140 (87,0)
15.60 ± 2.70
hoge
21 (13,0)
17.32 ± 3.22
AFP News 0,936
Normal
150 (93,2)
15.82 ± 2.80
High
11 (6.8)
15.89 ± 3.25
CA-125
0,494
Normal
154 (95,7)
15.79 ± 2.84
hoge
7 (4,3 )
16.55 ± 2.33
Schuin waarden zijn significant bij p
< 0.05
Tabel 2 Vergelijking van de p
waarden verkregen uit univariate en multivariate analyse van de vereniging van HNF1A-AS1 expressie (ACt) met klinisch-pathologische kenmerken van de patiënten
Kenmerken
Univariate

Multivariate
p
waarde
p
waarde
Leeftijd (jaar)
0,119
0,197
Geslacht
0,688
0,174
Diameter (cm)
0,002
0,005
Differentiatie
0,396
0,603
Invasion
0,032
0.580
Lymfatische metastase
0.006
0,235
veneuze invasie
0.001
0,057
perineurale invasie (PNI)
0,014
0,192
Tumor locatie
0.560
0,342
Schuin waarden zijn significant bij p
< 0.05
Vereniging van HNF1A-AS1
expressie met serum of immunohistochemische markers van GC
HNF1A-AS1
expressie in GC weefsels werd in verband gebracht met twee serum markers van het maagdarmkanaal tumoren, CEA (p
= 0,028) en CA19-9 (p
= 0,009), maar er was geen significant verband met andere spijsverteringskanaal kanker serum marker AFP of de epitheliale tumormarker CA125 (tabel 1). De expressie van HNF1A-AS1
in tumormonsters was ook significant gecorreleerd met een immunohistochemische markers van kanker, RRM1 (p
= 0,006), maar niet met VEGF, c-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn, of CgA (tabel 3) .table 3 Vereniging van HNF1A-AS1 expressie (ACt) met immunohisochemical kenmerken van GC weefsel
kenmerken
No. van de zaak (%)
Gemiddelde ± SD
p
waarde
VEGF
0,809
0
15 (10,0)
15.27 ± 3.69 1
22 (14,7)
15.57 ± 2.92 2
33 (22,0)
15.83 ± 2.72
3
59 (39,3)
15.94 ± 2.54 verhuur 4
21 (14,0)
16.39 ± 3.32
C-erbB-2
0,312
0
129 (86,0)
15,70 ± 2,84 1
5 (3.3)
16.37 ± 2.96 2
4 (2.7)
15.77 ± 1.01
3
12 (8.0)
17.30 ± 3.21
TS
0,543
0
22 (14,7)
16.41 ± 2.45 1
53 (35,3)
15.99 ± 2.97 2
52 (34,7)
15.33 ± 2.73
3
21 (14,0)
16.25 ± 3.34 verhuur 4 Pagina 2 (1.3)
15.92 ± 1.82
BRCA1
0,893
0
10 (6.7)
16,59 ± 1,83 1
31 (20,7)
16.07 ± 2.91 2
73 (48,6)
15.78 ± 2.57
3
34 (22,7)
15,61 ± 3,57 verhuur 4 Pagina 2 (1.3)
15.77 ± 5.01
ERCC1
0,585
0
19 (12,7)
15.81 ± 2.39 1
22 (14,7)
16.51 ± 3.61 2
44 (29,3)
15.96 ± 2.85
3
41 (27,3)
15.85 ± 3.05 verhuur 4
24 (16,0)
15.11 ± 2.02
RRM1
0.006
0
81 ( 54,0)
15.79 ± 2.41 1
10 (6.7)
13.27 ± 4.11 2
17 (11,3)
15.51 ± 3.08
3
35 (23.3)
16.98 ± 2.93 verhuur 4
7 (4.7)
15.48 ± 2.67
Ki67
0,328 1
14 (9.3)
16.54 ± 1.67 2
35 (23,3)
16.44 ± 2.79
3
57 (38,0)
15.48 ± 2.97 verhuur 4
44 (29,4)
15.66 ± 3.02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15.99 ± 2.95 1
16 (10,7)
15.15 ± 2.17 Pagina 2
3 (2.0)
13,98 ± 0,87
3
3 (2.0)
15.59 ± 3.06
CD56
0,364
0
137 (91,4)
15.94 ± 2.86 1
9 (6,0)
15.66 ± 3.09 2
2 (1.3)
12,72 ± 0,84
3 Pagina 2 (1.3)
14.22 ± 0.97
CgA
0.980
0
141 (94,0)
15.87 ± 2.91 1
7 (4.7)
15.69 ± 1.83 Pagina 2 pagina 2 (1.3)
15.63 ± 3.26
Schuin waarden zijn significant bij p
< 0,05
Discussie
Verschillende feiten hebben aangetoond dat veranderingen in de expressie van lncRNAs spelen belangrijke rollen bij carcinogenese en ontwikkeling van kanker [14, 15] en veranderde expressie van lncRNA bekend significant geassocieerd met verschillende klinische en pathologische kenmerken van menselijke tumoren, zoals de lymfeklieren metastase, TNM stadium, metastasen op afstand, en de graad van weefsel differentiatie. Zo verminderde expressie van kanker-geassocieerde gastrische transcript 1 (GACAT1
) significant geassocieerd met metastase, invasie en weefseldifferentiatie bij patiënten met GC [16]. Bovendien is verhoogde expressie van homeobox (HOX) transcript antisense RNA (hetelucht
), een lange intergene niet-coderende RNA geassocieerd met de functie van endometriale carcinoom (EC), metastase, invasie diepte van myometrium en slechtere algemene overleving [17]. Tenslotte wordt lage expressie van HMlincRNA717
in GC geassocieerd met distale metastase en invasie van de veneuze en zenuwstelsel [12]. Al deze resultaten zijn het bewijs van de belangrijke rol van lncRNAs in carcinogenese en de potentiële waarde in hun klinische toepassing.
In deze studie hebben we vastgesteld dat het expressieniveau van HNF1A-AS1
drie maagkanker cellijnen was significant verminderd ten opzichte van die in normale maagepitheelcellen. Belangrijker was downgereguleerd in 58,38% van maagkanker weefselmonsters vergelijking met die van naburige niet-neoplastische weefsels. De bevindingen uit Yang et al. blijkt dat lncRNA werd opgereguleerd in esophageal adenocarcinoom (EAC) [13]. Carcinogenese en progressie van kanker is een complex ziekteproces dat wordt gemedieerd door genexpressie netwerken. voorkomen van kanker in verschillende organen of weefsels kunnen worden geregeld door differentieel tot expressie niveaus van dezelfde genen of dezelfde lncRNAs [18, 19]. Daarom kan HNF1A-AS1
vertoont uiteenlopende expressieprofielen in verschillende soorten kankercellen verklaren. Verder onderzoek kan nodig zijn om de precieze moleculaire mechanisme van deze verschillen onthullen
Het is algemeen bekend dat kanker en metastase vaak optreedt via drie algemene routes. Lymfekliermetastase, reist door het vaatstelsel en lokale zaaien en groei. PNI is een extra middel om de invasie die meestal is gecorreleerd met een lokaal recidief. Omdat lokaal recidief nauw verbonden met een slechte prognose, het identificeren van patiënten met een hoog risico op PNI heeft grote klinische betekenis. Ondernemingen De prognose en overleving van patiënten met GC kan ook worden beïnvloed door de grootte van de tumor, die verband houdt met de tijd groei. Kleinere tumoren vertonen minder inbreuk in de maag dan grotere tumoren. Bovendien verhoogde diepte van invasie van tumoren groter de kans groter dat het lymfestelsel kan ontstaan. Vergroting lymfeknoop metastase kunnen de kankercellen gemakkelijker en leidt tot een slechte prognose groeien.
Zowel CEA en CA19-9 zijn bekend tumormarkers die meestal in serum of weefselmonsters opgereguleerd van patiënten met vroege of primaire kwaadaardige tumoren van het spijsverteringskanaal. RRM1 is één van de drie bekende humane ribonucleotide reductase met de functies van het reguleren van de proliferatie van kankercellen via bemiddelen DNA-synthese en reparatie, en detectie van de expressie van RRM1 in GC weefsels IHC geïdentificeerd prognostische betekenis patiënten met GC [ ,,,0],20].
Conclusies
Kortom, analyseerden we de associatie van de expressie niveau van HNF1A-AS1 hotels met de klinisch-pathologische kenmerken van patiënten met GC. Onze resultaten toonden dat de expressie van HNF1A-AS1
was significant neerwaarts gereguleerd in zowel GC weefsels en cellijnen. Bovendien werd verminderde expressie geassocieerd met tumorgrootte /diameter en niveaus van serum CEA, CA19-9, en weefsel RRM1. Deze bevindingen geven aan dat HNF1A-AS1
betrokken kan zijn bij de onderdrukking van maagkanker voorkomen en ontstaan ​​en dat de potentie heeft om te dienen als een nieuwe behandeling doelwit en biomerker voor de evaluatie van de ernst van de ziekte bij patiënten met GC. Omdat de steekproefgrootte van deze studie was relatief klein is, kan verder onderzoek nodig zijn om echte klinische waarde HNF1A-AS1
's bevestigen.
Verklaringen
Dankwoord
Dit werk werd ondersteund door het Innovation Team Foundation van Fuzhou General Hospital for Lie Wang (2014CXTD04); de Postdoctorale Stichting van Fuzhou General Hospital (43.853) voor Yuan Dang; de National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81372788), het Medisch Wetenschappelijk Onderzoek Key Foundation van Nanjing Militaire Commando (No. 11Z032), en de Natural Science Foundation van de provincie Fujian (nr 2014J01427) voor Qiaojia Huang; . En de Medisch-Wetenschappelijke Stichting Innovatie van Nanjing Militaire Commando (nr 2013-MS122) voor Yinghao Yu logo VPRO AccessThis artikel wordt gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution 4.0 International License (http:. //Creativecommons org /licenties /door /4. 0 /), die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elk medium toestaat, mits u de juiste krediet aan de oorspronkelijke auteur (s) en de bron te geven, een link naar de Creative Commons-licentie, en aangeven of wijzigingen zijn aangebracht. De Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creativecommons org /publicdomain /zero /1 0 /) van toepassing op de ter beschikking gestelde in dit artikel, tenzij anders vermeld data
Competing. belangen Ondernemingen de auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen.
auteurs bijdragen
YD voerde de experimenten en data-analyse. FL begeleide enkele experimenten. XO, KW en YL deelgenomen in monsters verzameld. YY leidde de formaline gefixeerde in paraffine ingebed weefsel verzameld en immunohistochemische assay. LW en YW begeleide grote verzamelde verse monsters. LW ook bijgedragen aan de grote financiële steun. QH ontwierp de studie. QH en YD schreef het manuscript. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Maagkanker celsupernatant apoptose veroorzaakt en fibrose in de peritoneale weefsels en resulteert in een gunstig peritoneale metastasen in vitro en in vivo
• Zijn protonpompremmers de eerste keuze voor de acute behandeling van maagzweren? Een meta-analyse van gerandomiseerde klinische trials