Expression ja kliininen merkitys pitkän ei-koodaavan RNA HNF1A-AS1 ihmisen mahasyövän

Expression ja kliininen merkitys pitkän ei-koodaavan RNA HNF1A-AS1
ihmisen mahasyövän
tiivistelmä
tausta
Lisääntyvä todistusaineisto on osoittanut, että pitkään ei-koodaava RNA: t (lncRNAs) on keskeisiä rooleja esiintyminen ja inhimillisen syöpien, kuten mahasyövän (GC). Kuitenkin toiminnalliset ja kliininen merkitys lncRNAs tunnetaan edelleen huonosti. Tool Menetelmät
Tässä tutkimuksessa ilmaus LncRNA HNF1A antisense-RNA 1 (HNF1A-AS 1
) ensin tutkittiin lncRNAs mikrosiruanalyysillä 6 GC kudoksia, ja sitten edelleen todentaa reaaliaikaisella kvantitatiivisella käänteistranskriptio-PCR (qRT-PCR) sekä 3 GC solulinjoissa ja 161 tapausta GC kudoksiin. Olemme myös arvioineet yhdistyksen välillä HNF1A-AS1
ilmaisun ja kliinis-potilaiden GC.
Tulokset
LncRNAs mikrosiruanalyysi tulokset osoittivat, että HNF1A-AS1
säädeltiin vähentävästi vuonna GC kudoksissa (keskimääräinen kertainen muutos 2,06 , s
< 0,05), mikä vahvistettiin edelleen qRT-PCR: llä. Tulokset qRT-PCR osoitti, että ilmentyminen HNF1A-AS1
ei vain vaimentua kolme GC-solulinjoissa (AGS, BGC-823, ja MKN-45) suhteessa, että normaalin mahan limakalvon epiteelin solulinja ( GES-1), mutta myös vähentynyt GC kudoksissa suhteessa, että pariksi viereisen ei-neoplastisten kudosten (alhainen ilmentyminen, 94 161; alhainen ekspressionopeudesta 58.38%). Lisäksi alhainen HNF1A-AS1
ilmentyminen oli yhteydessä kasvaimen kokoa /halkaisija (p
= 0,005, monimuuttuja-analyysi), seerumin karsinoembryonisen antigeeni (CEA), ja hiilihydraattiantigeeniä 19-9 (CA19-9), ja RRM1 ilmentymistä kudosnäytteistä (p
= 0,028, p
= 0,009 ja p
= 0,006, vastaavasti).
päätelmät
yhdessä meidän tiedot osoittavat, että lncRNA HNF1A-AS1
voi olla säätelijä GC, ja siten sillä voi olla potentiaalia uutena biomarkkerina ja hoidon kohteena tämän syöpä.
avainsanat
Mahasyöpää lncRNA HNF1A-AS1
biomarkkerit tausta
Mahasyöpää (GC) on yksi yleisimmistä syövistä ja voi esiintyä missä tahansa osassa ihmisen mahalaukussa. Nämä kasvaimet ovat usein pahanlaatuisia ja on kyky hyökätä hermoa kudokseen [1]. Tiedot viimeisimmän maailmanlaajuisen vuositutkimuksessa ovat osoittaneet, että on lähes 1 miljoona uutta tapausta ja 740.000 kuolemaa tähän syöpään vuodessa maailmanlaajuisesti. Ilmaantuvuus GC Kiinassa on korkeampi kuin useimmissa maailman maissa, joissa yli 400000 uutta tapausta vuosittain ja noin 300000 kuolemantapausta. Tutkimukset ovat osoittaneet, että jos tämä sairaus voidaan diagnosoida varhaisessa vaiheessa, hyvä ennuste voidaan saavuttaa täydellinen kirurginen resektio primaarikasvaimen kudoksen [2]. Valitettavasti potilaat GC osoittaa muutamia oireita alkuvaiheessa sairauden ja diagnoosi on yleensä vaikeaa. 5 vuoden eloonjäämisaste GC vaiheissa on edelleen heikko ja on itsepäinen noin 30% [3]. Syöpä biomarkkerit mahdollistaa syöpä diagnosoidaan ja voivat toimia terapeuttisina kohteina, sekä voidaan tutkia synnyssä tauti; Siksi tunnistaminen syöpä biomarkkereita olisivat arvokkaita.
Long ei-koodaavat RNA: t (lncRNAs) ovat ei-koodaavat RNA: t on suurempi kuin 200 nukleotidin [4]. Nämä RNA: t eivät koodaa proteiineja ja ovat pääkomponentit ihmisen transcriptome [5]. Kehittyvät näyttö osoittaa, että lncRNAs ovat tärkeitä säätelymolekyyleja jonka päätoiminnot liittyvät modulaatioon geeniekspression verkkojen [6]. Monet näistä verkkojen läheisesti liittyy syövän kehittymisen ja etenemisen [6-9]. Tiedot eri ryhmiin ja määrittää, että ilmentymisen muutosten lncRNAs liittyvät patogeneesi erilaisten ihmisen syöpien. Viimeaikaiset havainnot Wang et al., Song et al., Ja Shao et ai. ovat osoittaneet, että muutokset ilmentymisen profiilit lncRNAs ovat yhteydessä syöpään karsinogeneesin ja etenemisessä ja että lncRNAs voitaisiin käyttää jo biomarkkereita tai hoidon tavoitteet GC [10-12].
Jotta voitaisiin tunnistaa epänormaalin ilmentymisen kasvaimeen liittyvä LncRNAs ja ne, LncRNAs mahdollisia arvoja biomarkkereita, tässä tutkimuksessa lncRNAs ilmentymisen profiili microarray-analyysi suoritettiin kuusi GC kudosten ja niiden yhdistetty vieressä olevaan ei-neoplastisia mahalaukun kudoksissa. LncRNA HNF1A antisense-RNA-1 (HNF1A-AS1
) oli yksi LncRNAs jotka tunnistettiin vaimentua GC kudoksista mikrosiruanalyysillä. HNF1A-AS1
, yhden eksonin geenin kaistalla 12q24.31 kromosomin 12, on kaksisuuntainen lncRNA on 2455 nukleotidia [13]. Transkription aloituskohtaa tämän lncRNA on hyvin lähellä, että maksan ydin- 1 alfa-geenin (HNF1A
; HNF1A-AS1
n aloituspaikan on noin 5 kb alavirtaan HNF1A
) [13]. Tietääksemme ilmaus HNF1A-AS1
GC kudoksissa jää ilmoittamatta. Siksi tässä työssä, määritimme ekspressiotasot HNF1A-AS1
3 GC solulinjoissa ja 161 tapauksissa GC kudosten ja niiden pariksi viereisen ei-neoplastisia mahalaukun kudoksiin. Tutkimme myös mahdollisia välisen assosiaation ekspression HNF1A-AS1
ja kliinis-potilailla, joilla on GC. Tuloksemme kuvaavat mahdollisuuksia tämän lncRNA uutena biomarkkeri ja hoito tavoite GC. Tool Menetelmät
kudosnäytteitä ja kliinisten tietojen keruu
Sata ja kuusikymmentäyksi tuore pariksi kudosnäytteistä (GC kudosten ja non -neoplastic kudosnäytteiden 5 cm syöpä reunalla) saatiin Fuzhou General Hospital, Fujian, Kiina, vuonna 2014 ja 2015 Kaikki näytteet saatiin heti leikkauksen ja säilytettävä RNAlater (Qiagen, Saksa) -80 ° C käyttöön asti. Seeruminäytteiden havaitsemiseen käytetty seerumin kasvaimen biomarkkereita ja parafinoidut kudosnäytteistä havaitsemiseen käytetty immunohistokemiallinen markkereita kerättiin myös samalla potilaalla. Jokainen kudosnäytteestä histopatologisesti diagnosoitu ja vahvistettu vähintään kaksi patologia. Standardit kasvaimen-solmu-etäpesäke (TNM) vaihe ja histologinen arvosana oli suuntaviivojen mukaisesti International Union Against Cancer (UICC; 5th Ed) ja National Kattava Cancer Networkin (NCCN) Clinical Practice Guidelines onkologian (V. 1,2011), vastaavasti. Kukaan potilaista sai hoitoa ennen resektiota.
Ethics selvitys
tietoon perustuva suostumus saatiin kaikilta yksittäisiä osallistujia mukaan tutkimukseen, ja tämä hyväksyi tutkimuksen eettisen komitean Fuzhou General Hospital.
LncRNAs microarray määritys
lncRNAs mikrosiruja käytetään tässä tutkimuksessa olivat ihmisen LncRNAs Microarray V3.0 (Arraystar Inc., MD, USA), joka koostui lncRNAs ja mRNA: iden ihmisen genomista. lncRNAs microarray määritys ja tietojen analysointi suoritettiin KANGCHEN Bio-Tech (Shanghai, Kiina), joka perustuu valmistajan ohjeet.
Soluviljely
AGS, BGC-823, ja MKN-45 GC solulinjojen ja normaali ihmisen mahalaukun epiteelisolulinja (GES-1) hankittiin American Type Culture Collection, Manassas, VA, Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology, Kiinan tiedeakatemia Shanghai, Kiina, japani Cancer Research Bank ja Beijing Cancer Institute ( Peking, Kiina), tässä järjestyksessä. Soluja kasvatettiin F12, RP1640, tai DMEM-alustassa (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), jotka kaikki sisälsivät 10% naudan sikiön seerumia, inkubaattorissa 37 ° C: ssa, 5% CO 2.
Yhteensä RNA ja qRT-PCR
Yhteensä RNA: t eristettiin sekä kudoksista ja viljeltyjä soluja käyttämällä TRIzol reagenssia (Invitrogen). Käänteinen transkriptio suoritettiin sitten käyttäen Reverse Transcription Kit (Promega) mukaisesti valmistajan ohjeiden. Reaaliaikainen kvantitatiivinen käänteistranskriptio-PCR (qRT-PCR) suoritettiin käyttäen SYBR Green Mix Kit (Promega, Madison, WI, USA) Step One Reaaliaikainen PCR System (ABI, Grand Island, NY, USA) . Alukkeet 18-vuotiaille ja HNF1A-AS1
qPCR olivat seuraavat: (eteenpäin) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'ja (reverse) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3' varten HNF1A-AS1
; (Eteenpäin) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'ja (reverse) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3' varten 18s. Edellytykset PCR olivat seuraavat: vaihe 1, 95 ° C: ssa 10 min; vaihe 2, 40 sykliä 95 ° C: ssa 15 s, 57 ° C 1 min; vaiheen 3 (dissosiaatio vaihe), 95 ° C 15 s, 60 ° C: ssa 15 s, 95 ° C 15 sekunnin ajan. Nauhoitetun syklin kynnys (Ct) arvot kuului sekä HNF1A-AS1
ja 18 s; jälkimmäinen toimi kontrollina. Ilmentymisen taso HNF1A-AS1
saatiin käyttäen ACt menetelmää. Korkeammat ACt ilmoitettuja arvoja alhaisempi HNF1A-AS1
ilme. Tulokset saatiin kolmesta toisistaan ​​riippumattomasta kokeesta ja ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta (SD).
Mittaus AFP, CA-125, CEA, ja CA19-9 pitoisuudet seerumissa potilailla, joilla on GC
pitoisuudet alfafetoproteiinin (AFP), karsinoembryonaalinen antigeeni (CEA), syövän antigeeni 125 (CA-125), ja hiilihydraattiantigeeniä 19-9 (CA19-9) havaittiin seerumissa kaikki 161 tapauksissa tämän ryhmän potilaista käyttämällä Määrälliset Kit tuumorimarkkeri (Protein Chip-kemiluminesenssi) (HealthDigit, Huzhou, Kiina) HD-2001A ChipReader System (HealthDigit). Tässä tutkimuksessa normaali viitearvot terveet yksilöt olivat < 20,0 ng /ml, < 5,0 ng /ml, < 35,0 U /ml ja < 35,0 U /ml AFP, CEA, CA-125, ja CA19 -9, vastaavasti.
IHC
Käytimme immunohistokemia (IHC) parafiiniin upotetut leikkeet ekspression määrittämiseksi verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF), ihmisen epidermaalisen kasvutekijän reseptoria 2 (C-erbB-2 tai HER2 ), tymidylaattisynteesin (TS), rintasyöpä 1 (BRCA1), Leikkauskorjauksessa rajat komplementaatioryhmä 1 (ERCC1), Ki67 antigeeni (Ki67), ja ribonukleotidireduktaasi alayksikköä M1 (RRM1), synaptofysiinin (Syn), hermosolun adheesiomolekyylien (CD56), ja kromograniini A (CGA); 150 tapauksia parafinoidut kudosnäytteistä tämän ryhmän potilaista oli saatavilla IHC määrityksessä. IHC suoritettiin patologeja ohjeiden mukaisesti valmistajille. Vasta-aineet ja muut reagenssit IHC käytetty tässä työssä ostettiin Maixin (Fujian, Kiina) ja ZSGB-BIO (Peking, Kiina). Lukuun ottamatta Ki67, värjäytymisen intensiteetti pisteytettiin 0-4, jossa 0 on ilman värjäystä; 1, alle 25%: ssa soluista positiivisia; 2, 25-50%: ssa soluista positiivisia; 3, 51-75%: ssa soluista positiivisia; ja 4, > 76% soluista positiivisia. Sillä Ki67, arvosanat olivat suoraan arvostellaan prosentuaalinen positiivinen Ki67 ilmaisua. Levyt luokitellaan vähintään kaksi patologia.
Tilastollinen analyysi
Statistical Program for Social Sciences (SPSS) 16.0 ohjelmisto (SPSS, Chicago, IL, USA) ja GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, LaJolla, CA, USA ) käytettiin kaikissa tilastollisissa analyyseissä. Yksisuuntainen varianssianalyysi (ANOVA), sijoitus-summa testi, ja Studentin t
testiä olivat tärkeimmät tilastolliset menetelmät tässä työssä, p
< 0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävänä.
Tulokset
LncRNAs mikrosiruanalyysi on esillä HNF1A-AS1
ilmentyminen säädeltiin on GC kudoksissa
Kuten kuviossa. 1, tulokset lncRNAs ilmentymisen profiili mikrosiruanalyysi saanut kuuden GC kudosten ja niiden yhdistetty vieressä olevaan ei-neoplastisia mahalaukun kudokset osoittivat, että HNF1A-AS1
ekspressiota säädeltiin kaikissa kuudessa GC kudoksissa (tarkoittaa kertainen muutos 2,06, p
< 0,05), mikä osoitti, että tämä lncRNA voi olla potentiaalia olla yksi kasvaimeen liittyviä LncRNAs. Niinpä valitsimme sen tarkempaa analysointia varten. Kuva. 1 HNF1A-AS1
oli downexpressed kuudessa GC kudoksissa tunnistetaan lncRNAs mikrosiruanalyysillä. 84C, 83C, 87C, 78C, 97C, ja 90C osoitetaan kuusi GC kudosten (84, 83, 87, 78, 97, ja 90 oli kuusi tapausta kudoksen määrä, C
syöpä); 83N, 87N, 90N, 78N, 97N, ja 84N osoitti kuusi vastaavan pariksi viereisen ei-neoplastisten mahalaukun kudosten (N
epäneoplastisis- mahalaukun kudokset). Cluster analyysi perustuu mikrosirujen tulokset osoittivat, että HNF1A-AS1
ilmentyminen GC kudoksissa vaimentua verrattiin pariksi ei-neoplastisten mahalaukun kudokset (keskimääräinen kertainen muutos 2,06, p
< 0,05) B qRT- PCR todentaminen lisäksi vahvistaa, että HNF1A-AS1
ilmentyminen säädeltiin vähentävästi GC solulinjoissa ja kudoksissa
ensin tutkittiin ilmentymistä lncRNA HNF1A-AS1
kolmessa GC solulinjoissa: AGS, BGC-823, ja MKN -45. Käyttämällä qRT-PCR: ää varmistimme, että ilmentyminen HNF1A-AS1
oli merkittävästi vähentynyt kaikissa kolmessa GC solulinjoja suhteessa, että normaaleissa mahan epiteelisoluissa (GES-1-soluissa, AGS, s
< 0,0001; BGC-823, p
< 0,05; MKN-45, p
< 0,05; Fig. 2). Tutkimme myös HNF1A-AS1
ilmentymistä GC kudosnäytteistä ja pariksi viereisen ei-neoplastisia kudosnäytteistä. Tuloksemme osoittivat, että HNF1A-AS1
säädeltiin vähentävästi on 58,38% (94/161) GC kudosten suhteen, että ei-neoplastiset kudokset (s
< 0,01, Fig. 3). Yhdessä nämä tulokset osoittavat, että HNF1A-AS1
on vaimentua ihmisen GC. Kuva. 2 Vähentynyt ilmentyminen HNF1A-AS1
GC-soluissa suhteessa, että normaaleissa mahan epiteelisoluissa. qRT-PCR: ää käytettiin verrattaessa ilmentymisen HNF1A-AS1
in BGC-823, MKN-45, ja AGS GC soluja, jotka ei-neoplastisten GES-1-soluissa. Esitetyt tiedot ovat kolmesta toisistaan ​​riippumattomasta kokeesta ja ilmaistiin keskiarvona ± SD. Tähdellä
osoittavat arvot, joilla on tilastollisesti merkitsevä ero verrattuna arvoon GES-1-soluissa. * P
< 0,05, **** s
< 0,0001. GC
mahasyöpä, qRT-PCR
kvantitatiivisen tosiaikaisen PCR, SD
keskihajonta
Fig. 3 ilmentäminen HNF1A-AS1
in neoplastisia ja ei-neoplastisia mahalaukun kudoksiin. Ekspression HNF1A-AS1
GC kudoksissa verrattuna viereisissä ei-neoplastisten kudosten (n
= 161, ** p
< 0,01). T
GC kudoksissa, N
ei-neoplastisia kudoksia. Esitetyt tiedot ovat kolmesta toisistaan ​​riippumattomasta kokeesta ja ilmaistaan ​​keskiarvona ± SD (ACt-arvo). GC
mahasyöpä, SD
keskihajonta
liitto HNF1A-AS1
lausekkeen kliinis-potilaita, joilla GC
arvioimiseksi kliinistä merkitystä HNF1A-AS1
, analysoimme suhde sen ilmaisun ja kliinis-potilaiden GC. Kuten taulukoissa 1 ja 2, yksiulotteista analyysi osoitti, että ekspressio HNF1A-AS1
liittyi kasvaimen kokoa /halkaisija (p
= 0,002), invaasiota syvyys (T vaiheissa, s
= 0,032 ), lymfaattinen etäpesäke (N vaiheissa, p
= 0,006), laskimoiden invaasio (p
= 0,001), ja hermoa invaasio (PNI, p
= 0,014). Kuitenkin, kun ohjaukseen vaikuttavat tekijät, kuten ikä, sukupuoli, kasvaimen sijainti, kasvaimen koko /halkaisija, erilaistuminen, invaasio (T vaiheita), lymfaattinen etäpesäke (N vaiheita), laskimoiden invaasio, ja PNI, monimuuttuja-analyysi vahvistivat lisäksi, että kasvaimen koko säilyivät merkittävästi korreloi HNF1A-AS1 lauseke (p
= 0,005), mikä merkitsi sitä, että potilailla, joilla kasvaimen koon ≥5 cm oli alhaisempi HNF1A-AS1. Nämä tiedot viittaavat siihen, että HNF1A-AS1
voi olla rooleja syövän esiintymisen ja etenemiseen, ja se voi olla uusi biomarkkereiden mahalaukun cancer.Table 1 liitto HNF1A-AS1 lauseke (ACt) kanssa kliinis-potilaista
Ominaisuudet

No. case (%)
keskiarvo ± SD
p
arvo
Ikä (vuotta) B 0,119
≥60
82 (50,9 )
16.17 ± 2,90
< 60
79 (49,1) B 15,47 ± 2,71
Sukupuoli
0,688
Mies
123 (76,4) B 15,78 ± 2.88
Nainen
38 (23,6) B 15.99 ± 2,66
Kasvain sijainti
0,560
Sinukset ventriculi
57 (35,4) B 16,06 ± 3,13
Cardia
33 (20,5) B 15.87 ± 3,04
Oyj ventriculi
45 (28,0) B 15,92 ± 2,50
Muut
26 (16,1) B 15.11 ± 2,36
halkaisija (cm)
0,002
≥5
73 (45,3) B 16,59 ± 2,8
< 5
88 (54,7) B 15,2 ± 2,70
eriyttäminen
0,396
Well
2 (1,2) B 16,15 ± 0,71
Kohtalainen
34 (21,1) B 15,24 ± 2,66
Poor
125 (77,7 ) B 15.98 ± 2,87
Invasion
0,032
T1
13 (8,1) B 16,13 ± 1,95
T2
14 (8,7) B-14.09 ± 2,24
T3
16 (9,9) B 14,85 ± 3,71
T4
118 (73,3) B 16,13 ± 2,76
Lymphatic etäpesäke
0,006

N0
38 (23,6) B 14,74 ± 2,77
N1-3
123 (76,4) B 16.16 ± 2,76
Laskimoperäiset invaasio
0,001
Absent
86 (53,4)
15,14 ± 2,58
Esitä
75 (46,6) B 16,61 ± 2,90
hermoa invaasiota (PNI) B 0,014
Absent
89 (55,3)
15,34 ± 2,77
Esitä
72 (44,7)
16,43 ± 2,79
CEA
0,028
Normaali
130 (80,7 )
15.59 ± 2,74
korkea
31 (19,3) B 16.83 ± 2,97
CA19-9
0,009
Normaali
140 (87,0)
15,60 ± 2,70
korkea
21 (13,0) B 17,32 ± 3,22
AFP
0,936
Normaali
150 (93,2) B 15,82 ± 2,80
korkea
11 (6,8) B-15.89 ± 3,25
CA-125
0,494
Normaali
154 (95,7) B 15,79 ± 2,84
korkea
7 (4,3 )
16.55 ± 2,33
Kursivoitu arvot ovat merkittäviä p
< 0,05
Taulukko 2 vertailu p
arvoja yhden ja usean analyysit yhdistyksen HNF1A-AS1 lauseke (ACt) kanssa kliinis-potilaista
Ominaisuudet
Univariate

Monimuuttujatestaus
p
arvo
p
arvo
Ikä (vuotta) B 0,119
0,197
Sukupuoli
0,688
0,174
Halkaisija (cm) B 0.002
0,005
erilaistuminen
0,396
0,603
Invasion
0,032
0,580
Lymphatic etäpesäke
0,006
0,235
Laskimoperäiset invaasio
0,001
0,057
hermoa invaasiota (PNI)
0,014
0,192
Kasvain sijainti
0,560
0,342
Kursivoitu arvot ovat merkittäviä p
< 0,05
liitto HNF1A-AS1
ilmaisutapoja seerumin tai immunohistokemiallinen markkereita GC
HNF1A-AS1
ilmentyminen GC kudoksissa liittyi kaksi seerumimarkkereilla ruoansulatuskanavan kasvaimet, CEA (s
= 0,028) ja CA19-9 (p
= 0,009), mutta ei ollut merkittävää yhteyttä muiden ruoansulatuskanavan syöpään seerumimarkkerin AFP tai epiteelin tuumorimarkkeri CA125 (taulukko 1). Ekspression HNF1A-AS1
Tuumorinäytteissä myös korreloi merkitsevästi yhden immunohistokemiallinen markkereita syövän, RRM1 (p
= 0,006), mutta ei VEGF, C-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn tai CGA (taulukko 3) .table 3 liitto HNF1A-AS1 lauseke (ACt) kanssa immunohisochemical piirteitä GC kudoksen
ominaisuudet
No. case (%)
keskiarvo ± SD
p
arvo
VEGF
0,809
0
15 (10,0) B 15.27 ± 3.69
1
22 (14,7)
15,57 ± 2,92
2
33 (22,0) B 15.83 ± 2.72
3
59 (39,3)
15.94 ± 2,54
4
21 (14,0) B 16,39 ± 3,32
C-erbB-2
0,312
0
129 (86,0) B 15,70 ± 2,84
1
5 (3,3)
16,37 ± 2,96
2
4 (2,7) B 15,77 ± 1,01
3
12 (8,0) B-17.30 ± 3.21
TS
0,543
0
22 (14,7) B 16,41 ± 2,45
1
53 (35,3) B 15.99 ± 2,97
2
52 (34,7)
15,33 ± 2,73
3
21 (14,0) B 16,25 ± 3,34
4
2 (1,3) B 15,92 ± 1,82
BRCA1
0,893
0
10 (6.7) B 16,59 ± 1,83
1
31 (20,7) B 16.07 ± 2,91
2
73 (48,6) B 15.78 ± 2.57
3
34 (22,7)
15,61 ± 3,57
4
2 (1,3) B 15,77 ± 5,01
ERCC1
0,585
0
19 (12,7)
15,81 ± 2,39
1
22 (14,7) B 16,51 ± 3,61
2
44 (29,3) B 15.96 ± 2,85
3
41 (27,3)
15,85 ± 3,05
4
24 (16,0) B 15.11 ± 2,02
RRM1
0,006
0
81 ( 54,0) B 15.79 ± 2.41
1
10 (6.7) B 13,27 ± 4,11
2
17 (11,3) B 15,51 ± 3,08
3
35 (23,3) B 16,98 ± 2,93
4
7 (4,7) B 15,48 ± 2,67
Ki67
0,328
1
14 (9,3) B 16,54 ± 1,67
2
35 (23,3) B 16.44 ± 2.79
3
57 (38,0) B 15,48 ± 2,97
4
44 (29,4) B 15.66 ± 3,02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15,99 ± 2,95
1
16 (10,7) B 15,15 ± 2,17
2
3 (2,0) B-13.98 ± 0.87
3
3 (2,0) B 15,59 ± 3,06
CD56
0,364
0
137 (91,4) B 15.94 ± 2.86
1
9 (6,0) B-15.66 ± 3.09
2
2 (1,3) B 12,72 ± 0,84
3
2 (1,3)
14.22 ± 0,97
CGA
0,980
0
141 (94,0) B 15.87 ± 2,91
1
7 (4,7) B 15,69 ± 1,83
2
2 (1,3)
15,63 ± 3,26
Kursivoitu arvot ovat merkittäviä p
< 0.05
Keskustelu
useita linjoja todisteet ovat osoittaneet, että muutokset ilmentyminen lncRNAs tärkeitä rooleja syövän synnyn ja syövän kehityksen [14, 15], ja että muuttunut ilmentyminen lncRNA tiedetään merkittävästi liittyy useita kliinis piirteitä ihmisen kasvaimista, kuten imusolmuke etäpesäke, TNM, etäinen etäpesäke, ja luokka kudoksen erilaistumista. Esimerkiksi vähentynyt ilmentyminen mahalaukun syöpään liittyvän transkriptin 1 (GACAT1
) liittyy merkittävästi etäpesäkkeiden invaasio, ja kudosten erilaistumiseen potilailla, joilla GC [16]. Lisäksi kohonnut ilmentyminen homeobox (HOX) transkripti antisense-RNA (hotair
), pitkä geenien välinen ei-koodaava RNA, liittyy arvosana kohtukarsinooma (EY), etäpesäke, syvyys myometrisia hyökkäystä, ja huonompi yleistä selviytyminen [17]. Lopuksi, alhainen ilmentyminen HMlincRNA717
GC liittyy distaalinen etäpesäkkeitä ja invaasiota laskimoiden ja hermoston [12]. Kaikki nämä havainnot todistavat tärkeitä rooleja lncRNAs karsinogeneesissä ja mahdollinen arvo niiden kliinisen käytön.
Tässä tutkimuksessa olemme päättäneet, että ekspressiotaso HNF1A-AS1
kolmella mahasyövän solulinjoissa pieneni merkitsevästi suhteessa, että normaaleissa mahan epiteelisoluissa. Vielä tärkeämpää on, se vaimentua vuonna 58.38% mahasyövän kudosnäytteiden suhteessa, että viereisissä ei-neoplastisia kudoksia. Havainnot Yang et al. osoittavat, että tämä lncRNA oli yläreguloituja ruokatorven adenokarsinooma (EAC) [13]. Karsinogeneesi ja syövän etenemisessä on monimutkainen patologinen prosessi, joka välittyy geeniekspression verkoissa. Syövän esiintyminen eri elimiä tai kudoksia voidaan säädellä ilmentyvät eri tasoilla samalla geenien tai saman lncRNAs [18, 19]. Tämä saattaa selittää, miksi HNF1A-AS1
esiintyy eriäviä ekspressioprofiileja erityyppisissä syöpäsoluja. Lisätutkimus voi olla tarpeen paljastaa tarkkaa molekyylimekanismiksi näitä eroja.
On hyvin tunnettua, että syövän eteneminen ja metastaasit tapahtuu usein kautta kolme yhteistä reittiä: imusolmuke etäpesäke, kulkevat verisuoniston, ja paikalliset kylvö ja kasvua. PNI on lisäkeino hyökkäyksen, joka on yleensä korreloi paikallisen uusiutumisen. Koska paikallisen uusiutumisen läheisesti liittyy huono ennuste, tunnistaa potilaat on suuri riski PNI on suuri kliininen merkitys.
Ennustetta ja potilaiden selviytymiseen GC voidaan myös vaikuttaa koko kasvain, joka liittyy sen ajan kasvun. Pienemmät kasvaimia esiintyy vähemmän rikkominen vatsaan kuin tehdä suurempia kasvaimia. Lisäksi lisääntynyt syvyys hyökkäystä suurempien kasvaimia lisää todennäköisyyttä, että imunestejärjestelmän on rikottu. Lisääntyvä imusolmuke etäpesäke avulla syöpä kasvaa helpommin ja johtaa huonoon ennusteeseen.
Sekä CEA ja CA19-9, ovat hyvin tunnettuja kasvain markkereita, jotka ovat yleensä yläreguloituja seerumin tai kudoksen näytteitä potilailta, joilla on varhainen tai ensisijainen pahanlaatuisia ruoansulatuskanavan. RRM1 on yksi kolmesta tunnettujen ihmisen ribonukleotidireduktaasia toimintojen kanssa säännellä syöpäsolujen lisääntymistä kautta välittävä DNA-synteesin ja korjaus, ja havaitseminen ilmentymistä RRM1 GC kudoksissa IHC on todettu sisältävän prognostista merkitystä potilaille GC [ ,,,0],20].
Johtopäätökset
Yhteenvetona analysoi yhdistys ilmentymistason HNF1A-AS1
kanssa kliinis-potilaiden GC. Tuloksemme osoittivat, että ilmentyminen HNF1A-AS1
oli merkittävästi vaimentua sekä GC kudoksissa ja solulinjoissa. Lisäksi vähentynyt ilmentyminen liittyi kasvaimen koon /halkaisija ja seerumin CEA, CA19-9, ja kudos RRM1. Nämä havainnot osoittavat, että HNF1A-AS1
voi olla osallisena tukahduttamiseen mahasyövän esiintyminen ja kehitykseen ja että sillä on potentiaalia toimia uutena hoidon tavoite ja biologisten merkkiaineiden arvioinnin sairauden vaikeusasteen potilailla GC. Koska otoskoko Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli suhteellisen pieni, edelleen tarkastus voi olla tarpeen vahvistaa HNF1A-AS1
totta kliininen arvo.
Julistukset
Kiitokset
työtä tukivat Innovation Team Foundation Fuzhou General Hospital for Lie Wang (2014CXTD04); tutkijatohtorivaiheen Foundation of Fuzhou General Hospital (43853) ja Yuan Dang; National Natural Science Foundation of China (Grant nro 81372788), Medical Scientific Research Key Foundation Nanjing sotilasjohdon (nro 11Z032), ja Natural Science Foundation of Fujian (nro 2014J01427) varten Qiaojia Huang; ja Medical Tieteellinen Innovation Foundation Nanjing sotilasjohdon (nro 2013-MS122) varten Yinghao Yu.
Open AccessThis artikkeli jaetaan ehtojen mukaisesti Creative Commons Nimeä 4.0 International License (http: //creativecommons. org /lisenssejä /by /4 0 /), joka mahdollistaa rajoittamattoman käytön, jakelun, ja lisääntyminen tahansa mediassa, kunhan annat asianmukaiset luottoa alkuperäinen kirjoittaja (t) ja lähde, tarjoavat linkin Creative Commons-lisenssillä, ja ilmoittaa, jos muutoksia on tehty. Creative Commons Public Domain Dedication luopuminen (http: //creativecommons. Org /public domain /nolla /1 0 /) sovelletaan toimitetut tiedot tässä artikkelissa, ellei toisin mainita.
Kilpailevat edut
kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.
Tekijät osuudet
YD suoritti kokeita ja tietojen analysointi. FL ohjattu joitakin kokeiluja. XO, KW, ja YL osallistui kerätyistä näytteistä. YY ohjasi formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotettu kudokseen kerättiin ja immunohistokemiallista määritystä. LW ja YW ohjaavat suurten tuoreet näytteet kerättiin. LW myös osaltaan suurten rahoitustukea. QH suunniteltu tutkimus. QH ja YD kirjoitti käsikirjoituksen. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Mahalaukun syöpäsolun supernatantti aiheuttaa apoptoosin ja fibroosia vatsakalvon kudosten ja johtaa suotuisan ympäristön vatsakalvon etäpesäkkeitä, in vitro ja in vivo
• Ovatko protonipumpun estäjät ensimmäinen valinta akuuttiin hoitoon mahahaavan? Meta-analyysi satunnaistetussa kliinisessä tutkimuksessa