Expresión y significación clínica de largo no codificante ARN HNF1A-AS1 en la expresión cancer

gástrica humana y la importancia clínica de largo no codificante ARN HNF1A-AS1
en el cáncer gástrico humano
Resumen Antecedentes

aumento de la evidencia ha demostrado que los largos ARN no codificantes (lncRNAs) desempeñan papeles esenciales en la aparición y el desarrollo de los cánceres humanos, incluyendo el cáncer gástrico (GC). Sin embargo, el significado funcional y clínico de lncRNAs son aún poco conocidos.
Métodos
En este estudio, la expresión de ARN antisentido lncRNA HNF1A 1 (HNF1A-AS1
) fue examinada por primera vez por el análisis de microarrays en 6 lncRNAs GC tejidos, y se verificó luego más por el tiempo real de transcripción inversa cuantitativa PCR (QRT-PCR), tanto en 3 líneas celulares de GC y 161 casos de tejidos GC. También se evaluó la asociación entre la expresión y clinicopathological HNF1A-AS1
características de los pacientes con GC.
Resultados
resultados de los análisis de microarrays lncRNAs expuso que HNF1A-AS1
estaba regulado por disminución en los tejidos GCS (media 2,06 veces el cambio , p Hotel < 0,05), lo que fue confirmado por QRT-PCR. Los resultados de QRT-PCR mostraron que la expresión de HNF1A-AS1
no sólo estaba regulado por disminución en tres líneas de células GC (AGS, BGC-823, y MKN-45) con relación a que en una línea de células epiteliales de la mucosa gástrica normal ( GES-1), sino que también disminuyó en los tejidos GC respecto a la de los tejidos no tumorales adyacentes apareados (baja expresión, 94 de 161, tasa baja expresión, 58,38%). Además, bajo HNF1A-AS1
expresión se asocia con tumor tamaño /diámetro (p = 0,005
, análisis multivariante), los niveles de antígeno carcinoembrionario suero (CEA), y antígeno carbohidrato 19-9 (CA19-9), y expresión RRM1 en muestras de tejido (p = 0,028
, p
= 0,009 y p = 0,006
, respectivamente).
Conclusiones
en conjunto, nuestros datos indican que lncRNA HNF1A-AS1
puede ser un regulador de GC, y por lo tanto, puede tener potencial como un nuevo marcador biológico y objetivo de tratamiento para este tipo de cáncer.
Palabras clave
gástrico lncRNA cáncer HNF1A-AS1
Antecedentes de biomarcadores
el cáncer gástrico (CG) es uno de los cánceres más comunes y puede ocurrir en cualquier sección del estómago humano. Estos tumores son frecuentemente maligno y tienen la capacidad de invadir el tejido perineural [1]. Los datos de la última encuesta anual mundial han demostrado que hay casi 1 millón de nuevos casos y 740.000 muertes por este tipo de cáncer por año en todo el mundo. La incidencia de CG en China es más alta que en la mayoría de los países del mundo, con más de 400.000 nuevos casos cada año y aproximadamente 300.000 muertes. Los estudios han demostrado que si esta enfermedad se puede diagnosticar en una etapa temprana, de buen pronóstico se puede lograr a través de la resección quirúrgica completa del tejido tumoral primaria [2]. Por desgracia, los pacientes con GC muestran pocos síntomas en las primeras etapas de la enfermedad y el diagnóstico suele ser difícil. La tasa de supervivencia a 5 años de GC en las etapas avanzadas sigue siendo pobre y es terco en aproximadamente un 30% [3]. biomarcadores de cáncer permiten cáncer a ser diagnosticado y puede servir como dianas terapéuticas, así como se puede utilizar para explorar la patogénesis de la enfermedad; por lo tanto, la identificación de biomarcadores de cáncer sería de gran valor.
ARN no codificantes largas (lncRNAs) son los ARN no codificantes mayor que 200 nucleótidos [4]. Estos ARN no codifican proteínas y son los principales componentes del transcriptoma humano [5]. Nuevas pruebas indican que lncRNAs son moléculas reguladoras importantes cuyas funciones principales están relacionadas con la modulación de la expresión génica de las redes [6]. Muchas de estas redes están estrechamente relacionados con el desarrollo y progresión del cáncer [6-9]. Los datos de los diferentes grupos han determinado que los cambios en la expresión de lncRNAs están relacionados con la patogénesis de diversos cánceres humanos. Los resultados recientes de Wang et al., Song et al., y Shao et al. han demostrado que los cambios en los perfiles de expresión de lncRNAs están relacionados con la carcinogénesis y la progresión del cáncer gástrico y que lncRNAs podrían ser utilizados como biomarcadores tempranos o como objetivos de tratamiento para GC [10-12].
el fin de identificar la expresión anormal de lncRNAs relacionados con el tumor y aquellos lncRNAs con valores de potencial como biomarcadores, en este estudio, el análisis del perfil de expresión lncRNAs microarray se llevó a cabo en el tejido de seis GC y sus tejidos gástricos no neoplásicas adyacentes apareados. LncRNA HNF1A ARN antisentido 1 (HNF1A-AS1
) fue uno de los lncRNAs que fueron identificados para ser regulados a la baja en los tejidos GC por el análisis de microarrays. HNF1A-AS1
, un gen de un solo exón en la banda del cromosoma 12q24.31 12, es un lncRNA bidireccional de 2455 nucleótidos [13]. El sitio de inicio de la transcripción de este lncRNA está muy cerca de la del factor nuclear hepático 1 gen alfa (HNF1A
; sitio de inicio HNF1A-AS1
's es de aproximadamente 5 kb aguas abajo del HNF1A
) [13]. A nuestro entender, la expresión de HNF1A-AS1 Hoteles en tejidos GC sigue siendo no declarada. Por lo tanto, en este trabajo, a fin de determinar los niveles de expresión de HNF1A-AS1
en 3 líneas celulares de GC y en 161 casos de tejidos GC y sus tejidos gástricos no neoplásicas adyacentes apareados. También se investigó la posible asociación entre la expresión de HNF1A-AS1 Opiniones y características clínico-patológicas de los pacientes con GC. Nuestros datos ilustran el potencial de este lncRNA como un nuevo marcador biológico y un objetivo de tratamiento para la GC.
Métodos
muestras de tejido y recopilación de datos clínicos
Ciento sesenta y un fresco emparejado muestras de tejido (tejido GC y no -neoplastic tejidos recogidos de 5 cm desde el borde del cáncer) se obtuvieron del hospital general de Fuzhou, Fujian, china, en 2014 y 2015. Todas las muestras se obtuvieron inmediatamente después de la operación quirúrgica y se conservan en RNAlater (Qiagen, Alemania) a -80 ° C hasta su uso. Las muestras de suero se utilizan para la detección de los biomarcadores tumorales séricos y muestras de tejidos incluidos en parafina se utilizan para la detección de los marcadores inmunohistoquímicos, también se recogieron de los mismos pacientes. Cada muestra de tejido se histopatológicamente diagnostica y se confirmó por al menos dos patólogos. Los estándares para el tumor-nódulo-metástasis (TNM) etapa y el grado histológico estaban de acuerdo con las directrices de la Internacional Union Against Cancer (UICC; 5ª edición) y de la National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Guías de Práctica Clínica en Oncología (V. 1,2011), respectivamente. Ninguno de los pacientes recibió tratamiento antes de la resección.
Comunicado Ética
El consentimiento informado se obtuvo de todos los participantes individuales incluidos en el estudio, y este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital General de Fuzhou.
Microarrays lncRNAs Francia el ensayo lncRNAs microarrays utilizado en este estudio fueron el humano Microarray lncRNAs V3.0 (Arraystar Inc., MD, EE.UU.), que se compone de lncRNAs y los ARNm a partir del genoma humano. lncRNAs ensayo de microarrays y el análisis de los datos se realizaron por Kangchen Bio-Tech (Shanghai, China) en base a las instrucciones del fabricante. Cultivo de células
AGS, líneas celulares GC BGC-823, y MKN-45 y la normalidad se obtuvieron humanos gástricos línea de células epiteliales (GES-1) de la American Type Culture Collection, Manassas, VA, Shanghai Instituto de Bioquímica y Biología celular, la Academia de Ciencias de china en Shanghai, china, el Banco de Investigación del cáncer de Japón y el Instituto de cáncer de Beijing ( Beijing, china), respectivamente. Las células fueron cultivadas en F12, RP1640, o medio DMEM (Invitrogen, Grand Island, NY, EE.UU.), todos los cuales contenía 10% de suero bovino fetal, en un incubador a 37 ° C con 5% de CO 2.
extracción total de ARN y QRT-PCR
ARN totales se aislaron de ambos tejidos y células cultivadas usando reactivo TRIzol (Invitrogen). a continuación, la transcripción inversa se realizó usando un kit de transcripción inversa (Promega) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. En tiempo real de transcripción inversa cuantitativa PCR (QRT-PCR) se llevó a cabo utilizando el kit Mix SYBR Green (Promega, Madison, WI, EE.UU.) en un paso uno en tiempo real PCR System (ABI, Grand Island, NY, EE.UU.) . Los cebadores para 18s y HNF1A-AS1
qPCR fueron los siguientes: (avance) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'y (inverso) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3' para HNF1A-AS1
; (Avance) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'y (inverso) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3' de 18 años. Las condiciones para la PCR fueron las siguientes: etapa 1, 95 ° C durante 10 min; etapa 2, 40 ciclos a 95 ° C durante 15 s, 57 ° C durante 1 min; etapa 3 (etapa de disociación), 95 ° C durante 15 s, 60 ° C durante 15 s, 95 ° C durante 15 segundos. El ciclo umbral registrado valores (CT) incluyen tanto HNF1A-AS1
y 18 s; este último sirvió como control. El nivel de expresión de HNF1A-AS1
se obtuvo mediante el método? Ct. Los valores más altos indican? Ct menor HNF1A-AS1
expresión. Los resultados se obtuvieron a partir de tres experimentos independientes y se expresan como la media ± desviación estándar (SD).
Medición de la AFP, CA-125, CEA, y las concentraciones de CA19-9 en el suero de pacientes con GC
las concentraciones de alfa-fetoproteína (AFP), antígeno carcinoembrionario (CEA), antígeno de cáncer 125 (CA-125), y el antígeno de hidratos de carbono se detectaron 19-9 (CA19-9) en el suero de todos los 161 casos de este grupo los pacientes mediante el uso de el Kit cuantitativo de marcador tumoral (Protein Chip-quimioluminiscencia) (HealthDigit, Huzhou, china) con el Sistema ChipReader HD-2001A (HealthDigit). En este estudio, los valores normales de referencia para los individuos sanos fueron < 20,0 ng /ml, < 5,0 ng /ml, < 35,0 U /ml y < 35.0 U /ml de AFP, CEA, CA-125, y CA19 -9, respectivamente.
IHC
Se utilizó la inmunohistoquímica (IHC) en secciones embebidas en parafina para determinar la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor de crecimiento epidérmico humano receptor 2 (C-erbB-2 o HER2 ), la timidilato sintasa (TS), el cáncer de mama 1 (BRCA1), la reparación por escisión del grupo transversal complementación 1 (ERCC1), el antígeno Ki67 (Ki67), y la subunidad de la ribonucleótido reductasa M1 (RRM1), sinaptofisina (SYN), moléculas de adhesión celular neuronal (CD56), y cromogranina A (CGA); se dispuso de 150 casos de las muestras de tejido en parafina de este grupo de pacientes para el ensayo IHC. IHC se realizó por los patólogos de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes. Los anticuerpos y otros reactivos para IHC utilizados en este trabajo fueron adquiridos de Maixin (Fujian, China) y ZSGB-BIO (Pekín, China). Con la excepción de Ki67, la intensidad de la tinción se graduó de 0 a 4, siendo 0 la ausencia de tinción; 1, a menos de 25% de células positivas; 2, de 25 a 50% de células positivas; 3, 51-75% de células positivas; y 4, > 76% de células positivas. Para Ki67, las calificaciones fueron juzgados directamente como el porcentaje de positivos para la expresión de Ki67. Los portaobjetos se clasifican por lo menos dos patólogos.
El análisis estadístico
Programa Estadístico para Ciencias Sociales (SPSS) de software 16.0 (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.) y GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA, EE.UU. ) se utilizaron para todos los análisis estadísticos. Una forma de análisis de varianza (ANOVA), la prueba de suma de rangos, y t
test de Student fueron los principales métodos estadísticos utilizados en este trabajo, el p Hotel < 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
exposiciones de análisis de microarrays que lncRNAs HNF1A-AS1
expresión es downregulated en los tejidos GCS
Como se muestra en la Fig. 1, los resultados del análisis de microarrays de expresión lncRNAs perfil obtenido de seis tejidos GC y sus tejidos gástricos no neoplásicas adyacentes apareados mostraron que HNF1A-AS1
expresión se downregulated en todos los seis tejidos GC (media veces el cambio 2,06, p
< 0,05), lo que indica que este lncRNA puede tener el potencial de ser una de las lncRNAs relacionados con el tumor. Por lo tanto, lo elegimos para su posterior análisis. Higo. 1 HNF1A-AS1
se downexpressed en seis tejidos GC identificados por el análisis de microarrays lncRNAs. 84C, 83C, 87C, 78C, 97C, 90C y seis tejidos indicó GC (84, 83, 87, 78, 97 y 90 fueron los seis casos de varios tejidos, C
cáncer); 83N, 87N, 90N, 78N, 97N, 84N y señalaron los seis tejidos correspondientes pares adyacentes no neoplásicas gástricas (N
tejidos gástricos no neoplásicas). El análisis de agrupamiento basado en los resultados de microarrays que exhibió HNF1A-AS1
expresión en tejidos GC se downregulated en comparación con la de los tejidos gástricos no neoplásicas pareadas (media de 2,06 veces el cambio, p Hotel < 0,05) QRT-
la verificación de PCR confirma, además, que HNF1A-AS1
expresión es downregulated en líneas celulares y tejidos GC
lo primero que investigó la expresión de lncRNA HNF1A-AS1
en tres líneas celulares GC: AGS, BGC-823, y MKN -45. Mediante el uso de QRT-PCR, se confirmó que la expresión de HNF1A-AS1
se redujo significativamente en las tres líneas celulares GC respecto a la de las células epiteliales gástricas normales (células GES-1; AGS, p Restaurant < 0,0001; BGC-823, p
< 0,05; MKN-45, p
< 0.05; Fig. 2). También se examinaron HNF1A-AS1
expresión en muestras de tejido de GC y vinculado muestras de tejido no neoplásicas adyacentes. Nuestros resultados mostraron que HNF1A-AS1
se downregulated en 58,38% (94/161) de los tejidos GC respecto a la de los tejidos no neoplásicos (p
< 0,01, Fig. 3). Tomados en conjunto, estos datos indican que HNF1A-AS1
está regulado por disminución en GC humana. Higo. 2 Disminución de la expresión de HNF1A-AS1
en células de GC con relación a la de las células epiteliales gástricas normales. QRT-PCR se utilizó para comparar la expresión de HNF1A-AS1
en BGC-823, MKN-45, y las células AGS GC a la de las células GES-1 no neoplásicas. Los datos mostrados son de tres experimentos independientes y se expresan como la media ± SD. Los asteriscos indican los valores
con una diferencia estadísticamente significativa en comparación con el valor en las células GES-1. * P Hotel < 0,05, p **** Hotel < 0,0001. GC
cáncer gástrico, QRT-PCR cuantitativa
-PCR en tiempo real, SD
desviación estándar
Fig. 3 Expresión de HNF1A-AS1
en los tejidos gástricos neoplásicas y no neoplásicas. La expresión de HNF1A-AS1
en los tejidos de GC se comparó con la de los tejidos no neoplásicas adyacentes (n = 161
, ** p
< 0,01). T
tejidos GC, N
tejidos no neoplásicos. Los datos mostrados son de tres experimentos independientes y se expresan como la media ± desviación estándar (Ct valor). cáncer gástrico GC
, SD
desviación estándar
Asociación de HNF1A-AS1
expresión con las características clínico-patológicas de los pacientes con GC
para evaluar la significación clínica de HNF1A-AS1
, analizamos la relación entre su expresión y clinicopathological características de los pacientes con GC. Como se muestra en las Tablas 1 y 2, el análisis univariado mostró que la expresión de HNF1A-AS1
estaba asociado con un tumor del tamaño /diámetro (p = 0,002
), la profundidad de la invasión (estadio T, p = 0,032
), metástasis linfática (N etapas, p = 0,006
), invasión venosa (p = 0,001
), y la invasión perineural (PNI, p = 0,014
). Sin embargo, después de controlar afecta a factores como la edad, el sexo, la localización del tumor, el tamaño del tumor /diámetro, diferenciación, invasión (estadio T), metástasis linfática (N etapas), invasión venosa, y PNI, el análisis multivariante confirmó, además, que el tamaño del tumor persistió a significativamente correlacionada con la expresión HNF1A-AS1 (p = 0,005
), lo que significaba que los pacientes con tumores mayores de 5 cm de tamaño tenían niveles más bajos de HNF1A-AS1. Estos datos sugieren que HNF1A-AS1
pueden desempeñar funciones durante la aparición y progresión del cáncer y puede ser un nuevo biomarcador de gástrica cancer.Table 1 Asociación de expresión HNF1A-AS1 (Ct) con las características clínico-patológicas de los pacientes
Características
Nº
de los casos (%)
Media ±
p
valor
Edad (años)
0,119
≥60
82 (50,9 ): perfil del 16.17 ± 2.90 Hotel < 60
79 (49,1)
15,47 ± 2,71
Sexo Masculino
0.688

123 (76.4) 15.78 ±
2,88
Mujer
lugar 38 (23,6)
15.99 ± 2.66
tumor
0.560
senos paranasales ventriculi
57 (35,4)
16.06 ± 3.13
Cardia
33 (20,5)
15.87 ± 3.04
Corpora ventriculi
45 (28,0)
15,92 ± 2,50
Otros
26 (16,1)
15.11 ± 2.36
diámetro (cm)
0,002
≥5
73 (45,3)
16,59 ± 2,8 Hotel < 5
88 (54,7) 15,2 ± 2,70

Diferenciación
0,396
Bueno página 2 (1.2)
16,15 ± 0,71
Moderado
34 (21,1)
15.24 ± 2.66
Pobre
125 (77,7 )
15.98 ± 2.87
invasión
0,032
T1 página 13 (8.1)
16.13 ± 1.95
T2 página 14 (8.7) 14.09
± 2,24
T3
16 (9,9)
14.85 ± 3.71
T4
118 (73,3)
16.13 ± 2.76
linfático metástasis
0,006

N0
38 (23,6)
14.74 ± 2.77
N1-3
123 (76,4)
16.16 ± 2.76
invasión venosa
0,001
Ausente
86 (53,4)
15.14 ± 2.58
presente
75 (46,6)
16.61 ± 2.90
invasión perineural (PNI)
0,014
Ausente
89 (55,3)
15,34 ± 2,77
presente
72 (44,7)
16.43 ± 2.79
CEA
0,028
normal
130 (80,7 )
15.59 ± 2.74
alto
31 (19,3)
16.83 ± 2.97
CA19-9
0,009
normal
140 (87,0)
15.60 ± 2.70
alto
21 (13,0)
17.32 ± 3.22
AFP
0,936
normal
150 (93,2)
15.82 ± 2.80
Alto página 11 (6,8)
15.89 ± 3.25 hotels, CA-125
0,494
normal
154 (95,7)
15.79 ± 2.84
alta página 7 (4.3 ): perfil del 16.55 ± 2.33
valores en cursiva son significativas ap Hotel < 0.05
Tabla 2 Comparación de los valores de p
obtenidos de los análisis univariante y multivariante de la asociación de la expresión HNF1A-AS1 (Ct) con las características clínico-patológicas de los pacientes
Características
univariante

p
multivariado
valor
p
valor
Edad (años)
0,119 0,197

Género
0,688 0,174

Diámetro (cm)
0,002 0,005

Diferenciación
0,396 0,603

invasión
0,032 0,580

metástasis linfática
0,006 0,235

invasión venosa
0,001 0,057

invasión perineural (PNI): perfil del 0,014 0,192

Localización del tumor
0,560
0.342
valores en cursiva son significativas ap Hotel < 0.05
Asociación de HNF1A-AS1
expresión con suero o inmunohistoquímicos marcadores de GC
HNF1A-AS1
expresión en tejidos GC se asoció con dos marcadores séricos de tumores del tracto digestivo, CEA (p
= 0,028) y CA 19-9 (p = 0,009
), pero no hubo una asociación significativa con otro tipo de cáncer del tracto digestivo AFP marcador sérico o con el marcador tumoral CA125 epitelial (Tabla 1). La expresión de HNF1A-AS1
en muestras de tumor también se correlacionó significativamente con uno marcadores inmunohistoquímicos de cáncer, RRM1 (p
= 0,006), pero no con VEGF, C-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn, o CGA (Tabla 3) .Tabla Asociación 3 de expresión HNF1A-AS1 (Ct) con características immunohisochemical de tejido GC
características
No. de los casos (%)
Media ±
p
valor
VEGF
0,809
0
15 (10,0)
15.27 ± 3.69
1 | 22 (14,7)
15,57 ± 2,92
2 33 (22,0)
15.83 ± 2.72 página 3
59 (39,3)
15.94 ± 2.54
4 de 21 (14,0)
16.39 ± 3.32
C-erbB-2
0,312
0
129 (86,0)
15.70 ± 2.84
1 página 5 (3.3)
16,37 ± 2,96
2 4 (2,7)
15.77 ± 1.01 página 3 página 12 (8,0)
17.30 ± 3.21
TS
0,543
0
22 (14,7)
16.41 ± 2.45
1 | 53 (35,3)
15.99 ± 2.97
2 52 (34.7)
15.33 ± 2.73 página 3
21 (14,0)
16.25 ± 3.34
4 de 2 (1.3)
15,92 ± 1,82
BRCA1
0.893
0
10 (6,7)
16.59 ± 1.83
1 | 31 (20,7)
16,07 ± 2,91
2 73 (48,6)
15.78 ± 2.57 página 3
34 (22,7)
15,61 ± 3,57
4 de 2 (1.3)
15.77 ± 5.01
ERCC1
0.585
0
19 (12,7)
15.81 ± 2.39
1 | 22 (14,7)
16,51 ± 3,61
2 44 (29,3)
15.96 ± 2.85 página 3
41 (27,3)
15.85 ± 3.05
4 de 24 (16,0)
15.11 ± 2.02
RRM1
0,006
0
81 ( 54.0)
15.79 ± 2.41
1 | 10 (6,7)
13.27 ± 4.11
2 17 (11,3)
15.51 ± 3.08 página 3
35 (23.3)
16.98 ± 2.93
4 de 7 (4.7)
15.48 ± 2.67
Ki67
0,328
1 página 14 (9.3) 16.54 ±
1,67
2 35 (23,3)
16.44 ± 2.79 página 3
57 (38,0)
15.48 ± 2.97
4 de 44 (29,4)
15.66 ± 3,02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15.99 ± 2.95
1 | 16 (10,7)
15.15 ± 2.17 página 2
3 (2,0)
13.98 ± 0.87 página 3 página 3 (2,0)
15.59 ± 3.06
CD56
0,364
0
137 (91,4)
15.94 ± 2.86
1 página 9 (6.0)
15.66 ± 3.09
2 2 (1.3)
12,72 ± 0,84 página 3 página 2 (1.3)
14.22 ± 0.97
CGA
0,980
0
141 (94,0)
15.87 ± 2.91
1 página 7 (4.7)
15.69 ± 1.83 página 2 página 2 (1.3)
15,63 ± 3,26
valores en cursiva son significativas ap Hotel < 0.05
Discusión
Varias líneas de evidencia han demostrado que los cambios en la expresión de lncRNAs juegan un papel importante en la carcinogénesis y el desarrollo del cáncer [14, 15] y que la expresión alterada de lncRNA se sabe que se asociaron significativamente con varias características clinicopatológicas de tumores humanos, tales como la metástasis de los ganglios linfáticos, el estadio TNM, metástasis a distancia, y el grado de diferenciación de los tejidos. Por ejemplo, disminución de la expresión de transcripción gástrica asociada al cáncer 1 (GACAT1
) está asociado de forma significativa con la metástasis, invasión, y la diferenciación de tejidos en pacientes con GC [16]. Además, la expresión elevada de homeobox (HOX) transcrito de ARN antisentido (HOTAIR
), un largo ARN no codificante intergénica, está asociada con el grado de carcinoma endometrial (CE), la metástasis, la profundidad de la invasión miometrial, y más pobre en general la supervivencia [17]. Por último, la baja expresión de HMlincRNA717 Hoteles en GC se asocia con metástasis distal y la invasión de los sistemas venoso y nervioso [12]. Todos estos hallazgos son evidencia de las importantes funciones de lncRNAs en la carcinogénesis y el valor de potencial en su aplicación clínica.
En este estudio, se determinó que el nivel de expresión de HNF1A-AS1
en tres líneas celulares de cáncer gástrico se redujo significativamente con respecto a la de las células epiteliales gástricas normales. Más importante aún, se downregulated en 58,38% de las muestras de tejido de cáncer gástrico en relación a la de los tejidos no neoplásicas adyacentes. Los resultados de Yang et al. muestran que esta lncRNA se reguló en el adenocarcinoma de esófago (EAC) [13]. La carcinogénesis y la progresión del cáncer es un proceso patológico complejo que está mediada por las redes de expresión génica. la incidencia de cáncer en diferentes órganos o tejidos puede ser regulada por los niveles expresados ​​diferencialmente de los mismos genes o los mismos lncRNAs [18, 19]. Esto puede explicar por qué HNF1A-AS1
exhibe perfiles de expresión divergentes en diferentes tipos de células cancerosas. La investigación adicional puede ser necesaria para revelar el mecanismo molecular preciso de estas diferencias
Es bien sabido que la invasión del cáncer y la metástasis se produce con frecuencia a través de tres vías comunes:. Metástasis en ganglios linfáticos, viaja a través del sistema vascular, y la siembra y el crecimiento local. PNI es un medio adicional de invasión que generalmente está relacionada con la recurrencia local. Debido a la recurrencia local está estrechamente asociada con mal pronóstico, la identificación de pacientes con alto riesgo de PNI tiene una gran importancia clínica. México La pronóstico y la supervivencia de los pacientes con GC también puede ser afectado por el tamaño del tumor, el cual está relacionado a su vez de crecimiento. Los tumores más pequeños muestran una menor infracción en el estómago que lo hacen los tumores más grandes. Por otra parte, el aumento de la profundidad de la invasión de los tumores de mayor tamaño aumenta la probabilidad de que se violó el sistema linfático. El aumento de la metástasis de los ganglios linfáticos permite que el cáncer crezca más fácilmente y resulta en un mal pronóstico.
Tanto CEA y CA19-9 son marcadores tumorales conocidos que por lo general son upregulated en muestras de suero o de tejido de pacientes con tumores malignos primarios de primeros o el tracto digestivo. RRM1 es uno de los tres conocidos ribonucleótido reductasa humana con las funciones de la regulación de la proliferación de células cancerosas a través de la mediación de la síntesis y reparación del ADN, y la detección de la expresión de RRM1 en los tejidos GC por IHC se ha identificado a tener un significado pronóstico en pacientes con GC [ ,,,0],20].
Conclusiones
En resumen, se analizó la asociación del nivel de expresión de HNF1A-AS1
con las características clínico-patológicas de los pacientes con GC. Nuestros resultados mostraron que la expresión de HNF1A-AS1
se downregulated significativamente en ambos tejidos GC y líneas celulares. Por otra parte, la disminución de la expresión se asoció con el tamaño del tumor /diámetro y los niveles séricos de CEA, CA 19-9, y el tejido RRM1. Estos hallazgos indican que HNF1A-AS1
puede estar implicado en la supresión de la incidencia de cáncer gástrico y el desarrollo y que tiene el potencial de servir como un objetivo de tratamiento novedoso y biomarcadores para la evaluación de la gravedad de la enfermedad en pacientes con GC. Debido a que el tamaño de la muestra de este estudio fue relativamente pequeño, la verificación adicional puede ser necesaria para confirmar HNF1A-AS1
's cierto valor clínico.
Declaraciones
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por la Fundación de la Innovación equipo del hospital general de Fuzhou Wang Lie (2014CXTD04); la Fundación postdoctoral del Hospital General de Fuzhou (43853) para el Yuan Dang; la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Subvención Nº 81.372.788), la Fundación Científica Médica clave de la investigación del Comando Militar de Nanjing (núm 11Z032), y la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Fujian (núm 2014J01427) para Qiaojia Huang; . La Fundación Científica y Médica Innovación del Comando Militar de Nanjing (Nº 2013-MS122) para Yinghao Yu artículo abierto AccessThis
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de la competencia. intereses
los autores declaran que no tienen intereses en competencia.
contribuciones de los autores
YD realizado los experimentos y análisis de datos. FL guiado algunos experimentos. XO, KW, y YL participaron en las muestras recogidas. YY guió el tejido incluido en parafina y fijado en formalina recogido y ensayo inmunohistoquímico. LW y PA guiados principales muestras frescas recogidas. LW también contribuyó al importante apoyo financiero. QH diseñó el estudio. QH y YD escribió el manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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