Espressione e significato clinico di RNA non codificante lungo HNF1A-AS1 nel cancro gastrico umano

Espressione e significato clinico di RNA non codificante lungo HNF1A-AS1
nel carcinoma gastrico umano
Abstract
sfondo
crescente evidenza ha dimostrato che lunghi RNA non codificanti (lncRNAs) giocano un ruolo essenziale nella comparsa e lo sviluppo dei tumori umani, tra cui il cancro gastrico (GC). Tuttavia, il significato funzionale e clinica di lncRNAs sono ancora poco conosciuta.
Metodi
In questo studio, l'espressione di LncRNA HNF1A RNA antisenso 1 (HNF1A-AS1
) è stato esaminato da analisi lncRNAs microarray a 6 tessuti GC, ed è stato poi ulteriormente verificata da tempo reale inversione quantitativa trascrizione PCR (qRT-PCR) sia in 3 linee di cellule GC e 161 casi di tessuti GC. Abbiamo anche valutato l'associazione tra HNF1A-AS1
espressione e clinico-patologici caratteristiche dei pazienti con CG
. Risultati
i risultati delle analisi di microarray LncRNAs esposto che HNF1A-AS1
era downregulated nei tessuti GCs (variazione media piega 2.06 , p
< 0,05), che è stata ulteriormente confermata da qRT-PCR. I risultati di qRT-PCR hanno dimostrato che l'espressione di HNF1A-AS1
non solo era downregulated in tre linee di cellule GC (AGS, BGC-823, e MKN-45) relativi a quello di una normale linea di cellule epiteliali della mucosa gastrica ( GES-1), ma anche diminuito nei tessuti GC relativi a quella nei tessuti non neoplastiche adiacenti accoppiate (bassa espressione, 94 dei 161; basso tasso di espressione, 58.38%). Inoltre, a basso HNF1A-AS1
espressione è stata associata a tumore dimensioni /diametro (p = 0,005
, analisi multivariata), i livelli di siero di antigene carcinoembrionario (CEA), e carboidrati antigene 19-9 (CA 19-9), e RRM1 espressione in campioni di tessuto (p = 0,028
, p = 0,009
, e p = 0.006
, rispettivamente).
Conclusioni
nel loro insieme, i nostri dati indicano che lncRNA HNF1A-AS1
può essere un regolatore di GC, e, quindi, può avere un potenziale come un romanzo biomarker e un obiettivo di trattamento per questo tipo di cancro.
Parole
cancro gastrico lncRNA HNF1A-AS1
biomarker Sfondo
cancro gastrico (GC) è uno dei tumori più comuni e può verificarsi in qualsiasi sezione dello stomaco umano. Questi tumori sono spesso maligni e hanno la capacità di invadere i tessuti perineurale [1]. I dati del più recente sondaggio annuale globale hanno dimostrato che ci sono quasi 1 milione di nuovi casi e 740.000 decessi per questo tipo di tumore all'anno in tutto il mondo. L'incidenza di GC in Cina è superiore che nella maggior parte dei paesi del mondo, con oltre 400.000 nuovi casi ogni anno e circa 300.000 decessi. Studi hanno dimostrato che se questa malattia può essere diagnosticata in una fase precoce, buona prognosi può essere ottenuto attraverso la resezione chirurgica completa del tessuto tumorale primario [2]. Purtroppo, i pazienti con GC mostrano pochi sintomi nelle fasi iniziali della malattia e la diagnosi di solito è difficile. Il tasso di sopravvivenza a 5 anni del GC a stadi avanzati rimane scarsa ed è testardo, a circa il 30% [3]. biomarker tumorali permettono cancro da diagnosticare e può servire come bersagli terapeutici, così come può essere utilizzato per esplorare la patogenesi della malattia; di conseguenza, l'identificazione di biomarcatori del cancro sarebbe di grande valore.
RNA non codificanti lunghi (lncRNAs) sono RNA non codificanti superiore a 200 nucleotidi [4]. Questi RNA non codificano proteine ​​e sono i componenti principali del trascrittoma umano [5]. Prove emergenti indicano che lncRNAs sono importanti molecole regolatrici le cui funzioni principali sono legati alla modulazione delle reti di espressione genica [6]. Molte di queste reti sono strettamente associati con lo sviluppo del cancro e nella progressione [6-9]. I dati provenienti da diversi gruppi hanno stabilito che cambiamenti nell'espressione di lncRNAs sono legati alla patogenesi di diversi tumori umani. Recenti scoperte da Wang et al., Song et al., e Shao et al. hanno dimostrato che i cambiamenti nei profili di espressione di lncRNAs sono legati al gastrico cancerogenesi e progressione del cancro e che lncRNAs potrebbero essere utilizzati come biomarker precoci o come obiettivi di trattamento per GC [10-12].
Per identificare l'espressione anormale di LncRNAs tumore-correlate e di quelle LncRNAs con valori potenziali biomarcatori come, in questo studio, il lncRNAs espressione analisi del profilo microarray è stata eseguita nel tessuto sei GC e loro tessuti accoppiati adiacenti non neoplastiche gastrici. LncRNA HNF1A RNA antisenso 1 (HNF1A-AS1
) è stato uno dei LncRNAs che sono stati identificati per essere downregulated nei tessuti GC dall'analisi microarray. HNF1A-AS1
, un singolo gene-esone a banda 12q24.31 del cromosoma 12, è un lncRNA bidirezionale di 2455 nucleotidi [13]. Il sito di inizio della trascrizione di questo lncRNA è molto vicina a quella di epatica gene nucleare fattore 1 alfa (HNF1A
; sito di inizio HNF1A-AS1 's
è di circa 5 kb a valle di HNF1A
) [13]. A nostra conoscenza, l'espressione di HNF1A-AS1
nei tessuti GC rimane non dichiarata. Pertanto, in questo lavoro, abbiamo determinato i livelli di espressione di HNF1A-AS1
in 3 linee di cellule GC e in 161 casi di tessuti GC e dei loro tessuti accoppiati adiacenti non neoplastiche gastrici. Abbiamo anche studiato la potenziale associazione tra l'espressione di HNF1A-AS1
e le caratteristiche clinico-patologici di pazienti con GC. I nostri dati dimostrano il potenziale di questo lncRNA come un romanzo biomarker e un obiettivo di trattamento per GC.
Metodi
campioni di tessuto e la raccolta di dati clinici
Cento e sessantuno campioni di tessuto fresco abbinato (tessuto GC e non tessuti -neoplastic raccolto 5 cm dal bordo del cancro) sono stati ottenuti da Fuzhou General Hospital, Fujian, Cina, nel 2014 e 2015. Tutti i campioni sono stati ottenuti immediatamente dopo l'intervento chirurgico e conservati in RNAlater (Qiagen, Germania) a -80 ° C fino al momento dell'uso. I campioni di siero utilizzati per il rilevamento dei biomarcatori tumorali nel siero e campioni di tessuto inclusi in paraffina utilizzati per la rilevazione dei marcatori immunoistochimici sono stati raccolti anche dagli stessi pazienti. Ogni campione di tessuto è stata vista istopatologico diagnosticata e confermata da almeno due patologi. Gli standard per tumore-node-metastasi (TNM) stadio e grado istologico erano in conformità con le linee guida della Unione Internazionale Contro il Cancro (UICC; 5th Ed) e del National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Clinical Practice Guidelines in Oncologia (V. 1.2011), rispettivamente. Nessuno dei pazienti ha ricevuto un trattamento prima della resezione.
Dichiarazione etica
Il consenso informato è stato ottenuto da tutti i singoli partecipanti inclusi nello studio, e questo studio è stato approvato dal Comitato Etico di Fuzhou General Hospital.
LncRNAs microarray saggio
I lncRNAs microarray utilizzati in questo studio sono stati l'umano lncRNAs microarray V3.0 (Arraystar Inc., MD, USA), che è stato composto da lncRNAs e mRNA dal genoma umano. saggio microarray lncRNAs e l'analisi dei dati sono state eseguite da Kangchen Bio-Tech (Shanghai, Cina) in base alle istruzioni del produttore.
cellulare cultura
AGS, linee cellulari GC BGC-823, e MKN-45 e normale umani gastrici linee cellulari epiteliali (GES-1) sono stati ottenuti dal tipo americano Culture Collection, Manassas, VA, Shanghai Istituto di Biochimica e Biologia cellulare, l'Accademia Cinese delle Scienze di Shanghai, in Cina, giapponese Cancer Bank Research e Pechino Cancer Institute ( Pechino, Cina), rispettivamente. Le cellule sono state coltivate in F12, RP1640, o medio DMEM (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), ognuno dei quali conteneva 10% di siero fetale bovino, in un incubatore a 37 ° C con 5% di CO 2.
estrazione di RNA totale e qRT-PCR
RNA totali sono stati isolati da entrambi i tessuti e cellule in coltura, utilizzando il reagente TRIzol (Invitrogen). La trascrizione inversa è stata poi eseguita utilizzando un kit di trascrizione inversa (Promega) in accordo con le istruzioni del produttore. In tempo reale inversione quantitativa trascrizione PCR (qRT-PCR) è stata effettuata utilizzando il kit di SYBR Green Mix (Promega, Madison, WI, USA) in una Fase uno Real-time PCR (ABI, Grand Island, NY, USA) . I primer per 18 anni e HNF1A-AS1
qPCR sono stati i seguenti: (avanti) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'e (indietro) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3' per HNF1A-AS1
; (Avanti) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'e (indietro) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3' per 18 anni. Le condizioni di PCR erano le seguenti: Fase 1, 95 ° C per 10 min; fase 2, 40 cicli a 95 ° C per 15 s, 57 ° C per 1 min; fase 3 (fase di dissociazione), 95 ° C per 15 s, 60 ° C per 15 s, 95 ° C per 15 secondi. La soglia di ciclo registrato valori (CT) inclusi sia HNF1A-AS1
e 18 s; quest'ultimo servito come controllo. Il livello di espressione di HNF1A-AS1
è stato ottenuto utilizzando il metodo ΔCt. I valori più alti ΔCt indicati inferiore HNF1A-AS1
espressione. I risultati sono stati ottenuti da tre esperimenti indipendenti ed espressi come media ± deviazione standard (SD).
Misura di AFP, CA-125, CEA, e le concentrazioni CA19-9 nel siero di pazienti con GC
Le concentrazioni di alfa-fetoproteina (AFP), antigene carcinoembrionario (CEA), antigene del cancro 125 (CA-125), e l'antigene carboidrato 19-9 (CA 19-9) sono stati rilevati nel siero di tutti 161 casi di questo gruppo pazienti utilizzando il kit quantitativo per marcatore tumorale (Protein Chip-chemiluminescenza) (HealthDigit, Huzhou, Cina) con il ChipReader sistema HD-2001A (HealthDigit). In questo studio, i valori di riferimento normali per individui sani erano < 20,0 ng /ml, < 5.0 ng /ml, < 35,0 U /ml e < 35.0 U /ml per AFP, CEA, CA-125, e CA19 -9, rispettivamente.
IHC
Abbiamo usato l'immunoistochimica (IHC) nelle sezioni in paraffina per determinare l'espressione del fattore di crescita vascolare endoteliale (VEGF), recettore del fattore di crescita epidermico umano 2 (C-erbB-2 o HER2 ), timidilato sintasi (TS), il cancro al seno 1 (BRCA1), di riparazione per escissione gruppo cross-complementazione 1 (ERCC1), Ki67 antigene (Ki67), e ribonucleotide subunità riduttasi M1 (RRM1), synaptophysin (Syn), neuronali molecole di adesione cellulare (CD56), e cromogranina A (CgA); 150 casi di campioni di tessuto inclusi in paraffina di questo gruppo i pazienti erano disponibili per il test IHC. IHC è stata effettuata dai patologi in conformità con le istruzioni del produttore. Gli anticorpi e altri reagenti per IHC utilizzati in questo lavoro sono stati acquistati da Maixin (Fujian, Cina) e ZSGB-BIO (Pechino, Cina). Con l'eccezione del Ki67, l'intensità della colorazione è stata classificata da 0 a 4, con 0 che alcuna colorazione; 1, meno del 25% di cellule positive; 2, dal 25 al 50% di cellule positive; 3, il 51 al 75% di cellule positive; e 4, > 76% delle cellule positive. Per Ki67, i gradi erano direttamente giudicati come la percentuale positivo per l'espressione Ki67. Le diapositive sono stati classificati da almeno due patologi.
Analisi statistica
Programma Statistico per le Scienze Sociali (SPSS) software 16.0 (SPSS, Chicago, IL, USA) e GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, LaJolla, CA, Stati Uniti d'America ) sono stati utilizzati per tutte le analisi statistiche. Unidirezionale analisi della varianza (ANOVA), il rank test-sum, e il test t
di Student sono stati i principali metodi statistici utilizzati in questo lavoro, il p
< 0.05 è stato considerato statisticamente significativo.
Risultati
mostre analisi LncRNAs microarray che HNF1A-AS1
espressione è inibiti nei tessuti GCs
come indicato in fig. 1, i risultati delle analisi lncRNAs profilo di espressione microarray ottenuti da sei tessuti GC e dei loro tessuti accoppiati adiacenti non neoplastiche gastrici esposti che HNF1A-AS1
espressione è stata downregulated in tutte le sei tessuti GC (variazione media piega 2.06, p
< 0,05), che ha indicato che questo lncRNA può avere il potenziale per essere uno dei LncRNAs tumore-correlati. Così, abbiamo scelto per ulteriori analisi. Figura. 1 HNF1A-AS1
stato downexpressed in sei tessuti GC individuati mediante l'analisi lncRNAs microarray. 84C, 83C, 87C, 78C, 97C, 90C e ha indicato sei tessuti GC (84, 83, 87, 78, 97, e 90 sono stati i sei casi di numero di tessuti, C
cancro); 83N, 87N, 90N, 78N, 97N, 84N e indicate le sei corrispondenti coppie di tessuti gastrici non neoplastiche adiacenti (N
tessuti gastrici non neoplastiche). cluster analysis sulla base dei risultati di microarray esposto che HNF1A-AS1
espressione nei tessuti GC era downregulated rispetto a quella dei tessuti gastrici non neoplastiche appaiati (variazione media piega 2.06, p
< 0,05)
qRT- verifica PCR conferma inoltre che HNF1A-AS1
espressione è downregulated in linee cellulari GC e tessuti
in primo luogo abbiamo indagato l'espressione di lncRNA HNF1A-AS1
in tre linee di cellule GC: AGS, BGC-823, e MKN -45. Utilizzando qRT-PCR, abbiamo confermato che l'espressione di HNF1A-AS1
era significativamente diminuita in tutte le linee cellulari e tre GC relativi a quella in normali cellule epiteliali gastriche (cellule GES-1; AGS, p
< 0,0001; BGC-823, p
< 0,05; MKN-45, p
< 0,05; Fig. 2). Abbiamo inoltre esaminato HNF1A-AS1
espressione in campioni di tessuto GC e associato campioni di tessuto non-neoplastiche adiacenti. I nostri risultati hanno dimostrato che HNF1A-AS1
era downregulated a 58.38% (94/161) dei tessuti GC relativi a quella nei tessuti non neoplastiche (p
< 0.01, Fig. 3). Presi insieme, questi dati indicano che HNF1A-AS1
è downregulated in GC umana. Figura. 2 diminuita espressione di HNF1A-AS1
nelle cellule GC relativi a quella in normali cellule epiteliali gastriche. qRT-PCR è stato utilizzato per confrontare l'espressione di HNF1A-AS1
in BGC-823, MKN-45, e le cellule AGS GC a quello del non-neoplastiche cellule GES-1. I dati riportati sono da tre esperimenti indipendenti ed espressi come media ± SD. Gli asterischi indicano
valori con una differenza statisticamente significativa rispetto al valore GES-1 le cellule. * P
< 0,05, p **** Hotel < 0.0001. GC
cancro gastrico, qRT-PCR quantitativa
real-time PCR,
SD deviazione standard
Fig. 3 L'espressione di HNF1A-AS1
nei tessuti neoplastici gastrici e non neoplastiche. L'espressione di HNF1A-AS1
nei tessuti GC stato confrontato con quello nei tessuti non neoplastici adiacenti (n = 161
, ** p
< 0.01). T
tessuti GC, N
tessuti non neoplastici. I dati riportati sono da tre esperimenti indipendenti ed espressa come ± SD (ΔCt valore) media. GC
cancro gastrico,
SD deviazione standard
Associazione HNF1A-AS1
espressione con le caratteristiche clinico-patologici di pazienti con CG
per valutare il significato clinico di HNF1A-AS1
, abbiamo analizzato il rapporto tra la sua espressione e caratteristiche clinicopatologiche di pazienti con GC. Come indicato nelle tabelle 1 e 2, l'analisi univariata ha esposto che l'espressione di HNF1A-AS1
è stato associato con tumore dimensioni /diametro (p
= 0,002), la profondità di invasione (fasi T, p = 0,032
), metastasi linfatica (N stadi, p
= 0.006), invasione venosa (p
= 0.001), e l'invasione perineurale (PNI, p = 0.014
). Tuttavia, dopo il controllo influisce fattori tra cui l'età, il sesso, localizzazione del tumore, le dimensioni del tumore /diametro, la differenziazione, l'invasione (fasi T), metastasi linfatica (N stadi), l'invasione venosa, e PNI, l'analisi multivariata ha inoltre confermato che le dimensioni del tumore persisteva a significativamente correlata all'espressione HNF1A-AS1 (p
= 0.005), il che significa che i pazienti con le dimensioni del tumore ≥ 5 cm avevano livelli più bassi di HNF1A-AS1. Questi dati suggeriscono che HNF1A-AS1
può svolgere ruoli durante insorgenza e progressione del cancro e potrebbe essere un nuovo biomarcatore di cancer.Table gastrica 1 Associazione di espressione HNF1A-AS1 (ΔCt) con le caratteristiche clinico-patologici di pazienti
Caratteristiche

No. del caso (%)
Media ± SD
p
valore
Età (anni)
0.119
≥60
82 (50,9 )
16.17 ± 2.90
< 60
79 (49,1)
15,47 ± 2,71
genere
0,688
Maschio
123 (76,4)
15.78 ± 2.88
femminile
38 (23,6)
15.99 ± 2.66
Tumore posizione
0,560
seni ventriculi
57 (35,4)
16.06 ± 3.13
Cardia
33 (20,5)
15.87 ± 3.04
Corpora ventriculi
45 (28.0)
15,92 ± 2,50
Terzi in 26 (16,1)
15.11 ± 2.36
diametro (cm)
0.002
≥5
73 (45,3)
16.59 ± 2.8
< 5
88 (54,7)
15.2 ± 2.70
Differenziazione
0,396
Bene Pagina 2 (1.2)
16.15 ± 0.71
moderato
34 (21,1)
15.24 ± 2.66
Poor
125 (77,7 )
15.98 ± 2.87
Invasion
0.032
T1
13 (8.1)
16.13 ± 1.95
T2
14 (8.7)
14.09 ± 2.24
T3
16 (9,9)
14.85 ± 3.71
T4
118 (73,3)
16.13 ± 2.76
linfatico metastasi
0.006

N0
38 (23,6)
14.74 ± 2.77
N1-3
123 (76,4)
16.16 ± 2.76
invasione venosa
0.001
Assente
86 (53,4)
15.14 ± 2.58
Presentare
75 (46,6)
16.61 ± 2.90
invasione perineurale (PNI)
0.014
Assente
89 (55,3)
15,34 ± 2,77
Presentare
72 (44,7)
16.43 ± 2.79
CEA
0,028
normale
130 (80,7 )
15,59 ± 2,74
alta
31 (19,3)
16.83 ± 2.97
CA19-9
0.009
normale
140 (87,0)
15,60 ± 2,70
alta
21 (13,0)
17.32 ± 3.22
AFP
0,936
normale
150 (93,2)
15.82 ± 2.80
alta
11 (6.8)
15.89 ± 3.25
CA-125
0,494
normale
154 (95,7)
15.79 ± 2.84
alta
7 (4.3 )
16.55 ± 2.33 valori
in corsivo sono significativi a p
< 0.05
Tabella 2 Confronto tra i valori di p
ottenuti da analisi univariata e multivariata dell'associazione di espressione HNF1A-AS1 (ΔCt) con le caratteristiche clinico-patologici di pazienti
Caratteristiche
Univariata

multivariata
p
valore
p valore
Età (anni)
0,119 0,197

di genere
0,688 0,174

Diametro (cm)
0.002
0.005
differenziazione
0,396 0,603

Invasion
0.032
0.580
linfatico metastasi
0.006
0.235
invasione venosa
0,001 0,057

invasione perineurale (PNI)
0,014 0,192

localizzazione del tumore
0,560
0,342
valori in corsivo sono significativi a p
< 0.05
Associazione HNF1A-AS1
espressione con siero o immunoistochimici marcatori di GC
HNF1A-AS1
espressione nei tessuti GC è stato associato con due marcatori sierici di tumori del tratto digerente, CEA (p
= 0,028) e CA19-9 (p = 0.009
), ma non vi era alcuna associazione significativa con altri digerente cancro del tratto marcatore sierico AFP o con la epiteliale CA125 marcatore tumorale (Tabella 1). L'espressione di HNF1A-AS1
in campioni di tumore era significativamente correlata con uno marcatori immunoistochimici di cancro, RRM1 (p = 0.006
), ma non con VEGF, C-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn, o CgA (tabella 3) .table 3 Associazione di espressione HNF1A-AS1 (ΔCt) con le caratteristiche immunohisochemical di GC tessuto
caratteristiche
No. del caso (%)
Media ± SD
p
valore
VEGF
0,809
0
15 (10.0)
15.27 ± 3.69
1 22 (14,7)
15.57 ± 2.92 2
33 (22,0)
15.83 ± 2.72 3
59 (39,3)
15.94 ± 2,54 4
21 (14,0)
16.39 ± 3.32
C-erbB-2
0,312
0
129 (86.0)
15.70 ± 2.84
1 5 (3.3)
16.37 ± 2.96 2
4 (2,7)
15.77 ± 1.01 3
12 (8,0)
17.30 ± 3.21
TS
0,543
0
22 (14,7)
16.41 ± 2.45
1 53 (35,3)
15.99 ± 2.97 2
52 (34.7)
15.33 ± 2.73 3
21 (14,0)
16,25 ± 3,34 4
2 (1.3)
15.92 ± 1.82
BRCA1
0,893
0
10 (6.7)
16.59 ± 1.83
1 31 (20,7)
16.07 ± 2.91 2
73 (48,6)
15.78 ± 2.57 3
34 (22,7)
15.61 ± 3.57 4
2 (1.3)
15.77 ± 5.01
ERCC1
0.585
0
19 (12,7)
15.81 ± 2.39
1 22 (14,7)
16.51 ± 3.61 2
44 (29,3)
15.96 ± 2.85 Pagina 3
41 (27,3)
15.85 ± 3.05 4
24 (16,0)
15.11 ± 2.02
RRM1
0.006
0
81 ( 54.0)
15.79 ± 2.41
1 10 (6.7)
13.27 ± 4.11 2
17 (11.3)
15.51 ± 3.08 3
35 (23.3)
16.98 ± 2.93 4
7 (4.7)
15.48 ± 2.67
Ki67
0,328
1 14 (9.3)
16.54 ± 1.67 2
35 (23,3)
16.44 ± 2.79 3
57 (38,0)
15.48 ± 2.97 4
44 (29,4)
15.66 ± 3.02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15.99 ± 2.95
1 16 (10,7)
15.15 ± 2.17 Pagina 2
3 (2.0)
13.98 ± 0.87 3
3 (2.0)
15,59 ± 3,06
CD56
0,364
0
137 (91,4)
15.94 ± 2.86
1 9 (6.0)
15.66 ± 3.09 2
2 (1.3)
12.72 ± 0.84 3
2 (1.3)
14.22 ± 0.97
CgA
0,980
0
141 (94.0)
15.87 ± 2.91
1 7 (4.7)
15.69 ± 1.83 Pagina 2 Pagina 2 (1.3)
15,63 ± 3,26 valori
in corsivo sono significativi a p
< 0.05
Discussione
Diverse linee di prove hanno dimostrato che i cambiamenti nell'espressione di lncRNAs svolgono un ruolo importante nella cancerogenesi e lo sviluppo del cancro [14, 15] e che l'espressione alterata di lncRNA è noto per essere associato in modo significativo con diverse caratteristiche clinico-patologici di tumori umani, come metastasi linfonodali, stadio TNM, metastasi a distanza, e il grado di differenziazione dei tessuti. Ad esempio, diminuita espressione di gastrico trascritto cancro-associata 1 (GACAT1
) è significativamente associata a metastasi, l'invasione, e la differenziazione dei tessuti nei pazienti con GC [16]. Inoltre, elevata espressione di homeobox (HOX) trascrizione di RNA antisenso (HOTAIR
), una lunga intergenic non codificante RNA, è associato con il grado del carcinoma endometriale (CE), metastasi, profondità di invasione del miometrio, e più povero generale la sopravvivenza [17]. Infine, bassa espressione di HMlincRNA717
in GC è associata a metastasi distali e l'invasione della venoso e nervoso [12]. Tutti questi risultati sono la prova dei ruoli importanti di lncRNAs nella carcinogenesi e del valore potenziale nella loro applicazione clinica.
In questo studio, abbiamo stabilito che il livello di espressione di HNF1A-AS1
in tre linee cellulari di cancro gastrico è stata significativamente ridotta rispetto a quella in normali cellule epiteliali gastriche. Più importante, è stato downregulated in 58.38% dei campioni di tessuto di cancro gastrico relativi a quella nei tessuti non neoplastici adiacenti. I risultati di Yang et al. dimostrano che questo è stato lncRNA upregulated in adenocarcinoma esofageo (EAC) [13]. Cancerogenesi e progressione del cancro è un processo patologico complesso che è mediato dalle reti di espressione genica. Cancro verificarsi in diversi organi o tessuti può essere regolato dalla livelli espressi in modo differenziale degli stessi geni o gli stessi lncRNAs [18, 19]. Questo potrebbe spiegare perché HNF1A-AS1
presenta profili di espressione divergenti in diversi tipi di cellule tumorali. Ulteriori indagini può essere necessario rivelare l'esatto meccanismo molecolare di queste differenze
E 'ben noto che l'invasione del cancro e le metastasi si verifica spesso attraverso tre percorsi comuni:. Metastasi linfonodali, viaggiano attraverso il sistema vascolare, e la semina e la crescita locale. PNI è un ulteriore mezzo di invasione che di solito correlati con recidiva locale. Dato che la recidiva locale è strettamente associata a prognosi infausta, identificare i pazienti ad alto rischio di PNI ha un grande significato clinico.
La prognosi e la sopravvivenza dei pazienti con GC può anche essere influenzato dalla dimensione del tumore, che è legato al suo tempo della crescita. tumori più piccoli mostrano meno violazione nello stomaco di quanto non facciano i tumori più grandi. Inoltre, una maggiore profondità di invasione da parte di tumori più grandi aumenta la probabilità che il sistema linfatico sarà violato. L'aumento metastasi linfonodali permette al tumore di crescere più facilmente e si traduce in prognosi infausta.
Sia CEA e CA 19-9 sono marcatori tumorali noti che di solito sono sovraregolati in campioni di siero o di tessuto da pazienti con i primi o primari tumori maligni il tratto digestivo. RRM1 è uno dei tre noto ribonucleotide reduttasi umana con le funzioni di regolazione della proliferazione delle cellule tumorali attraverso mediare la sintesi del DNA e riparazione, e la rilevazione dell'espressione di RRM1 nei tessuti GC da IHC è stato identificato per avere significato prognostico in pazienti con GC [ ,,,0],20].
Conclusioni
In sintesi, abbiamo analizzato l'associazione tra i livelli di espressione di HNF1A-AS1
con le caratteristiche clinico-patologici dei pazienti con GC. I nostri risultati hanno dimostrato che l'espressione di HNF1A-AS1
era significativamente downregulated in entrambi i tessuti GC e linee cellulari. Inoltre, diminuita espressione è stata associata con tumore dimensioni /diametro e livelli di siero CEA, CA 19-9, e il tessuto RRM1. Questi risultati indicano che HNF1A-AS1
possono essere coinvolte nella soppressione della gastrico insorgenza del cancro e sviluppo e che ha il potenziale per servire come bersaglio trattamento nuovo e biomarker per la valutazione della gravità della malattia nei pazienti con GC. Poiché le dimensioni del campione di questo studio era relativamente piccolo, ulteriore verifica può essere necessario per confermare vero valore clinico HNF1A-AS1 's
.
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla Fondazione squadra Innovazione di Fuzhou General Hospital per Lie Wang (2014CXTD04); la Fondazione post-dottorato di Fuzhou General Hospital (43853) per Yuan Dang; la National Science Foundation naturale della Cina (Grant No. 81.372.788), il Medico Scientifica chiave Research Foundation di Nanchino Comando Militare (n 11Z032), e la Fondazione di Scienze Naturali della provincia del Fujian (n 2014J01427) per Qiaojia Huang; . E l'innovazione Medical Foundation Scientifico di Nanchino Comando Militare (n ° 2013-MS122) per Yinghao Yu
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concorrenti. interessi
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.
contributi degli autori
YD eseguiti gli esperimenti e le analisi dei dati. FL guidato alcuni esperimenti. XO, KW, e YL hanno partecipato campioni raccolti. YY ha guidato il tessuto incluso in paraffina fissati in formalina raccolta e analisi immunoistochimica. LW e YW guidati grandi campioni freschi raccolti. LW ha contribuito anche il maggiore sostegno finanziario. QH progettato lo studio. QH e YD ha scritto il manoscritto. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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