Protimikrobna dejavnosti evgenol in Cinnamaldehyde proti človeškega želodca patogenov Helicobacter pylori

Protimikrobna dejavnosti evgenol in Cinnamaldehyde proti želodčni patogena človeškega Helicobacter pylori
Abstract
Ozadje
izkoreninjenje Helicobacter pylori
je pomemben cilj pri premagovanju želodčnih bolezni. Veliko režimi so trenutno na voljo, vendar nobeden od njih bi lahko dosegli 100% uspeh v izkoreninjenje. Eugenol in cinnamaldehyde, ki se običajno uporabljajo v različnih živil, je znano, da imajo antimikrobno delovanje proti širokemu spektru bakterij.
Cilj
tej študiji je bila izvedena za oceno in vitro
učinke evgenol in cinnamaldehyde proti avtohtonih in standardni H. pylori
sevi, njihove minimalne inhibitorne koncentracije (MIK) in časovni potek smrtni učinki pri različnih pH.
Metode
A skupno 31 sevov (29 avtohtonih in en standardni sev H. pylori
ATCC 26695, so bili pregledani en sev E. coli
NCIM 2089). Metoda Agar redčenje je bila uporabljena za določitev vzorcev občutljivosti drog iz izolatov do pogosto uporabljenih antibiotikov in metode redčenja juhe za testnih spojin.
Rezultati
evgenol in cinnamaldehyde zaviral rast vseh 30 H. pylori v
preizkušeni sevi, pri koncentraciji 2 ug /ml, pri 9. in 12. urah inkubacije oz. Pri kislem pH, opazili povečano aktivnost obeh spojin. Poleg tega organizma ni razvila odpor do teh spojin tudi po 10 prehodov zrasla na sub-inhibitorne koncentracije.
Zaključek
Ti rezultati kažejo, da lahko obe bioaktivne spojine smo testirali preprečiti H. pylori
rast vitro
, ne da bi pridobil odpornost.
Uvod
Helicobacter pylori
je bila prvič odkrita leta 1982 in je bil kasneje ugotovljeno, da je pomembno etiološko sredstvo za gastritis [1], peptične razjede [2] in želodca maligne bolezni [3]. Ocenjuje se, da je polovica svetovnega prebivalstva okužena s H. pylori
[4]. Številne klinične dokazi kažejo, da je izkoreninjenje H. pylori
rezultati pri izboljšanju gastritis in drastično zmanjša hitrost ponovitve razjed dvanajstnika in želodca [5, 6]. H. pylori
prevoz mere so v državah v razvoju [7] okoli 80-90%, z visokim tveganjem za raka želodca in antibiotike režimov proti H. pylori
pogosto neučinkovita pri takih populacij [8]. Poleg tega, neželeni stranski učinki [9], neupoštevanje med bolniki [10] in stroški antibiotika režimov [11], so nekaj drugih dejavnikov za njihovo neučinkovitost. Zato je treba razviti alternativne pristope za zatiranje /odženejo okužbe.
Ker so bili stari časi, začimbe in dišave šteje nepogrešljiva v kulinarične umetnosti, kot se uporabljajo za aromatiziranje živil. Prav tako so te začimbe priznanje za svoje fiziološke in zdravilne lastnosti. Predpostavlja se, da lahko učinkovitost širok spekter teh začimb [12-14] zagotavlja primerno podlago za nove proti H. pylori
terapij. Nekatere epidemiološke študije kažejo na obratno sorazmerje med pojavu raka želodca (za katero je H. pylori
okužba znan dejavnik tveganja) in vnos v Allium zelenjave [15, 16]. Obstajajo poročila o vitro
protimikrobne aktivnosti mnogih začimbnih ekstraktov (in ne njihove aktivne načelih) na H. pylori
[17, 18]. Vendar so učinkovine česen in česen komponent poskušali [11, 19].
Eugenol, fenolne spojine, je glavna sestavina nageljnovih žbic (Eugenia caryophillis
) olje. Cinnamaldehyde je aromatski aldehid in glavna sestavina lubja izvlečka cimeta (Cinnamomum verum
). Oba spojine so prisotne v eteričnih olj mnogih rastlin in so se izkazali za aktiven proti številnim patogenim bakterijam [20, 21], glive [21, 22] in virusov [14]. Tam je na voljo premalo informacij o učinkih teh bioaktivnih spojin na H. pylori
. Zato je bila ta študija da se oceni učinkovitost evgenol in cinnamaldehyde kot proti H. pylori
agentov.
Materiali in metode
H. pylori
sevi
tridesetih H. pylori
sevov in eno E. coli
sev (NCIM2089) smo uporabili v študiji. Devetindvajset sevi, ki so bile označene kot MS-1 in MS-29 so bili izolirani iz želodca biopsijo (15 od dvanajstnika, 10 od prepovedi razjede dispepsijo in 4 iz želodčne razjede predmetov), ​​po obveščenih soglasij od bolnikov, ki so opravili zgornjega dela prebavil endoskopija na Deccan College of Medical Sciences, Hyderabad, Indija. bila vključena ena sev H. pylori
(ATCC26695) tudi
Osnovna izolacija je bila izvedena na Brucella agar (Becton, Dickinson & Co, Sparks, ZDA)., dopolnjen s 7% (V /V) ovce krvi in antibiotiki (Vankomicin, 6 mg /L; Amphoteracin B, 3 mg /L; polimiksina B, 2500 IU /L, Hi-Media, Mumbai, Indija). Končni pH medija smo uravnali na 7,2. H. pylori
je določen s svojim tipičnim morfologiji kolonij, Gram madeži, mikroaerofilnih rasti pri 37 ° C in drugih biokemijskih testov, kot so oksidaza, katalaze in ureaze. Ti sevi so bili shranjeni pri -80 ° C v Brucella brozgi (Becton, Dickinson & Co, Sparks, ZDA), ki vsebuje 10% (V /V), fetalni telečji serum (FCS) in 20% (v /v) glicerol bioaktivnih snovi
Komercialni pripravki bioaktivnih snovi, kot so evgenol in cinnamaldehyde so bili uporabljeni v naših poskusih. Vsi sevi smo posejali v Brucella agar z dodatkom 7% ovčje krvi in ​​goji za 48 ur v pogojih microaerobic. Bakterijska rast je pridelano iz plošče in ponovno suspendirali v sterilni fiziološki raztopini. Inokulum bil pripravljen, da vsebujejo ~ 10 8 CFU /ml s prilagoditvijo suspenzijo, da se ujemajo skalitve standard McFarland No-4 [23].
Antibakterijska aktivnost standardni antibiotikov
minimalnih inhibitornih koncentracij (MIK) za antibiotike, kot so metronidazol, amoksicilin in klaritromicin smo določili z metodo agar redčenje z dvema pregibom prirastke (0,016-256 mg /ml) v Mueller Hinton agar (MHA) plošče dopolnjena s 7% ovčje krvi in ​​inkubiramo 3 dni pri 37 ° C mikroaerofilnih kabinet. MIC smo določili kot najnižjo koncentracijo antibiotikov, ki zavirajo vidno rast [24] z uporabo ~ 10 6 CFU od inokuluma.
Antibakterijska aktivnost evgenol in cinnamaldehyde
Osnovna projekcija
Kirby-Bauer disk difuzije The Test občutljivost je bil uporabljen za preverjanje aktivnost bioaktivnih spojin na H. pylori
. Inokulum pripravljen kot je bil opisan že nanese na MHA dopolnjena s 7% ovčje krvi in ​​bioaktivnih spojin diskov (z nalaganjem ustreznih spojin v spremenljive koncentracije na sterilnih filter papir diskov pripravljenega) so bili postavljeni na ploščah s sterilno razpršilnik in inkubirali v microaerobic atmosferi pri 37 ° C za 3 dni.
minimalno inhibitorno koncentracijo (MIK) bioaktivnih spojin
Ker ni uveljavljena metoda za določitev antibakterijsko delovanje bioaktivnih spojin proti H. pylori
, serijska dva kratno razredčitve evgenol in cinnamaldehyde bile narejene v 5 ml Brucella pripravo brozge (pH 7), z 0,1% dimetilsulfoksid (DMSO, ki izboljšuje topnost spojine) in dopolni z 2,5% fetalnega telečjega seruma (FCS). Cotton volne priključen 25 ml konične bučke z Brucella juhe, pripravljene kot je opisano zgoraj, smo inokulirali s H. pylori
(~ 10 6 CFU /ml) [11]. Bučke inkubiramo 3-5 dni v mikroaerofilnih omaro s stresanjem pri ~ 150 min. Po inkubaciji smo 100 ml alikvoti medija razlijejo po brucelni agar plošče dopolnjeni s 7% ovčje krvi za določitev uspešne šteje.
Čas Tečaj
čas študije izvedljivosti seveda o bioaktivnih spojin so bile ustanovljene na enak način kot so bile navedene teste MIC, vendar hranilna raztopina vzorči vsako uro v prvem 4 ure in potem spet po 6, 9, 12, 24, 48 in 72 ur, da se preveri uspešno štetje. H. pylori
ATCC26695 smo uporabili kot inokulum za študijo.
Za primerjavo, znan antibiotik kot je amoksicilin uporabljen in E. coli
(NCIM2089) smo uporabili kot standardne bakterijsko kontrolo razen H. pylori.

Učinki bioaktivnih spojin na H. pylori
morfologijo
da preveri učinek bioaktivnih spojin na morfologiji H. pylori
, so diapozitivi pripravili iz zgoraj navedenih vzorcev najprej štiri ure, barvanega z Giemsa in opažene pod potopitvijo v olje.
Merjenje baktericidne aktivnosti pri kislem pH
učinkov pH na antibakterijske aktivnosti evgenol in cinnamaldehyde bila izvedena kot prej [25, 26] poročajo. PH pufra naravnamo na 4,00 z uporabo 100 mM citrat (pH 5,2), dopolnjenem z 10 mM sečnino in pH naravnamo na 7,00 pomočjo 10 mM fosfatnem pufru (pH 6,8). H. pylori
ATCC26695 (~ 10 7 CFU /ml) smo inokulirali v 5 ml medija z 0,1% DMSO s katerim dodamo različne koncentracije spojine. Vsi bučke inkubiramo pri 37 ° C. Dvajset xl vzorcev je bilo po inokulaciji sprejeti na 0, 15, 30 in 60 minut, našteti število živih celic.
Test za razvoj odpornosti na bioaktivnih snovi PODJETJA
Da bi raziskali razvoj odpornosti, pet sevov tj ATCC26695, MS-27 (občutljivi na vseh treh antibiotikov s), MS-1 (odporen na vse tri antibiotike s), MS-8 (odporen na metronidazol, klaritromicin in občutljiv na amoksicilin), in MS-15 (odporen samo metronidazola ), gojimo na agarju pri inhibitornih koncentracijah pod (0,25 in 0,5 mg /ml) v evgenol in cinnamaldehyde za 10 prehodov. Vse poskuse Navedene so bile ponovljene trikrat.
Rezultati
Antibakterijska aktivnost proti H. pylori
MIC antibiotikov za H. pylori
so bili določeni. Strain ATCC26695 je občutljiv (MIC < 0,016 g /ml) na vseh treh testiranih droge. Dvajset (66,7%) kliničnih izolatov (MS1-8, 10, 12, 14 - 17, 20, 23-26 in MS28) iz našem laboratoriju bili odporni proti metronidazolom (MIC > 8 ug /ml), 2 (6,7%) kliničnih izolatov (MS1 & 8), so odporni na klaritromicina (MIC > 2 mg /ml) in 1 (3,3%) klinični izolat (MS1) je odporna na amoksicilin (MIC > 0,5 mg /ml) [27] (Tabela 1) .table 1 Občutljivost H. pylori
sevi (n = 30) z različnimi antibiotiki
antibiotiki
Sensitive (% )
Resistance (%)
Razpon (g /ml)
MIC27 (g /ml)
Metronidazol
10 (33,3)
20 (66,7)
< 0,5 - > 256
> 8
Klaritromcin
28 (93.3)
2 (6.7)
< 0,5 - > 256
> 2
amoksicilin
29 (96,7)
1 (3.3)
< 0,5 - > 256
> 0.5
v predhodnem pregledu, tako spojine je približno 15 mm inhibicijske cone na vseh kliničnih izolatov za in standardnim seva (H. pylori
ATCC26695). To vitro
antimikrobni učinek bioaktivnih spojin, je pokazala, da sta bila oba spojine sposobne popolnoma inhibira rast vseh sevov (tako občutljive & odporni) pri koncentraciji 2 ig /ml. Za E. coli
(NCIM-2089), je bila MIC za evgenol in cinnamaldehyde 1 mg /ml.
Čas Seveda
Ker sta bila oba spojine aktivna pri koncentraciji 2 g /ml, smo preučil ubijanje krivulje časovni potek obeh spojin pri različnih koncentracijah in sicer 1 ug /ml 2 mg /ml in 4 mg /ml. Eugenol povsem inhibira rast H. pylori
ATCC 26.695 pri 2 ug /ml koncentracije v 9 urah inkubacije. Rast je bila popolnoma blokirana v samo 6 urah, ko je MIC podvojila (4 ug /ml). Nekateri zaviranje rasti opazili na MIC 1 g /ml, kjer je bil do 6 th uro opaziti zmanjšanje ~ 1,6 Prijava potem kasneje ni bilo nobenega učinka spojine na bakterije (slika 1). Cinnamaldehyde inhibiran ATCC26695 povsem pri 2 g /ml v 12 urah in v 9 urah pri dvojnem MIC (4 ug /ml). Vendar pa je na polovici MIC (1 mg /ml), je bilo le malo vpliva opaziti do 3 tretjem uro in se je zmanjšalo za 0,6 Prijavi brez naknadnega zaviralnega učinka (slika 1). Slika 1 krat študije izvedljivosti tečaj za evgenol in cinnamaldehyde s H. pylori ATCC26695. ATCC26695 bila izpostavljena evgenol v koncentracijah (◆) 4 mg /ml, (■) 2 ug /ml (▴) 1 mg /ml, (●) kontrola, ter cinnamaldehyde (◊) 4 mg /ml, (▫ ) 2 mg /ml (△) 1 mg /ml. Meja detekcije je bila prikazana z ravno črto. Kontrole so se ohranili z 0,1% DMSO.
Časovni potek smrtonosno akcijo bioaktivnih spojin na E. coli
(NCIM-2089) je študiral na treh različnih koncentracijah (1 g /ml, 2 mg /ml &, 0,5 mg /ml). Pri 1 g /ml, evgenola zaviral E. coli
po 1 uri inkubacije ker cinnamaldehyde inhibiran E. coli
po 75 minutah inkubacije (slika 2). Slika 2 Vpliv evgenol in cinnamaldehyde na rast E. coli NCIM-2089. E. coli
bila izpostavljena evgenol pri koncentracijah (◆) 2 g /ml, (■), 1 ug /ml (▲) 0,5 ug /ml (●) nadzor in cinnamaldehyde pri koncentraciji (◊ ) 2 ug /ml (□), 1 ug /ml (△) 0,5 ug /ml. Meja detekcije je bila prikazana z ravno črto. Kontrole so se ohranili z 0,1% DMSO.
Za primerjavo učinkovitosti naših bioaktivnih spojin proti H. pylori
, smo proučevali vpliv skupnega antibiotik (amoksicilin) ​​v različnih koncentracijah kot 1 g /ml, 0,1 ug /ml in 0,01 ug /ml z MIC < 0,016 mg /ml. Ni zaviranja H. pylori
opazili pri koncentraciji 0,01 ug /ml. Vendar je zaviranje opazili pri koncentraciji od 0,1 ug /ml do 4 th uri inkubacije. Vendar je bila bakterija popolnoma inhibiral pri koncentraciji 1 ug /ml do 12 th uri inkubacije (slika 3). Slika 3 Vpliv amoksicilina na rast H. pylori (ATCC26695). ATCC26695 bila izpostavljena pri koncentracijah (◊) 1 g /ml, (■) 0,1 mg /ml, (▴) 0,01 mg /ml, (○) nadzora. Meja detekcije je bila prikazana z premici.
H. pylori
morfologijo
mikroskopsko opazovanje mikroskopskih pokazala, da pri visokih koncentracijah obeh bioaktivnih spojin (4 ug /ml) in po 4 urah inkubacije ~ 70% celic prevzela kokoidne oblike z manj spiralne oblike organizmov.
učinek bioaktivnih spojin na rast H. pylori
v odbojnike pri kislem pH
preživetja seva ATCC 26695 pri kislem pH je raziskovali uporabo evgenol in cinnamaldehyde pri različnih koncentracijah (2 g /ml, 4 mg /ml in 1 g /ml). Kot je prikazano na sliki 4, in sicer spojine pokazale povečano aktivnost pri kislem pH (pH 4,0) in odmerkom je bilo opaziti tudi odvisni baktericidno aktivnost. Pri koncentraciji dvojnega MIC (4 ug /ml), je bilo ugotovljeno, evgenola popolnoma inhibira bakterije po približno 1 uri inkubacije. Cinnamaldehyde pokazala tudi baktericidno aktivnost na podoben način, vendar ne zavira organizma popolnoma (po eni uri inkubacije je bila razlika 0,2 Prijava). Pri obeh spojin, v primerjavi s kislim in nevtralnim pH, smo ugotovili razliko Log 1,5 po eni uri inkubacije pri MIC 2 ig /ml. Slika 4 Učinek evgenol in cinnamaldehyde na rast H. pylori (ATCC26695) pri nizkem pH. ATCC26695 bila izpostavljena evgenol v PH4 (polne črte) in pH7 (črtkane črte) v koncentracijah (◆ ali ◊) 4 mg /ml, (■ ali □) 2 g /ml, (beta ali △) 1 mg /ml, ( ●) nadzor. Meja detekcije je prikazan kot ravna črta. Kontrole so se ohranili z 0,1% DMSO.
Preskus odpornosti proti evgenol in cinnamaldehyde
Raziskovali smo, ali H. pylori
bi pridobili odpornost na bioaktivnih snovi. Izbrani H. pylori
sevi (ATCC26695, MS-27, MS-1, MS-8 in MS-15) ni pridobila odpornost na obeh bioaktivnih snovi v inhibitornih koncentracijah pod (0,25 in 0,5 mg /ml) celo po 10 prehodih.
Razprava
boja proti H. pylori
z monoterapijo je težko in pogosto povzroči slabo kliničnim izidom [28]. Trenutno je v uporabi inhibitor protonske črpalke (PPI), ki temelji trojno terapijo. Čeprav je s stopnjo uspešnosti 80 do 90% [29], težave, kot so neuspeh zdravljenja in kontraindikacije pri nekaterih bolnikih, ki so pogosti. Poleg tega je velik problem pri zdravljenju H. pylori
okužbe hitro razvijajočih se odpornost na zdravila med zdravljenjem z različnih antibiotikov [30]. Zaradi razširjenosti so odporne proti antibiotikom H. pylori
sevov, iskanje varnih in učinkovitih agenti niso antibiotike, je bistvenega pomena.
V indijski tradicionalni zdravstvenega sistema, so znani številni rastlin in rastlinskih proizvodov, ki imajo močan zdravilne lastnosti, kar pomeni, da lahko rastline, rastlinski proizvodi in njihovi izvlečki uporabna za posebne zdravstvene pogoje. Zato v naših prizadevanjih za določitev novejše spojine, ki lahko zavirajo H. pylori
rast, smo testirali evgenol in cinnamaldehyde. Te spojine so že ugotovili, da zavira 10 različnih več odpornih na zdravila, patogene bakterije, kot so E. coli
, Staphylococcus
, Proteus
, Klebsiella
, Enterobacter
in Pseudomonas
izolirani od ljudeh [20, 21]. V našem študijah, evgenol in cinnamaldehyde popolnoma inhibiral vseh sevov (tako občutljiva & odporni) pri koncentraciji 2 ig /ml. To inhibitorne koncentracije je zelo manj v primerjavi proti prej poročali MIC {allicins: 6-12 g /ml, česen olje: 8-32 g /ml [11] in ajoenes: 10-25 g /ml [31]}. Naši spojine izkazal tudi bolj močan kot thiosulfinate {40 ug /ml [19]} vinyldithiins {< 100 ug /ml [31]}, epigalokatehin galat {50-100 ug /ml [32]} in česen v prahu { 250 mikrogramov /ml [11]}.
V času študije izvedljivosti Seveda, smo ugotovili, da je evgenol in cinnamaldehyde zaviral H. pylori
ATCC26695 na 2 ig /ml koncentracije v 9 in 12 urah inkubacije oz. Zelo močni učinki nekaterih eteričnih olj limone trave na H. pylori
so bile že opisane [26]. Vendar pa se lahko naša opazovanja bolj natančno z dejstvom, da smo uporabili aktivne načel in ne ekstraktov ali olja, kot ga Ohno et al uporablja., [26]. Ti eterična olja lahko vsebujejo neznane snovi, ki bi lahko zagotovili sinergijske, zaviralno. Eugenol v naših raziskavah je bilo ugotovljeno, da je močan protimikrobna od eteričnih olj Ohno in sodelavci [26] medtem ko je bil učinek cinnamaldehyde približno enakovredna olja, ki jih uporabljajo. Poleg tega so bili naši spojine močnejši od skupne antibiotika amoksicilin, ki inhibira H. pylori
ATCC26695 na 12 th uro (podobno cinnamaldehyde), medtem ko eugenol inhibira rast mikrobov na 9 th uro samega inkubacije na svojem minimalno inhibitorno koncentracijo. Amoksicilin je bilo ugotovljeno, da se popolnoma inhibira bakterije pri višjih koncentracijah (1 mg /ml), kot je minimalna inhibitorna koncentracija (0,016 ug /ml) (slika 3). Kot H. pylori
nahaja v želodcu, kjer so vrednosti pH manj kot 3,0, je pomembno, da se preveri delovanje in stabilnost spojine pri kislem pH. V naši raziskavi, H. pylori
izolatov preživela pri pH 4,0, kljub nekaterim poročila, ki prikazujejo H. pylori
preživetje pri pH-3,0 [25], in bakterije učinkov bioaktivnih spojin je bilo ugotovljeno, da je močnejši, tudi pri nizkih pH. Več agentov, ki so baktericidno učinke proti H. pylori
so odvisni od pH (npr ecabet natrijev je aktivna pri kislih pH [25] in čaj cathechin je aktiven pri alkalnem pH [33]).
Poleg tega smo ugotovila, da organizem ne razvije odpor do testnih spojin tudi po 10 zaporednih prehodov zrasla na sub-inhibitorne koncentracije (0,25 in 0,5 mg /ml) [21], medtem ko je H. pylori
sevi pridobljena odpornost na amoksicilin in klaritromicin po 10 zaporednih prehodov kot prej [26, 34] poročajo. Poleg tega je imel enakovredne baktericidno aktivnost proti tako občutljivih in odpornih H. pylori
sevov te bioaktivne spojine.
Eugenol in cinnamaldehyde sestavni del redne prehrane v tropskih državah od leta starosti. Mnoga poročila kažejo te spojine so toksični pri odmerkih, ki se porabi [34], in so znani po svojih antimikrobno in antioksidativne lastnosti [21, 36]. Poleg tega, da se pozdravi peptični ulkus ali preprečiti oksidativni stres, predpisovanju antioksidantov je povsem običajna praksa v teh dneh z zdravniki. Ker sta oba te spojine naravni antioksidant [37], da bi njihove koristi obstaja več. Dve študije na živalih, ki se izvajajo v preteklosti kažejo, da izvleček iz cimetove skorje sprejeti ustno lahko pomaga preprečiti želodčno razjedo [36] in eno študijo opisano evgenol, da je tako protivnetno in antiulcerogenic [38]. Uporabljali so ga že leta 1950 za zdravljenje bolezni, razjede [39]. Glede na vse prednosti, smo opazili pri obeh bioaktivnih testiranih spojin, naši podatki ne bi smeli razumeti kot potrjevanje spojin v klinično uporabo, dokler njihove stabilnosti, specifičnost in splošna učinkovitost je bila ustanovljena v različnih laboratorijih in proti različnim bakterijskih sevov. Nadaljnje raziskave so v okviru ponovljivost teh ugotovitev pri različnih laboratorijskih pogojih, zato je nujno potrebno.
Zaključek
podatke, pridobljene v te raziskave kažejo, da eugenol in cinnamaldehyde pri 2 g /ml povzroči znatno zmanjšanje sposobnosti preživetja organizma H. pylori
, ne glede na sev. Dejavnost teh spojin na nizki ravni pH jim lahko pomagajo doseči njihove učinkovitosti v okolju, kot so človeški želodec. Verjamemo, te ugotovitve so spodbudne zaradi rastočih napak pri zdravljenju in odpornosti na antibiotike na področju H. pylori
upravljanja. Dodatne in vivo
študij in kliničnih preskušanj bi bili potrebni, da se upraviči in dodatno oceni potencial teh spojin so proti H. pylori
agentov.
Izjave
Zahvala
SMA, HP, LVR in CMH zahvaljujem University Grants Komisijo, New Delhi za zagotavljanje finančne podpore carryout to preiskavo. NA in LAS bi se rad zahvalil ISOGEM http:... //Www isogem org za podporo "originalne oddane datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev
avtorji izvirnih predložiti datotek za slik. "Izvirno datoteko na sliki 1 12941_2005_65_MOESM2_ESM.ppt avtorjev 12941_2005_65_MOESM1_ESM.ppt avtorjev prvotni datoteki Slika 2 12941_2005_65_MOESM3_ESM.ppt avtorjev prvotni datoteki številka 3 12941_2005_65_MOESM4_ESM.ppt avtorjev prvotni datoteki sliki 4

• Želodčne poškodbe: redka kirurški dogodek zaradi topega trebuhu trauma
• Slikanje pri ocenjevanju jeter in peritonealno metastaze raka želodca: sistematični pregled