Antimikrobielle Aktivitäten von Eugenol und Zimtaldehyd gegen den menschlichen Magen-Erreger Helicobacter pylori

Antimikrobielle Aktivitäten von Eugenol und Zimtaldehyd gegen den menschlichen Magen-Erreger Helicobacter pylori
Zusammenfassung
Hintergrund
Eradikation von Helicobacter pylori
ist ein wichtiges Ziel Magenerkrankungen zu überwinden. Viele Therapien sind derzeit aber keiner von ihnen konnte 100% Erfolg in Tilgung erreichen. Eugenol und Zimtaldehyd, die in verschiedenen Nahrungsmittelzubereitungen häufig verwendet werden, sind bekannte antimikrobielle Aktivität gegen ein breites Spektrum von Bakterien besitzen.
Ziel der vorliegenden Studie wurde durchgeführt, um die
in vitro
Wirkungen von Eugenol und Zimtaldehyd zu beurteilen gegen H. indigenen und Standard-pylori-Stämme
, ihre minimalen Hemmkonzentrationen (MHK) und Zeitverlauf letale Wirkungen bei verschiedenen pH-Werten.
Methoden insgesamt 31 Stämme
(29 einheimische und ein Standard-Stamm von H. pylori
ATCC 26695, ein Stamm von E. coli
NCIM 2089) wurden gescreent. Agar-Verdünnungsmethode zur Bestimmung von Medikamentenempfindlichkeitsmuster der Isolate zu den üblicherweise verwendeten Antibiotika und Brühe-Verdünnungsverfahren für die Testverbindungen verwendet wurde.
Ergebnisse
Eugenol und Zimtaldehyd hemmte das Wachstum aller 30 H. pylori
Stämme getestet, bei einer Konzentration von 2 ug /ml, jeweils in der 9. und 12. Stunden Inkubation. Bei saurem pH-Wert, wurde eine erhöhte Aktivität beobachtet für beide Verbindungen. Darüber hinaus entwickeln sich der Organismus keinen Widerstand gegenüber diesen Verbindungen auch nach 10 Passagen bei subinhibitorischen Konzentrationen gewachsen.
Fazit
Diese Ergebnisse zeigen, dass die beiden bioaktiven Verbindungen testeten wir verhindern können H. pylori
Wachstum in vitro
, ohne Widerstand zu erwerben.
Einführung Helicobacter pylori
erste im Jahr 1982 entdeckt wurde, und wurde in der Folge ein wichtiger Erreger für Gastritis sein [1], Magen-Darm-Geschwüre [2] und Magen gefunden Bösartigkeit [3]. Es wird geschätzt, dass die Hälfte der Weltbevölkerung ist mit H. pylori infiziert
[4]. Zahlreiche klinische Beweise, dass die Eradikation von H. pylori
Ergebnisse bei der Verbesserung der Gastritis zeigen und verringert drastisch die Rezidivrate von Magen- und Zwölffingerdarmgeschwüren [5, 6]. H. pylori
Frachten sind etwa 80-90% in den Entwicklungsländern [7], mit einem hohen Risiko von Magenkrebs und Antibiotika-Therapien gegen H. pylori
sind häufig unwirksam in solchen Populationen [8]. Außer diesem unerwünschten Nebenwirkungen [9], die Nichteinhaltung unter den Patienten [10] und die Kosten der Antibiotika-Anwendungen [11] sind einige andere Faktoren für die Ineffektivität. Daher besteht ein Bedarf an alternativen Ansätze zu entwickeln, um die Infektion zu unterdrücken /heilen.
Seit der Antike, Gewürze und Würzmittel unentbehrlich in der Kochkunst in Betracht gezogen worden, da sie zum Würzen von Speisen verwendet werden. Auch wurden diese Gewürze für ihre physiologischen und medizinischen Eigenschaften anerkannt. Es wird angenommen, dass die Breitspektrum-Wirksamkeit dieser Gewürze [12-14], um eine geeignete Grundlage für neue anti H. pylori
Therapien bereitstellen. Einige der epidemiologischen Studien deuten auf eine inverse Beziehung zwischen dem Auftreten von Krebs des Magens (für die H. pylori-Infektion
ist ein bekannter Risikofaktor) und die Aufnahme der Allium Gemüse [15, 16]. Es gibt Berichte über In-vitro
antimikrobielle Aktivität vieler Gewürzextrakte (und nicht ihre Wirkstoffe) auf H. pylori
[17, 18]. Aber Wirkstoffe von Knoblauch und Knoblauch-Komponenten versucht worden [11, 19].
Eugenol, eine phenolische Verbindung ist die Hauptkomponente der Nelke (Eugenia caryophillis
) Öl. Zimtaldehyd ist ein aromatischer Aldehyd und Hauptbestandteil von Rindenextrakt von Zimt (Cinnamomum verum
). Diese beiden Verbindungen sind in ätherischen Ölen von vielen Pflanzen und erwies sich als wirksam gegen viele pathogene Bakterien [20, 21], Pilze [21, 22] und Viren [14]. Es gibt einen Mangel an Informationen über die Auswirkungen dieser bioaktiven Verbindungen auf H. pylori
. Daher wurde die vorliegende Studie unternommen, um die Wirksamkeit von Eugenol und Zimtaldehyd als anti H. pylori
Mittel.
Materialien und Methoden
H. pylori-Stämme

Dreißig H. pylori zu bewerten
Stämme und ein E. coli-Stamm
(NCIM2089) wurden in der Studie verwendet. Neunundzwanzig-Stämme, die als MS-1 bis MS-29 wurden isoliert von Magen-Biopsie-Proben (15 von Zwölffingerdarmgeschwür, 10 aus nicht-Geschwür Dyspepsie und 4 von Magengeschwür Probanden) bezeichnet wurden, nachdem Informierte Einwilligung von Patienten, die oberen Magen-Darm unterzogen haben Endoskopie bei Deccan College of Medical Sciences, Hyderabad, Indien. Ein Stamm von H. pylori
(ATCC26695) wurde ebenfalls eingeschlossen
Erstisolierung wurde auf Brucella-Agar (Becton, Dickinson & Co, Sparks, USA)., Ergänzt mit 7% (V /V) Schafblut und Antibiotika (Vancomycin, 6 mg /l; Amphoteracin B, 3 mg /l; Polymixin B, 2500 IU /L; Hallo-Medien, Mumbai, Indien). End-pH des Mediums wurde auf 7,2 eingestellt. H. pylori
wurde durch seine typische Koloniemorphologie, Gram-Färbung, mikroaerophilen Wachstum bei 37 ° C und von anderen biochemischen Tests wie Oxidase, Katalase und Urease identifiziert. Diese Stämme wurden bei -80 ° C in Brucella-Brühe erhalten (Becton, Dickinson & Co, Sparks, USA) mit 10% (V /V) fötalem Kälberserum (FCS) und 20% (V /V) Glycerin bioaktive
Kommerzielle Präparate von bioaktiven Verbindungen wie Eugenol und Zimtaldehyd in unseren Experimenten verwendet wurden. Alle wurden die Stämme beimpft auf Brucella-Agar, ergänzt mit 7% Schafsblut und 48 Stunden lang unter mikroaeroben Bedingungen gezüchtet. Bakterienwachstum wurde von den Platten gewaschen und in steriler Salzlösung geerntet. Das Inokulum wurde hergestellt, enthält ~ 10 8 KBE /ml, indem die Suspension Einstellen des McFarland No-4 Trübungsstandard [23] entsprechen.
Die antibakterielle Aktivität von Standard-Antibiotika
minimalen Hemmkonzentrationen (MHK) für Antibiotika wie Metronidazol, Amoxicillin und Clarithromycin durch Agar-Verdünnungsverfahren bestimmt wurden, unter Verwendung von zwei fache Inkremente (0,016-256 ug /ml) auf Mueller Hinton-Agar (MHA) -Platten mit 7% Schafsblut ergänzt und bei 37 ° C für 3 Tage inkubiert, in ein microaerophilic Schrank. MHK wurden als die niedrigste Konzentration der Antibiotika hemmenden sichtbares Wachstum [24] bestimmt unter Verwendung von ~ 10 6 CFU des Inokulums.
Die antibakterielle Aktivität von Eugenol und Zimtaldehyd
primäre Screening
die Kirby-Bauer Plattendiffusions Empfindlichkeitstest wurde verwendet, um die Aktivität der bioaktiven Verbindungen auf H. pylori zu prüfen
. Das Inokulum, hergestellt wie zuvor beschrieben, wurde auf MHA mit 7% Schafsblut und bioaktive Verbindung Scheiben ergänzt inokuliert (hergestellt durch die entsprechenden Verbindungen in variablen Konzentration Verladung auf den sterilen Filterpapierscheiben) wurden auf die Platten mit der sterilen Spender aufgesetzt und inkubiert in mikroaerobe Atmosphäre bei 37 ° C für 3 Tage. Minimale Hemmkonzentration (MIC) von bioaktiven Verbindungen
Da es keine etablierte Methode war die antibakterielle Wirkung von bioaktiven Verbindungen gegen H. pylori
, Serien zwei zu bestimmen fache Verdünnungen von Eugenol und Zimtaldehyd wurden in einem 5 ml Brucella-Brühe Zubereitung (pH-7) mit 0,1% Dimethylsulfoxid hergestellt (DMSO, das verbessert Verbindung Löslichkeit) und mit 2,5% fötalem Kälberserum (FCS) ergänzt. Watte verstopft 25 ml Erlenmeyerkolben von Brucella-Brühe wie oben hergestellt wurden geimpft mit H. pylori
(~ 10 6 KBE /ml) [11]. Die Kolben wurden für 3-5 Tage in einem microaerophilic Schrank inkubiert bei ~ 150 Umdrehungen pro Minute schütteln. Nach der Inkubation wurden 100 ul Aliquots des Mediums wurden auf Brucella-Agar-Platten mit 7% Schafsblut ergänzt plattiert, um die Keimzahl zu bestimmen.
Zeitverlauf
Zeitverlauf Machbarkeitsstudien der bioaktiven Verbindungen wurden auf die gleiche Art und Weise einrichten wie die obigen MIC-Tests, jedoch wurden die Brühen stündlich über die ersten 4 h abgetastet und dann wieder bei 6, 9, 12, 24, 48 und 72 h die Keimzahl zu prüfen. H. pylori
ATCC26695 wurde als Inokulum für die Studie verwendet.
Zum Vergleich bekannten Antibiotikum wie Amoxicillin verwendet wurde, und E. coli
(NCIM2089) wurde als Standard bakterielle Kontrolle anders als H. verwendet pylori
.
Auswirkungen von bioaktiven Verbindungen auf H. pylori
Morphologie
die Wirkung von bioaktiven Verbindungen auf die Morphologie von H. pylori Um zu überprüfen,
wurden die Objektträger aus den obigen Proben zuerst hergestellt vier Stunden mit Giemsa und unter Ölkapselung beobachtet.
Messung der bakteriziden Aktivität bei sauren pH-
die Auswirkungen des pH-Wertes auf die antibakterielle Wirkung von Eugenol und Zimtaldehyd wurden zuvor wie berichtet getan [25, 26]. Der pH-Wert des Puffers wurde auf 4,00 eingestellt, mit 10 mM Harnstoff ergänzt unter Verwendung von 100 mM Citrat-Puffer (pH 5,2), und der pH wurde auf 7,00 eingestellt unter Verwendung von 10 mM Phosphatpuffer (pH 6,8). H. pylori
ATCC26695 (~ 10 7 CFU /ml) in 5 ml des Mediums mit 0,1% DMSO zu denen verschiedene Konzentrationen der Verbindungen inokuliert wurden zugegeben. Alle Kolben wurden bei 37 ° C inkubiert. Zwanzig &mgr; l der Proben bei 0, 15, 30 und 60 Minuten nach der Impfung genommen wurden, die Anzahl der lebenden Zellen aufzuzählen.
Test zur Entwicklung von Resistenzen gegen bioaktive Verbindungen
die Entwicklung von Resistenzen zu untersuchen, fünf Stämme, dh ATCC26695, MS-27 (empfindlich gegenüber allen drei Antibiotika), MS-1 (resistent gegen alle drei Antibiotika), MS-8 (resistent gegen Metronidazol, Clarithromycin und empfindlich gegen Amoxicillin) und MS-15 (resistent nur Metronidazol ) wurden bei sub Hemmkonzentrationen auf Agar gezüchtet (0,25 und 0,5 &mgr; g /ml) von Eugenol und Zimtaldehyd für 10 Passagen. Alle Experimente oben angegeben wurden dreimal wiederholt.
Ergebnisse
antibakterielle Aktivität gegen H. pylori
MICs von Antibiotika für H. pylori
bestimmt. Stamm ATCC26695 war empfindlich (MIC < 0,016 &mgr; g /ml) für alle drei Wirkstoffe getestet. Zwanzig (66,7%) klinischen Isolaten (MS1-8, 10, 12, 14-17, 20, 23-26 und MS28) aus unserem Labor waren resistent gegen Metronidazol (MICs > 8 &mgr; g /ml), 2 (6,7%) klinische Isolate (MS1 & 8) waren resistent gegen Clarithromycin (MICs > 2 &mgr; g /ml) und 1 (3,3%) klinisches Isolat (MS1) war resistent gegen Amoxicillin (MIC > 0,5 &mgr; g /ml) [27] (Tabelle 1) .Tabelle 1 Empfindlichkeit von H. pylori-Stämme
(n = 30) gegenüber verschiedenen Antibiotika
Antibiotika
Sensitive (% )
Resistenz (%)
Range (ug /ml)
MIC27 (ug /ml)
Metronidazol
10 (33,3)
20 (66,7)
< 0,5 - > 256
> 8
Clarithromycin
28 (93,3)
2 (6.7)
< 0,5 - > 256
> 2
Amoxycillin
29 (96,7)
1 (3.3)
< 0,5 - > 256
> 0,5
In der vorläufigen Screening sowohl die Verbindungen ergaben etwa 15 mm Hemmzonen zu allen klinischen Isolaten und Standardstamm (H. pylori
ATCC26695). Diese in vitro
antimikrobielle Wirkung der bioaktiven Verbindungen gezeigt, daß sowohl die Verbindungen der vollständig Hemmung des Wachstums aller Stämme fähig waren (beide sensitive & fest) in einer Konzentration von 2 ug /ml. Für E. coli
(NCIM-2089), MIC von Eugenol und Zimtaldehyd war 1 &mgr; g /ml.
Zeitverlauf
Da beide die Verbindungen in einer Konzentration von 2 ug /ml aktiv waren, untersuchten wir die sowohl die Verbindungen Kurve zeitlichen Verlauf der ml bei verschiedenen Konzentrationen, dh 1 ug /Tötungs, 2 ug /ml und 4 ug /ml. Eugenol hemmte das Wachstum von H. pylori
ATCC 26695 bei 2 &mgr; g /ml Konzentration in 9 Stunden Inkubation. Das Wachstum war in nur 6 Stunden vollständig gehemmt, wenn die MIC (4 ug /ml) wurde verdoppelt. Einige Wachstumshemmung wurde an der MIC von 1 &mgr; g /ml beobachtet, wobei bis zu 6 th Stunde eine Abnahme von ~ 1,6 Log beobachtet wurde dann später gab es keine Wirkung der Verbindung auf dem Bakterium (Abbildung 1). Zimtaldehyd gehemmt ATCC26695 vollständig bei 2 &mgr; g /ml in 12 Stunden und in 9 Stunden bei der doppelten MIC (4 ug /ml). Doch bei der Hälfte der MIC (1 ug /ml), ein wenig Wirkung wurde in den 3 rd Stunde beobachtet, und es war ein Rückgang von 0,6 log ohne nachfolgende hemmende Wirkung (Abbildung 1). Abbildung 1: Zeitlicher Verlauf Machbarkeitsstudien von Eugenol und Zimtaldehyd mit H. pylori ATCC26695. ATCC26695 wurde bei Konzentrationen von (◆), 4 &mgr; g /ml bis Eugenol ausgesetzt, (■), 2 &mgr; g /ml, (▴) 1 &mgr; g /ml (●) Kontrolle, und Zimtaldehyd (◊), 4 &mgr; g /ml, (▫ 2) &mgr; g /ml, (△) 1 &mgr; g /ml. Nachweisgrenze wurde mit einer geraden Linie gezeigt. Die Kontrollen wurden mit 0,1% DMSO gehalten. Auf E. Der Zeitverlauf letale Wirkung der bioaktiven Verbindungen
coli
(NCIM-2089) wurde bei drei verschiedenen Konzentrationen (1 &mgr; g /ml untersucht, 2 &mgr; g /ml & 0,5 &mgr; g /ml). Bei 1 &mgr; g /ml hemmte Eugenol E. coli
nach 1 Stunde Inkubation während Zimtaldehyd gehemmt E. coli
nach 75 Minuten Inkubation (Abbildung 2). Abbildung 2 Wirkung von Eugenol und Zimtaldehyd auf das Wachstum von E. coli NCIM-2089. E. coli
wurde bei Konzentrationen von (◆), 2 ug /ml bis Eugenol ausgesetzt, (■), 1 &mgr; g /ml (▲), 0,5 ug /ml (●) Kontrolle, und Zimtaldehyd in Konzentrationen von (◊ 2) &mgr; g /ml (□), 1 &mgr; g /ml, (△) 0,5 ug /ml. Nachweisgrenze wurde mit einer geraden Linie gezeigt. Die Kontrollen mit 0,1% DMSO gehalten wurden.
Für die Wirksamkeit unserer bioaktiven Verbindungen gegen H. pylori verglichen
, untersuchten wir die Wirkung eines gemeinsamen Antibiotikum (Amoxicillin) bei verschiedenen Konzentrationen wie 1 &mgr; g /ml, 0,1 &mgr; g /ml und 0,01 ug /ml mit einer MHK von < 0,016 &mgr; g /ml. Es gab keine Hemmung von H. pylori
bei der Konzentration von 0,01 &mgr; g /ml gesehen. Aber Hemmung wurde bei einer Konzentration von 0,1 ug /ml bis zur 4 th Stunde Inkubation beobachtet. Jedoch wurde das Bakterium vollständig bei einer Konzentration von 1 ug /ml inhibiert wird, durch den 12 th Stunde Inkubation (Abbildung 3). Figur 3 Wirkung von Amoxicillin auf das Wachstum von H. pylori (ATCC26695). ATCC26695 wurde bei Konzentrationen von (◊), 1 &mgr; g /ml (■), 0,1 &mgr; g /ml, (▴) 0,01 &mgr; g /ml ausgesetzt (○) -Steuerung. Nachweisgrenze wurde mit einer geraden Linie gezeigt.
H. pylori
Morphologie
Die mikroskopische Untersuchung von Dias gezeigt, dass bei hohen Konzentrationen sowohl der bioaktiven Verbindungen (4 ug /ml) und nach 4 Stunden Inkubation ~ 70% der Zellen angenommen coccoid Formen mit weniger spiralförmigen Organismen.
Wirkung der bioaktiven Verbindungen auf das Wachstum von H. pylori
in Puffer bei einem sauren pH-Wert
die Lebensfähigkeit der Stamm ATCC 26695 bei saurem pH-Wert Verwendung von Eugenol und Zimtaldehyd in verschiedenen Konzentrationen (2 ug /ml, 4 ug /ml und 1 ug /ml) untersucht. Wie in 4 gezeigt ist, die beiden Verbindungen ergab erhöhte Aktivität bei saurem pH (pH-4,0) und eine dosisabhängige bakterizide Aktivität wurde ebenfalls beobachtet. Bei einer Konzentration von doppelten MIC (4 ug /ml) wurde Eugenol die Bakterien bei etwa 1 Stunde Inkubation vollständig zu hemmen. Zimtaldehyd auch bakterizide Aktivität in ähnlicher Weise offenbart aber nicht den Organismus hemmen vollständig (nach einer Stunde Inkubation gab es eine Differenz von 0,2 log). Sowohl für die Verbindungen, wenn sie bei saurem und neutralem pH-Wert verglichen wird, fanden wir eine Log Differenz von 1,5 nach einer Stunde Inkubation bei MIC von 2 &mgr; g /ml. Figur 4: Wirkung von Eugenol und Zimtaldehyd auf das Wachstum von H. pylori (ATCC26695) bei niedrigem pH. ATCC26695 wurde bei Konzentrationen Eugenol bei pH4 (durchgezogene Linien) und pH 7 (gestrichelte Linien) ausgesetzt (◆ oder ◊) 4 &mgr; g /ml (■ oder □) 2 &mgr; g /ml, (ß oder △) 1 &mgr; g /ml, ( ●) Kontrolle. Nachweisgrenze wurde als eine gerade Linie gezeigt. Die Kontrollen wurden beibehalten mit 0,1% DMSO.
-Test für die Resistenz gegen Eugenol und Zimtaldehyd kaufen Wir untersuchten, ob H. pylori
Resistenz gegen die bioaktiven Verbindungen erwerben würde. Ausgewählt H. pylori
Stämme (ATCC26695, MS-27, MS-1, MS-8 und MS-15) hatten nicht erwerben Widerstand sowohl für die bioaktiven Verbindungen bei sub Hemmkonzentrationen (0,25 und 0,5 ug /ml) auch nach 10 Passagen.
Diskussion
Eradikation von H. pylori
mit Monotherapie ist schwierig und führt oft zu schlechten klinischen Ergebnis [28]. Derzeit ein Protonenpumpenhemmer (PPI) basierte Triple-Therapie verwendet wird. Obwohl es eine Erfolgsquote von 80 bis 90% [29] mit, Probleme wie Therapieversagen und Kontra für einige Patienten sind häufig. Weiterhin Infektion das Hauptproblem bei der Behandlung von H. pylori
entsteht rasch drug resistance während der Behandlung mit verschiedenen Antibiotika [30]. Wegen der Verbreitung von Antibiotika-resistenten H. pylori-Stämme
, die Suche nach sicheren und wirksamen nicht-Antibiotika unerlässlich ist.
In der indischen traditionellen medizinischen System, eine Reihe von Pflanzen und Pflanzenerzeugnissen sind dafür bekannt, starke besitzen medizinischen Eigenschaften, was darauf hindeutet, dass die Pflanzen, Pflanzenerzeugnisse und deren Extrakte können für bestimmte medizinische Bedingungen nützlich sein. Daher in unserem Bemühen neueren Verbindungen zu identifizieren, die das Wachstum
H. pylori hemmen können, haben wir getestet, Eugenol und Zimtaldehyd. Diese Verbindungen haben bereits gefunden wurde 10 verschiedene Mehrarzneimittelresistente pathogene Bakterien zu hemmen, wie beispielsweise E. coli
, Staphylococcus
, Proteus
, Klebsiella
, Enterobacter
und Pseudomonas isoliert
von menschlichen Probanden [20, 21]. In unseren Studien, Eugenol und Zimtaldehyd vollständig gehemmt allen Stämmen (sowohl sensitiv als & fest) in einer Konzentration von 2 ug /ml. Diese inhibitorische Konzentration ist sehr weniger im Vergleich gegenüber den früher berichteten MICs {allicins: 6-12 &mgr; g /ml, Knoblauchöl: 8-32 &mgr; g /ml [11] und ajoenes: 10-25 &mgr; g /ml [31]}. Unsere Verbindungen erwies sich auch stärker zu sein als Thiosulfinat {40 ug /ml [19]}, {vinyldithiins < 100 &mgr; g /ml [31]}, Epigallocatechingallat {50-100 ug /ml [32]} und Knoblauchpulver { 250 ug /ml [11]}.
Im Laufe Machbarkeitsstudien Zeit fanden wir, dass Eugenol und Zimtaldehyd gehemmt H. pylori
ATCC26695 bei 2 ug /ml-Konzentration innerhalb von 9 und 12 Stunden Inkubation sind. Hochwirksame Effekte einiger ätherischen Öle von Zitronengras auf H. pylori
zuvor beschrieben worden sind [26]. Jedoch können unsere Beobachtungen mit der Tatsache, genauer sein, dass wir Wirkstoffe und nicht die Extrakte und Öle von Ohno als verwendet et al., [26]. Diese ätherischen Öle können unbekannte Substanzen enthalten, die synergistische hemmende Wirkung liefern könnten. Eugenol in unseren Studien wurde eine starke antimikrobielle zu sein als die ätherischen Öle von Ohno und Kollegen [26], während die Wirkung von Zimtaldehyd zu finden die Öle von ihnen benutzten etwa äquivalent war. Außerdem waren unsere Verbindungen stärker als die gemeinsame Antibiotikum Amoxicillin, die gehemmt H. pylori
ATCC26695 bei 12 th Stunde (Zimtaldehyd ähnlich), während Eugenol mikrobielles Wachstum in der 9 gehemmt th Stunde Inkubation selbst auf ihrer minimalen Hemmkonzentration. Amoxycillin wurde vollständig zu hemmen Bakterien bei einer höheren Konzentration (1 ug /ml) festgestellt, als minimale inhibitorische Konzentration (0,016 &mgr; g /ml) (Figur 3) ist. Als H. pylori
im Magen befindet, in dem pH-Werte niedriger sind als 3,0, ist es wichtig, die Aktivität und die Stabilität einer Verbindung bei einem sauren pH-Wert zu überprüfen. In unserer Studie H. pylori
Isolaten über bei pH 4,0, trotz einiger Berichte H. pylori
Überleben bei einem pH-3.0 [25], und bakterizide Wirkung der bioaktiven Verbindungen zeigten, wurden gefunden, stärker zu sein, auch bei niedrigen pH. Mehrere Mittel, die auf pH bakterizide Wirkung gegen H. pylori
sind abhängig haben (beispielsweise Natrium ecabet bei saurem pH aktiv ist [25] und Tee cathechin bei alkalischem pH aktiv ist [33]).
Weiterhin wir festgestellt, dass der Organismus bei unteratmosphärischem Hemmkonzentrationen gezüchtet keinen Widerstand gegenüber den Testverbindungen selbst entwickeln nach 10 aufeinanderfolgenden Durchgängen (0,25 und 0,5 ug /ml) [21], während H. pylori-Stämme
Resistenz gegen Amoxicillin und Clarithromycin erworben nach 10 aufeinanderfolgenden Durchgängen, wie früher berichtet [26, 34]. Darüber hinaus sind sowohl diese bioaktiven Verbindungen hatten äquivalente bakterizide Aktivität gegen den empfindlichen und resistenten H. pylori-Stämme
.
Eugenol und Zimtaldehyd einen Teil der normalen Ernährung in tropischen Ländern seit Jahren bilden. Viele Berichte legen nahe, diese Verbindungen sind nicht toxisch bei Dosen verbraucht wird [34], und sie sind für ihre antimikrobiellen und antioxidativen Eigenschaften bekannt [21, 36]. Außerdem Magengeschwür zu heilen oder den oxidativen Stress zu verhindern, das Vorschreiben Antioxidantien ist durchaus eine gängige Praxis in diesen Tagen mit den Ärzten. Da beide diese Verbindungen natürliches Antioxidans [37] sind, könnten ihre Leistungen mehrfach sein. Zwei Tierversuche in der Vergangenheit legen nahe, durchgeführt, dass ein Extrakt aus Zimtrinde oral eingenommen helfen Magengeschwür verhindern kann [36] und eine Studie beschrieben Eugenol sowohl entzündungshemmende und antiulcerogenic [38] zu sein. Es wurde bereits 1950 für die Behandlung von Ulkus [39] verwendet. Angesichts all die Vorteile, die wir für die beiden bioaktiven Verbindungen beobachtet getestet, unsere Daten sollten nicht als Zertifizierung der Verbindungen in der klinischen Anwendung, bis ihre Stabilität verstanden werden, die Spezifität und die allgemeine Wirksamkeit in verschiedenen Labors und gegen verschiedene Bakterienstämme hergestellt. Weitere Studien sind daher eindeutig im Zusammenhang mit der Reproduzierbarkeit dieser Ergebnisse unter verschiedenen Laborbedingungen erforderlich.
Schlussfolgerung, Die Daten in dieser Studie zeigen, erhalten, dass Eugenol und Zimtaldehyd bei 2 ug /ml signifikante Abnahme der Lebensfähigkeit des Organismus erzeugen H. pylori
, unabhängig von der Belastung. Aktivität dieser Verbindungen bei niedrigen pH-Werten kann sie ihre Wirksamkeit in einer Umgebung, wie beispielsweise menschlichen Magen erreichen zu helfen. Wir hoffen, diese Ergebnisse sind ermutigend im Hinblick auf wachsende Therapieversager und Antibiotikaresistenz in der Umgebung von H. pylori
Management. Zusätzliche in vivo
Studien und klinischen Studien würde das Potenzial dieser Verbindungen als anti H. pylori
Mittel zu rechtfertigen und weiter zu bewerten benötigt werden.
Erklärungen
Danksagung
SMA, HP, LVR und CMH möchte University Grants Kommission, Neu-Delhi für die finanzielle Unterstützung danken, diese Untersuchung zu carryout. NA und LAS möchte den ISOGEM http danken:... //Www isogem org für die Unterstützung
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