Antimikrobielle aktiviteter Eugenol og Cinnamaldehyde mot den menneskelige mage patogen Helicobacter pylori

antimikrobielle aktiviteter Eugenol og Cinnamaldehyde mot den menneskelige mage patogen Helicobacter pylori
Sammendrag Bakgrunn
Utryddelse av Helicobacter pylori
er en viktig Målet i å overvinne mage sykdommer. Mange regimer er for tiden tilgjengelig, men ingen av dem kunne oppnå 100% suksess i utrydding. Eugenol og cinnamaldehyde som ofte brukes i ulike næringsmidler som er kjent for å ha antimikrobiell aktivitet mot et bredt spekter av bakterier.
Mål
Denne studien ble utført for å vurdere in vitro
effekter av eugenol og cinnamaldehyde mot urfolk og standard H. pylori
stammer, deres minste hemmende konsentrasjon (MIC) og tidsforløp dødelige effekter ved ulike pH.
metoder, En totalt 31 stammer (29 urfolk og en standard stamme av H. pylori
ATCC 26695, ble en stamme av E. coli
NCIM 2089) vist. Agarfortynningsmetoden ble anvendt for bestemmelse av medikamentet følsomhetsmønstre isolater til vanlig brukte antibiotika og kokes fortynningsmetode for testforbindelsene
. Resultater
Eugenol og cinnamaldehyd inhiberte veksten av alle de 30 H. pylori
stammer testet, ved en konsentrasjon på 2 ug /ml, i 9 og 12 timers inkubering respektivt. Ved sur pH, ble øket aktivitet observert for begge forbindelser. Videre gjorde organismen ikke utvikler noen motstand mot disse forbindelser selv etter 10 passeringer dyrket ved sub-inhiberende-konsentrasjoner.
Konklusjon
tyder disse resultatene på at de to bioaktive forbindelser som ble undersøkt kan forhindre at H. pylori
vekst vitro
, uten å anskaffe noen motstand.
Innledning
Helicobacter pylori
ble først oppdaget i 1982, og ble senere funnet å være en viktig agens for gastritt [1], magesår [2] og mage malignitet [3]. Det er anslått at halvparten av verdens befolkning er infisert med H. pylori product: [4]. Mange kliniske bevis viser at utryddelse av H. pylori
resulterer i forbedring av gastritt og drastisk reduserer frekvensen av tilbakefall av mage-og duodenalsår [5, 6]. H. pylori
vogn prisene er ca 80-90% i utviklingsland [7], med en høy risiko for magekreft og antibiotikakurer mot H. pylori
er ofte ineffektive i slike bestander [8]. Utenom dette, uønskede bivirkninger [9], lovbrudd blant pasientene [10] og kostnaden av antibiotikakurer [11] er få andre faktorer for deres ineffektivitet. Derfor er det behov for å utvikle alternative tilnærminger for å undertrykke /kurere infeksjonen.
Siden antikken, krydder og tilbehør har vært betraktet som uunnværlig i den kulinariske kunster, som de er vant til smaken mat. Også disse krydder ble anerkjent for sine fysiologiske og medisinske egenskaper. Det forutsettes at den bredspektret effektiviteten av disse krydder [12-14] kan gi et passende grunnlag for nye anti H. pylori
terapi. Noen av de epidemiologiske studier tyder på en invers sammenheng mellom forekomsten av kreft i magesekken (som H. pylori-infeksjon er
en kjent risikofaktor) og inntak av Allium grønnsaker [15, 16]. Det er rapporter om in vitro
antimikrobiell aktivitet av mange krydderekstrakter (og ikke deres aktive prinsipper) på H. pylori product: [17, 18]. Men aktive prinsipper hvitløk og hvitløk komponenter har blitt prøvd [11, 19].
Eugenol, en fenoliske sammensatte er den viktigste komponenten i fedd (Eugenia caryophillis
) olje. Cinnamaldehyde er en aromatisk aldehyd og viktigste komponenten av bark ekstrakt av kanel (Cinnamomum verum
). Begge disse forbindelser er til stede i eteriske oljer av mange planter og viste seg å være aktive mot mange patogene bakterier [20, 21], sopp [21, 22] og virus [14]. Det er en mangelen på informasjon om effekten av disse bioaktive forbindelser på H. pylori
. Derfor denne studien ble gjennomført for å evaluere effekten av eugenol og kanel som anti H. pylori
agenter.
Materiale og metode
H. pylori
stammer
Tretti H. pylori
stammer og en E. coli
belastning (NCIM2089) ble brukt i studien. Tjueni stammer som ble utpekt som MS-en til MS-29 ble isolert fra mage biopsier (15 fra duodenalsår, 10 fra ikke sår dyspepsi og 4 fra magesår fag), etter informert samtykke fra pasienter som har gjennomgått øvre gastrointestinal endoskopi på Deccan College of Medical Sciences, Hyderabad, India. En stamme av H. pylori plakater (ATCC26695) ble også inkludert
Primær isolasjon ble utført på Brucella-agar (Becton, Dickinson & Co, Sparks, USA)., Supplert med 7% (V /V) saueblod og antibiotika (Vancomycin, 6 mg /L, Amphoteracin B, 3 mg /L, Polymixin B, 2500 IU /L, Hi-Media, Mumbai, India). Endelig pH på mediet ble justert til 7,2. H. pylori
ble identifisert ved sin typiske kolonimorfologi, Gram-farging, mikroaerofil vekst ved 37 ° C og ved andre biokjemiske tester som oksidase, katalase og urease. Disse stammene ble konservert ved -80 ° C i Brucella-buljong (Becton, Dickinson &Co. Co, Sparks, USA) inneholdende 10% (V /V) føtalt kalveserum (FCS) og 20% ​​(vol /vol) glycerol bioaktive forbindelser
Kommersielle preparater av bioaktive forbindelser slik som eugenol og kanelaldehyd ble anvendt i våre forsøk. Alle stammer ble utsådd på Brucella agar supplert med 7% saueblod og dyrket i 48 timer under microaerobic betingelser. Bakterievekst ble høstet fra platene og resuspendert i sterilt saltvann. Inokulum var forberedt på å inneholde ~ 10 8 CFU /ml ved å justere fjæring for å matche McFarland No-4 turbiditet standard [23].
Antibakteriell aktivitet av standard antibiotika
Minimum hemmende konsentrasjon (MIC) for antibiotika som metronidazol, amoxicillin og klaritromycin ble bestemt ved agarfortynningsmetoden, ved hjelp av to brette trinn (0,016 til 256 pg /ml) på Mueller Hinton-agar (MHA) plater supplert med 7% saueblod og inkubert i 3 dager ved 37 ° C i en mikroaerofile kabinett. MIC ble bestemt som den laveste konsentrasjon av antibiotika som hemmer synlig vekst [24] med ~ 10 6 CFU av inokulum.
Antibakteriell aktivitet av eugenol og cinnamaldehyd
Primær screening
Kirby-Bauer disk diffusjon resistenstest ble anvendt for å kontrollere aktiviteten av de bioaktive forbindelsene på H. pylori
. Inokulum fremstilt som beskrevet tidligere ble inokulert på MHA supplert med 7% saueblod og bioaktive sammensatte plater (fremstilt ved å laste de respektive forbindelser i varierende konsentrasjon på sterile filterpapirskivene) ble plassert på platene med det sterile dispenser og inkubert i microaerobic atmosfære ved 37 ° C i 3 dager.
Minste hemmende konsentrasjon (MIC) av bioaktive forbindelser
Da var det ingen etablert metode for å bestemme den antibakterielle aktivitet av bioaktive forbindelser mot H. pylori
, seriell to fold fortynninger av eugenol og kanelaldehyd ble gjort i en Brucella kokes preparat 5 ml (pH-7) med 0,1% dimetylsulfoksid (DMSO, som forsterker forbindelsen oppløselighet) og supplert med 2,5% kalvefosterserum (FCS). Bomulls plugget 25 ml koniske kolber av Brucella kjøttkraft fremstilt som ovenfor, ble inokulert med H. pylori plakater (~ 10 6 CFU /ml) [11]. Kolbene ble inkubert i 3-5 dager i en mikroaerofil kabinett med risting ved ~ 150 rpm. Etter inkubering ble 100 ul alikvoter av medium utsådd på brucella-agar-plater supplert med 7% saueblod for å bestemme levedyktige tellinger.
Tidsforløp
Tidsforløp levedyktighet studier av bioaktive forbindelser ble satt opp på samme måten som de ovenstående MIC-tester, men buljonger ble tatt prøver hver time i løpet av de første 4 timer og deretter igjen ved 6, 9, 12, 24, 48 og 72 timer for å kontrollere levedyktig telling. H. pylori
ATCC26695 ble anvendt som inokulum for studien.
Til sammenligning kalles antibiotikum slik som amoxycillin ble anvendt og E. coli plakater (NCIM2089) ble anvendt som en standard bakteriekontroll annet enn H. pylori
.
Effekter av bioaktive forbindelser på H. pylori
morfologi
å sjekke effekten av bioaktive forbindelser på morfologi av H. pylori
, ble lysbilder forberedt fra de ovennevnte prøver av første fire timer, farget med Giemsa og observert under oljeimmersjon.
måling av baktericid aktivitet ved sur pH
effektene av pH på de antibakterielle aktiviteter eugenol og cinnamaldehyd ble gjort som rapportert tidligere [25, 26]. PH på bufferen ble justert til 4,00 ved anvendelse av 100 mM citratbuffer (pH 5,2) supplert med 10 mM urea, og pH ble justert til 7,00 ved bruk av 10 mM fosfatbuffer (pH 6,8). H. pylori
ATCC26695 (~ 10 7 CFU /ml) ble inokulert i 5 ml medium med 0,1% DMSO til hvilke forskjellige konsentrasjoner av forbindelsene ble tilsatt. Alle kolber ble inkubert ved 37 ° C. Tyve pl av prøvene ble tatt ved 0, 15, 30 og 60 minutter etter inokulering for å telle antallet levedyktige celler.
Test for utvikling av resistens mot bioaktive forbindelser
For å undersøke utviklingen av resistens, fem stammer dvs. ATCC26695, MS-27 (følsom for alle de tre antibiotika), MS-en (resistent mot alle de tre antibiotika), MS-8 (resistent overfor metronidazol, klaritromycin og følsom for amoxycillin), og MS-15 (resistent bare metronidazol ), ble dyrket på agar ved sub hemmende konsentrasjoner (0,25 og 0,5 ug /ml) av eugenol og cinnamaldehyd i 10 passasjer. Alle forsøkene nevnt ovenfor ble gjentatt tre ganger.
Resultater
Antibakteriell aktivitet mot H. pylori
MIC for antibiotika for H. pylori
ble bestemt. ATCC26695 stammen ble følsom (MIC < 0,016 ug /ml) til alle de tre stoffene som ble testet. Tjue (66,7%) kliniske isolater (MS1-8, 10, 12, 14 - 17, 20, 23 - 26 og MS28) fra vårt laboratorium var resistente mot metronidazol (MIC > 8 ug /ml), 2 (6,7%) kliniske isolater (MS1 & 8) var resistente mot klaritromycin (MIC > 2 ug /ml) og 1 (3,3%) klinisk isolat (MS1) var resistent mot amoxycillin (MIC > 0,5 ug /ml) [27] (tabell 1) .table en følsomhet av H. pylori
stammer (n = 30) til forskjellige antibiotika
antibiotika
Sensitive (% )
Resistance (%)
Range (mikrogram /ml)
MIC27 (mikrogram /ml)
metronidazol
10 (33,3)
20 (66,7)
< 0,5 - > 256
> 8
klaritromycin
28 (93,3)
2 (6,7)
< 0,5 - > 256
> 2
Amoxycillin
29 (96,7)
1 (3,3)
< 0,5 - > 256
> 0,5
i den foreløpige screening, både forbindelser ga ca 15 mm hemming soner til alle kliniske isolater og standard belastning (H. pylori
ATCC26695). Denne in vitro
antimikrobiell effekt av bioaktive forbindelser viste at begge forbindelser var i stand til fullstendig å inhibere veksten av alle stammer (både følsomme og & resistent) ved en konsentrasjon på 2 ug /ml. For E. coli
(NCIM-2089), MIC av eugenol og kanel var 1 mikrogram /ml.
Tid løpet
Som begge forbindelsene var aktive i en konsentrasjon på 2 mikrogram /ml, vi undersøkte drepe kurve tidsforløpet av begge forbindelser ved forskjellige konsentrasjoner, dvs. 1 ug /ml 2 pg /ml og 4 pg /ml. Eugenol fullstendig hemmet veksten av H. pylori
ATCC 26695 på 2 ug /ml konsentrasjon i 9 timer med inkubasjon. Veksten ble fullstendig hemmet i bare 6 timer når den MIC ble fordoblet (4 ug /ml). Noen hemming av vekst ble observert ved MIC på 1 pg /ml, hvor opp til 6 th time ble det observert en reduksjon av ~ 1,6 Log så etterpå var det ingen effekt av forbindelsen på bakterien (figur 1). Cinnamaldehyde hemmet ATCC26695 helt 2 mikrogram /ml i 12 timer, og i 9 timer på det dobbelte av MIC (4 mikrogram /ml). Imidlertid, ved halvparten av MIC (1 pg /ml), ble en liten effekt observert opp til 3 rd time, og det var en reduksjon på 0,6 Log uten noen påfølgende hemmende effekt (figur 1). Figur 1 gang kurs levedyktighet studier av eugenol og kanel med H. pylori ATCC26695. ATCC26695 ble utsatt for eugenol ved konsentrasjoner på (◆) 4 ug /ml, (■) 2 ug /ml, (▴) 1 ug /ml, (●) kontroll, og for å cinnamaldehyd (◊) 4 ug /ml, (▫ ) 2 ug /ml, (△) 1 ug /ml. Deteksjonsgrensen ble vist med en rett linje. Kontrollene ble holdt med 0,1% DMSO.
Tidsforløpet dødelig virkning av de bioaktive forbindelsene på E. coli plakater (NCIM-2089) ble undersøkt ved tre forskjellige konsentrasjoner (1 ug /ml, 2 ug /ml &Co. 0,5 ug /ml). 1 mikrogram /ml, eugenol hemmet E. coli
etter 1 times inkubasjon mens cinnamaldehyde hemmet E. coli
etter 75 minutters inkubasjon (figur 2). Figur 2 Effekt av eugenol og cinnamaldehyd på veksten av E. coli NCIM-2089. E. coli
ble utsatt for eugenol ved konsentrasjoner på (◆) 2 ug /ml, (■) 1 ug /ml, (▲) 0,5 ug /ml, (●) kontroll, og for å cinnamaldehyd ved konsentrasjoner på (◊ ) 2 ug /ml, (□) 1 ug /ml, (△) 0,5 ug /ml. Deteksjonsgrensen ble vist med en rett linje. Kontrollene ble holdt med 0,1% DMSO.
For å sammenligne effekten av de bioaktive forbindelser mot H. pylori
studerte vi effekten av et vanlig antibiotikum (amoxycillin) ved forskjellige konsentrasjoner, så som 1 ug /ml, 0,1 ug /ml og 0,01 pg /ml med en MIC på < 0,016 ug /ml. Det var ingen hemming av H. pylori
sees ved en konsentrasjon på 0,01 ug /ml. Men inhibering ble lagt merke til i en konsentrasjon på 0,1 ug /ml opp til 4 th times inkubasjon. Imidlertid bakterien ble fullstendig inhibert ved en konsentrasjon på 1 ug /ml, ved 12 th time med inkubasjon (figur 3). Figur 3 Effekt av amoksicillin på vekst av H. pylori (ATCC26695). ATCC26695 ble utsatt for konsentrasjoner på (◊) 1 ug /ml, (■) 0,1 ug /ml, (▴) 0,01 ug /ml, (○) kontroll. Deteksjonsgrensen ble vist med en rett linje.
H. pylori
morfologi
Mikroskopisk observasjon av lysbilder viste at ved høye konsentrasjoner av både de bioaktive forbindelsene (4 ug /ml) og etter 4 timers inkubering ~ 70% av cellene antas coccoide former med færre spiralformede organismer.
Virkning av de bioaktive forbindelsene på vekst av H. pylori
i buffere ved sur pH
levedyktigheten av stamme ATCC 26695 ved sur pH var undersøkt ved hjelp av eugenol og cinnamaldehyd i forskjellige konsentrasjoner (2 ug /ml, 4 ug /ml og 1 ug /ml). Som vist i figur 4. Begge forbindelsene viste øket aktivitet ved sur pH (pH-4,0) og en doseavhengig baktericid aktivitet ble også observert. Ved en konsentrasjon på det dobbelte av MIC (4 ug /ml), ble eugenol funnet å fullstendig hindre at bakterier på omtrent 1 time med inkubering. Cinnamaldehyd avslørte også baktericid aktivitet på tilsvarende måte, men inhiberte ikke organismen fullstendig (etter en times inkubasjon var det en forskjell på 0,2 Log). For begge forbindelsene, sammenlignet ved sur og nøytral pH-verdi, har vi funnet en logg forskjell på 1,5 etter en times inkubering ved MIC på 2 ug /ml. Figur 4 Effekt av eugenol og cinnamaldehyd på vekst av H. pylori (ATCC26695) ved lav pH. ATCC26695 ble utsatt for eugenol ved pH 4 (heltrukne linjer) og pH 7 (stiplede linjer) ved konsentrasjoner (◆ eller ◊) 4 ug /ml, (■ eller □) 2 ug /ml, (ß eller △) 1 ug /ml, ( ●) kontroll. Deteksjonsgrensen ble vist som en rett linje. Kontrollene ble opprettholdt med 0,1% DMSO.
Test for motstand mot eugenol og cinnamaldehyde
Vi undersøkte om H. pylori
ville utvikler resistens mot de bioaktive forbindelser. Valgte H. pylori
stammer (ATCC26695, MS-27, MS-1, MS-8 og MS-15) ikke utvikler resistens til både de bioaktive forbindelser ved under hemmende konsentrasjoner (0,25 og 0,5 ug /ml) selv etter 10 passasjer.
diskusjon
Utryddelse av H. pylori
med monoterapi er vanskelig og ofte resulterer i dårlig klinisk utfall [28]. For tiden er en protonpumpeinhibitor (PPI) basert trippelterapi er i bruk. Selv om det er å ha en suksessrate på 80 til 90% [29], problemer som behandlingssvikt og kontraindikasjoner for noen pasienter er vanlig. Videre er stort problem ved behandling av Helicobacter pylori-infeksjon
raskt voksende medikamentresistens ved behandling med forskjellige antibiotika [30]. På grunn av utbredelsen av antibiotikaresistente H. pylori
stammer, er avgjørende jakten på sikker og effektiv ikke-antibiotiske midler.
I indisk tradisjonell medisinsk system, er en rekke planter og planteprodukter kjent for å ha potent medisinske egenskaper, hvilket antyder at planter, planteprodukter og deres ekstrakter, kan være nyttige for spesielle medisinske tilstander. Derav i vårt arbeid med å identifisere nyere forbindelser som kan hemme H. pylori
vekst, testet vi eugenol og cinnamaldehyde. Disse forbindelsene har allerede vist seg å hemme 10 forskjellige multi resistente sykdomsfremkallende bakterier som E. coli
, Staphylococcus
, Proteus
, Klebsiella
, Enterobacter
, og Pseudo
isolert fra mennesker [20, 21]. I våre studier, eugenol og cinnamaldehyd fullstendig inhiberte alle stammer (både sensitive &Co. resistent) ved en konsentrasjon på 2 ug /ml. Denne hemmende konsentrasjon er meget mindre når sammenlignet mot de tidligere rapporterte MIC {allicins: 6-12 ug /ml, hvitløk olje: 8-32 ug /ml [11] og ajoenes: 10-25 ug /ml [31]}. Våre forbindelser også vist seg å være mer potent enn thiosulfinate {40 ug /ml [19]}, vinyldithiins {< 100 ug /ml [31]}, epigallocatechin gallate {50-100 ug /ml [32]} og hvitløkspulver { 250 mikrogram /ml [11]}.
i tid selvfølgelig levedyktighet studier, fant vi at eugenol og cinnamaldehyde hemmet H. pylori
ATCC26695 på 2 mikrogram /ml konsentrasjon innen 9 og 12 timer inkubasjon hhv. Meget potente effekten av noen essensielle oljer av sitrongress på H. pylori
har tidligere blitt beskrevet [26]. Imidlertid kan våre observasjoner være mer nøyaktig med det faktum at vi brukte aktive prinsipper, og ikke er de ekstrakter og oljer som brukes av Ohno et al., [26]. Disse essensielle oljer kan inneholde ukjente stoffer som kan gi synergistiske, inhiberende virkninger. Eugenol i våre studier ble funnet å være en sterk antimikrobiell enn de essensielle oljer i Ohno og medarbeidere [26] mens effekten av cinnamaldehyd tilnærmet ekvivalent med de oljer som brukes av dem. Videre våre forbindelser var mer potent enn den vanlige antibiotika amoxicillin, som hemmet H. pylori
ATCC26695 på 12 th time (tilsvarende cinnamaldehyde), mens eugenol hemmet mikrobiell vekst på 9 th times inkubasjon selv , ved dens minste inhiberende konsentrasjon. Amoxycillin ble funnet å fullstendig hemme bakterier ved en høyere konsentrasjon (1 pg /ml) enn det minste hemmende konsentrasjon (0,016 ug /ml) (figur 3). Som H. pylori
ligger i magesekken, hvor pH-nivået er lavere enn 3,0, er det viktig å undersøke aktiviteten og stabiliteten til en forbindelse ved sur pH. I vår studie, H. pylori
isolater levde ved pH 4,0, til tross for noen rapporter som viser H. pylori
overlevelse ved pH-3.0 [25], og bakteriedrepende effekten av bioaktive forbindelser ble funnet å være sterkere, selv ved lav pH. Flere midler som kan ha bakteriedrepende effekt mot Helicobacter pylori
er avhengig av pH-verdi (for eksempel, er ecabet natrium aktive ved sur pH [25] og te cathechin er aktivt ved alkalisk pH [33]).
Videre har vi funnet at organismen ikke utviklet noen motstand til testforbindelsene selv etter 10 suksessive passeringer dyrket ved sub-hemmende konsentrasjoner (0,25 og 0,5 ug /ml) [21], mens H. pylori
stammer ervervet resistens mot amoxycillin og clarithromycin etter 10 sekvensielle passasjer som rapportert tidligere [26, 34]. I tillegg er disse bioaktive forbindelser hadde tilsvarende bakteriedrepende aktiviteter mot både mottakelige og resistente H. pylori
stammer.
Eugenol og cinnamaldehyde danne en del av vanlig kosthold i tropiske land siden aldre. Mange rapporter foreslår at disse forbindelser er ikke-toksisk i doser som blir konsumert [34], og de er kjent for sine antimikrobielle og antioksidantegenskaper [21, 36]. Videre, for å helbrede magesår, eller for å hindre oksidativt stress, forskrivning antioksidanter er ganske vanlig praksis i disse dager med leger. Som begge disse forbindelsene er naturlig antioksidant [37], kan deres fordeler være flere. To dyrestudier utført i det siste tyder på at et ekstrakt av kanel bark tas oralt kan bidra til å hindre magesår [36] og en studie beskrev eugenol å være både anti-inflammatorisk og antiulcerogene [38]. Det ble anvendt så tidlig som i 1950 for behandling av ulcus [39]. Gitt alle de fordelene vi observerte for de to bioaktive forbindelser testet, bør våre data ikke tolkes som sertifisering av forbindelsene i klinisk anvendelse inntil deres stabilitet, spesifisitet og samlet effekt er etablert i forskjellige laboratorier og mot ulike bakteriestammer. Videre studier er derfor klart behov i forbindelse med reproduserbarheten av disse funnene under forskjellige laboratorieforhold.
Konklusjon
De oppnådde data i denne studien viser at eugenol og cinnamaldehyd ved 2 ug /ml produsere betydelig reduksjon av levedyktigheten av organismen H. pylori
, uavhengig av belastningen. Aktivitet av disse forbindelser ved lave pH-nivåer kan hjelpe dem med å oppnå deres effekt i et miljø slik som human mage. Vi stoler på disse funnene er oppløftende med tanke på økende behandlingssvikt og antibiotikaresistens i området av H. pylori
ledelse. Tilleggs in vivo
studier og kliniske studier vil være nødvendig for å rettferdiggjøre og videre vurdere potensialet i disse forbindelsene som anti H. pylori
agenter.
Erklæringer
Takk
SMA, HP, LVR og CMH vil takke Universitetet Grants Commission, New Delhi for å gi økonomisk støtte til carryout denne undersøkelsen. NA og LAS ønsker å takke ISOGEM http:... //Www isogem org for støtten
Forfatternes opprinnelige innsendte filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes originale innsendt filer for bilder. 12941_2005_65_MOESM1_ESM.ppt Forfatteroriginalfilen for figur 1 12941_2005_65_MOESM2_ESM.ppt Forfatteroriginalfilen for figur 2 12941_2005_65_MOESM3_ESM.ppt Forfatteroriginalfilen for figur 3 12941_2005_65_MOESM4_ESM.ppt Forfatteroriginalfilen for figur 4

• Gastric skader: en sjelden kirurgisk tilfelle på grunn av sløve abdominal traumer
• Imaging i å vurdere nedsatt lever- og peritoneal metastaser av magekreft: en systematisk