Неполное ЖМ у детей с инсулинозависимым сахарным диабетом и целиакии. Ультраструктурным study

Неполное ЖМ у детей с инсулинозависимым сахарным диабетом и целиакии. Ультраструктурным исследование
Аннотация
Справочная информация
Ассоциация инсулинозависимым сахарным диабетом (ИЗСД) и целиакии (CD) широко сообщалось в детей, но отношения между этими двумя условиями неполностью поняты. Кроме того, конкретные исследования по кишечной биопсии пациентов с ассоциацией двух заболеваний до сих пор отсутствуют.
Методы
Мы изучали ультраструктуру слизистой двенадцатиперстной кишки у 12 больных с ИЗСД, так и CD.
Результаты <бр> Все пациенты были либо полностью или частично атрофию слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки. В семи субъектах, накопление electrondense гранул в апикальной цитоплазме групп энтероцитов был найден. В четырех из них, двойное население гранул существовали (средний диаметр: 400-800 нм и 100-200 нм соответственно) показывает двухфазный характер. В остальных трех пациентов, только мелкие гранулы (100- 200 нм) были обнаружены в энтероцитов.
Выводы
Настоящая работа предполагает, что у пациентов с ИЗСД /CD может представлять собой подгруппу в контексте населения CD. Кишечные биопсию таких людей часто показывают накопление electrondense гранул в апикальной цитоплазме энтероцитов, которые могут быть интерпретированы как неполной метаплазии желудка.
Введение
Ассоциация инсулинозависимым сахарным диабетом (ИЗСД) и целиакия (CD) широко сообщалось в детей [1,2,3]. Распространенность CD у пациентов с ИЗСД значительно выше, чем найденное в общей популяции (около 1: 300), в диапазоне от 1,3 до 19% [4,5,6,7,8,9,10,11,12] , Хотя отношения между этими двумя условиями неполностью понимается [13,14,15], предыдущие генетические и Иммуногенетические исследования предложили общую аутоиммунный патогенез для повреждения ткани [16,17,18]. Как правило, ИЗСД начало предшествует типу CD [18,19], и было показано, что иммунологические маркеры CD (т.е. антиглиадиновых (AGA) и antiendomysial (EMA) антител) могут появляться лет после постановки диагноза ИЗСД [10,20]. У больных с ИЗСД, регулярное серологическое обследование может привести к диагностике CD на ранней стадии поражения слизистых оболочек, когда субъекты все еще протекает бессимптомно [17,21,22,23].
Конкретные исследования по кишечной биопсии пациентов с ассоциацией из этих двух заболеваний до сих пор не сообщалось в литературе. Поэтому мы провели ультраструктурную исследование в группе пациентов с ИЗСД и CD для того, чтобы оценить картину поражения слизистых оболочек.
Методы
267 пациентов (по состоянию на декабрь 1997 года) с последующим ИЗСД в диабетическую центре Детская Департамент Вероне были регулярно обследоваться на CD с 1992 года у всех больных IgA и IgG AGA (метод ИФА) и /или IgA EMA (метод ИФА) были оценены и в положительных больных была получена двенадцатиперстной биопсии. Двенадцать пациентов (7 мужчин, возрастной диапазон 2.6-20.4 лет) от 18 с ИЗСД и гистологической диагностики CD был также ультраструктурную оценку их образца биопсии, и поэтому были включены в основной группе. Некоторые клинические особенности этих пациентов представлены в таблице. Все пациенты удовлетворяли критериям для диагностики ИЗСД (уровень С-пептида ≤ 0,5 нмоль /I) и CD (положительный АГА и /или EMA и последовательное гистологическое поражение) .table Клинические особенности исследуемой группы.

пациента
Секс

ИЗСД

CD

IgA AGA

IgG AGA

IgA ЭМА

гистологии

<й>
<й>
Возраст на момент постановки диагноза (лет) <бр>
<й>
<й>
<й>
<й>
1
M
15.1
16.8
+
+
+
TVA
2
M
6.9
8.2
+
+
+
TVA
3
M
14.6
15.6
+
-
+
PVA
4
F
9.1
10.2
+
+
+
TVA
5
F
7.6
11.8
+
+
nd
TVA
6
F
1.8
2.6
+
+
+
TVA
7
M
3.7
5.7
-
-
+
PVA
8
M
10.6
17.2
+
-
+
PVA
9
F
6.6
8.8
+
+
+
TVA
10
F
6.9
20.4
+
-
+
TVA
11
M
7.1
9.6
+
+
nd
TVA
12
M
12.8
13.8
+
+
+
PVA
+: Положительный; -: Отрицательный; й: не сделано. TVA: общая атрофия ворсинок; ПВА:. Частичная атрофия ворсинок
эндоскопии была выполнена во второй части двенадцатиперстной кишки с помощью гастроскоп Olympus GIF-XP10. Olympus FB-19K щипцами были использованы для биопсий. Для гистологического исследования, образцы фиксировали в 4% нейтральном формалине и заливали в парафин. Для трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ), образцы фиксировали в 2,5% глутаральдегида в буфере Соренсена в течение двух часов, оканчиваются в 1% осмия в буфере Соренсена в течение одного часа, обезвожены в градуированных этанолов, встроенный в EPON-Araldite и нарезали Ultracut E ультрамикротоме (Reichert). Ультратонкие срезы окрашивали цитратом свинца и уранилацетате и наблюдали под EM10 электронным микроскопом (Zeiss). Шестнадцать биопсию детей с компакт-диска (файлы Института анатомии и гистологии) были взяты в качестве контрольной группы и соответствующим образом обрабатывают для тех пациентов с ИЗСД /CD.
Результаты
Одиннадцать из 12 пациентов с ИЗСД /CD не имели кишечные симптомы. Только один пациент () была легкой диареи в течение месяца до постановки диагноза CD. Гистологические и ультраструктурные результаты показали, либо полностью или частично атрофический слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у всех пациентов (таблица). В одном случае (), ЖМ был найден в гистологии. В другом пациента, гистологическое исследование показало накопление PAS-положительного материала в небольших группах энтероцитов. В одном ребенке (1 #) хеликобактер пилори
инфекция наблюдалась при гистологическом исследовании слизистой оболочки желудка.
При ультраструктурным осмотре энтероцитов показали как уменьшенную высоту и нерегулярные микроворсинки у всех пациентов. В 7 предметов (
,2,3,4,5,6,10), мы обнаружили, накопление electrondense гранул в апикальной цитоплазме энтероцитов. Такие клетки были расположены на открытой поверхности, представленной о 8-10% эпителиальных клеток и, как правило, расположены в небольших группах, в окружении "нормальных" энтероцитов (рис. 1,2). Мы не наблюдали увеличение числа лимфоцитов среди модифицированных энтероцитов. Рисунок 1 ПЭМ слизистой двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. Апикальные гранулы можно наблюдать в небольшой группе клеток, в которых Гольджи комплексы hypertrophyc, микроворсинки уменьшаются в высоту и липидную накопление видна. Bar = 1000 нм. Рисунок 2
ПЭМ слизистой двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. Площадь, покрытая секреторных энтероцитов видна справа. Bar = 1000 нм.
В 4 из этих 7 пациентов, двойное население гранул было видно (рис. 3,4,5,6). Прежний имел диаметр 400-800 нм и яйцевидную форму. Был обнаружен двухфазный характер. Чем больше electrondense составляющая была на периферии гранулах и породило сеть, в которой менее electrondense материал был виден. Последний тип гранул имели меньший диаметр (100-200 нм) и с низкой electrondensity круглый сердечник. Эти гранулы были в основном на периферии клетки, рядом с соединительного аппарата. Оба типа гранул были обнаружены в клетках с увеличенными Гольджи комплексов в супра-ядерной области. В остальных 3-х предметов, только гранулы меньшего размера (100-200 нм) были обнаружены в энтероцитов. В 2-х случаях, энтероцитов иногда заполнены липидные капли, в основном в их апикальной цитоплазмы (рис. 1). Рисунок 3 ТЕМ из слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. Энтероцитов с крупными гранулами показаны справа. Слева, энтероцитов с гранулами небольшого диаметра в апикальной цитоплазме. Bar = 625 нм. Рисунок 4
ПЭМ слизистой двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. Группа элементов с коротким микроворсинок и несколько небольших гранул ниже терминала сети. Многослойные липидные включения (стрелка) можно наблюдать в сверхъядерной части клеток. Bar = 500 нм. Рисунок 5
ПЭМ слизистой двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. Клетка как с крупными и мелкими гранулами при высоком увеличении. Bar = 125 нм. Рисунок 6
ПЭМ слизистой двенадцатиперстной кишки у больных с ИЗСД /CD. В этих клетках мелкие гранулы видны. Один большой диаметр гранул показывает нетипичную внутренний рисунок. Bar = 156 нм.
В контрольной группе, оптические и ультраструктурным оценка показала, либо полную или частичную атрофию слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, в соответствии с диагнозом CD. Как правило, не наблюдалось никакого накопления секреторных гранул в апикальной цитоплазме энтероцитов. У одного пациента, было обнаружено мягкое накопление 100-200 нм гранул.
Обсуждение
В данной работе, мы охарактеризовали структуру слизистой оболочки поражения у пациентов с ИЗСД и CD. В дополнение к типичным поражением кишечника целиакия (т.е., либо полное или частичное атрофии слизистой оболочки), биопсий из этих предметов показал характерную высокую частоту модифицированных энтероцитов с накопленными electrondense гранул. Аналогичная картина не была ранее описана в CD, и мы не нашли сопоставимые аспекты ни в контрольной группе пациентов, CD, ни в ультраструктурным обследования около 150 предметов (личные дела).
Две основные закономерности накопления гранул были нашли у 58% наших пациентов (у 33% и 25% пациентов соответственно). Тем не менее, из-за малой площади тканей исследуемого с помощью электронной микроскопии, мы не можем исключить, что подобное неоднородными поражение можно было упускать из виду в некоторых других предметов. Гранулы, казалось, секреторную и не эндоцитозного, а также увеличенный комплекс Гольджи мы обнаружили в модифицированных энтероцитов бы предложить их секреторную происхождение. Тем не менее, это не представляется возможным, чтобы быть убедительным по этому вопросу, особенно для больших гранул, которые имеют гетерогенную содержание как в lysosomial отсеках.
При большом увеличении, внутренняя структура гранул большого диаметра напоминал желудочном поверхностного слизистого клетки. Элементы с промежуточными ультраструктурным характеристиками между секреторной и абсорбирующих клеток, были описаны в кишечной метаплазии пищевода и желудка [24]. Таким образом, накопление electrondense гранул в четырех из наших пациентов может быть истолковано как незавершенный желудочной метаплазии слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, по аналогии с неполной кишечной метаплазии, описанной в желудке [25,26,27,28], пищевода [29] и пищеводножелудочное узел [30]. Тем не менее, шаблон мы описали должны быть дифференцированы с помощью других условий, в которых ПАС-позитивный материал можно найти в апикальной части энтероцитов. Накопление лизосом является довольно Аспецифическое событие виден в нескольких условиях повреждения слизистых оболочек. Также при врожденной microvillous атрофии, маленькие, PAS-положительные гранулы с однородным внутренним рисунком были описаны, что, казалось, из-за секреторного материала гликокаликса [31]. ЖМ двенадцатиперстной кишки может быть связано с H. Pylori
инфекции [32], что, кажется, встречается у больных сахарным диабетом. Тем не менее, в нашей группе один пациент с неполной метаплазии показал H. Pylori
в желудке.
В заключение отметим, что настоящая работа предполагает, что субъекты с ИЗСД и CD представляют собой подгруппу пациентов CD характеризуется отличительным рисунком слизистых оболочек поражения. По нашему мнению, поражение не является истинным метаплазия, поскольку полное превращение кишечного эпителия в желудочный глади отсутствует. В неполной метаплазии желудка, клетки с накопленными гранул поддерживают ультраструктурным характеристики энтероцитов (т.е. терминал веб-, микроворсинки, гликокаликса и т.д.). Такое повреждение, кажется, скорее, является результатом процесса фенотипических сдвига
, с помощью которых морфология клеток ≪ ≪ сдвинуты > > от абсорбционных по отношению к скрытной фенотипа. Мы полагаем, что эта трансформация может быть связано с ненормальным внутри двенадцатиперстной среды, возможно, вторичной по отношению к аномалиям опорожнение желудка, как сообщается в высокой доле детей с ИЗСД [33] и в животных моделях этого заболевания [34].
с клинической и патогенетической точки зрения, время, вероятно, пришел к спекулировать, если в загадке CD (латентная, клиническая, аутоиммунные заболевания, связанные и внекишечные формы), могут возникнуть различные пути клеточного или гистологического повреждения. У пациентов с-диска и других аутоиммунных заболеваний, можно рассматривать в качестве подходящего исследуемой популяции, в которых экспрессируется на высоком уровне механизмы аутоагрессивных заболевания. Дальнейшие исследования должны быть проведены, чтобы исследовать, если условие мы описали, возможно, предрасполагают к развитию желудочной метаплазии слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, такие как, что мы нашли у одного пациента
Список сокращений:.
ИЗСД: инсулиннезависимый сахарный диабет
CD: целиакия
AGA: антиглиадиновых антитела
EMA: antiendomysial антитела
ТЭМ: просвечивающая электронная микроскопия
декларациях
Благодарности
Исследование было поддержано грантом от Regione Veneto , Giunta Регионале, Ricerca Sanitaria Finalizzata, Венеция, Италия.
Конкурирующие интересы
Никто не объявлял
Авторы 'оригинальные файлы, представленные для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинала, представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для Рисунок 1 12907_2001_2_MOESM2_ESM.tiff Авторского 12907_2001_2_MOESM1_ESM.tiff авторов исходного файла для "исходного файла для фигурного 3 12907_2001_2_MOESM4_ESM.tiff Авторского Рисунок 2 12907_2001_2_MOESM3_ESM.tiff Авторского исходного файла для фигурного 4 исходного файла 12907_2001_2_MOESM5_ESM.tiff Авторского на рисунке 5 Исходный файл 12907_2001_2_MOESM6_ESM.tiff авторов на рисунке 6

• Случай диссеминированного карциноматозом костного мозга, происходящих от рака желудка 3-х лет после внутрибр…
• Оксид азота-эндогенным ингибитором секреции желудочной кислоты в изолированных желудочных железах человека