densidade de mastócitos em biópsias gástricas de faixa etária pediátrica e sua relação com a inflamação e presença de Helicobacter pylori

densidade de mastócitos em biópsias gástricas de faixa etária pediátrica e sua relação com a inflamação e presença de Helicobacter pylori da arte abstracta
Fundo
O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre a densidade de mastócitos, a gravidade histológica da gastrite ., e a presença de Helicobacter pylori (H. pylori) na mucosa antral de pacientes pediátricos
Métodos
o estudo incluiu 352 (192 macho e fêmea 160, < 14 anos de idade) pacientes. Todos os casos foram submetidos à endoscopia e biópsias foram obtidas para exame histopatológico e avaliação de Helicobacter pylori. Todas as biópsias foram avaliadas de acordo com o sistema de Sydney e densidade de mastócitos na mucosa antral foi analisada por Giemsa. O teste de correlação de Spearman foi usada para determinar a relação entre a densidade de mastócitos e outros parâmetros histopatológicos. A comparação da densidade de mastócitos entre H. pylori grupos positivos e negativos foram analisados ​​pelo teste de Mann Whitney.

Resultados da densidade de células Mast foi de 12,6 ± 0,87 em 0,25 mm 2 (0-81). Meios de gravidade da inflamação gástrica em pacientes H. pylori positivos e negativos foram de 1,7 ± 0,6 e 0,6 ± 0,7, respectivamente, o que foi estatisticamente significativo (p = 0,0001). densidade de células mastro não foi correlacionada com a presença eo grau de inflamação, atividade, presença e pontuação de H. pylori no antro (p > 0,05). Não houve correlação significativa entre a densidade de mastócitos e alergia.
Discussão
Concluiu-se que pode haver algumas outras maneiras para contribuição de mastócitos em processos patológicos envolvendo trato gastrointestinal em crianças.
Fundo
Mast As células são redondas ou ovais células de tecido conjuntivo, medindo 20-30 micrómetros de diâmetro, com grânulos citoplasmáticos contendo glicosaminoglicanos, resultando em metacromasia e também histamina, proteases neutras, factor de activação de plaquetas e muitos outros [1]. A superfície de mastócitos contém receptores específicos para IgE, que após a fixação e a ligação com antigénios especiais, pode resultar na libertação de grânulos de mastócitos e, consequentemente, reacção de hipersensibilidade imediata [1].
Mastro células são originárias da medula óssea e são do a maioria das células importantes em processos inflamatórios. Enquanto que libertam vários mediadores e citocinas no início do processo inflamatório, eles são considerados como células pró-inflamatórias por alguns [2] autores. Eles têm papel importante no desencadeamento e regulação de processos inflamatórios. Eles residem no sangue adjacente e canais linfáticos principalmente sob superfícies epiteliais, como pele, respiratório, gastrointestinal e do trato urogenital [3].
Desde 1996, poucos estudos têm sido realizados sobre a densidade de mastócitos em biópsias gastrintestinais, principalmente na faixa etária adulta. Nakajima et ai. demonstrou a presença de mastócitos por coloração imuno-histoquímica com o anticorpo anti triptase humana em biópsias gástricas e concluiu que a densidade de mastócitos foi 2 a 3 vezes maior em H. pylori da mucosa gástrica infectada do que no estômago normal, negativo [4]. Bamba et ai. demonstraram que o aumento em mastócitos gástricas em H. pylori biópsias positivas é devido à in situ a proliferação de mastócitos, em vez de a migração de outros locais e resultados de factor de células estaminais e interleucinas 3, 4 e 6 [5]. Sulik et ai. envolvimento de mastócitos estudado em crianças com ou sem infecção por H. pylori. Os resultados deste estudo mostraram que mastócitos através dos seus numerosos mediadores pode desempenhar um papel-chave na gastrite crónica especialmente na H. pylori casos positivos [6]. Mysorekar et ai. investigou o grau de envolvimento de mastócitos na gastrite antral com e sem infecção por H. pylori em indivíduos com sintomas sugestivos de doença péptica ácida. Eles concluíram que a H. pylori pode ser responsável pelo aumento da densidade das células mastro no antro gástrico [7]. Kayaselcuk et ai. investigaram a relação entre a densidade de mastócitos, H. pylori e densidade gravidade histopatológico da gastrite no corpus e antral mucosa e concluiu que a densidade de mastócitos foi significativamente maior no grupo de H. pylori positiva do que o grupo negativo e também a distribuição das células mastro superior foi correlacionada com o aumento da actividade de inflamação e [8]. Maciorkowska et ai. avaliadas amostras de biópsia da mucosa gástrica coletadas de pacientes H. pylori positivos, os pacientes após a infecção por H. pylori e H. pylori crianças-negativos. Os espécimes foram avaliados para a infecção e a inflamação e coradas com triptase de mastócitos anti-humano para contar os mastócitos das mucosas. Na avaliação de morfometria, pequenas diferenças foram encontradas no número de mastócitos entre os grupos que não foi estatisticamente significativa (o número de mastócitos sendo: 86,4, 81,4 e 70,2 células /mm2 de amostra, respectivamente) [9]
Como mencionado. acima, os estudos sobre a densidade de mastócitos foram realizados principalmente em adultos e em vez pequenos grupos como ainda. Por isso, decidimos estudar a densidade de mastócitos na faixa etária pediátrica em vez maior número de casos em hospital de referência crianças com longa experiência em gastroenterologia pediátrica.
O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre a densidade de mastócitos, achados histopatológicos e na presença de Helicobacter pylori na mucosa antral em pacientes pediátricos
Métodos
352 crianças (< 14 anos de idade, com queixas gastrointestinais). que se referiu a Children Medical Center, Universidade de Teerã de Ciências Médicas, com diferentes problemas gastrointestinais foram incluídos neste estudo da 2004-2006, por amostragem sequencial. Todos os casos foram submetidos à endoscopia e biópsias antrais foram obtidas para exame histológico e avaliação de Helicobacter pylori. Um questionário foi preenchido para cada paciente, incluindo achados clínicos e endoscópicos e história da alimentação e outras alergias.
Os espécimes foram fixados em formol 10% tamponado, processado, embebidos em parafina e cortadas em sequenciais 3 secções micrométricas. seções superficiais e profundas foram coradas pela hematoxilina-eosina (duas lâminas) e uma lâmina foi corada por Giemsa. severidade gástrica foi determinada pelo sistema de pontuação Sydney e presença e pontuação do H. pylori foram determinadas por critérios na tabela 1.Table 1 sistema de pontuação modificado para H. pylori densidade.
Densidade de H. pylori
As características histológicas
0
nenhuma bactéria
1
Poucas bactérias (5 a 10), observado apenas sob × 40 ampliação Página 2
distribuição desigual (< 50 de criptas de superfície total), com menor densidade (NCB < 10)
3
distribuição desigual (< 50 de criptas de superfície total), com de alta densidade (NCB > 10)
Ou distribuição difusa (> 50 de criptas de superfície total), com mistura de baixa densidade (NCB < 10) 4
distribuição difusa (> 20 das criptas de superfície total), com mistura de alta (NCB > 10) e de baixa densidade ( NCB < 10)
5
distribuição difusa (> 50 de criptas de superfície total), todos com alta densidade (NCB > 10)
NCB = Número de H. pylori em cada criptas
Os mastócitos foram contadas por Giemsa em × 1000 ampliação em 10 campos com uma Zeiss padrão de 20 microscópio de luz ea soma foi calculado para cada caso (medindo 0,25 mm 2). Todas as contagens de mastócitos e avaliação histológica foi realizada por um único observador.
A análise estatística foi realizada usando SPSS, versão 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA). Os valores foram testados quanto à normalidade usando um teste de Kolmogorov-Smirnov. O teste de correlação de Spearman foi usada para determinar a relação entre a densidade de mastócitos e outros parâmetros histopatológicos. A comparação da densidade de mastócitos entre H. pylori grupos positivos e negativos foram analisados ​​pelo teste de Mann Whitney. A P-valor de 0,05 ou menos foi considerado significativo.

Resultados Durante um período de estudo de 2 anos, 352 biópsias antrais foram obtidas dos participantes. Entre essas pessoas, 54,5% (192 pessoas) eram do sexo masculino. Não houve diferença significativa entre o sexo dos pacientes (P > 0,05). A idade média dos pacientes incluídos no estudo foi de 7,17 ± 3,27 (variação: 1-14 anos). A Tabela 2 fornece uma indicação das características da linha de base dos pacientes e o diagnóstico clínico. Como mostrado na tabela 2, 119 pessoas (33,8%) dos pacientes tiveram dor antes de comer, 102 pessoas (28,9%) dor depois de comer, perda de peso 49 pessoas (13,9%), e 47 pessoas (13,5%) tiveram azia. Nenhuma relação significativa foi encontrada entre sexo e tipo de queixa gastrointestinal. 69 pessoas (19,6%) foram positivos para a história de alergia. achados endoscópicos são descritos na tabela 2.Table 2 dos pacientes características basais e diagnóstico clínico com base em achados endoscópicos.

do sexo masculino (n = 192)
do sexo feminino (n = 160)
valor-p
Idade (anos) *
7 ± 3,5
7,3 ± 3,1
NSA
sintomas (%)
dor antes de comer
66 (18,7%)
53 (15,1%)
NSB
dor depois de comer
60 (17%)
42 (11,9 %)
NS
A perda de peso
29 (8,2%)
20 (5,7%)
NS Heart queimar
23 (6,6%)
24 (6.8 %)
NS
Outros
55 (15,6%)
38 (10,7%)
NS
História de alergia (%)
34 (17,7%)
35 (21,8%)
NS
diagnóstico clínico (%)
com base em resultados endoscópicos
normal
85 (24,1%)
75 (21,3%)
NS
esofagite
32 (9,1%)
25 (7,1%)
Gastrite
37 (10,5%)
30 (8,5%)
Duodenite Sims 3 (0,9%) Sims 3 (0,9%)
Gastroesophagitis
35 (9,9%)
27 (7,7%)
Os dados são apresentados como média ± SD.
aNOT significativo (NS), t de Student teste.
bchi quadrado
Como mostrado na tabela 3, de 352 casos, 36,6% de biópsias gástricas não mostrou nenhuma mudança significativa patológica, 29% gastrite crónica suave, 10,2% gastrite crónica moderada, gastrite crónica grave 1,1%, e 23% gastrite folicular. 15,6% também mostrou actividade. 17,6% dos casos foram positivos para H. pylori. Meios de gravidade da inflamação gástrica em pacientes H. pylori positivos e negativos foram de 1,7 ± 0,6 e 0,6 ± 0,7, respectivamente, o que foi estatisticamente significativo (p = 0,0001). Houve uma relação estatisticamente significativa entre o estado de H. pylori ea atividade da gastrite (p = 0,0001) .table 3 características patológicas

do sexo masculino (n = 192)
do sexo feminino (n = 160)
valor-p
Gastrite (%)
normal
70 (19,9%)
59 (16,8%)
0,166
Mild
55 (15,6%)
47 (13,4%)
Moderado
26 (7,4%)
10 (2,8%)
Severe
1 (0,3%) Sims 3 (0,9%)
folicular
40 (11,4%)
41 (11,6%)
Helicobacter pylori (%)
34 (9,7%)
28 (8%)
0,537
Atividade (%)
30 (8,5%)
25 (7,1%)
0,560
densidade de células Mast
média (intervalo)
13,1 (0-78)
12,2 (0-81)
NS
Median
7
5
um Não significativo (NS)
densidade de células Mast foi de 12,6 ± 0,87 em 0,25 mm 2 (intervalo: 0-81) (fig. 1). densidade de mastócitos, presença e grau de inflamação com base no status H. pylori é apresentada na tabela 4. Não houve correlação significativa entre a densidade de mastócitos e sexo dos pacientes. Também não houve correlação significativa entre a densidade de mastócitos e presença e grau de inflamação [(r = -0,032, p = 0,604), (Fig. 2)], atividade (p = 0,09) e presença de H. pylori (p = 0,21). De acordo com o estado de H. pylori, não houve correlação estatisticamente entre a densidade de célula mastro e a gravidade da gastrite (Fig. 3 e 4). Não houve diferença significativa entre a densidade de mastócitos e história de alergia (p = 0,34) .table 4 densidade de células mastro e presença e grau de inflamação.
gastrite

mastro densidade celular
total (n = 352)
HP (+) (n = 62)
HP (-) (n = 290)
normais
0
14 ± 18,6 (6)
13,9 ± 18,5 (5,5)
leve
19,3 ± 30,9 (3)
13,7 ± 15,1 (9)
9,4 ± 11,8 ( 4.5)
moderada
5,2 ± 6,3 (2,5)
11,7 ± 13,5 (5,5)
9,4 ± 11,8 (4,5)
grave
14 Sims 3 ± 5.1 (0)
5,7 ± 6,9 (4,5)
folicular
10.1 ± 14.5 (5)
12,1 ± 15 (4)
11 ± 14,6 (5)
total de
9,5 ± 14,1 (4) *
13,3 ± 16,5 (6,5)
Os dados são apresentados como média ± DP (mediana)
HP: Helicobacter pylori
* Mann-Whitney; não é estatisticamente significativa (p = 0,217)
Figura 1 mastócitos vistos por Giemsa como células ovais grandes que contêm grânulos metacromáticos (cinco são vistos neste campo, imersão em óleo × 1000, Giemsa).
Figura 2 A relação entre a densidade de mastócitos e gravidade da gastrite (r = -0,032, p = 0,604).
Figura 3 A relação entre a densidade de mastócitos e gravidade da gastrite em H. pylori pacientes negativos (r = -0,003, p = 0,962) .
Figura 4 a relação entre a densidade de mastócitos e gravidade da gastrite em H. pylori positivos (r = 0,182, p = 0,485).
Discussão
os mastócitos são reivindicados ser um elemento importante no infiltração celular no decurso da inflamação da mucosa gástrica, devido à infecção por H. pylori [10]. Há apenas poucos dados na literatura sobre o número de mastócitos na inflamação crônica da mucosa gástrica na faixa etária pediátrica e existentes dados têm resultados bastante conflitantes.
Detecção de mastócitos é bastante fácil por uma coloração simples e barato (Giemsa) que também pode ser usado para detectar a presença de H. pylori. É de notar que a detecção confiável é alcançada através da análise do tecido sob imersão em óleo (x1000) e em ampliações inferiores podem ser perdidas. Embora o padrão ouro é a coloração do tecido com o anticorpo anti-triptase por métodos de imuno-histoquímica, é um demorado e método bastante caro não é recomendado para avaliação patológica rotineira de biópsias gástricas.
Decidimos estudar em número bastante grande de espécimes na um hospital de referência crianças com longa experiência em gastroenterologia pediátrica e determinar a densidade de mastócitos e sua relação com a inflamação e presença de H. pylori.
neste estudo, não observamos uma correlação significativa entre a densidade de mastócitos, a gravidade da inflamação, atividade da gastrite e da presença e densidade do H. pylori no antro. Nossos resultados são bastante em concordância com os resultados de alguns autores como Maciorkowska et al., Mas não outros [6-8], embora nenhum desses estudos foram realizados em séries grande como o nosso.
H. pylori é o factor mais frequente e importante na etiologia da gastrite crónica activa, para além de ser implicada em várias doenças tais como úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico, linfoma e [8]. Os nossos resultados mostraram também que havia uma relação significativa entre a infecção por H. pylori e a gravidade da gastrite (p = 0,0001).
Mastócitos são as células mais importantes em reacções alérgicas agudas com mediação de IgE. Neste estudo, não houve correlação significativa entre os sintomas alérgicos declarados pelos pais (alimentos e outras alergias) e densidade de mastócitos gástrico.
Muitas crianças passam por endoscopia com queixa comum de dor abdominal crônica ou recorrente em nosso centro. Eles estão principalmente na faixa de 5 a 7 anos de idade e não há mudanças significativas são observadas tanto por via endoscópica e por exame microscópico, como em muitos dos nossos casos (cerca de 231 em cada 352 casos). O nosso estudo mostra que a densidade de mastócitos neste grupo é ligeiramente mais elevada do que outros grupos (embora estatisticamente não significativo) e nós propomos que talvez os mastócitos desempenham um papel na produção de tais sintomas não pelas suas vias tradicionais conhecidos em processos inflamatórios, mas por uma ainda caminho indefinido, tais como efeito estimulador sobre plexos nervosos gástricas. Então, nós recomendamos que o aumento na densidade de mastócitos deve ser incluído no relatório final de biópsias gástricas.
Embora não tenhamos realizado imunohistoquímica para detecção de mastócitos, propomos que Giemsa é um método de coloração confiável e fácil disponível em todas laboratórios e também tem boa correlação entre os observadores. Embora ele também tem falhas, tais como detecção errada de fluorescência artificial como mastócitos, os efeitos do edema e encolhimento e também faltando-lhes por causa da degranulação, estes não têm impacto significativo na contagem final.
Além das deficiências do nosso estudo, é necessário mencionar que foi realizado, em vez de uma grande série de pacientes pediátricos e os resultados não são surpreendentemente concordantes com outros estudos realizados principalmente na faixa etária adulta.
Declarações
Agradecimentos
Este estudo foi realizado por uma concessão de Imunologia, asma, e Instituto de Pesquisa Alergia, Children Medical Center, Universidade de Teerã de Ciências Médicas
Somos gratos de Ms Zahra Omidi e Ms Mitra Mir. Khaef por seu apoio técnico dedicado.
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• componente pouco diferenciado em biópsias gástricas pitada prevê submucosa invasion
• As diferenças nos fatores de risco entre os padrões de recorrência em pacientes após a ressecção curativa para diferenças avançados gástricas carcinoma