la densité des mastocytes dans les biopsies gastriques du groupe d'âge pédiatrique et sa relation avec l'inflammation et la présence de la densité cellulaire Helicobacter pylori

Mast dans les biopsies gastriques du groupe d'âge pédiatrique et sa relation avec l'inflammation et la présence de l'arrière-plan de Helicobacter pylori
Résumé
le but de cette étude était d'étudier la relation entre la densité des mastocytes, la gravité histologique de la gastrite et la présence d'Helicobacter pylori (H. pylori) dans la muqueuse antrale des patients pédiatriques.
Méthodes
l'étude a inclus 352 (192 hommes et 160 femmes, < 14 ans) patients. Tous les cas ont subi une endoscopie et des biopsies ont été obtenues pour l'examen histopathologique et l'évaluation de Helicobacter pylori. Toutes les biopsies ont été évaluées selon le système Sydney et la densité des mastocytes dans la muqueuse antrale a été analysée par coloration de Giemsa. Le test de corrélation de Spearman a été utilisé pour déterminer la relation entre la densité de mastocytes et d'autres paramètres histopathologiques. La comparaison de la densité des mastocytes entre H.pylori groupes positifs et négatifs ont été analysées par le test U de Mann Whitney.: Résultats
densité cellulaire était de 12,6 ± mât 0,87 à 0,25 mm 2 (0-81). Un moyen de sévérité de l'inflammation gastrique chez des patients pylori positifs et négatifs sont H. 1,7 ± 0,6 et 0,6 ± 0,7, respectivement, ce qui est statistiquement significatif (p = 0,0001). la densité des cellules de mât n'a pas été corrélée avec la présence et le degré de l'inflammation, l'activité, la présence et le score de H. pylori dans l'antre (p > 0,05). Il n'y avait pas de corrélation significative entre la densité des mastocytes et des allergies. Du Rapport
Nous avons conclu qu'il peut y avoir d'autres moyens pour la contribution des mastocytes dans les processus pathologiques impliquant tractus gastro-intestinal chez les enfants.
Fond
Mast les cellules sont rondes à ovales cellules du tissu conjonctif, la mesure de 20 à 30 micromètres de diamètre, avec des granules cytoplasmiques contenant des glycosaminoglycanes entraînant métachromasie ainsi que l'histamine, des proteases neutres, facteur d'activation plaquettaire et beaucoup d'autres [1]. La surface des mastocytes contient des récepteurs spécifiques pour les IgE, qui, après la fixation et la liaison avec des antigènes spécifiques, peut entraîner la libération des granules de mastocytes et de réaction d'hypersensibilité donc immédiate [1]. Cellules
Mast proviennent de la moelle osseuse et sont de la la plupart des cellules importantes dans les processus inflammatoires. Alors qu'ils libèrent plusieurs médiateurs et cytokines au début du processus inflammatoire, ils sont considérés comme des cellules pro-inflammatoires par certains auteurs [2]. Ils ont un rôle important dans le déclenchement et la régulation des processus inflammatoires. Ils résident du sang adjacent et les canaux lymphatiques principalement sous les surfaces épithéliales telles que la peau, des voies respiratoires, gastro-intestinales et des voies urogénitales [3].
Depuis 1996, peu d'études ont été réalisées sur la densité des mastocytes dans les biopsies gastro-intestinaux, principalement dans le groupe d'âge adulte. Nakajima et al. en évidence la présence de mastocytes par immunohistochimie avec l'anticorps humains anti tryptase dans les biopsies gastriques et a conclu que la densité des mastocytes était de 2 à 3 fois plus élevée chez H. pylori infection muqueuse gastrique dans l'estomac de la normale négative [4]. Bamba et al. démontré que l'augmentation des mastocytes gastriques chez H. pylori biopsies positives est due à la prolifération in situ de mastocytes plutôt que la migration à partir d'autres sites et les résultats du facteur de cellules souches et interleukines 3, 4 et 6 [5]. Sulik et al. la participation de la cellule étudiée de mât chez les enfants avec ou sans infection par H. pylori. Les résultats de cette étude ont montré que des mastocytes à travers ses nombreux médiateurs peut jouer un rôle clé dans la gastrite chronique surtout chez H. pylori cas positifs [6]. Mysorekar et al. étudié le degré d'implication des mastocytes dans la gastrite antrale avec et sans infection à H. pylori chez des sujets présentant des symptômes évocateurs d'une maladie gastro-duodénal acide. Ils ont conclu que H. pylori pourrait être responsable de l'augmentation de la densité des mastocytes dans l'antre gastrique [7]. Kayaselcuk et al. étudié la relation entre la densité de mastocyte, la densité de H. pylori et la sévérité histologique de la gastrite dans le corpus et antrale muqueuse et a conclu que la densité de mastocytes était significativement plus élevée chez H. pylori groupe positif que celui du groupe négatif et également la distribution des cellules du mât supérieur est corrélé à une augmentation de l'inflammation et l'activité [8]. Maciorkowska et al. biopsies évaluées de la muqueuse gastrique recueillies auprès de patients pylori-positifs H., les patients après infection par H. pylori et H. pylori enfants-négatifs. Les échantillons ont été évalués pour l'infection et de l'inflammation et colorées avec de la tryptase mastocytaire anti-humain pour compter les mastocytes des muqueuses. Dans l'évaluation morphométrique, de légères différences ont été trouvées dans le nombre de mastocytes parmi les groupes qui n'a pas été statistiquement significative (le nombre de mastocytes étant: 86,4, 81,4 et 70,2 cellules /mm2 de spécimen, respectivement) [9]
Comme mentionné. ci-dessus, les études relatives à la densité des mastocytes ont été effectuées principalement sur des adultes et des groupes relativement petits jusqu'à présent. Nous avons donc décidé d'étudier la densité des mastocytes dans le groupe d'âge pédiatrique sur un peu plus grand nombre de cas dans un hôpital pour enfants de référence avec une expérience de longue date dans la gastro-entérologie pédiatrique.
Le but de cette étude était d'étudier la relation entre la densité des mastocytes, les résultats histopathologiques et la présence d'Helicobacter pylori dans la muqueuse antrale chez les patients pédiatriques
Méthodes
352 enfants (< 14 ans, avec troubles gastro-intestinaux). qui a mentionné Medical Center Children, l'Université de Téhéran des sciences médicales avec différents problèmes gastro-intestinaux étaient inscrits dans cette étude pour la période 2004-2006, par échantillonnage séquentiel. Tous les cas ont subi une endoscopie et des biopsies antrales ont été obtenus pour un examen histologique et l'évaluation de Helicobacter pylori. Un questionnaire a été rempli pour chaque patient, y compris les résultats et l'histoire de la nourriture et d'autres allergies cliniques et endoscopiques.
Les spécimens ont été fixés dans 10% de formaline tamponnée, traités, inclus dans la paraffine et coupés en sections séquentielles 3 micromètres. sections superficielles et profondes ont été colorées par haematoxyline-éosine (deux diapositives) et une diapositive a été souillée par Giemsa. gravité gastrique a été déterminée par Sydney système de notation et de la présence et de la notation de H. pylori ont été déterminés par des critères dans le tableau 1 1.Table système de notation modifié pour la densité de H. pylori.
Densité de H. pylori
caractéristiques histologiques
0
Pas bactéries 1
Peu bactéries (5 à 10) ont observé que dans 40 × grossissement 2
Averses de distribution (< 50 du total des cryptes de surface) avec une densité inférieure (PNE < 10) 3
Averses de distribution (< 50 du total des cryptes de surface) avec une plus grande densité (PNE > 10)
Ou la distribution diffuse (> 50 du total des cryptes de surface) avec mélange de basse densité (PNE < 10) 4
la distribution diffuse (> 20 du total cryptes de surface) avec mélange de haute (NCB > 10) et basse densité ( PNE < 10)
5
Distribution diffuse (> 50 du total des cryptes de surface), toutes avec haute densité (NCB > 10)
PNE = Nombre de H. pylori dans chaque cryptes
mastocytes étaient compté par Giemsa à × 1000 agrandissement dans 10 champs à une norme microscope optique Zeiss 20 et la somme a été calculée pour chaque cas (mesure 0,25 mm 2). Tous les comptes de cellules de mât et l'évaluation histologique a été réalisée par un seul observateur.
L'analyse statistique a été réalisée en utilisant SPSS, la version 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Les valeurs ont été testées pour la normalité en utilisant un test de Kolmogorov-Smirnov. Le test de corrélation de Spearman a été utilisé pour déterminer la relation entre la densité de mastocytes et d'autres paramètres histopathologiques. La comparaison de la densité des mastocytes entre H. pylori groupes positifs et négatifs ont été analysées par le test U de Mann Whitney. les résultats d'une P-valeur de 0,05 ou moins est considérée comme significative.
Au cours d'une période d'étude de 2 ans, 352 biopsies antrales ont été obtenues auprès des participants. Parmi ces personnes, 54,5% (192 personnes) étaient des hommes. Il n'y avait pas de différence significative entre le sexe des patients (p > 0,05). L'âge moyen des patients inclus dans l'étude était 7,17 ± 3,27 (extrêmes: 1-14 ans). Le tableau 2 donne une indication des caractéristiques initiales des patients et le diagnostic clinique. Comme le montre le tableau 2, 119 personnes (33,8%) des patients présentaient des douleurs avant de manger, 102 personnes (28,9%) la douleur après avoir mangé, 49 personnes (13,9%) la perte de poids, et 47 personnes (13,5%) avaient des brûlures d'estomac. Aucune relation significative n'a été observée entre le sexe et le type de trouble gastro-intestinal. 69 personnes (19,6%) étaient positifs pour l'histoire de l'allergie. les résultats endoscopiques sont représentés dans le tableau 2 2.Table «caractéristiques de base et le diagnostic clinique basées sur les résultats endoscopiques. Patients

mâle (n = 192)
femelle (n = 160)
p-valeur
Age (an) *
7 ± 3,5
7,3 ± 3,1
NSa
Les symptômes (%)
douleur avant de manger
66 (18,7%)
53 (15,1%)
NSB Pain après avoir mangé
60 (17%)
42 (11,9 %)
NS de la perte de poids 29 (8,2%)
20 (5,7%)
NS
brûlures
23 (6,6%)
24 (6.8 %)
NS
55 (15,6%
autres)
38 (10,7%)
NS
Histoire de l'allergie (%)
34 (17,7%)
35 (21,8%)
NS
diagnostic clinique (%) Basé sur
normal des résultats endoscopiques de 85 (24,1%)
75 (21,3%)
NS
32 (9,1%) œsophagite

25 (7,1%)
Gastrite
37 (10,5%)
30 (8,5%)
Duodénite
3 (0,9%)
3 (0,9%)
35 (9,9%) de Gastroesophagitis
27 (7,7%)
données est représenté en moyenne ± SD.
ANOT significative (NS), t de l'étudiant test.
BCHI essai carré
Comme le montre le tableau 3, de 352 cas, 36,6% des biopsies gastriques n'a montré aucun changement pathologique significatif, 29% gastrite chronique légère, 10,2% gastrite chronique modérée, la gastrite chronique 1,1% sévère, et 23% gastrite folliculaire. 15,6% ont également montré une activité. 17,6% des cas étaient positifs pour H. pylori. Un moyen de sévérité de l'inflammation gastrique chez des patients pylori positifs et négatifs sont H. 1,7 ± 0,6 et 0,6 ± 0,7, respectivement, ce qui est statistiquement significatif (p = 0,0001). Il y avait une relation statistiquement significative entre H. pylori et l'activité de la gastrite (p = 0,0001) .Table 3 caractéristiques pathologiques

mâle (n = 192)
femmes (n = 160)
p-valeur
Gastrite (%)
70 (19,9% de normal)
59 (16,8%)
0,166
Mild 55 (15,6%)
47 (13,4%)
modéré
26 (7,4%)
10 (2,8%)
Severe
1 (0,3%)
3 (0,9%)
40 (11,4%) folliculaire
41 (11,6%)
Helicobacter pylori (%)
34 (9,7%)
28 (8%)
0,537
Activité (%)
30 (8,5%)
25 (7,1%)
0,560
densité cellulaire Mast
moyenne (plage)
13.1 (0-78)
12,2 (0-81)
NS
médian
7
5
un non significatif (NS)
densité de mastocytes était de 12,6 ± 0,87 à 0,25 mm 2 (gamme: 0-81) (Fig. 1). la densité des mastocytes, la présence et le degré d'inflammation sur la base de H. pylori est présenté dans le tableau 4. Nous avons trouvé aucune corrélation significative entre la densité des mastocytes et le sexe des patients. En outre, aucune corrélation significative n'a été observée entre la densité des mastocytes et la présence et le degré d'inflammation [(r = -0,032, p = 0,604) (Fig. 2)], l'activité (p = 0,09) et en présence de H. pylori (p = 0,21). Selon H. pylori, il n'y avait pas de corrélation entre la densité statistique de mastocytes et de la gravité de la gastrite (fig. 3 et 4). Aucune différence significative n'a été trouvée entre la densité des mastocytes et des antécédents d'allergie (p = 0,34) .Table 4 densité de mastocytes et la présence et le degré d'inflammation.
gastrite
total
mât densité cellulaire
(n = 352)
HP (+) (n = 62)
HP (-) (n = 290)
normale
0
14 ± 18,6 (6)
13,9 ± 18,5 (5,5) Le plus doux
19,3 ± 30,9 (3)
13,7 ± 15,1 (9)
9.4 ± 11.8 ( 4.5)
modérée
5,2 ± 6,3 (2,5)
11,7 ± 13,5 (5,5)
9,4 ± 11,8 (4,5)
sévère
14
3 ± 5.1 (0)
5,7 ± 6,9 (4,5)
folliculaire
10,1 ± 14,5 (5)
12,1 ± 15 (4)
11 ± 14.6 (5)
totale de 9,5 ± 14,1 (4) *
13,3 ± 16,5 (6,5)
données est représenté comme moyenne ± écart-type (médiane)
HP: Helicobacter pylori
* Mann-Whitney test; pas statistiquement significative (p = 0,217)
Figure 1 mastocytes vu par Giemsa que de grandes cellules ovales contenant des granules métachromatique (cinq sont considérés dans ce domaine, immersion dans l'huile × 1000, Giemsa).
Figure 2 La relation entre la densité de mastocytes et de la gravité de la gastrite (r = -0,032, p = 0,604).
figure 3 La relation entre la densité de mastocytes et de la gravité de la gastrite à Helicobacter pylori patients négatifs (r = -0,003, p = 0,962) .
Figure 4 la relation entre la densité des mastocytes et la gravité de la gastrite chez H. pylori patients positifs (r = 0,182, p = 0,485) rapport
mastocytes de. sont revendiqués comme un élément important dans la une infiltration cellulaire au cours de l'inflammation de la muqueuse gastrique due à une infection à H. [10] pylori. Il est seulement peu de données dans la littérature concernant le nombre de mastocytes dans l'inflammation chronique de la muqueuse gastrique dans le groupe d'âge pédiatrique et les données existantes ont des résultats plutôt contradictoires.
Mast la détection de cellules est assez facile par une coloration simple et peu coûteuse (Giemsa) qui peut également être utilisé pour détecter la présence de H. pylori. Il est intéressant de noter que la détection fiable est obtenue en examinant le tissu sous immersion dans l'huile (x1000) et grossissements inférieurs, ils peuvent être manqués. Bien que l'étalon-or est une coloration de tissu avec un anticorps anti-tryptase par des méthodes immunohistochimiques, il est un temps et une méthode assez cher non recommandée pour l'évaluation pathologique de routine des biopsies gastriques.
Nous avons décidé d'étudier assez grand nombre de spécimens un hôpital pour enfants de référence avec une expérience de longue date en gastroentérologie pédiatrique et déterminer la densité des mastocytes et sa relation avec l'inflammation et la présence de H. pylori.
dans cette étude, on n'a pas observé une corrélation significative entre la densité des mastocytes, la sévérité de l'inflammation, l'activité de la gastrite et la présence et la densité de H. pylori dans l'antre. Nos résultats sont plutôt en concordance avec les résultats de quelques auteurs tels que Maciorkowska et al., Mais pas d'autres [6-8], même si aucune de ces études ont été réalisées sur cette grande série comme la nôtre.
H. pylori est le facteur le plus fréquent et important dans l'étiologie de la gastrite chronique active, en plus d'être impliquée dans diverses maladies telles que l'ulcère gastro-duodénal, adénocarcinome gastrique et le lymphome [8]. Nos résultats ont également montré qu'il y avait une relation significative entre l'infection par H. pylori et la gravité de la gastrite (p = 0,0001).
Mastocytes sont des cellules les plus importantes dans les réactions allergiques aiguës avec la médiation d'IgE. Dans cette étude, il n'y avait pas de corrélation significative entre les symptômes allergiques déclarés par les parents (nourriture et d'autres allergies) et de la densité des mastocytes gastrique.
De nombreux enfants subissent une endoscopie avec plainte commune de la douleur chronique ou récurrente abdominale dans notre centre. Ils sont principalement dans la gamme de 5 à 7 ans et aucun changement notable sont observées à la fois par voie endoscopique et par examen microscopique, comme dans beaucoup de nos cas (près de 231 sur 352 cas). Notre étude montre que la densité des mastocytes dans ce groupe est légèrement supérieur à celui des autres groupes (mais statistiquement non significatif) et nous proposons que peut-être les mastocytes jouent un rôle dans la production de tels symptômes et non par leurs voies connues traditionnelles dans les processus inflammatoires, mais par un encore undefined voie, comme effet stimulant sur plexus nerveux gastriques. Nous recommandons donc que l'augmentation de la densité des cellules de mât doit être inclus dans le rapport final de biopsies gastriques.
Bien que nous ne sommes pas effectué les taches immunohistochimiques pour la détection des mastocytes, nous proposons que Giemsa est une méthode de coloration fiable et facile disponible dans tous les laboratoires et dispose également d'une bonne corrélation interobservateur. Même si elle a aussi des lacunes telles que la détection erronée de coloration artifactual que les mastocytes, les effets de l'œdème et le retrait et aussi les manquer à cause de la dégranulation, ceux-ci ont aucun impact significatif sur le décompte final.
Outre les lacunes de notre étude, il est nécessaires pour mentionner qu'il a été réalisé sur un assez grand nombre de patients pédiatriques et les résultats ne sont pas étonnamment concordant avec d'autres études principalement effectuées dans le groupe d'âge adulte. Déclarations de Remerciements
Cette étude a été réalisée par une subvention de l'immunologie, l'asthme, et de l'Institut recherche sur les allergies, Centre médical pour enfants, Université de Téhéran des sciences médicales
Nous sommes reconnaissants de Mme Zahra Omidi et Mme Mitra Mir. Khaef pour leur soutien technique dévoué.
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