densità cellulare Mast in biopsie gastriche di età pediatrica e la sua relazione con l'infiammazione e la presenza di densità cellulare Helicobacter pylori

Mast in biopsie gastriche di età pediatrica e la sua relazione con l'infiammazione e la presenza di Helicobacter pylori
Abstract
sfondo
lo scopo di questo studio è stato quello di indagare il rapporto tra la densità dei mastociti, la gravità istologica di gastrite, e la presenza di Helicobacter pylori (H. pylori) nella mucosa antrale di pazienti pediatrici.
Metodi
lo studio ha incluso 352 (192 maschi e 160 femmine, < 14 anni) pazienti. Tutti i casi sono stati sottoposti a endoscopia, e le biopsie sono state ottenute per l'esame istopatologico e la valutazione di Helicobacter pylori. Tutte le biopsie sono state valutate secondo il sistema Sydney e la densità dei mastociti nella mucosa antrale è stato analizzato da Giemsa. test di correlazione di Spearman stata utilizzata per determinare la relazione tra la densità dei mastociti e altri parametri istopatologici. Il confronto della densità dei mastociti tra H. pylori gruppi positivi e negativi sono stati analizzati con il test di Mann Whitney U.
Risultati
densità cellulare Mast era 12,6 ± 0,87 a 0,25 mm 2 (0-81). Mezzi di gravità dell'infiammazione gastrica in pazienti H. pylori-positivi e negativi erano 1,7 ± 0,6 e 0,6 ± 0,7, rispettivamente, che era statisticamente significativa (p = 0,0001). la densità dei mastociti non è stato correlato con la presenza e il grado di infiammazione, l'attività, la presenza e il punteggio di H. pylori nel antro (p > 0,05). Non c'era alcuna correlazione significativa tra la densità dei mastociti e allergie.
Discussione
Abbiamo concluso che ci possono essere altri modi per contributo dei mastociti nei processi patologici che coinvolgono il tratto gastrointestinale nei bambini.
Sfondo
Mast le cellule sono rotondo a ovale cellule del tessuto connettivo, che misura 20-30 micrometro di diametro con granuli citoplasmatici contenenti glicosaminoglicani conseguente metacromasia e anche istamina, proteasi neutre, fattore attivante le piastrine e molti altri [1]. La superficie dei mastociti contiene recettori specifici per le IgE, che dopo la fissazione e vincolante con gli antigeni speciali, può causare il rilascio di granuli dei mastociti e reazione di ipersensibilità immediata, quindi, [1].
Mast cellule originano dal midollo osseo e sono di maggior parte delle cellule importanti nei processi infiammatori. Mentre rilasciano diversi mediatori e citochine all'inizio del processo infiammatorio, sono considerati come cellule proinfiammatorie da alcuni autori [2]. Hanno ruolo importante nello scoppio e regolazione dei processi infiammatori. Essi risiedono sangue adiacente e canali linfatici principalmente sotto superfici epiteliali come la pelle, delle vie respiratorie, gastrointestinali e del tratto urogenitale [3].
Dal 1996 pochi studi sono stati condotti sulla densità dei mastociti nelle biopsie gastrointestinali, principalmente nel gruppo di età adulta. Nakajima et al. dimostrato la presenza di mastociti mediante colorazione immunoistochimica con anticorpo anti triptasi umano in biopsie gastriche e concluso che la densità dei mastociti è da 2 a 3 volte maggiore in H. pylori infetta mucosa gastrica che in negativo stomaco normale [4]. Bamba et al. dimostrato che aumento di mastociti gastrici in H. pylori biopsie positive è dovuto in situ proliferazione dei mastociti, piuttosto che la migrazione da altri siti e risultati di fattore delle cellule staminali e interleuchine 3, 4 e 6 [5]. Sulik et al. coinvolgimento dei mastociti studiato nei bambini con e senza infezione da H. pylori. I risultati di questo studio hanno dimostrato che mastociti attraverso i suoi numerosi mediatori può giocare un ruolo chiave nella gastrite cronica soprattutto nei H. pylori casi positivi [6]. Mysorekar et al. indagato la misura del coinvolgimento dei mastociti nella gastrite antrale con e senza infezione da H. pylori in soggetti con sintomi suggestivi di malattia peptica acida. Essi hanno concluso che H. pylori potrebbe essere responsabile per aumentare la densità dei mastociti nel gastrico [7]. Kayaselcuk et al. indagato il rapporto tra la densità dei mastociti, H. pylori la densità e la gravità della gastrite istopatologico nel corpus e antrale mucosa e ha concluso che la densità dei mastociti era significativamente più alta nel gruppo H. pylori positivi di gruppo negativo e anche la distribuzione dei mastociti più alto era correlato con maggiore infiammazione e l'attività [8]. Maciorkowska et al. campioni bioptici valutati di mucosa gastrica raccolti da H. pylori pazienti positivi, i pazienti dopo infezione da H. pylori e H. pylori bambini-negativi. I campioni sono stati valutati per l'infezione e l'infiammazione e colorati con triptasi mastocitaria anti-umano per contare mastociti della mucosa. Nella valutazione morfometrica, lievi differenze sono state trovate nel numero di mastociti tra i gruppi che non era statisticamente significativa (il numero dei mastociti che sono: 86,4, 81,4 e 70,2 cellule /mm2 di campioni, rispettivamente) [9]
Come accennato. sopra, gli studi sulla densità dei mastociti sono stati effettuati principalmente su adulti e piuttosto piccoli gruppi come ancora. Così abbiamo deciso di studiare la densità dei mastociti in età pediatrica sul piuttosto grande numero di casi in un ospedale per bambini di riferimento con una lunga esperienza in gastroenterologia pediatrica.
Lo scopo di questo studio è stato quello di indagare il rapporto tra la densità dei mastociti, risultati istopatologici e la presenza di Helicobacter pylori nella mucosa antrale in pazienti pediatrici
Metodi
352 bambini (< 14 anni, con disturbi gastrointestinali). che ha fatto riferimento al Children Medical center, Università di Teheran di Scienze mediche con diversi problemi gastrointestinali erano arruolati in questo studio dal 2004-2006, dal campionamento sequenziale. Tutti i casi sono stati sottoposti a endoscopia, e le biopsie antrali sono stati ottenuti per l'esame istologico e la valutazione di Helicobacter pylori. Un questionario è stato compilato per ogni paziente incluso risultati clinici ed endoscopici e la storia del cibo e altre allergie.
I campioni sono stati fissati in formalina al 10% tamponata, elaborati, inclusi in paraffina e tagliato a sequenziali 3 sezioni micrometriche. sezioni superficiali e profonde sono state colorate da haematoxyline-eosina (due diapositive) e uno scivolo è stato macchiato da Giemsa. gravità gastrico è stato determinato dal sistema di punteggio di Sydney e la presenza e il punteggio di H. pylori sono stati determinati dai criteri nella tabella 1 1.Table sistema di punteggio modificata per H. pylori densità.
Densità di H. pylori
caratteristiche istologiche
0
nessun batteri
1 pochi batteri (da 5 a 10) osservati solo sotto × 40 ingrandimenti 2
distribuzione Sereno (< 50 del totale cripte di superficie) con densità inferiore (BCN < 10) 3
distribuzione Sereno (< 50 del totale delle cripte di superficie) con una maggiore densità (NCB > 10)
o la distribuzione diffusa (> 50 del totale cripte di superficie) con miscela di bassa densità (BCN < 10) 4
distribuzione diffusa (> 20 del totale cripte di superficie) con la miscela di alta (NCB > 10) e bassa densità ( BCN < 10)
5
distribuzione diffusa (> 50 del totale delle cripte di superficie), tutti ad alta densità (NCB > 10)
BCN = Numero di H. pylori in ogni cripte
I mastociti sono stati contato con Giemsa a × 1000 ingrandimenti in 10 campi con uno standard di 20 microscopio ottico Zeiss e la somma è stata calcolata per ogni singolo caso (misura 0,25 mm 2). Tutti i conteggi dei mastociti e valutazione istologica è stata effettuata da un singolo osservatore.
L'analisi statistica è stata effettuata utilizzando SPSS, versione 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). I valori sono stati testati per la normalità utilizzando un test Kolmogorov-Smirnov. test di correlazione di Spearman stata utilizzata per determinare la relazione tra la densità dei mastociti e altri parametri istopatologici. Il confronto della densità dei mastociti tra H. pylori gruppi positivi e negativi sono stati analizzati con il test di Mann Whitney U. Un P-value di 0,05 o meno è stato
considerato significativo. Risultati
un periodo di 2 anni di studio, 352 biopsie antrali sono stati ottenuti dai partecipanti. Tra queste persone, il 54,5% (192 persone) erano di sesso maschile. Non vi era alcuna differenza significativa tra il sesso dei pazienti (p > 0,05). L'età media dei pazienti inclusi nello studio era 7.17 ± 3.27 (range: 1-14 anni). La tabella 2 fornisce un'indicazione di caratteristiche basali dei pazienti e la diagnosi clinica. Come mostrato nella tabella 2, 119 persone (33,8%) dei pazienti avevano dolore prima di mangiare, di 102 persone (28,9%), il dolore dopo aver mangiato, la perdita di peso di 49 persone (13,9%), e 47 persone (13,5%) avevano bruciore di stomaco. Nessuna relazione significativa è stata trovata tra sesso e tipo di reclamo gastrointestinale. 69 persone (19,6%) sono risultati positivi per la storia di allergia. reperti endoscopici sono raffigurati nella tabella 2.Table 2 Patients 'caratteristiche basali e diagnosi clinica sulla base di reperti endoscopici.

maschile (n = 192)
femminile (n = 160)
p-value
Età (anni) * Pagina 7 ± 3,5
7.3 ± 3.1
Nsa
I sintomi (%)
dolore prima di mangiare
66 (18,7%)
53 (15,1%)
NSB
dolore dopo aver mangiato
60 (17%)
42 (11.9 %)
NS
perdita di peso
29 (8,2%)
20 (5,7%)
NS
cuore bruciare
23 (6,6%)
24 (6.8 %)
NS
Terzi in 55 (15,6%)
38 (10,7%)
NS
Storia di allergia (%)
34 (17,7%)
35 (21,8%)
NS
La diagnosi clinica (%)
sulla base dei risultati endoscopici
normale
85 (24,1%)
75 (21,3%)
NS
Esofagite
32 (9,1%)
25 (7,1%)
gastrite
37 (10,5%)
30 (8,5%)
Duodenite Sims 3 (0,9%) Pagina 3 (0,9%)
Gastroesophagitis
35 (9,9%)
27 (7,7%)
dati viene mostrato come media ± SD.
Anot significativa (NS), t di student prova.
bchi piazza prova
Come indicato nella tabella 3, di 352 casi, il 36,6% delle biopsie gastriche non ha mostrato alcun cambiamento significativo patologico, il 29% lieve gastrite cronica, il 10,2% gastrite cronica moderata, 1,1% grave gastrite cronica, e il 23% gastrite follicolare. 15,6% ha anche mostrato attività. 17,6% dei casi era positivo per H. pylori. Mezzi di gravità dell'infiammazione gastrica in pazienti H. pylori-positivi e negativi erano 1,7 ± 0,6 e 0,6 ± 0,7, rispettivamente, che era statisticamente significativa (p = 0,0001). C'è stata una relazione statisticamente significativa tra stato di Helicobacter pylori e l'attività di gastrite (p = 0,0001) .table 3 caratteristiche patologiche

maschile (n = 192)
femminile (n = 160)
p-value
gastrite (%)
normale
70 (19,9%)
59 (16,8%)
0,166
Mild 55 (15,6%)
47 (13,4%)
Moderato 26 (7,4%)
10 (2,8%)
grave
1 (0,3%)
3 (0,9%)
follicolare
40 (11,4%)
41 (11,6%)
Helicobacter pylori (%)
34 (9,7%)
28 (8%)
0,537
attività (%)
30 (8,5%)
25 (7,1%)
0,560
densità cellulare Mast
media (range)
13.1 (0-78)
12.2 (0-81)
NS
mediana 7
5
una non significativa (NS)
densità cellulare Mast era 12,6 ± 0,87 a 0,25 mm 2 (range: 0-81) (Fig. 1). la densità dei mastociti, la presenza e il grado di infiammazione sulla base di H. pylori è presentata nella tabella 4. Non abbiamo trovato alcuna correlazione significativa tra la densità dei mastociti e sesso dei pazienti. Inoltre nessuna correlazione significativa è stata trovata tra la densità dei mastociti e la presenza e il grado di infiammazione [(r = -0,032, p = 0,604), (Fig. 2)], l'attività (p = 0,09) e la presenza di H. pylori (p = 0.21). Secondo H. pylori, non vi era alcuna correlazione statisticamente tra la densità dei mastociti e la gravità della gastrite (Fig. 3 e 4). Nessuna differenza significativa è stata trovata tra la densità dei mastociti e la storia di allergia (p = 0,34) .table 4 densità cellulare Albero e la presenza e il grado di infiammazione.
gastrite

mast densità cellulare
totale (n = 352)
HP (+) (n = 62)
HP (-) (n = 290)
normale
0
14 ± 18.6 (6)
13,9 ± 18,5 (5,5)
lieve 19,3 ± 30,9 (3)
13,7 ± 15,1 (9)
9.4 ± 11.8 ( 4.5)
moderata
5.2 ± 6.3 (2.5)
11,7 ± 13,5 (5,5)
9.4 ± 11.8 (4.5)
grave
14
3 ± 5.1 (0)
5.7 ± 6.9 (4.5)
follicolare
10,1 ± 14,5 (5)
12,1 ± 15 (4)
11 ± 14,6 (5)
totale 9,5 ± 14,1 (4) *
13,3 ± 16,5 (6,5)
dati è mostrato come media ± DS (mediana)
HP: Helicobacter pylori
test * Mann-Whitney; non statisticamente significativa (p = 0,217)
Figura 1 mastociti visti da Giemsa come grandi cellule ovali contenenti granuli metacromatici (cinque sono visti in questo campo, immersione in olio × 1000, Giemsa).
Figura 2 Il rapporto tra la densità dei mastociti e la gravità della gastrite (r = -0,032, p = 0,604).
Figura 3 La relazione tra la densità dei mastociti e la gravità della gastrite in H. pylori pazienti negativi (r = -0.003, p = 0,962) .
Figura 4 la relazione tra la densità dei mastociti e la gravità della gastrite in H. pylori pazienti positivi (r = 0,182, p = 0,485)
. Discussione
mastociti sono affermato di essere un elemento importante nella infiltrazione cellulare nel corso di infiammazione della mucosa gastrica causa di H. pylori [10]. C'è solo pochi dati in letteratura relativi al numero di mastociti in infiammazione cronica della mucosa gastrica in età pediatrica ed esistenti dati hanno risultati piuttosto contrastanti.
Rilevamento Mast cellule è piuttosto facile da una colorazione semplice e poco costoso (Giemsa) che può anche essere utilizzato per rilevare la presenza di H. pylori. Si tratta di pena di notare che il rilevamento affidabile è ottenuta esaminando il tessuto in olio da immersione (X1000) e ingrandimenti più bassi che si possono perdere. Anche se il gold standard è la colorazione dei tessuti con l'anticorpo anti-triptasi con metodi di immunoistochimica, si tratta di un tempo e metodo piuttosto costoso, non raccomandato per la valutazione patologica di routine di biopsie gastriche.
Abbiamo deciso di studiare il numero piuttosto elevato di esemplari in un ospedale per bambini di riferimento con una lunga esperienza in gastroenterologia pediatrica e di determinare la densità dei mastociti e la sua relazione con l'infiammazione e la presenza di H. pylori.
in questo studio, non abbiamo osservato una significativa correlazione tra la densità dei mastociti, la gravità dell'infiammazione, l'attività di gastrite e la presenza e la densità di H. pylori in antro. I nostri risultati sono piuttosto in accordo con i risultati di alcuni autori come Maciorkowska et al., Ma non altri [6-8], anche se nessuno di questi studi sono stati effettuati su tali grandi serie come la nostra.
H. pylori è il fattore più frequente e significativo nell'eziologia di gastrite cronica attiva, oltre ad essere implicata in varie malattie come ulcera peptica, adenocarcinoma gastrico e linfoma [8]. I nostri risultati hanno anche mostrato che vi era una relazione significativa tra infezione da H. pylori e la gravità della gastrite (p = 0,0001).
Mast cellule sono le cellule più importanti reazioni allergiche acute con la mediazione di IgE. In questo studio, non vi era alcuna correlazione significativa tra sintomi allergici dichiarati dai genitori (cibo e altre allergie) e gastrico la densità dei mastociti.
Molti bambini sono sottoposti a endoscopia con disturbo comune di dolore addominale cronico o ricorrente nel nostro centro. Essi sono principalmente nella gamma di 5 a 7 anni di età e non si osservano variazioni significative sia per via endoscopica e con l'esame microscopico, come in molti dei nostri casi (circa 231 su 352 casi). Il nostro studio mostra che la densità dei mastociti in questo gruppo è leggermente superiore rispetto agli altri gruppi (anche se non statisticamente significativa) e proponiamo che forse mastociti svolgono un ruolo nel produrre tali sintomi non per i loro percorsi tradizionali note nei processi infiammatori, ma da un ancora percorso definito come effetto stimolante sul plessi nervosi gastrici. Quindi si consiglia di aumento della densità dei mastociti dovrebbe essere incluso nella relazione finale di biopsie gastriche.
Anche se non abbiamo effettuato le macchie di immunoistochimica per la rilevazione dei mastociti, proponiamo che Giemsa è un metodo di colorazione affidabile e facile disponibile in tutte le laboratori e ha anche una buona correlazione tra osservatori. Anche se ha anche dei difetti, come il rilevamento errato di colorazione artefatta come mastociti, gli effetti di edema e di ritiro e anche loro scomparsa a causa della degranulazione, questi non hanno alcun impatto significativo sul conteggio finale.
Oltre alle carenze del nostro studio, è
Questo studio necessario ricordare che è stato eseguito su piuttosto una grande serie di pazienti pediatrici ed i risultati non sono sorprendentemente concordanti con altri studi condotti principalmente nel gruppo di età adulta.
Dichiarazioni
Ringraziamenti è stato eseguito da una sovvenzione da Immunologia, asma e allergia Research Institute, bambini Medical center, Università di Teheran di Scienze mediche
Siamo grati della sig.ra Zahra Omidi e la sig.ra Mitra Mir. Khaef per il loro supporto tecnico dedicato.
Autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai degli autori fascicoli presentati originali per immagini. 'file originale per la figura 1 13000_2006_60_MOESM2_ESM.pdf Autori 13000_2006_60_MOESM1_ESM.pdf autori file originale per la figura 2' file originale per la figura 3 13000_2006_60_MOESM4_ESM.pdf Autori 13000_2006_60_MOESM3_ESM.pdf autori file originale per la figura 4

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• Le differenze nei fattori di rischio tra i modelli di recidiva in pazienti dopo resezione curativa per il carcinoma gastrico avanzato