mástil en biopsias gástricas de edad pediátrica y su relación con la inflamación y la presencia de Helicobacter pylori
Resumen Antecedentes
el objetivo de este estudio fue investigar la relación entre la densidad de los mastocitos, la gravedad de la gastritis histológica y la presencia de Helicobacter pylori (H. pylori) en la mucosa del antro de los pacientes pediátricos.
Métodos comentario el estudio incluyó a 352 (192 hombres y 160 mujeres, < 14 años) de los pacientes. Todos los casos se sometieron a endoscopia, y se obtuvieron biopsias para el examen histopatológico y la evaluación de Helicobacter pylori. Todas las biopsias fueron evaluadas de acuerdo con el sistema de Sydney y densidad de los mastocitos en la mucosa antral se analizó mediante tinción de Giemsa. Se utilizó la prueba de correlación de Spearman para determinar la relación entre la densidad de los mastocitos y otros parámetros histopatológicos. La comparación de la densidad de los mastocitos entre H. pylori grupos positivos y negativos se analizaron mediante la prueba U de Mann Whitney.
Resultados
densidad de los mastocitos fue de 12,6 ± 0,87 en 0,25 mm
2 (0-81). Medios de gravedad de la inflamación gástrica en pacientes H. pylori positivos y negativos fueron 1,7 ± 0,6 y 0,6 ± 0,7, respectivamente, que fue estadísticamente significativa (p = 0,0001). densidad de los mastocitos no se correlacionó con la presencia y el grado de la inflamación, la actividad, la presencia y la puntuación de H. pylori en el antro (p > 0,05). No hubo correlación significativa entre la densidad de los mastocitos y la alergia.
Discusión
Llegamos a la conclusión de que puede haber algunas otras maneras para que la contribución de los mastocitos en los procesos patológicos que implican el tracto gastrointestinal en niños.
Antecedentes
mástil las células son redondas u ovales células de tejido conectivo, la medición de 20 a 30 micrómetros de diámetro con gránulos citoplásmicos que contienen glicosaminoglicanos resultantes en metacromasia y también la histamina, proteasas neutras, factor activador de plaquetas y muchos otros [1]. La superficie de los mastocitos contiene receptores específicos para la IgE, que después de la fijación y de unión con antígenos especiales, puede resultar en la liberación de gránulos de los mastocitos y la reacción de hipersensibilidad inmediata, por tanto, [1].
Mástil células se originan en la médula ósea y son de la mayoría de las células importantes en los procesos inflamatorios. Mientras que liberan varios mediadores y citoquinas en el comienzo de proceso inflamatorio, que son considerados como células proinflamatorias por parte de algunos autores [2]. Ellos tienen un importante papel en el desencadenamiento y la regulación de los procesos inflamatorios. Residen en la sangre adyacente y canales linfáticos principalmente bajo las superficies epiteliales como la piel, respiratorio, gastrointestinal y tracto urogenital [3].
Desde 1996, pocos estudios se han realizado sobre la densidad de los mastocitos en las biopsias gastrointestinales, principalmente, a la edad adulta. Nakajima et al. demostrado la presencia de mastocitos por tinción inmunohistoquímica con el anticuerpo triptasa humanos anti en biopsias gástricas y llegó a la conclusión de que la densidad de los mastocitos fue de 2 a 3 veces mayor en H. pylori infectadas mucosa gástrica que en estómago normal negativo [4]. Bamba et al. demostrado que el aumento de mastocitos gástricos en H. pylori biopsias positivas se debe a la proliferación in situ de los mastocitos en lugar de la migración desde otros sitios y los resultados de factor de células madre y las interleucinas 3, 4 y 6 [5]. Sulik et al. la participación de los mastocitos estudiado en niños con o sin infección por H. pylori. Los resultados de este estudio mostraron que los mastocitos a través de sus numerosos mediadores puede desempeñar un papel clave en la gastritis crónica especialmente en H. pylori casos positivos [6]. Mysorekar et al. investigado el grado de participación de los mastocitos en la gastritis antral con y sin infección por H. pylori en pacientes con síntomas sugestivos de enfermedad ácido péptica. Llegaron a la conclusión de que H. pylori podría ser responsable del aumento de la densidad de los mastocitos en el antro gástrico [7]. Kayaselcuk et al. investigado la relación entre la densidad de los mastocitos, la densidad de H. pylori y la gravedad histopatológico de la gastritis en el corpus y antral mucosa y llegó a la conclusión de que la densidad de los mastocitos fue significativamente mayor en H. pylori positiva del grupo de grupo negativo y también se correlacionó la distribución de los mastocitos mayor con aumento de la inflamación y la actividad [8]. Maciorkowska et al. las muestras de biopsia de mucosa gástrica evaluados recogido de pacientes H. pylori positivos, los pacientes después de la infección por H. pylori y los niños pylori-negativas H.. Las muestras se evaluaron para la infección y la inflamación y se tiñeron con la triptasa de los mastocitos anti-humano para contar los mastocitos de la mucosa. En la evaluación morfométrica, se encontraron pequeñas diferencias en el número de células cebadas en los grupos que no fue estadísticamente significativa (el número de mastocitos son: 86,4, 81,4 y 70,2 células /mm2 de muestra, respectivamente) [9]
Como se ha mencionado. anteriormente, los estudios sobre la densidad de los mastocitos se han realizado principalmente en los adultos y en los grupos más pequeños como todavía. Así que decidimos estudiar la densidad de los mastocitos en el grupo de edad pediátrica en bastante mayor número de casos en un hospital de niños de referencia con una larga experiencia en gastroenterología pediátrica. México La finalidad de este estudio fue investigar la relación entre la densidad de los mastocitos, los hallazgos histopatológicos y la presencia de Helicobacter pylori en la mucosa antral en pacientes pediátricos
Métodos
352 niños (< 14 años de edad, con problemas gastrointestinales). quien se refirió a los niños del Centro Médico de la Universidad de Teherán de Ciencias médicas con diferentes problemas gastrointestinales eran inscritos en este estudio para el período 2004-2006, mediante un muestreo secuencial. Todos los casos se sometieron a endoscopia, y se obtuvieron biopsias antrales para el examen histológico y la evaluación de Helicobacter pylori. Se aplicó un cuestionario para cada paciente, incluyendo los hallazgos clínicos y endoscópicos y la historia de los alimentos y otras alergias.
Las muestras fueron fijadas en formalina al 10%, se procesan, se incluyeron en parafina y cortadas en secciones secuenciales 3 micrómetros. secciones superficiales y profundos fueron teñidas por hematoxilina-eosina (dos diapositivas) y una diapositiva fue manchado por la tinción de Giemsa. la gravedad gástrica se determinó mediante sistema de puntuación de Sydney y la presencia y la puntuación de H. pylori fueron determinados por criterios en la tabla 1 1.Table sistema de puntuación modificado para la densidad de H. pylori.
Densidad de H. pylori
Las características histológicas
0
No hay bacterias
1
pocas bacterias (5 a 10) observaron solamente bajo ampliación × 40
2 distribución irregular (< 50 de criptas total de la superficie) con menor densidad (BCN < 10) página 3
distribución irregular (< 50 de criptas superficies totales) con la mayor densidad (BCN > 10)
o distribución difusa (> 50 de criptas total de la superficie) con mezcla de baja densidad (BCN < 10)
4 de distribución difusa (> 20 de las criptas de la superficie total) con mezcla de alta (BCN > 10) y de baja densidad ( BCN < 10) página 5
distribución difusa (> 50 de criptas superficies totales), todas con alta densidad (BCN > 10)
BCN = Número de H. pylori en cada criptas
Los mastocitos eran contados por tinción de Giemsa a 1.000 aumentos en 10 campos con un microscopio óptico Zeiss estándar de 20 y la suma se calculó para cada caso (que mide 0,25 mm 2). Todos los recuentos de células cebadas y evaluación histológica fue realizada por un solo observador.
El análisis estadístico se realizó con el programa SPSS, versión 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE.UU.). Los valores fueron las pruebas de normalidad utilizando una prueba de Kolmogorov-Smirnov. Se utilizó la prueba de correlación de Spearman para determinar la relación entre la densidad de los mastocitos y otros parámetros histopatológicos. La comparación de la densidad de los mastocitos entre H. pylori grupos positivos y negativos se analizaron mediante la prueba U de Mann Whitney. Un valor de p de 0,05 o menos fue considerado significativo.
Resultados
Durante un período de 2 años de estudio, 352 biopsias antrales se obtuvieron de los participantes. Entre estas personas, el 54,5% (192 personas) eran varones. No hubo diferencia significativa entre el sexo de los pacientes (p > 0,05). La edad media de los pacientes incluidos en el estudio fue de 7,17 ± 3,27 (rango: 1-14 años). La Tabla 2 proporciona una indicación de las características basales de los pacientes y el diagnóstico clínico. Como se muestra en la tabla 2, 119 personas (33,8%) de los pacientes tenían dolor antes de comer, 102 personas (28,9%) el dolor después de comer, la pérdida de peso de 49 personas (13,9%), y 47 personas (13,5%) tenía ardor de estómago. No se encontró relación significativa entre el sexo y el tipo de problema gastrointestinal. 69 personas (19,6%) fueron positivos para la historia de alergia. Los hallazgos endoscópicos se representan en la tabla 2 2.Table los pacientes las características basales y el diagnóstico clínico basado en los hallazgos endoscópicos.
macho (n = 192) mujeres (n = 160) guía empresas p-valor Edad (años) * página 7 ± 3.5 7.3 ± 3.1 NSA Los síntomas (%): perfil del dolor antes de comer 66 (18,7%) guía 53 (15,1%) NSB Dolor después de comer 60 (17%) 42 (11,9 %) NS La pérdida de peso 29 (8,2%) 20 (5,7%) NS corazón quemar 23 (6,6%) 24 (6.8 %) NS Otros 55 (15,6%) 38 (10,7%) NS Antecedentes de alergia (%): perfil 34 (17,7%) 35 (21,8%) NS el diagnóstico clínico (%): perfil basándose en los resultados endoscópicos normal 85 (24,1%) 75 (21,3%) NS La esofagitis 32 (9,1%) 25 (7,1%) Gastritis 37 (10,5%) 30 (8,5%) Duodenitis Estrellas: 3 (0,9%) página 3 (0,9%) Gastroesophagitis 35 (9,9%) guía 27 (7,7%) Los datos se muestran como media ± dE. aNo significativa (NS), la t de Student prueba. BChl cuadrado de prueba Como se muestra en la tabla 3, de 352 casos, el 36,6% de las biopsias gástricas no mostró ningún cambio patológico significativo, 29% gastritis crónica leve, 10.2% gastritis crónica moderada, un 1,1% severa gastritis crónica, y 23% gastritis folicular. 15,6% también mostró actividad. 17,6% de los casos fueron positivos para H. pylori. Medios de gravedad de la inflamación gástrica en pacientes H. pylori positivos y negativos fueron 1,7 ± 0,6 y 0,6 ± 0,7, respectivamente, que fue estadísticamente significativa (p = 0,0001). Hubo una relación estadísticamente significativa entre el estado de H. pylori y la actividad de la gastritis (p = 0,0001) .Tabla 3 características patológicas | macho (n = 192) mujeres (n = 160) guía empresas p-valor Gastritis (%) normal 70 (19,9%) 59 (16,8%) 0,166 leve 55 (15,6%) 47 (13,4%) Moderado 26 (7,4%): perfil 10 (2,8%) grave 1 (0,3%) página 3 (0,9%) folicular 40 (11,4%) guía 41 (11,6%) Helicobacter pylori (%): perfil 34 (9,7%) 28 (8%) 0,537 Actividad (%) 30 (8,5%) 25 (7,1%) 0.560 densidad de los mastocitos media (rango) 13,1 (0-78): perfil del 12,2 (0-81) NS la mediana página 7 página 5 un No significativo (NS) densidad de los mastocitos fue de 12,6 ± 0,87 en 0,25 mm 2 (rango: 0-81) (Fig. 1). densidad de los mastocitos, la presencia y grado de inflamación basado en el estado de H. pylori se presenta en la tabla 4. No se encontró correlación significativa entre la densidad de los mastocitos y el sexo de los pacientes. También se encontró correlación significativa entre la densidad de los mastocitos y la presencia y el grado de inflamación [(r = -0,032, p = 0,604), (Fig. 2)], la actividad (p = 0,09) y la presencia de H. pylori (p = 0,21). De acuerdo con el estado de H. pylori, no hubo correlación estadísticamente entre la densidad de los mastocitos y la gravedad de la gastritis (Fig. 3 y 4). No se encontró diferencia significativa entre la densidad de los mastocitos y la historia de alergia (p = 0,34) .Tabla 4 densidad de los mastocitos y la presencia y el grado de inflamación. gastritis mástil densidad celular total (n = 352) guía empresas HP (+) (n = 62) HP (-) (n = 290) normales 0 página 14 ± 18,6 (6) 13,9 ± 18,5 (5,5): perfil suave 19,3 ± 30,9 (3) 13,7 ± 15,1 (9) 9,4 ± 11,8 ( 4.5) moderada 5,2 ± 6,3 (2,5) 11,7 ± 13,5 (5,5) 11,8 ± 9,4 (4.5) severa página 14 página 3 ± 5.1 (0) 5,7 ± 6,9 (4,5) folicular 10,1 ± 14,5 (5): perfil del 12,1 ± 15 (4): perfil 11 ± 14,6 (5) total de 14,1 ± 9,5 (4) * 13,3 ± 16,5 (6,5) se muestra datos como la media ± SD (mediana) HP: Helicobacter pylori prueba de Mann-Whitney *; no es estadísticamente significativa (p = 0,217) Figura 1 mastocitos visto por tinción Giemsa como células ovales grandes que contienen gránulos metacromáticos (cinco se ven en este campo, de inmersión en aceite × 1000, tinción Giemsa). Figura 2 La relación entre la densidad de los mastocitos y la gravedad de la gastritis (r = -0,032, p = 0,604). Figura 3 La relación entre la densidad de los mastocitos y la gravedad de gastritis por H. pylori en pacientes negativos (r = -0,003, p = 0,962) . Figura 4 la relación entre la densidad de los mastocitos y la gravedad de la gastritis por H. pylori en pacientes positivos (r = 0,182, p = 0,485). Discusión los mastocitos se dice que son un elemento importante en el la infiltración celular en el curso de la inflamación de la mucosa gástrica debido a la infección por H. pylori [10]. Sólo hay pocos datos en la literatura sobre el número de mastocitos en la inflamación crónica de la mucosa gástrica en el grupo de edad pediátrica y que los datos existentes tienen resultados bastante contradictorios. Mástil de detección de células es bastante fácil por una tinción simple y de bajo costo (Giemsa) que también puede ser utilizado para detectar la presencia de H. pylori. Es de destacar que la detección fiable se logra mediante el examen de los tejidos con aceite de inmersión (x1000) y en menores aumentos se pueden perder. Aunque el estándar de oro es la tinción de tejidos con el anticuerpo anti-triptasa por métodos inmunohistoquímicos, es una pérdida de tiempo y un método bastante caro no se recomienda para la evaluación patológica rutinario de las biopsias gástricas. Decidimos estudiar en número bastante grande de muestras en un hospital de niños de referencia con una larga experiencia en gastroenterología pediátrica y determinar la densidad de los mastocitos y su relación con la inflamación y la presencia de H. pylori. en este estudio, no se observó una correlación significativa entre la densidad de los mastocitos, la gravedad de la inflamación, la actividad de la gastritis y la presencia y la densidad de H. pylori en el antro. Nuestros resultados son más bien en concordancia con los resultados de algunos autores como Maciorkowska et al., Pero no en otros [6-8], aunque ninguno de estos estudios se realizaron en series tan grande como la nuestra. H. pylori es el factor más frecuente y significativo en la etiología de la gastritis crónica activa, además de estar implicado en diversas enfermedades tales como úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico y linfoma [8]. Nuestros resultados también mostraron que había una relación significativa entre la infección con H. pylori y la gravedad de la gastritis (p = 0,0001). Mastocitos son las células más importantes en las reacciones alérgicas agudas con mediación de IgE. En este estudio, no hubo correlación significativa entre los síntomas alérgicos indicadas por los padres (alimentos y otras alergias) y la densidad de los mastocitos gástrico. ¿Cuántas niños se someten a endoscopia con queja frecuente de dolor abdominal crónico o recurrente en nuestro centro. Son principalmente en el rango de 5 a 7 años de edad y no se observan cambios significativos tanto endoscópica como por examen microscópico, como en la mayoría de nuestros casos (casi 231 de cada 352 casos). Nuestro estudio muestra que la densidad de los mastocitos en este grupo es ligeramente más alta que otros grupos (aunque estadísticamente no significativo) y proponemos que tal vez mastocitos juegan un papel en la producción de tales síntomas no por sus vías tradicionales conocidos en los procesos inflamatorios, sino por un todavía vía definida como efecto estimulante sobre plexos nerviosos gástricos. Por lo tanto, se recomienda que aumento de la densidad de los mastocitos se debe incluir en el informe final de las biopsias gástricas. Aunque no se realizaron tinciones de inmunohistoquímica para la detección de células cebadas, proponemos que la tinción de Giemsa es un método de tinción fiable y fácil disponible en todo laboratorios y también tiene buena correlación entre observadores. Aunque también tiene deficiencias tales como la detección errónea de la tinción de artefactos como los mastocitos, los efectos de edema y la contracción y también desaparecidos a causa de la desgranulación, pero éstos no tienen un impacto significativo en el recuento final. Además de las deficiencias de nuestro estudio, es hay que mencionar que se realizó en más bien una gran serie de pacientes pediátricos y los resultados no son sorprendentemente concordante con otros estudios realizados principalmente a la edad adulta. Declaraciones Agradecimientos Este estudio se llevó a cabo gracias a una subvención de Inmunología, Asma y Alergia Instituto de Investigación, Centro Médico infantil de la Universidad de Teherán de Ciencias médicas Estamos agradecidos de la Sra Zahra Omidi y la Sra Mitra Mir. Khaef por su apoyo técnico dedicado. Los autores originales presentados archivos de imágenes A continuación se presentan los enlaces a los autores originales presentados archivos de imágenes. 'archivo original para la figura 1 13000_2006_60_MOESM2_ESM.pdf autores 13000_2006_60_MOESM1_ESM.pdf Autores archivo original de la figura 2' archivo original de la figura 3 13000_2006_60_MOESM4_ESM.pdf autores 13000_2006_60_MOESM3_ESM.pdf Autores archivo original de la figura 4
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