Sumažėjęs išraiška prenyl difosfato synthase subvieneto 2 koreliuoja su sumažėjusiu išlikimo pacientams, sergantiems skrandžio cancer

sumažėjo išraiška prenyl difosfato synthase subvieneto 2 koreliuoja su sumažėjusiu išlikimo pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, pervežimas tezės
Background pervežimas identifikavimas naujų molekulinių biologinių žymenų pagerės pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu (GC) valdymą. Prenyl difosfatas sintezės subvieneto 2 (PDSS2) reikalingas Kofermentas Q10 biosintezės ir veikia kaip naviko slopintuvas; Tačiau vaidmuo ir reguliavimo mechanizmai PDSS2
GC nėra suprantama. Šio tyrimo tikslas buvo nustatyti ekspresijos būklė ir reguliavimo mechanizmus PDSS2
GC.
Metodai
ryšį tarp žodžio ir metilinimo PDSS2
buvo įvertintos naudojant GC ląstelių linijas. Klinikinė reikšmė PDSS2
išraiška buvo vertinama naudojant 238 porų chirurginiu rezekcijos skrandžio audinių su pogrupių analizę remiantis GC potipių.
Rezultatai Viesbutis The iš PDSS2
mRNR ekspresijos sumažėjo 73% GC ląstelių linijos, lyginant su kontroline nevėžinis ląstelių. Į PDSS2
rengėjas buvo hypermethylated ląstelių susilpnėjimas PDSS2
išraiška, ir gydyti šias ląsteles su metilinimo inhibitorių vėl PDSS2
išraiška. GC audiniai išreiškė žymiai mažesnes vidutines lygiai PDSS2
mRNR palyginti su gretimų sveikų audinių (p
< 0,001). Sąvoka modelis PDSS2 baltymų atitiko jo iRNR. Iš PDSS2
iRNR išraiškos sumažėjimas GC audinių (mažiau nei pusė žodžio aptikta atitinkamų normaliomis gretimuose audiniuose lygis) koreliavo su padidėjęs angliavandenių antigeno 19-9 (p pervežimas = 0,015), limfmazgių metastazės (p
= 0,022), ir trumpesnis pasikartojimo išgyvenamumas be po radikalių rezekcijos (P, pervežimas = 0,022). Be to, daugiamatis analizė nustatė PDSS2
iRNR raiška kaip nepriklausomas prognostinis faktorius (rizikos santykis 1,95, 95% pasikliautinasis intervalas 1.22-3.09, p
= 0,005), o jo išraiška modelio ir prognostinė reikšmė buvo panašūs tarp trijų GC potipių .
išvadas
PDSS2
koduoja spėjamą naviko slopintuvas, ir mes parodyti čia, kad jo išraiška buvo reglamentuojama hypermethylation jos rengėjas GC ląsteles. Slopinimas PDSS2
iRNR išraiškos gali būti kaip naują biologinis žymuo visų GC tipų.
Raktiniai žodžiai
Skrandžio vėžys Prenyl difosfatas sintezės subvieneto 2 Expression metilinimas potipio Background
Nors skrandžio vėžio atvejų (GC) mažėja labiausiai išsivysčiusių šalių, ji išlieka viena iš labiausiai paplitusių priežasčių vėžio susijusių mirčių visame pasaulyje [1] - [3]. Tinkamas stratifikacija pacientų yra pagrindinis aspektas individualizuoto gydymo, todėl sumažinti mirtingumą nuo šio vėžio [4], [5].
Pasak jo epidemiologijos, patologijos, ir vieta kūne, GC pripažinta trijų skirtingų piktybinių navikų atsirandantis tame pačiame organe [6] - [8]. Shah ir kt. [9] buvo pasiūlyta įtikinamą klasifikatorių GC pagal histopatologinis ir anatominių kriterijus taip: (1) proksimalinis nondiffuse GC, kur navikas yra daugiausiai išsidėsčiusios skrandžio Cardia su įrodymais pirmtakų liaukų displazijos arba in situ karcinomos lėtinio uždegimo buvimą , paprastai be atrofijos; (2) difuzinis GC, kuris gali būti bet kurioje skrandyje be aiškios gastritas, kad būdingos visiškai išsklaidytų modelį įsiskverbimo Ląstelių, turinčių prastai diferencijuotos fenotipo; ir (3) distalinio nondiffuse GC, kuris yra daugiausiai išsidėsčiusios distalinio skrandžio, kai esama požymių lėtinio gastrito, kad yra daugiausia diferencijuota arba eksponuoja žarnyno fenotipą. Šiame tyrime, jie nustatyta, kad trys GC potipių išsiskiria jų ekspresijos profilius. Todėl, genetinė įvairovė GC potipių turėtų būti atsižvelgta į tyrimų genetinių ir epigenetinių pokyčių, susijusių su skrandžio kancerogenezėje ir progresavimo.
Prenyl difosfatas sintezės subvieneto 2 (PDSS2
) buvo nustatyta 2005 m [10], ir įrodymai rodo kad ji veikia kaip auglio slopinamojo [11], [12]. PDSS2
reikalingas kofermento Q10 (CoQ10) [13] sintezę [14], kuris yra sintetinamas mitochondrijų vidinės membranos ir vaidina svarbų vaidmenį mitochondrijų kvėpavimo grandinės, pirimidino nukleozidų biosintezę ir moduliaciją apoptozės [15]. PDSS2
gyvena per chromosomų lokuso 6q16.3-21, dažno mikrosatelitiniai DNR nestabilumo ir praradimo heterozigotiškumo (LOH) svetainė GC [16], [17], remti savo vaidmenį kaip naviko slopintuvas skrandžio epitelinių ląstelių , Be to, PDSS2
gali slopinti piktybinių melanomos ir plaučių vėžio [11], [12] vystymąsi. Be to, Chen ir kt., Pranešama, kad vykdomas Padidėjusi PDSS2
veda prie apoptozės į GC ląstelių linijos sukelia ląstelių ciklo suėmimą į G0 /G1 fazės [18]. Šie pranešimai privertė mus daryti hipotezę, kad PDSS2
yra potencialus GC susijusių genų ir iš naujo kliniškai svarbių prognostinių persekiotoją GC kandidatas.
Šiame tyrime, saviraiškos ir metilinimo statuso PDSS2
GC buvo pasiryžę įvertinti klinikinę reikšmę ir reguliavimo mechanizmų PDSS2
raiškos GC. Mūsų rezultatai rodo, kad PDSS2
išraiška suteikia galimą klinikinį biologinis iš progresavimo ir pasikartojimo GC.
Medžiaga ir metodai etikos
Šis tyrimas atitiko etikos gairių Pasaulio medikų asociacijos deklaracijos Helsinkyje -etinis principai žmonėmis susijusių medicinos tyrimų temos ir institucinių ekspertizės valdyba Nagojos universiteto Japonijoje buvo patvirtintas. Parašyta informuotas sutikimas už naudojimąsi klinikinius mėginius ir duomenis, kaip reikalaujama pagal institucinius peržiūros laive, buvo gauta iš visų ligonių [4].
Mėginio paėmimo
vienuolika GC ląstelių linijas (H111, KATOIII, MKN1, MKN28, MKN45 , MKN74, NUGC2, NUGC3, NUGC4, SC-2-NU ir SC-6-LCK) ir CCL-241 (nevėžinis ląstelių linija kilęs iš plonosiose žarnose) buvo gauti iš Amerikos tipinių kultūrų kolekcijoje (Manassas, VA, JAV) arba Tohoku universitetas, Japonija. GC ląstelių linijos buvo auginamos 37 ° C temperatūroje, RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, JAV), papildytoje 10% vaisiaus galvijų serumo atmosferoje sudėtyje yra 5% CO 2. Už CCL-241, 30 ng /ml epidermio augimo faktoriaus (Sigma-Aldrich) buvo pridėta į terpėje. Pirminiai GC audiniai ir atitinkami normalus gretimų audinių buvo renkami iš 238 pacientų, kuriems buvo atlikta skrandžio rezekcija GC Nagojoje universitetinės ligoninės tarp 2001 ir 2012 pacientai, kurie gavo neoadjuvantinės terapija buvo atmesti, nes buvo sunku gauti vėžio ląstelių randuotas audiniuose. Mėginiai buvo suskirstyti histologiškai naudojant 7-osios redakcijos Tarptautinės vėžio kontrolės (UICC) klasifikaciją [19] Sąjunga. Svarbios klinikos parametrai buvo įsigytas iš medicininių įrašų. Įvertinti, ar pasakymas lygis PDSS2
koreliuoja su naviko fenotipo, pacientai buvo suskirstyti į tris grupes pagal GC potipių apibrėžimas pagal Shah ir kt kriterijus. [9] taip: proksimalinio nondiffuse, difuzinis, ir distalinės nondiffuse tipas. Nuo 2006 m palaikomoji chemoterapija naudojant S-1 (geriamasis fluorintų pirimidino) yra skiriamas visų UICC II etapo III pacientus su GC, jei draudžiama nuo paciento būklės [20]. Pacientai buvo stebimi bent kartą kas 3 mėnesius 2 metus po operacijos ir po to kas 6 mėnesius 5 metus arba iki mirties. Fizinis patikrinimas, laboratoriniai tyrimai, ir sustiprintos kompiuterinė tomografija (krūtinės ir pilvo ertmėje) buvo atlikta kiekvieno apsilankymo metu. Chemoterapija pacientams, sergantiems toli metastazių arba po pasikartojimo nulėmė gydytojo nuožiūra.
Audinių mėginiai buvo nedelsiant užšaldomi skystu azotu ir saugomi -80 ° C temperatūroje. Navikų mėginiuose be nudžiūvusiuose srityse (apie 5 mm 2) buvo paimti dėl didelio stebėjimo ir tik patvirtino, kad sudaro daugiau nei 80% naviko komponentus H &mėginius; El dažymo buvo įtrauktos į šį tyrimą. Atitinkantis normalų gretimų skrandžio gleivinės mėginiai > 5 ° cm nuo navikų krašto buvo gautos iš to paties paciento [21]
kiekybinis realaus laiko atvirkštinės transkripcijos polimerazės grandininę reakciją (KRL-PGR)
viso RNR. (10 mikrogramų vienam mėginio) buvo izoliuotas nuo 11 GC ląstelių linijų, KKM-241, 238 pirminės GC audiniai ir atitinkantis normalų gretimuose audiniuose buvo naudojamas generuoti kDNR, kuris buvo papildyta naudojant specifinius PGR pradmenis (papildomas failų 1: lentelė S1). Realaus laiko nustatymas SYBR® Žalioji fluorescencijos intensyvumas buvo atliktas naudojant ABI StepOnePlus realiojo laiko PGR sistema (taikoma BIOSYSTEMS Foster City, CA, JAV). Iš GAPDH
mRNR ekspresijos buvo įvertintas kiekvieno mėginio standartizacijos. Kad KRL-PGR reakcijos kiekvieno mėginio buvo pakartotas tris kartus. Sąvoka lygis kiekvieno mėginio pateikiama kaip PDSS2 vertės pervežimas amplikono padalinus iš kad GAPDH
[22]. PDSS2
mRNR išraiška buvo apibrėžtas kaip sumažėjo GC audinių, kai jo lygis buvo mažesnis nei pusė, kad atitinkamo įprastą gretimus audinius.
Analizė promotoriaus regione PDSS2
nukleotidų seką, kurios PDSS2
promotoriaus regione buvo analizuojama siekiant nustatyti buvimą ar nebuvimą CpG salų apibūdinamas taip: bent 200-BP regionas DNR su aukštos GC kiekis (> 50%) ir Stebimi CpG /laukiami CpG santykis ≥0.6 [23] , Mes naudojome CpG sala Searcher programinę įrangą (http:.. //Cpgislands USC edu /) nustatyti CpG salos vietas [24]
metilinimas konkrečių PGR (JEP) ir bisulfito sekos analizė
. PDSS2
turi labai CPG salą netoli jo promotoriaus regione, ir mes iškėlė hipotezę, kad netipinė metilinimas yra atsakingas už reguliuojant PDSS2
GC transkripciją. DNR mėginiai iš 11 GC ląstelių linijų gydomiems bisulfito buvo atliktas JEP ir nukleotidų sekos analizė [25]. Grunto sekas naudojami JEP ir bisulfito sekos yra išvardyti papildomame faile 1: Lentelė S1
5-aza-2'-dezoksicitidino (5-aza-DC) gydymo
įvertinti promotoriaus hypermethylation santykį su PDSS2.
transkripcija, GC ląstelės (1,5 × 10 6) buvo gydomi 5-aza-dC (Sigma-Aldrich) slopina DNR metilinimas ir kultūringas 6 dienas su vidutinio pokyčių, 3, 5 dienų 1, ir. RNR buvo išskirta ir AT-PGR buvo atliekama taip, kaip aprašyta [7].
imunohistocheminis (IHC) pervežimas IHC į PDSS2 lokalizavimo analizė buvo atlikta naudojant pelės monokloninis antikūnas prieš PDSS2 (ab119768, Abcam, Cambridge, UK ) skiesti 1: 150 antikūnų skiedikliu (Dako, Glostrup, Danija) zondas 30 atstovybes formalinu fiksuotų ir parafino įterptųjų skyriai anksčiau [3] aprašyto gerai išsaugotas GC audinio. Dažymo modeliai buvo lyginami tarp GCS ir atitinkamų normaliomis gretimuose audiniuose. Norėdami išvengti subjektyvumo, egzemplioriai buvo randomizuoti ir koduojamos prieš analizę dviejų nepriklausomų stebėtojų, kurie buvo nežinoti mėginių statusą. Kiekvienas stebėtojas įvertino Visi egzemplioriai bent du kartus sumažinti vidaus stebėtojo variacijos [7].
Įvertinimas klinikinė reikšmė PDSS2 išraiškos pervežimas koreliacijas tarp iš PDSS2
iRNR išraiškos ir klinikos parametrų modelis buvo vertinami pagal vienas iš trijų GC potipių skirtumai. Pogrupio analizė išlikimo pagal GC potipis buvo atliekama siekiant nustatyti PDSS2
išraiškos dėl pacientų rezultatų įtaką.
Statistinė analizė
Santykiniai lygių iRNR išraiškos (PDSS2 /GAPDH
) tarp GC ir greta normaliuose audiniuose buvo analizuojami naudojant Mann-Whitney U
testą. Χ
2 bandymas buvo naudojamas analizuoti tarp ekspresijos ir metilinimo statuso PDSS2
ir klinikos parametrų asociacijos reikšmę. Liga-specifinis ir išgyvenimo be ligos normos buvo apskaičiuotas naudojant Kaplan-Meier metodu, o išgyvenimo kreivių skirtumas buvo analizuojami naudojant log-rank testą. Mes atlikome regresijos analizę, siekiant nustatyti prognostiniai faktoriai, naudojant Cox proporcinės rizikos modelį ir kintamuosius P
< 0,05 buvo įrašyti į galutinį modelį. Visi statistinės analizės buvo atliekamos naudojant JMP 10 programinę įrangą (SAS Institute Inc, Cary, NC, JAV). A P
<vertės; 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas.
Rezultatai
identifikavimo CpG saloje PDSS2 promotoriaus
CpG sala buvo identifikuoti PDSS2
promotoriaus regione naudojant CPG Island Searcher. Šio CpG salos savybės yra tokios: 1655 bp 55,9% GC ir 0,70 Stebimi CpG /laukiami CpG santykis (1A pav.) Taigi, mes iškėlė hipotezę, kad hypermethylation iš CpG salų reguliuoja PDSS2
GC išraiška. 1 pav Metilinimas analizė PDSS2 GC ląstelių linijų. (A) CpG salą mėlynos linijos nurodė centre ant PDSS2
transkripcija inicijavimo svetainėje pratęsiantis prieš į promotoriaus regione. (B), Baras Grafikai rodo PDSS2
iRNR raiškos lygį CCL-241 (kontrolė nevėžinės ląstelių) ir GC ląstelių linijas prieš arba po 5-aza-DC gydymą. Metilinimo statusas PDSS2
rengėjas buvo įvertintas naudojant JEP, o rezultatai yra pateikiami pridedamame dėžutę. M, metilo; PM, iš dalies denatūruotas; U nemetilintas. (C) Tipiniams rezultatai bisulfito sekos analizės. Visi CpG svetainių KATOIII ląstelės buvo saugomi kaip CG ir tų MKN74 buvo perskaičiuotos TG.
PDSS2 iRNR raiška ir metilinimo statusą GC ląstelių linijų
reikšmingai sumažina PDSS2
mRNR lygiais buvo aptikta septynios (73 %) 11 GC ląstelių linijų, palyginti su ekspresijos lygio CCL-241 ląstelių (duomenys apie GC audinių yra aprašytas žemiau). Nebuvo aišku, skirtumas ekspresijos lygį tarp ląstelių linijų, gautų iš diferencijuoto ir nediferencijuotos GCS (1b pav.) Hypermethylation iš PDSS2
rengėjas buvo aptiktas MKN1, SC-2-NU, KATOIII, MKN45 ir NUGC3 ląstelių (1b pav.) Norėdami nustatyti, ar hypermethylation iš PDSS2
promotoriaus slopinamas transkripciją, iRNR raiška lygiai buvo palyginti prieš ir po gydymo ląsteles metilinimo inhibitorių 5-aza-DC. PDSS2
iRNR kiekis buvo atkurta ląstelių su Dauno reguliuojama PDSS2
išraiška kartu hypermethylation po 5-aza-DC gydymą (1b paveikslas) rodo, kad rengėjas hypermethylation slopinamas PDSS2
rašybą GC. Reprezentacinės chromatogramos sekos analizę, kad PDSS2
promotoriaus regione MKN28 (Visas metilinimo) ir NUGC4 (nėra metilinimas) ląstelių rodomi 1c pav.
Pacientų charakteristikos Viesbutis The pacientų populiacijos įtrauktos 179 vyrai ir 59 amžius nuo 20 iki 84 metų moterų (65,3 × 11,7 metų, reiškia × standartinis nuokrypis). Patologiškai, 139 ir 99 pacientai sirgo nediferencijuotos ir diferencijuotai GC, atitinkamai. Pacientai buvo suskirstyti į tris GC fenotipų juos išdėstant taip: nondiffuse, 54; difuzinis, 48; ir distalinės nondiffuse, 136. Pagal 7-osios redakcijos UICC klasifikavimo, 58, 40, 71 ir 69 pacientai etapais I, II, III ir IV, atitinkamai. Šimtas šešiasdešimt keturi pacientai etapuose I-III patyrė R0 rezekcijos. Šešiasdešimt iš 69 pacientų UICC IV etape buvo diagnozuotas IV stadijos dėl teigiamo peritoninės lavažo citologija, lokalizuota peritoninės metastazių ar tolimoje limfmazgių metastazių. Aštuoni iš pacientų IV stadijos turėjo sinchroninio kepenų metastazių, vienas turėjo plaučių metastazių, ir jie patyrė skrandžio pašalinimas siekiama kontroliuoti kraujavimą ar obstrukcija su maistu.
Expression lygių PDSS2 mRNR plaukimo ir baltymų chirurginiu rezekcijos audinių
reiškia išraiška lygis PDSS2
mRNR buvo mažesnis GC audinių palyginti su normaliomis gretimuose audiniuose (p
< 0,001); Tačiau nebuvo reikšmingo skirtumo PDSS2
iRNR ekspresijos lygį tarp pacientų, sergančių nediferencijuotos ar diferencijuotai GC (2a pav.) Sąvoka modelis PDSS2 buvo įvertintas naudojant IHC. Reprezentacinės atvejai su sumažintu PDSS2 dažymo GC audinių rodomi 2B pav. Apskritai, dažymo modeliai PDSS2 atitiko KRL-PGR duomenis. 2 pav išraiška analizė PDSS2 klinikinių mėginių. (A) vidutinis lygis PDSS2
mRNR GC audinių palyginti su atitinkamu normaliomis gretimuose audiniuose ir GC audiniuose tarp pacientų, sergančių nediferencijuotos GC ir diferencijuotai GC. (B), atstovas IHC duomenimis lyginant PDSS2 išraišką naviko ir gretimuose normaliuose gretimų audinių (padidintas 100 × 400 ×). N normalu greta audinių; T naviko audinyje.
Prognostiniai pasekmės PDSS2 mRNR ekspresijos lygį
iš PDSS2
mRNR ekspresijos GC audinių sumažėjo 76 (32%) iš 238 pacientų (mažiau nei pusė žodžio lygio aptinkamų atitinkamas normalus gretimus audinius). Liga konkrečių išgyvenamumas pacientams, sergantiems sumažėjo lygiai PDSS2
mRNR GCS buvo žymiai mažesnis, palyginti su tais, be (5 metų išgyvenimo, 36% ir 64%, atitinkamai, p
< 0,001, pav 3A). Sumažėjęs PDSS2
mRNR GCS buvo reikšmingai susijęs su angliavandenių antigeno (CA) 19-9 > 37 TV /ml ir limfmazgių metastazių (1 lentelė). Vienmatės analizės ligos būdingi išlikimo parodė, kad GC porūšį (proksimalinės nondiffuse arba pasklidųjų taršos), CA 19-9 > 37 TV /ml, naviko dydis (≥50 mm), PT4, nediferencijuota naviko, limfinės dalyvavimas, laivas invazija, invazinės augimas, limfmazgių metastazių teigiamas pilvaplėvės plovimas Citologija ir sumažėjęs PDSS2
iRNR išraišką GC audiniuose buvo reikšmingas prognostinis veiksniai nepageidaujamų rezultatų. identifikuoti daugiamatė analizė sumažėjo PDSS2
iRNR raiška kaip nepriklausomas prognostinis faktorius (rizikos santykis 1,95, 95% pasikliautinasis intervalas 1.22-3.09, p
= 0,005, 2 lentelė). Proporcinio pavojai prielaida į Cox modelis buvo įvertintas modeliai, įskaitant laiką-by-kovariantą sąveikos ir jokių reikšmingų pažeidimų buvo rasta modelio. 3 pav prognostinę reikšmę PDSS2 iRNR išraiškos pacientams, sergantiems GC. (A), ligos būdingi išlikimas pacientams, sergantiems sumažėjo PDSS2
iRNR GC audinio. (B), (C), ligos būdingi (B) ir pasikartojimo be (C), išlikimas tarp 168 pacientų, kuriems buvo atlikta R0 rezekcijos.
1 lentelė asociacija tarp ekspresijos lygį PDSS2 mRNR ir klinikos parametrų 238 pacientų
Kintamieji
DecreasedPDSS2
iRNR GC audinių (N)
kitos (n)
P
vertės
Amžius
0,408
< 65 metų
29
71
≥ 65 metų
47
91
Lytis
0.551
Vyras
59
120 pervežimas Panelių
17 Subtype
0,298
42
Proksimalinės nondiffuse
22
32
Difuzinė
14
33
Distalinė nondiffuse
40
96
karcinoembrioninius antigenas (ng /ml)
0.490
≤ 5
59
132
> 5
17
30
Angliavandeniai antigenui 19-9 (TV /ml)
0,015 *
≤ 37
55
139
> 37
21 23
Naviko dydis (mm)
0,104
< 50
29
80
≤ 50
47
82
Naviko gylis (UICC)
0,419
PT1
14
32
pt2
6
24
PT3
19
33
PT4
37
73
diferencijavimas
0.217
Diferencijuotas
36
63
neišrūšiuotos
40
99
limfinės dalyvavimas
0.201
Nėra
8
27
Pateikite
68
135
laivas invazija
0,535
Nėra
31
73
Pateikite
45
89
infiltracinė augimas tipas
0,443
Invazinės augimas
24
59
išsiplečiantis augimo
52
102
limfmazgių metastazės (UICC)
0,022 *
pN0
19
70
pN1
8
19
pN2
12
24
pn3
37
49
peritoninė plovimas citologija
0.306
Neigiama
57
131
Teigiamas
19
31
Tolima metastazės (UICC)
0,228
M0
50
119
M1
26
43
* statistiškai patikimas (p
< 0,05). GC, skrandžio vėžio; UICC, sąjunga Tarptautinės vėžio kontrolės.
2 lentelė prognostiniai faktoriai ligos būdingi išlikimo 238 pacientų
Kintamieji

N (%)
vienmatės

kintamųjų
Rizikos santykis

95% PI

P
vertę
rizikos veiksnių santykis
95% PI

P
vertė
amžius (≥65)
138 (58%)
1,04
0,67-1,61
0,843
Lytis (moteriška)
59 (25%)
1.29
0.79 - 2.05
0,301
Subtype (distalinės nondiffuse)
136 (57%)
0.43
0,28-0,67
< 0.001
0,64
0,40 - 1.01
0,056
karcinoembrioninius antigenas (> 5 ng /ml)
47 (20%)
1,48
0,86 - 2,42
0.149
Angliavandeniai antigenui 19-9 (> 37 TV /ml)
44 (18%)
1.98
1.17 - 3.20
0,012
1.23
0,71-2,06
0,445
naviko dydis (≥50 mm)
129 (54%)
2.86
1,78-4,80
< 0,001
1.40
0,83-2,42
0,211
naviko gylis (PT4, UICC)
110 (46%)
4.17
2.61 - 6,88
< 0,001
1.38
0,78-2,50
0,273
naviko diferenciacijos (nediferencijuotą)
139 (58%)
2,03
1.28 - 3.32
0,002
1.45
0.83 - 2,60 limfinės dalyvavimas
0,197
203 (85%)
6.31
2,36 - 25,8
< 0,001
1.45
0,45-6,50
0,559
laivų invazija
134 (56%)
2,65
1,66-4,37
< 0,001
1,75
1,07-2,97
0,026 *
invazinių augimo
83 (35%)
3.03
1.97 - 4,70
< 0,001
1.19
0,70-2,05
0.520
Limfmazgių metastazės
149 (63%)
7.02
3.70 - 15,1
< 0,001
1.38
0,56-3,81
0,503
peritoninė plovimas citologija (teigiamas)
50 (21%)
4.33
2.76 - 6.74
< 0,001
1,87
1,14-3,06
0,014 *
UICC etapas (III-IV)
140 (59%)
9,68
4,97-21,8
< 0,001
2,63
0,94-7,83
0,065
Sumažėjęs PDSS2
mRNR gCS
76 (32%)
2.18
1.40 - 3.37
< 0,001
1.91
1,19-3,04
0,008 *
* Statistiškai reikšmingas Dispersinės analizės. GC, skrandžio vėžio; PI, pasikliautinasis intervalas; UICC, sąjunga Tarptautinės vėžio kontrolės.
Iš 168 pacientų, kuriems buvo atlikta R0 rezekcijos, liga konkrečių išgyvenamumas buvo žymiai mažesnis tiems, sumažėjo PDSS2
iRNR išraišką GCS (N = 50), lyginant su tais, be (n = 118) (5-metų išgyvenimo, 50% ir 77%, atitinkamai, p
= 0,006, Fig.3B). Pacientai, kurių sumažėjo PDSS2
iRNR raiška GCS patyrę gerokai anksčiau recidyvų po operacijos, lyginant su tais, be (2 metų pasikartojimo be išgyvenimo, 64% ir 84%, atitinkamai, p
= 0,022, Fig.3C). Pradiniai pasikartojimo svetainės 43 recidyvuojanti pacientams, sergantiems sumažėjo PDSS2
iRNR raiška GCS buvo pilvaplėvės 21 (49%), kepenys 6 (14%), limfmazgiuose į 13 (30%) ir kiti (pvz plaučių ir kaulų) 3 pacientams. Kita vertus, tie iš 61 recidyvuojanti pacientams, be sumažėjo PDSS2
buvo pilvaplėvės 35 (57%), kepenų 10 (16%), limfmazgių iš 8 (13%) ir kiti, 8 pacientams. Pacientai, sergantys pogrupio analizė PDSS2 išraiška sumažėjo PDSS2
iRNR raiška GCS buvo tikėtina, kad mazgas atkryčio, nors jis nepasiekė statistinį reikšmingumą.
Pagal GC potipio
Vidurkis PDSS2
iRNR išraiška lygis buvo lygiaverčiai GC ir normalių gretimuose audiniuose (4a pav.) Be to, prognostinė vertė sumažėjo PDSS2
iRNR raiška GCS buvo panašus tarp trijų GC potipių (4b pav.) 4 pav pogrupis analizė GC potipių. (A) PDSS2
iRNR raiška lygis tarp trijų GC potipių tiek GC ir normalių gretimuose audiniuose. (B), palyginimas ligos būdingi išlikimo pacientų su ir be sumažėjo PDSS2
iRNR išraišką GCS kiekvienos GC potipio.
Diskusijos
PDSSs yra heterotetrameric fermentai sudaro padaliniai užkoduotus iki PDSS1
(10p12. 1) ir PDSS2
[10], [12]. PDSS veikla reikalauja tiek subvienetų [10], [14], [15]. Iš PDSS2
asociacija su GC buvo laikomas dėl savo chromosomų vietą (6q21), ir dėl jo nukenksminimas arba nuostolis iš tam tikrų piktybinių navikų [16], [26]. Čia mes parodome, kad PDSS2
iRNR buvo nevienodai išreikštas GC ląstelių linijų, o jo išraiška buvo slopinamas 73% ir 32% GC ląstelių linijų ir navikų audiniuose, atitinkamai. Mes nustatėme, hypermethylation iš PDSS2
promotoriaus iš penkių (45%) iš 11 GC ląstelių linijų žymiai sumažėjęs PDSS2
išraiška. Be to, PDSS2
transkripcijos buvo vėl po to, kai ląstelės buvo gydomi DNR metilinimo inhibitoriumi. Šie duomenys yra pirmasis mūsų žiniomis parodyti, kad rengėjas hypermethylation reguliuoja PDSS2
transkripciją. Tačiau PDSS2
išraiška sumažėjo kai GC ląstelių be hypermethylation. Kadangi chromosoma 6q yra dažna svetainė LOH GC [17], [26], [27], LOH gali reguliuoti PDSS2
išraišką, taip pat.
Buvo ataskaita rodo, kad buvo išreikšta PDSS2
ne sumažėjo arba neaptinkama raiškos nedaugeliui biopsijos GC pavyzdžių [18]. Šiame tyrime mes išanalizavo 238 chirurginių egzempliorių navikų ir atitinkamą nesusiję audinį įgyti daugiau įžvalgų klinikinė reikšmė PDSS2
raiškos GC. Atitikti analizės piktybinės melanomos ir plaučių vėžio [11], [12], dauguma pacientų su GC priglaudė lygis sumažėjo PDSS2
mRNR GC audinių, o vidutinis PDSS2
išraiška lygis buvo gerokai sumažėjo GC palyginti su normaliu gretimuose audiniuose. IHC buvo atliktas siekiant nustatyti, ar iRNR lygis atsispindi PDSS2
baltymo ekspresiją. Kadangi IHC rezultatai parodė, kad mRNR duomenys derinosi su baltymų lygio, vėlesni tyrimai buvo atliekami pagal iRNR duomenų, kurie yra labiau linkusios į kiekybinės analizės [7],
[23]. Sumažėjęs PDSS2 pervežimas iRNR raiška gCS buvo reikšmingai susijęs su padidėjusiu priešoperacinius CA19-9 lygius ir limfmazgių metastazių ir buvo identifikuojamas kaip savarankiškas prognostinis faktorius. Be to, pacientams, sergantiems sumažėjo PDSS2
iRNR išraišką GC audinio patirties gerokai anksčiau pasikartojimo po R0 rezekcijos. Neseniai, Chen ir kt., tyrė naviko slopina aktyvumą PDSS2
plaučių vėžiu [28]. Jie pranešė, kad priversti padidėjusią PDSS2
sukėlė didžiulį ląstelių žūtį per apoptozinių kelius ir smarkiai slopino kolonijos formavimo ir ten buvo atvirkštinė koreliacija tarp PDSS2
išraiška ir gelsolin išraiška, kuri yra žinoma, slopina apoptozę ir padidinti ląstelių invaziją ir metastazės [29], nors PDSS2 neturėjo įtakos vėžinių ląstelių jautrumą chemoterapiniais vaistais [28]. Tai navikas slopinančio mechanizmas PDSS2
gali būti taikomi GC taip pat.
Išraiška modelio PDSS2
mRNR ir jo prognostinės poveikio buvo panašus tarp trijų GC potipių (proksimalinio nondiffuse, difuzinis, ir distalinio nondiffuse) tai rodo, kad PDSS2
išraiška įtakoja visų GC tipų patogenezę. Shah ir kt. pranešė, kad trečdalis amplifikuotų genų, galbūt įskaitant PDSS2
, parodė, lygiavertis ekspresijos šabloną tarp trijų GC potipių [9].
GC yra vienas iš navikų su aukšto dažnio nukrypusiu nuo normos metilinimo ir ji dažnai eksponuoja CpG sala methylator fenotipas [30], [31]. Iš daugelio genų ekspresija yra slopinama CpG salos hypermethylation GC ląstelių, įskaitant tuos kodavimo naviko slopintuvai, ląstelinio ciklo reguliavimo, induktorių ir budelių apoptozės, baltymų, kurie skatina invazinių fenotipą ir DNR neatitikimas remontas fermentų [32]. Šie Epigenetiniai pakitimai gali tarnauti kaip biologinių žymenų, kad apšviesti didesnį metastazavusiu potencialą ir agresyvų naviko fenotipą [33], taip pat gydomąsias tikslus [34]. Todėl identifikavimas kitų genų, kurie reglamentuoja metilinimo GC ląstelių, greičiausiai, bus pagerinti GC valdymą
navikas slopinančią funkciją PDSS2
palaiko šių išvadų taip:. (1) sumažėjo išraišką iš PDSS2
buvo dažnai aptinkama GC audinių (2), vidutinis lygis PDSS2
išraiška buvo žymiai mažesnis GC audinių ir (3) išraiška PDSS2
buvo susijęs su anksti pasikartojimo ir po blogos prognozės sumažėjo. PDSS2
ekspresijos lygis biopsijos audinių gautas naudojant endoskopinis priežiūros pavyzdžius ar chirurginių egzempliorių gali būti naudinga prognozuojant anksti pasikartojimui ir prastos prognozės, kurios, greičiausiai, bus pagalbos pastangos sukurti efektyvesni gydymo strategijas.
Šis tyrimas buvo apribota jos pakankamai funkcinės analizės PDSS2
, trūksta kuris mišiniai išvadą, kad jis veikia kaip naviko slopintuvas GC. Tikimasi, tolesni tyrimai, įskaitant rūšyse analizės skrandžio kancerogenezėje ir funkcinės analizės išsiaiškinti molekulinius mechanizmus, sukeliančius biologiniam aktyvumui PDSS2
GC.
Išvada
Apibendrinant, mūsų išvados patvirtina išvadą, kad sąvoka spėjamas navikas slopintuvas genų PDSS2
reglamentuoja promotoriaus hypermethylation GC ląsteles ir nurodyti. Mūsų rezultatai rodo, jog sumažėjo išraiška PDSS2
mRNR gali atstovauti romaną biologinis už progresavimo ir pasikartojimo visų GC tipų.
Autorių indėlį
MK Ho FS DS, HT, Naudoti RH km atliekami eksperimentai ir duomenų analizė. DK, KT, SY, TF, GN, SS, MK, VD ir YK surinkti atvejus ir klinikinius duomenis. MK ir NN sumanyta ir sukurta tyrimą ir parengė pirminį rankraščio. YK prižiūri projektą.

• Skrandžio tonometrija vadovaujasi terapija intensyviosios slaugos pacientų: sisteminė apžvalga ir metaanalizė
• Iš citokeratinams naudingumo 7 ir 20 (CK7 /20) imunohistocheminis į trumpalaikių segmento Barrett stemplės skrandžio žarnyno metaplazijos skirtumo: Ar tai patikimas