Smanjena ekspresija prenyl difosfat sintetaze podjedinice 2 korelira sa smanjenom preživljavanje pacijenata s rakom želuca

Smanjena ekspresija prenyl difosfat sintetaze podjedinice 2 korelaciji sa smanjenim preživljavanje pacijenata s rakom želuca
apstraktne pregled pozadine
Identifikacija novih molekularnih biomarkera će poboljšati upravljanje bolesnika s karcinomom želuca (GC). Prenyl difosfat sintaze podjedinica 2 (PDSS2) potrebna je za Q10 biosinteze koenzima i djeluje kao supresor tumora; Međutim, uloga i regulatorni mehanizmi PDSS2
u GC nisu razumjeli. Cilj ovog istraživanja bio je utvrditi stanje izražavanja i regulatorne mehanizme PDSS2 pregled u GC.
Metode
povezanost između izražavanja i metilacije PDSS2 pregled su procijenjene pomoću GC stanične linije. Klinički značaj PDSS2 pregled izražavanja je određen primjenom 238 parova kirurški reseciranih želučanog tkiva s analize podskupina temelju GC podtipova. Pregled Rezultati
izražavanju PDSS2 pregled mRNA bila je smanjena u 73% GC stanice linija u usporedbi sa kontrolnom nekancerozni stanice. U PDSS2 pregled promotor hypermethylated u stanicama sa smanjenom PDSS2 pregled, izraza, a liječenje ovih stanica s inhibitorom metilacije aktiviran PDSS2 pregled izraz. GC tkiva izražava značajno niže srednje razine PDSS2 pregled mRNA u usporedbi sa susjednim normalnim tkivima (P pregled < 0,001). Ekspresija Uzorak PDSS2 proteina je u skladu s onom mRNA. Smanjenje PDSS2 pregled mRNA ekspresije u tkivima GC (manje od polovice je razina ekspresije otkrivenog u odgovarajućim uobičajenim susjedna tkiva) značajno korelira s povišenim razinama ugljikohidratnog antigen 19-9 (P
= 0,015), limfnih čvorova metastaza (P pregled = 0,022), a kraće preživljavanje recidiva bez nakon kurativne resekcije (P
= 0,022). Nadalje, multivarijatna analiza identificirani PDSS2 pregled mRNA ekspresije kao samostalni prognostički faktor (omjer rizika 1,95, 95% CI 1.22-3.09, p pregled = 0,005), a njegov izraz uzorak i prognostički značaj bili su slični između tri podtipa GC .
Zaključci
PDSS2 pregled kodira navodni supresor tumora, a mi smo pokazali da se ovdje njegov izraz bio je reguliran Hipermetilacija njegovog promotora u GC stanicama. Inhibicija PDSS2 pregled mRNA ekspresije može poslužiti kao novi biomarkera svih vrsta GC.
Ključne riječi
Rak želuca prenyl difosfat sintaze podjedinice 2 Expression metilacije Podtip Pozadina pregled Iako je incidencija karcinoma želuca (GC) opada u većini razvijenih zemalja, i dalje je jedan od najčešćih uzroka raka povezanih smrti u svijetu [1] - [3]. Odgovarajuće raslojavanje bolesnika je ključna aspekt individualiziranog liječenja, što dovodi do smanjenja smrtnosti od raka ove [4], [5]. Pregled Po svojoj epidemiologiji, patologije, i mjesto u tijelu, GC je prepoznata kao tri zasebna malignih bolesti nastaju u istom organu [6] - [8]. Shah et al. [9] predlaže uvjerljiv klasifikaciju GC prema histopatološke i anatomskim kriterijima kao što slijedi: (1) proksimalna nondiffuse GC gdje je tumor se uglavnom u želučanoj kardija dokaz prekursora žljezdanog displazija ili in situ karcinoma u prisutnosti kronične upale , obično bez atrofije; (2) difuzni GC, koji može biti smješten bilo gdje u želucu bez ikakvog gastritisa koji pokazuje potpuno difuzni uzorak infiltracije stanica sa slabo diferenciranom fenotipu; i (3) distalni nondiffuse GC, koji se nalazi uglavnom u distalnom trbuh dokaz kroničnog gastritisa koji pretežno diferencirane ili pokazuje crijevne fenotip. U ovom istraživanju, pokazali su da su tri podtipa GC razlikovati po njihovim profila genske ekspresije. Dakle, genetska raznolikost GC podtipova treba uzeti u obzir u studijama genetskih i epigenetičkim promjenama vezanim za želučane karcinogeneze i napredovanja.
Prenyl difosfat sintaze podjedinica 2 (PDSS2
) je identificiran u 2005. [10], a dokazi ukazuju da djeluje kao supresor tumora [11], [12]. PDSS2 pregled je potreban za sintezu koenzima Q10 (CoQ10) [13], [14], koji je sintetiziran u mitohondrijalnom unutarnje membrane i igra bitnu ulogu u mitohondrijalnom respiratornom lancu, pirimidinskih nukleozida biosinteze, i modulacije apoptoze [15]. PDSS2 pregled boravi u kromosomskom lokusu 6q16.3-21, site čestih mikrosatelitne DNA nestabilnost i gubitak heterozigotnosti (LOH) u GC [16], [17], s podrškom za svoju ulogu kao supresor tumora kod želučanih epitelnim stanicama , Štoviše, PDSS2 pregled može suzbiti razvoj malignih melanoma i karcinoma pluća [11], [12]. Štoviše, Chen et al. izvijestili da primjenjuju nadekspresijom PDSS2 pregled dovodi do apoptoze u staničnoj liniji GC uzrokujući prekid staničnog ciklusa u fazi G0 /G1 [18]. Ta izvješća nas je da se hipoteza da PDSS2 pregled je potencijalni GC vezanih gena i kandidat za novog klinički relevantne prognostički biljeg GC.
U ovoj studiji, izražavanja i status metilacije PDSS2 Netlogu u GC su određene procijeniti klinički značaj i regulatorne mehanizme PDSS2 pregled izražavanja u GC. Naši rezultati pokazuju da PDSS2 pregled izraz pruža potencijalnu kliničku biomarker napredovanje i recidiva GC.
Materijal i metode pregled etike pregled Ova studija suobličeni etičkim smjernicama Deklaracije Svjetskog liječničkog zbora u Helsinkiju -Ethical Načela za medicinska istraživanja na ljudima, te je odobren od strane Institutional Review Board Sveučilišta Nagoya, Japan. Pismeni informirani pristanak za korištenje kliničkih uzoraka i podataka, kako to zahtijeva institucionalni pregled odbor, koji je dobiven od svih pacijenata. [4] prikupljanja pregled uzorka
staničnim linijama Jedanaest GC (H111, KATOIII, MKN1, MKN28, MKN45 , MKN74, NUGC2, NUGC3, NUGC4, SC-2-NU i SC-6-LCK) i CCL-241 (stanična linija nekancerozni izveden iz tankog crijeva) dobivene su od American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA) ili Sveučilište Tohoku, Japan. Stanična linije GC su kultivirane na 37 ° C u RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) s dodatkom 10% fetalnog goveđeg seruma u atmosferi s 5% ugljičnog 2. Za CCL-241, 30 ng /ml za epidermalni faktor rasta (Sigma-Aldrich) je dodan u medij. Primarni GC tkiva i odgovarajuće normalno susjedna tkiva su prikupljeni od 238 pacijenata koji su imali operaciju želučanog resekcija za GC na Nagoya University Hospital između 2001. i 2012. Pacijenti koji su primili terapiju neoadjuvansima su isključeni jer je bilo teško dobiti stanice raka iz ožiljcima tkiva. Uzorci su bili klasificirani histološki korištenjem 7. izdanje Unije za međunarodnu kontrolu raka (UICC) klasifikacije [19]. Relevantni kliničkopatološkim parametri su stekli iz medicinske dokumentacije. Za procjenu da li je razina ekspresije PDSS2
korelaciji s tumora fenotipa, bolesnici su svrstani u tri skupine prema definiciji GC podtipova prema kriterijima Shah i dr. [9] kako slijedi: proksimalni nondiffuse, difuzna i distalnog tipa nondiffuse. Od 2006. godine, adjuvantna kemoterapija pomoću S-1 (oralni fluorirane pirimidina) se primjenjuje na sve UICC fazi II-III bolesnika s GC osim kontraindicirana pacijenta stanje [20]. Pacijenti su praćeni najmanje jednom u 3 mjeseca za 2 godine nakon operacije, a zatim svakih 6 mjeseci za 5 godina ili do smrti. Fizikalni pregled, laboratorijske pretrage, te poboljšana kompjutorizirana tomografija (prsa i trbušne šupljine) obavljena su na svakom posjetu. Kemoterapija za pacijente s udaljenim metastazama i nakon ponovne određena je odluci liječnika. Uzorci tkiva su pregled odmah zamrznute u tekućem dušiku i pohranjeni na -80 ° C. uzorci tumora bez nekrotične područjima (oko 5 mm 2) ekstrahira se bruto promatranje i samo uzoraka potvrdila da sadrže više od 80% tumorskih komponente H &E bojenje su uključeni u ovu studiju. Odgovarajući normalni susjednih uzoraka želučane sluznice + 5 ° cm od ruba tumora dobiveni su iz istog bolesnika [21]
kvantitativnih realnom vremenu reverznom transkripcijom lančane reakcije polimeraze (QRT-PCR)
Ukupno RNA. (10 ug po uzorku) su izolirane iz staničnih linija 11 GC, CCL-241, 238 primarne GC tkiva i odgovarajući normalnih susjedna tkiva je korišten za dobivanje cDNK koja je amplificirana upotrebom specifičnih vodećih sekvencija PCR (dodatne datoteke 1: Tablica S1). detekcija u realnom vremenu SYBR® Green intenziteta fluorescencije je provedeno pomoću ABI StepOnePlus Real-time PCR System (tnom City, CA, USA). Izraz GAPDH pregled mRNA kvantitativno je u svakom uzorku za standardizaciju. QRT-PCR reakcije u svakom uzorku provedena su u triplikatu. Razina ekspresije svakog uzorka prikazana kao vrijednosti PDSS2
produkt amplifikacije podijeljena onom GAPDH pregled [22]. PDSS2 pregled mRNA ekspresija je definiran kao smanjena u GC tkiva kada je nivo je manje od polovice one od odgovarajućem normalnom susjedna tkiva, pregled Analiza promotorske regije PDSS2
nukleotidnu sekvencu PDSS2
promotorska regija je analiziran da se odredi prisutnost ili odsutnost CpG otoka definirani kako slijedi: najmanje 200 bp područje DNA s visokim sadržajem GC (> 50%) i uočena omjer CpG /Očekivani CpG ≥0.6 [23] , Koristili smo CpG Otok Searcher softver (http:.. //cpgislands USC edu /) za određivanje lokacije CpG otoka [24]
Metilacija specifičan PCR (MSP) i bisulfit analiza sekvenci
. PDSS2 pregled posjeduje otok CpG blizini njegove promotorske regije, a mi smo pretpostavili da je nenormalna metilacije je odgovoran za regulaciju transkripcije PDSS2 pregled u GC. DNA uzorci iz 11 GC staničnim linijama liječenih bisulfit podvrgnuti su MSP i sekvenca nukleotida analiza [25]. Sekvencijama koriste za MSP i bisulfita sekvenciranje navedene su u dodatne datoteke 1: Tablica S1
5-aza-2'-deoksicitidin (5-aza-DC) tretman pregled je procijeniti odnos promotora Hipermetilacija na PDSS2. pregled transkripcije, GC stanice (1.5 x 10 6) tretirane su s 5-aza-dC (Sigma-Aldrich) da inhibiraju DNA metilacije i kultivirane tijekom 6 dana sa srednjim promjena na dane 1, 3 i 5 ° C. RNA je ekstrahirana i RT-PCR je izveden kao što je opisano [7].
imunohistokemija (IHH)
IHC analize lokalizaciju PDSS2 provedena je pomoću mišje monoklonalno antitijelo protiv PDSS2 (ab119768, Abcam, Cambridge, Velika Britanija ) razrijeđen 1: 150 u razrjeđivačem antitijela (Dako, Glostrup, Danska) kako bi istražili 30 reprezentativnih formalinom fiksne i parafinske ugrađeni dijelovi dobro očuvani GC tkiva prethodno [3] je opisan. Bojanje obrasci su uspoređene između GCS i odgovarajućim normalnim susjedna tkiva. Da bi se izbjegla subjektivnost, uzorci su nasumično i kodirani prije analize od strane dva neovisna promatrača koji su bili svjesni stanja uzoraka. Svaki promatrač ocjenjuje sve primjerke barem dva puta kako bi se smanjili unutar promatrača varijacije [7]. Pregled Procjena kliničke značajnosti PDSS2 izražavanja
korelacije između obrascu PDSS2 pregled mRNA ekspresije i kliničkopatološkim parametara su procijenjeni prema razlike između tri podvrste GC. Analiza podskupina preživljavanja prema GC podtip je provedeno kako bi se utvrdilo utjecaj PDSS2 pregled izrazom na ishode pacijenata.
Statistička analiza pregled relativne razine ekspresije mRNA (PDSS2 /GAPDH
) između GC i susjedstvu normalna tkiva su analizirani korištenjem Mann-Whitney u
test. Χ pregled 2 test je korišten za analizu značaj povezanosti između izraza i metilacije status PDSS2 Netlogu i kliničkopatološkim parametara. Specifičan za bolest i bolesti bez opstanak stope su izračunate pomoću Kaplan-Meier metodi, a razlika u krivuljama preživljavanja je analiziran pomoću log-rank testa. Izvršili smo multivarijatne regresijske analize za otkrivanje prognostički čimbenici pomoću Cox proporcionalnih rizika model i varijable s P Netlogu < 0,05 ušao u konačni model. Sve statističke analize provedene su pomoću JMP 10 programa (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). Vrijednost P Netlogu < 0,05 smatrana je statistički značajna. Pregled Rezultati
Identifikacija CpG otoka u PDSS2 promotora pregled jedan od otoka CpG je identificiran u PDSS2 pregled promotorske regije pomoću CpG Island tragač. Svojstva otoka CpG su kako slijedi: 1655 bp, 55,9% GC i 0.70 uočena CpG /očekivani odnos CpG (Slika 1A). Stoga, pretpostavili smo da Hipermetilacija od CpG otoka regulira ekspresiju PDSS2 pregled u GC. Slika 1 Metilacija analize PDSS2 u GC stanicama. (A) CpG otok označen plavom linijom usmjeren je na PDSS2 pregled iniciranje transkripcije se proteže uzvodno u promotorske regije. (B) Bar dijagrami pokazuju PDSS2 pregled razinu ekspresije mRNA u CCL-241 (kontrola nekancerozne stanice) i stanične linije GC prije ili poslije 5-aza-dC liječenja. Metilacija status PDSS2 pregled, promotor je određen primjenom MSP, a rezultati su zatvoreni u kutiji. M, metilnog; pM, djelomično metiliranog; U, nemetiliran. (C) Reprezentativni bisulfita analizom sekvence. Svi CpG mjesta u KATOIII stanice su zadržani kao CG i onih MKN74 su pretvoreni u TG.
Izraz PDSS2 mRNA i status metilacija u staničnim linijama GC
značajno smanjenje PDSS2 pregled razine mRNA detektirana u sedam (73 %) spoja 11 GC stanicama u usporedbi s razinom ekspresije u CCL-241 stanice (podaci za GC tkiva opisani su u nastavku). Nema vidljiva razlika u razinama ekspresije između staničnih linija izvedenih iz diferencirane i nediferencirani GCS (Slika 1B). Hipermetilacija ovog PDSS2 pregled promotora je otkriven u MKN1, SC-2-NU, KATOIII, MKN45 i NUGC3 stanica (slika 1B). Da bi se odredilo da li Hipermetilacija od PDSS2 pregled promotora inhibiran transkripciju mRNA razine ekspresije, dok su prije i nakon tretiranja stanica sa inhibitorom metilacije 5-aza-DC. PDSS2 pregled razine mRNA su obnovljeni u stanicama s Downovim regulirano PDSS2 pregled izraz popratni Hipermetilacija nakon 5-aza-DC tretmana (Slika 1B), što ukazuje da promotor Hipermetilacija inhibiran PDSS2 pregled transkripciju u GC. Reprezentativni kromatogrami analiza sekvence PDSS2 pregled promotorske regije u MKN28 (kompletna metilacije) i NUGC4 (odsutnost metilacije) stanica prikazane su na Slici 1C. Pregled pacijenata karakteristike
populaciji bolesnika uključeno 179 muškaraca i 59 ženke u dobi od 20 do 84 godina (65,3 × 11,7 godina, znači × standardna devijacija). Patološki, 139 i 99 bolesnika s nediferencirane i diferencirani GC dijagnoza, respektivno. Pacijenti su klasificirani u tri GC fenotipova kako slijedi: nondiffuse, 54; difuzna, 48; i distalni nondiffuse, 136. Prema 7. izdanje klasifikacije UICC, 58, 40, 71 i 69 su pacijenti u fazama I, II, III i IV, respektivno. Stotinu šezdeset i četiri bolesnika u stadijima I-III doživio R0 resekcija. Šezdeset od 69 pacijenata u UICC stadiju IV je dijagnosticirano kao stadiju IV, zbog pozitivnog peritonejsku ispiranje citologije, lokaliziran peritonejsku metastaza ili udaljenih metastaza limfnog čvora. Osam pacijenata u stadiju IV imala sinkroni metastaze jetre, jedan je imao metastaze pluća, a oni su podvrgnuti gastrektomije cilj kontrola krvarenja ili zapreke za prolaz hrane. Pregled razine ekspresije PDSS2 mRNA i proteina u kirurški reseciranog tkiva
Srednja razina ekspresije PDSS2 pregled mRNA bila je niža u usporedbi s GC tkiva normalnih susjedna tkiva (P pregled < 0,001); Međutim, nije bilo značajne razlike u PDSS2 pregled razinama ekspresije mRNA između bolesnika s nediferencirane ili diferenciranog GC (slika 2a). Način ekspresije PDSS2 je procijenjena pomoću IHC. Reprezentativne slučajevima sa smanjenom PDSS2 bojanjem GC tkiva prikazane su na Slici 2B. Sve u svemu, bojanja obrasci PDSS2 su bili u skladu s podacima QRT-PCR. Slika 2 Expression analize PDSS2 u kliničkim uzorcima. (A) Srednja razina PDSS2 pregled mRNA u GC tkiva u usporedbi s odgovarajućim normalnim susjedna tkiva i GC tkiva između bolesnika s nediferencirane GC i diferencirane GC. (B) predstavnik IHC podaci uspoređuju PDSS2 izraz u tumoru i susjedna normalnog susjedna tkiva (uvećano 100 i 400 puta). N, normalno susjedna tkiva; T, tumorsko tkivo. Pregled Prognostički implikacije PDSS2 mRNA ekspresije
izraz PDSS2 pregled mRNA u GC tkiva smanjena je u 76 (32%) od 238 pacijenata (manje od pola razini ekspresije otkrivenih u odgovarajući normalna susjedna tkiva). Bolest specifična stopa preživljavanja pacijenata sa smanjenom količinom PDSS2 pregled mRNA u GCS bila je značajno niža u usporedbi s onima bez (stopa 5-godišnjeg preživljavanja, 36% i 64%, p Netlogu < 0,001, Slika 3A). Smanjena razina PDSS2 pregled mRNA u GCS su značajno povezane s ugljikohidratima antigena (CA) 19-9 > 37 IU /ml, a limfni čvorovi metastaza (Tablica 1). Jednosmjerna analiza preživljenja bez znakova bolesti specifične pokazala da je GC podtip (proksimalni nondiffuse ili difuznim), CA 19-9 > 37 IU /ml, veličina tumora (≥50 mm), pT4, nediferencirani tumora, limfni uključenost, invazija posuda, invazivni rasta, limfni čvor metastaza, pozitivan peritonealni ispirak citologiju i smanjeni PDSS2 pregled mRNA ekspresiju u GC tkivima bile su značajne prognostic faktori štetnim ishodima. Multivarijatna analiza identificirani smanjio PDSS2 pregled mRNA ekspresije kao samostalni prognostički faktor (omjer rizika 1,95, 95% CI 1.22-3.09, p = 0,005 pregled, tablica 2). Proporcionalni opasnosti pretpostavka u Cox modelu određuje se pomoću modela uključujući i vrijeme-po-kovarijan interakcija i bez značajnih kršenja pronađeni su u modelu. Slika 3 prognostički implikacije izraza PDSS2 mRNA u bolesnika s GC. (A) bolest-specifične preživljavanje pacijenata sa smanjenom PDSS2 pregled mRNA u GC tkiva. (B) (C) bolesti specifične (B) i ponavljanje bez (C) preživljavanje među 168 pacijenata koji su se podvrgnuli R0 resekcija. Pregled Tablica 1. Povezanost između razine ekspresije od PDSS2 mRNA i kliničkopatološkim parametrima 238 pacijenata
varijable
DecreasedPDSS2 pregled mRNA u GC tkiva (n)
ostalo (n)
P pregled vrijednosti
Age pregled 0.408
< 65 godina pregled 29 pregled, 71 pregled ≥ 65 godina pregled 47 pregled, 91 pregled Spol pregled 0,551 pregled muški pregled 59
120
Ženski
17 pregled, 42 pregled Podtip pregled 0,298 pregled aproksimalnim nondiffuse pregled 22 pregled, 32 pregled difuznu pregled 14 pregled, 33 pregled, distalni nondiffuse pregled 40
96 pregled karcinoembrijski antigen (ng /ml) pregled 0,490 pregled ≤ 5
59 pregled 132 izvoznici > 5. pregled 17 pregled, 30 pregled, ugljikohidratni antigen 19-9 (IU /mL)
0.015 * pregled ≤ 37 pregled, 55 pregled, 139 izvoznici > 37 pregled, 21 pregled, 23 pregled, veličina tumora (mm)
0.104 izvoznici < 50 pregled, 29 pregled, 80 pregled ≤ 50 pregled, 47 pregled, 82 pregled tumora dubina (UICC)
0,419 pregled pT1
14 pregled, 32
PT2 pregled 6
24 pregled pT3
19 pregled, 33 pregled pT4
37 pregled, 73 pregled Diferencijacija
0,217 pregled diferenciranog pregled 36
63 pregled nediferencirane
40 pregled, 99 pregled angažman Limfna pregled 0,201 pregled Odsutni pregled 8
27 pregled predstaviti pregled 68 pregled 135
Brod invazija
0,535 pregled Odsutni pregled 31 pregled, 73 pregled predstaviti pregled 45 pregled, 89 pregled Invazivni tipa rasta pregled 0,443 pregled Invazivne rast pregled 24
59 pregled ekspanzivnog razvoja pregled, 52 pregled 102 pregled limfnih čvorova metastaze (UICC) pregled 0.022 * pregled PN0 pregled, 19 pregled, 70 pregled pN1 pregled 8 pregled, 19 pregled pN2 pregled, 12 pregled, 24 pregled PN3 pregled, 37 pregled, 49 pregled Peritonejska citologija ispiranje pregled 0,306 pregled Negativna pregled 57 pregled 131 pregled Pozitivan pregled 19 pregled, 31 pregled, udaljene metastaze (UICC) pregled 0,228 pregled M0
50 pregled 119 pregled M1
26 pregled 43
* statistički značajna (P izvoznici < 0,05). GC, rak želuca; UICC, Unija za međunarodnu kontrolu raka.
Tablica 2. Prognostički faktori za opstanak bolesti specifične za 238 pacijenata
varijabli
n (%)
Jednosmjerna
multivarijabilno
omjer rizika
95% CI
P vrijednost
omjer rizika
95% CI pregled
P pregled vrijednost
Dob (≥65) pregled, 138 (58%)
1,04 pregled 0,67-1,61 pregled 0,843 pregled Spol (ženski) pregled 59 (25%)
1,29
0,79 - 2,05 pregled 0,301 pregled Podtip (distalno nondiffuse) pregled, 136 (57%) pregled, 0,43 pregled 0,28 do 0,67 izvoznici < 0.001
0,64 pregled 0,40-1,01 pregled 0,056 pregled karcinoembrijski antigen (> 5 ng /ml)
47 (20%)
1,48
0,86 - 2,42 pregled 0,149 pregled ugljikohidratni antigen 19-9 (> 37 IU /ml)
44 (18%)
1,98 pregled 1,17 - 3,20 pregled 0,012
1,23 pregled 0,71-2,06
0,445 pregled veličina tumora (≥50 mm) pregled, 129 (54%) pregled, 2,86 pregled 1,78-4,80 izvoznici < 0,001 pregled 1,40 pregled 0,83-2,42 pregled 0.211 pregled tumora dubina (pT4, UICC) pregled, 110 (46%)
4.17
2,61 - 6,88 izvoznici < 0,001 pregled 1,38 pregled 0,78-2,50 pregled 0.273
Tumor diferencijacije (nediferencirani) pregled, 139 (58%)
2,03
1.28 - 3.32 pregled 0.002
1,45 pregled 0,83-2,60 pregled 0,197 pregled Limfna uključenost pregled 203 (85%)
6,31
2,36 - 25,8 izvoznici < 0,001 pregled 1,45 pregled 0,45-6,50 pregled 0,559 pregled plovila invazija
134 (56%)
2,65 pregled 1,66-4,37 izvoznici < 0,001 pregled 1,75 pregled 1,07-2,97 pregled 0,026 * pregled invazivan rast pregled, 83 (35%)
3,03
1,97 - 4,70 izvoznici < 0,001 pregled 1,19 pregled 0,70-2,05 pregled 0,520 pregled limfnih čvorova metastaze pregled 149 (63%)
7,02 pregled 3,70-15,1 izvoznici <0,001 pregled 1,38 pregled 0,56-3,81 pregled 0,503 pregled Peritonejska ispiranje citologija (pozitivno)
50 (21%)
4.33
2,76 - 6,74 izvoznici < 0,001
1,87 pregled 1,14-3,06 pregled 0,014 * pregled UICC stupanj (III-IV) pregled, 140 (59%) pregled, 9,68 pregled 4,97-21,8 izvoznici < 0.001
2,63 pregled 0,94-7,83 pregled 0,065 pregled Smanjena PDSS2 pregled mRNA u GCS pregled, 76 (32%)
2,18
1,40 - 3,37 izvoznici < 0.001
1.91 pregled 1,19-3,04 pregled 0,008 * pregled * statistički značajna u multivarijatne analize. GC, rak želuca; CI, interval povjerenja; UICC, Unija za međunarodnu kontrolu raka. Pregled Od 168 pacijenata koji su se podvrgnuli R0 resekcija, stopa preživljenja bez znakova bolesti specifične bila je značajno niža kod onih sa smanjenom PDSS2 pregled mRNA ekspresije u GCS (n = 50) u usporedbi s onima koji su bez (n = 118) (5-godišnje preživljavanje, 50% i 77%, respektivno, P pregled = 0.006, slika 3B). Bolesnici sa smanjenom PDSS2 pregled mRNA u GCS osjetili su znatno ranije ponavljanje nakon operacije u usporedbi s onima koji su bez (2-godišnje recidiva bez preživljavanja, 64% i 84%, respektivno, P pregled = 0,022, Slika 3C). Početne recidiva mjesta od 43 recidivirajuće bolesnika sa smanjenom PDSS2 pregled mRNA u GCS su peritonejsku u 21 (49%), jetra je u 6 (14%), limfnog čvora u 13 (30%) i drugih (npr pluća i kosti) u 3 pacijenta. S druge strane, oni 61 relaps pacijenata bez smanjen PDSS2 pregled bili peritonealni u 35 (57%), jetre u 10 (16%), u limfni čvor 8 (13%), a drugi u 8 pacijenata. Bolesnici sa smanjenom PDSS2 pregled mRNA u GCS su vjerojatno da će imati čvora recidiv, iako to nije dosegla statističku značajnost. Pregled podskupina analizu PDSS2 izražavanja prema GC podtip pregled Mean PDSS2 pregled mRNA ekspresije razine su ekvivalentni u GC i normalnim susjedna tkiva (slika 4a). Isto tako, prognostička vrijednost smanjena PDSS2 pregled mRNA u GCS bio usporediv među tri GC podvrste (slika 4b). Slika 4 Analiza podskupina GC podtipova. (A) PDSS2 pregled mRNA razine ekspresije između tri GC podvrste kako u GC i normalnim susjedna tkiva. (B) Usporedba opstanak bolesti specifične bolesnika sa i bez smanjio PDSS2 pregled mRNA ekspresije u GCS svakog GC podtipa. Pregled Rasprava pregled PDSSs su heterotetramerski enzimi koji sadrže podjedinice koje kodira PDSS1 pregled (10p12. 1) i PDSS2 pregled [10], [12]. PDSS aktivnost zahtijeva obje podjedinice [10], [14], [15]. Udruga PDSS2 Netlogu sa GC smatralo zbog kromosomske mjestu (6q21), a zbog svoje inaktivacije ili gubitak iz određenih malignih bolesti [16], [26]. Ovdje pokazujemo da PDSS2 pregled mRNA heterogeno je izražen u GC stanicama, a ekspresija je spriječeno u 73% i 32% GC stanicama i tumorskim tkivima, respektivno. Otkrili smo Hipermetilacija od PDSS2 pregled promotor u pet (45%) staničnim linijama 11 GC sa znatno smanjena razina PDSS2 pregled izražavanja. Nadalje, PDSS2 pregled transkripcija aktivira nakon stanice su tretirane s inhibitorom metilacije DNA. Ovi rezultati su prvi našim saznanjima pokazuju da promotor Hipermetilacija regulira PDSS2 pregled transkripciju. Međutim, PDSS2 pregled, izraz je smanjen u nekim GC stanicama bez Hipermetilacija. Zbog kromosom 6q je čest mjesto Loh u GC [17], [26], [27], LOH mogu regulirati PDSS2 pregled izraz, kao dobro.
Došlo je izvješće pokazuje da PDSS2 pregled je izražena na smanjenom ili nemjerljivom izražavanja u malom broju u uzorku biopsije GC [18]. U ovoj studiji analizirali smo 238 kirurških uzoraka tumora i odgovarajući uninvolved tkivo steći bolji uvid u kliničkom značaju PDSS2 pregled izražavanja u GC. U skladu s analizama malignog melanoma i raka pluća [11], [12], većina pacijenata s GC gajili smanjenu razinu PDSS2 pregled mRNA u GC tkiva, a srednja PDSS2 pregled razina ekspresije bila je znatno smanjena u odnosu GC s normalnim susjedna tkiva. IHC je provedeno kako bi se utvrdilo je li razina mRNA ogleda PDSS2 pregled ekspresije proteina. Jer su rezultati pokazali da IHC podaci mRNA bile u skladu sa razini proteina, naknadne analize su provedene u skladu s podacima mRNA, koji su pogodniji za kvantitativnu analizu [7], [23]. Pregled Smanjenje PDSS2
mRNA u GCS je značajno povezana s povišenim razinama preoperativna CA19-9 i limfnih čvorova metastaza i identificiran je kao nezavisni prognostički čimbenik. Osim toga, pacijenti s smanjen PDSS2 pregled mRNA ekspresije u GC tkivu doživjeli znatno ranije recidiva nakon R0 resekcije. Nedavno, Chen et al. istraživali djelovanje tumora supresije od PDSS2 Netlogu kod raka pluća [28]. Oni su izvijestili da je prisiljen prekomjerna ekspresija PDSS2 Netlogu dovelo do teških smrt stanica putem apoptoze i formiranje značajno inhibiraju kolonija i tu je inverzna korelacija između PDSS2 pregled izražavanja i gelsolina izražavanja, koje je poznato da inhibira apoptozu i poboljšati invazije stanica i metastaze [29], iako PDSS2 nije utjecala na osjetljivost stanica raka na kemoterapijskih lijekova [28]. Ovaj tumor je ograničavajući mehanizam PDSS2 pregled može se primijeniti na GC, kao dobro.
Način ekspresije PDSS2 pregled mRNA i njegovu prognostički utjecaj bile su slične među tri podvrste GC (proksimalni nondiffuse, difuzna, a distalni nondiffuse) , što znači da PDSS2 pregled izraz utječe na patogenezu svih vrsta GC. Shah et al. izvijestio je da je jedna trećina pojačanih gena, vjerojatno uključujući PDSS2 Netlogu pokazali ekvivalentni izraz uzorak među tri GC podtipova [9] pregled. GC je jedan od tumora s visokom učestalošću abcrantnog metilacije, a to se često pokazuje CpG otok methylator fenotip [30], [31]. Izraz velikog broja gena suprimira CpG otoku Hipermetilacija u GC stanicama, uključujući one koji kodiraju tumorskih potiskivača, regulatora staničnog ciklusa, koji induciraju i krvnici apoptoze, proteina koji potiču invazivnu fenotip i sparenih popravak enzima [32]. Ove Epigenetske promjene mogu poslužiti kao biomarkeri koji osvjetljavaju povećanu metastatski potencijal i agresivnog tumora fenotip [33], kao i terapijske ciljeve [34]. Stoga, identifikacija drugih gena koji su regulirani metilacije u GC stanicama vjerojatno će poboljšati upravljanje GC
tumor supresijski funkciju PDSS2 pregled su podržani od strane ovih nalaza na sljedeći način: (1). Smanjena ekspresija PDSS2 pregled je često otkriven u GC tkiva, (2) srednja razina PDSS2 pregled izražavanja bila je značajno niža u GC tkiva, te (3) smanjena ekspresija PDSS2 Netlogu bio je povezan s početkom recidiva i naknadne lošu prognozu. PDSS2 pregled razine ekspresije u biopsija tkiva dobiveni pomoću uzoraka endoskopska nadzora ili u kirurških uzoraka može biti korisna za predviđanje ranog recidiva i lošu prognozu, što će vjerojatno napori pomoći da dizajn učinkovitijih terapijske strategije.
Ovog istraživanja bio je ograničen svojim nedostatak dovoljnog funkcionalne analize PDSS2 Netlogu koja ćudi zaključka da djeluje kao supresor tumora u GC. Daljnje studije uključujući stazi analize u želučanom karcinogeneze i funkcionalne analize očekuju se razjasniti molekularne mehanizme koji su dio biološke aktivnosti PDSS2 pregled u GC. Pregled Zaključak
U zaključku, naši rezultati podupiru zaključak da je izraz od potencijalni tumor supresorski gen PDSS2 pregled je regulirano promotora Hipermetilacija u GC stanicama i navesti. Naši rezultati pokazuju nadalje da je smanjena ekspresija PDSS2 pregled mRNA može predstavljati novi biomarker za napredovanje i povratak svih vrsta GC. Doprinose
autorovih pregled MK, HO, FS, DS, HT, RH i KM izvode eksperimenti i analize podataka. DK, CT, SY, TF, GN, HS, MK, MF i YK prikupljaju slučajeva i kliničke podatke. MK i SN zamišljen i dizajniran studiju, a izradio početnu rukopis. YK nadzirao projekt. Svi autori pridonijelo konačnom rukopisu.

• Želučani Tonometrija vođena terapija u bolesnika kritične skrbi: sustavni pregled i meta-analysis
• Korisnost Citokeratini 7 i 20 (CK7 /20) imunohistokemijski u razlici od kratkog segmenta Barrett jednjak od želuca intestinalne metaplazije: Je li to pouzdan