A segédprogram a citokeratin 7 és 20 (CK7 /20) immunhisztokémiai a különbséget a rövid szegmens Barrett oesophagus gyomor- bélrendszeri metaplasiaként Vajon megbízható-e?

hasznosságát citokeratin 7 és 20 (CK7 /20) immunhisztokémiai a különbséget a rövid -segment Barrett oesophagus gyomor- bélrendszeri metaplasiaként Vajon megbízható? katalógusa Abstract katalógusa Háttér katalógusa a cél a jelenlegi korrelatív immunhisztokémiai vizsgálat, hogy értékelje a hasznosságát citokeratin (CK7 és CK20) kifejezést a diagnózis rövid -segment Barrett oesophagus, különösen annak hatékonyságát a differenciáló Barrett nyálkahártya intestinalis metaplasia cardia és corpus. katalógusa módszerek katalógusa két csoportja endoszkópos biopsziás mintákat vizsgáltak, köztük 20 endoszkópos biopsziás mintákat rövid szegmens Barrett oesophagus ( a csoport) és azonos számú mutató Helicobacter pylori
kapcsolódó intestinalis metaplasia cardia és corpus (B csoport). Minden vizsgáltuk immunhisztokémiai módszerrel a szabványos ABC módszer CK7 és CK20 kifejezést. Fisher-féle egzakt tesztet alkalmaztunk statisztikai elemzése Barrett CK7 /20 és a gyomor CK7 /20 minták az egyes csoportok között. Katalógusa Eredmények katalógusa A tervezett minta reaktivitás Barrett nyálkahártya (CK7: erős diffúz pozitivitás felületes és mély mirigyek; CK20: pozitivitás a felszíni hám és felszíni mirigyek) volt látható 2 esetben Group a példányok. A várható gyomor minta (CK7: foltos immunhisztokémiai változó bevonásával mély mirigyek CK20: foltos immunfestésével felületes és mély mirigyek hiányos intestinalis metaplasia /hiánya CK7 immunreakcióra erős CK20 festés felületes és mély mirigyek teljes intesztinális metaplasia) volt látható 8 esetben a B-csoport példányok. A megfelelő érzékenység és fals negativitást értékeit CK7 /20 festéssel Barrett minta a Group A volt 10% és 90% volt. Ezek az értékek a gyomor-minta a B csoportban voltak, 40% és 60% volt. A specificitást és hamis-pozitivitás értékei mindkét minták voltak azonos (100% és 0% volt). Nem volt statisztikailag szignifikáns különbség a Barrett minta a két csoport között (p
= 0,487), míg a megfigyelés a gyomor minta szignifikánsan nagyobb volt a B csoport, mint az A csoportban (p
= 0,02).
Következtetések katalógusa Arra a következtetésre jutottunk, hogy ezek feltételezték, és a közelmúltban alkalmazott diagnosztikus kritériumok bevonásával CK7 és CK20 immunreaktivitás nem megbízhatóak megkülönböztetésére rövid szegmens Barrett oesophagus intestinalis metaplasia látható módon Cardiatumorban és corpus. katalógusa Háttér katalógusa Barrett oesophagus ( BE) van társítva fokozott a nyelőcső adenokarcinóma, rosszindulatú daganat, hogy volt egy gyors növekvő előfordulása a közelmúltban [1-3]. A etiológiája BE ismeretlen, de a genetikai hajlam colitis változik a gyomor-nyelőcső reflux betegség (GERD) lehet felelős. [4]
BE kell gondolni az endoszkópia, amikor a szokásos, fehéres-megjelenő laphám helyébe egy piros, bársonyos megjelenésű nyálkahártya a disztális nyelőcső. A megbízható diagnózis BE nehéz kapcsolódó mintavételi hibák miatt meghatározása pontos helyét a gyomor-nyelőcső találkozásánál például hiatus hernia. Diagnosztikai nehézségek merülnek fel, amikor az endoszkópos foglalkozik a rövid távú szegmensben BE. Junctionalis, fundus és speciális (bél) típusú mirigyes hámszövet ismertették a meghatározása történhet Paull et al.
[5]. De ez volt az utóbbi időben beszámolt arról, hogy az észlelési az utóbbi egy megbízható kritériumot a diagnózis a BE [4, 6]. Helicobacter pylori katalógusa (H. pylori katalógusa) kapcsolatban állhat carditisszel és intestinalis metaplasia a cardia [7]. Ezért intesztinális metaplázia bevonásával cardia kapcsolatos Helicobacter
gasztritisz lehet szövettanilag megkülönböztethetetlen intesztinális metaplázia a disztális nyelőcső.
Azt javasolták, hogy a citokeratin részhalmazok 7 és 20 (CK7 és CK20) hasznos lehet megkülönböztetni mindkét hosszú és rövid szegmensét BE intestinalis metaplasia a proximális gyomor [8-11]. A tanulmány célja az volt, hogy értékelje a citokeratin (CK7 és CK20) kifejezés a diagnózis rövid szegmens Barrett oesophagus, különösen annak hasznosságát differenciáldiagnosztikájában Barrett nyálkahártya intestinalis metaplasia cardia és corpus. Katalógusa Módszerek
Endoszkópia mintáival utalt betegek származó Marmara University Institute of Gastroenterology áttekintették a fájlokat a Department of Pathology ugyanazon az egyetemen 1998 és 2002 között legalább 4 biopsziát vettünk szabálytalan squamo-oszlopos csomópont (SCJ) a félszigetek vagy nyelvvel a hengerhám és szigetek laphám vagy hengerhám minden esetben. Ha egynél több félsziget vagy a nyelv a hengerhám a disztális nyelőcső volt megfigyelhető endoszkóposan, 4 biopsziát vettünk föl félsziget és ők küldtek szövettani vizsgálatok alapján külön eppendorph csövek. Kis félszigetek lineáris hajók distalisan SCJ és bármilyen rendellenességet fokális is biopsziát. Katalógusa nyelőcső és a gyomor-biopsziát vettünk antegrád vagy retrográd a retroflexion az endoszkóp, amikor arra volt szükség. A retroflexed megközelítést előnyben mintavétele cardia. Az esetek diagnosztizáltak szövettanilag rövid részes BE vontak a vizsgálatba. Rövid részes BE definiáltuk endoszkóposan nyelvek kevesebb, mint 3 cm hosszú felett nyelőcső-gyomor találkozásánál (EGJ) annak hasonlított a vékonybélbe, amelyek jól formált mikrobolyhokat és intestinalis metaplasia vagy hematoxilin-eozin (H &E) (ábra 1) vagy alcián kék pH = 2,5 pozitív kehelysejtet (2. ábra) mikroszkópos vizsgálata. 1. ábra szakasz gyomor-nyelőcső találkozásánál mutató legyen kehelysejtet, H &E, × 40 katalógusa 2. ábra intenzív kék festése kehely sejtek alcián kék pH 2,5 /PAS, × 40 katalógusa A tanulmány csoportba 20 betegek rövid részes BE (a csoport) és az azonos számú beteg gyomor-bélrendszerben metaplasia (cardia és corpus) kíséretében H. pylori katalógusa gastritis (B csoport). Biopsziás mintákat, hogy kapunk 5 mm távolság alatt EGJ tekintették szív nyálkahártyáját.
Mintákat fixáltuk 10% -os pufferolt formalinban paraffinba ágyaztuk. Soros metszeteket minden mintából. Minden metszeteket rutin H &E foltot. Perjódsav Schiff (PAS), Alcian kék pH = 2,5 és Alcian kék pH 0,5 azonosítására használtuk semleges mucin, sialomucin és sulphomucin, ill. Giemsa festés alkalmaztunk, hogy felfedje a H. pylori katalógusa. Kizártuk azokat az eseteket nélkül észlelt serleget sejt metaplasia által alcián kékség mindkét csoport A és Group BH pylori katalógusa fertőzést Giemsa festékkel az esetben a B csoportba katalógusa endoszkópos biopsziás csoportosítani a teljes (I. típusú) vagy hiányos (type II) intestinalis metaplasia szerint a korábban meghatározott feltételeknek [12]. A javasolt Barrett CK7 /CK20 minta (CK7: erős diffúz pozitivitás felületes és mély mirigyek CK20: pozitivitást felszíni hám és felszíni mirigyek) és gyomor CK7 /CK20 minta (CK7: foltos immunhisztokémiai változó bevonásával mély mirigyek CK20: foltos immunfestésével felületes és mély mirigyek hiányos intestinalis metaplasia /hiánya CK7 immunreakcióra erős CK20 festés felületes és mély mirigyek teljes intesztinális metaplasia) értékeltünk minden esetben. Hat kontroll biopsziás alkotja visszamenőlegesen betegeknél, akiknél a biopsziás minták mutatták normális SCJ (n = 3) és a normál cardia (n = 3) mikroszkóp alatt.
Csoport Egy fiatal klinikai adatok, köztük az életkor, a nem, a gyomor-nyelőcső reflux tünetei, és endoszkópos lelet és a rövid szegmens Barrett nyálkahártya kaptuk minden esetben. A betegek BE az elmúlt 3 cm disztális nyelőcső vontak az A. csoport betegek pozitív H. pylori katalógusa kizártuk a vizsgálatból.
B csoport katalógusa klinikai adatok, beleértve a kor, a nem, a gyomor -esophageal reflux tünetei, endoszkópos lelet, és a H. pylori katalógusa állapot kaptuk minden esetben. Pozitív betegek H. pylori katalógusa vontunk a vizsgálatba. Húsz endoszkópos biopszia (cardia, n = 9, és a corpus, n = 11) a szövettani bizonyítékot intesztinális metaplázia vizsgáltuk.
Immunhisztokémiai vizsgálatok
egyik tissue-blokkot kiválasztott minden egyes esetben. A blokkok vágtunk 5 nm szakaszok. A metszeteket paraffint és rehidráljuk osztályozni alkoholok. Antigén-visszanyerés alkalmazásával hajtottuk végre citrát puffer mikrohullámú mind CK7 és CK20. Metszeteket 3% -os hidrogén-peroxid /metanol 20 percig, hogy blokkolja a nem-specifikus háttér festődés endogén peroxidáz. A standard sztreptavidin-biotin-peroxidáz komplex (ABC) módszer, CK7 (klón OV-TL 12/30, Neomarkers, Fremont, CA, USA) és CK20 (klón K20.4, Neomarkers, Fremont, CA, USA) végeztük minden diák. A lemezeket 30 percig inkubáljuk a szekunder antitest oldatot. Diaminobenzidinnel (DAB) szolgált a ChromaGen. A tárgylemezeket hematoxilinnel ellenfestettük. A mintákat a mellrák és a vastagbél-karcinóma alkalmaztunk pozitív kontrollként az CK7 és CK20, ill. A negatív kontrollokat elő ugyanezen tumor minták és festési eljárások elhagyásával a primer antitestekkel.
Statisztikai elemzés
Fisher-féle egzakt tesztet alkalmaztunk elemzésére Barrett és gyomor mintákat. Az eredmény tekintettük statisztikailag szignifikánsnak, ha a P
érték kisebb volt, mint, vagy egyenlő egy alfa-szint 0,05.
Eredménye
Összesen 40 beteget vontunk a vizsgálatba. A medián betegek életkora 46 (tartomány 28-77) év A csoport 50 (tartomány 25-73) év a B csoportba a férfi-nő arány 4-1 csoportjában, míg volt 2 3 B csoportba A klinikai és immunhisztokémiai sajátosságokat táblázat 1.Table 1. klinikai és immunhisztokémiai eredmények betegeknél rövid részes bE és a gyomor-bélrendszerben metaplasia katalógusa
Rövid részes BE (n = 20) Matton Gyomor intestinalis metaplasia (n = 20) Matton Életkor (év) egy fiatal 28-77 katalógusa 25-73
férfi /nő
4/1 katalógusa 03/02 katalógusa Barrett CK7 /20 patternb (%) hotelben 10 katalógusa 0 katalógusa Gyomor CK7 /20 patternc (%) hotelben 5 katalógusa 40
Más minták (%) hotelben 85 katalógusa 60 katalógusa Range szerinti b referenciameghatározott C referenciakatalógusa csoport egy fiatal reflux tüneteinek találtak 14 esetben (70%) és a BE. Nagyfrekvenciás a hiatus hernia (65%) találtak ebben a csoportban. Három eset mutatott enyhe fokú dysplasia ki összesen. Tizenhárom esetben kiderült, hiányos intestinalis metaplasia és 7 eset teljes intestinalis metaplasia segítségével alcián kék foltot. A várható Barrett CK7 /20 minta volt, melyeket csak 2. 20 esetben (3. ábra). Egy eset mutatott várt gyomor CK7 /CK20 mintát. Az emlékeztető volt változó festési minták; mint az antitest nem (n = 6) vagy fokális immunhisztokémiai (n = 11) CK7 fokális vagy diffúz immunfestés CK20, amely nem illeszkedik a várható Barrett CK7 /20 minta (4. ábra). Az érzékenység, specificitás, hamis pozitivitás, és hamis negativitás CK7 /20 festéssel Barrett minta volt 10%, 100%, 0%, illetve 90% volt. A 3. ábra a. Diffúz mérsékelt CK7 immunfestésével felületes és mély mirigyek BE, × 40, b. Szalagszerű CK20 immunfestésével felszíni hám és felszíni mirigyek BE, × 40 katalógusa 4. ábra a. Hiányzik CK7 immunfestést BE, × 100, b. Foltos CK20 immunfestésével felületes és mély mirigyek BE, × 100 katalógusa B csoport
tizenegy eset mutatott teljes intestinalis metaplasia, míg 9 esetben azt mutatták, hiányos intestinalis metaplasia segítségével alcián kék foltot. Nyolc esetben kifejezte a gyomor CK7 /20 minta (cardia, n = 5 és corpus, n = 3). Hatan megmutatta teljes és 2 hiányos gyomor CK7 /20 mintát. Barrett CK7 /20 minta nem volt megfigyelhető, ha a beteg gyomor intestinalis metaplasia. A festési tulajdonságai a fennmaradó 12 esetben pedig nem illeszkedik a várt gyomor CK7 /20 minta; köszönhető, hogy a foltos CK7 és /vagy fokális CK20 immunpozitivitása esetekben teljes intestinalis metaplasia és távollétében CK7 immunpozitivitása és /vagy diffúz CK20 immunpozitivitása esetekben hiányos intestinalis metaplasia. Az érzékenység, a specificitás, a hamis-pozitivitás, és a hamis-negativitás CK7 /20 festéssel Barrett minta volt 40%, 100%, 0% és 60% volt.
Nem volt szignifikáns különbség a Barrett minta között a két csoport (20/02 csoportjában vs. katalógusa 0/20 a B csoport, P katalógusa = 0,487), míg a megfigyelés a gyomor minta szignifikánsan magasabb volt a B csoportban, mint az a csoportban (8/20 vs. .
20/01, P katalógusa = 0,02). katalógusa normál SCJ megmutatta foltos immunpozitivitása az CK7 nélkül immunreakciót CK20, de a normál cardia kiderült immunonegativity az CK7 együtt foltos immunpozitivitást a CK20, amely korlátozott a felszíni hám. katalógusa Vita katalógusa intestinalis metaplasia alakulhat ki a cardia betegeknél akár rövid részes bE vagy carditisszel különösen H. pylori által okozott katalógusa. A kettő között különbség szervezetek fontos, mivel a etiológiája és kialakulásának kockázata adenocarcinoma különböznek [7]. BE véljük, hogy okozta GERD és társított fokozott kockázatával nyelőcső adenocarcinoma [1, 2, 4]. Mikroszkópos BE definiálható csere a nyelőcső laphám által metaplasticus speciális (intestinalized) hengerhám. Más epiteliális típusok junctionalis típusát és háttér típusú hámban. A diagnózis a BE igényel biopszia megerősítését bél metaplázia alcián kék pH = 2,5 pozitív kehelysejtet mellett jellegzetes endoszkópos lelet. A pontos szint SCJ, közeli része a gyomor ráncok, és lineárisan orientált nyálkahártya hajók a disztális nyelőcső és EGJ azonosítani kell [13]. SCJ általában megegyezik a proximális széle egyenes gyomor redők, ami azt jelenti EGJ. A kis hajók párhuzamosak hossztengelye a nyelőcső eltűnik a normál esetben SCJ. Azonban kimutatására abnormális meghosszabbítása e hajók alatti SCJ és proximális határa fölött a gyomor redői olyan bizonyíték jelenléte hengerhám a disztális nyelőcső [14].
Megkülönböztető BE más szervezetek, amelyek teheti hasonló szövettani jellemzői a legfontosabb. Mivel nincs abszolút szövettani kritériumok diagnosztizálására Barrett nyálkahártya jött létre még friss tanulmány [8-11, 15-19], elsősorban attól függ, minták egyes citokeratin részhalmaza, különösen két különálló mintákat CK7 /20 festéssel. Citokeratin erősen konzervált polipeptidek, és képviseli egy csoport a citoszkeletális szerkezeti fehérjékhez jelen minden hámban. Van legalább 20 különálló formái citokeratin hámsejtekben és változó expressziós mintát típusától függően, helyét és differenciálódását az epithelium [20]. CK7 lényegében nem expresszálódik normális hám a gyomor-bél traktus, míg CK20 expresszálódik intesztinális epitheliumban, gyomorrák foveolar hám, és endokrin sejtek a felső részeinek a pylorus mirigyek. Barrett CK7 /20 minta definiálta először Ormsby et al.
[8], mert foltosodás a felületi hám a CK20 és festése is felületes és mély metaplasticus hám a CK7. A kijelölt gyomor CK7 /20 minta csoportosították két mintái a típus a intestinalis metaplasia (teljes /teljes) ugyanezen szerzők. Szerint a javaslatot, foltos CK7 kifejezés változó bevonásával mély mirigyek volt látható hiányos a gyomor-bélrendszerben metaplasia, mivel az erős CK20 expresszió felületes és mély mirigyek hiányában CK7 expresszió volt megfigyelhető az egész gyomor-bélrendszerben metaplasia. Ebben úttörő tanulmányban, Barrett CK7 /20 minta volt nagyon érzékeny és specifikus amikor esetekhez képest a gyomor- bél metaplázia. Ugyanakkor H. pylori katalógusa állapot az esetek nem került említésre. Tanulmányok szerint Glickman munkatársai katalógusa [9] és Jovanovic et al.
[15] megerősítette Ormsby megállapításait 91%, illetve 94% -át esetek hosszú részes BE, ill. Másrészt, tanulmányok néhány más kutatók nem voltak képesek támogatni Ormsby megállapításait; A javasolt Barrett CK7 /20 minta találtak 54% -ánál a hosszú szegmens BE Mohammed et al.
[16], és csak 39% -ánál a hosszú szegmens BE El-Zimaity et al.
[17]. katalógusa Ormsby et al.
[11] később értékelik a hasznosságát CK7 /20 minták rövid részes bE másik tanulmány megállapította, hogy a "diagnosztikai" Barrett CK7 /20 minta volt jelen 82 % -ánál a rövid szegmens BE. Bár Mohammed et al.
[16] megállapította, szinte ugyanolyan arányban (81%), a rövid részes olyan esetek Ormsby et al.
[11], megtalálták ugyanazt a mintát 30,7% -ánál bél metaplasia cardia és érdekes módon 55% biopszia amely normál vagy gyulladt gyomornyálkahártya nélkül intestinalis metaplasia.
a jelen vizsgálatban, 10% -ánál a rövid szegmens bE mutatta a várt CK7 /20 minta és 40 % -ánál a gyomor-bélrendszerben metaplasia mutatta a várt gyomor CK7 /20 minta megfelelő teljes vagy hiányos intestinalis metaplasia. Az érzékenység a Barrett CK7 /20 minta nagyon alacsony volt (10%), a BE-csoport annak ellenére, hogy nagy specifitással (100%). Az érzékenység a gyomor CK7 /20 minta is alacsony volt (40%) a gyomor bél metaplázia csoport, bár a specificitása magas volt (100%) ebben a csoportban is. Gyomor- CK7 /20 minta szignifikánsan magasabb volt a gyomor-bélrendszerben metaplasia csoportban, mint a BE (P katalógusa = 0,02), míg Barrett CK7 /20 minta nem különbözött szignifikánsan a két csoport között (p = 0,487 katalógusa). Ezen eredmények alapján, hogy két különböző mintákat CK7 /20 festéssel nem volt elfogadható, mint egy megbízható módszer a differenciálódás rövid részes BE-nek a gyomor-bélrendszerben metaplasia hiszen mindkét minták nagyon alacsony érzékenységet és nagyon nagy a tévesen negativitás értékeket.
a Couvelard tanulmányában [10] 31% -ánál és a Ormsby tanulmánya 15% -ánál a rövid szegmens társulhat Barrett CK7 /20 minta volt a H. pylori fertőzés katalógusa. Bár a százalékos pozitív H. pylori katalógusa esetekben betegeknél rövid szegmens társítható Barrett CK7 /20 minta nem szerepel a Mohamed tanulmány [16], 6% -ánál a H. pylori katalógusa fertőzés rövid szegmens BE. Mivel intestinalis metaplasia lehet látni mind a H. pylori fertőzés katalógusa és a BE, ezek kombinációja szervezetek nem lehetnek az értelmezett értékelésére hasznosságát citokeratin részhalmazai. Kizártuk a H. pylori katalógusa pozitív esetek is, ha azt diagnosztizálták BE. Ezért a különbség a tanulmány és a korábban közölt eredmények miatt lehet, hogy ezt a szigorú különbséget a H. pylori katalógusa pozitív esetek a jelen tanulmányban. Különbségek a biopszia protokollok közötti korábbi tanulmányok és a jelen tanulmány (száma, mérete, illetve a munkaterületen a mintát, anterográd vagy retroflexed megközelítés) lehetett más oka eredményeinek különbsége. Azonosítani a pontos helyét a cardia anterográd megközelítést kell alkalmazni. Azonban ami a szív normális hám, létezése továbbra is tisztázatlan, mivel az eredményeket a különböző tanulmányok eredményei ellentmondóak [21-23]. Míg a két vizsgálatok arra utalnak, hogy a normális szív hám jelentése formájában metaplasztikus epithelium másodlagos gyomor-nyelőcső reflux [21, 22], egy másik tanulmány által jelentett Kilgore és munkatársai arra utalnak, hogy a szív nyálkahártya létezik, mint egy natív struktúra [23]. További vizsgálatok információt adhat a szív- nyálkahártya, különösen annak "kapcsolatban reflux változások és a BE. Katalógusa Következtetések
alapján eredményeink, kevésbé vagyunk biztosak a használata a javasolt CK7 /20 minták megkülönböztetésére rövid részes BE-nek a gyomor-bélrendszerben metaplasia. Fontos felismerni az endoszkópos funkciók segítik a diagnózis felállítását BE számára endoszkópos, mert a szövettani intestinalis metaplasia a cardia kapcsolatos egyéb etiológiájú és Barrett nyelőcső azonos. Javasoljuk, hogy a definíció BE kell alapulnia a klinikára, endoszkópos és szövettani eredmények helyett a minta CK7 /20 immunfestést. Katalógusa rövidítések jegyzéke katalógusa BE: katalógusa Barrett nyelőcső
Matton GERD: katalógusa gyomor-nyelőcső reflux betegség
H. pylori katalógusa:
Helicobacter pylori Matton Matton CK7: katalógusa Cytokeratin 7
CK20: katalógusa Cytokeratin 20
SCJ:
Squamo-oszlopos Junction
EGJ: katalógusa nyelőcső-Gyomor Junction
H & E: katalógusa hematoxilinnal és eozinnal
Matton PAS: katalógusa időszakos Acid Schiff
ABC: katalógusa standard sztreptavidin-biotin peroxidáz komplex Matton
DAB: katalógusa Diaminobenzidine
GEJ: katalógusa gastrooesophagealis átmenet
nyilatkozatok katalógusa Szerzők eredeti benyújtott fájlok képek
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 12907_2003_16_MOESM1_ESM.jpeg A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 12907_2003_16_MOESM2_ESM.jpeg A szerzők eredeti fájl 2. ábrán 12907_2003_16_MOESM3_ESM.jpeg A szerzők eredeti fájl 3. ábra 12907_2003_16_MOESM4_ESM.jpeg A szerzők eredeti fájl 4. ábra Érdekütközés katalógusa Nincs bejelentett.

• Csökkent expressziója prenil-difoszfát-szintáz-alegység 2 korrelál a csökkent betegek túlélési gyomorrák
• Helicobacter pylori lipopoliszacharid módosítása, Lewis antigén expresszióját, és a gyomor kolonizáció koleszterin-függő