Korisnost Citokeratini 7 i 20 (CK7 /20) imunohistokemijski u razlici od kratkog segmenta Barrett jednjak od želuca intestinalne metaplazije: Je li to pouzdan

Korisnost Citokeratini 7 i 20 (CK7 /20) imunohistokemijski na razlike kratko? -segment Barrett jednjak od želuca intestinalne metaplazije:? je li to pouzdan pregled Sažetak pregled Pozadina pregled svrha ovog korelativnim imunohistokemijske studije bio je procijeniti korisnost citokeratin (CK7 i CK20) izraz u dijagnostici kratki -segment Barrett jednjaka, osobito njegova učinkovitost u razlikovanju Barrett sluznicu od intestinalne metaplazije želučanog kardija i korpusa.
Metode pregled su proučavali dvije skupine endoskopske biopsije uzorka, uključujući 20 endoskopske uzorka biopsije kratkog segmenta Barrett jednjaka ( Grupa a) i jednak broj koji pokazuje Helicobacter pylori
povezana intestinalne metaplazije želučane kardija i korpusa (skupina B). Sve ispitivane su imunohistokemijski pomoću standardnog ABC metodu za CK7 i CK20 izražavanja. Fisherov egzaktni test je korišten za statističku analizu Barrett CK7 /20 i želuca CK7 /20 slika između grupa | Rezultati
predviđenom obrascu reaktivnosti u Barrett sluznice (CK7. Jaka difuzna pozitivnost u površinske i duboke žlijezde; CK20: pozitivnost u površini epitela i površinskih žlijezda) je viđen u 2 slučaja iz grupe a primjeraka. Očekivani želuca uzorak (CK7: pjegav imunološko s promjenjivim uključenosti dubokih žlijezda; CK20: pjegav imunološko površnih i dubokih žlijezda u nepotpunom intestinalne metaplazije /odsutnosti CK7 imunoreaktivnost s jakim CK20 bojenja u površne i duboke žlijezde u potpunoj intestinalne metaplazije) viđena u 8 slučajeva Grupa B primjeraka. Odgovarajuće osjetljivosti i lažno negativnost vrijednosti CK7 /20 bojanjem Barrett uzorak u skupini A bili su 10% i 90%, respektivno. Te vrijednosti za želučane uzorak u skupini B je 40% i 60%, pojedinačno. Vrijednosti specifičnost i lažno pozitivna oba uzoraka su isti (100% i 0%, respektivno). Nije bilo statistički značajne razlike za Barrett uzorak između dviju skupina (P
= 0,487), dok je promatranje želučani uzorka bila je značajno viša u skupini B nego u skupini A (P
= 0,02). Pregled Zaključci pregled zaključili smo da ovi pretpostavili, a nedavno primijeniti dijagnostičke kriterije koji uključuju CK7 i CK20 imunoreaktivnost nisu pouzdani u razlikovanju kratkog segmenta Barrett jednjaka s crijevnom metaplazije kao što se vidi u želučanom kardija i korpusa. pregled Pozadina pregled Barrett jednjaka ( BE) je povezana s povećanim rizikom od adenokarcinoma jednjaka, malignosti koji je imao brzi većeg broja slučajeva u posljednje vrijeme [1-3]. Etiologija BE je nepoznat, ali je genetska predispozicija s ulceroznim promjenama iz gastro-ezofagealni refluks bolest (GERB) mogu biti odgovorni [4].
BITI treba posumnjati na endoskopije, kada je zamijenjen normalno, bjelkasto-pojavljivanje pločastog epitela crvenim baršunastim-pojavljivanje sluznice u distalnom jednjak. Pouzdana dijagnoza BE je teško odnose na pogreške uzorkovanja zbog određivanja točnog položaja gastro-ezofagealni spoju kao u hiatal kila. Dijagnostički poteškoće nastaju kada endoscopist bavi kratkom segmentu BE. Spojni, fundusa i specijalizirane (intestinalne) vrste žljezdanog epitela opisana za definiranje BE by Paull et al.
[5]. No, nedavno je izvijestio da je otkrivanje potonji je pouzdan kriterij za dijagnozu BE [4, 6]. Helicobacter pylori pregled (H. pylori pregled) može biti povezan s karditis i intestinalne metaplazije u kardija [7]. Stoga, crijevne metaplazije uključuju kardija povezan s Helicobacter pregled gastritis može histološki ne može razlikovati od intestinalne metaplazije distalnog jednjaka.
Sugerirano je da citokeratin podskupovi 7 i 20 (CK7 i CK20) može biti koristan za razlikovanje i dugoročni i kratkoročni segment biti od intestinalne metaplazije proksimalnog želuca [8-11]. Svrha ovog istraživanja bila je procijeniti citokeratin (CK7 i CK20) izraz u dijagnostici kratkog segmenta Barrett jednjaka, osobito njegove korisnosti u diferencijalnoj dijagnozi Barrett sluznice iz intestinalne metaplazije želučanog kardija i korpusa.
Metode
endoskopija primjerci pacijenata iz iz Marmara University Institute of Gastroenterology razmotreni su datoteke s Odjela za patologiju na istom sveučilištu između 1998. i 2002. godine najmanje 4 biopsija se uzima iz nepravilnog squamo-stupolika spoju (SCJ) sa poluotocima ili jezici cilindričnim epitelom i otoci pločastih ili cilindričnim epitelom za svaki slučaj. Odnosno dok se više od jednog poluotoka ili jezik cilindričnim epitelom u distalnom jednjak endoskopski, 4 biopsije su uzeti iz svake poluotoka su poslane na histopatološko ispitivanje u odvojenim eppendorph cijevi. Mali poluotoci s linearnim plovila distalno od SCJ i bilo žarišne abnormalnosti su i biopsije. Pregled jednjaka i želučanih biopsija se uzima antegrade ili retrogradna s retrofleksiju endoskopa, kada je to potrebno. Retroflexed pristup je bio poželjan za uzorkovanje kardija. Slučajevi koji su dijagnosticirani patohistološki kao kratki segment SE uključeni su u studiju. Short-segment trebao biti definiran je endoskopski kao jezika manje od 3 cm u dužinu iznad esophago želudac spoju (EGJ) sa sličnosti s tankom crijevu ima dobro oblikovan mikrovila i intestinalne metaplazije ili hematoksilinom i eozinom (H &E) (Slika 1) ili Alcian blue pH2.5 pozitivne pehar stanice (slika 2) na mikroskopskim pregledom. Slika 1 Odjeljak s gastro-ezofagealni razvodne prikazuje biti s vrčastih stanica, H &E, × 40 pregled slika 2 intenzivno plavi bojenje vrčastih stanica s Alcian blue pH 2,5 /PAS, × 40 pregled Ispitivana skupina sastojala od 20 bolesnici s kratkom segmentu BE (skupina a), a jednak broj bolesnika s želučanim intestinalne metaplazije (kardija i korpusa) u pratnji H. pylori
gastritis (skupina B). Uzorci biopsije koje su dobivene u mm udaljenosti 5 ispod EGJ se smatralo da su srčane sluznice.
Uzorci su fiksirane u 10% -tnom puferiranom formalinu i uklopljene u parafin. Napravljeni su serijski rezovi od svaki uzorak. Svi odjeljci su obojeni uobičajenom H &E mrlja. Periodni Schiff kiselina (PAS), Alcian blue pH 2,5 i Alcian blue pH 0,5 se koristi za identifikaciju neutralni mucin, sialomucin i sulphomucin, respektivno. Giemsa boja je korištena da bi se otkrilo H. pylori
. Mi smo isključeni slučajevi bez otkrivenog stanica metaplazije pehar Alcian plava boja za obje skupine A i BH pylori pregled infekcija potvrđena Giemsinom bojom za slučajeve u skupini B. pregled endoskopske biopsije su grupirani kao potpuni (tip I) ili nepotpunih (tip II) intestinalne metaplazije u skladu s prethodno utvrđenim kriterijima [12]. Predloženi Barrett CK7 /CK20 uzorak (CK7: jaka difuzna pozitivnost u površinske i duboke žlijezde; CK20: pozitivnost u površini epitela i površinskih žlijezda) i želuca CK7 /CK20 uzorak (CK7: pjegav imunološko s promjenjivim uključenosti dubokih žlijezda; CK20: raznorodan imunološko površnih i dubokih žlijezda u nepotpunom intestinalne metaplazije /odsutnosti CK7 imunoreaktivnost s jakim CK20 bojenja u površne i duboke žlijezda u potpunoj intestinalne metaplazije) ocijenjeni su za sve slučajeve. Šest kontrolne biopsije su činili retroaktivno od pacijenata čije biopsija pokazala je normalnu SCJ (n = 3) i normalno kardija (n = 3) mikroskopski.
Skupina A pregled kliničkih podataka, uključujući dob, spol, gastroezofagealni refluks simptoma i endoskopski nalaz i kratki segment Barrett sluznice dobiveni su od svakog slučaja. Bolesnici s BE u zadnjih 3 cm distalnog jednjaka bili uključeni u A. Pacijenti grupe s pozitivnim H. pylori
su isključeni iz studije.
Skupina B pregled kliničkih podataka, uključujući dob, spol, gastro -esophageal refluks simptomi, endoskopski nalaz i H. pylori pregled stanja dobiveni su od svakog slučaja. Bolesnici s pozitivnim H. pylori
bili uključeni u studiju. su proučavali Dvadeset endoskopska biopsije (kardija, n = 9 i korpus, n = 11) s histoloških naznaka intestinalne metaplazije.
imunohistokemijska studije pregled Jedan blok tkivo je izabrana za svaki slučaj. Blokovi su rezani na 5 um sekcija. Slajdovi su deparafmizirane i rehidrirane ocjenjuju alkohola. Antigen dohvat je provedena korištenjem citratnog pufera u mikrovalnoj za oba CK7 i CK20. Rezovi su inkubirani u 3% vodikovog peroksida /metanola 20 min da se blokira nespecifične pozadinske bojenje zbog endogene peroksidaze. Koristeći standardni streptavidin-peroksidaza biotin postupak (ABC), CK7 (klon OV-TL 12/30, Neomarkers, Fremont, CA, USA) i CK20 (klon K20.4, Neomarkers, Fremont, CA, USA) su izvedena na sve slajdove. Rezovi su inkubirani 30 minuta u otopini sekundarnog antitijela. Diaminobenzidin (DAB) služio je kao chromagen. Stakalca su prebrojane s hematoksilinom. Uzorci karcinoma dojke i debelog crijeva su korištene kao pozitivne kontrole za CK7 i CK20, respektivno. Negativne kontrole su se proizveli isti tumorski uzorci i postupci bojanja izostavljajući primarnih protutijela. Pregled Statistička analiza pregled Fisher-ov egzaktni test korišten je za analizu Barrett i želučani uzoraka. Rezultat se smatra statistički signifikantnim ako je P pregled vrijednost bila manja od ili jednaka alfa razine od 0,05. Rezultati pregled
Ukupno 40 bolesnika je uključeno u studiju. Srednja dob bolesnika bila je 46 (raspon 28-77) godina u skupini A i 50 (raspon 25-73) godina, u skupini B. odnos muškaraca i žena bio 4 na 1 u skupini A, dok je bilo 2 do 3 u skupini B. klinički i imunohistokemijski značajke su sažeti u tablici 1.Table 1 kliničkih i imunohistokemijska nalaza u bolesnika s kratkom segmentu biti i želuca intestinalne metaplazije pregled
kratki segment BE (n = 20)
želudac intestinalne metaplazije (n = 20)
Starost (god) a pregled 28-77 pregled 25-73
Muški /Ženski
4/1 pregled 2/3 pregled Barrett CK7 /20 patternb (%)
10
0 pregled želuca CK7 /20 patternc (%)
5
40 pregled Ostali obrasci (%)
85 pregled, 60 pregled rasponu b definiran u odnosuc definiran u odnosupregled skupina A pregled refluks simptomi su pronađeni u 14 slučajeva (70%) s biti. Visoka učestalost hiatal kila (65%) pronađen je u ovoj skupini. Tri slučaja pokazao nekvalitetan displazija od ukupno. Trinaest slučajeva pokazala nepotpunu intestinalne metaplazije i 7 slučajeva bili potpuni intestinalne metaplazije pomoću Alcian plava boja. Predviđeni Barrett CK7 /20 uzorak je identificiran samo 2 od 20 slučajeva (Slika 3). Jedan slučaj je pokazao očekivani želučane CK7 /CK20 uzorak. Podsjetnik imao promjenjive obrasce bojenje; kao niti imunološkim (n = 6) ili žarišna imunološkim (N = 11) za CK7 s Žarišna ili difuzna imunološkim za CK20, koji nisu uskladile s očekivanom Barrett CK7 /20 uzorka (slika 4). Osjetljivost, specifičnost, lažno pozitivni i lažno negativnosti CK7 /20 bojanjem Barrett uzorkom bile 10%, 100%, 0% i 90%, respektivno. Slika 3 a. Difuzna umjerena CK7 imunološko površnih i dubokih žlijezda u BE, × 40, b. Band-kao CK20 imunološko površine epitela i površnih žlijezda u BE, × 40 pregled slika 4. a. Odsutni CK7 imunološko u BE, × 100, b. Mjestimična CK20 imunološko površnih i dubokih žlijezda u BE, × 100 pregled Group B
jedanaest slučajeva pokazala potpunu intestinalne metaplazije, dok je 9 slučajeva pokazao nepotpunu intestinalne metaplazije pomoću Alcian plava boja. Osam slučajeva izrazio želučane CK7 /20 uzorak (kardija n = 5 i corpus, n = 3). Šest od njih je pokazao potpuni i dva nepotpuna želuca CK7 /20 uzorak. Barrett CK7 /20 uzorak nije bio opažen kod svih bolesnika s želučanim intestinalne metaplazije. Karakteristike bojanjem preostalih 12 slučajeva nije odgovarao s predviđenom želuca CK7 /20 uzorak; s obzirom na slučajan CK7 i /ili fokalne CK20 immunopositivity u slučajevima s potpunim intestinalne metaplazije i odsutnosti CK7 immunopositivity i /ili difuznog CK20 immunopositivity u slučajevima sa nepotpunim intestinalne metaplazije. Osjetljivost, specifičnost, lažno pozitivni i lažno negativnosti CK7 /20 bojanjem Barrett uzorkom bile 40%, 100%, 0% i 60%, respektivno. Netlogu Ne postoji značajna razlika za Barrett uzorak između dvije skupine (2/20 u skupini a vs pregled 0/20 u skupini B, P pregled = 0,487), dok je promatranje želučani uzorak bio je značajno viši u skupini B nego u skupini a (8/20 vs . pregled, 1/20, P pregled = 0,02). pregled normalno SCJ pokazali fragmentaran immunopositivity za CK7 bez imunoreaktivnost za CK20, ali normalno želuca kardija otkrila immunonegativity za CK7 kombinaciji s slučajan immunopositivity za CK20, koja je ograničena na površinu epitela. pregled Rasprava pregled intestinalne metaplazije se može razviti u kardija kod bolesnika bilo s kratkog segmenta BE ili karditis posebno uzrokovane H. pylori
. Razlika između ta dva entiteta je važno jer je etiologija i rizik od razvoja adenokarcinom su različiti [7]. SE se vjeruje da su uzrokovane GERB i povezana je s povećanim rizikom od adenokarcinoma jednjaka [1, 2, 4]. Mikroskopski SE se može definirati kao zamjene jednjaka pločastog epitela strane metaplastičnim specijalizirano (intestinalized) cilindričnim epitelom. Ostali epitelne tipovi spojnog tip i trup i vrh maternice vrsta epitela. Dijagnoza BE zahtijeva potvrdu biopsija crijeva metaplazije Alcian blue pH2.5 pozitivnih vrčastih stanica pored tipičnih endoskopskih nalaza. Točna razina SCJ, proksimalni aspekt želučanih nabora, a linearno orijentirana sluznice žile u distalnom jednjak i EGJ treba identificirati [13]. SCJ normalno odgovara proksimalnom rubu linearnih želučanih nabora, što znači EGJ. Male posude su postavljene paralelno uzdužnoj osi jednjaka nestaju u koja se nalazi SCJ. Međutim, otkrivanje nenormalan produženje tih žila ispod SCJ i iznad proksimalnom rubu želučanog nabora je dokaz o prisutnosti cilindričnim epitelom u distalnom jednjaka [14].
Razlikovanje biti iz drugih subjekata koje mogu prouzročiti slične PATOHISTOLOŠKA osobine je stvar prestiža. Zbog apsolutna histoloških kriterija za dijagnosticiranje Barrett sluznicu još nije uspostavljen, nedavne studije [8-11, 15-19] uglavnom ovise o obrascima nekim keratin podskupova, a posebno dva različita obrasce CK7 /20 bojenja. Citokeratini su visoko čuvane i polipeptidi predstavljaju skupinu citoskeletnih strukturnih proteina prisutnih u svim epitela. Postoje najmanje 20 različita oblika Citokeratini u epitelnim stanicama i promjenjive obrasce izražavanja, ovisno o vrsti, lokaciji i diferencijacije epitela [20]. CK7, u biti, nije izražen na normalnim epitelu gastrointestinalnog trakta, a izražava se u CK20 epitel crijeva, želučani foveolar epitela, te endokrinih stanica u gornjim dijelovima pilorusa žlijezde. Barrett CK7 /20 uzorak je prvi put definiran Ormsby et al.
[8] mrlje od površnog epitela za CK20 i bojenje oba površnom i dubokom metaplastičnim epitela za CK7. Imenovani želuca CK7 /20 uzorak je grupirati u dva oblika u pogledu tipa intestinalne metaplazije (nepotpuni /potpune) od strane istih autora. Prema njihovu prijedlogu, fragmentaran CK7 izraz s promjenjivim uključenost dubokih žlijezda je viđen u nepotpunom želučane intestinalne metaplazije, dok jaka CK20 izraz u površinske i duboke žlijezda s nedostatku CK7 izražavanja je viđen u potpunoj želuca intestinalne metaplazije. U ovoj pionirskoj studiji, Barrett CK7 /20 uzorak bio je vrlo osjetljiv i specifičan u odnosu na slučajeve s želučanim intestinalne metaplazije. Međutim, H. pylori pregled statusa slučajeva ne spominje. Studije po Glickman sur pregled [9] i Jovanović i dr.
[15] potvrdio Ormsby otkrića u 91% i 94% njihovih slučajeva s dugom segmentu BE, respektivno. S druge strane, istraživanja i neki drugi istraživači nisu bili u mogućnosti podržati Ormsby otkrića; predloženi Barrett CK7 /20 uzorak pronađen je u 54% bolesnika s dugom segmentu BITI Mohammed et al.
[16], a samo 39% bolesnika s dugom segmentu BITI El-Zimaity et al.
[17]. pregled Ormsby et al.
[11] kasnije ocjenjuje korisnost CK7 /20 uzoraka u kratkom segmentu biti u drugoj studiji i utvrdili da "dijagnostički" Barrett CK7 /20 uzorak je bio prisutan u 82 % bolesnika s kratkom segmentu BE. Iako je Mohammed i sur.
[16] pronašao gotovo isti postotak (81%) za kratki segment biti slučajeva s Ormsby i sur.
[11], otkrili su isti obrazac u 30,7% bolesnika s intestinalne metaplazije u kardija i više zanimljivo kod 55% biopsije koji su imali ili normalne ili upaljenu želučanu sluznicu bez intestinalne metaplazije.
u ovoj studiji, 10% pacijenata s kratkom segmentu sE pokazao očekivani CK7 /20 uzorak i 40 % bolesnika s želučanim intestinalne metaplazije pokazali očekivani želučani CK7 /20 uzorak s odgovarajućim kompletnim ili nekompletnim intestinalne metaplazije. Osjetljivost Barrett CK7 /20 uzorak je vrlo niska (10%), u BE skupine unatoč visokom specifičnošću (100%). Osjetljivost želučane CK7 /20 uzorak je bio nizak (40%) u želučanom intestinalne metaplazije skupini, iako je bila visoka specifičnost (100%) u ovoj skupini i. Želučani CK7 /20 uzorka bila je značajno viša u želučanom intestinalne metaplazije skupini nego u BE skupini (P Netlogu = 0,02), dok je Barrett CK7 /20 uzoraka nije se značajno razlikovao između dvije skupine (P pregled = 0,487). Na temelju tih rezultata, koristiti dvije različite obrasce CK7 /20 bojenja ne može se prihvatiti kao pouzdane metode u razlikovanju kratki segment biti od želuca intestinalne metaplazije jer obje obrasci imaju vrlo nisku osjetljivost i vrlo visoke lažno negativnosti vrijednosti.
u Couvelard studiji [10] 31% pacijenata i u Ormsby studiji 15% bolesnika s kratkom segmentu biti povezana s Barrett CK7 /20 uzorka imala H.pylori pregled infekcije. Iako je postotak pozitivnog H. pylori pregled slučajevima u bolesnika s kratkom segmentu biti povezana s Barrett CK7 /20 uzorak se ne spominje u Muhameda studiji [16], 6% bolesnika imalo je H. pylori pregled infekcija s kratkom segmentu BE. Od intestinalne metaplazije se može vidjeti kako u H. pylori
infekcije i BE, kombinacija tih entiteta ne bi trebao biti interpretirani za procjenu korisnosti keratin podskupine. Mi smo isključeni na H. pylori pregled pozitivnih slučajeva čak i ako je dijagnoza kao biti. Dakle, razlike između našeg rada i ranije izvijestili su rezultati možda zbog ove stroge razlike H. pylori pregled pozitivnih biti slučajeva u ovom istraživanju. Razlike u biopsija protokola između prethodne studije i ove studije (broj, veličina ili web uzorka, anterograd ili retroflexed pristup) mogao biti još jedan razlog za razlike u rezultatima. Utvrditi točan položaj cardia anterograd pristup treba koristiti. Međutim, što se tiče normalnog srčanog epitela, njegovo postojanje ostaje i dalje nejasno, jer su rezultati različitih studija su kontradiktorni [21-23]. Dok su dvije studije ukazuju na to da normalni srčani epitel predstavlja oblik metaplastičnim epitela sekundarne do gastro-ezofagealni refluks [21, 22], druga studija je izvijestila Kilgore et al sugerira da srčana sluznica postoji kao izvorni strukture [23]. Daljnja istraživanja mogu pružiti informacije o srčanom sluznice, posebice svoje 'odnos s promjenama refluks i biti. Pregled Zaključci
Na temelju naših rezultata, mi smo manje sigurni korištenja predloženih CK7 /20 uzoraka za razlikovanje kratki segment biti od želuca intestinalne metaplazije. Važno je prepoznati endoskopske značajke koje pomoći dijagnozu biti za endoscopists, budući da je histologija intestinalne metaplazije u kardija se odnose na druge etiologije i Barrett jednjaka je identičan. Predlažemo da definicija BE treba temeljiti na klinici, endoskopskih i Histološki nalazi, a ne uzorak CK7 /20 imunološkim pregled Popis kratica pregled biti:. Pregled Barrett jednjak

GERB: pregled Gastro-ezofagealni refluks bolest
H. pylori pregled: pregled Helicobacter pylori

CK7: pregled keratin 7
CK20: pregled keratin 20
SCJ:
Squamo-stupolika Junction
EGJ: pregled Esophago-Želučani Junction
H &E: pregled hematoksilinom i eozinom

PAS: pregled periodički kisele Schiff
ABC: pregled Standardna streptavidinom Biotin peroksidaza

DAB: pregled Diaminobenzidin
GEJ: pregled, gastroezofagealni Junction
Izjave
autora na izvorni podnosi datoteke slike
Ispod su linkovi na autora originalnih dostavljenih datoteka za slike. Izvorna datoteka za Slika 1 12907_2003_16_MOESM2_ESM.jpeg autorskim 12907_2003_16_MOESM1_ESM.jpeg autora izvorne datoteke za sliku 2 12907_2003_16_MOESM3_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke na Slici 3 12907_2003_16_MOESM4_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke za Slika 4 interesa natječe
Ništa proglašen.

• Smanjena ekspresija prenyl difosfat sintetaze podjedinice 2 korelira sa smanjenom preživljavanje pacijenata s rakom želuca
• Helicobacter pylori lipopolisaharid modifikacija, izraz Lewis antigen, a želučani kolonizacija su kolesterol ovisan