Inaktivering av Bacillus cereus vegetativa celler genom magsyra och galla under in vitro gastrointestinala transit

inaktivering av Bacillus cereus
vegetativa celler genom magsyra och galla under in vitro
gastrointestinal genomgång Bild Sammanfattning
Bakgrund
livsmedelsburna patogener Bacillus cereus
kan orsaka diarré matförgiftning genom produktion av enterotoxiner i tunntarmen. Förutsättningen för diarrésjukdomar är alltså överlevnad under gastrointestinal passage.
Metoder
vegetativa celler av tre olika B. cereus
stammar odlades i en matris riktig sammansatta livsmedel, lasagne verde, och deras överlevnad under efterföljande simulering av gastrointestinal passage bedömdes med hjälp av in vitro
experiment simulerar transit genom människans övre mag-tarmkanalen (från mun till tunntarmen).
Resultat
ingen överlevnad vegetativa celler observerades, trots de höga inokulatnivåer av 7,0 till 8,0 log CFU /g och närvaro av olika potentiellt skyddande livsmedelskomponenter. Signifikanta fraktioner (ung. 10% av den förbrukade inokulat) av B. cereus
vegetativa celler överlevde gastric passagen, men de var därefter inaktiveras genom galla exponering i svagt sur intestinal medium (pH 5,0). I kontrast, det låga antalet sporer som före (upp till 4,0 log sporer /g) visade utmärkt överlevnad och förblev livskraftiga sporer i hela mag-tarmkanalen simulering.
Slutsats
Vegetativa celler inaktiveras av magsyra och galla under gastrointestinal passage , medan sporer är resistenta och överleva. Därför fysiologiska formen (vegetativa celler eller sporer) av B. cereus
konsumeras bestämmer efterföljande gastrointestinal överlevnad och därmed smittsam dos, vilket förväntas bli mycket lägre för sporer än vegetativa celler. Inga signifikanta skillnader i mag-tarmöverlevnadsförmåga återfanns bland de olika stammarna. Dock stora påfrestningar variabiliteten hos sporbildning tendens under tillväxt i laboratoriemedium och mat, som har stor betydelse för mag överlevnadspotential av olika B. cereus
stammar.
Nyckelord
Bacillus cereus
galla In vitro
simulering Gastrointestinal passage bakgrund
B. cereus
kan orsaka kräk och diarré och matförgiftning av produktionen av resp. emetisk (cereulide) och diarrétoxiner (icke-hemolytisk enterotoxin (Nhe), hemolysin BL (Hbl), cytotoxin K (CytK), etc.) [1]. I motsats till den extremt stabila toxin cereulide, är enterotoxiner lätt bryts ned av sura och matsmältningsenzymer (proteaser) och på så sätt förformade enterotoxiner i livsmedel inte behåller sin toxicitet under gastrointestinal passage [2]. Därför är en förutsättning för diarré matförgiftning enterotoxin produktion av B. cereus
i tunntarmen, så mag överlevnad vegetativa B. cereus
undersöktes. Det har tidigare visat att ca. 10% av de vegetativa cellerna överlevde gastric passage [3]. Nästa är de överlevande bakterier konfronteras med galla i lumen av duodenum, den proximala delen av tunntarmen.
Bile består huvudsakligen av gallsyror (cirka 72% av de totala lipider), förutom fosfolipider (ung. 24% ) och kolesterol (ung. 4%) [4]. Hos människor, är dessa gallsyror består i huvudsak av cholsyra (mellan 50% och 80%) och kenodeoxicholsyra (mellan 20% och 50%) [5, 6]. De syntetiseras i levern från kolesterol och konjugerat till glycin (approx. 75%) eller taurin (approx. 25%), med konjugeringstekniker förhållanden beroende på dieten bland andra faktorer [6, 7]. Utsöndringen av galla utlöses av fett och syra frigöring från magen in i duodenum, vilket resulterar i 7 till 15 mM gallsalter i tunntarmen efter en måltid, motsvarande 5-10 g Oxgall /L [7-10]. Dekonjugering av gallsyror från inhemska tarmbakterier förekommer främst i distala ileum, där ca. 95% av de gallsyror reabsorberas, varav cirka. 15% är okonjugerat [7, 10]. Både konjugerade och okonjugerade gallsyror absorberas genom passiv diffusion längs hela tarmen, men denna process är mer effektiv för okonjugerade gallsyror. Dessutom specifika aktiva transportsystem är närvarande i den distala ileum, som är mer effektiva i upptaget av konjugerade gallsyror. Efter absorption från tarmen, är gallsyrorna transporteras till levern via blodet, reconjugated och utsöndras igen in i gallan blåsan. Denna återvinningsprocess av gallsyror kallas det enterohepatiska kretsloppet.
Den fysiologiska rollen av gallsyror är för att öka lösligheten av fett och underlätta dess nedbrytning och absorption. På grund av sina rengörande egenskaper, gallsyror ändra även cellmembran och därmed har cytotoxiska och baktericida effekter, märkbara av en ökad membran fluiditet och permeabilitet [11-14]. Beroende på gallan koncentration, uppstår sönderdelning av cellmembranintegritet nästan omedelbart, vilket orsakar cell läckage och död, eller långsammare och subtilt genom att förändra membranpermeabiliteten och fluiditet, aktiviteten av kritiska proteiner i cellmembranet och membranet hydrofobicitet [15 ]. Förutom förstörelse av bakteriecellmembranintegritet, galla också inducerar DNA-skador, denaturering och felveckning av proteiner, vilket leder till döden för bakterier [16].
Grampositiva bakterier tenderar att vara mer känsliga för galla än gram negativa bakterier, men galla tolerans mycket stamspecifik, så generaliserade uttalanden för arter är inte möjligt [17-19]. Trots de bakteriedödande effekterna av galla, har vissa mikroorganismer utvecklat galla motstånd genom induktion av galla enzymer och transportsystem eller genom att ändra membranpermeabiliteten, fluiditet eller avgift. Vissa tarmpatogener kan även bero på galla som värd signal för virulens reglering. Till exempel Salmonella enterica serovar Typhimurium besitter multi effluxpumpen AcrAB för galla flytt och transport genom det yttre membranet [20]. Dessutom är invasionen av värdens epitelceller av denna bakterie som induceras av sänkta galla koncentrationer, så efter väg till krumtarmen eller i slemskiktet [21].
Samtidig intag av mat är en viktig faktor i den antibakteriella aktivitet av galla i tarmarna. Galla inaktivering av bakterier påverkas av förekomsten av livsmedelskomponenter, som kan skapa skyddande mikromiljöer eller binder galla. Till exempel den maximala galla koncentration tolereras av B. cereus
under tillväxt i tarmmediet var 3 g /L svin galla när Ärtsoppa kompletterades, medan endast 0,9 g /L och 0,6 g /L galla tolererades i närvaro av mjölk och avsaknad av mat, respektive [22]. Även för Lactobacillus curvatus, närvaron av en livsmedelsmatris, nämligen kött, ökade sin galla tolerans och därefter dess gastrointestinal överlevnad [23]. På samma sätt var toleransen av Bifidobacterium breve galla förstärks av sojaproteiner [24].
I denna studie var gastrointestinala överlevnad vegetativa B. cereus
celler undersöktes och kopplad till bakteriedödande roll av galla. B. cereus
inokulum odlades i den sammansatta livsmedelsmatrisen lasagne verde före vitro
simulering av den gastrointestinala passagen in för att inkludera eventuella skyddande effekter av livsmedelspartiklarna på de gastrointestinala överlevnaden av B. cereus
.
Material och metoder
B. cereus
stammar, odling och räkning
B. cereus
stammar ATCC 14579, NVH 1230-1288 och 73 FF (tabell 1) odlades och därefter subodlas i 10 ml Trypton Soya Broth (TSB, Oxoid) under 24 h vid 30 ° C. Efter centrifugering och återsuspension i 1 ml Fysiologisk Pepton saltlösning (PPS, 8,5 g /L NaCI (Fluka) och 1 g /L neutraliserade bakteriologisk pepton (Oxoid)), var 830 mikroliter av subkultur inokulerades på 83 g lasagne Verde (köpt i det lokala snabbköpet) i stomacher påsar och inkuberades under 24 timmar vid 22 ° C. Retail lasagne verde köptes i det lokala snabbköpet, som innehöll i genomsnitt 4,7 log CFU /g totalt bakterier (standardavvikelse på 1,3 log CFU /g, analys av 11 olika produkter under en sex månaders period) och ≤ 2,0 log CFU /g B . cereus
. Den genomsnittliga pH-värdet för denna livsmedelsprodukt var 5,52 (standardavvikelse ± 0,06) .table 1 simulering av mag-tarmkanalen utfördes med tre olika B. cereus-stammar: typ stammen B. cereus ATCC 14579, den kliniska isolat B. cereus NVH 1230 -88 från en diarré matförgiftning utbrott och maten isolat B. cereus FF 73 från den aktuella livsmedelsmatrisen, nämligen lasagne verde
B. cereus-stam
Origin
Mininal tillväxttemperatur ( ° C)
Hbl produktion
Nhe produktion
ATCC114579
stammen Hotel > 10
+
+
NVH2 1230 -88
kliniska (mänskliga avföring) katalog 8
+ -
FF3 73
mat (lasagne verde) katalog 10
+
+
1ATCC = American Type Culture Collection, USA; 2NVH = Norwegian School of Veterinary Science, Oslo, Norge; 3FF = Flanders 'Food Collection, Belgien.
Totala antalet och B. cereus
räkna bestämdes genom att stryka ut lämpliga utspädningar i PPS på Trypton Soya Agar (TSA) och Mannitol-Äggula-Polymyxin B agar (MYP .., respektive Spore koncentrationer~~POS=HEADCOMP bestämdes genom att stryka ut efter upphettning vid 80 ° C under 10 min
In vitro
simulering av gastrointestinal passage
dynamiska gastrointestinal simuleringsexperiment omfattade fem faser: 1) munnen, 2) magen, 3) i tolvfingertarmen, 4) dialys och 5) ileum [25]. I korthet sattes lasagne verde innehållande B. cereus
inokulum (83 g) blandades med salivmedium (56 ml, pH 6,5, 37 ° C) genom stomaching under 1 minut (Stomacher Lab Blender 400, Seward) och inkuberades under 10 min före överföring till magen kärlet. Den gastriska pH sänktes från 5,0 till 3,0 under den första 90 min och 2,0 under de sista 90 min genom att kontinuerligt tillsatt syra (0,28 M HCl). Magtömning initierades 30 min efter starten av den gastriska fasen i 5 fraktioner genom diskontinuerlig pumpning på ett sådant sätt att ca. 25% av den gastriska innehållet avlägsnades efter 1 h, 50% efter 2 timmar och 75% efter tre timmar. Fraktionerad magtömning resulterade i en 150 min överlappning mellan magsäcken och tolvfingertarmen fas, där den B. cereus
inokulum delades i subpopulationer som har genomgått flera olika inkubationstider i magen fasen (min. 30 min, max . 180 min) och tolvfingertarmen fas (min. 10 min, max. 160 min). Tarmkärlet var anaerob (spolades med kvävgas) och innehöll tarm medium med 10,0 g /I galla (Oxgall, Difco) och pH pH automatiskt justeras med en pH-kontroller (FerMac 260, Electrolab) stanna kvar vid pH 5,0 under första 45 min och vid pH 6,0 under den sista 115 min. Och änden av duodenum fasen, var de fullständiga maginnehållet överförs och gallan koncentrationen sänktes genom spädning till 5 g /L. Under nästa fas, var ≥ 90% av denna galla avlägsnas genom dialys och konkurrens med människans tarmbakterier har simulerade under slut ileum fasen. Emellertid, efter eliminering av B. cereus
vegetativa celler, var det gastrointestinala experimentet stoppas, vilket resulterar i experiment som består av de tre första endast faser. Experimenten utfördes i triplikat med olika B. cereus
inokulat på olika dagar.
Bile tolerans av B. cereus
B. cereus
stam NVH 1230-88 odlades och därefter subodlas i 10 ml TSB under 24 timmar vid 30 ° C. Därefter 100 mikroliter av subkulturen ympades i glasrör innehållande 9,9 ml TSB och inkuberades vid 37 ° C. PH för TSB var antingen neutralt (pH = 7,2) eller sura (pH = 5,0) och kompletterades med varierande galla koncentrationer, vilket resulterar i de slutliga koncentrationer av 0,0 (TSB-kontroll), 1,0, 5,0 och 10,0 g /L oxgalla (Difco ). Överlevnaden av vegetativa B. cereus
celler bedömdes genom plätering lämpliga diltutions i PPS på TSA.
Toxinproduktion
Produktion av enterotoxiner Nhe och Hbl bestämdes genom att analysera 1 ml prover efter filtrering (0,2 um sprutfilter, Whatman) med Duopath® cereus Enterotoxiner (Merck) enligt tillverkarens instruktioner.
Resultat
tillväxt av B. cereus
i lasagne verde
lasagne verde ympades med ca . 6,0 CFU /g B. cereus
och inkuberades under 24 h vid 22 ° C för att erhålla en högkoncentrerad inokulum av vegetativa B. cereus
celler odlade i en kompositmatris mat med mat mikrobiota genom att simulera lagring av förorenad lasagne på rumstemperatur. Detta resulterade i lasagne verde innehåller ca. 8,5 log cfu /g totalt bakterier, varav B. cereus
utgjorde 7,0-8,0 CFU /g, beroende på stammen (Tabell 2). B. cereus
NVH 1230-1288 visade en stabil spore koncentration av 3,5 log sporer /g, som härrör från TSB inokulat. Däremot ytterligare sporulering var uppenbart från ca.. 4,0 log sporer /g till 4,5 log sporer /g efter 30 h för B. cereus
FF 73. Anmärkningsvärt, B. cereus
ATCC 14579 inte producera några sporer efter 30 timmars inkubation, med endast mycket låga siffror ( 3,0 sporer /g) observerades i endast en av de 3 likadana påsar. Efter inokulering och inkubering, var lasagne verde sålunda kraftigt förorenat med B. cereus
vegetativa celler (7,0-8,0 log CFU /g) i den stationära tillväxtfasen och låga mängder av B. cereus
sporer (upp till 4,0 log sporer /g) .table 2 tillväxt av de tre olika B. cereus-stammar i livsmedelsmatrisen före simulering av gastrointestinal passage; medelvärden oberoende experiment i tre exemplar uttryckt i log CFU /g ± standardavvikelse presenteras
B. cereus-stam
Tid (h)
0

22
24
26
28
30
B. cereus
ATCC14579
Totalt utslag
5,8 ± 0,1
8,3 ± 0,6
8,4 ± 0,3
8,8 ± 0,2
8,8 ± 0,3
8,9 ± 0,2
Totalt B. cereus
5,7 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,7 ± 0,3
7,2 ± 0,3
7,0 ± 0,2
B. cereus
sporer Hotel < 2,0 ± 0,0 Hotel < 2,0 ± 0,0 Hotel < 2,0 ± 0,0 Hotel < 2,0 ± 0,0 Hotel < 2,0 ± 0,0
2,3 ± 0,6
B. cereus
NVH 1230-1288
Totalt utslag
5,9 ± 0,1
8,2 ±
0,2 8,4 ± 0,1
8,9 ± 0,0
8,9 ± 0,1
8,8 ± 0,2
Total B. cereus
6,2 ± 0,3
7,9 ± 0,2
8,2 ± 0,1
8,5 ± 0,2
8,3 ± 0,3
7,9 ± 0,1
B. cereus
sporer
3,5 ± 0,6
3,5 ±
0,2 3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
B. cereus
73
FF Totalt utslag
5,7 ± 0,1
8,5 ± 0,1
8,7 ± 0,1
9,0 ± 0,0
9,0 ± 0,3
8,9 ± 0,3
totala B. cereus
5,7 ± 0,1
8,1 ± 0,2
8,0 ± 0,1
8,3 ± 0,1
8,2 ± 0,1
8,3 ± 0,2
B. cereus
sporer
3,8 ± 0,2
3,9 ±
0,4 ​​3,9 ± 0,4
4,0 ±
0,5 4,0 ± 0,3
4,5 ± 0,1
Ingen produktion av enterotoxiner upptäcktes i lasagne verde efter 24 timmar av B. cereus
ATCC 14579 och B. cereus
NVH 1230-1288, medan Nhe var sporadiskt detekteras (i ett av tre replikat) i fallet med B. cereus
FF 73. Detta var förmodligen på grund av att det sura pH 5,5 av lasagne Verde och den ganska låga inkubationstemperatur av 22 ° C, som inte är optimala för enterotoxin produktion [1]. Men förformade enterotoxiner i livsmedel är inte ansvariga för diarré matförgiftning, eftersom de snabbt bryts ned under gastrointestinal passage [2].
In vitro
simulering av mag-tarmkanalen av B. cereus
vegetativa celler
lasagnen verde kontaminerad med 7,0 till 8,0 log CFU /mL B. cereus
vegetativa celler i den stationära tillväxtfasen utsattes för in vitro
simulering av gastrointestinal passage (Figur 1). Överlevnad av B. cereus
(< 1 log reduktion) observerades under munnen fasen och den första 30 min av magen fas när magens pH var mellan 5,0 och 4,0. Därefter när pH i magsäcken minskas under 4,0, de vegetativa cellerna inaktiveras snabbt i magen fasen märkbar som en snabb nedgång av den totala B. cereus
räknas till liknande värden av B. cereus
spore räknar i gastriska fartyg. B. cereus
totalt och spore räknar under tolvfingertarmen fasen förblev ca. 1,0 log cfu /ml för B. cereus
ATCC 14579, ca. 2,5 log cfu /ml för B. cereus
NVH 1230-1288 och ca. 3,5 log cfu /ml för B. cereus
FF 73. Intressant nog spore räknar av B. cereus
NVH 1230-1288 minskade under magen fasen under den sista timmen och mest surt pH. Eftersom det totala B. cereus
räkna inte förändras, indikerar detta initiering av sporgroning. B. cereus
ATCC 14579 visade inkonsekvent spore produktion, vilket resulterar i avsaknad av sporer under de två första simuleringar och mycket låga siffror (något över detektionsgränsen 1,0 sporer /ml) under de senaste två experiment. Figur 1 Inaktivering av vegetativa celler under den dynamiska in vitro simulering av mag-tarmkanalen med B. cereus ATCC 14579 (1), B. cereus
NVH 1230-1288 (2) och B. cereus
73 FF (3); B. cereus
total (a) och spor (b) räknar bestämdes genom utstrykning på MYP utan och med värmebehandling (10 minuter vid 80 ° C), respektive, i lasagne Verde (□), munnen fasen (◊), magen fasen (Δ) och tolvfingertarmen fas (○); medelvärdena och standardavvikelsen för trippelexperimenten på olika dagar presenteras.
ingen upptäckt test för enterotoxiner Nhe och Hbl utfördes, eftersom ingen tillväxt observerades under någon av de gastrointestinala faser, vilket är en förutsättning för enterotoxin produktion [1 ].
Bile tolerans B. cereus
tillväxt och överlevnad B. cereus
NVH 1230-1288 bestämdes i närvaro av varierande galla koncentrationer (Figur 2). Vid optimala förhållanden, dvs neutral TSB med pH 7,2, var effekten av galla koncentrationsberoende. Den lägsta koncentrationen av 1,0 g /L Oxgall resulterade i en population reduktion av ca.. 30% i jämförelse med kontroll (TSB utan galla) vid tiden 0 timmar. Dessutom, efter en h den viabla räkningen reducerades med ca.. 40% i jämförelse med koncentrationen i TSB med 1,0 g /L Oxgall vid 0 h. Emellertid, efter 2 h återhämtning och utväxt av de återstående cellerna observerades, eftersom B. cereus
koncentrationen var liknande den för 0 h, och slutligen efter 3 h, befolkningen hade ökat med ca.. 1 log i jämförelse med det vid 0 h. Emellertid närvaron av 5,0 g /L Oxgall inducerade en permanent nedgång till 4,1 log CFU /mL i genomsnitt (inaktivering av 88% av de vegetativa celler) och den för 10,0 g /L Oxgall till 3,9 log CFU /mL (inaktivering av 94 %). Figur 2 Överlevnad av B. cereus NVH 1230-1288 i Tryptone Soya Broth (TSB) vid 37 ° C med pH 7,2 (A) och pH 5,0 (B) med varierande galla (Oxgall, Difco) koncentrationer: 0,0 g /L (vit ), 1,0 g /L (ljusgrå), 5,0 g /L (mörkgrå) och 10,0 g /L (svart).
I TSB vid surt pH 5,0, ca. 99% av B. cereus
inokulum blev genast inaktiverades genom gallan exponering, oberoende av galla koncentrationen, vilket resulterar i konstant total B. cereus
räkningar av ca.. 3,0 log CFU /mL. B. cereus
inokulum innehöll mellan 0,1 och 0,2% sporer, var så konstanta spore räknar erhållits genom hela experimentet: 2,6 (± 0,2) log sporer /ml i början och 2,5 (± 0,3) log sporer /ml vid den slutet. Mot bakgrund av detta spor befolkning hänsyn de vegetativa cellerna utgjorde fortfarande majoriteten (ca. 60%) av 1% galla resistent B. cereus
.
Diskussion
överlevnad vegetativa celler under gastric passage liknade med den för tidigare studier med potatismos medium [3]. Under dessa experiment, ca. 10% av de vegetativa cellerna överlevde gastric passage, de flesta av dem i den första gastric fraktionen när pH i magsäcken var mellan 5,0 och 4,0. Dessa celler överfördes levande i tarm kärlet och därmed mellan 5,5 och 6,5 log CFU /mL B. cereus
förväntades i tarm kärlet. Emellertid mycket lägre räknas, vilket approximerade B. cereus
sporbildande räknas, erhölls under duodenum fasen. Detta tyder på att de vegetativa celler som överlevde gastric passage inaktiverades i tarmmiljön. Satsinkubationstid experiment i TSB och varierande koncentrationer av galla visade att majoriteten (99,1%) av vegetativa celler inaktiverades omedelbart efter galla exponering vid pH 5,0, oberoende av galla koncentration i området 1,0 till 10,0 g Oxgall /L. Sammanfattningsvis var vegetativa B. cereus
celler som överlevde gastric passage elimineras under den efterföljande tolvfingertarmen fasen av bakteriedödande effekten av galla.
Bakteriedödande effekt av galla på vegetativa B. cereus
celler var pH-beroende. Vid pH 7,0, var inaktiveringen korrelerad med gallan koncentrationen, och den lägsta galla koncentration (1 g /L) även tillät överlevnad och tillväxt. I kontrast, vid pH 5,0, omedelbar inaktivering av de flesta (mer än 99%) inträffade av vegetativa celler, oberoende av galla koncentration (inom området 1,0 till 10,0 g /L). I likhet med våra resultat, inaktivering av Listeria monocytogenes från gallsyror också ökat kraftigt vid surt pH 5,5 [26]. Inaktivering av bakterier genom att galla är liknande den av organiska syror, som är både speciellt effektiva vid lågt pH. Den logaritmiska syrakonstanten (pKa) av okonjugerade gallsyror är cirka 5,1, men konjugering med glycin sänker pKa till ca. 3,7 [27]. Konjugering med taurin leder till en ännu lägre pKa på ca. 1,5 [28]. Som en konsekvens, är majoriteten av konjugerade gallsyror dissocieras och joniseras vid de flesta fysiologiska och intestinala pH-värden, nämligen 95,24% vid pH 5,0 och 99,95% vid pH 7,0 för glycoconjugated gallsyror. Endast de fackligt former av gallsyror kan passivt passera cellmembranet, medan de dissocierade och joniserade konjugerade gallsyror kräver särskilda aktiva transportsystem [29]. Som ett resultat, kan 4,67% av de konjugerade gallsyror in i B. cereus
celler vid pH 5,0, i motsats till endast 0,03% vid pH 7,0. Dessutom ligger den interna pH av livskraftiga B. cereus
celler alltid mellan 6,0 och 7,5, beroende på externa pH och odlingsbetingelser [30]. Efter odissocierad gallsyror har spritt till B. cereus
celler, de flesta av dem (99,50-99,98%) undergår intracellulär dissociation, vilket resulterar i dödlig inre försurning.
Det rapporterades att vissa livsmedelskomponenter ökat galla tolerans av B. cereus
vegetativa celler i tarm medium med pH 6,5 [22]. Däremot hade den sammansatta livsmedelsmatrisen lasagne verde inte mildra de skadliga effekterna av galla på B. cereus
under våra experiment vid pH 5,0. Det är möjligt att typ mat effekter endast observeras vid en mer optimal pH för livsmedelsburna patogener, när mer uttalade skillnader mellan behandlingarna förväntas.
I motsats till vegetativa celler, B. cereus
sporer inte inaktiveras av galla , även om de inte gror i tarm medium innehållande 5 till 10 g /L Oxgall. Detta sammanfaller med de observationer av dynamisk simulering av mag-tarmkanalen av sporer [25], där sporerna var opåverkad under munnen, magsäcken och tolvfingertarmen fas och bara börjat groning under dialys, när gallan koncentrationen sänktes från 5,0 g /L Oxgall till < 0,5 g /L och för de sats inkubation experiment [31], där sporer grott inom 2 timmar i tarm simulering medium innehållande 1,0 g /L galla. Andra studier rapporterade också att sporer kunde gro och föröka sig i simulerad tarmvätska innehållande galla (1,5 g Oxgall /L) [32], och att gallan motståndet hos B. cereus
sporer var överlägsen den hos vegetativa celler [33 ]. Sammanfattningsvis hög galla koncentrationer (≥ 5 g /L Oxgall) tillåter inte sporgroning, medan låg galla koncentrationer (< 5 g /L). Inducera groning och utväxt
Förutom dess betydelse i närings matsmältning och absorption, galla är också en viktig antimikrobiell förening i tarmen [7]. Onormala låga tarm galla nivåer kan förekomma hos personer med galla eller lever avvikelser eller brister i den enterohepatiska cirkulationen, som kan göra dem särskilt mottagliga för diarré på grund av förbättrad överlevnad intagna och tarmbakterier. Dessutom gallsyror är endogena laxermedel, så malabsorption av gallsyror från tunntarmen, vilket leder till att öka gall-nivåer i terminalen tunntarmen och tjocktarmen, kan också resultera i diarré [34].
Slutsats
B. cereus
vegetativa celler kunde överleva gastrointestinal passage som simuleras genom in vitro
experiment, trots den höga inokulatkoncentration av 7,0-8,0 log CFU /mL och odling av ympen i den sammansatta livsmedelsmatrisen lasagne verde. Majoriteten av vegetativa celler inaktiverades av magsyra, och de överlevande cellerna därefter inaktiverades genom galla under tolvfingertarmen fasen. Däremot B. cereus
sporer överlevde simulering av mag-tarmkanalen och förblev sporer under ogynnsamma förhållanden för groning (och utväxt). Därför smittsam dos för B. cereus
varierar förmodligen beroende på den fysiologiska formen konsumeras, är lägre för högresistenta sporer. Även mag överlevnad var liknande för de olika stammarna, deras sporbildning tendens varierat kraftigt, vilket i sin tur har stor betydelse för mag överlevnadspotential och därmed infektiösa dosen av olika B. cereus
stammar.
Förklaringar
författarnas ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 1 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 2 Konkurrerande intresse
Vi alla författare, förklara att vi inte har några konkurrerande intressen.
Författarnas bidrag
SC, MU och TVdW utformade experimenten; SC och SH utfört experimentellt arbete och bearbetas resultatet; SC skrev manuskriptet med hjälp av MU, NB och TVdW. Alla författare läst och godkänt den slutliga manuskriptet.

• Ihållande lågt uttryck av hZip1 i slem karcinom i äggstockarna, tjocktarmen, mage och lunga
• Exsanguinating övre GI blöder på grund av ovanlig arteriovenös missbildning (AVM) i magen och mjälte: en fallrapport