Inactivation vu chineseschen Bazillus deen vegetative Zellen vun gastric Seier an Bile während kënschtlech gastrointestinal transit

Inactivation vu chineseschen Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen vun gastric Seier an Bile während kënschtlech VerfÜgung gastrointestinal oennert VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung D' foodborne pathogen chineseschen Bazillus deen VerfÜgung kann duerch Produktioun vun enterotoxins am klenge Daarm diarrheal Liewensmëttel Vergëftung féieren. D'Viraussetzung fir diarrheal Krankheet ass also Iwwerliewe während gastrointestinal Trip. VerfÜgung Method Vegetative Zellen vun 3 verschidden B. Bazillus deen
analyséieren an engem real Komposit Liewensmëttel Matrixentgasung Territoire waren, Lasagne Verde, an hir Iwwerliewe während Kierzunge Simulatioun vun gastrointestinal Trip évaluéieren war mat kënschtlech VerfÜgung Experimenter oennert duerch de Mënsch ieweschte gastrointestinal TRACT (aus Mond ze kleng Daarm) simulating. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Nee Iwwerliewe vun vegetative Zellen observéiert gouf, trotz dem héije inoculum Niveau vun 7.0 bis 8.0 Logbuch CFU /g an der Präsenz vun verschiddenen potenziell Schutzpatrounin Liewensmëttel Voleten. Grouss ufale (ca.. 10% vun de verbrannt inoculum) vun B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen erëmfonnt gastric Passage, mä si goufen dono vun Bile aussetzt zu schwaach dono intestinal mëttelfristeg (pH 5.0) inactivated. Am Géigesaz, huet den niddregen Zuelen Spore präsent (bis zu 4,0 Logbuch Spore /g) excellent Iwwerliewe a blouf liewensfäeg Spore uechter d'gastrointestinal Trip Simulatioun. VerfÜgung Conclusioun Vegetative Zelle inactivated vun gastric Seier an Bile während gastrointestinal Trip VerfÜgung , iwwerdeems Spore gi méi resistent a iwwerlieft. Dofir, zu der Fro gestallt Form (vegetative Zellen oder Spore) vun den B. Bazillus deen verbrannt bestëmmt d'Kierzunge gastrointestinal Iwwerliewe an domat d'infective Dosis, déi méi kleng fir Spore wéi vegetative Zellen ze erwaarden ass. Keng Differenze zu Fähegkeet gastrointestinal Iwwerliewe gouf ënnert de verschiddene analyséieren fonnt. Allerdéngs, Verännerlechkeet considérabel Efforten war zu sporulation Tendenz während Wuesstem am Labo mëttel- a Liewensmëttel observéiert, wat wichteg Konsequenzen fir d'gastrointestinal Iwwerliewe Potential vun de verschiddene B. Bazillus deen VerfÜgung analyséieren huet. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung chineseschen Bazillus deen VerfÜgung Bile An kënschtlech VerfÜgung Simulatioun Gastrointestinal Trip Background VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung kann emetic an diarrheal a Liewensmëttel Vergëftung vun Produktioun vun z'erfollege féieren. emetic (cereulide) an diarrheal entgëften (Net-haemolytic enterotoxin (Nhe), haemolysin BL (Hbl), cytotoxin K (CytK), etc.) [1]. Am Géigesaz zu der extrem stabil toxin cereulide, sinn d'enterotoxins vun Seier an digestive Enzymen (proteases) an domat preformed enterotoxins Liewensmëttel liicht deforméiert net hir toxicity während gastrointestinal Trip behalen [2]. Dofir, ass enterotoxin d'Viraussetzung fir diarrheal Liewensmëttel Vergëftung Produktioun vun B. Bazillus deen VerfÜgung am klenge Daarm, sou de gastrointestinal Iwwerliewe vun vegetative B. Bazillus deen VerfÜgung propagéieren war. Et war schonn déi ca. gewisen. 10% vun de vegetative Zellen erëmfonnt gastric Trip [3]. Next, sinn der Eos Bakterien mat Bile an der lumen vun den Ausléiser, der proximal Deel vun de klenge Daarm eriwwer. VerfÜgung Bile besteet haaptsächlech vun Bile Saieren (ongeféier 72% vun de gesamten Fetten), ausser phospholipids (ca.. 24% ) an Cholesterol (ca.. 4%) [4]. An Mënschen, aus dëse Bile Saieren haaptsächlech vun cholic Seier (tëscht 50% an 80%) an chenodeoxycholic Seier (tëscht 20% an 50%) [5, 6]. Si sinn an der Liewer aus Cholesterol Wierderbuch a conjugated zu glycine (ca.. 75%) oder taurine (ca.. 25%), mat unhéier nennen je op d'Ernährung ënner anere Facteuren [6, 7]. Secretion vun Bile ass vun Fett an Seier Verëffentlechung vun de Mo an der Ausléiser ausgeléist, déi no engem Iessen am 7 bis 15 mm Bile Salzer an de klenge Daarm Resultater, mat 5 bis 10 g Oxgall /L entspriechend [7-10]. Deconjugation vun Bile Saieren vun Naturvölker intestinal Bakterien existeiert haaptsächlech an der distal ileum, wou ca.. 95% vun der Bile Saieren ass reabsorbed, vun deenen ca.. 15% ass unconjugated [7, 10]. Béid conjugated an unconjugated Bile Saieren sinn duerch passiv Diffusion laanscht de ganze GUT absorbéiert, mä dëse Prozess ass méi effikass fir unconjugated Bile Saieren. Zousätzlech sinn déi spezifesch aktiv Transport Systemer an der distal ileum, déi si méi efficace an der Notzong vun conjugated Bile Saieren. No Tellur vum Daarm kann, sinn d'Bile Saieren un der Liewer via d'Blutt transportéiert, reconjugated an erëm an de Bile BBC secreted. Dëse Recyclage vun Bile Saieren ass enterohepatic Circulatioun genannt. D'Fro gestallt Roll vun Bile Saieren VerfÜgung ass d'Creme Nahrungszousaz Fett ze klammen a seng ofgeschnidden an Tellur vereinfachen. Wéinst hirem Nodeems Eegeschaften, Bile Saieren och Zell Schläimhait ofzeänneren an domat cytotoxic an bactericidal Effekter, deitlech duerch eng fräi Membran fluidity an permeability [11-14] hunn. Ofhängeg vum Bile Konzentratioun, Stéierungen vun der Integritéit Zell Membran existeiert instantaneously bal, Zell Auswee an Doud dauernd, oder méi lues a wouer vun der Membran permeability an fluidity Wou muss ech, der Aktivitéit vun kritescher Proteinen an der Zell Membran an der Membran hydrophobicity [15 ]. Zousätzlech zu der Zerstéierung vun der Integritéit bakteriell Zell Membran, Bile induces och DNA Schued, denaturation an misfolding vu Proteinen, fir den Doud vu Bakterien Virwaat [16]. VerfÜgung Gramm-positiv Bakterien éischter méi sensibel op Bile gin wéi Gram- negativ Bakterien, mä Bile Toleranz ass ganz Deformatioun spezifesch, sou generaliséiert Aussoen fir Arten sinn net méiglech [17-19]. Trotz der bactericidal Auswierkunge vun Bile, e Mikro-Organismen hunn Bile Resistenz vun Aféierungs- vun Bile entwéckelt Enzymen an Transport Systemer oder vun Wou muss ech Membran permeability, fluidity oder Vitesse metabolizing. Verschidde enteric pathogens kann och dovun ofhänken op Bile als Provider Signal fir virulence Regulatioun. Zum Beispill, leie Salmonellen enterica serovar Typhimurium der multidrug efflux Pompel AcrAB fir Bile Entféierung an Transport duerch d'Baussennetz Membran [20]. Desweideren, Invasioun vun der epithelial Zellen d'Gaaschtland vun dëser Bakterie ass duerch e Gang Bile Konzentratioune entschlof, sou no oennert dem distal ileum oder an der mucus futti [21]. VerfÜgung De Co-Nossallergie vun Iessen ass e wichtege Faktor vun der antibacterial Aktivitéit vun Bile an der intestines. Bile inactivation vun Bakterien ass vun der Präsenz vun de Liewensmëttel Komponente beaflosst, déi Schutz- Mikro-Ëmfeld oder kruet Bile schafe kann. Zum Beispill war déi maximal Bile Konzentratioun vun B. Bazillus deen VerfÜgung während Wuesstem zu intestinal mëttelfristeg toleréiert 3 g /L porcine Bile wann Iebëssenzoppp ergänzt gouf, iwwerdeems nëmmen 0,9 g /L an 0.6 g /L Bile an der Präsenz toleréiert huet vun der Mëllech an de Flichte vun de Liewensmëttel, bzw. [22]. Och fir Lactobacillus curvatus, d'Präsenz vun engem Liewensmëttel Matrixentgasung, nämlech Fleesch, hiren Bile Toleranz an duerno seng gastrointestinal Iwwerliewe [23]. Den Zerfall, war d'Bile Toleranz vun Bifidobacterium breve vun Soja Proteinen verstäerkte [24]. VerfÜgung An dëser Etude, war d'gastrointestinal Iwwerliewe vun vegetative B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen propagéieren an der bactericidal Roll vun Bile verbonnen. Den B. Bazillus deen VerfÜgung inoculum war an der Komposit Liewensmëttel Matrixentgasung Lasagne Verde virun der kënschtlech an den Territoire zur VerfÜgung Simulatioun vun der gastrointestinal Passage op der gastrointestinal Iwwerliewe vun B. Bazillus deen all Potential Schutzpatrounin Effekter vun der Liewensmëttel Deelercher ze gehéieren
. VerfÜgung spontan a Methoden VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung analyséieren, ubauen an Configuratioun VerfÜgung De B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC 14579, NVH 1230-88 an FF 73 analyséieren (Table 1) huet den Territoire an dono subcultured an 10 ml Tryptone Soja läschen (TSB, Oxoid) fir 24 h op 30 ° C. No centrifugation an resuspension zu 1 ml gestallt Peptone Salt Léisung (PPS, 8,5 g /L NaCl (Fluka) an 1 g /L bacteriological peptone (Oxoid) neutraliséiert), 830 μL vun der zësummen op 83 g Lasagne Verde inoculated war (kaaft an de Supermarché) zu stomacher Tuuten a bei 22 ° C fir 24 h incubated. Retail Lasagne Verde war am Supermarché kaaft, deen an der Moyenne 4,7 Logbuch enthale CFU /g total Bakterien (Standard deviation vun 1,3 Logbuch CFU /g, Analyse vu 11 verschidde Produiten während enger 6 Méint) an ≤ 2.0 Logbuch CFU /g B . Bazillus deen VerfÜgung. D'Moyenne pH vun dëse Liewensmëttel Produit war 5.52 (Standard deviation ± 0.06) .Table 1 der Simulatioun vun gastrointestinal Passage mat dräi verschidden B. Bazillus deen analyséieren gesuergt huet: den Typ Deformatioun B. Bazillus deen ATCC 14579, de Medeziner isoléieren B. Bazillus deen NVH 1230 -88 aus engem diarrheal Liewensmëttel Vergëftung Ausbroch an d'Liewensmëttel isoléieren B. Bazillus deen FF 73 aus dem zoustännege Liewensmëttel Matrixentgasung, nämlech Lasagne Verde VerfÜgung B. Bazillus deen Deformatioun VerfÜgung Origin
Mininal Wuesstem Temperatur ( ° C)
Hbl Produktioun
Nhe Produktioun
ATCC114579 VerfÜgung Typ Deformatioun VerfÜgung > 10 VerfÜgung + VerfÜgung + VerfÜgung NVH2 1230 -88 VerfÜgung Medeziner (mënschlech faeces) VerfÜgung 8 VerfÜgung + VerfÜgung - VerfÜgung FF3 73 VerfÜgung Iessen (Lasagne Verde) 10
+ VerfÜgung + VerfÜgung 1ATCC = American Type Kultur Collection, USA; 2NVH = norwegesche School vun Veterinary Science, Oslo, Norwegen; 3FF = Flandern "Food Collection, Belsch. VerfÜgung Déi total zielen a B. Bazillus deen VerfÜgung Grof vun di de passenden dilutions vun PPS op Tryptone Soja Agar (TSA) an Mannitol-Eegiel-Polymyxin B Agar (MYP alles sech .., bzw. Spore Konzentratioune fir 10 min duerch di der Heizung op 80 ° C sech waren VerfÜgung an kënschtlech VerfÜgung Simulatioun vun gastrointestinal Trip VerfÜgung d'dynamesch Experimenter gastrointestinal Simulatioun aus fënnef Phasen: 1) de Mond, 2) de Mo, 3) den Ausléiser, 4) dialysis a 5) déi ileum [25]. Kuerz, war mat Spaut mëttelfristeg gemëscht der Lasagne Verde de B. Bazillus deen VerfÜgung inoculum (83 g) mat (56 ml, pH 6.5, 37 ° C), déi fir 1 min stomaching (Stomacher déngt Istanbul 400, Seward) an incubated fir 10 min virum Transfert un de Mo. pompelen. D'gastric pH war vun 5.0 bis 3.0 während den éischten 90 min an bis 2.0 während de leschten 90 min duerch kontinuéierlech dobäi Seier (0.28 M HCl) ofgeholl. Gastric emptying 30 min nom Ufank vun der gastric Phase vun 5 ufale vun erauskomm Hushovd an esou enger Manéier dass ca. ageleet gouf. 25% vun der gastric Inhalt war no 1 h geläscht, 50% no 2 Stonnen a 75% der 3 h. D'fractional gastric emptying e schéinen 150 min iwwerlageren tëscht de Mo a Ausléiser Phase, an där d'B. Bazillus deen VerfÜgung inoculum zu subpopulations ënnerdeelt gouf déi zu verschiddene incubation Mol am Mo. Phase ënnerworf waren (min. 30 min, max . 180 min) an Ausléiser Phase (min. 10 min, max. 160 min). D'intestinal pompelen war selwescht (mat Stéckstoff Gas Ofwaasser) an enthale intestinal mëttelfristeg mat 10.0 g /l Bile (Oxgall, Difco) an de pH pH automatesch vun engem PH, ziemlech (FerMac 260, Electrolab) ugepasst gouf um pH bleiwen 5.0 während der éischt 45 min an um pH 6.0 während de leschten 115 min. An d'Enn vun der Ausléiser Phas, huet de komplett gastric Inhalter Virée an der Bile Konzentratioun war vun dilution bis 5 g /L Gang. An den nächste Phase, ≥ 90% vun dëser Bile war mat mënschlechen intestinal Bakterien duerch dialysis a Konkurrenz geläscht war während der Finale ileum Phase surfen. Allerdéngs, an der Eliminatioun vun de vegetative Zellen VerfÜgung B. Bazillus deen, war d'gastrointestinal Experimenter ze stoppen, an Experimenter doraus nëmmen aus den éischten dräi Phasen. D'Experiment an triplicate mat verschiddene B. Bazillus deen VerfÜgung inocula op verschidden Deeg gesuergt. VerfÜgung Bile Toleranz vun B. Bazillus deen
B. Bazillus deen VerfÜgung Deformatioun NVH 1230-88 war Territoire an duerno subcultured an 10 ml TSB fir 24 h op 30 ° C. Dunn 100 μL vun der zësummen war am Glas Krunn mat 9,9 ml TSB inoculated a bei 37 ° C incubated. D'pH vun der TSB war entweder neutral (pH = 7,2) oder dono (pH = 5.0) a mat variabelen Bile Konzentratioune ergänzt, an der Finale Konzentratioune vun 0.0 (TSB Kontroll) doraus, 1.0, 5.0 an 10.0 g /L oxgall (Difco ). D 'Iwwerliewe vun vegetative B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen duerch di passenden diltutions vun PPS op TSA évaluéieren war. VerfÜgung Produktioun vun enterotoxins Nhe an Hbl VerfÜgung Toxin Produktioun vun analyséiert 1 ml Echantillon der filtration alles war (0,2 μm Sprëtz Filter, Whatman) mat der Duopath® Bazillus deen Enterotoxins (Merck) no der Taktik 'Producteure. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Wuesstem vun B. Bazillus deen VerfÜgung zu Lasagne Verde VerfÜgung d'Lasagne Verde war mat ca. inoculated . 6.0 CFU /g B. Bazillus deen VerfÜgung an incubated fir 24 h op 22 ° C eng héich Konzentratioun inoculum vun vegetative B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen zu engem Komposit Liewensmëttel Matrixentgasung mat Liewensmëttel microbiota op déi simulating Stockage vun knaschtege Lasagne ugebaut ze kréien Raumtemperatur. Dëse schéinen Lasagne Verde mat ca.. 8.5 Logbuch CFU /g total Bakterien, vun deem B. Bazillus deen VerfÜgung 7.0 bis 8.0 CFU /g opgebaut, je op de Klischee (Table 2). B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 huet eng stabil spore Konzentratioun vun 3,5 Logbuch Spore /g, ursprünglech aus der TSB inoculum. Am Géigesaz, war zousätzlech sporulation aus ca. offensichtlech. 4.0 Logbuch Spore /g bis 4.5 Logbuch Spore /g no 30 h fir B. Bazillus deen VerfÜgung FF 73. butzeg, B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC 14579 hu keng Spore no 30 h incubation recycléieren, mat nëmmen Héich Zuelen ( 3.0 Spore /g) observéiert an nëmmen 1 vun den 3 behaapten paken. No inoculation an incubation, war d'Lasagne Verde also mat B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen héich Belaaschtung (7.0 bis 8.0 Logbuch CFU /g) an de permanente Wuesstem Phase an héich Zommen vun B. Bazillus deen VerfÜgung Spore (bis zu 4,0 Logbuch Spore /g) .Table 2 Wuesstem vun den dräi verschidde B. Bazillus deen analyséieren an de Liewensmëttel Matrixentgasung virun Simulatioun vun gastrointestinal Trip; Duerchschnëtt Wäerter vun onofhängege Experimenter zu triplicate zu Logbuch CFU ausgedréckt /g ± normale deviation sinn VerfÜgung B. Bazillus deen Deformatioun virgestallt VerfÜgung Time VerfÜgung (h)
0 VerfÜgung
22
24
26
28
30
B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC14579 VerfÜgung Total Grof VerfÜgung 5.8 ± 0,1 VerfÜgung 8.3 ± 0.6 VerfÜgung 8.4 ± 0.3 VerfÜgung 8,8 ± 0,2 VerfÜgung 8,8 ± 0.3 VerfÜgung 8,9 ± 0,2 VerfÜgung Total B. Bazillus deen
5,7 ± 0,1 VerfÜgung 6,9 ± 0,1 VerfÜgung 6,9 ± 0,1 VerfÜgung 6,7 ± 0.3 VerfÜgung 7,2 ± 0.3 VerfÜgung 7.0 ± 0,2 VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung Spore VerfÜgung &Si besteet; 2.0 ± 0,0 VerfÜgung &Si besteet; 2.0 ± 0,0 VerfÜgung &Si besteet; 2.0 ± 0,0 VerfÜgung &Si besteet; 2.0 ± 0,0 VerfÜgung &Si besteet; 2.0 ± 0,0 VerfÜgung 2,3 ± 0.6 VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 VerfÜgung Total Grof VerfÜgung 5.9 ± 0,1 VerfÜgung 8.2 ± 0,2 VerfÜgung 8.4 ± 0,1 VerfÜgung 8,9 ± 0,0 VerfÜgung 8,9 ± 0,1 VerfÜgung 8,8 ± 0,2
Total B. Bazillus deen
6.2 ± 0.3 VerfÜgung 7,9 ± 0,2 VerfÜgung 8.2 ± 0,1 VerfÜgung 8,5 ± 0,2 VerfÜgung 8.3 ± 0.3 VerfÜgung 7,9 ± 0,1 VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung Spore VerfÜgung 3,5 ± 0.6 VerfÜgung 3,5 ± 0,2 VerfÜgung 3,3 ± 0.6 VerfÜgung 3,4 ± 0.6 VerfÜgung 3,3 ± 0.6 VerfÜgung 3,4 ± 0.6 VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung FF 73 VerfÜgung Total Grof VerfÜgung 5,7 ± 0,1 VerfÜgung 8,5 ± 0,1 VerfÜgung 8.7 ± 0,1 VerfÜgung 9.0 ± 0,0 VerfÜgung 9.0 ± 0.3 VerfÜgung 8,9 ± 0.3 VerfÜgung total B. Bazillus deen
5,7 ± 0,1 VerfÜgung 8.1 ± 0,2 VerfÜgung 8.0 ± 0,1 VerfÜgung 8.3 ± 0,1 VerfÜgung 8.2 ± 0,1 VerfÜgung 8.3 ± 0,2 VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung Spore VerfÜgung 3,8 ± 0,2 VerfÜgung 3,9 ± 0,4 VerfÜgung 3,9 ± 0,4 VerfÜgung 4.0 ± 0,5 VerfÜgung 4.0 ± 0.3 VerfÜgung 4.5 ± 0,1 VerfÜgung Nee Produktioun vun enterotoxins nogewise gouf zu Lasagne Verde no 24 h duerch B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC 14579 a B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88, iwwerdeems Nhe Bierg fonnt gouf (an 1 aus 3 gefaart) am Fall vun B. Bazillus deen VerfÜgung FF 73. dat war wahrscheinlech wéinst der dono pH 5.5 vun Lasagne Verde an der éischter niddereg incubation Temperatur vun 22 ° C, wat fir enterotoxin Produktioun net optimal sinn [1]. Allerdéngs, preformed enterotoxins zu Liewensmëttel sinn net responsabel fir d'diarrheal Liewensmëttel Vergëftung, well si séier während gastrointestinal Trip deforméiert ginn [2]. VerfÜgung An kënschtlech VerfÜgung Simulatioun vun gastrointestinal Passage vun B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen
d'Lasagne Verde mat 7.0 bis 8.0 Logbuch CFU /mL B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen am permanente Wuesstem Phase knaschtege war fir eng kënschtlech VerfÜgung Simulatioun vun gastrointestinal Trip (Dorënner 1) ënnerworf. Iwwerliewe vun B. Bazillus deen VerfÜgung (&Si besteet; 1 Logbuch Reduktioun) war während de Mond Phase an déi éischt 30 min vun de Mo. Phase observéiert wann der gastric pH zwëschen 5.0 a 4.0 war. Duerno, wann d'gastric pH ënnert 4,0 ofgeholl, huet de vegetative Zellen séier am Mo Phase inactivated, deitlech als rapide Réckgank vun der total B. Bazillus deen VerfÜgung ziélt zu ähnleche Wäerter vun den B. Bazillus deen VerfÜgung spore zielt an der gastric kritt. Den B. Bazillus deen VerfÜgung total an spore zielt während der Ausléiser Phas nach ca.. 1.0 Logbuch CFU /ml fir B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC 14579, ca.. 2,5 Logbuch CFU /ml fir B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 an ca.. 3,5 Logbuch CFU /ml fir B. Bazillus deen VerfÜgung FF 73. Spannen, ofgeholl der spore zielt vun B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 am Mo. Phas während der leschter Stonn an déi dono pH. Zënter dem Ganzen B. Bazillus deen VerfÜgung Grof änneren rauszesichen, beweist dëse Initiatioun vun spore germination. B. Bazillus deen VerfÜgung ATCC 14579 zougedréckt onkompatibel spore Produktioun, déi zu de Flichte vun de Spore während den éischten zwee Simulatioune a Héich Zuelen (liicht virun der erkennen Limite vun 1.0 Spore /ml) während de leschten zwee Experimenter. Figur 1 Inactivation vun vegetative Zellen am dynamesch kënschtlech Simulatioun vun gastrointestinal Trip mat B. Bazillus deen ATCC 14579 (1), B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 (2) a B. Bazillus deen VerfÜgung FF 73 (3); den B. Bazillus deen VerfÜgung total (en) an spore (b) zielt sech duerch di op MYP alles ouni a mat Hëtzt Behandlung (10 min bei 80 ° C), respektiv, an der Lasagne Verde (□), de Mond Phas (◊), de Mo Phase (Δ) an den Ausléiser Phase (○); der Moyenne Wäerter an Liewesniveau deviation vun triplicate Experimenter op verschidden Deeg ginn. Nee erkennen Tester fir enterotoxins Nhe an Hbl VerfÜgung huet gesuergt, well kee Wuesstem während all vun der gastrointestinal Phasen observéiert gouf, déi eng Viraussetzung fir enterotoxin Produktioun ass [1 ]. VerfÜgung Bile Toleranz vun B. Bazillus deen
de Wuesstem an Iwwerliewe vun B. Bazillus deen VerfÜgung NVH 1230-88 war an der Präsenz vun verännerlech Bile Konzentratioune (Dorënner 2) geschoss. Op optimal Konditiounen, i.e. neutral TSB mat pH 7,2, den Effet vun Bile war Konzentratioun ofhängeg. Déi déifst Konzentratioun vun 1.0 g /L Oxgall e schéinen Populatioun Reduktioun vun ca.. 30% am Verglach mat der Kontroll (TSB ouni Bile) um Zäit 0 h. Desweideren, no 1 h war d'Statioune Grof mat ca. reduzéiert. 40% am Verglach mat der Konzentratioun an TSB mat 1.0 g /L Oxgall op 0 h. Allerdéngs, no 2 h Pateren an outgrowth vun de Rescht Zellen observéiert gouf, well den B. Bazillus deen VerfÜgung Konzentratioun un déi vun 0 h ähnlech war, an endlech no 3 h, déi der Bevëlkerung mat ca. fräi. 1 aloggen Verglach mat dass bei 0 h. Ee entschlof der Präsenz vun 5.0 g /L Oxgall eng permanent Réckgang zu 4,1 Logbuch CFU /ML op Duerchschnëtt (inactivation vun 88% vun de vegetative Zellen) an déi vun 10.0 g /L Oxgall zu 3,9 Logbuch CFU /ML (inactivation vun 94 %). Figur 2 Iwwerliewe vun B. Bazillus deen NVH 1230-88 an Tryptone Soja läschen (TSB) bei 37 ° C mat pH 7,2 (A) an pH 5.0 (B) mat variabelen Bile (Oxgall, Difco) Konzentratioune 0,0 g /L (wäiss ), 1.0 g /L (hell gro), 5.0 g /L (däischter gro) an 10.0 g /L (schwaarz). VerfÜgung An TSB um dono pH 5.0, ca.. 99% vun den B. Bazillus deen VerfÜgung inoculum war direkt vun der Bile aussetzt, onofhängeg vun der Bile Konzentratioun geplatzt konstant total B. Bazillus deen VerfÜgung zielt vun ca. inactivated. 3.0 Logbuch CFU /ML. Den B. Bazillus deen VerfÜgung inoculum tëscht 0,1 an 0,2% Spore Texter, sou konstant spore zielt uechter d'Experimenter kritt huet: 2,6 (± 0,2) aloggen Spore /ml am Ufank an 2,5 (± 0.3) aloggen Spore /ML um Enn. Alles dëst spore Populatioun bedenkt, opgebaut de vegetative Zellen nach d'Majoritéit (ca.. 60%) vun der 1% Bile resistent B. Bazillus deen VerfÜgung. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung D'Iwwerliewe vun vegetative Zellen während gastric Trip war ähnlech fir déi vun virdrun Studie mat hausgemaachte Gromper mëttelfristeg [3]. Während deenen Experimenter, ca.. 10% vun de vegetative Zellen erëmfonnt gastric Passage, déi meescht vun hinnen an der éischter gastric Ëmwandlung wann gastric pH zwëschen 5.0 a 4.0 war. Dës Zellen sech lieweg an de intestinal Zuchstreck iwwerginn an also tëscht 5.5 a 6.5 Logbuch CFU /ML B. Bazillus deen VerfÜgung an der intestinal Zuchstreck erwaart goufen. Allerdéngs, vill manner zielt, wat den B. Bazillus deen VerfÜgung spore zielt Bevölkerung, sech während den Ausléiser Phase kritt. Dat beweist, datt de vegetative Zellen déi gastric Trip erëmfonnt huet an der intestinal Ëmwelt inactivated. Gefouert incubation Experimenter zu TSB a verännerlech Konzentratioune vun Bile gewisen, datt d'Majoritéit (99.1%) vun vegetative Zellen am pH 5.0, onofhängeg vun der Bile Konzentratioun an der Gamme vun 1.0 bis 10.0 g Oxgall /L direkt no Bile aussetzt inactivated war. Zu der Konklusioun, vegetative B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen déi gastric Passage hannerléisst sech während der nächster Ausléiser Phase vun der bactericidal Effet vun Bile éliminéiert. VerfÜgung D'bactericidal Effet vun Bile op vegetative Bazillus deen B. VerfÜgung Zellen war pH ofhängeg. Op pH 7.0, war d'inactivation mat der Bile Konzentratioun soll, an de niddregsten Bile Konzentratioun (1 g /L) souguer Iwwerliewe a Wuesstem erlaabt. Am Géigesaz, um pH 5.0, Instant inactivation vun der Majoritéit (> 99%) vun vegetative Zellen Priedegt, onofhängeg vun der Bile Konzentratioun (an der Gamme vun 1.0 bis 10.0 g /L). Ähnlech zu eise Resultater, inactivation vun Listeria monocytogenes vun Bile Saieren war och um dono pH 5.5 [26] geklomm. Inactivation vun Bakterien duerch Bile ass gläicht, datt déi biologesch Saieren, déi souwuel besonnesch effektiv um niddereg pH. D'Mooss Seier dissociation konstant (pKa) vun unconjugated Bile Saieren ass ongeféier 5.1, mee unhéier mat glycine sénkt de pKa ca. un. 3,7 [27]. Unhéier mat taurine féiert zu engem nach méi pKa vun ca.. 1.5 [28]. Als Konsequenz, ass d'Majoritéit vun conjugated Bile Saieren dissociated a Moossinstrumenter am meeschte gestallt an intestinal pH Wäerter, nämlech 95,24% op pH 5.0 an 99,95% op pH 7.0 fir glycoconjugated Bile Saieren. Nëmmen d'unionized Formen vun Bile Saieren kann passively der Zell Membran Kräiz, iwwerdeems de dissociated a Moossinstrumenter conjugated Bile Saieren spezifesch aktiv Transport Systemer verlaangen [29]. Als Resultat, kann 4,67% vun der conjugated Bile Saieren gitt der B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen am pH 5.0, am Géigesaz zu nëmmen 0,03% op pH 7.0. Desweideren, läit d'intern pH vun liewensfäeg B. Bazillus deen VerfÜgung Zellen ëmmer zwëschen 6.0 a 7.5, je op de Baussegrenzen pH a Kultur Konditiounen [30]. No der undissociated Bile Saieren an d'Zellen VerfÜgung B. Bazillus deen diffused hunn, awer d'Majoritéit vun hinnen (99.50 zu 99,98%) intracellular dissociation, an spektakulärer intern sauer doraus. VerfÜgung Et gouf gemellt, datt verschidde Liewensmëttel Komponente der Bile fräi Toleranz vun B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen zu intestinal mëttelfristeg mat pH 6.5 [22]. Allerdéngs huet de Komposit Liewensmëttel Matrixentgasung Lasagne Verde net déi demokratesch gefouert Auswierkunge vun Bile op B. Bazillus deen VerfÜgung während eiser Experimenter op pH 5.0 mitigate. Et ass méiglech, datt Liewensmëttel Typ Effekter nëmmen bei enger méi optimal pH fir dës foodborne pathogen observéiert ginn, wann méi nozekommen Differenzen tëscht Behandlungen erwaart ginn. Am Géigesaz zu Zellen ze vegetative, B. Bazillus deen VerfÜgung Spore sech net duerch Bile inactivated , obwuel se an der intestinal mëttelfristeg net Somen hu 5 bis 10 g /L Oxgall mat. Dëst gläichzäiteg mat der Observatioun vun der dynamescher Simulatioun vun gastrointestinal Passage vun Spore [25], wou Spore während de Mond, Moo an Ausléiser Phase an nëmmen huet germination während der dialysis onberéiert goufen, wann d'Bile Konzentratioun vun 5.0 g /L Oxgall Gang war bis &Si besteet; 0,5 g /L an déi vun de Konte gefouert incubation Experimenter [31], wou bannent 2 h an intestinal Simulatioun mëttelfristeg germinated Spore 1.0 g /L Bile mat. Aner Studie confirméiert och, datt de Spore konnt sech zu surfen intestinal Flesseggassystem zu Somen an féngeren Bile wouvun (1.5 g Oxgall /L) [32] an datt d'Bile Resistenz vun B. Bazillus deen VerfÜgung Spore sech iwwerleeë fir datt vun vegetative Zellen [33 ]. Zu der Konklusioun, héich Bile Konzentratioune (≥ 5 g /L Oxgall) do erlaben net spore germination, iwwerdeems niddereg Bile Konzentratioune (&Si besteet; 5 g /L). Germination an outgrowth induce VerfÜgung Nieft hirer Wichtegkeet an Nährwert unzereegen an Tellur, Bile ass och eng wichteg antimicrobial Massa am Daarm [7]. Anormal héich intestinal Bile Niveauen an Leit mat biliary oder Liewer abnormalities oder mat Mängel an der enterohepatic Circulatioun geschéie kann, dee wéinst verstäerkte Iwwerliewe vun ingested an intestinal Bakterien déi Leit virun allem Rief d`Toilette maachen kann. Ausserdem, sin Bile Saieren endogenous laxatives, sou malabsorption vun Bile Saieren vun de klenge Daarm, Bile Niveauen am Uschloss kleng Daarm an de Colon gestiermt Virwaat, och op d`Toilette Resultat kann [34]. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung B. Bazillus deen VerfÜgung vegetative Zellen gedanzt gastrointestinal Passage ze iwerliewen als déi kënschtlech VerfÜgung Experimenter surfen, trotz dem héije inoculum Konzentratioun vun 7.0 bis 8.0 Logbuch CFU /ML an der ubauen vun der inoculum an der Komposit Liewensmëttel Matrixentgasung Lasagne Verde. D'Majoritéit vun vegetative Zellen war vun gastric Seier inactivated, an der Eos Zellen sech duerno duerch Bile während den Ausléiser Phase inactivated. Am Géigesaz, erëmfonnt VerfÜgung B. Bazillus deen Spore der Simulatioun vun gastrointestinal Passage an blouf Spore während encadréiere Konditioune fir germination (an outgrowth). Dofir, schwankt den infective Portioun fir B. Bazillus deen VerfÜgung wahrscheinlech no der gestallt Form verbrannt, manner fir d'héich resistent Spore ginn. Obwuel d'gastrointestinal Iwwerliewe vun de verschiddene analyséieren ähnlech war, variéiert hir sporulation Tendenz gefierwt, déi am Tour wichteg Konsequenzen fir d'gastrointestinal Iwwerliewe Potential an domat d'infective Portioun de verschiddene B. Bazillus deen VerfÜgung analyséieren huet. VerfÜgung Deklaratioune
Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller. 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf Auteuren 'original Datei fir Figur 1 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf Auteuren' original Datei fir Figur 2 Wettsträit Interessi VerfÜgung Mir, all Auteuren, erklären, dass mir keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung Auteuren 'Contributiounen VerfÜgung SC, MU an TVdW entworf Experimenter; SC a néirens standing der experimentell Aarbecht an Filteren de Resultater; SC geschriwwen de En mëttelalterlech Handschrëft vun MU, NB an TVdW. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Bestänneg niddereg Ausdrock vun hZip1 zu mucinous carcinomas vun der ovary, Colon, Moo an haett
• Exsanguinating iewescht gi bleeds wéinst Ongewéinlech Arteriovenous Malformation (AVM) vun Mo. an Mëlz: e Fall Rapport