Inaktyvacija Bacillus cereus vegetatyvinių ląstelių skrandžio rūgšties ir tulžies in vitro virškinimo tranzito metu

Inaktyvacija Bacillus cereus pervežimas vegetatyvinių ląstelių skrandžio rūgšties ir tulžies in vitro, pervežimas virškinimo tranzitą pervežimas tezės
Background Viesbutis The per maistą plintančių ligų patogenas Bacillus cereus metu
gali sukelti viduriavimą apsinuodijimo maistu iki gamybos enterotoksinams plonojoje žarnoje. Taigi už viduriavimo ligos sąlyga yra išlikimo per virškinimo ištrauka.
metodai
Vegetatyvinis ląsteles 3 skirtingų B. cereus
kamienai buvo auginami nekilnojamojo sudėtinio maisto matricos lakštiniai, lazanja verde ir jų išlikimo per vėlesnius modeliavimas virškinimo ištrauka buvo vertinamas naudojant in vitro
eksperimentus imituoti tranzitą per žmogaus viršutinio virškinimo trakto (iš burnos į plonosios žarnos).
rezultatai
nebuvo pastebėta vegetatyvinių ląstelių išlikimas nepaisant aukštų sėjimo kultūra lygių 7.0 8,0 prisijungti CFU /g, o įvairių potencialiai apsaugos maisto komponentų buvimą. Svarbūs frakcijos (apytiksl. 10% suvartojamos sėjimo kultūra) B. cereus
vegetatyvinių ląstelių išgyveno skrandžio ištrauką, bet vėliau jie buvo inaktyvuoja tulžies poveikio silpnai rūgščioje terpėje žarnyno (pH 5,0). Priešingai, žemos numeriai sporų dabarties (iki 4.0 žurnale sporos /G) parodė puikų išlikimą ir išliko gyvybingas sporas visame žmogaus virškinimo ištrauka modeliavimas.
Išvada
Vegetatyvinis ląsteles yra inaktyvuotų skrandžio rūgšties ir tulžies per virškinimo ištrauka , o sporos yra atsparios ir išgyventi. Todėl fiziologinis forma (vegetacinės ląstelių arba sporų) iš B. cereus
sunaudotą lemia tolesnį virškinimo išlikimą, taigi ir užkrečianti dozė, kuris, tikimasi, kad bus daug mažesnis sporų nei vegetatyvinių ląstelių. Jokių reikšmingų skirtumų virškinimo išgyvenimo galimybe buvo rastas tarp skirtingų kamienų. Tačiau nemažą įtampą kintamumas buvo pastebėtas sporuliacija tendencija augimo laboratorinių vidutinio ir maisto, kuris turi svarbių pasekmių virškinimo išlikimo potencialas skiriasi B. cereus
padermių metu.
Raktiniai žodžiai
Bacillus cereus
tulžies in vitro
modeliavimas virškinimo ištrauka faktai
B. cereus
gali sukelti vėmimą ir viduriavimą ir apsinuodijimo maistu iki gamybos Resp. vėmimą (cereulide) ir viduriavimo toksinai (ne hemolizinė enterotoksino (nhe), haemolysin BL (HBL), citotoksinas K (CytK), ir tt) [1]. Priešingai nei labai stabilios toksino cereulide, enterotoksinai lengvai skaldo rūgšties ir virškinimo fermentų (proteazės) ir tokiu būdu iš anksto nustatytų formų enterotoksinams maisto neišlaiko jų toksiškumas per virškinimo ištrauka [2]. Todėl už viduriavimo apsinuodijimo maistu sąlyga yra enterotoksiną gamybą B. cereus
plonojoje žarnoje, todėl buvo tiriama virškinimo išlikimo vegetatyvinio B. cereus
. Ji anksčiau buvo parodyta, kad maždaug. 10% augalinių ląstelių išgyveno skrandžio ištrauka [3]. Be to, išlikę bakterijos susiduria su tulžimi į dvylikapirštę žarną, proksimalinio dalis plonosios žarnos spindį.
Tulžies daugiausia sudaro tulžies rūgščių (maždaug 72% visų lipidų), be to, fosfolipidų (apytiksl. 24% ) ir cholesterolio (maždaug. 4%) [4]. Žmonėms, šie tulžies rūgščių sudaro daugiausia iš cholio rūgšties (tarp 50% ir 80%) ir chenodeoksicholio rūgšties (tarp 20% ir 50%) [5, 6]. Jie yra sintetinamas kepenyse iš cholesterolio ir konjuguoto su glicinas (maždaug. 75%) arba taurino (maždaug. 25%), su konjugacija santykis priklausomai nuo be kitų veiksnių dietos [6, 7]. Sekrecijos tulžies suaktyvinamas pagal riebalų ir rūgšties išleidimo iš skrandžio į dvylikapirštės žarnos, dėl kurio susidaro nuo 7 iki 15 mM tulžies druskų plonosiose žarnose po valgio, atitinkantis su 5 iki 10 g Oxgall /L [7-10]. Deconjugation tulžies rūgščių skaičius, vietinių žarnyno bakterijų dažniausiai pasireiškia, distaline klubinės žarnos, kur maždaug. 95% tulžies rūgščių rezorbuoja, iš kurių maždaug. 15% yra nekonjuguoto [7, 10]. Abi konjuguoti ir nekonjuguota tulžies rūgštys yra absorbuojamas pasyvios difuzijos palei visą žarnų, bet šis procesas yra efektyvesnis už nekonjuguoto tulžies rūgščių. Be to, yra tam tikrų veikliųjų transporto sistemos yra pateikti į distalinio klubinės žarnos, kuri yra efektyviau konjuguotų tulžies rūgščių įsisavinimą. Po to, kai absorbciją iš žarnyno, tulžies rūgštys yra transportuojami patenka į kepenis kraujyje, reconjugated ir vėl išskiriamas į tulžies pūslės. Tai perdirbimo procesas tulžies rūgščių, vadinamas enterohepatinę cirkuliaciją.
Fiziologinį vaidmenį tulžies rūgščių yra padidinti riebalus tirpumą ir palengvinti jo degradaciją ir absorbciją. Dėl savo ploviklių savybių, tulžies rūgštys taip pat pakeisti ląstelių membranas ir tokiu būdu turėti citotoksinių ir baktericidinėmis poveikį, pastebimų padidėjusi membranos takumas ir pralaidumas [11-14]. Priklausomai nuo tulžies koncentraciją, sutrikęs ląstelių membranos vientisumo įvyksta beveik akimirksniu, todėl ląstelių nuotėkio ir mirtis, arba lėčiau ir subtiliai keičiant membranos pralaidumą ir sklandumą, kritinių baltymų aktyvumą ląstelių membranos ir membranos hidrofobiškumo [15 ]. Be sunaikinimo bakterijų ląstelių membranos vientisumą, tulžies taip pat sukelia DNR pažaidas, denatūravimo ir misfolding baltymų, todėl bakterijų mirties [16].
Gram-teigiamų bakterijų linkę būti jautresni tulžies nei Gram- neigiamas bakterijas, bet tulžies paklaida labai padermė specifinis, todėl apibendrinti atskaitomybė rūšių yra neįmanoma [17-19]. Nepaisant baktericidinis poveikis tulžies, kai mikroorganizmai sukūrė atsparumą tulžies taikant indukcijos tulžies metabolizmą fermentų ir transporto sistemas arba pakeisti membranos pralaidumo, sklandumą arba mokestį. Kai žarnyno patogenų gali net priklauso nuo tulžies kaip priimančioji signalas virulentiškumo reglamentą. Pavyzdžiui, salmonelių serotipas enterica typhimurium turintis daugiskaitos ištekėjimo siurblio AKrabo už tulžies pašalinimo ir gabenimo per išorinės membranos [20]. Be to, invazija į šeimininko epitelinių ląstelių šios bakterijos yra sukeliama sumažino tulžies koncentraciją, todėl po tranzito į distalinio klubinės žarnos arba į gleivių sluoksniu [21].
Bendro praryti maisto yra svarbus veiksnys antibakterinis veikla tulžies žarnyne. Tulžies inaktyvacijai bakterijų įtakoja maisto komponentų buvimas, kuris gali sukurti apsaugines mikroaplinkos ar surišti tulžies. Pavyzdžiui, maksimalus tulžies koncentracija toleruoja B. cereus
augimo žarnyno terpėje metu buvo 3 g /l kiaulių tulžies kai žirnių sriuba buvo papildytas, o tik 0,9 g /l ir 0,6 g /l tulžies buvo toleruojama dalyvaujant pieno ir maisto nesant, atitinkamai [22]. Taip pat Lactobacillus curvatus, kad maisto matricos, būtent mėsos buvimas, padidino savo tulžies toleranciją, o vėliau jo virškinimo išlikimo [23]. Be to, tulžies tolerancija Bifidobacterium breve buvo sustiprintas sojos baltymų [24].
Šiame tyrime buvo tiriami ir susijęs su baktericidinį vaidmenį tulžies virškinimo išlikimo vegetatyvinio B. cereus pervežimas ląsteles. B. cereus
sėjimo kultūra buvo auginama sudėtinio maisto matricos lazanijos Kyšulio prieš in vitro pervežimas modeliavimas virškinimo ištrauka įtraukti visas galimas apsauginį poveikį maisto daleles virškinimo išlikimo B. cereus
.
medžiagos ir metodai
B. cereus
padermių auginimo ir suskaičiuojamos Viesbutis The B. cereus
padermių ATCC 14579, NVH 1230-88 ir FF 73 (1 lentelė), buvo auginami ir vėliau persėjamos 10 ml triptono sojos buljono (TSB, OXOID) 24 h 30 ° C temperatūroje. Po centrifugavimo ir susispenduotų 1 ml Fiziologinis peptono druskos tirpalas (PPS, 8,5 g /l NaCl (Fluka) ir 1 g /l neutralizuoti bakteriologinius leptono (OXOID)), 830 pL iš subkultūros buvo pasėta apie 83 g lazanijos verde (perkamos vietos prekybos centras) į Stomacherį maišus ir inkubuojami 24 h 22 ° C temperatūroje. Mažmeninė lazanija Verde pirkta vietos prekybos centre, kuriame esančios vidutiniškai 4,7 log KSV /g viso bakterijos (standartinis nuokrypis 1,3 log ksv /g, analizė 11 skirtingų produktų per 6 mėnesių laikotarpį) ir ≤ 2,0 log KSV /g B . cereus
. Vidutinis pH šio maisto produkto buvo 5,52 (standartinis nuokrypis ± 0,06) .table 1 iš virškinimo trakto ištrauka modeliavimas buvo atliekamas su trimis skirtingais B. cereus padermių: tipo padermės B. cereus ATCC 14579, klinikinė izoliatas B. cereus NVH 1230 -88 nuo viduriavimo apsinuodijimo maistu protrūkį ir maisto išskirto B. cereus FF 73 iš atitinkamos maisto matricos, ty lazanijos Kyšulio pervežimas B. cereus padermė
Kilmės

Mininal augimo temperatūrą ( ° C),
HBL gamyba
nhe gamybos
ATCC114579
tipo padermės
> 10
+
+
NVH2 1230 -88
klinikiniai (žmogaus išmatos)
8
+ -
FF3 73
maisto (lazanija Verde)
10
+
+
1ATCC = Amerikos tipas kultūra kolekcija, JAV; 2NVH = Norvegijos mokyklos veterinarijos mokslo, Oslas, Norvegija; 3FF = Flandrijos maisto rinkimas, Belgija.
Bendras skaičius ir B. cereus
skaičius lėmė dengimo atitinkamas skiedinius PGS ant triptono sojos agaras (TSA) ir Manitolis-kiaušinių trynių-Polimiksinas B agaro (MYP .., atitinkamai Spore koncentracija buvo nustatoma pagal dengimo po šildymo 80 ° C temperatūroje 10 min
in vitro
modeliavimas virškinimo ištrauka Viesbutis The dinamišką virškinimo imitavimo eksperimento sudaro penki etapai: 1) burnos, 2) skrandis, 3) dvylikapirštės žarnos, 4) dializės ir 5) klubinė žarna [25]. Trumpai tariant, lakštiniai verde, kurio sudėtyje yra B. cereus
sėjimo kultūros (83 g) buvo sumaišyti su seilių terpės (56 ml, pH 6,5, 37 ° C) stomaching 1 min (Stomacherį Lab Blender 400, Seward) ir inkubuojami 10 min prieš perduodant į skrandį laivo. Skrandžio pH sumažėjo nuo 5,0 iki 3,0 per pirmąsias 90 min ir iki 2,0 per pastarąjį 90 min, nuolat pridėtinės rūgšties (0,28 M HCl). Skrandžio išsituštinimo buvo pradėtas 30 min po to, kai skrandžio etapo 5 frakcijomis štapelio siurbimo pradžios tokiu būdu, kad maždaug. 25% skrandžio turinio buvo pašalintas po 1 h, 50% po 2 h ir 75% po to, kai 3 h. Trupmeninė skrandžio ištuštinimą lėmė 150 min sutapimu tarp skrandžio ir dvylikapirštės žarnos etapo, kuriame B. cereus
sėjimo kultūra buvo padalintas į smulkesnes grupes, kurie buvo veikiami įvairiais inkubacijos laikas skrandyje etapą (min. 30 min, maks . 180 min) ir dvylikapirštės žarnos etapas (min. 10 min 160 maks. min.) Žarnyno laivas buvo anaerobinis (praplauti azoto dujomis) ir jame žarnyno terpę su 10,0 g /l tulžies (Oxgall, Difco) ir pH pH buvo automatiškai reguliuoti pH kontrolerio (FERMAC 260, Electrolab) pasilikti esant pH 5.0 metu pirmasis 45 min ir, esant pH 6,0 per pastarąjį 115 min. Ir dvylikapirštės žarnos opa etapo pabaigoje visiškai skrandžio turinys buvo perkeltos ir tulžies koncentracija buvo sumažintas skiedžiant iki 5 g /l. kitame etape metu, ≥ 90% šios tulžies buvo pašalintas dializės metu ir konkuruoja su žmogaus žarnyno bakterijų buvo imituoti galutinio klubinės žarnos etapo metu. Tačiau po pašalinimo B. cereus
vegetatyvinių ląstelių, virškinimo eksperimentas buvo sustabdytas, todėl eksperimentai, susidedančių iš trijų pirmųjų tik etapais. Eksperimentai buvo atliekami tris kartus su kitu B. cereus pervežimas užkrato skirtingomis dienomis.
Tulžies tolerancija B. cereus
B. cereus pervežimas kamieno NVH 1230-1288 buvo auginami, o vėliau persėti 10 ml TSB 24 h esant 30 ° C temperatūroje. Tada 100 pL iš subkultūros paskiepyta stiklo vamzdelių, kurių sudėtyje yra 9,9 ml TSB ir inkubuojamos 37 ° C temperatūroje. Priemonės, kuriomis TSB pH buvo arba neutralus (pH = 7,2) arba rūgštus (pH = 5,0), ir papildomai su įvairaus tulžies koncentracijos, iš kurios atsirado galutinė koncentracija būtų 0,0 (TSB reguliuojamas), 1,0, 5,0 ir 10,0 g /l oxgall (Difco ). Vegetatyvinė B. cereus pervežimas ląstelių išlikimas buvo įvertintas dengimo atitinkamas diltutions PGS ant TSA. Buvo nustatyta
gaminti toksinus
gamyba enterotoksinams nhe ir HBL analizuojant 1 ml mėginius po filtravimo (0,2 mkm švirkštą filtrai, WHATMAN) su Duopath® cereus enterotoksinams (Merck) pagal gamintojo nurodymus.
rezultatai
augimo B. cereus
lazanijos Kyšulio Viesbutis The lazanijos Kyšulio buvo pasėta su maždaug , 6,0 KSV /g, B. cereus parsisiųsti ir inkubuojami 24 h 22 ° C temperatūroje, kad gautų labai koncentruotas užkrato vegetatyvinio B. cereus
ląstelių, auginamų sudėtinio maisto matricos su maistu mikrofloros imituojant saugojimo užteršto lazanija ne kambario temperatūra. Tai lėmė, kad lazanijos verde, kurių sudėtyje yra apytikriai. 8,5 log ksv /g viso bakterijas, kurios B. cereus
formavę 7.0 iki 8,0 KSV /g, priklausomai nuo kamieno (2 lentelė). B. cereus
NVH 1230-88 parodė stabilią sporų koncentracija 3,5 log sporų /g, kilusi iš TSB sėjimo kultūra. Priešingai, papildoma sporuliacija buvo nuo maždaug aišku. 4,0 log sporos /g iki 4,5 log sporų /g po 30 h B. cereus pervežimas FF 73 Pažymėtina, B. cereus ATCC
14579 negamino po 30 h inkubacijos jokių sporas, tik labai mažas kiekis ( 3,0 sporos /g) pastebėtas tik 1 iš 3 kartotinių maišus. Po skiepijimo ir inkubatorių, lazanija Verde buvo taip labai užterštas B. cereus pervežimas vegetatyvinių ląstelių (7,0 iki 8,0 žurnalas KSV /g) stacionarios augimo fazės ir mažomis sumomis B. cereus
sporų (iki 4,0 prisijunkite sporos /g) .table 2 Augimas iš trijų skirtingų B. cereus padermių maisto matricos iki modeliavimas virškinimo ištrauka; vidutinės vertės nepriklausomų eksperimentų trimis egzemplioriais, išreikštų žurnalo KSV /g ± standartinis nuokrypis yra pateikti
B. cereus padermė
laikas (h)
0

22
24
26
28
30
B. cereus
ATCC14579
viso skaičius
5,8 ± 0,1 pervežimas 8,3 ± 0,6
8,4 ± 0,3
8,8 ± 0,2 0,3
8,9 0,2
± Viso
8,8 ± B. cereus
5,7 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,7 ± 0,3
7,2 ± 0,3 pervežimas 7,0 ± 0,2 pervežimas B. cereus sporos

< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
2,3 ± 0,6
B. cereus
NVH 1230-88
viso skaičius
5,9 ± 0,1 pervežimas 8.2 ± 0.2
8,4 ± 0,1
8,9 ± 0,0
8,9 ± 0,1
8,8 ± 0,2
Iš viso B. cereus
6,2 ± 0,3
7,9 ± 0,2
8,2 ± 0,1
8,5 ± 0,2
8,3 ± 0,3 pervežimas 7,9 ± 0,1 pervežimas B. cereus sporos

3,5 ± 0,6
3,5 ± 0,2
3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
B. cereus
FF 73
viso skaičius
5,7 0,1
± 8,5 0,1 ± 8,7
0,1
± 9,0 0,0 ± 9,0 pervežimas ± 0,3
8,9 ± 0,3
Iš viso B. cereus
5,7 ± 0,1
8,1 ± 0,2
8,0 ± 0,1
8,3 ± 0,1
8,2 ± 0,1 pervežimas 8,3 ± 0,2 pervežimas B. cereus sporos

3,8 ± 0,2
3,9 ± 0,4
3,9 ± 0,4
4,0 ± 0,5
4,0 ± 0,3
4,5 ± 0,1
buvo aptiktas Nr enterotoksinams gamyba į lazanijos Kyšulio po 24 h B. cereus ATCC pervežimas 14579 ir B. cereus pervežimas NVH 1230-88, o nhe buvo sporadiškai aptiktas (į 1 iš 3 pakartojimais) į B. cereus
atveju FF 73. Tai buvo tikriausiai dėl to, kad yra rūgštus 5.5 lazanijos verde ir gana mažos inkubacijos temperatūra 22 ° C, kuris yra ne optimalus enterotoksinas gamybos [1]. Tačiau iš anksto nustatytų formų enterotoksinai maisto neatsako už viduriavimo apsinuodijimo maistu, nes jie sparčiai degradavo per virškinimo ištrauka [2].
In vitro
modeliavimas virškinimo ištrauka iš B. cereus pervežimas vegetatyvinių ląstelių
apie lazanija Verde užterštas 7,0 iki 8,0 žurnalas KSV /ml B. cereus pervežimas vegetatyvinių ląstelių stacionarios augimo fazėje buvo atliktas in vitro
modeliavimas virškinimo ištrauka (1 paveikslas). buvo pastebėtas burnos fazės ir pirmą 30 min skrandžio etapo metu, kai skrandžio pH buvo tarp 5,0 ir 4,0; išlikimo B. cereus
(1 log sumažinimas <). Vėliau, kai skrandžio pH sumažėjo žemiau 4.0, vegetatyvinės ląstelės buvo greitai inaktyvuoja skrandyje etape pastebimas kaip sparčiai mažėja visos B. cereus pervežimas grafų į panašių vertybių B. cereus pervežimas sporų skaičiaus į skrandžio laivai. B. cereus
visų ir sporų skaičiaus dvylikapirštėje etape liko maždaug. 1,0 prisijungti KSV /ml B. cereus ATCC
14579, apytiksl. 2,5 prisijungti KSV /ml B. cereus pervežimas NVH 1230-88 ir maždaug. 3,5 prisijungti KSV /ml B. cereus pervežimas FF 73 Įdomu tai, kad skrandžio etape per paskutinę valandą, ir dauguma rūgštaus pH sporų skaičius B. cereus pervežimas NVH 1230-88 sumažėjo. Kadangi bendras B. cereus
skaičius nepasikeitė, tai reiškia, inicijuoti sporų sudygimo. B. cereus ATCC
14579 parodė nenuosekli sporų gamybą, todėl sporų nėra per pirmuosius dvejus modeliavimas ir labai mažas kiekis (šiek tiek virš aptikimo ribos 1,0 sporų /ml) per pastaruosius dvejus eksperimentams. metu in vitro modeliavimas virškinimo ištrauka B. cereus ATCC 14579 (1), B. cereus pervežimas NVH 1230-88 (2) ir B. cereus pervežimas FF 73 dinamiška 1 pav nukenksminimą vegetatyvinių ląstelių (3); B. cereus
viso (a) ir sporų (b) skaičius lėmė dengimo ant MYP be ir su terminio apdorojimo (10 min 80 ° C), atitinkamai, į lazanijos Verde (□), burnos etape (◊), skrandžio etapas (Δ) ir dvylikapirštės žarnos etapas (○); vidutiniai dydžiai ir standartinis nuokrypis arba trijų eksperimentų skirtingomis dienomis pateikti.
Nėra nustatymo testus enterotoksinams nhe ir HBL buvo atliekamos, nes nepastebėta augimas per bet kuriuos iš virškinimo trakto etapais, kurie yra būtina sąlyga enterotoksiną gamybos [1 ].
tulžies tolerancija B. cereus
augimo ir išlikimo B. cereus pervežimas NVH 1230-88 buvo nustatomas atsižvelgiant į įvairaus tulžies koncentracijos (2 paveikslą) buvimą. Tuo optimaliomis sąlygomis, t.y. neutralioje TSB su pH 7.2, tulžies poveikis buvo nuo dozės priklausomas. Mažiausia koncentracija 1,0 g /l Oxgall lėmė gyventojų mažinimo apytiksl. 30%, palyginti su kontrole (TSB be tulžies) laiku 0 h. Be to, po 1 h, gyvybinga skaičius buvo sumažintas su maždaug. 40%, lyginant su į TSB koncentracijos su 1,0 g /L Oxgall esant 0 h. Tačiau, po to, kai 2 h panaudojimo ir atauga likusių ląstelių buvo pastebėtas, dėl to, kad B. cereus
koncentracijos buvo panašus į 0 h, ir pagaliau po 3 h, populiacija išaugo su maždaug. 1 log, palyginti su 0 h. Tačiau 5.0 g buvimas /l Oxgall sukėlė nuolatinį nuosmukį iki 4,1 log KSV /ml vidutiniškai (nukenksminimo 88% vegetatyvinių ląstelių), ir kad iš 10,0 g /l Oxgall iki 3,9 log KSV /ml (nukenksminimo 94 %). 2 pav Išgyvenimo B. cereus NVH 1230-1288 Triptono sojų sultinio (TSB) 37 ° C pH 7.2 (A) ir pH 5,0 (B) su įvairaus tulžies (Oxgall, Difco) koncentracijos: 0,0 g /l (baltos spalvos ), 1,0 g /l (šviesiai pilka), 5,0 g /l (tamsiai pilka) ir 10,0 g /l (juodas).
Be TSB rūgštaus pH 5.0, apytiksl. 99% B. cereus pervežimas sėjimo kultūra buvo iš karto inaktyvuoja tulžies poveikio, neatsižvelgiant į tulžies koncentraciją, todėl nuolat viso B. cereus
skaičiai, apytikriai. 3,0 prisijungti CFU /mL. B. cereus
sėjimo kultūra esanti tarp 0,1 ir 0,2% sporų, todėl nuolat sporų skaičius buvo gauti visoje eksperimentas: 2,6 (± 0,2) prisijungti sporas /ml pradžioje ir 2,5 (± 0,3) prisijungti sporas /ml ne galas. Atsižvelgdama į tai sporų gyventojus į, vegetatyvinės ląstelės vis dar sudarė daugumą (apytiksl. 60%), kad 1% tulžies atsparus B. cereus
.
Diskusijos
vegetatyvinių ląstelių išgyvenimą metu skrandžio ištrauka buvo panašus kaip ir ankstesniais tyrimų su bulvių koše terpėje [3]. Per tuos eksperimentus, apytiksl. 10% Augaliniame ląstelių išliko skrandžio praėjimą, dauguma jų pirmoje skrandžio frakcija, kai skrandžio pH buvo tarp 5,0 ir 4,0. Šios ląstelės buvo perkelti gyvas į žarnyno laivo ir taip tarp 5,5 ir 6,5 žurnalas KSV /ml B. cereus
buvo tikimasi, žarnyno laivo. Tačiau daug mažesnės skaičiuoja, kurie suderino B. cereus
sporas skaičių, buvo gauti dvylikapirštėje etape. Tai rodo, kad augalinės ląstelės, kurie išliko skrandžio praėjimą buvo inaktyvuota žarnyno aplinkoje. Partijos inkubavimo eksperimentai TSB ir kintantys koncentracija tulžies parodė, kad didžioji dalis (99,1%) augalinės ląstelių inaktyvuodavo iš karto po to, kai tulžies poveikio, esant pH 5.0, nepriklausomai nuo to, tulžies koncentracija yra 1,0 intervale iki 10,0 g Oxgall /L. Taigi, augalinė B. cereus
ląstelių, kurios išgyveno skrandžio ištrauka vėliau dvylikapirštės žarnos etapo, kurį baktericidinį poveikį tulžies metu buvo pašalinta.
Baktericidinį poveikį tulžies ant vegetatyvinio B. cereus
ląstelės buvo priklausoma tel. Esant pH 7,0, nukenksminti buvo susietas su tulžies koncentraciją, ir mažiausia tulžies koncentracija (1 g /l), net leidžiama išlikimo ir augimo. Priešingai, esant pH 5.0, momentinės inaktyvacija daugumos (> 99%) vegetatyvinių ląstelių įvyko, nepriklausomai nuo tulžies koncentraciją (į 1,0 intervale iki 10,0 g /l). Panašus į mūsų rezultatus, inaktyvacija Listeria monocytogenes pagal tulžies rūgščių taip pat buvo labai padidėjo rūgštaus pH 5,5 [26]. Inaktyvacija bakterijose, tulžies yra panašus į tą, kurią organinių rūgščių, kurios yra tiek ypač veiksminga esant mažam pH. Logaritminis rūgšties disociacijos konstanta (pKa) ir netiesioginis tulžies rūgščių yra maždaug 5,1, bet konjugacijos su glicino mažina pKa maždaug. 3,7 [27]. Konjugacijos su taurino veda prie dar mažiau pKa maždaug. 1,5 [28]. Kaip pasekmė, konjuguotų tulžies rūgščių dauguma atskirti ir jonizuotas daugelyje fiziologinių ir žarnyno pH, ty 95,24%, kai pH 5,0 ir 99,95%, kai pH 7,0 glycoconjugated tulžies rūgščių. Tik į profesines formos tulžies rūgščių gali pasyviai kirsti ląstelių membraną, o atsieta ir jonizuoto konjuguoto tulžies rūgštys yra būtinos specialios aktyvių transporto sistemas [29]. Kaip rezultatas, 4.67% iš konjuguotų tulžies rūgščių gali patekti į B. cereus
ląstelių, esant pH 5,0, priešingai tik 0,03%, esant pH 7,0. Be to, vidaus pH gyvybinga B. cereus
ląstelių visada yra tarp 6,0 ir 7,5, priklausomai nuo išorės pH ir kultūros sąlygų [30]. Po neskaidyta tulžies rūgštys išsklaidytas į B. cereus
ląstelių, iš jų (99,50 iki 99,98%) dauguma praeina intraląstelinę disociacija, todėl mirtiną vidaus rūgštėjimo.
Buvo pranešta, kad tam tikrų maisto komponentų padidino tulžį tolerancija B. cereus
Vegetatyvinis ląsteles žarnyno terpėje su pH 6,5 [22]. Tačiau sudėtinis maisto matrica lazanija Verde nebuvo sušvelninti žalingą tulžies apie B. cereus
metu mūsų eksperimentų, kurio pH 5,0. Tai yra įmanoma, kad maisto produkto rūšį poveikis pastebėtas tik kai labiau optimalus pH šį maistą plintančių ligų sukėlėjų, kai tikimasi ryškesni skirtumai tarp gydymo.
Priešingai vegetacinės ląsteles B. cereus
sporų nebuvo inaktyvuoja tulžies , nors jie nesudygo žarnyno terpėje, turinčioje nuo 5 iki 10 g /l Oxgall. Tai sutampa su dinaminės modeliavimas virškinimo ištrauka iš sporų [25], kurioje sporos per burnos, skrandžio ir dvylikapirštės žarnos etape buvo nepakitusi, o tik pradėjo dygimą per dialize, kai tulžies koncentracija buvo sumažinta nuo 5,0 g /l Oxgall pastabas < 0,5 g /l ir tie, iš partijos inkubacijos eksperimentų [31], kur sporos daiginti per 2 h žarnyno modeliavimo terpėje, turinčioje 1,0 g /l tulžį. Kiti tyrimai taip pat pranešė, kad sporos galėjo sudygti ir daugintis imituojant žarnų skystyje, kuriame yra tulžies (1,5 g Oxgall /l) [32] ir kad tulžies varža B. cereus pervežimas sporų buvo pranašesnis, kad vegetatyvinių ląstelių [33 ]. Taigi, didelės tulžies koncentracijos (≥ 5 g /l Oxgall) neleidžia sporų dygimą, o mažai tulžies koncentracijos (< 5 g /l). Indukuoti daigumas ir išaugą
Be jo svarbą maistinių medžiagų virškinimą ir absorbciją, tulžies taip pat yra svarbus antimikrobinis junginys žarnyne [7]. Nenormalūs žemos žarnyno tulžies lygiai gali atsirasti žmonių, turinčių tulžies ar kepenų sutrikimų ar trūkumais enterohepatinio apyvartą, kuri gali lemti tuos žmones ypač jautrūs viduriavimas dėl glaudesnio išlikimo praryti ir žarnyno bakterijos. Be to, tulžies rūgštys yra endogeninių vidurių laisvinamieji preparatai, todėl absorbcijos sutrikimas, tulžies rūgščių iš plonosiose žarnose, todėl padidinti tulžies lygius galiniame plonosiose žarnose ir gaubtinės žarnos, taip pat gali sukelti viduriavimas [34].
Išvada
B. cereus
vegetacinės ląstelės negalėtų išgyventi virškinimo ištrauką kaip imituojamas in vitro pervežimas eksperimentą, nepaisant didelio sėjimo kultūros koncentracija 7,0 iki 8,0 log KSV /ml, o sėjimo kultūros auginimo sudėtiniai maisto matricos lazanijos Verde. Iš vegetatyvinių ląstelių dalis buvo suardo skrandžio rūgštyje, o išlikę ląstelės vėliau buvo inaktyvuoja tulžies dvylikapirštėje etape. Priešingai, B. cereus sporos
išgyveno virškinimo ištrauka modeliavimas ir liko sporas per nepalankių sąlygų sudygti (ir atauga). Todėl užkrečianti dozė B. cereus
tikriausiai skiriasi atsižvelgiant į fiziologinę forma suvartojamos, yra mažesnis už labai atsparių sporų. Nors virškinimo išgyvenamumas buvo panašus skirtingų štamų, jų sporuliacija tendencija skyrėsi, o tai savo ruožtu daro didelį poveikį virškinimo išlikimo potencialą ir tokiu būdu užkrečianti dozė skirtingose ​​B. cereus pervežimas padermių.
Deklaracijos
autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf Autorių originalus failas 1 pav 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf Autorių originalaus failo 2 pav konkuruojančių interesų
Mes, visi autoriai, pripažinti, kad neturime konkuruojančius interesus.
Autoriai įnašai
AB, MU ir TVdW sukurta eksperimentus; AB ir SH atlikti eksperimentinį darbą ir tvarkomi rezultatus; AB parašė rankraštį pagelbėtų MU, NB ir TVdW. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Patvarūs mažas išraiška hZip1 į mucinous karcinoma kiaušidžių, storosios žarnos, skrandžio ir lung
• Exsanguinating viršutinės virškinimo kraujuoja dėl neįprastų arterioveninės apsigimimų (AVM) skrandžio ir blužnies: byla report