Inaktivacija Bacillus cereus vegetativnih celic z želodčno kislino in žolča v in vitro prebavil transit

inaktivacijo Bacillus cereus
vegetativnih celic z želodčno kislino in žolča v in vitro
prebavil tranzitu
Abstract
Ozadje
PRENAŠA s hRANO patogen Bacillus cereus
lahko povzroči driske zastrupitev s hrano s proizvodnjo enterotoksinih v tankem črevesju. Predpogoj za drisko bolezen je tako preživetje v prebavnem prehoda.
Metode
vegetativne celice 3 različne B. cereus
so sevi gojijo v realnem kompozitne matrice s hrano, lazanje verde, in njihovo preživetje v poznejših simulacijo prebavil prehod je bila ocenjena s pomočjo in vitro
poskuse za simulacijo prehoda skozi prebavni trakt človeškega zgornjem (od ust do tankega črevesa).
Rezultati
niso opazili preživetje vegetativnih celic, kljub visoki stopnji inokulum 7,0 do 8,0 log CFU /g in prisotnost različnih morebitnih zaščitnih živilskimi komponentami. Pomembne frakcije (pribl. 10% porabljene inokuluma) z B. cereus
vegetativnih celic preživela želodčne prehod, vendar so se nato aktivira s izpostavljenosti žolča v rahlo kislem črevesni mediju (pH 5,0). V nasprotju s tem pa je majhno število prisotnih spor (do 4,0 log spor /g) je pokazala odlično preživetje je ostala izvedljive spor celotnem gastrointestinalnem simulacijo prehoda.
Zaključek
vegetativne celice so inaktivirani z želodčno kislino in žolča v prebavnem prehodom , medtem ko spore so odporni in preživeti. Zato je fiziološko obliko (vegetativnih celic ali spor) za B. cereus
porabljene določi naknadno v prebavilih preživetje in s tem infektivni odmerek, ki naj bi bila precej nižja za spor kot vegetativnih celic. Ni velike razlike v prebavnem sposobnosti za preživetje, je bilo ugotovljeno med različnimi sevi. Vendar pa je bila precej sev variabilnost, opažena pri sporulaciji težnjo med rastjo v laboratorijskem gojišču in hrano, ki ima pomembne posledice za možnosti prebavnem preživetje različnih B. cereus
sevov.
Ključne besede
Bacillus cereus
Bile vitro
simulacija v prebavilih prehod Ozadje
B. cereus
lahko povzroči bljuvanje in drisko in zastrupitev s hrano s proizvodnjo oz. bljuvalo (cereulide) in driska toksini (non-hemolitični enterotoksin (NHE), haemolysin BL (HBL), citotoksin K (CytK), itd) [1]. V nasprotju z izredno stabilne toksina cereulide so enterotoksini zlahka razgradijo s kislino in prebavnih encimov (proteaze) in s tem oblikovalne enterotoksini v hrani ne ohranijo svoje toksičnosti v prebavilih prehodom [2]. Zato je predpogoj za drisko zastrupitev s hrano je enterotoksina proizvodnjo B. cereus
v tankem črevesu, tako da gastrointestinalni preživetje vegetativnega B. cereus
bila raziskana. Tako je bilo ugotovljeno, da je cca. 10% od vegetativnih celic preživelo želodca prehod [3]. Naslednji so preživele bakterije soočen z žolča v lumen dvanajsternika, proksimalni del tankega črevesa.
Žolčne glavnem sestoji iz žolčnih kislin (približno 72% celotnih lipidov), poleg fosfolipidov (pribl. 24% ) in holesterola (pribl. 4%) [4]. Pri ljudeh, so ti žolčnih kislin sestavljena v glavnem iz holne kisline (med 50% in 80%) in henodeoksiholinske kisline (med 20% in 50%) [5, 6]. So sintetiziran v jetrih iz holesterola in konjugirano glicinu (pribl. 75%) ali tavrin (pribl. 25%), z razmerjem konjugacije glede na dieti med drugimi faktorji [6, 7]. Izločanje žolča sproži maščobe in kislim izpustitvi iz želodca v dvanajsternik, kar ima za posledico 7 do 15 mM žolčnih soli v tankem črevesu po obroku, kar ustreza 5 do 10 g /L Oxgall [7-10]. Deconjugation žolčnih kislin, ki jih avtohtone črevesne bakterije večinoma pojavlja v distalni ileum, kjer je cca. 95% žolčnih kislin se reabsorbira, od katerih je cca. 15% je nekonjugiranega [7, 10]. Tako konjugiranih in nekonjugiranih žolčnih kislin se absorbirajo s pasivno difuzijo vzdolž celotne črevesju, vendar je ta proces učinkovitejši pri nekonjugiranih žolčnih kislin. Poleg posebne aktivni transportni sistemi so prisotni v distalnem ileumu, ki so bolj učinkoviti pri uvajanju konjugiranih žolčnih kislin. Po absorpciji iz črevesa, so žolčne kisline transportira v jetra preko krvi reconjugated in spet izloča v žolču mehurja. Ta postopek recikliranja žolčnih kislin se imenuje enterohepatično cirkulacijo.
Fiziološko vlogo žolčnih kislin se poveča topnost prehrambenih maščob in olajša njeno razgradnjo in absorpcijo. Zaradi svojih lastnosti detergenta, žolčnih kislin spremeni tudi celične membrane in s tem imajo citotoksične in baktericidno posledice, vidne s povečano membransko fluidnost in prepustnost [11-14]. Glede na koncentracijo žolča, porušitev celovitosti celične membrane se zgodi skoraj v trenutku, kar je povzročilo uhajanje in smrt celic, ali bolj počasi in subtilno s spremembo prepustnosti membrane in pretočnost, dejavnost kritičnih proteinov v celične membrane in membrane hidrofobnost [15 ]. Poleg uničenje integritete bakterijske celične membrane, žolč povzroča tudi poškodbe DNK, denaturacijo in misfolding proteinov, ki vodi v smrt bakterij [16].
Gram-pozitivne bakterije so bolj občutljivi na žolča kot Gram- negativne bakterije, vendar tolerance žolčnih je zelo sev specifično, zato generalizirani izjave za vrste ni mogoče [17-19]. Kljub baktericidnih učinkov žolča, so nekateri mikroorganizmi razvili odpornost žolča z indukcijo žolča encimov za presnovo in prevoznih sistemov ali s spreminjanjem membransko prepustnost, fluidnost ali naboj. Nekatere gastrorezistentne patogeni morda celo odvisna od žolča kot signal gostiteljice za ureditev virulence. Na primer, Salmonella enterica serovar Typhimurium poseduje iztočne črpalke ARakova za odstranitev žolča in prometa skozi zunanjo membrano [20]. Poleg tega je vdor v epitelnih celicah gostitelja, ki jih ta bakterija povzroča s spuščenimi koncentracije žolčnih, tako po tranzitu na distalni ileum ali v sluzi plasti [21].
Sodelovanje zaužitja hrane je pomemben dejavnik pri protibakterijsko aktivnost žolča v črevesju. Bile inaktivacijo bakterij vpliva prisotnost sestavin živil, ki lahko ustvari zaščitni mikrookolja ali vežejo žolč. Na primer, največja koncentracija žolčno B. cereus
prenašajo med rastjo v črevesni mediju bilo 3 g /L prašičji žolčnih ko je grah juha dopolnjen, medtem ko je le 0,9 g /l in 0,6 g /l žolčnih v prisotnosti prenaša mleka in pomanjkanja hrane, oziroma [22]. Tudi za Lactobacillus curvatus, prisotnost matrike hrane, in sicer mesa povečala žolča toleranco in nato njeno gastrointestinalnih preživetje [23]. Podobno je toleranca žolč Bifidobacterium breve okrepljeno z sojinih beljakovin [24].
V tej študiji je bila gastrointestinalna preživetje vegetativnega B. cereus
celic raziskovali in povezan z baktericidno vlogo žolča. B. cereus
inokuluma smo gojili v sestavljenem hrane matrični lazanje verde pred in vitro
simulacijo prebavil prehoda za vključitev morebitnih zaščitnih učinkov delci hrane na gastrointestinalni preživetje B. cereus
.
materiali in metode
B. cereus
sevi, gojenje in števila
B. cereus
obremenjuje ATCC 14579, NVH 1230-88 in FF 73 (tabela 1) so gojili in nato kultivirajo v 10 ml tripton sojino brozge (TSB, Oxoid) za 24 ur pri 30 ° C. Po centrifugiranjem in resuspendiranje v 1 mL raztopine Fiziološke peptonske Salt (PPS, 8,5 g /L NaCl (Fluka) in 1 g /L nevtralizirali bakteriološko pepton (Oxoid)), je bila 830 xl od subkulture nacepili na 83 g lazanje verde (kupljeno v lokalni supermarket) v stomaherjem vrečke in inkubirali 24 ur pri 22 ° C. Trgovina na drobno lazanje verde je bila kupljena v lokalni supermarket, ki je vsebovalo v povprečju za 4,7 log CFU /g skupni bakterije (standardni odklon 1,3 log CFU /g, analiza 11 različnih izdelkov, med 6 mesecev) in ≤ 2,0 log CFU /g B . cereus
. Povprečna pH tega prehrambenega izdelka je 5,52 (standardni odklon ± 0,06) je bil .table 1 Simulacija prebavil prehoda izvede s tremi različnimi sevi B. cereus: tip seva B. cereus ATCC 14579, klinični izolat B. cereus NVH 1230 -88 z drisko izbruhom zastrupitev s hrano in hrano izolata B. cereus FF 73 od ustreznega matrice s hrano, in sicer lazanje verde
B. cereus seva
Izvor
Mininal temperaturo rasti ( ° C)
HBL proizvodnja
proizvodnje NHE
ATCC114579
sev vrste
> 10
+
+
NVH2 1230 -88
klinične (človeški iztrebki)
8
+ -
FF3 73
hrane (lazanje verde)
10
+
+
1ATCC = Ameriški Type Culture Collection, ZDA; 2NVH = Norwegian School of Veterinary Science, Oslo, Norveška; 3FF = Flamska Food Collection, Belgija.
Skupno število in B. cereus
Število bili določeni s strani prevleka ustrezne razredčitve v SKM na Tripton sojino Agar (TSA) in agar manitol-Rumenjak-polimiksin B (MYP .., oziroma koncentracije Spore smo določili z nasaditvijo po segrevanju pri 80 ° C za 10 minut
vitro
simulacija gastrointestinalnega prehoda
dinamični gastrointestinalnega simulacijo eksperimenta sestavlja pet faz: 1) usta, 2) želodec, 3) dvanajstniku, 4), dializa in 5) ileum [25]. Na kratko smo lazanje otokov vsebuje B. cereus
inokuluma (83 g) zmešamo s slino mediju (56 ml, pH 6,5, 37 ° C), ki jo stomaching 1 min (stomaherjem Lab mešalnikom 400, Seward) in inkubirali 10 minut pred prenosom na želodcu plovila. PH želodca je v zadnjem 90 min s kontinuirano dodajamo kisline (0,28 M HCl) zmanjšala od 5,0 do 3,0 v prvem 90 minut in do 2,0. Želodca se je začela 30 minut po začetku želodčne faze v 5 frakcij s prekinjeno črpanje na tak način, da je cca. 25% vsebnosti želodčne smo odstranili po 1 uri, 50% po 2 urah in 75% po 3 urah. Lomni želodca povzročilo 150 min prekrivanja želodca in dvanajstnika fazo, v kateri je bila B. cereus
inokuluma razdeljen na podpopulacije, ki so bile izpostavljene različnim različnih časih inkubacije v fazi želodcu (min. 30 min, maks . 180 min) in dvanajsternik faza (min. 10 min, maks. 160 min). Črevesna ladja je bila anaerobna (splaknemo z dušikom) in se nahajajo v črevesju medij z 10,0 g /l žolča (Oxgall, Difco) in pH pH je bil samodejno prilagodi z regulatorjem pH (FERMAC 260, Electrolab) ostati pri pH 5,0 Med prvi 45 min in pri pH 6,0 v zadnjem 115 min. In konec dvanajstnika faze so bile popolne želodca vsebino prenese in koncentracija žolčnih je znižala z razredčevanjem do 5 g /L. V naslednji fazi, je ≥ 90% tega žolča odstraniti z dializo in konkurence v človekove črevesne bakterije je simulirano v končni fazi ileuma. Vendar pa po odstranitvi B. cereus
vegetativnih celic, je gastrointestinalni poskus ustavljen, zaradi česar pri poskusih, ki so sestavljeni iz prvih treh samo fazah. Poskuse smo izvedli v treh izvodih z različnimi B. cereus
inokulov na različne dneve.
Bile tolerance B. cereus
B. cereus
seva NVH 1230-1288 je bila obdelana in nato ponovno kultivirajo v 10 ml TSB za 24 ur pri 30 ° C. Nato je bil 100 ml za subkulturo nacepili v steklene epruvete, ki vsebujejo 9,9 ml TSB in inkubirali pri 37 ° C. PH TSB je bodisi nevtralen (pH = 7,2) ali kisel (pH = 5,0) in dopolnjena z različnimi koncentracijami žolčnih, kar v končni koncentraciji 0,0 (kontrole TSB), 1,0, 5,0 in 10,0 g /L oxgall (Difco ). Preživetje vegetativnega B. cereus
celic smo ocenili s prevleka ustrezne diltutions v SKM na TSA.
Proizvajanja toksinov
Proizvodnja enterotoksinih NHE in HBL smo določili z analizo 1 ml vzorcev po filtracijo (0,2 um filtri za brizgalke, WHATMAN) z Duopath® cereus enterotoksinih (Merck) v skladu z navodili proizvajalca.
Rezultati
rast B. cereus
v lazanje verde
lazanje verde smo inokulirali s ca. . 6,0 CFU /g B. cereus
in inkubirali 24 ur pri 22 ° C, da dobimo zelo koncentriran inokulum vegetativno B. cereus
celice, gojene v sestavljenem hrane matrike z mikrobiote hrane s simulacijo shranjevanje kontaminirane lazanje na sobna temperatura. To je povzročilo lazanje verde, ki vsebuje cca. 8,5 log CFU /g skupne bakterije, od katerih B. cereus
so pomenila 7,0 do 8,0 CFU /g, odvisno od seva (tabela 2). B. cereus
NVH 1230-88 so pokazali stabilno koncentracijo spor 3,5 log spor /g, ki izvira iz TSB inokuluma. V nasprotju s tem je razvidno iz približno dodatno sporulacije. 4.0 log spore /g do 4,5 log spor /g po 30 h za B. cereus
FF 73. Zanimivo je, da B. cereus
ATCC 14579 ni prišlo do nobenih spor po 30 h inkubacije, z zelo majhnim številom ( 3.0 spore /g) opazili le 1 od 3 ponovljenih vrečke. Po inokulaciji in inkubator, lazanje verde je bila tako močno onesnaženi z B. cereus
vegetativnih celic (7,0 do 8,0 log CFU /g) v stacionarni fazi rasti in nizke količine B. cereus
spor (do 4,0 log trosi /g) .table 2 rast treh različnih sevov B. cereus v matrici hrane pred simulacijo prebavil prehoda; Povprečne vrednosti neodvisnih poskusov v treh izvodih, izraženih v log CFU /g ± standardni odklon so predstavljene
B. cereus seva
čas (h)
0

22
24
26
28
30
B. cereus
ATCC14579
Skupno število
5,8 ± 0,1
8,3 ± 0,6
8,4 ± 0,3
8,8 ± 0,2
8,8 ± 0,3
8,9 ± 0,2
Skupaj B. cereus
5,7 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,9 ± 0,1
6,7 ± 0,3
7,2 ± 0,3
7,0 ± 0,2
B. cereus
spore
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
< 2,0 ± 0,0
2,3 ± 0,6
B. cereus
NVH 1230-88
Skupno število
5,9 ± 0,1
8,2 ± 0,2
8,4 ± 0,1
8,9 ± 0,0
8,9 ± 0,1
8,8 ± 0,2
Total B. cereus
6,2 ± 0,3
7,9 ± 0,2
8,2 ± 0,1
8,5 ± 0,2
8,3 ± 0,3
7,9 ± 0,1
B. cereus
spore
3,5 ± 0,6
3,5 ± 0,2
3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
3,3 ± 0,6
3,4 ± 0,6
B. cereus
FO 73
Skupno število
5,7 ± 0,1
8,5 ± 0,1
8,7 ± 0,1
9,0 ± 0,0
9,0 ± 0,3
8,9 ± 0,3
Skupaj B. cereus
5,7 ± 0,1
8,1 ± 0,2
8,0 ± 0,1
8,3 ± 0,1
8,2 ± 0,1
8,3 ± 0,2
B. cereus
spore
3,8 ± 0,2
3,9 ± 0,4
3,9 ± 0,4
4,0 ± 0,5
4,0 ± 0,3
4,5 ± 0,1
niso zasledili proizvodnja enterotoksinih v lazanje verde po 24 urah ga je B. cereus
ATCC 14579 in B. cereus
NVH 1230-88, medtem ko NHE je občasno mogoče zaznati (pri 1 od 3 ponovitev) v primeru B. cereus
FF 73. To je verjetno zaradi kislega pH 5.5 lazanje verde in precej nizke temperature inkubacijski dobi 22 ° C, ki niso optimalne za proizvodnjo enterotoksin [1]. Vendar pa oblikovalne enterotoksini v živilih niso odgovorni za drisko zastrupitve s hrano, saj so v prebavnem prehoda [2].
In vitro
simulacija prebavil prehoda B. cereus
vegetativnih celic hitro razgradi
lazanje verde onesnaženi z 7,0 na 8,0 log CFU /ml B. cereus
vegetativnih celic v stacionarni fazi rasti je bil opravljen in vitro
simulacijo prebavil prehoda (slika 1). Preživetje B. cereus
(< 1 zmanjševanje dnevnik) smo med fazo ust in prvih 30 minutah faze želodcu opazili, ko je bil pH v želodcu med 5,0 in 4,0. Po tem, ko je želodčni pH znižala pod 4,0, so vegetativne celice hitro inaktivira v fazi želodcu, opazen kot hiter padec celotnega B. cereus
grofov s podobnimi vrednotami B. cereus
spor šteje v želodčnega plovila. B. cereus
skupaj in spore šteje med dvanajstnika fazi ostala pribl. 1,0 log CFU /ml za B. cereus
ATCC 14579, pribl. 2,5 log CFU /ml za B. cereus
NVH 1230-88 in pribl. 3,5 log CFU /ml za B. cereus
FF 73. Zanimivo je, da spore grofje B. cereus
NVH 1230-88 zmanjšalo fazi želodca v zadnji uri in najbolj kislim pH. Od skupno B. štetje cereus
ni spremenila, to pomeni začetek spor kalitev. B. cereus
ATCC 14579 je pokazala, nedosledno proizvodnjo spore, ki izhajajo iz odsotnosti spor v prvih dveh simulacij in zelo nizkih številk (nekoliko nad mejo detekcije 1,0 spor /ml) so bili v zadnjih dveh poskusih. Slika 1 Inaktivacija vegetativnih celic med dinamično in vitro simulacijo prebavil prehoda z B. cereus ATCC 14579 (1), B. cereus
NVH 1230-88 (2) in B. cereus
FF 73 (3); B. cereus
skupno (a) in spore (b) število bila določena z prevleka na MYP brez in s toplotno obdelavo (10 min pri 80 ° C), oziroma, v lazanje verde (□), fazo usta (◊), faza želodec (Δ) in dvanajsternik faza (○); so predstavljene povprečne vrednosti in standardni odklon trojnih poskusov na različnih dnevih.
Ni testi za ugotavljanje za enterotoksinih NHE in HBL so bila opravljena, ker je bil v katerem koli od prebavil faz, kar je predpogoj za proizvodnjo enterotoksin [1 niso opazili rast ].
Bile tolerance B. cereus
rast in preživetje B. cereus
NVH 1230-88 je bila določena v prisotnosti različnih koncentracij žolča (slika 2). Pri optimalnih pogojih, tj nevtralnega TSB s pH 7,2, je bil učinek žolča odvisna od koncentracije. Najnižja koncentracija 1,0 g /L Oxgall povzročilo zmanjšanje prebivalstva pribl. 30% v primerjavi s kontrolo (TSB brez žolča) pri času 0 ur. Poleg tega je po 1 uri je izvedljiv število zmanjša s pribl. 40% v primerjavi s koncentracijo v TSB z 1,0 g /L Oxgall pri 0 uri. Vendar pa po okrevanju 2 h in izraščanja preostalih celic smo opazili, ker je bil B. cereus
koncentracije podoben tistemu 0 h in končno po 3 urah, populacija se je povečala s pribl. 1 log v primerjavi s tisto pri 0 h. Vendar pa prisotnost 5,0 g /L Oxgall povzroča trajno zmanjšanje za 4,1 log CFU /ml na povprečno (inaktivaciji 88% vegetativnih celic) in da se 10,0 g /L Oxgall 3,9 log CFU /ml (inaktivacija 94 %). Slika 2 Preživetje B. cereus NVH 1230-1288 v Tripton sojino brozge (TSB) pri 37 ° C, pH 7,2 (A) in pH 5,0 (B) s spreminjanjem žolčnih (Oxgall, Difco) koncentracije: 0,0 g /l (bela ), 1,0 g /L (svetlo siva), 5,0 g /L (temno sivo) in 10,0 g /L (črna).
V TSB pri kislem pH 5,0, pribl. 99% B. cereus
inokuluma je takoj inaktiviramo z izpostavljenostjo žolča, ne glede na koncentracijo žolča, kar konstantno skupno B. cereus
preštetimi pribl. 3,0 log CFU /ml. B. cereus
inokuluma vsebuje med 0,1 in 0,2% trosi so tako konstantno število spore pridobljeni med poskusom: 2,6 (± 0,2) log spor /ml ob začetku in 2,5 (± 0,3) log spor /ml v end. Ob tej spor prebivalstvo upoštevati, da vegetativne celice še vedno predstavljal večino (pribl. 60%) na 1% žolčnih odporno B. cereus
.
Razprava
preživetje vegetativnih celic med želodca prehod je bil podoben v prejšnjih študijah s pire krompirja mediju [3]. V teh poskusih, pribl. 10% od vegetativnih celic preživelo želodčne prehod, večina od njih v prvem želodčnem frakcije, ko je bil pH v želodcu med 5,0 in 4,0. Te celice so bile prenesene živi v črevesnem plovila in s tem med 5,5 in 6,5 log CFU /ml B. cereus
je bilo pričakovati v črevesni plovila. Vendar pa je precej nižje število, ki približal B. cereus
spore šteje, so bili pridobljeni v dvanajstnika fazi. To kaže, da so bile vegetativne celice, ki so preživele želodca prehod inaktiviramo v črevesnem okolju. Serije inkubacijski poskusi TSB in različne koncentracije žolč pokazala, da je večina (99,1%) vegetativnih celic inaktiviramo takoj po izpostavitvi žolča pri pH 5,0, glede na koncentracijo žolča v razponu od 1,0 do 10,0 g Oxgall /L. Na koncu so bili vegetativnega B. cereus
celic, ki so preživeli želodca prehod v naslednjem dvanajstnika faze s baktericidno učinek žolča odpraviti.
Baktericidno učinek žolča na vegetativno B. cereus
bil celice odvisna od pH. Pri pH 7,0, smo deaktivacijo korelaciji s koncentracijo žolča in najnižja koncentracija žolčne (1 g /L), tudi omogočiti preživetje in rast. Nasprotno, pri pH 5,0, instant deaktivacijo večine (> 99%) se je pojavila v vegetativnih celic, neodvisna od koncentracije žolčnih (v razponu od 1,0 do 10,0 g /L). Podobno kot pri naših rezultatih, inaktivacijo Listeria monocytogenes s žolčnih kislin se je tudi močno povečala s kislim pH 5,5 [26]. Inaktivacijo bakterij s žolča je podoben tistemu, ki ga organskimi kislinami, ki so tako še posebej učinkoviti pri nizkem pH. disociacijska konstanta logaritemsko kislina (pKa) nekonjugiranih žolčnih kislin je približno 5,1, vendar konjugacija z glicinom zniža pKa pribl. 3.7 [27]. Konjugacijo z tavrin vodi k še nižji pKa pribl. 1.5 [28]. Kot posledica je večina konjugiranih žolčnih kislin ločiti in ionizirano največ fizioloških in črevesnih pH vrednosti, in sicer 95,24% pri pH 5,0 in 99,95% pri pH 7,0 po glycoconjugated žolčnih kislin. Lahko samo sindikati oblike žolčnih kislin pasivno prečkati celične membrane, medtem ko je bil ločen in ioniziran konjugiranih žolčnih kislin zahtevajo posebne aktivne prometne sisteme [29]. Kot rezultat se lahko 4,67% od konjugiranih žolčnih kislin vnesti B. cereus
celic pri pH 5,0, v nasprotju le 0,03% pri pH 7,0. Poleg tega je notranja pH izvedljiva B. cereus
celic vedno giblje med 6,0 ​​in 7,5, odvisno od zunanjih pH in kulture razmerah [30]. Potem ko so undissociated žolčnih kislin razprši v B. cereus
celic, večina od njih (99,50 do 99,98%) podvržena znotrajcelični disociacije, ki izhajajo iz smrtonosno notranjem zakisljevanja.
Bilo je poročala, da so nekatere komponente hrane povečala žolč toleranca B. cereus
vegetativnih celic v črevesju mediju s pH 6,5 [22]. Vendar pa je sestavljeno hrano matrika lazanje verde ni ublaži škodljive učinke žolča na B. cereus
v naših poskusih pri pH 5,0. Možno je, da so učinki tipa hrano opazili samo pri bolj optimalni pH za ta prenašajo s hrano patogena, ko se pričakujejo bolj izrazite razlike zdravljenja.
V nasprotju s vegetativno celic B. cereus
sporami niso inaktiviramo z žolču čeprav niso kalijo v črevesni mediju, ki vsebuje 5 do 10 g /L Oxgall. To sovpada z ugotovitvami v dinamični simulaciji prebavil prehoda spor [25], kjer so bile spore vpliva v ustih, želodca in dvanajstnika fazi in le začeli kalitev med dializo, ko je bila koncentracija žolčnih Nižja od 5,0 g /L Oxgall < 0,5 g /L in tiste serije inkubacije poskusov [31], kjer trosi vzklila v 2 urah v črevesni simulacije mediju, ki vsebuje 1,0 g /L žolča. Druge študije tudi poročali, da so spore lahko kalijo in se množijo v simulirani črevesni tekočini, ki vsebuje žolča (1,5 g Oxgall /L) [32] in da je bil upor žolč B. cereus
spore boljši od tistega, vegetativnih celic [33 ]. Skratka, visoke koncentracije žolčnih (≥ 5 g /L Oxgall) ne omogočajo kalitev spor, medtem ko je koncentracija nizka žolčnih (< 5 g /L). Inducira kalitev in izraščanja
Poleg pomembne prebavo in absorpcijo hranil, žolča je prav tako pomemben antimikrobno spojina v črevesju [7]. Nenormalne nizke črevesne ravni žolč se lahko pojavijo pri ljudeh z nepravilnostmi biliarnim ali jeter ali pomanjkljivosti v enterohepatični obtok, ki jih lahko opravlja tiste ljudi, še posebej dovzetne za drisko zaradi povečane preživetje zaužitih in črevesne bakterije. Poleg tega žolčnih kislin so endogeni odvajala, tako malabsorpcije žolčnih kislin iz tankega črevesa, kar poveča raven žolčne v terminalnem tankem črevesu in debelega črevesa, lahko povzroči tudi drisko [34].
Zaključek
B. cereus
vegetativne celice niso mogli preživeti v prebavilih prehod, kot ga je in vitro
poskusu simulira, kljub visoko koncentracijo inokuluma od 7,0 do 8,0 log CFU /ml in gojenje inokuluma v sestavljenem hrane matriko lazanje verde. Večina vegetativnih celic deaktivirali z želodčno kislino in preživeli celice so bile nato inaktiviramo z žolča med dvanajstnika fazo. V nasprotju s tem, B. cereus
spore preživel simulacijo prebavil prehoda in ostale spore v neugodnih pogojih za kalitev (in izrastka). Zato je infektivni odmerek za B. cereus
verjetno se razlikuje glede na fiziološki obliki porabi, pri čemer nižja za visoko odpornih spor. Čeprav je bil v prebavilih preživetje podobna pri različnih sevov, njihovo sporulacija težnja zelo razlikuje, kar ima pomembne posledice za prebavil preživetje potencial in s tem kužni odmerek različnih B. cereus
sevov.
Izjave
avtorjev originalnih predloženi datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev izvirnih predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf avtorjev 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf avtorjev prvotni datoteki slika 2. Konkurenca interesa
Mi, vsi avtorji, izjavljamo, da nimamo konkurenčnih interesov. Prispevkov
avtorjev
SC, MU in TVdW zasnovan poskuse; SC in SH izvedli eksperimentalno delo in obdelujejo rezultate; SC napisal rokopis podprto s MU, NB in ​​TVdW. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Obstojne nizko izražanje hZip1 v mucinozni karcinomov jajčnikov, debelega črevesa, želodca in pljuč
• Exsanguinating zgornjih prebavilih krvavitve zaradi nenavadne arteriovenske malformacije (AVM) želodca in vranice: prikaz primera