Inaktiválása Bacillus cereus vegetatív sejtek a gyomorsav és az epe során in vitro gasztrointesztinális transit

inaktiválása Bacillus cereus katalógusa vegetatív sejtek a gyomorsav és az epe során in vitro katalógusa gasztrointesztinális tranzit katalógusa Abstract katalógusa Háttér
élelmiszer-eredetű kórokozó Bacillus cereus
okozhat hasmenéses ételmérgezést által termelése enterotoxinok a vékonybélben. Ennek előfeltétele a hasmenéses betegség tehát a túlélés során gasztrointesztinális áthaladást.
Módszerek
Vegetatív sejtek 3 különböző B. cereus
törzseket egy valódi összetett élelmiszer-mátrix, lasagne Verde, és túlélésüket a későbbi szimulációja gyomor-bél szakasz alkalmazásával vizsgáltuk in vitro kísérletekben katalógusa szimuláló átszállítására az emberi felső gasztrointesztinális traktus (szájról vékonybél). katalógusa Eredmények
túlélés nem vegetatív sejtek száma, annak ellenére, hogy a magas oltóanyagot szintje 7,0 8,0 log cfu /g, és a jelenléte a különböző, potenciálisan védő élelmiszer-összetevők. Jelentős frakciókat (kb. 10% -a az elfogyasztott inokulum) B. cereus katalógusa vegetatív sejtek túlélték gyomor- áthaladás voltak, de később inaktiváltuk epe expozíció gyengén savas bél közegben (pH 5,0). Ezzel szemben, az alacsony száma spórák jelen (legfeljebb 4,0 log spóra /g) azt mutatta, kiváló túlélését és maradt életképes spórák az egész gyomor-bél szakasz szimulációt.
Következtetés
Vegetatív sejteket inaktiválódik a gyomorsav és az epe során gasztrointesztinális áthaladás , míg a spórák ellenállóak és túlélni. Ezért a fiziológiai formában (vegetatív sejtek és spórák), a B. cereus
fogyasztott határozza meg a későbbi gasztrointesztinális túlélés és így a fertőző dózis, amely várhatóan sokkal alacsonyabb a spórák, mint a vegetatív sejteket. Nem volt lényeges különbség a gasztrointesztinális túlélési képesség közül került a különböző törzsek. Ugyanakkor jelentős törzs variabilitást figyeltek sporuláció tendencia a növekedés során a laboratóriumi közegben, élelmiszer, amelynek jelentős következményei vannak a gyomor-bél túlélési potenciálját a különböző B. cereus katalógusa törzsek.
Kulcsszavak katalógusa Bacillus cereus katalógusa Az epe In vitro katalógusa szimulációs Emésztőrendszeri átjáró Háttér katalógusa B. cereus katalógusa okozhat hánytató és a hasmenéses és az élelmiszer-mérgezés gyártása ill. hányási (cereulide) és a hasmenéses toxin (nem hemolitikus enterotoxin (Nhe), hemolizin BL (HBL), citotoxin K (CytK) stb) [1]. Ezzel szemben a rendkívül stabil toxin cereulide, az enterotoxinokat könnyen lebomlik savas és emésztő enzimek (proteázok), és így előformált enterotoxinok élelmiszer nem megtartják toxicitás során gasztrointesztinális áthaladás [2]. Ezért az előfeltétele hasmenéses ételmérgezés enterotoxin termelését B. cereus
a vékonybélben, így a gyomor-bél túlélését vegetatív B. cereus
vizsgáltuk. Korábban kimutatták, hogy a kb. 10% -a, a vegetatív sejtek túlélték gyomor- áthaladás [3]. Ezután a túlélő baktériumok szembesülnek epe a lumen a duodenum, a proximális része a vékonybél.
Epe főleg epesavak (körülbelül 72% -a az összes lipid), emellett a foszfolipidek (kb. 24% ) és koleszterint (kb. 4%) [4]. Az emberekben ezek epesavak főként kolsav (50% és 80%) és chenodeoxycholic sav (20% és 50%) [5, 6]. Ezek a májban szintetizálódik származó koleszterin és konjugált glicin (kb. 75%), vagy a taurin (kb. 25%), a konjugáció arányok függően diéta egyéb tényezők mellett [6, 7]. Váladék az epe váltja ki a zsír és a sav felszabadulása a gyomorban a nyombélbe, ami 7-15 mM epesók a vékonybélben étkezés után, amely megfelel a 5-10 g Oxgall /L [7-10]. Dekonjugálásból epesavak bennszülött bélbaktériumok főleg akkor a distalis ileum, ahol kb. 95% -a az epesavak felszívódik, ebből kb. 15% -a indirekt [7, 10]. Mind a konjugált és nem konjugált epesavak szívódnak passzív diffúzióval mentén az egész bélben, de ez a folyamat hatékonyabb a nem konjugált epesavak. Továbbá, specifikus aktív transzport rendszer van jelen a disztális ileum, amelyek hatékonyabb a felvétele konjugált epesavak. Felszívódás után a bél, a epesavak szállítják a máj keresztül a vért, reconjugated és szekretált ismét az epébe hólyag. Az újrafeldolgozási eljárás epesavak nevezzük enterohepatikus keringés.
A fiziológiai szerepe az epesavak, hogy növelje a oldhatóságát étkezési zsír és megkönnyíti annak lebontását és felszívódását. Mivel a tisztítószer tulajdonságait, az epesavak is megváltoztathatja a sejtmembránon, és így citotoxikus és baktériumölő hatású, észrevehető fokozott membránfluiditás és áteresztőképesség [11-14]. Attól függően, hogy az epe koncentráció zavar a sejtmembrán integritását jelentkezik majdnem pillanatszerűen, ami sejt szivárgást és a halál, vagy lassabban és finoman megváltoztatásával a membrán permeabilitás és fluiditás, a tevékenység a kritikus fehérjék a sejtmembránban és a membrán hidrofób jelleg [15 ]. Amellett, hogy megsemmisítése a bakteriális sejtmembrán integritását, epe is indukál DNS-károsodás, a denaturálási és misfoiding fehérjék, ami a halál a baktériumok [16].
Gram-pozitív baktériumok általában sokkal érzékenyebbek a epe mint Gram- negatív baktériumok, hanem az epe tolerancia nagyon törzs egyedi, így általános kimutatások fajok nem lehetséges [17-19]. Annak ellenére, hogy a baktériumölő hatását epe, néhány mikroorganizmus fejlesztettek epe rezisztencia indukciója epe metabolizáló enzimek és a közlekedési rendszerek vagy megváltoztatásával membránpermeabilitással folyékonyság vagy díjat. Egyes enterális kórokozók akár függ epe, mint a befogadó jel virulencia szabályozás. Például Salmonella enterica szerovaronként Typhimurium rendelkezik a multidrug kiáramlási pumpa ARák epe eltávolítás és szállítás külső membránján keresztül [20]. Sőt, invázió a gazdaszervezet hámsejtek által ez a baktérium által indukált csökkent epe koncentrációk, így azután tranzit a disztális ileum vagy a nyálkaréteg [21].
A co-táplálék bevitele egy fontos tényező a antibakteriális aktivitása epe a belekben. Az epe inaktiválja a baktériumokat befolyásolja az étel jelenléte alkatrészek, amely létrehozhat védő mikrokörnyezetet vagy bind epe. Például a maximális epe koncentráció által tolerált B. cereus
a növekedés során a bél közegben volt 3 g /l sertés epe amikor borsó leves kiegészítettük, miközben csak 0,9 g /l és 0,6 g /l epével tolerálták a jelenlétében a tej és az, ha az élelmiszer, illetve [22]. Szintén a Lactobacillus curvatus, a jelenléte egy élelmiszer mátrix, vagyis a hús, növelte epe tolerancia, és ezt követően annak gasztrointesztinális túlélését [23]. Hasonlóképpen, az epe tolerancia Bifidobacterium breve fokozta az szójaproteinek [24].
Ebben a vizsgálatban, a gyomor-bél túlélését vegetatív B. cereus
sejteket megvizsgálták, és kapcsolódik a baktericid szerepe epe. A B. cereus
inokulumot tenyésztettünk az összetett élelmiszer mátrix lasagne Verde előtt in vitro
szimuláció a gasztrointesztinális áthaladást tartalmaz olyan potenciális védőhatását az élelmiszer-részecskék a gyomor-túlélését B. cereus
.
anyagok és módszerek katalógusa B. cereus katalógusa törzsek, termesztés és a felsorolás katalógusa A B. cereus katalógusa ATCC 14579, NVH 1230-1288 és FF 73 (1. táblázat) tenyésztettük és később átoltjuk 10 ml tripton-szója (TSB, Oxoid) 24 órán át 30 ° C-on. Centrifugálás után és reszuszpenziós 1 ml fiziológiás Pepton sóoldatot (PPS, 8,5 g /l nátrium-klorid (Fluka) és 1 g /l semlegesítjük bakteriológiai pepton (Oxoid)), 830 ni a szubkultúra oltottuk a 83 g lasagne Verde (vásárolt a helyi szupermarketben) a Stomacher táskák és inkubáltuk 24 órán át 22 ° C-on. Kiskereskedelmi lasagne verde vásárolta a helyi szupermarketben, amely tartalmazta átlagosan 4,7 log CFU /g összes baktérium (szórás 1,3 log CFU /g elemzése 11 különböző termék alatt egy 6 hónapos időszak alatt) és ≤ 2,0 log CFU /g B . cereus katalógusa. Az átlagos pH-értéke ezen élelmiszer termék 5,52 (szórás ± 0,06) .table 1 szimulációja gasztrointesztinális áthaladás végeztük három különböző B. cereus törzs: milyen típusú törzs Bacillus cereus ATCC 14579, klinikai izolátum B. cereus NVH 1230 -88 egy hasmenéses ételmérgezés és az élelmiszer-izolátumot B. cereus FF 73-re vonatkozó élelmiszer mátrixban, vagyis lasagne verde katalógusa B. cereus törzs
Eredeti Matton Mininal növekedési hőmérséklet ( ° C) Matton HBL termelés Matton Nhel termelés Matton ATCC114579 katalógusa típusú törzs katalógusa > 10 katalógusa + katalógusa + katalógusa NVH2 1230 -88 katalógusa klinikai (humán székletből) hotelben 8 katalógusa + -
FF3 73 katalógusa ételek (lasagne verde) hotelben 10 katalógusa + katalógusa + katalógusa 1ATCC = American Type Culture Collection, USA; 2NVH = norvég School of Veterinary Science, Oslo, Norvégia; 3ff = Flandria Food Collection, Belgium.
A teljes szám és B. cereus katalógusa száma határoztuk ültetéssel a megfelelő hígításban az PPS tripton Soya Agar (TSA) és mannit-tojássárgája-polimixin B agar (MYP , ill. Spore koncentrációkat határoztuk meg plating melegítés után 80 ° C-on 10 percig.
In vitro
szimulációs gastrointestinalis áthaladás katalógusa a dinamikus gasztrointesztinális szimulációs kísérlet áll öt szakaszból áll: 1) a száj, 2) a gyomor, 3) a duodenumban, 4) dialízis és 5) az ileum [25]. Röviden, a lasagne Verde tartalmazó B. cereus
inokulum (83 g) összekeverünk nyál közepes (56 ml, pH = 6,5, 37 ° C) által stomaching 1 percig (Stomacher Lab Blender 400, Seward), és inkubáljuk 10 perc, mielőtt át a gyomorba hajó. A gyomor pH-t csökkent 5,0-3,0 alatt az első 90 perc és 2,0 az elmúlt 90 perc folyamatos hozzáadott savat (0,28 M HCI). Gyomorürülés indult 30 perc kezdete után a gyomor fázis 5 frakciók szakaszos szivattyúzás oly módon, hogy kb. 25% -a a gyomor tartalmát eltávolítjuk 1 óra eltelte után 50% 2 óra után és 75%, 3 óra elteltével. A frakcionált gyomorürülés eredményezett 150 min közötti átfedés a gyomor és a nyombél fázis, amelyben a B. cereus
inokulumot osztva szubpopulációk amely vetettük alá, különböző inkubációs idők a gyomorban fázisban (min. 30 perc, max . 180 perc) és a duodenum fázis (min. 10 perc, max. 160 perc). A bél edény volt anaerob (nitrogénnel átöblítjük gáz), és tartalmazta a bél közegben 10,0 g /l epével (Oxgall, Difco), és a pH pH-t automatikusan beállítja a pH ellenőrzőt (FerMac 260, Electrolab) marad pH = 5,0 alatt első 45 perc, és pH = 6,0 alatt az utolsó 115 min. És a végén a duodenum fázis, a teljes gyomor tartalmát áthelyezték és az epe koncentrációt csökkentették hígítással 5 g /l. A következő fázis, ≥ 90% -a epe dialízissel eltávolítható, és a versenyt az emberi bélbaktériumok szimulálták az utolsó ileum szakasz. Azonban eltávolítása után a B. cereus
vegetatív sejtek, a gyomor-bél kísérletet leállítjuk, így a kísérletek, amely az első három fázis csak. A kísérleteket három párhuzamossal végzett, különböző B. cereus
inokulumok különböző napokon.
Epe tolerancia a B. cereus
B. cereus
törzset NVH 1230-1288 tenyésztettük, és ezt követően átoltjuk 10 ml TSB-24 órán át 30 ° C-on. Ezután 100 ul a szubkultúra oltottuk üveg tartalmazó csövekbe 9,9 ml TSB és inkubáljuk 37 ° C-on. A pH a TSB volt, vagy semleges (pH = 7,2), vagy savas (pH = 5,0), és kiegészített változó epe koncentrációkban, így a végső koncentráció 0,0 (TSB kontroll), 1,0, 5,0 és 10,0 g /l oxgall (Difco ). A túlélés a vegetatív B. cereus
sejteket értékeltük borítás a megfelelő diltutions PPS TSA.
Toxintermelés
előállítása enterotoxinok Nhel és HBL elemzésével állapítottuk meg 1 ml-es mintákat szűrés után (0,2 im fecskendős szűrők Whatman) a Duopath® cereus Enterotoxin (Merck) alkalmazásával a gyártó utasításainak megfelelően. katalógusa eredményei katalógusa növekedési B. cereus
lasagne verde katalógusa a lasagne verde oltottuk kb . 6,0 CFU /g B. cereus katalógusa, és inkubáltuk 24 órán át 22 ° C-on, így egy erősen koncentrált oltóanyagot vegetatív B. cereus
növesztett sejtek egy összetett élelmiszer mátrix élelmiszer mikrobióta szimulálásával tárolása szennyezett lasagne at szobahőmérséklet. Ez azt eredményezte, lasagne Verde tartalmazó kb. 8,5 log cfu /g összes baktériumok, amelyek B. cereus
összetételű 7,0-8,0 CFU /g, attól függően, a törzs (2. táblázat). B. cereus katalógusa NVH 1230-1288 mutatott stabil spóra koncentrációt 3,5 log spóra /g származó TSB oltóanyagot. Ezzel szemben, a további sporuláció nyilvánvaló volt kb. 4,0 log spóra /g és 4,5 log spóra /g 30 óra eltelte után a B. cereus
FF 73. Figyelemre méltó, hogy a B. cereus katalógusa ATCC 14579 nem termel semmilyen spórákat után 30 óra inkubálás, csak nagyon alacsony számok ( 3,0 spóra /g) megfigyelt csupán 1, a 3 párhuzamos zsákok. A beoltás után és az inkubálást, a lasagne Verde tehát erősen szennyezett B. cereus
vegetatív sejteket (7,0-8,0 log CFU /g) a stacioner növekedési fázisban, és kis mennyiségű B. cereus katalógusa spórákat (legfeljebb 4,0 log spóra /g) .table 2 növekedése a három különböző B. cereus törzsek az élelmiszer-mátrixban megelőzően szimulációs gasztrointesztinális áthaladás; átlagértékei független kísérlet három példányban logaritmus CFU /g ± szórás van bemutatva katalógusa B. cereus törzs
idő (h)
0 katalógusa
22 Matton 24 Matton 26 Matton 28 Matton 30 Matton B. cereus
ATCC14579 katalógusa Totálbeütés katalógusa 5,8 ± 0,1 8,3 ± 0,6 katalógusa katalógusa 8,4 ± 0,3 katalógusa 8,8 ± 0,2 katalógusa 8,8 ± 0,3 8,9 ± 0,2 katalógusa katalógusa Összesen B. cereus Matton 5,7 ± 0,1 6,9 ± 0,1 katalógusa katalógusa 6,9 ± 0,1 6,7 ± 0,3 katalógusa katalógusa 7,2 ± 0,3 katalógusa 7,0 ± 0,2 katalógusa B. cereus katalógusa spórák katalógusa < 2,0 ± 0,0 katalógusa < 2,0 ± 0,0 katalógusa < 2,0 ± 0,0 katalógusa < 2,0 ± 0,0 katalógusa < 2,0 ± 0,0 2,3 ± 0,6 katalógusa katalógusa B. cereus
NVH 1230-1288 katalógusa Totálbeütés katalógusa 5,9 ± 0,1 katalógusa 8,2 ± 0,2 katalógusa 8,4 ± 0,1 8,9 ± 0,0 katalógusa katalógusa 8,9 ± 0,1 katalógusa 8,8 ± 0,2
Az összes B. cereus Matton 6,2 ± 0,3 katalógusa 7,9 ± 0,2 katalógusa 8,2 ± 0,1 8,5 ± 0,2 katalógusa katalógusa 8,3 ± 0,3 katalógusa 7,9 ± 0,1 katalógusa B. cereus katalógusa spórák
3,5 ± 0,6 3,5 ± 0,2 katalógusa katalógusa 3,3 ± 0,6 3,4 ± 0,6 katalógusa katalógusa 3,3 ± 0,6 3,4 ± 0,6 katalógusa katalógusa B. cereus
FF 73 katalógusa Totálbeütés katalógusa 5,7 ± 0,1 8,5 ± 0,1 katalógusa katalógusa 8,7 ± 0,1 katalógusa 9,0 ± 0,0 katalógusa 9,0 ± 0,3 8,9 ± 0,3 katalógusa katalógusa Összesen B. cereus Matton 5,7 ± 0,1 8,1 ± 0,2 katalógusa katalógusa 8,0 ± 0,1 8,3 ± 0,1 katalógusa katalógusa 8,2 ± 0,1 8,3 ± 0,2 katalógusa katalógusa B. cereus katalógusa spórák
3,8 ± 0,2 3,9 ± 0,4 katalógusa katalógusa 3,9 ± 0,4 katalógusa 4,0 ± 0,5 katalógusa 4,0 ± 0,3 4,5 ± 0,1 katalógusa katalógusa No termelés enterotoxinokra mutattunk a lasagne verde 24 óra után a B. cereus katalógusa ATCC 14579 és B. cereus katalógusa NVH 1230-1288, míg Nhel ben szórványosan kimutatható (1-ből 3 ismétlésben) esetében a B. cereus katalógusa FF 73. Ez valószínűleg köszönhető, hogy a savas pH-ja 5,5 lasagne Verde és a meglehetősen alacsony inkubációs hőmérséklet 22 ° C, amelyek nem optimálisak az enterotoxin termelés [1]. Azonban előre enterotoxinokról élelmiszer nem felel a hasmenéses ételmérgezés, mivel azok gyorsan lebomlanak során emésztőrendszeri áthaladás [2]. In vitro katalógusa katalógusa szimulációs gasztrointesztinális áthaladást B. cereus katalógusa vegetatív sejtek
a lasagne Verde szennyezett 7,0-8,0 log CFU /ml B. cereus
vegetatív sejtek a stacioner növekedési fázisban vetettük alá in vitro
szimulációs gasztrointesztinális áthaladást (1. ábra). Túlélése B. cereus katalógusa (< 1 log csökkenés) volt megfigyelhető a száj fázis, és az első 30 perc a gyomor fázisban, amikor a gyomor pH-ját között volt 5,0 és 4,0. Ezt követően, amikor a gyomor pH-ját 4,0 alá csökkent, a vegetatív sejteket gyorsan inaktiválódik a gyomorban fázisban észrevehető, mint egy gyors csökkenése a teljes B. cereus katalógusa számít, hogy hasonló értékeket a B. cereus katalógusa spóra számít a gyomor hajó. A B. cereus katalógusa összesen spóra szám alatt a nyombél fázisban maradt kb. 1,0 log CFU /ml B. cereus katalógusa ATCC 14579, kb. 2,5 log CFU /ml B. cereus katalógusa NVH 1230-1288 és kb. 3,5 log CFU /ml B. cereus katalógusa FF 73. Érdekes, hogy a spórák rendbeli B. cereus katalógusa NVH 1230-1288 során csökkent a gyomor fázis során az utolsó óra, és a legtöbb savas pH. Mivel a teljes B. cereus
száma nem változott, ez azt jelzi, megindítása spórák csírázást. B. cereus
ATCC 14579 kimutatta következetlen spóra termelést, ami hiányában a spórák az első két szimuláció és nagyon alacsony számok (kissé meghaladja a kimutatási határ 1,0 spóra /ml) Az elmúlt két kísérletet. 1. ábra inaktiválása vegetatív sejtek során a dinamikus in vitro szimulálására, gasztrointesztinális folyosón B. cereus ATCC 14579 (1), B. cereus
NVH 1230-1288 (2) és B. cereus
FF 73 (3); a B. cereus
Összesen (a) és spóra (B) számát határoztuk meg plating a MYP nélkül és hőkezeléssel (10 perc 80 ° C-on), illetve a lasagne Verde (□), a száj fázis (◊), a gyomor fázis (Δ), valamint a nyombél fázis (○); az átlagos értékeket és a standard deviációt három párhuzamosban végzett kísérletek különböző napokon van bemutatva.
Nincs érzékelés teszteket enterotoxinok Nhel és HBL végeztük, mivel nincs növekedés volt megfigyelhető során bármelyik a gyomor-bél szakaszban, ami előfeltétele az enterotoxin termelés [1 ].
epe tolerancia a B. cereus Matton növekedéséhez és túléléséhez B. cereus katalógusa NVH 1230-1288 határoztuk jelenlétében változó epe koncentrációk (2. ábra). Optimális körülmények között, azaz semleges TSB pH 7.2, a hatás az epe koncentrációfüggő volt. A legalacsonyabb koncentráció 1,0 g /l Oxgall eredményezte populáció csökkenését kb. 30% a kontrollhoz képest (TSB nélkül epe) a 0 időpontban h. Ezen kívül, 1 óra elteltével a élősejtszám csökkent kb. 40%, összehasonlítva a koncentráció TSB 1,0 g /l Oxgall 0 h. Azonban, miután 2 óra hasznosítás és kinövése a maradék sejteket figyelhető meg, mivel a B. cereus
koncentráció hasonló volt a 0 óra, és végül 3 óra eltelte után a népesség nőtt kb. 1 log képest, hogy 0 óra. Azonban jelenlétében 5,0 g /l Oxgall indukált állandó csökkenés 4,1 log CFU /ml átlagos (inaktiválását 88% -a a vegetatív sejtek), és hogy a 10,0 g /l Oxgall 3,9 log CFU /ml (inaktiválását 94 %). 2. ábra A túlélés B. cereus NVH 1230-1288 a tripton-szója (TSB), 37 ° C-on pH = 7,2 (A) és pH = 5,0 (B) változó epe (Oxgall, Difco) koncentrációk: 0,0 g /l (fehér ), 1,0 g /l (világosszürke), 5,0 g /l (sötétszürke) és 10,0 g /l (fekete).
TSB savas pH 5,0, kb. 99% -a a B. cereus
inokulumot azonnal inaktiválódik az epe expozíció, függetlenül a epe koncentráció, ami a konstans teljes B. cereus
rendbeli kb. 3,0 log cfu /ml volt. A B. cereus
inokulum tartalmazott 0,1 és 0,2% spórák, ezért állandó spóra rendbeli kaptuk az egész kísérlet: 2,6 (± 0,2) log spóra /ml elején és 2,5 (± 0,3) log spóra /ml a végén. Ha ezt a spóra népesség figyelembevételével, a vegetatív sejtek még többségben (kb. 60%) az 1% -os epe rezisztens Bacillus cereus katalógusa.
Megbeszélés katalógusa túlélése vegetatív sejtek során a gyomor áthaladás hasonló volt e korábbi vizsgálatok burgonyapürével közepes [3]. Azokban a kísérletekben kb. 10% a vegetatív sejtek túlélték gyomor folyosón, legtöbbjük az első gyomor frakció, amikor a gyomor pH-értéke 5,0 és 4,0. Ezeket a sejteket át elevenen a bél hajó, így 5,5 és 6,5 közötti log CFU /ml B. cereus katalógusa várták a bél hajó. Azonban sokkal alacsonyabb számít, amely megközelítette az B. cereus katalógusa spóra számít kaptuk során a nyombél fázisban. Ez azt jelzi, hogy a vegetatív sejteket, amelyek túlélték a gyomor áthaladás inaktiváltuk a bél környezetet. Batch inkubációs kísérletek TSB és különböző koncentrációjú epe azt mutatta, hogy a többség (99,1%) mennyiségben a vegetatív sejtek inaktiváltuk után azonnal epe expozíció pH = 5,0, függetlenül az epe koncentráció a tartomány 1,0 és 10,0 g Oxgall /l. Összefoglalva, vegetatív B. cereus
sejteket, amelyek túlélték a gyomor áthaladás arra eltávozik a következő nyombél fázis által a baktériumölő hatása az epe.
A baktericid hatását epe vegetatív B. cereus
sejtek pH-függő. PH = 7,0, az inaktiváció korrelációban az epe koncentráció, és a legalacsonyabb epe koncentráció (1 g /l), még megengedett túlélését és növekedését. Ezzel szemben, pH = 5,0, instant inaktiválása a többség (> 99%) mennyiségben a vegetatív sejtek történt, független a epe koncentráció (a tartomány 1,0 és 10,0 g /l). Hasonló Eredményeink inaktiválása Listeria monocytogenes epesavak is erőteljesen növekedett savas pH 5.5 [26]. Inaktiválása baktériumok epe hasonló a szerves savak, amelyek mind különösen hatékony alacsony pH. A logaritmikus sav disszociációs állandó (pKa) konjugált epesavak körülbelül 5,1, de konjugáció glicin csökkenti a pKa kb. 3.7 [27]. A konjugálás taurin vezet még alacsonyabb pKa-értéke kb. 1.5. [28] Ennek következtében a legtöbb konjugált epesavak disszociált és ionizált legfeljebb fiziológiai és a bél pH-értékeken, azaz a 95,24%, pH = 5,0, és 99,95% -os, pH = 7,0 glycoconjugated epesavak. Csak a nem ionizált formában epesavak is passzívan átjut a sejtmembránon, míg a disszociált és ionizált konjugált epesavak igényelnek különleges aktív transzport-rendszereket [29]. Ennek eredményeként 4,67% -a konjugált epesavak beléphet a B. cereus
sejteket pH = 5,0, szemben a csak 0,03%, pH = 7,0. Továbbá, a belső pH életképes B. cereus
sejtek mindig között fekszik 6,0 és 7,5, attól függően, hogy a külső pH-t és tenyésztési körülmények [30]. Miután a nem disszociált epesavak is diffundál a B. cereus katalógusa sejtek, többségük (99,50-99,98%) megy intracelluláris disszociáció, ami halálos belső savasodás.
Azt jelentették, hogy bizonyos élelmiszer-összetevők nőtt az epe tolerancia B. cereus
vegetatív sejtek bél közegben pH = 6,5 [22]. Azonban az összetett élelmiszer-mátrix lasagne Verde nem enyhítik a káros hatásokat az epe a B. cereus
Kísérleteink során pH = 5,0. Lehetséges, hogy az élelmiszer-típusú hatások csak figyeltünk meg több optimális pH erre élelmiszer-eredetű kórokozó, amikor kifejezettebb különbség a kezelések között várható.
Ellentétben a vegetatív sejtek, B. cereus
spórákat nem inaktiváltuk epe , bár nem csíráznak a bél közegben, amely 5 és 10 g /l Oxgall. Ez egybeesik a megfigyelések a dinamikus szimuláció gasztrointesztinális áthaladást spórák [25], ahol a spórák nem befolyásolta során a száj, a gyomor és a nyombél és mindössze kezdődött csírázás során dialízis, amikor az epe koncentrációt csökkentették 5,0 g /l Oxgall < 0,5 g /l, valamint a szakaszos inkubációs kísérletek [31], ahol a spórák kicsírázott 2 órán belül a bél szimulációs közegben, amely 1,0 g /l epével. Más vizsgálatok is beszámolt, hogy a spórák voltak képesek csírázni és szaporodnak mesterséges bélnedvben tartalmazó epe (1,5 g Oxgall /l) [32], és hogy az epe ellenállása B. cereus katalógusa spórák jobb volt, hogy a vegetatív sejtek [33 ]. Összefoglalva, a magas epe koncentrációban (≥ 5 g /l Oxgall) nem teszik lehetővé a spórák csírázását, míg az alacsony epe koncentrációban (< 5 g /l) indukálnak csírázás és kinövését.
Betöltött fontossága mellett az a tápanyag emésztése és felszívódása, az epesavak szintén fontos mikróbaellenes vegyületet a bélben [7]. Rendellenes alacsony bél epe szintek előfordulhatnak emberek epeúti vagy máj rendellenességek vagy hiányosságok enterohepatikus keringés, amely teheti azokat az embereket, különösen hajlamosak a hasmenés miatt fokozott túlélése lenyelt és a bélbaktériumok. Sőt, az epesavak endogén hashajtók, így felszívódási zavar epesavak a vékonybélből, ami növeli az epe szintje a terminál vékonybél és a vastagbél, is eredményezhet hasmenés [34].
Következtetés
B. cereus
vegetatív sejtek nem képesek a túlélésre gasztrointesztinális áthaladás mint által szimulált in vitro
kísérletben, annak ellenére, magas inokulum koncentrációját 7,0-8,0 log CFU /ml, és a termesztés az inokulum az összetett élelmiszer mátrix lasagne Verde. A legtöbb vegetatív sejtek inaktiválódik a gyomorsav, és a túlélő sejteket ezt követően inaktiváljuk epe során a nyombélben fázisban. Ezzel szemben a B. cereus katalógusa spórák túlélte a szimuláció gasztrointesztinális folyosón, és maradt spórák során kedvezőtlen feltételeket csírázás (és kinövés). Ezért a fertőző dózis B. cereus
valószínűleg szerint változik a fiziológiai forma fogyasztása esetén, alacsonyabb a rendkívül ellenálló spórák. Bár a gyomor-túlélés hasonló volt a különböző törzsek, sporulációjukat tendencia jelentősen eltértek, ami viszont fontos következményei vannak a gyomor-bél túlélési potenciált, és a fertőző dózis a különböző B. cereus katalógusa törzsek.
Nyilatkozatok
a szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf A szerzők eredeti fájl 2. ábrán versengő érdek katalógusa Mi, minden szerző, állapítsa meg, hogy nincs ellentétes érdekek. Katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa SC, MU és TVdW tervezett kísérletek; SC és SH végzett kísérleti munka és a feldolgozott eredmények; SC írta a kézirat segített MU, NB és TVdW. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Tartósan alacsony expressziója hZip1 a mucinosus carcinomák a petefészek, vastagbél, a gyomor és a tüdő
• Exsanguinating felső GI vérzések miatt szokatlan arteriovenosus malformáció (AVM) a gyomor és a lép: a esetismertetés