Инактивация Bacillus Cereus вегетативных клеток под действием желудочной кислоты и желчи во время экстракорпорального транзита желудочно-кишечного тракта

Инактивация Bacillus сегеиз
вегетативных клеток под действием желудочной кислоты и желчи во время в пробирке
желудочно-кишечный тракт
Аннотация
Справочная информация
The пищевого происхождения возбудитель Bacillus сегеиз
может вызвать диспепсические пищевое отравление при производстве энтеротоксинов в тонком кишечнике. Предпосылкой для желудочно-кишечных заболеваний, таким образом, выживание во время желудочно-кишечного тракта прохождения.
Методы
вегетативные клетки 3-х различных B. Cereus
штаммы культивировались в матрице пищевого реального композита, рожки верде, и их выживание при последующем моделировании желудочно-кишечный проход оценивали с использованием пробирке
эксперименты в моделировании транзита через человека верхних отделов желудочно-кишечного тракта (изо рта в тонкой кишке).

Результаты не наблюдалось выживание вегетативных клеток, несмотря на высокие уровни инокуляции 7,0 до 8,0 войти КОЕ /г и наличие различных потенциально защитных компонентов пищи. Значительные фракции (ок. 10% от потребляемой посевного материала) из B. Cereus
вегетативные клетки выжили проход желудка, но они были впоследствии инактивируется под воздействием желчи в слабокислой среде кишечника (рН 5,0). В противоположность этому, низкое число спор, присутствующих (до 4,0 лог спорами /г) показал превосходную выживаемость и остаются жизнеспособными спорами в желудочно-кишечном имитации прохода.
Заключение
вегетативные клетки инактивируют кислоты желудочного сока и желчи во время желудочно-кишечного тракта прохождения , в то время как споры устойчивы и выживают. Таким образом, физиологическая форма (вегетативные клетки или споры) от B. сегеиз
потребленный определяет последующее желудочно-кишечного тракта выживания и, следовательно, инфекционная доза, которая, как ожидается, будет намного ниже, чем для спор вегетативных клеток. Никаких существенных различий в желудочно-кишечном способности выживаемости не было обнаружено среди различных штаммов. Тем не менее, значительная изменчивость штамма наблюдалась тенденция спорообразования в процессе роста в лабораторной среде и пище, которая имеет важные последствия для желудочно-кишечного тракта потенциал выживаемости различных B. Cereus
штаммов.
Ключевые слова
Эхиноцереус бациллы
Желчь В пробирке
моделирование Желудочно-кишечный канал фон
B. эхиноцереус
может вызвать рвотное и диарейных и пищевое отравление при производстве соотв. рвотное (cereulide) и желудочно-кишечные токсины (не-гемолитический энтеротоксин (Nhe), гемолизин BL (Hbl), цитотоксин K (CytK) и т.д.) [1]. В отличие от чрезвычайно стабильной токсина cereulide, энтеротоксины легко разрушаются кислоты и пищеварительных ферментов (протеазы), и, таким образом, предварительно сформированные энтеротоксинов в пищевых продуктах не сохраняют свою токсичность в течение желудочно-кишечного тракта прохождения [2]. Таким образом, предпосылкой для диареей пищевых отравлений энтеротоксина производства Б. эхиноцереус
в тонкой кишке, так что желудочно-кишечный Выживание вегетативного В. Cereus
исследовалась. Ранее было показано, что прибл. 10% из вегетативных клеток выжила прохождение желудка [3]. Затем выжившие бактерии сталкиваются с желчью в просвет двенадцатиперстной кишки, проксимальной части тонкой кишки.
Желчь в основном состоит из желчных кислот (приблизительно 72% от общего количества липидов), к тому же фосфолипидов (прибл. 24% ) и холестерин (прибл. 4%) [4]. В организме человека эти желчные кислоты состоят в основном из холевой кислоты (от 50% до 80%) и хенодезоксихолевой кислоты (от 20% до 50%) [5, 6]. Они синтезируются в печени из холестерина и конъюгированный с глицином (прибл. 75%) или таурин (прибл. 25%), с соотношением конъюгации в зависимости от диеты среди других факторов [6, 7]. Секреция желчи инициируется жира и высвобождение кислоты из желудка в двенадцатиперстную кишку, что приводит к 7 до 15 мМ солей желчных кислот в тонкой кишке после приема пищи, что соответствует от 5 до 10 г /л Oxgall [7-10]. Деконьюгации желчных кислот коренных кишечных бактерий, главным образом, происходит в дистальной подвздошной кишке, где прибл. 95% желчных кислот реабсорбируется, из которых ок. 15% неконъюгированного [7, 10]. Оба и несопр конъюгированных желчных кислот всасываются путем пассивной диффузии вдоль всей кишки, но этот процесс является более эффективным для неконъюгированных желчных кислот. Кроме того, конкретные активные транспортные системы присутствуют в дистальной подвздошной кишке, которые являются более эффективными в поглощении конъюгированных желчных кислот. После всасывания из кишечника, желчные кислоты транспортируются в печень через кровь, reconjugated и секретируются снова в желчный пузырь. Этот процесс рециркуляции желчных кислот называется энтерогепатической циркуляции.
Физиологическая роль желчных кислот, чтобы увеличить растворимость пищевых жиров и способствуют его деградации и поглощения. Благодаря своим моющим свойствам, желчные кислоты также изменяют клеточные мембраны и, таким образом, обладают цитотоксической и бактерицидные эффекты, заметные повышенной текучести мембраны и проницаемости [11-14]. В зависимости от концентрации желчи, нарушению целостности клеточных мембран происходит почти мгновенно, в результате чего утечка и гибели клеток, или более медленно и тонко путем изменения проницаемости мембран и текучесть, активность критических белков в клеточной мембране и мембраной гидрофобности [15 ]. В дополнение к разрушению целостности бактериальной клеточной мембраны, желчь также индуцирует повреждение ДНК, денатурации и неправильного фолдинга белков, что приводит к гибели бактерий [16].
Грам-положительных бактерий, как правило, более чувствительны к желчи, чем грам отрицательные бактерии, но толерантность к желчи очень напрягает специфически, так обобщенные заявления для вида не представляется возможным [17-19]. Несмотря на бактерицидное действие желчи, некоторые микроорганизмы выработали резистентность желчи путем индукции желчи биотрансформации ферментов и транспортных систем, или путем изменения проницаемости мембран, текучесть или заряд. Некоторые кишечно патогены могут даже зависеть от желчи как сигнал хозяина для регуляции вирулентности. Например, сальмонелла энтерика серовар Typhimurium обладает множественной лекарственной оттоку насоса AcrAB для удаления желчи и транспорта через внешнюю мембрану [20]. Кроме того, вторжение эпителиальных клеток хозяина этой бактерией индуцируется пониженными концентрациями желчи, поэтому после транзита в дистальной подвздошной или в слой слизи [21].
Сопредседатель отметил приема пищи является важным фактором в антибактериальной активность желчи в кишечнике. Желчь инактивация бактерий влияет наличие пищевых компонентов, которые могут создать защитные микро-среды или связывания желчи. Например, максимальная концентрация желчи переносится B. Cereus
во время роста в кишечной среде была 3 г /л свиная желчь, когда гороховый суп был дополнен, в то время как лишь 0,9 г /л и 0,6 г /л желчи переносились в присутствии молока и отсутствие пищи, соответственно [22]. Кроме того, для Lactobacillus curvatus, наличие пищевой матрицы, а именно мяса, увеличила желчи толерантность и впоследствии его желудочно-кишечного тракта выживаемость [23]. Кроме того, допуск желчи Bifidobacterium Breve усиливалась соевых белков [24].
В этом исследовании желудочно-кишечного выживание вегетативного B. сегеиз
клеток исследовали и связана с бактерицидной роли желчи. B. эхиноцереус
инокулята культивировали в композиционном пищевой матрицы лазаньи верде до проведения экстракорпорального
моделирования в желудочно-кишечного прохода, чтобы включить любые потенциальные защитные эффекты частиц пищи на желудочно-кишечный выживания B. сегеиз <бр>.
материалы и методы
B. эхиноцереус
штаммов, культивирования и подсчета
The B. сегеиз
штаммы АТСС 14579, NVH 1230-88 и FF 73 (таблица 1) культивировались и затем пересевают в 10 мл триптонового соевом бульоне (TSB, Oxoid) в течение 24 ч при 30 ° с. После центрифугирования и ресуспендирования в 1 мл раствора Физиологическое пептон соль (ПФС, 8,5 г /л NaCl (Fluka) и 1 г /л нейтрализованы бактериологический пептон (Oxoid)), 830 мкл субкультуры высевали на 83 г лазаньи верде (купленного в местный супермаркет) в корсаж пакеты и инкубировали в течение 24 ч при 22 ° с. Розничная лазанья верде был куплен в местном супермаркете, в котором содержится в среднем 4,7 журнала КОЕ /г всего бактерий (стандартное отклонение 1,3 журнала КОЕ /г, анализ 11 различных продуктов в течение 6 месяцев) и ≤ лог 2,0 КОЕ /г B . эхиноцереус
. В среднем рН этого пищевого продукта составляет 5,52 (стандартное отклонение ± 0,06) .table 1 моделирование желудочно-кишечного тракта прохождения проводили с тремя различными штаммами B. Cereus: тип штамма B. Cereus ATCC 14579, клинический изолят B. эхиноцереус NVH 1230 -88 от диарейных вспышки пищевого отравления и пищевой изолята B. Cereus FF 73 из соответствующей пищевой матрицы, а именно лазаньи верде
B. Cereus штамма

Происхождение

температуры роста Mininal ( ° C)

Hbl производства

производства NHe

ATCC114579
штамма
> 10
+
+
NVH2 1230 -88
клинические (фекалии) человека
8
+
-
FF3 73
питание (лазанья верде)
10
+
+
1ATCC = American Type Culture Collection, США; 2NVH = Норвежская школа ветеринарных наук, Осло, Норвегия; 3FF = Фландрии Food Collection, Бельгия.
Общее количество и B. сегеиз
Количество определяли путем посева соответствующих разведений в ПФС на триптонового соевом агаре (TSA) и маннитол-Яичный желток-полимиксин агар (MyP .., соответственно концентрации спорами определяли путем высева после нагревания при 80 ° с в течение 10 мин
В пробирке
моделирование желудочно-кишечного тракта прохождения
динамический желудочно-кишечном имитационного эксперимента состояла из пяти этапов: 1) рот, 2) желудок, 3) в двенадцатиперстной кишке, 4) диализ и 5) подвздошной кишки [25]. В кратком изложении, лазаньи верде, содержащий B. сегеиз
посевного материала (83 г) смешивают со слюной средой (56 мл, рН 6,5, 37 ° С) с помощью stomaching в течение 1 мин (корсаж Lab Blender 400, Seward) и инкубировали в течение за 10 мин до передачи в желудок судна. Значение рН желудка было снижено с 5,0 до 3,0 в течение первых 90 мин и до 2,0 в течение последних 90 мин путем непрерывной добавленной кислоты (0,28 М HCl). Опорожнение желудка было начато через 30 мин после начала желудочной фазы в 5 фракций прерывистым накачки таким образом, что ок. 25% от желудочного содержимого была удалена через 1 ч, 50% через 2 часа и 75% через 3 ч. Фракционное опорожнение желудка приводит к 150 мин перекрытием между желудка и двенадцатиперстной кишки фазы, в которой В. Cereus
инокулята была разделена на субпопуляции, которые были подвергнуты различным различного времени инкубации в фазе желудка (мин. 30 мин, макс . 180 мин) и двенадцатиперстной кишки фазы (мин. 10 мин, макс. 160 мин). Кишечный сосуд анаэробный (продувают газообразным азотом) и содержали кишечную среду с 10,0 г /л желчи (Oxgall, Difco), и рН рН автоматически регулируется с помощью регулятора рН (FERMAC 260, Electrolab), чтобы оставаться при рН 5,0 в течение первые 45 мин и при рН 6,0 в течение последних 115 мин. И конец двенадцатиперстную фазы, полное содержимое желудка переносили и концентрация желчи была снижена путем разбавления до 5 г /л. На следующем этапе, ≥ 90% от этой желчи удаляли путем диализа и конкуренции с кишечными бактериями человека моделировалось на заключительном этапе подвздошной. Тем не менее, после устранения B. Cereus
вегетативные клетки, желудочно-кишечный эксперимент был остановлен, в результате экспериментов, состоящих из первых трех фаз только. Эксперименты проводились в трех экземплярах с различными B. сегеиз
инокулята в разные дни.
Толерантность к Желчь Б. эхиноцереус

Б. сегеиз
штамма NVH 1230-88 культивировался, а затем пересевают в 10 мл TSB в течение 24 ч при 30 ° C. Затем добавляли 100 мкл субкультуры высевали в стеклянные пробирки, содержащие 9,9 мл TSB и инкубируют при 37 ° С. Значение рН TSB был либо нейтральным (рН = 7,2) или кислой (рН = 5,0) и с добавлением различных концентраций желчи, в результате чего в конечной концентрации 0,0 (контроль TSB), 1,0, 5,0 и 10,0 г /л oxgall (Difco ). Выживание вегетативного B. сегеиз
клеток оценивали путем высева соответствующие diltutions в ППС на АСП. Был определен
токсинообразования
Производство Энтеротоксины Nhe и HBL путем анализа 1 мл образцов после фильтрации (0,2 Шприц мкм фильтры, Whatman), с Duopath® эхиноцереус энтеротоксинов (Merck) в соответствии с инструкциями производителя.
Результаты
Рост B. Cereus
в лазаньи верде
лазанья верде засевали ок , 6,0 КОЕ /г B. Cereus
и инкубировали в течение 24 ч при 22 ° С для получения высокой концентрации инокулята вегетативного B. Cereus
клеток, выращенных в композитной матрице пищевого с пищевым микробиоты путем имитации хранения загрязненных лазаньи в комнатная температура. Это привело к лазаньи верде, содержащий ок. 8,5 войти КОЕ /г общего количества бактерий, из которых B. Cereus
составлявшие от 7,0 до 8,0 КОЕ /г, в зависимости от штамма (таблица 2). B. эхиноцереус
NVH 1230-88 показал стабильную концентрацию спорами 3,5 бревенчатых спор /г, происходящих из прививочного TSB. В отличие от этого, дополнительный споруляционная было видно из прибл. 4.0 Споры журнала /г до 4,5 лог спор /г после 30 ч для B. Cereus
FF 73. Примечательно, что Б. эхиноцереус
АТСС 14579 не производит каких-либо спор после 30 часов инкубации, только с очень низким числом ( 3,0 спор /г) наблюдалось только у 1 из 3-х дублирующих мешков. После инокуляции и инкубации лазаньи верде, таким образом, сильно загрязнена B. Cereus
вегетативных клеток (7,0 до 8,0 журнала КОЕ /г), в стационарной фазе роста и низких количеств B. Cereus
спор (до 4,0 авторизуйтесь спор /г) .table 2 Рост трех различных штаммов B. Cereus в пищевой матрице до моделирования желудочно-кишечного тракта прохождения; Средние значения независимых экспериментов в трех экземплярах, выраженных в лог КОЕ /г ± стандартное отклонение представлены
B. Cereus штамма

Время (h)


0
<бр> 22

24

26

28

30

B. эхиноцереус
ATCC14579
Общее количество
5,8 ± 0,1 8,3 ±
0,6 ± 8,4
0,3
8,8 ± 0,2 8,8 ±
0,3
8,9 ± 0,2
Общий B. эхиноцереус

5,7 ± 0,1 6,9 ±
0,1
6,9 ± 0,1 6,7 ±
0,3
7,2 ± 0,3 7,0 ±
0,2
Б. эхиноцереус
споры
&л; 2,0 ± 0,0
&л; 2,0 ± 0,0
&л; 2,0 ± 0,0
&л; 2,0 ± 0,0
&л; 2,0 ± 0,0 2,3 ±
0,6 В.
эхиноцереус
NVH 1230-88
общее количество
5,9 ± 0,1 8,2 ±
0,2
8,4 ± 0,1 8,9 ±
0,0
8,9 ± 0,1 8,8 ±
0,2
Итого B. эхиноцереус

6,2 ± 0,3 ± 7,9
0,2
8,2 ± 0,1 8,5 ±
0,2
8,3 ± 0,3 7,9 ±
0,1
Б. эхиноцереус
спорами
3,5 ± 0,6 3,5 ±
0,2
3,3 ± 0,6 3,4 ±
0,6
3,3 ± 0,6 3,4 ±
0,6
Б. эхиноцереус
FF 73
Общее количество
5,7 ± 0,1 8,5 ±
0,1
8,7 ± 0,1 9,0 ±
0,0
9,0 ± 0,3 8,9 ±
0,3
Итого B. эхиноцереус

5,7 ± 0,1 8,1 ±
0,2
8,0 ± 0,1 8,3 ±
0,1
8,2 ± 0,1 8,3 ±
0,2
Б. эхиноцереус
спорами
3,8 ± 0,2 3,9 ±
0,4 ​​
3,9 ± 0,4 4,0 ±
0,5
4,0 ± 0,3 4,5 ±
0,1
обнаружено не было производства энтеротоксинов в лазаньи верде через 24 ч Б. сегеиз
ATCC 14579 и Б. сегеиз
NVH 1230-88, в то время как Nhe был обнаружен спорадически (в 1 из 3 повторностях) в случае B. Cereus
FF 73. вероятно, это было связано с кислым рН 5,5 лазаньи верде и довольно низкой температурой инкубации 22 ° C, которые не являются оптимальными для производства энтеротоксин [1]. Тем не менее, заранее сформированные энтеротоксины в пищевых продуктах не несет ответственности за диарейных пищевое отравление, так как они быстро деградируют во время прохождения желудочно-кишечного тракта [2].
В пробирке
моделирование желудочно-кишечного тракта прохождения B. сегеиз
вегетативных клеток <бр> лазанья верде загрязнен 7,0 до 8,0 журнала КОЕ /мл B. сегеиз
вегетативных клеток в стационарной фазе роста была подвергнута моделирования в пробирке
желудочно-кишечного тракта прохождения (рисунок 1). наблюдалось во время фазы рта и первые 30 мин фазы желудка при рН желудка было между 5,0 и 4,0; Выживание B. Cereus
(1 логарифмического снижения &ЛТ). После этого, когда рН желудка снизился ниже 4,0, вегетативные клетки быстро инактивируется в фазе желудка, заметно, как быстрое снижение общего B. сегеиз
рассчитывает на аналогичные значения B. сегеиз
подсчетов спорами в желудочные сосуды. B. эхиноцереус
полных и споровых отсчетов во время фазы двенадцатиперстной кишки остается ок. 1,0 войти КОЕ /мл для B. сегеиз
ATCC 14579, прибл. 2,5 войти КОЕ /мл для B. сегеиз
NVH 1230-88 и ок. 3.5 войти КОЕ /мл для B. эхиноцереус
FF 73. Интересно, что споровые подсчеты B. сегеиз
NVH 1230-88 снизился во время фазы желудка в течение последнего часа и наиболее кислом рН. Так как общее B. Количество эхиноцереус
не изменилась, это указывает на начало прорастания спор. В. Cereus
ATCC 14579 показал непоследовательное производство спорами, в результате чего в отсутствие спор в течение первых двух имитаций и очень низким числом (чуть выше предела обнаружения 1,0 спор /мл) в течение последних двух экспериментах. Рисунок 1 Инактивация вегетативных клеток в процессе динамического моделирования в лабораторных условиях желудочно-кишечного тракта прохождения с Б. эхиноцереус АТСС 14579 (1), Б. сегеиз
NVH 1230-88 (2) и B. сегеиз
FF 73 (3); Б.М. эхиноцереус
общей (а) и спорами (б) отсчеты были определены путем высева на MYP без и с термической обработкой (10 мин при 80 ° C), соответственно, в лазанью верде (□), фазы рта (◊), фаза желудка (Δ) и двенадцатиперстную кишку фазы (○); средние значения и стандартное отклонение трех параллельных экспериментов в разные дни представлены. не
никаких тестов обнаружения для Энтеротоксины Nhe и HBL были выполнены, так как не наблюдалось никакого роста в течение любого из желудочно-кишечного тракта фаз, что является необходимым условием для производства энтеротоксин [1 ].
Желчь толерантность B. Cereus

роста и выживания B. сегеиз
NVH 1230-88 определяли в присутствии различных концентраций желчи (Рисунок 2). При оптимальных условиях, то есть нейтральной TSB с рН 7,2, эффект от желчи зависит от концентрации. Самая низкая концентрация 1,0 г /л Oxgall привело к сокращению численности населения ок. 30% по сравнению с контролем (TSB без желчи) в момент времени 0 ч. К тому же, через 1 час количество жизнеспособных микроорганизмов уменьшается с прибл. 40% по сравнению с концентрацией в ТСБ с 1,0 г /л Oxgall при 0 ч. Тем не менее, после восстановления 2 ч и разрастание остальных клеток наблюдалась, так как В. Cereus
концентрация была аналогична 0 ч, и, наконец, через 3 ч, население увеличилось с прибл. 1 журнал по сравнению с тем, что при 0 ч. Тем не менее, наличие 5,0 г /л Oxgall индуцируется постоянное снижение до 4,1 журнала КОЕ /мл в среднем на (инактивация 88% вегетативных клеток) и что 10,0 г /л Oxgall до 3,9 журнала КОЕ /мл (инактивация 94 %). Рисунок 2 Выживание B. эхиноцереус NVH 1230-88 в триптонового соевом бульоне (TSB) при 37 ° С при рН 7,2 (А) и рН 5,0 (В) с различной желчи (Oxgall, Difco) концентрации: 0,0 г /л (белый ), 1,0 г /л (светло-серый), 5,0 г /л (темно-серый) и 10,0 г /л (черный).
В TSB при кислом рН 5,0, прибл. 99% B. сегеиз
инокулята мгновенно инактивируется воздействием желчи, независимо от концентрации желчи, что приводит к постоянным полным B. сегеиз
эпизодам ок. 3,0 войти КОЕ /мл. В. Cereus
посевного материала содержала от 0,1 до 0,2% спор, так что постоянные отсчеты споровых были получены в течение всего эксперимента: 2,6 (± 0,2) войти спор /мл в начале и 2,5 (± 0,3) войти спор /мл в конец. Исходя из этого спорами населения во внимание, вегетативные клетки по-прежнему составляли большинство (ок. 60%) на 1% желчи резистентных B. Cereus
.
Обсуждение
выживания вегетативных клеток во время прохода желудка была аналогична к тому, что из предыдущих исследований с картофельным пюре среды [3]. В ходе этих экспериментов, прибл. 10% от вегетативных клеток выжила проход желудка, большинство из них в первой желудочной фракции при рН желудка было от 5,0 до 4,0. Эти клетки переносили живыми в кишечном сосуд и, таким образом, между 5,5 и 6,5 журнала КОЕ /мл B. эхиноцереус
, как ожидается, в кишечном сосуде. Тем не менее, гораздо более низкие счетчики, которые приблизили B. Cereus
подсчет спор, были получены в двенадцатиперстной кишке фазы. Это указывает на то, что вегетативные клетки, которые выжившие проход желудка инактивируются в кишечной среде. Пакетные инкубационных экспериментов в ТСБ и различные концентрации желчи показало, что большинство из них (99,1%) из вегетативных клеток инактивируют сразу после воздействия желчной при рН 5,0, независимо от концентрации желчи в диапазоне от 1,0 до 10,0 г /л Oxgall. В заключение, вегето B. эхиноцереус
клеток, которые пережили переход желудка во время последующей фазы двенадцатиперстной кишки с помощью бактерицидного эффекта желчи были устранены.
Бактерицидный эффект желчи на вегетативную B. сегеиз
клетки была зависит от рН. При рН 7,0, инактивация коррелировала с концентрацией желчи, а самая низкая концентрация желчи (1 г /л) даже позволило выживание и рост. В отличие от этого, при рН 5,0, мгновенная инактивация большинства (> 99%) вегетативных клеток произошли, не зависит от концентрации желчи (в диапазоне от 1,0 до 10,0 г /л). Подобно нашим результатам, инактивация листерий по желчных кислот также сильно увеличивается при кислом рН 5,5 [26]. Инактивация бактерий желчь подобна органическими кислотами, которые являются особенно эффективными как при низких значениях рН. Константа диссоциации логарифмическая кислоты (рКа) неконъюгированных желчных кислот составляет около 5,1, но конъюгации с глицином снижает рКа прибл. 3.7 [27]. Сопряжение с таурина приводит к еще более низким рКа прибл. 1.5 [28]. Как следствие, большинство конъюгированных желчных кислот, диссоциирует и ионизируется при большинстве физиологических и кишечных значениях рН, а именно 95,24% при рН 5,0 и 99,95% при рН 7,0 для glycoconjugated желчных кислот. Только неионизированную формы желчных кислот может пассивно пересечь клеточную мембрану, в то время как диссоциированных и ионизированных конъюгированных желчных кислот требуют специфических активных транспортных систем [29]. В результате, 4,67% конъюгированных желчных кислот, могут войти в B. сегеиз
клеток при рН 5,0, в отличие от только 0,03% при рН 7,0. Кроме того, внутренний рН жизнеспособных B. Cereus
клеток всегда лежит между 6,0 и 7,5, в зависимости от внешних рН и условия культивирования [30]. После того, как недиссоциированные желчных кислот диффундирует в B. Cereus
клеток, большинство из них (99,50 до 99,98%) подвергается внутриклеточный диссоциации, что приводит к летальному внутренней подкисления.
Сообщалось, что некоторые пищевые компоненты увеличили желчи толерантность B. сегеиз
вегетативные клетки в кишечной среде с рН 6,5 [22]. Тем не менее, составной матричный пищевой лазанья верде не смягчить вредное воздействие желчи на B. Cereus
в ходе наших экспериментов при рН 5,0. Возможно, что эффекты питания типа наблюдаются только при более оптимального рН для этого пищевого происхождения патогена, когда более выраженные различия между обработками, как ожидается.
В отличие от вегетативных клеток, В. Cereus
спор не инактивируется желчи , хотя они не прорастали в кишечной среде, содержащей от 5 до 10 г /л Oxgall. Это совпадает с наблюдениями динамического моделирования желудочно-кишечного тракта прохождения спор [25], где споры не были затронуты во рту, желудке и двенадцатиперстной фазы и только начали проращивание во время диализа, когда концентрация желчи была снижена с 5,0 г /л Oxgall к &лт; 0,5 г /л и те из партии инкубационных экспериментов [31], где споры проросли в течение 2 ч в кишечном имитационной среде, содержащей 1,0 г /л желчи. Другие исследования также сообщили, что споры способны прорастать и размножаться в моделированной кишечной жидкости, содержащей желчь (1,5 г Oxgall /л) [32] и что сопротивление желчи B. Cereus
спор был лучше, чем вегетативных клеток [33 ]. В заключение, высокая концентрация желчи (≥ 5 г /л Oxgall) не позволяют прорастание спор, в то время как низкие концентрации желчи (&л; 5 г /л). Индуцировать прорастание и разрастание
К тому же его значение в питательном пищеварения и всасывания, желчи также является важным антимикробный в кишечнике [7]. Аномальные низкие уровни кишечных желчных кислот могут возникнуть у людей с желчными или печени нарушений или недостатков в энтерогепатической циркуляции, которые могут оказать эти люди особенно восприимчивы к диарее из-за повышенной выживаемости глотавших и кишечных бактерий. Кроме того, желчные кислоты являются эндогенными слабительные, поэтому мальабсорбции желчных кислот из тонкой кишки, что приводит к увеличению уровней желчи в терминальной тонкой кишки и толстой кишки, может также привести к диарее [34].
Заключение
B. эхиноцереус
вегетативные клетки не могли выжить желудочно-кишечный пассаж имитируется экстракорпорального
эксперимента, несмотря на высокую концентрацию посевного материала от 7,0 до 8,0 журнала КОЕ /мл и культивирование посевного материала в композиционном пищевой матрицы лазаньи верде. Большинство вегетативных клеток инактивировали желудочной кислоты, а выжившие клетки впоследствии инактивируется желчи во двенадцатиперстную фазе. В противоположность этому, B. Cereus
споры пережили моделирование желудочно-кишечного тракта прохождения и оставались спорами при неблагоприятных условиях для прорастания (и вырост). Таким образом, инфекционная доза для B. Cereus
вероятно, варьируется в зависимости от физиологической форме израсходован, была ниже для высокорезистентных спор. Несмотря на то, желудочно-кишечного тракта выживаемость была одинакова для различных штаммов, их споруляция тенденция значительно варьируется, в свою очередь, имеет важные последствия для желудочно-кишечного выживания потенциала и, таким образом, инфекционная доза различных B. сегеиз
штаммов.
Объявления <бр> Авторские оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинальных представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для фигурного 1 13099_2012_68_MOESM2_ESM.pdf Авторского 13099_2012_68_MOESM1_ESM.pdf авторов исходного файла для фигуры 2 Конкурируя интерес
Мы, все авторы, заявляют, что у нас нет конкурирующих интересов. Взносов
Авторского
SC, MU и TVdW разработаны эксперименты; SC и SH выполнил экспериментальную работу и обработаны результаты; SC написал рукопись которой помогает MU, NB и TVdW. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Стойкие низкое выражение hZip1 в муцинозных карцином яичников, толстой кишки, желудка и легких
• Обескровливающий верхних отделов ЖКТ кровоточит благодаря необычному артериовенозных мальформаций (АВМ) же…