Funkcionalne spremembe, povezane z prebavnem traktu organogenezo med metamorfozo v navadni jezik (Hippoglossus hippoglossus)

Funkcionalne spremembe, povezane z prebavnem traktu organogenezo med metamorfozo v navadni jezik (Hippoglossus hippoglossus
)
Abstract
ozadju
Bokoplute metamorfoze je hormon, urejen po zarodkov razvojni dogodek, ki spreminja simetrično ličinke v asimetrične mladoletnika . V altricial-želodčni teleost rib, diferenciacija želodca poteka po pojavu prvega hranjenja in med metamorfozo dramatične molekularnih in morfoloških sprememb prebavil (GI-) trakta pojavijo. Tukaj vam predstavljamo funkcionalno zorenjem v razvoju GI traktu iz integrativne perspektive v pleuronectiforme navadnega jezika in testiranje hipoteze, da je več funkcije teleost želodcu med metamorfozo razvoj sinhrono.
Rezultati
Nastop funkcije želodca je bila določena z več pristopov (anatomski, biokemijski, molekularni in vivo
pripomb). In vivo
analize pH v lumnu na GI-trakta v kombinaciji s kvantitativno PCR (qPCR) iz a in beta podenote želodčni protonske črpalke (H
+
/K
+
-ATPaznega
) in pepsinogen A2
je pokazala, da je v želodcu proteolytic zmogljivosti s sedežem v vrhuncu metamorfoze. Prepis obilo ghrelin
, domnevni orexigenic signalne molekule, proizvedenega v želodcu v razvoju, medsebojno povezana (p < 0,05) s pojavom želodca proteolitičnim dejavnosti, kar kaže, da se zgodi vloga želodcu pri regulaciji apetita hkrati z ustanovitvijo proteolitske funkcije . 3D modeli serije razvoja GI-trakta navedeno funkcionalno pilorično mišice zapiralke pred prvo hranjenje. Opazovanja v prehrani ličink in vivo
potrdila, da je funkcija v trebuhu jezero ustanovljena pred metamorfozo, in je tako neodvisen od tega dogodka. Mehanska razdelitev hrane in prevoza chyme skozi GI trakta opazili vivo
in posledica fazno in razmnoževalnega popadkov, ustanovljenih precej pred preobrazbo. Število kontrakcije v midgut zmanjšala na metamorfnih vrhunec sinhrono z vzpostavitvijo proteoliti zmogljivosti želodca in povečane peristaltične aktivnosti. Domnevni osmoregulatory pristojnosti GI trakta, ki jo obilo natrija sklepati
+
/K
+
-ATPaznega α
prepisi, je bila že ustanovljena na začetku eksogenega hranjenja in je nespremenjeno s metamorfoze.
sklepe
funkcionalne specializacije GI trakta ni bil izključno za metamorfozo, njegova osmoregulatory zmogljivost in rezervoar funkcija so bili določeni pred prvo hranjenje. Kljub temu, kisline proizvodnja in zmogljivost proteolytic želodca sovpadalo z metamorfnih vrhunec, in prav tako zaznamoval nastop vpletenosti želodca pri uravnavanju apetita preko ghrelin.
Ključne besede
Navadni jezik želodca protonske črpalke Prebavila ghrelin motiličnost Na + /K + - ATPaze Pepsinogen ontogeny pH v želodcu Ozadje
strategij odklonilna prebavil (GI-) morfologija trakta in prehrane med ličink in odraslih faze so prilagoditve za bistveno različne habitate in viri hrane [1]. Postembrionalnem zorenje prebavnega sistema je ključni dogodek v zgodovini življenjski vretenčarjev in bistvenega pomena za preživetje. Ščitničnega hormona (TH) poganja metamorfoza igra ključno vlogo v funkcionalnem zorenje GI trakta in pri oblikovanju svoje morfologijo obrazec za odrasle [2, 3]. Krivljenje v GI traktu od ličinke do odraslega so intenzivno proučevali v Xenopus
[2, 4]. V ta organizem je črevo preoblikoval pod vplivom THS iz dolge spiralne cevi v kompleksno organa z diferencirano želodcu in tankem črevesu [5, 6]. To vključuje epitelijskih in mezenhimskih orožja, gladkih mišic odebelitev in nastajanje črevesnih gub. Številne študije so opisane celične mehanizme, ki so odgovorni za to preoblikovanje v dvoživk [7, 8], vendar je le malo znanega o njihovem vplivu na delovanje tkiva vretenčarjev, predvsem več funkcij, vključenih v želodcu.
Privlačna lastnost vretenčarjev metamorfozo je organogeneza želodca. V zgodnjih razvojnih fazah ribe in brezrepe dvoživke želodec je pogosto odsoten in del njene funkcije se lahko opravi v črevesju. Glavne vloge vretenčarjev želodcu so skladiščenje zaužite hrane, izločanje solne kisline (HCl) in pepsinogen in mehanske okvare in mešanje hrane v želodcu izločki [1, 9]. Tako je v ličinke altricial-želodca vrste, kot so navadni jezik, odsotnost želodcu omejuje sposobnost za prebavo prehranskih beljakovin, ko se začne eksogeni hranjenje [10-14]. To je eden od razlogov, zakaj je večina študij razvoja GI-trakta med metamorfozo, ki se osredotočajo na razvoj želodcu in menijo, videz želodčnih žlez kot ustrezen kazalnik popolnoma razvit želodec [15, 16]. Vendar pa je postalo jasno, da je histološka identifikacija želodčnih žlez, ne pomeni, da je želodec popolnoma funkcionalen. Zato je proteolytic funkcija želodcu najbolje kaže pepsin dejavnosti [11, 17] in vsebine pepsinogen
[18]. Da bi bolje razumeli učinkovitost prebavnega obdelave med rib zorenjem, številne študije primerjali izražanja profile pepsinogen
in želodca protonske črpalke (H
+
/K
+
-ATPaznega
), ki se nahajajo v izločajo oxynticopeptic celic HCl [19-22]. Murray et al. [23] so uporabili histologijo in pepsinogen
analize Prepis preučiti zorenjem želodca v navadnega jezika in pokazala, da je nastop na 66 dni po izvalitvi (DPH) želodčnih žlez, pred izražanje pepsinogens A1
in A2
prepisi pri 80 DPH. Vendar pa je vpliv metamorfoze na drugih pomembnih funkcij razvoja želodcu ali GI-trakta na splošno je v veliki meri spregledani v ploščatih rib.
Poleg kisline proizvodnje in proteolize vretenčar želodec ima tudi funkcije rezervoarjev. Po zaužitju se želodec trgovin in predigests hrane, nato pa prinaša chyme na midgut za nadaljnjo prebavo in naknadno absorpcijo hranil [9]. Funkcija shranjevanje želodcu odpravlja mladih in odraslih rib iz potrebe, da nenehno krme, kot so stomachless ličinke. Ustanovitev želodcu kot rezervoarja zahteva funkcionalne mišic zapiralk (požiralnik in pilorus) in dobro razvit nevronske in gladke plasti mišic. Mehansko mešanje in transport hrane skozi GI trakta se doseže s posebnimi vzorci gibljivosti in ujemanje peristaltiko s sproščanjem prebavnih encimov. Ta proces ima osrednjo vlogo pri učinkovitem predelavi hrane (glej mnenje, [24]), čeprav je zelo malo študij ciljno GI trakta gibanje ličink rib. Prednost uporabe ličink rib, kot so atlantski morske plošče, je njihova optika preglednost, da se ohrani do metamorfoze. To omogoča neposredne vizualne pripombe GI trakta in njegove vzorce motilitete v živih živalih. Pittman sod. [25] poročajo peristaltične krčenje v Navadni jezik ličink, v sprednjem delu črevesa pri 35 DPH. Pri mladih Navadni jezik GI traktu tako anterogradno (razmnoževanje v analnem smeri) in retrogradno (razmnoževalnega v ustni smeri) so bili opisani krčenje valovi [26], in so opazili tudi enaki vzorci v zarodkov in ličinke v stomachless cebric (Danio rerio
) [27].
želodec proizvaja hormone, ki sodelujejo tako pri uravnavanju apetita in prebave. Grelina je primer hormon, ki je v glavnem proizveden v želodcu in deluje kot spodbujevalec vnosa hrane [28, 29]. Pri sesalcih, je grelina je tudi predlagala, da se stimulira izločanje želodčne kisline in gibljivost [30, 31]. Funkcija ghrelin v ličink rib je še vedno slabo opisano, vendar pa je bil predlagan kot kazalnik vpletenosti želodca pri uravnavanju apetita pri razvoju rib [32]. V navadnega jezika, ghrelin
med vrhunec metamorfoze izražanja genov povečuje, kar sovpada z razvojem v trebuhu [33]. Grelina je bogat v razvoju želodčnih žlez in več osmoregulatory tkiv. Poleg tega je njegova hkratna izraz z natrija
+
/K
+
-ATPazni
predlaga, naj bo domnevni vlogi v termah bilance [34]. Vendar pa je vloga ghrelin pri regulaciji apetita, gibljivost in osmoregulation ni znano, kakor tudi njene povezave z proteolitičnim in rezervoarja funkcije želodca v navadnega jezika med metamorfozo.
Namen te študije je ugotoviti vpliv agastric- želodca prehod na funkcionalni vlogi preoblikovanje postembrionalnem GI-trakta, ki se pojavi med metamorfozo v navadnega jezika, a bokoplute vrste velikega komercialnega interesa za severno evropski in severnoameriški ribogojstva. Za vpis spremembe v razvoju GI-trakta in vzpostaviti dogodke, povezane z TH-pogon preobrazbo smo zgradili vrsto 3D modelov morfološke in prostorske ureditve prebavnih organov v reprezentativnih razvojnih fazah. Testirali smo hipotezo, da je razvoj več funkcij želodcu sinhroni in povezan s svojim telesnim videzom na preobrazbo. Funkcija proteolitični želodca smo preučevali z uporabo vivo
pH analiz v kombinaciji z izražanjem profilih specifičnega gena označevalcev H
+
/K
+ -ATPaznega
α
in β podenote
in pepsinogen A2
s kvantitativno PCR (qPCR). Želodec polnjenja in funkcija rezervoar so bili ocenjeni in vivo
vizualnih študij prozorno ličink na prometamorphosis in vrhunec metamorfoze. Domnevna vloga popolnoma funkcionalno želodec pri uravnavanju apetita smo določili z merjenjem grelina
Prepis izobilju. Ustanovitev GI trakt vzorcev gibljivosti v razvoju je bila določena z in vivo
stališčih in vključevanje gastrointestinalnem traktu v osmoregulation smo ocenili z merjenjem obilo natrija
+
/K
+
-ATPaznega α
podenot prepisi.
Rezultati
3D rekonstrukcijo prebavnih organov
3D modele morfologije prebavnega sistema med razvojem so rekonstruirali iz serije histološke sekcije. Lokacija in velikost GI trakta in z njo povezanih organov, kot so jetra, endokrine in exocrine trebušne slinavke in žolčnika, so opazili od 3. fazi (pred prvo hranjenje) do post-metamorfna stopnja 10 (slika 1). Slika 1 zorenjem prebavnih organov v navadni jezik ličinke. 3D modeli so bili rekonstruirani iz serijskih histoloških oddelkov uporabo IMARIS programske opreme. Na prebavila so prikazani iz treh zornih kotov; levo, desno in hrbtna stran. Puščice
kažejo na anteriorni smeri (usta). Orange
zunanja plast GI trakta, rdečo
jeter, zeleno
žolčnika, vijolično
trebušne slinavke, roza
otoček Langerhansovih, rumena
hranilnega mešička. Transparent barve se uporablja za exocrine trebušne slinavke (vijolična
), da se pokažejo v Langerhansovih otočkih (roza
) in žolčnika (zelena
).
GI-trakt vključuje ozek foregut (požiralnik in domnevno želodec /želodec), midgut in kratek epigastru (danka) (slika 2). Sprednjo regija midgut, takoj po pilorusa sfinktru (PS), je bil večji premer, to je bolj voluminozen, v primerjavi s preostalim midgut. Ta funkcija je ohranila med GI-trakta zorenjem (sliki 1 in 2). Oba PS (ki ločuje domnevno želodec od sprednjega midgut) in ileorectal sfinkter (ki ločuje midgut in epigastru) smo identificirali iz stopnje 3 leta (sliki 1 in 2). Piloricne caeca postalo očitno, kot projekcije iz najbolj sprednjega dela midgut v fazi 6 (sliki 1 in 2). Želodec je dobro diferencirani na stopnji 10 in želodca žleze so bili vidni na histoloških odsekih (Dodatni datotek 1). Obseg luminalne v gastrointestinalnem traktu povečano fazi razvoja, zlasti v zadnjih dveh stopnjah analiziranih (stopnjah 9A in 10) (slika 3 Tabela 1 in dodatno datoteko 2). Obseg želodec od 9A do 10 povečal s 415 na 4933 NL, oziroma in je ustrezalo 11-krat prirastek (tabela 1). Slika 2 zorenjem domnevnih trebuhu (transparent svetlo modra) in lumnov GI trakt (modra) v navadni jezik ličinke. 3D modeli so bili rekonstruirani iz serijskih histoloških oddelkov uporabo IMARIS programske opreme. GI trakta lumen predstavlja notranjo plast (nasproti lumen) iz gastrointestinalnega trakta. GI trakta je razvidno iz treh kotov; levo, desno, in hrbtna stran. Puščice
kažejo na anteriorni smeri (usta). Arrow voditeljev
kažejo na položaj mišice zapiralke (rdeča: pilorično sfinkter, črna: ileorectal mišice zapiralke). St
sum trebuhu /želodcu, mg
midgut, hg
epigastru.
Slika 3 standardizirano povečanje glasnosti prebavnih organov med fazo (S), 3 do 10 navadnega jezika. Povečanje prometa je bilo normalizirano na celotno povprečje povečanja prostornine med stopnjami za vsako tkivo (za podrobnejšo razlago glej dodatno datoteko 2). Obseg
Tabela 1 GI trakta organ (nl) in površina (10 6 mikrometrov 2)
Faza 3
Faza 4
Stage 5
Stage 6
Stage 9A
Stage 10

GI trakta zunanji sloj (nl)
157,42
261,03
490,65
1038,48
2670,15
12.855,10
GI trakta zunanji sloj (106 μm2)
3.59
5.12
6.74
10.07
20.53
63.38
GI trakta notranja plast (nl)
78,40
136,84
266,55
525,89
1034,10
6451,16
GI trakta notranja plast (106 μm2)
2.83
4.73
9.60
16.34
50.45
54.76
GI trakta tkiva volumea (nl)
79.02
124,19
224,10
512,59
1636,05
6403,94
jeter (NL)
35.24
48.82
98,18
225,23
928,25
4232,77
trebušne slinavke (nl)
13.79
21.42
37.91
109,08
471,25
463,79
Langerhansovih otočkih (NL)
0,50
0,46
0,57
1,05
5,33
11.73
domnevnih želodec (nl)
15.51
27.29
32.06
84.09
414,54
4932,67
Vrednosti so izračunane iz 3D modelov uporabljajo IMARIS MeasurementsPro
obseg AGI-trakt tkiva = GI trakta zunanji sloj -.. GI trakta notranja plast
jeter je bil postavljen pod foregut in prednjim delom naraščajočem zanko midgut (slika 1) in obsega postopoma povečala razvoj (slika 3 in preglednica 1). Eksokrinega pankreas smo opazili med domnevnih želodca in sprednjem delu midgut v fazi 3 in je obdan to midgut področje vsej zorenjem (slika 1). V trebušne slinavke, so opazili jasno razlikuje otoček Langerhansovih blizu žolčnika v fazi 3 (slika 1). V nasprotju z drugimi prebavilih je bila porast v normirani obsega endokrinega in eksokrine trebušne nizka in negativen, oziroma med stopnjah 9A in 10 (slika 3 in tabeli 1). Rumenjak-sac, ki je nameščena pod GI trakta v 3. fazi, v velikosti zmanjšala po začetku eksogenega hranjenja in majhen ostanek ostal poleg jeter v fazi 4 (6 dni po prvi hranjenje, dpff). Žolčniku opazili na desni strani med exocrine trebušne slinavke in jeter ter ohranila ta položaj na vseh razvojnih stopnjah analiziranih (slika 1). Pankreatičnih vod in žolčnih vodov odprt drug poleg drugega v lumen na srednjo ravnino sprednjega midgut, šele potem PS (podatki niso prikazani).
Kloniranje in filogenetske karakterizacijo pepsinogen A2, ghrelin, želodca protonske črpalke podenote in na + /k + ATP-aze podenote α
popolno kodirno zaporedje (CDS), navadnega jezika pepsinogen A2
je 1128 bp in je bil predložen GenBank pod pristopno št. KF184647 (Dodatna datoteka 3: C). Amino kisline (AA) zaporedje pepsinogen je relativno dobro ohranjen pri teleost rib in, kot je bilo pričakovano, več spremenljivk v primerjavi z drugimi vretenčarjev pepsinogens. Na primer, morska pepsinogen A2 v skupni rabi oziroma 88% in 64% zaporedje AA identitete z zimskim iverke (Pseudopleuronectes americanus
) pepsinogen obliki, IIb in IIa, vendar le 52% in 48% identitete z homologov iz Xenopus laevis
in ljudi, v tem zaporedju (podatki niso prikazani).
cDNA delci klonirane za navadni jezik H
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
( 911 bp) in na
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
(714 bp) so bile deponirane v GenBank s številkami pristopna KF184648 in KF184650, oziroma (Dodatna datoteka 3: B, D). CDS za H
+
/K
+
-ATPaznega β je podenota
od 874 bp klonirali in predloženo GenBank s pristopom št. KF184649 (Dodatna datoteka 3: A). Filogenetska analiza alfa podenote želodca protonske črpalke in Na + /K + - ATPaze in vretenčarjev homologov (Dodaten datotek 4) generira dva glavna genotipskih skupin, pri čemer eden ustreza H + /K + - ATPaze, drugi pa natrija + /k + - ATPaze. Filogenetski analizi beta podenote (Dodatni datotek 5) ustvarila drevo z dvema velikima genotipskih skupin, ki v skupni rabi isto splošno topologijo kot phylotree za alfa podenoto z H + /K + - ATPaze in Na + /K + - ATPaze zbrani neodvisno
Navadni jezik H + /K + -. -ATPaze α podenote najtesneje žive z teleost homologov, s katero je v skupni rabi 94% sekvenčno AA identiteto, povečala na 98% identitete z zimskim iverke in trska (Gadus morhua
). Spodnja AA sekvenčno identiteto (72%) je bilo ugotovljeno, ko Navadni jezik H + /K + - ATPaze α podenote je bila v primerjavi z Navadni jezik natrija + /K + - ATPaze α podenote (70 %) in drugih vretenčarjih kolegi (72%). Atlantic morska Na + /K + - -ATPaze alfa podenoto nakopičenih s Antarktiki ogorčico (Pachycara brachycephalum
) homolog (98%) in skupno približno 88% AA identitete z drugimi teleost genskih homologov. H + /K + - -ATPaze beta podenoto nakopičenih kot je bilo pričakovano v teleost klad (celotne identitete približno 80%) in skupno precej nizko identiteto s svojo človeško homolog (50%). Navadni jezik H + /K + - ATPaze β podenote ni delež več kot 39% sekvenčno AA identiteto z Navadni jezik natrija + /K + -. -ATPaze Β podenote
ontogenetski izraz vzorec in analiza korelacije
razvojnih izražanja profilov pepsinogen A2
, H
+
/K
+
-ATPaznega α
in β podenoti
, na
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
in ghrelin
so bili analizirani s qPCR v gastrointestinalnem traktu individualne Navadni jezik ličink (slika 4). Gen izražanje obeh želodčnih podenote protonske črpalke znatno bili (p 0.05, prilagojen R 2: 0,773) korelacija (slika 5) in je vzporedna izražanja vzorcev, z ostrim in pomembno (p < 0,05) povečanje pri vrhunec in v fazi post-metamorfnih (Slika 4). Pepsinogen A2
je značilno (p < 0,05) povezana s profilom ekspresije želodca a protonske črpalke (nastavljiv R 2: 0.9738) in ß (prilagojena R 2: 0,7963) podenot (slika 5 ). Pomemben (p < 0,05) povečanje v stopnji 8 je bila ugotovljena za pepsinogen A2
in njen izraz dosegla vrhunec v fazi post-metamorfnih. Ghrelin
mRNA transkript številčnost postopno povečuje in znatno (p 0.05) med proclimax /vrhunec metamorfozo in dosegla maksimum v fazi po metamorfnega (slika 4). Poleg tega so bile grelina prepis številčnost in proteolytic dejavnost med GI-trakta zorenjem značilno povezana (p < 0,05; prilagojeni R 2: 0,9342, 0,8852, 0,9252 za ​​pepsinogen A2, želodčnih a protonske črpalke in beta podenote, v tem zaporedju; glej sliko 5). Izražanje natrija
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
mRNA je bila odkrita v vseh razvojnih fazah, z značilno (p < 0,05) več prepisov na stopnji 5. Slika 4 Povprečna normiranih izrazne vzorce označenih mRNA prepisov posameznih ličink (fazi 10/05). Rezultati za pepsinogen A2
predhodnik, želodca H
+
/K
+
ATPaznih podenote alfa
in P
, NA
+
/K
+
-ATPaznega podenote α
in grelina
so mRNA transkriptov prikazani kot povprečje ± SEM normirane izražanja (z referenčno genov eEF1A1). Srednje vrednosti z različnimi črkami se bistveno razlikujejo (One Way ANOVA, p < 0,05).
Slika 5 linearna regresija ocenjene iz analize korelacije med želodcem specifičnih genskih označevalcev v navadni jezik zorenjem. Linearni regresijski modeli so opremljeni s prijavo preoblikovala srednje izraz vrednosti (MNE) iz A), v želodcu H
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
in β podenote
; B) pepsinogen A2
in H
+
/K
+
-ATPaznega β podenote
(črni kvadrati in polna črta), pa tudi H
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
(sive pike in črtkana črta); C) grelina
in H
+
/K
+
-ATPaznega β podenote
(črni kvadrati in polna črta), H
+
/K
+
-ATPaznega α podenote
(sive pike in črtkana črta), kot tudi pepsinogen A2
(svetlo sivi trikotniki in prekinjena črta). Vse korelacije so pomembne (p 0.05). The-dnevnik transformirana sredina MNE na prizorišču (5 do 10) je bila vzeta iz šestih posameznikov.
Oceno pH v lumnu želodca in odkrivanje kisline proizvodnje
odmero pH v lumnu želodca in midgut /epigastru med postembrionalnem razvoja je temeljila na barvo opazimo po injekciji indikatorskih pH raztopin (sliki 6 in v tabeli 2). PH v midgut /epigastru ostala alkalna (pH nad 8) v vseh razvojnih fazah analiziranih (stopnja 5 do 9B). Pavšalnega predplačila v želodcu je imel tudi alkalno pH z vrednostmi nad 7,5 do faza 8. Postopno zakisljevanje so opazili pri stopnjah, ki ustrezajo vrhunec metamorfoze. Prehod iz alkalnih v kislem pH v želodcu svetlino bilo očitno v fazi 9A, ko vbrizga sol
CPR ostala vijolična, vendar sol
MCP dal rumeno obarvanje (pH6.5 - 7.5). Lumen želodca bilo očitno v kislem območju (pH < 3,5) v fazi 9B, kot rumeno barvo v želodcu po uporabi tako CPR in BPB rešitev razkrila. Slika 6 pH spremembe v gastrointestinalnem traktu Navadni jezik ličinke v času razvoja. Panel A: Rezultati za polnjenje pH indikatorskih rešitev v ličinke iz premetamorphosis (stopnja 5) do vrhunca metamorfozo (stage 9a in 9b). pH sol
MCP vsebuje 0,1% M-krezol vijolične, sol
CPR sestavljena iz 0,1% Chlorphenol Red in pH sola
BPB imel 1% Bromophenol modro. st: želodec /sum želodec; mg: midgut; hg: epigastru. Lestvica bar = 0,5 mm. Panel B: standardi potopljeni v vodi in fotografirali s podobno svetlobi kot ličinke pod seciranje mikroskopom
Tabela 2 pH spremembe v gastrointestinalnem traktu Navadni jezik ličink na različnih razvojnih stopnjah
Stage
. želodec
Midgut /epigastru
5
> 7.5
> 8,0
6
> 7.5
> 8,0
7
> 7.5
> 8,0
8
> 7.5
> 8,0
9A
6,5 - 7,5
> 8,0
9B
< 3.5
> 6.5
predstavljenih pH vrednosti temeljijo na vizualnih opazovanj sprememba barve po dajanju treh pH indikatorskih rešitev
Analiza GI-trakta so opazili
Spontana razmnoževalni popadki. v gastrointestinalnem traktu v prometamorphosis (stopnji 6; 25 dpff) in vrhunec metamorfoze (odrske 9A /B, 49 dpff) (Slika 7). Zaradi precejšnje individualne razlike, število in pogostost popadkov ni bilo mogoče združiti v skupine in so prikazani za vsak analizirani posamezni (tabeli 3 in dodatnega datoteko 6). v midgut regija 1 so opazili dve vrsti kontrakcije (mg1, po PS, padajoče del zanke) in 2 (Mg2): fazno in razmnoževalnega valovi (Dodatni datotek 7). Za razmnoževalni kontrakcije opazili v Mg2 so retrogradno valovi, ki so nastale na območju "A
" in se preselili k ustih. Vendar pa v mg1 večina razmnoževalnega kontrakcije izvira tik pod PS in so anterogradno valovi, ki se preselili v analni smeri. Gibljivosti dejavnost v obeh midgut regijah je bila odkrita na stopnji 6 s frekvenco v razponu od 0,31 do 3,77 min -1, kar je odvisno od posameznika in vrsto krčenje. V fazi 9, je bilo v midgut opaziti relativno malo spontano krčenje kratek čas. Med vrhunec metamorfoze, so bili popadki v želodcu registrirana v vseh posameznikov, v nasprotju s 6. faza, ko je gibljivost v domnevnih želodcu opazili samo v enem ličinke. Rektalni kontrakcija (oziroma odvajanja refleks) je zmes za nazaj in anterogradno popadkov in v obeh fazah 6 in 9 s podobnimi frekvenc v večini posameznikov analiziranih niso opazili. Slika 7 GI-trakta v Navadni jezik ličink na stopnji 6 in 9. retrogradno in gibanja anterogradno valov (razmnoževalnega kontrakcije) so označeni s črtkano črto. Ti valovi se pojavljajo z območja A do B; in od pilorusa sfinkter (zastopata dva rdeče puščice *) v območju B in obratno
. A in B predstavljata glavna področja, na katerih se pojavljajo fazno popadki. st: želodec /sum želodec; mg1: midgut regija 1; Mg2: midgut regija 2; hg: epigastru; r: rektalno območje. Lestvica bar = 1 mm
Tabela 3 GI trakta gibljivosti vzorce. - Količinsko
Želodec
Midgut 1
Midgut 2
epigastru

Rektalno področje
razmnoževalni
fazno
razmnoževalni
fazno
ličinka
n
frekvence (min-1)
n
frekvence (min-1)
n
frekvenca (min-1 )
n
frekvence (min-1)
n
frekvence (min-1)
n

frekvence (min-1)
n
frekvence (min-1)
Stage 6
1
-
-
14
2.31
50
1.69
57
1.84
79
3.54
13
1.46
161
5.24
2
-
-
26
1.81
-
-
95
3.77
12
0.44
15
0.54
3
0.22
3
17
0.56
5
0.31
4
0.24
28
1.66
77
3.01
-
-
96
3.22
4*
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
43
2.25
25
1.69
faza 9
1
11
2.37
-
-
-
-
-
-
-
-
1
-
11
1.44
2
10
0.90
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
11
0.41
3
4
0.44
-
-
-
-
9
3.83
-
-
-
-
13
0.46
4
4
0.56
-
-
3
1.13
-
-
-
-
12
1.12
24
0.81
Razmnoževalni in fazno popadki so navedene za midgut 1 in midgut 2 regij. Frekvenca je število popadkov registriranih (n) na minuto.
* Ni mogoče količinsko fazno in razmnoževalni val kontrakcije. Prizadete GI trakta segmenti so nenehno (tonik) sklenjena pogodba v celotnem opazovanem obdobju (glej dodatno datoteko 7).
Razprava
V vseh altricial-želodca vrst, GI trakta opravi dramatično preoblikovanje med TH-pogon metamorfozo . spremeni GI trakta iz preprostega cevaste oblike v bolj kompleksno zavitega strukturo. Hkrati želodec postane ločen prostor in še pridobiva več funkcij skozi preobrazbo. Obstaja presenetljivo malo študij, ki obravnava in vključevanje v anatomske in funkcionalne spremembe v gastrointestinalnem traktu, povezane s tem, TH pogon dogodka. V dvoživke, kot so Xenopus
, je tudi ugotovljeno, da THS povzroči GI-trakt remodeliranje vodi do črevesnih skrajšanju in razvoj grobnicah in resic [35-37].

• Razmerje med okužbo s H. pylori in clinicopathological funkcij in prognozo želodca cancer
• Korelacija med HER-2 /neu (erbB-2) nivo izražanja in terapevtski učinek kombiniranega zdravljenja z zdravilom Herceptin in kemoterapevtiki v želodcu karcinom lines