Funkcionalne promjene povezane s organogeneze probavnog trakta tijekom metamorfoze u Atlantic iverak (Hippoglossus hippoglossus)

funkcionalne promjene povezane s organogeneze probavnog trakta tijekom metamorfoze u Atlantic iverak (Hippoglossus hippoglossus pregled) pregled, sažetak, znanstveni pregled pozadini pregled list metamorfoza je hormon regulirani nakon embrionalnog razvoja događaja koji pretvara simetrični larva u asimetričnoj maloljetnika. U altricial želudac nadreda Teleostei ribe diferencijacija želuca odvija nakon početka prvog hranjenja, te za metamorfoze dramatične molekularne i morfološke promjene u gastrointestinalnom (Gj) traktu pojaviti. Ovdje ćemo predstaviti funkcionalnu ontogeneza u razvoju GI-traktu iz integrativne perspektive u pleuronectiforme Atlantic iverak, i testirati hipotezu da se više funkcije nadreda Teleostei želucu razvije sinkrono tijekom metamorfoze. | Rezultati
Početak želučane funkcije određen je s nekoliko pristupa (anatomskim, biokemijskim, molekularne i in vivo
opažanja). In vivo
pH analiza u lumenu GI-sustava u kombinaciji s kvantitativnim PCR (qPCR) od a i P podjedinica želučane protonske pumpe (H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze pregled) i pepsinogen A2 pregled pokazuje da želuca proteolitički kapacitet je utvrđeno tijekom vrhunca metamorfoze. Transkript obilje grelin Netlogu, navodni oreksigenska signalne molekule proizvedene u želucu u razvoju, u korelaciji (p < 0,05) s pojavom želučane proteolitičke aktivnosti, što ukazuje da je uloga želuca u regulaciji apetita javlja istovremeno s osnivanjem proteolitičke funkcije , 3D modeli serija razvoja GI-trakta pokazala funkcionalni pilorusa sfinktera prije prvog hranjenja. Promatranja sitosti ličinki in vivo pregled potvrdio je da je funkcija spremnika želudac je osnovana prije metamorfoze, te je neovisna o ovom događaju. Mehanički kvar hrane i prijevoza himus kroz GI-traktu zabilježeno je in vivo Netlogu a rezultat je fazna i sadnog kontrakcija utvrđenim i prije preobrazbe. Broj kontrakcija u midgut smanjio na metamorfnim vrhunac sinkrono s uspostavom proteolitičke sposobnosti želuca i povećanje njegove peristaltic aktivnosti. Pretpostavljena osmoregulatory nadležnost GI-trakta, zaključiti po brojnosti Na pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α pregled transkripata, bio je već uspostavljena na samom početku egzogenog hranjenja i bio je nemodificirani po metamorfoze.
Zaključci pregled funkcionalna specijalizacija GI-traktu nije bio ekskluzivno za metamorfoze, a osmoregulatory kapaciteta i rezervoar funkcija uspostavljeni su prije prvog hranjenja. Ipak, kiselina proizvodnje i kapaciteta proteolitički želuca podudara s metamorfnim vrhunca, a također je obilježila početak angažmana želuca u regulaciji apetita preko grelina. Pregled Ključne riječi pregled, Atlantic iverak želudac protonske pumpe u probavnom traktu Ghrelin pokretljivosti Na + /K + - ATPaze Pepsinogen ontogeneza pH želuca Pozadina pregled divergentne gastrointestinalnih (Gj) morfologije trakta i hranjenja strategije između ličinki i odraslih faze su prilagodbe fundamentalno različita staništa i hrane resursi [1]. Post-embrionalna sazrijevanje probavnog sustava je ključni događaj u povijesti života kralježnjaka i bitne za opstanak. hormoni štitnjače (TH) pokreće metamorfoza igra ključnu ulogu u funkcionalnom sazrijevanje probavnog trakta i u oblikovanju svoje morfologiju obliku odraslog [2, 3]. Pregradnji GI-trakta od ličinke do odraslog je opsežno studirao u Xenopus Netlogu [2, 4]. U tom organizmu, crijeva se transformira pod utjecajem THS iz duge smotan cijevi u kompleks organa s diferenciranim želuca i tankog crijeva [5, 6]. To uključuje epitela i mezenhimalne proliferaciju glatkih mišića zadebljanje i nastajanje crijevnih nabora. Nekoliko studija je opisao stanične mehanizme odgovorne za ovaj pregradnje u vodozemaca [7, 8], no malo je poznato o njihovom utjecaju na funkciju tkiva u kralješnjaka, osobito višestrukim funkcijama integriranim u želucu.
Upečatljiv obilježje kralješnjaka metamorfoze je organogeneza želuca. U ranim razvojnim stadijima riba i anurans želudac je često odsutan i dio njegove funkcije može se provesti u crijevu. Glavni zadaci su kralježnjaka želuca skladištenje uzete hrane, lučenje klorovodične kiseline (HCl) i pepsinogen i mehanički kvar i miješanje hrane kod želučanih izlučevina [1, 9]. Dakle, u ličinki altricial želudac vrsta, kao što su Atlantic iverak, nepostojanje želuca ograničava sposobnost da probaviti prehrambenog proteina u kojoj je pokrenut egzogeni hranjenje [10-14]. To je jedan od razloga zašto većina studija razvoja GI-trakta tijekom metamorfoze su usmjerene na razvoj želuca i uzeti u obzir pojavu želučanih žlijezda kao adekvatan pokazatelj potpuno razvijene želuca [15, 16]. Međutim, postalo je jasno da je histološki identifikacija želučanih žlijezda ne znači da je želudac potpuno funkcionalan. Dakle, proteolitički funkciju želuca, najbolje pokazuje pepsinskom aktivnosti [11, 17] i pepsinogen
sadržaj [18]. Da bi bolje razumjeli učinkovitost probavnog obrade tijekom ribe posebnom pažnjom, nekoliko studija u usporedbi profile ekspresije pepsinogen Netlogu i želučanog protonske pumpe (H pregled + pregled /K pregled +
-ATPaze pregled), lokaliziran je u HCl izlučuju oxynticopeptic stanica [19-22]. Murray et al. [23] su koristili histologije i pepsinogen pregled transkripta analize proučavati ontogeneza želuca u Atlantic iverak i pokazao da je pojava na 66 dana nakon izlijeganja (DPH) želučanih žlijezda prethodili izraz pepsinogens A1 i A2 Netlogu
transkripti na 80 DPH. Međutim, utjecaj metamorfoze na druge važne funkcije u razvoju želuca ili GI-sustava u cjelini u velikoj mjeri je previdjeti u list.
Osim kiseline za proizvodnju i proteolizu kralježnjak želudac ima akumulacije funkcija. Nakon gutanja, želudac trgovinama i predigests hranu, a zatim donosi probavljena hrana na midgut za daljnju probavu i naknadno apsorpciju hranjivih tvari [9]. Skladištenje funkcija želuca ublažava maloljetnike i odrasle ribe iz potrebe da se stalno hrani poput stomachless ličinki. Uspostava želucu kao rezervoar zahtijeva funkcionalne sfinktera (jednjak i piloms) i dobro razvijenu neuralni i glatke slojeva mišića. Mehaničko miješanje i transport hrane kroz GI-traktu se postiže posebnim obrascima pokretljivosti i podudaranje peristaltiku s izdavanjem probavnih enzima. Ovaj proces ima središnju ulogu u učinkovitom preradu hrane (vidi pregled, [24]), iako su vrlo malo studija ciljanog GI trakta pokreta u ribljem ličinki. Prednost korištenja riblje larve, kao što su Atlantic iverak, je njihova optička prozirnost koja se održava do metamorfoze. To omogućuje izravne vizualne opservacije GI-traktu i njegove pokretljivosti obrasce u živim životinjama. Pittman et al. [25] izvijestili peristaltic kontrakcije u Atlantic konjski jezik ličinke, u prednjem crijevu na 35 DPH. U juvenilni Atlantic konjski jezik GI trakta oba anterogradno (reprodukcijski u analnom smjeru) i retrogradno (reprodukcijski u usnoj smjeru) kontrakcija valovi opisano [26], a identični uzorci su također opažena kod embrija i ličinke iz stomachless zebraste ribice (Danio rerio pregled) [27].
želudac proizvodi hormone koji su uključeni kako u regulaciji apetita i probave. Grelin je primjer hormona koji se uglavnom proizvodi u želucu i djeluje kao stimulator unosa hrane [28, 29]. U sisavaca, grelin Također je sugerirano da stimulira sekreciju želučane kiseline i pokretljivost [30, 31]. Funkcija grelina u ribljem ličinki još uvijek slabo opisano, ali to je bio predložen kao indikator uključenosti želuca u regulaciji apetita u razvoju ribe [32]. U Atlantic iverak, grelina
ekspresije gena povećava tijekom vrhunca metamorfoze, podudara s razvojem želuca [33]. Grelin je u izobilju u razvoju želučanim žlijezdama i nekoliko osmoregulatory tkiva u. Osim toga, njegov ko-ekspresija s Na pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze pregled sugerira pretpostavljenog ulogu u hydromineral ravnoteže [34]. Ipak, uloga grelina u regulaciji apetita, pokretljivost i osmoregulation je nepoznat, kao i njegovu vezu na proteolitičke i rezervoara funkciju želuca u Atlantic iverak tijekom metamorfoze.
Ova studija ima za cilj utvrditi utjecaj agastric- želuca prijelaz na funkcionalnu ulogu nakon embrionalnog pregradnje GI-trakta koja se javlja tijekom metamorfoze u Atlantic iverak, a list vrsta visokog komercijalnog interesa za Sjevernoj Europi i Sjevernoj Americi industriju akvakulture. Za mapiranje promjene u razvoju GI-trakta i utvrditi događaje povezane s TH-driven metamorfoze smo konstruirali niz 3D modela morfološke i prostorne organizacije probavnih organa u predstavničkim razvojne faze. Testirali smo hipotezu da je razvoj višestrukih funkcija želuca je sinkroni i povezan s fizičkim izgledom na metamorfoze. Proteolitička funkcija želuca istraživana je koristeći in vivo
pH analize u kombinaciji s ekspresijskim profilima specifičnog gena markera H pregled + pregled /K pregled + -ATPaze pregled α pregled i β podjedinica pregled i pepsinogen A2 pregled pomoću kvantitativne PCR (qPCR). Želudac punjenje i funkciju spremnika ispitana su u in vivo pregled vizualnih studija u prozirnoj larvi na prometamorphosis i vrhunac metamorfoze. Pretpostavljena uloga potpuno funkcionalne želuca u regulaciji apetita procijenjena je mjerenjem grelin pregled transkripta izobilju. Uspostavljanje obrazaca GI-trakta pokretljivosti tijekom razvoja utvrđena je in vivo
opažanja i uključivanje GI-sustava u osmoregulation procijenjena je mjerenjem obilje Na pregled + pregled /K
+ pregled -ATPaze α
podjedinica transkripti. pregled Rezultati
3D rekonstrukcija probavnih organa
3D modela morfologije probavnog sustava tijekom razvoja rekonstruirano iz niza histološki sekcije. Položaj i veličina GI-traktu i njegovih povezanih organa, kao što su jetra, endokrini i exocrine gušterače i žučnog mjehura, primijetio je iz faze 3 (prije prvog hranjenja) pa do post-metamorfnih stage 10 (slika 1). Slika 1 ontogeneza probavnih organa u Atlantic konjski jezik ličinki. 3D modeli su rekonstruirati iz serijske histoloških sekcija koriste Imaris softvera. Probavni organi su prikazani iz tri kutova; lijevo, desno i dorzalnoj strani. Strelice pregled ukazuju na prednje smjer (usta). Orange pregled, vanjski sloj GI-trakta, crvena
jetra, zelena
žučnog mjehura, ljubičaste
gušterače, roza
otočića Langerhansovih, žuta
žumanjčana ulici. Transparentna boja se koristi za exocrine gušterača (ljubičasta
) kako biste se Langerhansovih otočića (ružičasta
) i žučnog mjehura (zelena
).
GI trakta obuhvaća uski prednjem crijevu (jednjak i vjerojatnih želudac /želudac), midgut, a kratki hindgut (rektuma) (Slika 2). Prednji područje midgut, neposredno nakon pyloric sfinktera (PS), bio je veći u promjeru, tj više voluminozan, u usporedbi s ostatkom midgut. Ova značajka je održavana tijekom pažnjom na GI trakta (slike 1 i 2). I PS (koji razdvaja vjerojatnu želuca iz prednjeg midgut) i ileorectal sfinkter (koji odvaja midgut i hindgut) su identificirani iz faze 3 nadalje (slike 1 i 2). Pilorisa cekuma postalo je jasno kako je projekcija od najviše prednjem dijelu midgut u fazi 6 (slike 1 i 2). Želudac je dobro diferencirana na pozornici 10 i želučani žlijezde su vidljivi na histoloških sekcija (dodatne datotečne 1). Volumen luminalnog GI-traktu povećao tijekom razvoja, osobito u posljednja dva stadija analiziranih (stupnjevi 9A i 10) (slika 3, tablica 1 i dodatne datotečne 2). Volumen želuca iz 9A do 10 povećao se sa 415 na 4933 NL, odnosno i korespondira s 11 puta prirasta (Tablica 1). Slika 2 ontogeneza na vjerojatnu želucu (prozirna svijetlo plava) i lumena GI trakta (plavo) u Atlantic konjski jezik ličinki. 3D modeli su rekonstruirati iz serijske histoloških sekcija koriste Imaris softvera. lumen GI trakta, predstavljen na unutrašnji sloj (okrenut lumen) od GI trakta. GI trakta može se vidjeti iz tri ugla; lijevo, desno, i dorzalnoj strani. Strelice pregled ukazuju na prednje smjer (usta). Glave strelica
ukazuju na poziciji sfinktera (Red: pyloric sfinktera, crna: ileorectal sfinkter). ST pregled sumnjivih trbuh /stomak, mg pregled midgut, hg pregled hindgut.
Slika 3 standardiziranog povećanje volumena probavnih organa između pozornice (S) 3 do 10 Atlantic iverak. Povećanje volumena je normalizirana na cjelokupnom sredina povećanje volumena između faze za svako tkivo (za detaljnije objašnjenje, pogledajte dodatne datoteke 2). Volumen pregled Tablica 1. GI trakta organa (nl) i površine (10 6 um 2)
Stage 3
Faza 4
Faza 5
Stage 6
Stage 9A
Stage 10

GI trakta vanjski sloj (nl) pregled 157,42 pregled 261,03 pregled 490,65 pregled 1.038,48 pregled 2.670,15 pregled 12.855,10 pregled GI trakta vanjski sloj (106 μm2)
3,59 pregled 5,12 pregled 6.74 pregled 10.07
20,53 pregled 63.38 pregled, GI trakta unutrašnji sloj (nl) pregled, 78,40 pregled 136,84 pregled 266,55 pregled 525,89
1.034,10 pregled 6.451,16 pregled GI trakta unutrašnji sloj (106 μm2) pregled, 2,83 pregled 4.73
9,60 pregled 16.34 pregled 50.45 pregled 54.76 pregled tkiva GI trakta volumea (nl)
79.02 pregled 124,19 pregled 224,10 pregled 512,59 pregled 1.636,05 pregled 6.403,94 pregled jetre (NL)
35.24 pregled 48.82 pregled 98,18
225,23 pregled 928,25 pregled 4.232,77 pregled Gušterača (nl) pregled, 13,79 pregled 21.42 pregled 37.91 pregled 109,08 pregled 471,25 pregled 463,79 pregled Langerhansovih otočića (NL)
0,50 pregled 0.46
0,57 pregled 1.05
5,33 pregled 11.73 pregled vjerojatnih želudac (nl) pregled, 15,51 pregled 27.29 pregled 32.06
84,09 pregled 414,54 pregled 4.932,67 pregled vrijednosti izračunate su iz 3D modela korištenjem Imaris MeasurementsPro pregled volumen AGI-trakta tkivo = GI trakta vanjski sloj. -. GI trakta unutarnji sloj
Jetra je pozicioniran ispod prednjem crijevu i prednji na uzlaznoj petlju midgut (slika 1) i opseg stalno povećava tijekom razvoja (slika 3 i tablica 1). Egzokrine gušterače zabilježen je između vjerojatnih želuca i prednjeg dijela midgut u fazi 3 i okružen ovo midgut područje cijele posebnom pažnjom (slika 1). U gušterači, jasno razlikuje otočić Langerhansovih zabilježena je u neposrednoj blizini žučnog mjehura u fazi 3 (slika 1). Za razliku od ostalih probavnih organa prirast u normaliziranoj volumenu endokrinog i egzokrinog pankreasa je bila niska i negativna, redom, između stadija 9A i 10 (slika 3 i tablici 1). Žumance ulici, smješten u GI trakta u fazi 3, smanjio u veličini nakon početka egzogenog hranjenja i mali ostatak ostali osim u jetri u stupnju 4 (6 dana nakon prvog hranjenja, dpff). Žučni mjehur je promatrana na desnoj strani između exocrine gušterače i jetre, i održava ovu poziciju u svim razvojnim fazama analizirana (Slika 1). Gušterače kanala i žučovoda otvorila jedni pored drugih u lumen na središnju ravninu prednjeg midgut, neposredno nakon što je PS (podaci nisu prikazani). Pregled, kloniranje i filogenetski karakterizaciju pepsinogen A2, grelina, želučani protonske pumpe podjedinice i na + /K + -ATPaze podjedinica α
cjelokupnu sekvencu (CDS) Atlantic iverak pepsinogen A2 Netlogu bio 1128 bp je dostavljen GenBank pod pristupnim br. KF184647 (Dodatni file 3: C). Aminokiselina (AA) slijed pepsinogen je relativno dobro očuvan među nadreda Teleostei ribe i, kao što se i očekivalo, više varijabla u odnosu na druge kralježnjaka pepsinogens. Na primjer, konjski jezik pepsinogen A2 zajednička, odnosno 88% i 64% identičnosti AA sekvence sa zimskim listova (Pseudopleuronectes americanus Netlogu) pepsinogen Oblik IIb i IIa, ali samo 52% i 48% identičnosti sa homologa iz Xenopus laevis Netlogu a ljudi (podaci nisu prikazani).
cDNA fragmente kloniranih Atlantic konjski jezik H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinice Netlogu ( 911 bp) i na pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinica pregled (714 bp) su pohranjeni u GenBank s pristupnim brojevima KF184648 i KF184650, odnosno (Dodatni file 3: B, D). Na CD-a za BiH pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze β podjedinica pregled od 874 bp je kloniran i dostavljen GenBank s pristupanjem br. KF184649 (Dodatni file 3: A). Filogenetski analiza alfa podjedinicu želučanog protonske pumpe i Na + /K + - ATPaze i kralježnjaka homologa (dodatne datotečne 4) ostvarila dvije velike clades, jedna odgovara H + /K + - ATPaze, a drugi, na + /K + - ATPaze. Filogenetski analiza beta podjedinica (Dodatni file 5) generira stablo s dvije velike clades koji dijele istu opću topologiju kao phylotree za alfa podjedinica s H + /K + - ATPaze i Na + /K + - ATPaze grupirani neovisno pregled Atlantic iverak H + /K + -. ATPazu α podjedinice grupirani najuže s teleost homologa, s kojom dijele 94% identiteta AA slijed, a povećana na 98% identiteta s zimskim listova i bakalara (Gadus morhua pregled). Identitet Donja AA slijed (72%) je pronađen kada Atlantic iverak H + /K + - ATPaze α podjedinica je u odnosu na Atlantic konjski jezik Na + /K + - ATPaze α podjedinice (70 %) i drugim kralježnjacima kolege (72%). Atlantic iverak Na + /K + - ATPaze a podjedinica grupirani s Antarktike eelpout (Pachycara brachycephalum
) homologije (98%) i podijelili oko 88% AA identiteta s drugim teleost gena homologa. H + /K + - ATPaze ß podjedinica grupirani kao što se očekuje unutar nadreda Teleostei clade (cjelokupnog identiteta oko 80%) i podijelili prilično nizak identitet sa svojom ljudskom homologa (50%). Atlantic iverak H + /K + - ATPaze β podjedinica nije dijelila više od 39% identičnosti AA sekvence s Atlantskog konjski jezik Na + /K + -. ATPaze β podjedinica pregled ontogenetski ekspresije i korelacijska analiza pregled razvojnim profile ekspresije pepsinogen A2 Netlogu H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α pregled i β podjedinice
, na pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinice Netlogu i grelina pregled analizirani su qPCR u GI-traktu pojedinačne Atlantic konjski jezik ličinke (Slika 4). Ekspresija gena oba želučanih podjedinice protonske pumpe su značajno (p < 0.05 podešen R 2: 0.773) u odnosu na (slika 5) i imali su paralelne putevima ekspresije, s oštrim i značajnom (p < 0.05) povećanje u vrhunac i po etapama post-metamorfne (Slika 4). Pepsinogen A2 pregled bio je značajno (p < 0.05) u odnosu na ekspresijskom profilu želučanih a protonske pumpe (podešene R 2: 0.9738) i P (prilagođena R 2: 0,7963) (Slika 5 podjedinica ). Značajan (p < 0,05) porast tijekom faze 8 zabilježena je za pepsinogen A2 Netlogu a njegov izraz vrhunac u post-metamorfnim fazi. Grelin pregled mRNA transkript brojnost porasla postupno i značajno (p < 0,05) tijekom proclimax /vrhunca metamorfoze i dostigao maksimum u post-metamorfnim fazi (Slika 4). Osim toga, grelin transkript obilje i proteolitički aktivnosti tijekom posebnom pažnjom GI-trakta su značajno korelirana (p < 0,05; prilagođen R 2: 0,9342, 0,8852, 0,9252 za ​​pepsinogen A2, želučanih protonske pumpe a i P podjedinica, odnosno, vidi sliku 5). Izražavanje Na pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinice pregled mRNA je otkrivena u svim razvojnim fazama, sa značajno (p < 0,05) više transkripata na pozornici 5. Slika 4 Srednja normalizirane izraz uzoraka od navedenih mRNA transkripata individualnog ličinke (stadij 5-10). Rezultati za pepsinogen A2 pregled prethodnik, želučane H
+
/K
+
-ATPaze podjedinica alfa
i beta
, Na pregled +
/K pregled + pregled -ATPaze podjedinica α
i grelin pregled mRNA transkripti su prikazani kao srednja vrijednost ± SEM od normalizirane izraza (pomoću genske eEF1A1 referentne). Srednje vrijednosti s različitim slovima su značajno različite (One Way ANOVA, p < 0,05).
Slika 5 linearna regresija procjenjuju iz korelacija analizira između želuca specifičnih genetskih markera u Atlantic konjski jezik posebnom pažnjom. Linearni regresijski modeli su opremljeni za prijavu transformiranih srednje izraz vrijednosti (MNE) A) želučane H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinica pregled i β podjedinica pregled; B) pepsinogen A2 pregled i H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze β podjedinica pregled (crni trgovi i puna crta), kao i H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze α podjedinica pregled (sive točkice i isprekidana linija); C) grelin pregled i H pregled + pregled /K pregled + pregled -ATPaze β podjedinica pregled (crni kvadratići i puna crta), H pregled + pregled /K
+ pregled -ATPaze α podjedinica pregled (sive točkice i isprekidana linija), kao i pepsinogen A2
(svjetlo siva trokuti i točkasta linija). Sve korelacije su značajne (p 0,05). Log transformiranih srednja MNE po fazi (5 do 10) je oduzeta od šest jedinki.
Procjena pH u lumenu želuca i otkrivanje proizvodnje kiseline
Procjena pH u lumenu želuca i midgut /hindgut tijekom post-embrionalnog razvoja temelji se na boji primijećen nakon injekcije indikatora pH otopine (Slika 6 i Tablica 2). PH u midgut /hindgut ostali alkalna (pH vrijednost iznad 8) u svim razvojnim stadijima analiziranih (faza 5 do 9B). Vjerojatne želuca također imao alkalni pH u vrijednosti iznad 7,5 do pozornice 8. Postupno zakiseljavanje zabilježeno je u fazi odgovara vrhuncu metamorfoze. Prijelaz iz alkalno u kiselom pH u lumenu želuca je vidljivo u koraku 9A, kada se injektira sol pregled CPR ostali ljubičasta ali sol pregled MCP daje žutu boju (pH 6.5 - 7.5). Lumen želuca je očito u kiselom području (pH < 3.5) u fazi 9B, kao što je otkriveno žute boje u želucu nakon davanja oba CPR i BPB rješenja. Slika 6 pH promjene u probavnom traktu-atlantskih konjski jezik ličinki tijekom razvoja. Panel A: rezultati hranjenja cijev indikatora pH otopine u larva iz premetamorphosis (stupanj 5) do vrhunca metamorfoze (faza 9A i 9B). pH Sol pregled MCP sadržavala 0,1% m-kresola ljubičasta, sol pregled CPR se sastojao od 0,1% Chlorphenol Red i pH sol pregled BPB imala 1% bromtenolom plava. st: Želudac /vjerojatan u želucu; mg: midgut; Hg: hindgut. Mjerilo = 0,5 mm. Panel B: standardi uronjen u vodu i fotografirali sa sličnim svjetlosnim uvjetima kao ličinke pod mikroskopom
Tablica 2 pH promjene u probavnom traktu-atlantskih konjski jezik ličinki u različitim fazama u razvoju pregled Stage
. želudac
Midgut /Hindgut
5 izvoznici > 7.5 izvoznici > 8,0 pregled, 6 izvoznici > 7.5 izvoznici > 8,0 pregled, 7
> 7.5 izvoznici > 8,0 pregled, 8 izvoznici > 7.5 izvoznici > 8,0 pregled, 9A pregled 6,5 - 7,5 izvoznici > 8,0 pregled, 9B
< 3,5 izvoznici > 6,5 pregled predstavljenih pH vrijednosti temelje se na vizualnim zapažanjima promjene boje nakon primjene tri pH indikatora rješenja pregled, analiza pokretljivosti GI-trakta su uočeni pregled spontani propagiranju kontrakcije. u GI trakta u prometamorphosis (fazi 6; 25 dpff) i vrhunac metamorfoze (stadij 9A /B, 49 dpff) (slika 7). Zbog značajnog individualne varijacije, broj i učestalost kontrakcija ne može se svrstati i prikazani su za svaki pojedini analizirali (tablica 3 i dodatne datotečne 6). Dvije vrste kontrakcija zabilježene u midgut regija 1 (mg1, nakon PS, spušta dio petlje) i 2 (Mg2): fazna i sadnog valove (dodatne datotečne 7). Sadnog kontrakcije uočene u Mg2 su retrogradno valovi koji je nastao u prostoru "A Netlogu" i krenuo prema ustima. Međutim, u mg1 većina propagiraju kontrakcija nastala upravo pod PS i bili anterogradnom valovi koje su se kretale u analni smjeru. Pokretljivost aktivnost u oba područja midgut je otkriven na stupnju 6 s frekvencijom u rasponu od 0,31 do 3,77 min -1, ovisno o pojedincu i vrsti kontrakcije. U drugoj fazi 9, razmjerno malo spontane kontrakcije kratkog trajanja zabilježene su u midgut. Tijekom vrhunca metamorfoze, kontrakcije u želucu zabilježen je u svim pojedincima, za razliku od pozornici 6, kada je uočeno samo motilitet u vjerojatnih želuca u jednoj ličinke. Rektalna kontrakcija (ili refleks defekacije) bio je mješavina retro i anterogradnom kontrakcija i zabilježen je u obje faze 6 i 9 sa sličnim frekvencijama u većini pojedinaca analiziranih. Slika pokretljivosti 7 GI trakta u Atlantic konjski jezik ličinki u stadiju 6. i 9. i retrogradna kretanja anterogradna vala (propagiraju kontrakcije) označeni su isprekidanom linijom. Ovi valovi se javljaju iz područja A do točke B; a od pyloric sfinktera (zastupa dvije crvene strelice *) za područje B i obrnuto Netlogu. A i B predstavljaju glavna područja u kojima se javljaju fazni kontrakcije. st: Želudac /vjerojatan u želucu; mg1: midgut regija 1; Mg2: midgut regija 2; Hg: hindgut; r: rektalno područje. Mjerilo = 1 mm
Tablica 3. GI trakta, obrasci za probavu. - Kvantifikacija
Želudac
Midgut 1
Midgut 2
Hindgut
pregled rektalnog područja
reprodukcijski
fazna
reprodukcijski
fazna
Larva
n
Frekvencija (min-1)
n
Frekvencija (min-1)
n
frekvencija (min-1 )
n
Frekvencija (min-1)
n
Frekvencija (min-1)
n pregled
Frekvencija (min-1)
n
Frekvencija (min-1)
Stage 6
1
-
-
14
2.31
50
1.69
57
1.84
79
3.54
13
1.46
161
5.24
2
-
-
26
1.81
-
-
95
3.77
12
0.44
15
0.54
3
0.22
3
17
0.56
5
0.31
4
0.24
28
1.66
77
3.01
-
-
96
3.22
4*
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
43
2.25
25
1.69
Faza 9
1
11
2.37
-
-
-
-
-
-
-
-
1
-
11
1.44
2
10
0.90
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
11
0.41
3
4
0.44
-
-
-
-
9
3.83
-
-
-
-
13
0.46
4
4
0.56
-
-
3
1.13
-
-
-
-
12
1.12
24
0.81
Propagiranje i fazni trudovi su iskazani za midgut 1 i midgut 2 regije. Frekvencija je broj kontrakcija registriranih (n) po min. Pregled * Nije moguće kvantificirati fazna i sadnog val kontrakcije. Pogođeni GI trakta segmenti su stalno (tonik) ugovoreni tijekom cijelog promatranog razdoblja (vidjeti dodatne datoteku 7). Pregled Rasprava pregled u svim altricial želudac vrsta, GI trakta prolazi dramatične remodeliranje tijekom TH-driven metamorfoze , Promjene GI trakta, iz jednostavnog cjevastog oblika u složenijem preklopljenim strukture. Istovremeno želuca postaje jasan odjeljak i dalje stjecati više funkcija kroz preobrazbe. Tu su iznenađujuće malo studija koje su ispitivale i integracija anatomske i funkcionalne promjene u probavnom traktu-povezana s ovim TH-driven događaj. U vodozemaca kao što su Xenopus Netlogu, dobro je utvrđeno da THS izazivaju GI trakta pregradnja dovodi do crijevne skraćenja i razvoj kripti i resice [35-37].

• Odnos između H. pylori infekcije i kliničkopatološkim značajke i prognozi raka želuca
• Korelacija između HER-2 /neu (erbB-2) razina ekspresije i terapeutski učinak kombiniranog tretmana Herceptinom i kemoterapijska sredstva u želučanom staničnim linijama raka