Funkciniai modifikacijos, susijusios su skrandžio ir žarnyno trakto organogenezės metamorfozės Atlanto otų (Hippoglossus hippoglossus) metu

Funkciniai modifikacijos, susijusios su skrandžio ir žarnyno trakto organogenezės metamorfozės Atlantic otų (Hippoglossus hippoglossus
) pervežimas Anotacija
fone
plokščiųjų metamorfozės metu yra hormonas reguliuoja po embriono vystymosi įvykis, kuris transformuoja simetrinį lerva į asimetrinį nepilnamečiui , Be altricial-skrandžio teleost žuvies, diferenciacija skrandyje vyksta po pirmojo šėrimo pradžios ir metamorfozių metu dramatiškų molekulinius ir morfologinių pakeitimų virškinimo (GI-) takų atsirasti. Čia mes pateikiame funkcinę Ontogeny besivystančio GI trakto iš integruotos perspektyvą pleuronectiforme Atlanto otų ir išbandyti hipotezę, kad keli funkcijos teleost skrandžio plėtoti sinchroniškai metamorfozės metu.
Rezultatai
pradžia skrandžio funkcijos lėmė keletas požiūrių (anatomijos, biocheminiai, molekuliniai ir in vivo pervežimas pastabas). In vivo pervežimas pH analizė GI trakto spindyje kartu su kiekybine PGR (qPCR) Iš alfa ir beta subvienetų skrandžio protonų siurblio (H
+
/K,
+
-ATPazė
) ir pepsinogen A2
nurodė, kad skrandžio proteolitinis talpa yra įsteigta per metamorfozės kulminacijos. Stenograma gausa ghrelin
, spėjamą orexigenic signalizacijos molekulės besivystančiame skrandžio, koreliuoja (p < 0,05) su skrandžio proteolitus veiklos atsiradimą, o tai rodo, kad skrandžio vaidmuo apetito reguliavimas vyksta vienu metu su proteolitus funkcijų nustatymas , 3D modeliai serijos GI takų plėtros nurodyta funkcinė prievarčio sfinkterio prieš pirmą šėrimo. Pastabos Fed lervų in vivo
patvirtino, kad skrandis rezervuaras funkcija buvo įkurta prieš metamorfozės, ir buvo todėl nepriklauso nuo šio įvykio. Mechaninė pasiskirstymas maisto ir transportavimo chyme per GN-trakte buvo pastebėtas vivo parsisiųsti ir lėmė Studijose ir nustatė gerokai prieš metamorfozės dauginamosios susitraukimai. Iš susitraukimai į Vidurinė žarna skaičius sumažėjo metamorfinės kulminacijos sinchroniškai su įsisteigimo skrandžio proteolitus pajėgumų ir jos padidėjo peristaltiniu veikla. Spėjamas osmoregulatory kompetencija GN-trakto, numanomas gausa Na
+
/K,
+
-ATPazė α
nuorašai, buvo jau įsteigta pradžios egzogeninės šėrimo ir buvo nepakeistą iki metamorfozės.
išvadas
funkcinės specializacijos GN-trakte buvo ne tiktai metamorfozės, o jo osmoregulatory pajėgumai ir rezervuaras funkcija buvo įkurta prieš pirmą šėrimo. Nepaisant to, rūgšties gamyba ir proteolitinis talpa skrandžio sutapo su metamorfinės kulminacijos, o taip pat pažymėta, kad skrandžio dalyvavimo apetito reguliavimas per ghrelin pradžią.
Raktiniai žodžiai
Atlantinis paltusas skrandžio protonų siurblio virškinimo trakto ghrelin judančių Na + /K + - ATPazės Pepsinogen ontogeny pH skrandžio faktai
skirtingus virškinimo trakto (GI-) takų morfologija ir šėrimo strategijos tarp lervų ir suaugusių etapų yra adaptacijos esmės skiriasi buveinių ir maisto išteklių [1]. Post-embriono brendimą virškinimo sistemos yra pagrindinis įvykis gyvavimo istoriją stuburinių ir būtinas išlikimui. Skydliaukės hormonų (TH) varomas metamorfozė vaidina lemiamą vaidmenį funkcinės brendimo GN-trakto ir formuojant savo morfologiją į suaugusiųjų forma [2, 3]. Remodeliavimo GN-trakto iš lerva į suaugusiųjų buvo plačiai tiriamas Xenopus
[2, 4]. Šiuo organizmo, žarnyno transformuojama pagal THS iš ilgo apvynioti vamzdį įtaką į sudėtingą organą su diferencijuotai skrandžio ir plonosios žarnos [5, 6]. Tai reiškia, kad epitelio ir mezenchiminių proliferaciją, lygiųjų raumenų sustorėjimas ir žarnyno raukšlės išsidėstymą. Keletas tyrimų apibūdino ląstelių mechanizmus, atsakingus už šio remodeliacij varliagyvių [7, 8], tačiau mažai žinoma apie jų poveikį audinių funkcija stuburinių, ypač integruotų į skrandį daugybe funkcijų.
Ryškus bruožas stuburinių metamorfozės yra skrandžio organogenezės. Pradžioje vystymosi stadijose žuvims ir varliagyviai skrandžio yra dažnai nėra, o dalis jo funkcija gali būti atliekamas žarnyne. Pagrindiniai vaidmenys stuburinių skrandžio yra saugojimas suvartoti maisto, sekrecijos druskos rūgšties (HCl) ir pepsinogen ir mechaninis paskirstymas ir maišymas maisto su skrandžio sekreciją [1, 9]. Taigi, lervų altricial-skrandžio rūšių, pavyzdžiui, Atlanto otų, iš skrandžio nebuvimas riboja galimybę virškinti baltymų kiekio maiste, kai egzogeninė maitinti inicijavo [10-14]. Tai yra viena iš priežasčių, kodėl dauguma tyrimų GI takų plėtros metamorfozės metu daugiausia dėmesio buvo skirta skrandžio vystymąsi ir apsvarstyti skrandžio liaukų išvaizdą kaip tinkamos rodiklis išvystyta skrandžio [15, 16]. Tačiau tapo aišku, kad histologinis identifikavimas skrandžio liaukų nenurodo, kad skrandis yra visiškai funkcionalus. Taigi, skrandžio anketa proteolitinis funkcija yra geriausiai rodo pepsino aktyvumo [11, 17] ir pepsinogen pervežimas kiekį [18]. Norėdami geriau suprasti virškinimo perdirbimo efektyvumą žuvų ontogenezie metu, keli tyrimai, palyginti raiškos profilius pepsinogen
ir skrandžio protonų siurblio (H
+
/K,
+
-ATPazė
), lokalizuotas HCl sekretuojančių oxynticopeptic ląstelių [19-22]. Murray ir kt. [23] panaudojo histologijos ir pepsinogen
stenograma analizės studijuoti iš Atlanto oto skrandyje Ontogeny ir parodė, kad ne 66 dienų išvaizda po išsiritimo (DPH) skrandžio liaukų, prieš išraiška pepsinogens A1
ir A2
nuorašai at 80 DPH. Tačiau metamorfozės poveikis kitų svarbių funkcijų skrandžio ar Gi-takų plėtrai apskritai iš esmės buvo pamiršta plokščiųjų.
Be rūgšties gamyba ir proteolysis stuburinis skrandis taip pat turi rezervuaro funkcijas. Prarijus, skrandžio parduotuvės ir predigests maisto, tada pristato chyme į Vidurinė žarna tolesniam virškinimui ir vėliau maistinių medžiagų absorbciją [9]. Saugojimo funkcija skrandžio mažina nepilnamečių ir suaugusių žuvų iš būtinybės nuolat maitinasi kaip ir stomachless lervų. Steigimas skrandį, kaip rezervuaras reikalauja funkcinius sfinkteriai (stemplė ir fazė prievartyje) ir gerai išvystytą neuroniniai ir lygiųjų raumenų sluoksnius. Mechaninis maišymas ir transportavimas maisto per GN-trakto pasiekti konkrečių judrumą modelius ir suderintu peristaltiką su virškinimo fermentų spaudai. Šis procesas vaidina pagrindinį vaidmenį veiksmingai maisto perdirbimo (žr peržiūrą [24]), nors ir labai nedaug tyrimų orientuojasi Gi-takų judėjimą žuvų lervų. Galimybė naudotis žuvų lervų privalumas, pavyzdžiui, Atlanto otų, yra jų optinis skaidrumas, kad būtų išlaikytas iki metamorfozės. Tai leidžia tiesiogiai vizualinius stebėjimus GN-trakto ir jo judrumas modelius gyvais gyvūnais. Pittman ir kt. [25] pranešė peristaltiniu susitraukimus Atlantinis paltusas lervų, o priekinės žarnyno 35 DPH. Nepilnamečių Atlantinis paltusas GI trakto tiek anterogradinė (sklindančių išangės kryptimi) ir atgal (dauginamosios burnos kryptimi) susitraukimo bangos buvo aprašyta [26], o identiški modeliai, taip pat pastebėtas embrionų ir lervų stomachless zebrafish (Danio rerio
) [27].
skrandis gamina hormonus, susijusius tiek su apetitą ir virškinimą reglamentą. Ghrelin yra hormono, kad yra daugiausia pagaminto iš skrandžio ir veikia kaip maisto vartojimo [28, 29] stimuliatoriumi pavyzdys. Žinduolių, ghrelin taip pat buvo siūloma skatinti skrandžio rūgšties sekrecijos ir judrumas [30, 31]. Iš ghrelin žuvies lervų funkcija dar menkai aprašyti, bet jis buvo pasiūlytas kaip skrandžio dalyvavimo rodiklis apetito reguliavimas kuriant žuvis [32]. Atlanto otas, ghrelin pervežimas per metamorfozės kulminacijos genų ekspresijos didėja, sutampančius su skrandžio vystymąsi [33]. Ghrelin gausu besivystančių skrandžio liaukų ir kelių osmoregulatory audiniuose. Be to, jo bendrai išraiška su Na
+
/K,
+
-ATPazė
rodo spėjamas vaidmuo hidromineralinėse pusiausvyrą [34]. Vis dėlto, iš ghrelin vaidmuo apetito reguliavimas, judrumas ir osmoregulation nežinoma, taip pat jo nuorodą į proteolitus ir rezervuaro funkciją Atlantic otus metamorfozės metu skrandyje.
Šis tyrimas siekia nustatyti, kad agastric- poveikį skrandžio perėjimas į funkcinį vaidmenį po embriono Gi-takų remodeling, kuri atsiranda metamorfozės metu Atlanto otų, plekšnių a rūšių didelės komercinės svarbos Šiaurės Europos ir Šiaurės Amerikos akvakultūros pramonei. Į žemėlapį į GN-takų plėtros pokyčius ir nustatyti įvykių, susijusių su Th varoma metamorfozė mes sukonstravo 3D modelių morfologinės ir erdvinio organizavimo virškinimo organų reprezentacinėse vystymosi stadijose seriją. Mes išbandėme hipotezę, kad iš kelių skrandžio funkcijų plėtra yra sinchroninis ir susijusi su jos išvaizda ne metamorfozės. Proteolitinio funkcija skrandžio buvo tiriamas naudojant in vivo
pH analizuoja kartu su ekspresijos profilius konkretaus genų žymenų H
+
/K,
+
-ATPazė α parsisiųsti ir β subvieneto parsisiųsti ir pepsinogen A2
naudojant kiekybine PGR (qPCR). Skrandžio pildymo ir rezervuaras funkcija buvo vertinama in vivo
vizualinių studijų permatomo lervas prometamorphosis ir kulminacijos metamorfozės. Spėjamą vaidmuo visiškai funkcinis skrandžio apetito reguliavimą buvo įvertintas matuojant ghrelin
stenograma gausa. GI-trakto peristaltiką modelių vystymosi metu sukūrimas lėmė in vivo
pastabas ir GN-trakto osmoregulation dalyvavimas buvo įvertintas matuojant Na
+
/K +
-ATPazė α
subvieneto nuorašai.
rezultatai
3D rekonstrukcijos virškinimo organų
3D modelius virškinimo sistemos plėtros metu morfologijos buvo rekonstruotas iš serijos histologiniai skyriai. Vieta ir dydis GN-trakte ir jos asocijuotų organų, pavyzdžiui, kepenų, endokrininės ir egzokrininės kasos ir tulžies pūslę, buvo pastebėtas iš 3 etape (prieš pirmą šėrimo), kol po Metamorphic 10 etapas (1 paveikslas). 1 pav ontogeny iš virškinimo organų Atlantinis paltusas lervų. 3D modeliai buvo rekonstruotas nuo serijinių histologinių skyriuose naudojant Imaris programinę įrangą. Virškinimo organų rodomi iš trijų kampų; kairėn, dešinėn ir nugarinio pusėje. Rodyklės
rodantiems priekinė kryptį (burnoje). Orange
išorinis sluoksnis GI trakto, raudona pervežimas kepenyse, žalia pervežimas tulžies pūslės, violetinė
kasos, rožinė pervežimas salelių iš Langerhanso, geltonos pervežimas trynio-maišelį. Skaidri spalva naudojama egzokrininės kasos (violetinė pervežimas) siekiant parodyti salelės Langerhanso (rožinė pervežimas) ir tulžies pūslė (žalia pervežimas).
Gi-trakto apima siaurą Priekinis žarna (stemplė ir žarninių skrandžio /skrandžio), Vidurinė žarna, ir trumpas hindgut (tiesiosios žarnos) (2 pav.) Priekinė regionas Vidurinė žarna, tik po to, kai prievarčio sfinkterio (PS), buvo didesnis skersmens, t.y. daugiau didelės apimties, palyginti su Vidurinė žarna poilsio. Ši funkcija buvo prižiūrimas Gi-takų ontogenezie (1 ir 2 paveikslus). Tiek PS (kuris atskiria spėjamasis skrandį iš priekinės Vidurinė žarna) ir ileorectal sfinkterio (kuri atskiria Vidurinė žarna ir hindgut) buvo nustatyti nuo 3 stadija (1 ir 2 pav). Prievarčio žarnų tapo akivaizdu, kaip projekcijomis iš labiausiai priekinės dalies Vidurinė žarna prie 6 etapo (1 ir 2 paveikslus). Skrandis buvo gerai diferencijuoti 10 etape ir skrandžio liaukos buvo matomas histologinių skyriuose (Papildoma failų 1). Ertmės tūris GN-trakto vystymosi metu padidėjo, ypač dviejų analizuojamų pastaruosius etapus (etapai 9A ir 10) (3 pav, 1 lentelė ir papildomų failų 2). Skrandis tūris nuo 9A 10 padidėjo nuo 415 iki 4933 NL, atitinkamai ir atitiko 11 kartų prieaugio (1 lentelė). 2 pav ontogeny Numanomų skrandžio (skaidri šviesiai mėlyna) ir GI trakto spindyje (mėlyna) iš Atlantinis paltusas lervų. 3D modeliai buvo rekonstruotas nuo serijinių histologinių skyriuose naudojant Imaris programinę įrangą. GI-takų šviesos srauto atstovauja vidinio sluoksnio (atsukta į ertmę) GN-trakte. GI-takų matyti iš trijų kampų; į kairę, dešinę, ir nugarinio pusėje. Rodyklės
rodantiems priekinė kryptį (burnoje). Arrow vadovų
tašką į sfinkteriai poziciją (Raudona: prievarčio sfinkterio; juoda: ileorectal sfinkterio). st
įtariamų pilvo /skrandžio, mg
Vidurinė žarna, HG
hindgut.
3 paveikslas standartizuotą garso padidėjimą virškinimo organų tarp etape (S) 3 iki 10 Atlanto otų. Tūris padidėjo normalizuotas prie bendro vidurkio tūrio padidėjimą tarp etapų kiekvienos audinio (už išsamų paaiškinimą žr Papildoma failą 2).
1 lentelė Gi-takų organų tūris (NL) ir paviršiaus plotas (10 6 mkm 2)
3 etapas
4 etapas
5 etapas
6 etapas
etapas 9A
10 etapas

Gi-takų išorinis sluoksnis (nl)
157,42
261,03
490,65
1038,48
2670,15
12855,10
Gi-takų išorinis sluoksnis (106 μm2)
3.59
5.12
6.74
10.07
20.53
63.38
Gi-takų vidinis sluoksnis (nl)
78,40
136,84
266,55
525,89
1034,10
6451,16
Gi-takų vidinis sluoksnis (106 μm2)
2,83 4,73
9.60
16.34
50.45
54.76
Gi-takų audinių volumea (nl)
79.02
124,19
224,10
512,59
1636,05
6403,94
Ilgaamžis (nl)
35.24
48.82
98,18
225,23
928,25
4232,77
Kasos (nl)
13.79
21.42
37,91 463,79
109,08
471,25
salelės Langerhanso (nl)
0,50
0,46
0,57
1,05
5.33
11,73
įtariamas skrandžio (nl)
15.51
27.29
32.06
84,09
414,54
4932,67
vertybes buvo apskaičiuotos iš 3D modelių naudojant Imaris MeasurementsPro
AGI-takų audinių apimtis = GI-takų išorinis sluoksnis -.. Gi-takų vidinis sluoksnis
kepenys buvo pastatytas pagal priekinis žarna ir priekinė į aukštutinės linijos į Vidurinė žarna (1 paveikslas) ir jos apimties plėtros (3 paveiksle ir 1 lentelė) metu nuolat didėjo. Egzokrininė kasos buvo pastebėtas tarp numanomų skrandžio ir priekinės dalies Vidurinė žarna 3 etape ir ji supa šį Vidurinė žarna plotą, kuris ištisus ontogenezie (1 paveikslas). Be endokrininės kasos, buvo pastebėtas aiškiai skiriasi salelių iš Langerhanso arti tulžies pūslės 3 etape (1 paveikslas). Skirtingai nuo kitų virškinimo organų, į normalizuotas tūrio endokrininės ir egzokrininės kasos prieaugis buvo mažas ir neigiamas, atitinkamai, tarp etapų 9A ir 10 (3 pav ir 1 lentelę). Trynys-SAC, pastatytas pagal GI trakto 3 etape, sumažėjo dydis po egzogeninės šėrimo inicijavimo ir mažas atgyvena liko be bent 4 etape kepenyse (6 dienoms po pirmojo kūdikį, dpff). Tulžies pūslės buvo pastebėtas ant dešinėje pusėje tarp egzokrininės kasos ir kepenų, ir prižiūrimi šią poziciją visų analizuotų raidos etapuose (1 paveikslas). Kasos latakų ir tulžies latakų bent vidurinei plokštumai priekinės Vidurinė žarna kitas atidaryta viena kitai į spindį, tik po PS (duomenys neparodyti).
Klonavimas ir filogenetycznej apibūdinimo pepsinogen A2, ghrelin, skrandžio protonų siurblio subvienetų ir Na + /K + -Atpazė subvieneto α
pilną koduojančią seką (CD) Atlanto otų pepsinogen A2
buvo 1128 bp ir buvo pateiktas GenBank pagal prisijungimo nr. KF184647 (Papildoma failą 3: C temperatūroje). Amino rūgštis (AA) seka pepsinogen yra gana gerai-konservatyvi, tai teleost žuvų ir, kaip ir tikėtasi, daugiau kintamąjį, kai, palyginti su kitomis stuburinių pepsinogens. Pavyzdžiui, otas pepsinogen A2 pasidalino atitinkamai 88% ir 64% A. seka tapatybė su žiemos plekšnės (Pseudopleuronectes americanus
) pepsinogen formą IIb ir IIa, bet tik 52% ir 48% identiškumą su homologų iš Xenopus laevis parsisiųsti ir žmogaus, atitinkamai (duomenys neparodyti).
kDNR fragmentai klonuoti Atlantinis paltusas H
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto
( 911 BP) ir Na
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto
(714 bp) buvo pervestas į GenBank su priėjimo numerius KF184648 ir KF184650, atitinkamai (Papildoma failas 3: B, D). Už H CDS
+
/K,
+
-ATPazė β subvieneto
874 bp buvo klonuojami ir pateikė GenBank su prisijungimo nr. KF184649 (Papildoma failą 3 A). Filogenetinė analizė alfa subvieneto skrandžio protonų siurblio ir Na + /K + - ATPazės ir stuburinių homologų (Papildoma failų 4) SUKURTA dvi pagrindines dangalus, vienas atitinkantis H + /K + - ATPazės o kitas Na + /K + - ATPazės. Filogenetinė analizė beta subvieneto (Papildoma failo 5) generuoja medį su dviem pagrindiniais dangalus, kad bendromis tą pačią bendrą topologijos kaip už alfa subvieneto su H + /K phylotree + - ATPazės ir Na + /K + - ATPazės susitelkę nepriklausomai
Atlantinis paltusas H + /K + -. ATPazės α subvieneto labiausiai sugrupuotos su teleost homologų, su kuria ją sieja 94% A. sekos tapatybę, ir padidėjo iki 98% tapatumo su žiemos plekšnės ir Atlanto menkių (Gadus morhua
). buvo rastas mažesnis A. seka tapatybę (72%), kai Atlantinis paltusas O + /K + - ATPazės α subvieneto buvo lyginamas su Atlantinis paltusas Na + /K + - ATPazės α subvieneto (70 %) ir kitų stuburinių kolegomis (72%). Atlanto otų Na + /K + - ATPazės alfa subvieneto sugrupuotos su Antarkties gyvavedes vėgėles (Pachycara brachycephalum
) homologą (98%) ir maždaug pasidalino 88% AA tapatybę su kitais teleost genų homologų. O + /K + - ATPazės ß subvieneto sugrupuotos taip, kaip tikimasi per teleost klad (bendra tapatybės apie 80%) ir bendrai, o žemas tapatybę su žmogaus homologas (50%). Atlantinis paltusas O + /K + - ATPazės β subvieneto nepritarė daugiau kaip 39% A. sekos identiškumą su Atlantinis paltusas Na + /K + -. ATPazės β subvieneto
ontogenetic išraiška modelio ir koreliacinė analizė
raišką profilių pepsinogen A2
H
+
/K,
+
-ATPazė α parsisiųsti ir β subvienetų
Na
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto
ir ghrelin
buvo analizuojami qPCR į GN-trakto individualaus Atlantinis paltusas lervų (4 paveikslas). Genų ekspresija abiejų skrandžio protonų siurblio padaliniuose buvo žymiai (p < 0,05; reguliuojamas r 2: 0,773) koreliuoja (5 paveikslas) ir turėjo lygiagrečiai raiškos modelius, su aštriu ir reikšmingas (p < 0,05) nepadidintas Climax ir iš po metamorfinė etapai (4 paveikslas). Pepsinogen A2
buvo reikšmingai (p < 0,05) koreliuoja su ekspresijos profilio skrandžio protonų siurblio alfa (Pritaikytas r 2: 0.9738) ir beta (pakoreguota r 2: 0,7963) subvienetų (5 pav ). Didelė (p < 0,05) padidėjo 8 etape buvo pastebėta pepsinogen A2 parsisiųsti ir jo išraiška pasiekė aukščiausią tašką po metamorfinės etape. Ghrelin
iRNR stenograma gausa palaipsniui ir žymiai padidėjo (p < 0,05) per proclimax /kulminacijos metamorfozės ir pasiekti maksimumą po metamorfinės etape (4 paveikslas). Be to, ghrelin stenograma gausa ir proteolitinis veikla per GN-takų ontogenezie buvo reikšmingai koreliavo (p < 0,05; reguliuojamas r 2: 0,9342, 0,8852, 0,9252 ir pepsinogen A2, skrandžio protonų siurblio alfa ir beta padaliniuose, atitinkamai, žr pav 5). Išraiška Na
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto
iRNR buvo aptiktas visuose vystymosi etapuose, su žymiai (p < 0,05) daugiau nuorašai ne 5. etape 4 pav Vidutinis normalizuotų raiškos modelius nurodytuose mRNR nuorašai individualaus lervų (5-10 etapas). Rezultatai pepsinogen A2
pirmtakas, skrandžio O pervežimas + pervežimas /K pervežimas + pervežimas -ATPazė subvieneto alfa parsisiųsti ir beta pervežimas, Na
+ pervežimas /K
+
-ATPazė subvieneto α parsisiųsti ir ghrelin
iRNR nuorašai rodomi kaip vidurkis ± SEM iš normalizuotas išraiškos (naudojant pamatinį genų eEF1A1). Vidutinės vertės su skirtingų raidžių gerokai skiriasi (į vieną pusę ANOVA, p < 0,05).
5 paveikslas tiesinės regresijos įvertintas pagal koreliacijos analizę tarp skrandžio konkrečių genų žymenų metu Atlantinis paltusas ontogenezie. Tiesinės regresijos modeliai buvo įrengti prisijungti transformuotos vidutinė išraiška vertės (MNE) A) skrandžio O
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto parsisiųsti ir β subvieneto
; B) pepsinogen A2
ir H
+
/K,
+
-ATPazė β subvieneto
(juodi kvadratai ir ištisinė linija), taip pat O
+
/K,
+
-ATPazė α subvieneto
(pilka taškų ir brūkšninė linija); C), ghrelin
ir H
+
/K,
+
-ATPazė β subvieneto
(juodi kvadratai ir ištisinė linija), O
+
/K
+
-ATPazė α subvieneto
(pilki taškai ir brūkšninė linija), taip pat pepsinogen A2
(šviesiai pilkos trikampiai ir taškinė linija). Visi koreliacijas reikšmingas (p < 0,05). Žurnalo transformuotos vidurkis mne per etape (5 iki 10) buvo paimti iš šešių asmenų.
Įvertinimas pH skrandžio ir aptikimo rūgšties gamybos Viesbutis The pH vertinimo spindžio į skrandį ir Vidurinė žarna liumenų /hindgut metu po embriono vystymasis buvo grindžiamas spalva, pastebėta po pH indikatorinių tirpalų injekcijoms (6 paveiksle ir lentelėje 2). Į Vidurinė žarna /hindgut pH liko šarminis (pH didesnis negu 8) visų analizuojamų (5 etape 9B) raidos etapus. Įtariamų skrandis taip pat turėjo šarminės pH reikšmėmis virš 7,5 iki etapas 8. Laipsniškas rūgštėjimas buvo pastebėta etapus, atitinkančius metamorfozės kulminacijos. Perėjimas iš šarminės į rūgštus skrandžio spindį buvo akivaizdu, ne scenoje 9A, kai suleidžiamas Sol
BNR liko raudonos, bet Sol
MCP davė geltoną spalvą (pH6.5 - 7,5). Skrandžio šviesos srauto buvo aiškiai nustatytas rūgštinėje skalėje (pH < 3.5) 9B etape, kaip matyti iš geltonos spalvos, kad skrandžio suleidus tiek CPR ir BPB sprendimus. 6 pav pH pokyčiai GI trakto Atlanto otų lervų vystymosi metu. Skydelyje: vamzdžių maitinimo pH indikatorinių tirpalų rezultatus į lerva iš premetamorphosis (5 etapas) prie kulminacijos metamorfozė (etapo 9A ir 9B). pH Sol
MCP pateikta 0,1% metakrezolis violetinė, Sol
BNR sudarė 0,1% Chlorphenol raudona ir pH Sol
BPB 1% Bromfenolio mėlyna. g: skrandžio /įtariamų skrandžio; mg Vidurinė žarna; Hg: hindgut. Mastelio juosta = 0,5 mm. Skydas B standartai panardintas vandenyje ir nufotografuoti su panašiu apšvietimo sąlygomis, kaip lervos pagal Sekcijiniai mikroskopu
2 lentelė pH pokyčiai GI trakto Atlanto otų lervų įvairiais vystymosi etapais
etapas

. skrandžio
Vidurinė žarna /Hindgut
5
> 7,5
> 8,0
6
> 7,5
> 8,0
7
> 7,5
> 8,0
8
> 7,5
> 8,0
9A
6,5 - 7,5 pervežimas > 8,0
9B pervežimas < 3,5
> 6.5
pateiktą pH vertės yra pagrįstos vizualinių stebėjimų spalvų pokyčius po trijų pH indikatorinių tirpalų administravimo
analizė Gi-trakto motorikai nepastebėta
savaiminiai dauginantys susitraukimai. į GN-trakte prometamorphosis (6 etape; 25 dpff) ir kulminacija metamorfozės (etapo 9A /B; 49 dpff) (7 pav.) Dėl didelės individualios variacijos, skaičius ir periodiškumas susitraukimai negalėjo būti sugrupuoti ir pateikti kiekvieno atskiro analizuojami (3 lentelė ir papildomų failų 6). buvo stebimas dviejų tipų susitraukimai į Vidurinė žarna regionas 1 (mg1; po PS, mažėjančia tvarka dalį kilpa) ir 2 (Mg2): Studijose ir dauginamosios bangos (papildomas failų 7). Dauginamoji susitraukimai pastebėtas Mg2 buvo atgal bangos, kilęs ploto "A UAB" ir persikėlė į burną. Tačiau mg1 dauguma sklindančių susitraukimai kilęs tik pagal PS ir buvo anterogradinė bangos, kad persikėlė į analinį kryptimi. Judrumas veikla abiejose Vidurinė žarna regionuose buvo aptikti 6 etape, kurio dažnis svyruoja nuo 0,31 iki 3,77 min -1, priklausomai nuo individo ir rūšies susitraukimo. Tuo 9 etape palyginti nedaug spontaninių susitraukimai trumpos trukmės buvo pastebėtas Vidurinė žarna. Per metamorfozės kulminacijos, susitraukimai skrandyje buvo užregistruota visiems asmenims, priešingai nei 6 etapas, kai judrumas iš numanomų skrandžio buvo pastebėtas tik vieną lerva. Tiesiosios žarnos susitraukimas (arba tuštinimasis refleksas) buvo atgaline ir anterogradinė susitraukimai mišinio ir buvo pastebėtas abiejų etapų 6 ir 9 su panašiomis dažnių dauguma asmenų analizuotų. 7 pav Gi-trakto peristaltiką Atlanto otų lervų po 6 ir stadijos 9. atgal ir anterogradinę bangų judėjimo (dauginamosios susitraukimus) žymimos punktyrine linija. Šios bangos atsiranda iš A teritorijos į B; ir nuo prievarčio sfinkterio (atstovauja du raudonos rodyklės *) B plotą ir atvirkščiai
. A ir B yra pagrindinės sritys, kuriose atsiranda fazinės susitraukimai. g: skrandžio /įtariamų skrandžio; mg1: Vidurinė žarna regionas 1; Mg2: Vidurinė žarna regionas 2; Hg: hindgut; R: tiesiosios žarnos srityje. Mastelio juosta = 1 mm
3 lentelė Gi-trakto peristaltiką modeliai -. Kiekybinis
Skrandžio
Vidurinė žarna 1
Vidurinė žarna 2
Hindgut

žarnos srityje
dauginamosios
Studijose
dauginamosios
Studijose
lerva
N
dažnis (min-1)
N

dažnis (min-1)
N

dažnis (min-1 )
N

dažnis (min-1)
N

dažnis (min-1)
N

dažnis (min-1)
N

dažnis (min-1)
6 etapas
1
-
-
14
2.31
50
1.69
57
1.84
79
3.54
13
1.46
161
5.24
2
-
-
26
1.81
-
-
95
3.77
12
0.44
15
0.54
3
0.22
3
17
0.56
5
0.31
4
0.24
28
1.66
77
3.01
-
-
96
3.22
4*
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
43
2.25
25
1.69
9 etapas
1
11
2.37
-
-
-
-
-
-
-
-
1
-
11
1.44
2
10
0.90
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
11
0.41
3
4
0.44
-
-
-
-
9
3.83
-
-
-
-
13
0.46
4
4
0.56
-
-
3
1.13
-
-
-
-
12
1.12
24
0.81
Dauginamosios ir fazinės susitraukimai yra apskaitomas už Vidurinė žarna 1 ir Vidurinė žarna 2 regionuose. Dažnis yra registruotas (N) per minutę susitraukimų skaičius.
* Neįmanoma kiekybiškai Studijose bei dauginamosios bangų susitraukimus. Nukentėję Gi-takų segmentai buvo nuolat (tonikas) sutartis per visą stebėjimo laikotarpį (žr Papildoma failą 7).
Diskusijos
Visais altricial-skrandžio rūšių, GN-takų patiria dramatišką rekonstruoti per TH-varoma metamorfozės , GI takų pokyčiai nuo paprasto vamzdžio formos į sudėtingesnio sulankstyti struktūrą. Tuo pačiu metu, kai skrandžio tampa atskira kamera ir toliau įsigyti savo daugybę funkcijų per metamorfozės. Yra stebėtinai nedaug, tiriantys ir integruoti anatominius ir funkcinius pokyčius GI trakto, susijusią su šia TH varoma atveju. Be varliagyvių, pavyzdžiui, Xenopus
, tai yra gerai nustatyta, kad THS sukelti GI trakto remodeling todėl žarnyno sutrumpinimo ir kriptos ir Willy [35-37] plėtrai. [25].

• Ryšys tarp H.pylori infekcijos ir klinikos ypatybių ir prognozės skrandžio vėžio
• Koreliacija tarp JAI-2 /neu (ErbB 2) išraiška lygis ir gydomasis poveikis kombinuoto gydymo Herceptin ir chemoterapiniais preparatais skrandžio vėžio ląstelių lines